專利名稱：具有生長激素釋放性質的化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的化合物、含有它們的組合物及其在治療生長激素缺乏所致的醫(yī)學疾病中的應用。
背景技術：
生長激素是一種促進所有能夠生長的組織生長的激素。此外，已知生長激素對代謝過程產生多種不同的影響，例如促進蛋白質合成和游離脂肪酸活動化，并且在碳水化合物代謝為脂肪酸的能量代謝中起開關作用。生長激素缺乏可以誘發(fā)多種嚴重的醫(yī)學疾病，例如侏儒癥。
生長激素釋放自腦垂體。該釋放作用受許多激素和神經遞質直接或間接的嚴格調控。生長激素的釋放可以被生長激素釋放激素(GHRH)促進且可以被促生長素抑制素(somatostatin)抑制。在這兩種情況中，這兩種激素均釋放自下丘腦，但它們的作用主要由位于腦垂體中的特異性受體來介導。還描述了其他刺激腦垂體釋放生長激素的化合物。例如精氨酸、L-3,4-二羥基苯基丙氨酸(L-多巴)、胰高血糖素、后葉加壓素、PACAP(垂體腺苷環(huán)化酶激活肽)、毒覃堿性受體拮抗劑和合成六肽，GHRP(生長激素釋放肽)通過直接作用于腦垂體或通過影響下丘腦的GHRH和/或促生長素抑制素釋放作用來釋放出內源生長激素。
在需要增加生長激素水平的疾病或情況中，生長激素的蛋白質特性致使除了非腸道給藥以外的任何給藥方式都無效。此外，其他直接起作用的天然促分泌素，例如GHRH和PACAP，都是較長的多肽，所以優(yōu)選通過非腸道途徑給藥。
迄今業(yè)已公開了應用某些化合物來提高哺乳動物中生長激素水平，例如在EP18072、EP83864、WO89/07110、WO89/01711、WO89/10933、WO88/9780、WO83/02272、WO91/18016、WO92/01711、WO93/04081、WO9517422、WO9517423、WO9514666、WO9419367、WO9534311、WO9602530、WO9615148、WO9613265、WO9622997、WO9635713、WO9638471、WO9632943、WO9700894、WO9706803、WO9709060、WO9707117、WO9711697、WO9722620、WO9723508、WO9724369和WO9734604。
生長激素釋放化合物的組合物的重要之處在于其生長激素釋放效能及其生物利用度。所以本發(fā)明的目的是提供新的具有生長激素釋放性質的酰肼類化合物。此外，本發(fā)明的目的是提供新的具有特異性和/或選擇性的且沒有或基本上沒有副作用的生長激素釋放化合物(生長激素促分泌素)，例如釋放LH、FSH、TSH、ACTH、后葉加壓素、后葉催產素、皮質醇和/或催乳激素。本發(fā)明的目的是提供具有良好口服生物利用度的化合物。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了在正常試驗條件下可直接在體外作用于腦垂體細胞以從中釋放生長激素的新化合物。
可以在體外使用這些生長激素釋放化合物作為用于研究如何在腦垂體水平下調控生長激素分泌的獨特科研工具。
此外，本發(fā)明的生長激素釋放化合物也可以經體內給藥以提高內源生長激素的釋放。
發(fā)明詳述所以，本發(fā)明涉及通式Ⅰ所示的化合物或其藥學上可接受的鹽 其中R1和R2獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；R3a是氫、由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或由一個或多個C1-6-烷基任選取代的芳基或雜芳基；
R4a是由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或C1-7-?；籖5a是氫、由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或由一個或多個C1-6-烷基任選取代的芳基或雜芳基；或R3a和R4a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系由一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代；或R3a和R5a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系由一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代；或R4a和R5a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系由一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代；或a和b獨立地為0、1或2；G是氫、-O-(CH2)k-R27， J是氫、-O-(CH2)L-R32 其中R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35和R36獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；k和L獨立地為0、1或2；D是 其中R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；n、m和q獨立地是0、1、2或3；p是0或1；M是-CR11=CR11a、亞芳基、亞雜芳基、-O-、-S-或價鍵；R11和R11a獨立地是氫或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；或D是R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R11獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；或R7和R8或R7和R9或R8和R9任選地形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j獨立地是1或2并且U是-O-、-S-或價鍵；n和m獨立地是0、1、2或3；o和p獨立地是0或1；M是-CR11=CR11a-、亞芳基、亞雜芳基、-O-、-S-或價鍵；R11和R11a獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基。
此外，式Ⅰ的化合物包括其光學異構體，它們的形式可以是分離的、純化或部分純化的光學異構體或其外消旋混合物。
在通式Ⅰ的化合物的R-和/或S-構型中可以存在兩個手性碳原子。在一個實施方案中，這兩個手性碳原子同時存在于R-構型中。
而且，式Ⅰ的化合物可以具有一個或多個可能為幾何異構的碳-碳雙鍵，并且預期可能存在的立體異構體(E或Z異構體)均屬于本發(fā)明的范圍，除非指出具體幾何并構體。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，R1是氫。在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，R1是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特別是甲基。
在式Ⅰ化合物的又一個實施方案中，R2是氫。在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，R2是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特別是甲基。
仍然是在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，R3a是氫。在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，R3a是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特別是甲基。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，R4a是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特別是甲基。在式Ⅰ化合物的另一個實施方案中，R4a是C1-7-?；?，例如C2-4-?；貏e是乙?；?br> 仍然是在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，R5a是氫。在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，R5a是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特別是甲基。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，R3a和R4a可以與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系被一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代。所述雜環(huán)體系可以是芳香族雜環(huán)或非芳族雜環(huán)，并且可以選自例如吡唑、噠嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮雜萘、噌啉、吡唑烷、氧代吡唑烷或吡唑啉。在一個具體實施方案中，所述雜環(huán)體系是氧代吡唑烷。
在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，R3a和R5a可以與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系可被一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代。所述雜環(huán)體系可以是芳香族雜環(huán)或非芳族雜環(huán)，并且選自例如吡唑、噠嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮雜萘、噌啉、吡唑烷或吡唑啉。
在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，R4a和R5a可以與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系可被一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代。所述雜環(huán)體系可以是芳香族雜環(huán)或非芳族雜環(huán)，并且選自例如氮雜環(huán)丙烷、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、異二氫吲哚或嗎啉，特別是吡咯烷或哌啶。
當R3a和R4a構成雜環(huán)體系時，R4a和R5a也可以同時形成雜環(huán)體系，或R5a是氫、由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或由一個或多個C1-6-烷基任選取代的芳基或雜芳基。
當R3a和R5a構成雜環(huán)體系時，R4a和R5a也可以同時形成雜環(huán)體系，或R4a是由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或C1-7-?；?。
在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，a是1。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，b等于1。在另一實施方案中，b是2。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，G是 其中R27和R28獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一實施方案中，R27和R28同時為氫。在一個實施方案中，G是1-萘基或2-萘基。在上式Ⅰ的化合物中，優(yōu)選G是2-萘基。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中G是 其中R27、R28、R29、R30和R31獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一實施方案中，R27、R28、R30和R31是氫且R29是芳基。在另一實施方案中，R29是苯基。在上式Ⅰ的化合物中，G優(yōu)選是聯苯-4-基。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，G是-O-(CH2)k-R27，其中R27是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；k是0、1或2。在另一實施方案中，R27是芳基。在又一實施方案中k等于1。在上式Ⅰ的化合物中，優(yōu)選G是芐氧基。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，G是 其中R27和R28獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一實施方案中，R27和R28同時為氫。在一個實施方案中G是1H-吲哚-3-基。
在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，J是 其中R32、R33、R34、R35和R36獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一實施方案中，R32、R33、R34、R35和R36均為氫。優(yōu)選J是苯基。
在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，J是 其中R32和R33獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一實施方案中，R32和R33同時為氫。優(yōu)選J是2-噻吩基。
在式Ⅰ化合物的另一實施方案中，D是R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R10獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；n和m獨立地為0、1、2或3；o和p獨立地是0或1；M是-CR11=CR11a、亞芳基、-O-或-S-；R11和R11a獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；在一個實施方案中，R7是氫。在第二實施方案中，R7是C1-6-烷基，特別是甲基。在第三實施方案中，R8是氫。在另一實施方案中，R8是C1-6-烷基，特別是甲基。在一個實施方案中，R9是氫。在另一實施方案中，R9是C1-6-烷基，特別是甲基。
在一個實施方案中R8和R9形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j獨立地是1或2并且U是-O-、-S-或價鍵。在另一實施方案中，U是價鍵。在一個實施方案中i+j的和等于3。
在一實施方案中，n等于0。在另一實施方案中，m等于0。在一實施方案中，m等于1。在另一實施方案中，o等于0。在一實施方案中，p等于0。在另一實施方案中p等于1。在一實施方案中M是-CR11=CR11a-、亞芳基、-O-或-S-。在另一實施方案中M是-CH=CH-。在又一個實施方案中，M是亞苯基。
在式Ⅰ化合物的一個實施方案中，D是R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R10獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；n和m獨立地為0、1、2或3；o和p獨立地是0或1；M是價鍵；R11和R11a獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基。在一個實施方案中，R7是氫。在第二實施方案中，R7是甲基。在第三實施方案中，R8是氫。在另一實施方案中，R8是C1-6-烷基，特別是甲基。在另一實施方案中，R9是氫。在另一實施方案中，R9是C1-6-烷基，特別是甲基。在一實施方案中，n是0。在另一實施方案中，m是0。在一實施方案中，m等于1。在另一實施方案中，o是0。在又一實施方案中，p是0。在一實施方案中，p是1。
在上式Ⅰ的化合物中，優(yōu)選的D是3-氨基甲苯基、4-氨基-4-甲基戊-(1E)-烯基、N-甲基-3-氨基甲苯基、3-(1-氨基環(huán)丁基)-1-丙烯基或1-氨基-1-甲基乙基。
本發(fā)明優(yōu)選的式Ⅰ化合物是(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺 3-氨基甲基-N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲氨基甲基)苯甲酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)酰胺 2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-2-甲基丙酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲?；鶀乙基)-N-甲基酰胺 2-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀乙基)-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-(2-芐氧基-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{2-芐氧基-1-[N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯基丙基)氨基甲?；鵠乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-[(1R)-1-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲?；鵠-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺 和2-氨基-N-[(1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺 在上述優(yōu)選化合物中，最優(yōu)選(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)酰胺通用方法 通式結構Ⅰ的化合物可以由一-、二-或三取代肼或腙和適當保護的氨基酸和適當的偶聯劑(如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽和1-羥基苯并三唑)或肽偶聯領域中已知的其他偶聯劑、在適宜的溶劑(如二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中制備而成。適當的氨基酸可以采用所屬技術領域已知的方法保護和脫保護并且例如T.W.Green所述(《有機合成中的保護基》，第2版，JohnWiley & Sons，紐約，1991)。
相信，式Ⅰ化合物可以提高對酶促蛋白水解降解的抗性，這是因為它們是非天然化合物，特別是因為非天然的模擬酰胺鍵替代了天然酰胺鍵。與已知的激素釋放肽相比的本發(fā)明化合物對蛋白水解降解抗性的增加和尺寸的減小，預期將改進其相對于現有文獻中公開的肽的生物利用度。
在上述結構式和本發(fā)明說明書全文中，下列術語具有下列確定的含義如上具體所述的C1-6-烷基、C1-6-亞烷基、C1-4-烷基或C1-4-亞烷基將包括那些呈直鏈或支鏈或環(huán)狀構型的指定鏈長的烷基或亞烷基。所述直鏈烷基的例子是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基及其相應的二價基團，如亞乙基。支鏈烷基的例子是異丙基、仲丁基、叔丁基、異戊基和異己基及其相應的二價基團，例如亞異丙基。環(huán)烷基的例子是C3-6-環(huán)烷基，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基及其相應的二價基團，如亞環(huán)丙基。
上述C1-6-烷氧基將包括那些呈直鏈或支鏈或環(huán)狀構型的指定鏈長的烷氧基。直鏈烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。支鏈烷氧基的例子是異丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、異戊氧基和異己氧基。環(huán)烷氧基的例子是環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基和環(huán)己氧基。
上述C1-7-?；鶎切┏手辨溁蛑ф溁颦h(huán)狀構型的指定鏈長的酰基。直鏈酰基的例子是甲?；?、乙?；⒈；?、丁酰基、戊?；?。支鏈?；睦邮钱惗□；?、異戊?；⑿挛祯；?。環(huán)?；睦邮黔h(huán)戊基羰基、環(huán)己基羰基等。
在本文中，術語“芳基”將包括一價碳環(huán)芳香環(huán)基團，該基團可以是單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)，例如選自苯基和萘基；該基團被一個或多個C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、鹵素、氨基或芳基任選取代。
在本文中，術語“亞芳基”將包括二價碳環(huán)芳香環(huán)基團，該基團可以是單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)，例如選自亞苯基和亞萘基；該基團被一個或多個C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、鹵素、氨基或芳基任選取代。
在本文中，術語“雜芳基”將包括一價雜環(huán)芳香環(huán)基團，該基團可以是單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)，例如選自吡啶基、1-H-四唑-5-基、噻唑基、咪唑基、吲哚基、嘧啶基、噻二唑基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻吩基、喹啉基、吡嗪基或異噻唑基，該基團被一個或多個C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、鹵素、氨基或芳基任選取代。
在本文中，術語“亞雜芳基”將包括二價雜環(huán)芳香環(huán)基團，該基團可以是單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)，例如選自吡啶二基、1-H-四唑二基、噻唑二基、咪唑二基、吲哚二基、嘧啶二基、噻二唑二基、吡唑二基、噁唑二基、異噁唑二基、噁二唑二基、噻吩二基、喹啉二基、吡嗪二基或異噻唑二基，該基團被一個或多個C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、鹵素、氨基或芳基任選取代。
在本文中，術語“雜環(huán)體系”將包括芳香環(huán)和非芳香環(huán)基團，該體系可以是單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)并且在環(huán)結構內含有至少一個，例如一個、兩個或三個氮原子，并且任選含有一個或多個，如一個或兩個其他雜原子如硫或氧原子。該雜環(huán)體系優(yōu)選選自吡唑、噠嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮雜萘、噌啉、吡唑烷、吡唑啉、氮雜環(huán)丙烷、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、氧代吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、異二氫吲哚或嗎啉。
術語“鹵素”是指氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)和碘(I)。
本發(fā)明的化合物可具有一個或多個不對稱中心(手性碳原子)并且其立體異構體，不論是分離的、純化或部分純化的立體異構體或是其外消旋混合物均包括在本發(fā)明的范圍內。
本發(fā)明的化合物可以任選地為藥學上可接受鹽的形式，例如式Ⅰ化合物的藥學上可接受的酸加成鹽，其包括那些通過將式Ⅰ化合物與無機或有機酸反應制備的酸加成鹽，所述無機酸或有機物可例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、乙酸、磷酸、乳酸、馬來酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、檸檬酸、戊二酸、葡糖酸、甲磺酸、水楊酸、琥珀酸、酒石酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、氨基磺酸或富馬酸和/或水。
式Ⅰ的化合物可以以藥學上可接受酸加成鹽的形式給藥，或在適當時作為堿金屬或堿土金屬或低級烷基銨鹽給藥。相信上述鹽形式具有接近于和游離堿形式相同等級的活性。
另一方面，本發(fā)明涉及含有通式Ⅰ所示化合物或其藥學上可接受鹽作為活性組份以及藥學上可接受載體或稀釋劑的藥物組合物。
通過常規(guī)技術可以制備含有本發(fā)明化合物的藥物組合物，例如公開在《Remington氏藥物科學》1985或Remington的《藥物科學和實踐》，第19版(1995)中的方法。所述組合物可以以常規(guī)形式，如膠囊、片劑、氣溶膠、溶液、混懸液或局部涂敷劑的形式存在。
所用的藥學上可接受的載體或稀釋劑可以是常規(guī)的固體或液體載體。所述固體載體的實例是乳糖、石膏粉、蔗糖、環(huán)糊精、滑石、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸或纖維素的低級烷基醚。液體載體的實例是糖漿、花生油、橄欖油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧化乙烯或水。
同樣地，所述載體或稀釋劑可以包括任何所屬領域已知的緩釋材料，例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，它們可以單獨使用或與蠟混合。
如果將固體載體用于口服給藥，可以將制劑壓片，以粉末或顆粒形式裝入在硬明膠膠囊內或采取糖錠劑或錠劑的形式。固體載體的量的變化范圍很寬，但通常為約25mg-約1g。如果采用液體載體，制劑可以采取糖漿劑、乳劑軟明膠膠囊或滅菌注射液如含水或無水混懸液或溶液的形式。
可以通過常規(guī)壓片技術制備的典型片劑可以含有片芯活性化合物(游離化合物或其鹽)100mg膠體二氧化碳(Aerosil) 1.5mg微晶纖維素(Avicel) 70mg改性纖維素膠(Ac-Di-Sol) 7.5mg硬脂酸鎂包衣HPMC約 9mg*Mywacett 9-40約 0.9mg*薄膜包衣中用作增塑劑的酰化甘油一酯對于經鼻給藥，所述制劑可以含有溶解或懸浮在液體載體中，特別是含水載體中的式Ⅰ化合物，用于氣溶膠給藥。所述載體可以含有添加劑，例如增溶劑如丙二醇、表面活性劑、吸收促進劑如卵磷脂(磷脂酰膽堿)或環(huán)糊精、防腐劑如對羥基苯甲酸酯。
通常，本發(fā)明的化合物是以單位劑型分配，每單位劑型中含有50-200mg的活性組份以及藥學上可接受載體。
當對病人例如人體給藥時，本發(fā)明化合物作為藥物時的劑量適宜為0.1-500mg/天，例如約5-約50mg，如約10mg/劑。
業(yè)已證實，通式Ⅰ的化合物具有在體內釋放內源生長激素的能力。所以，所述化合物可應用于治療需提高血漿生長激素水平的疾病中，例如用于生長激素缺乏癥人體或老年患者或家畜的治療中。
所以，在一個具體方面中，本發(fā)明涉及一種用于促進腦垂體釋放生長激素的藥物組合物，該組合物含有通式Ⅰ的化合物或其藥學上可接受鹽作為活性組份以及藥學上可接受的載體或稀釋劑。
另一方面，本發(fā)明涉及一種促進腦垂體釋放生長激素的方法，該方法包括給需此治療的患者施用有效量的通式Ⅰ的化合物或其藥學上可接受的鹽。
另一方面，本發(fā)明涉及通式Ⅰ的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于促進腦垂體釋放生長激素的藥物中的應用。
所屬領域的普通技術人員業(yè)已熟知，在人體中經常且有效地使用生長激素是多種多樣的和變化的。所以，式Ⅰ的化合物可以以促進腦垂體釋放生長激素為目的給藥，而且因此具有類似的作用或用作生長激素本身。生長激素的用途概括如下促進老年人體內生長激素的釋放，預防糖皮質激素的分解代謝副作用，預防和治療骨質疏松癥，治療慢性疲勞綜合征(CFS)、治療急性疲勞綜合征和選擇性手術繼發(fā)性肌肉損失，刺激免疫系統(tǒng)，加速創(chuàng)傷愈合，促進骨折修復，促進復雜性骨折如disctraction骨生成，治療骨折繼發(fā)性消瘦，治療生長遲緩，治療腎衰或腎機能不全所致的生長遲緩，治療心肌病，治療慢性肝病，治療血小板減少癥、治療節(jié)段性回腸炎，治療短腸綜合征，治療慢性阻塞性肺部疾病(COPD)，治療和移植有關的并發(fā)癥，治療生理性身材矮小包括生長激素缺乏的兒童和與慢性疾病有關的身材矮小，治療肥胖和與肥胖有關的生長遲緩，治療食欲缺乏，治療與Prader-Willi綜合征和特納氏綜合征相關的生長遲緩；提高患有部分性生長激素不敏感綜合征患者的生長速度；加快燒傷患者復原且減少住院時間；治療子宮內生長遲緩、骨骼發(fā)育不良、腎上腺皮質機能亢進和庫興氏病；誘發(fā)生長激素脈沖式釋放；在應激患者中替代生長激素，治療骨軟骨發(fā)育不良、Noonan氏綜合征、精神分裂癥、抑郁癥、阿耳茨海默氏病、創(chuàng)傷愈合遲緩和身心障礙，治療肺機能障礙和通氣依賴癥(ventilatordependency)，治療心力衰竭或有關的血管機能障礙，治療心功能損傷，治療或預防心肌梗塞，降低血壓，預防心室機能障礙或預防再灌注；在慢性透析中治療成年人；減弱大型手術后蛋白質的分解代謝反應，減小慢性疾病如癌癥或AIDS所致惡病質和蛋白質損失；治療包括胰島細胞增殖癥的血胰島素增多，用于誘發(fā)排卵的佐劑治療；用于促進胸腺發(fā)育和預防與年齡有關的胸腺功能衰退，治療免疫抑制的患者，治療sarcopenia，治療與AIDS有關的消瘦；提高肌肉的強度、可動性，保持皮膚厚度，維持代謝內穩(wěn)態(tài)，維持衰弱老年人的腎臟內穩(wěn)態(tài)，促進成骨細胞、骨骼改型和軟骨生長，調節(jié)對食物的攝??；刺激同組動物中的免疫系統(tǒng)并且治療同組動物中衰老性疾病，作為家畜的生長啟動子和促進綿羊羊毛的生長，和治療代謝綜合征(綜合征X)。此外，式Ⅰ的化合物可用于治療哺乳動物如人體中的胰島素(包括NIDDM)耐藥性。而且，由于REM(眼速動期)睡眠的增加并且REM潛伏期的減少，本發(fā)明的式Ⅰ化合物能夠改善睡眠質量且校正相對的衰老生長激素過少癥。
對于上述適應癥，給藥劑量取決于所用的式Ⅰ化合物、給藥方式和預期療法。然而，以每天0.0001-100毫克/干克體重，優(yōu)選約0.001-約50毫克/千克體重的劑量水平對患者和動物給藥通常能夠獲得內源生長激素的有效釋放。此外，當以上述劑量水平給藥時，式Ⅰ的化合物沒有或基本上沒有副作用，這類副作用例如釋放LH、FSH、TSH、ACTH、后葉加壓素、后葉催產素、皮質醇和/或催乳激素。一般地，適合口服、經鼻、經肺或透皮給藥的劑型含有約0.0001mg-約100mg，優(yōu)選約0.001mg-約50mg的、與藥學上可接受的載體或稀釋劑混合在一起的式Ⅰ化合物。
本發(fā)明的藥物組合物選擇性地含有與一種或多種具有不同活性的化合物，如抗生素或其他藥學活性物質，組合在一起的式Ⅰ化合物。
給藥途徑可以是任何將活性化合物有效輸送至適當或指定作用部位的途徑，例如口服、經鼻、經肺、透皮或非腸道給藥，優(yōu)選口服給藥。
除了式Ⅰ化合物的藥物用途以外，式Ⅰ化合物可以用于研究生長激素釋放的調控的體外工具。
式Ⅰ的化合物還用于在體內作為評估腦垂體的生長激素釋放性能的工具。例如，分析將這些化合物給藥于人體前后所取的血清樣本中的生長激素。對各血清中的生長激素的比較可以直接測定出患者腦垂體釋放生長激素的能力。
可以給商業(yè)上重要的動物施用式Ⅰ化合物以提高其生長速度和生長程度，并且增加產奶量和產毛量，或用于治療疾病。
生長激素促分泌素式Ⅰ化合物的另一個用途是與其他促分泌素如GHRP(2或6)、GHRH及其類似物、生長激素及其類似物或生長調節(jié)素(包括IGF-1和IGF-2)混合。
藥學方法可以體外評估式Ⅰ化合物在大鼠腦垂體原代培養(yǎng)物中釋放生長激素的效能和效價，并且所述評估試驗按照下列方法進行。
大鼠腦垂體細胞的分離方法是對O.Sartor等人在內分泌學116,1985,952-957頁所述方法的改進。從Mollegaard,Lille Skensved,Denmark購得雄性白化Sprague-Dawley大鼠(250±25克)。將大鼠分組籠養(yǎng)(4只/籠)并置于12小時光照循環(huán)的室內。室溫在19-24℃間變化且濕度為30-60％。
將大鼠斬首并切下腦垂體。除去神經中葉且將殘留組織立即置于冰冷的隔離緩沖液(Gey氏培養(yǎng)基(Gibco 041-04030)內，該緩沖液中補加有0.25％D-葡萄糖，2％非必需氨基酸(Gibco 043-01140)和1％牛血清白蛋白(BSA)(Sigma A-4503))內。將組織切成小片且轉移至補加有3.8mg/ml胰蛋白酶(Worthington#3707 TRL-3)和330mg/ml DNA酶(Sigma D-4527)的隔離緩沖液中。將該混合物在37℃和O2/CO2為95/5％的氣氛中以70轉/分鐘溫育35分鐘。隨后在上述緩沖液中洗滌該組織3次。隨后用標準巴斯德氏吸移管將該組織抽吸成為單細胞。分散后，細胞經尼龍濾膜(160mm)過濾以除去未消化的組織。將該細胞懸浮液用補加有胰蛋白酶抑制劑(0.75mg/ml,Worthington#2829)的隔離緩沖液洗滌3次，最后再懸浮在培養(yǎng)基中，所用培養(yǎng)基是補加有25mMHEPES(Sigma H-3375)的DMEM(Gibco 041-01965),4mM谷氨酰胺(Gibco 043-05030H),0.075％碳酸氫鈉(Sigma S-8875),0.1％非必需氨基酸，2.5％胎牛血清(FCS,Gibco 011-06290),3％馬血清(Gibco 034-06050),10％新鮮大鼠血清，1nMT3(Sigma T-2752)和40mg/l地塞米松(Sigma D-4902)pH7.3；培養(yǎng)的密度為2×105細胞/ml。將細胞接種在微量滴定板(Nunc,Denmark)中，濃度為200ml/孔，并且在37℃和8％CO2的條件下培養(yǎng)3天。
化合物試驗培養(yǎng)后，將上述細胞用補加有1％BSA(Sigma A-4503)的刺激緩沖液(Hanks平衡鹽溶液(Gibco 041-04020),0.25％D-葡萄糖(Sigma G-5250)和25mMHEPES(Sigma H-3375)pH7.3)洗滌兩次并在37℃下預溫育1小時。用90ml的刺激緩沖液(37℃)更換上述緩沖液。加入10ml待測化合物的溶液且將平板在37℃和5％CO2的條件下溫育15分鐘。傾析掉培養(yǎng)基且在rGH SPA試驗系統(tǒng)中測定GH的含量。
對劑量為10pM-100mM內的所有混合物進行分析。利用希爾公式(圖P,Biosoft)作出劑量-反應的關系圖。效能(釋放的最大GH值，Emax)表示為GHRP-6的百分Emax。效價(EC50)測定為誘發(fā)刺激GH釋放最大值一半時的化合物的濃度。
利用下列方法可以評估式Ⅰ化合物的代謝穩(wěn)定性將化合物以濃度為1mg/ml溶解在水中。取25ml此溶液分別加入到175ml的相應的酶-溶液內(得到酶∶底物比例(w/w)=約1∶5)。將溶液在37℃下放置過夜。使用具有選定的離子監(jiān)控分子離子的流動注射電噴質譜法(ESMS)，相對于相應的零樣本對10ml各種降解溶液進行分析。如果和零樣本相比，信號的降低超過了20％，則再采用HPLC和質譜來分析剩余的溶液，從而精確鑒定出降解的程度和位點。
穩(wěn)定性試驗中包括采用若干種標準肽(ACTH4-10，血管緊張肽1-14和胰高血糖素)，目的在于檢驗不同溶液對肽的降解能力。
標準肽(血管緊張肽1-14,ACTH4-10和胰高血糖素)購自Sigma Mo,USA。
酶(胰蛋白酶，糜蛋白酶、彈性蛋白酶氨肽酶M和羧肽酶Y和B)均購自Boehringer Mannheim GmbH(Mannheim,Germany)。
胰酶混合物存在于100mM碳酸氫銨pH8.0中的胰蛋白酶，糜蛋白酶和彈性蛋白酶(總濃度為0.025mg/ml)。
羧肽酶混合物存在于50mM碳酸氫銨pH4.5中的羧肽酶Y和B(總濃度為0.025mg/ml)。
氨肽酶M溶液存在于100mM碳酸氫銨pH8.0中的氨肽酶(0.025mg/ml)。
用兩種不同的質譜儀進行質譜分析。Sciex API Ⅲ三聯四極LC-MS儀(Sciex Instruments,Thornhill,Ontario)上安裝有電噴離子源和Bio-Ion 20 time-of-flight血漿解吸附儀(Bio-Ion Nordic AB,Uppsala,Sweden)。
在APIⅢ儀上，使用單一的離子監(jiān)控所研究的流動注射分析物中的分子離子來定量分析(降解前后的)化合物。用ABI 140B HPLC元件(Perkin-ElmerApplied Biosystems Divisions,Foster City,CA)將液體流量(甲醇∶水=1∶1)控制在100ml/分鐘。將該儀器的參數設定在標準操作條件，并且使用最強分子離子(多數情況下，這相當于雙重帶電的分子離子)來進行SIM監(jiān)控。
而且，降解產物的鑒定包括使用血漿解吸附質譜(PDMS)，其中將樣本涂敷在硝基纖維素涂層的靶上且在標準的儀器設定下進行。所測定的質譜的準確度一般優(yōu)于0.1％。
用HY-TACH C-18反相4.6×105mm HPLC(Hewlett-Packard公司，Palo Alto,CA)和標準的乙腈∶TFA(三氟乙酸)分離梯度分離并純化降解產物。HPLC系統(tǒng)采用HP 1090M(Hewlett-Packard Company,Palo Alto,PA)。
+穩(wěn)定(在降解溶液中24小時后SIM信號的降低小于20％)-不穩(wěn)定(在降解溶液中24小時后SIM信號的降低超過了20％)任何在此所述的新特征和特征的組合對于本發(fā)明來說是重要的。
試驗在下列實施例中將進一步舉例說明制備式Ⅰ化合物的方法和含有它們的制劑，但是不能把這些實施例構成對本發(fā)明的限定。
化合物的結構是通過高效液相色譜(HPLC)、核磁共振(NMR,Bruker400MHz)或液相色譜-質譜(LC-MS)來鑒定。NMR位移(δ)以百萬分之一(ppm)表示并且僅給出選定峰的位移。mp為熔點且以℃表示。柱色譜采用W.C.Still等人在《有機化學雜志》1978,43,2923-2926所述的技術并在Merck硅膠60(Art9385)上進行。用作起始原料的化合物或是已知化合物，或是易于通過已知方法制備的化合物。所用甲醇/氨溶液是含有10％氨的甲醇溶液。
HPLC(方法A1):RP-HPLC分析是使用214nm下的UV檢測和HibarLiChrosorb RP-18(5uM)250-4(Merck)柱進行的，洗脫速率為1ml/分鐘。所用的兩種溶劑體系為溶劑體系Ⅰ:0.1％三氟乙酸的乙腈溶液。溶劑體系Ⅱ:0.1％三氟乙酸的水溶液。用由20％溶劑體系Ⅰ和95％溶劑體系Ⅱ組成的混合液平衡該色譜柱。在注射樣品后，在30分鐘內進行在溶劑體系Ⅱ中含有20％-80％溶劑體系Ⅰ的梯度洗脫。然后，將梯度擴展到100％溶劑體系Ⅰ5分鐘，接著用100％的該溶劑體系等度洗脫5分鐘。RP分析采用在214、254、276和301nm下的UV檢測并在218TP54 4.6mm×250mm 5m C-18硅膠柱(TheSeperations Group,Hesperia)上進行分析，所述硅膠柱在42℃下以1ml/分鐘洗脫。上述柱用5％乙腈的緩沖溶液平衡，所述緩沖液是由0.1M硫酸銨組成且用4M硫酸調至pH為2.5。注射樣品后，在50分鐘內用在同一緩沖液中含有5％-60％乙腈的梯度進行洗脫。
HPLC(方法B1):RP-HPLC分析是采用214nm下的UV檢測和HibarLiChrosorb RP-18(5uM)250-4(Merck)柱，洗脫速率為1ml/分鐘。所用的兩種溶劑體系為溶劑體系Ⅰ:0.1％三氟乙酸的乙腈溶液。溶劑體系Ⅱ:0.1％三氟乙酸的水溶液。用由20％溶劑體系Ⅰ和95％溶劑體系Ⅱ組成的混合液平衡該色譜柱。在注射樣品后，在30分鐘內進行在溶劑體系Ⅱ中含有20％-80％溶劑體系Ⅰ的梯度洗脫。然后，將梯度擴展到100％溶劑體系Ⅰ5分鐘，接著用100％的該溶劑體系等度洗脫5分鐘。RP分析采用在214、254、276和301nm下的UV檢測并在218TP54 4.6mm×250mm 5m C-18硅膠柱(TheSeperations Group,Hesperia)上進行分析，所述硅膠柱在42℃下以1ml/分鐘洗脫。上述柱用含有5％(乙腈+0.1％TFA)的TFA水溶液(0.1％)平衡。注射樣品后，在50分鐘內用在相同含水緩沖液中的5％-60％(乙腈+0.1％TFA)的梯度進行洗脫。
HPLC(方法H8):HPLC分析是采用Watersmillenium系統(tǒng)且使用Water3mm×150mm 3.5m C-18對稱柱進行。將該柱加熱至42℃并且在15分鐘內以1ml/分鐘的流速用5-90％乙腈、85-0％水和10％三氟乙酸(0.5％)水溶液的線性梯度進行洗脫。
實施例1(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
N’-乙酰基肼基羧酸叔丁酯 向肼基甲酸叔丁酯(1.0g,7.6mmol)和吡啶(3.1ml)在二氯甲烷(5ml)中的溶液內緩慢加入乙酸酐(1.5ml)且將該混合物攪拌過夜。將混合物加入二氯甲烷(50ml)中并用水(2×10ml)和鹽水(10ml)洗滌并干燥(MgSO4)，過濾且真空濃縮得到0.95g作為黃色油狀物的N’-乙?；卖人崾宥□?。
LC-MS:Rt=5.39分鐘，m/z=349.6(m+1)1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.5(s,9H,(CH3)3C-O)；2.05(s,3H,CH3CO)N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 將N’-乙?；卖人崾宥□?0.95g,5.45mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中并加入三氟乙酸(10ml)且在室溫下將該混合物攪拌1小時。真空濃縮該混合物并用二氯甲烷抽提得到1.0g乙酰肼。隨后將(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲氨基)-3-苯基丙酸(0.76g,2.73mmol)溶解在由二甲基甲酰胺(3ml)和二氯甲烷(6ml)組成的混合液中，向其中加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.45g,3.28mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.62g,3.28mmol)的混合物并攪拌20分鐘。隨后加入乙酰肼(1.0g,5.45mmol)和二異丙基乙基胺(1.87ml)的混合物且將該混合物攪拌過夜。加入乙酸乙酯(50ml)并用水(50ml)洗滌該混合物。水層用乙酸乙酯(3×50ml)提取且將合并的有機層用水(2×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，濃縮成油狀物，并在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到0.81g N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，該產物為黃色油狀物。
LC-MS:Rt=9.34分鐘，m/z=336.4(m+1)HPLC:Rt=10.17分鐘(H8)1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.32+1.40(2s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)；2.05(s,3H,COCH3)；2.78(s,3H,N-CH3)N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 將N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.81g,2.42mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中且加入三氟乙酸(5ml)并在室溫下將該混合物攪拌30分鐘。真空濃縮該混合物且用二氯甲烷抽提3次，將殘留的油狀物在硅膠(40克)上層析，用二氯甲烷(甲醇/氨)(9∶1)洗脫得到0.41g乙酸N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙?；?肼，該產物為無定形粉末。
隨后將(2R)-2-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.63g,1.92mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中且加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.26g,1.92mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.37g,1.92mmol)的混合物并攪拌30分鐘。向其中加入乙酸N’((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙?；?肼(0.41g,1.74mmol)和DIEA(0.39ml)的混合物并攪拌過夜。
向混合物中加入二氯甲烷(50ml)且用水(50ml)洗滌該混合物。有機層用碳酸氫鈉水溶液(10ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，濃縮得到油狀物，并在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到0.59g N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，該產物為油狀物。
LC-MS:Rt=13.68分鐘，m/z=574.2(m+1)HPLC:Rt=13.53分鐘(H8)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 0℃下，向溶于二氯甲烷(5ml)中的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.59g,1.08mmol)溶液內加入三氟乙酸(5ml)且攪拌90分鐘。真空濃縮該混合物且用二氯甲烷汽提3次。將所得油狀物溶解在甲醇/氨(2ml)中并加入二氯甲烷(20ml)和硅膠(5g)且真空濃縮。通過過濾用二氯甲烷(100ml)和二氯甲烷(甲醇/氨)(9∶1)提取所得粉末，將合并的提取液真空濃縮，得到0.41g粗產物，該產物為泡沫狀。
然后，將(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.21g,0.89mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.13g,0.98mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(0.13g,0.98mmol)的混合物并攪拌30分鐘。隨后，加入上述粗產物(0.40g,0.89mmol)和二異丙基乙基胺(0.20ml)的混合物且將該混合物攪拌過夜。
加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)洗滌該混合物。有機層用碳酸氫鈉水溶液(10ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，濃縮得到0.42g褐色泡沫。將該泡沫溶于二氯甲烷(5ml)中，冷卻至0℃，加入三氟乙酸(5ml)，將該混合物攪拌45分鐘。用二氯甲烷(50ml)和水(10ml)停止該反應混合物，用固體碳酸氫鈉滴定至pH～7。分離有機層且用水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。
將所得產物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上樣至C-18Sep-Pak Classic柱體(2.0g，購自WatersTM)上，該柱體預先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗滌。隨后采用由水/乙腈/三氟乙酸(10、15、20和25％乙腈在水/0.1％三氟乙酸中的溶液)組成的梯度洗脫劑通過Sep-Pak柱(2g)。合并相關餾分且冷凍干燥，得到0.19g(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺的三氟乙酸鹽，該鹽為白色無定形粉末。
LC-MS:Rt=9.21分鐘，m/z=572.4(m+1)HPLC:Rt=26.45分鐘(A1),Rt=28.40(B1)實施例2(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 N’-乙?；?N-甲基肼羧酸叔丁酯 向溶于二氯甲烷(10ml)中的N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.62g,4.20mmol)的溶液內加入乙酸酐(0.79毫升，8.40mmol)和吡啶(1.36ml,16.80mmol)并且將該混合物攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(50ml)且用水(3×10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮，得到0.32g(41％)的N’-乙酰基-N-甲基肼羧酸叔丁酯，該產物為油狀物。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.45+1.48(2s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)；1.98(s,3H,COCH3)；3.14+3.17(2s,3H,N-CH3，旋轉異構體)乙酸N’-甲基肼 向溶于二氯甲烷(2ml)中的N’-乙酰基-N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.3g,1.59mmol)的溶液內加入三氟乙酸(2ml)并且將混合物攪拌60分鐘。將該混合物真空濃縮并用二氯甲烷汽提3次，得到0.32g(100％)乙酸N’-甲基肼三氟乙酸，該產物為薄油狀物。
1H NMR(CDCl3):δ2.13(s,3H,COCH3)；2.98(s,3H,N-CH3)N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 向(2R)-2-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-苯基丙酸(0.27g,0.96mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中的溶液內加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.13g,0.96mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(0.18g,0.96mmol)并將該混合物冷卻至0℃。加入乙酸N’-甲基肼(0.19g,0.96mmol)和二異丙基乙基胺(0.41g,2.40mmol)，將該混合物在室溫下攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)、飽和碳酸氫鈉(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮，得到0.35g(125％)N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯粗品，該產物為無色油狀物。
LC-MS:Rt=10.29分鐘，m/z=350.4(m+1)HPLC:Rt=10.77分鐘(H8)乙酸N’-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙?；?肼 向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.35g,1.00mmol)的溶液內加入三氟乙酸(2ml)且將混合物攪拌30分鐘。將該混合物真空濃縮，用二氯甲烷汽提3次且在硅膠(40g)上層析，用二氯甲烷(甲醇/氨)(9∶1)洗脫，得到110mg(44％)乙酸N’-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙?；?肼，該產物為油狀物。
1H NMR(CDCl3):δ1.85(s,3H,COH3)；2.25(2s,3H,N-CH3)；3.05(s,3H,N-CH3)(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺 向溶于二氯甲烷(5ml)中的2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.18g,0.53mmol)的溶液內加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.072g,0.53mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.10g,0.53mmol)且將混合物冷卻至0℃。隨后加入乙酸N’-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙?；?肼(0.11g,0.44mmol)和二異丙基乙基胺(0.098g,0.57mmol)且在室溫下將混合物攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)、飽和碳酸氫鈉(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮且在硅膠(40g)上層析，用乙酸乙酯洗脫，得到0.14g(57％)N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，該產物為無色油狀物。
在0℃下向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.14g,0.25mmol)的溶液內加入三氟乙酸(2ml)并將該混合物攪拌90分鐘。隨后加入二氯甲烷(50ml)和飽和碳酸氫鈉(5ml)，用固體碳酸氫鈉滴定該混合物直至pH=7。分離水層且用二氯甲烷(20ml)提取，將合并的有機層用鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮，得到0.10g(87％)的(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺，該產物油狀物。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.68(s,3H,N-CH3)；1.98(s,3H,COCH3)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 向溶于二氯甲烷(5ml)中的(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.066g,0.27mmol)的溶液內加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.037g,0.27mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.052g,0.27mmol)且將混合物冷卻至0℃。隨后加入(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺(0.10g,0.22mmol)和二異丙基乙基胺(0.049毫升，0.29mmol)且在室溫下將混合物攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(50ml)且用水(10ml)、飽和碳酸氫鈉(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮。所得產物在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到0.10g(66％)((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯，該產物為無色油狀物。
將溶于二氯甲烷(2ml)中的((3E)-4-[N-((1R)-2-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.1g,0.146mmol)溶液冷卻至0℃并加入三氟乙酸(2ml)，將該混合物攪拌30分鐘。然后，加入二氯甲烷(50ml)和飽和碳酸氫鈉(5ml)，用固體碳酸氫鈉滴定該混合物直至pH=7。分離水層且用二氯甲烷(20ml)提取，合并的有機層用鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。將所得產物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上樣至C-18 Sep-PakClassic柱體(2.0g，購自WatersTM)上，該柱體已經預先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗滌。隨后將由水/乙腈/三氟乙酸(10、50和70％乙腈在水/0.1％三氟乙酸中的溶液)組成的梯度洗脫劑通過該Sep-Pak柱(2g)。合并相關餾分且冷凍干燥，得到0.054g(53％)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺的三氟乙酸鹽，該產物為白色無定形粉末。
LC-MS:Rt=8.74分鐘，m/z=586.4(m+1)HPLC:Rt=29.53(A1)；Rt=31.35(B1)1H NMR(DMSO)選定峰δ1.05(s,6H,C-(CH3)2)；1.77(s,3H,COCH3)；6.2(d,1H,C=CH-CO)；6.3(m,1H,CH2-CH=C)實施例3(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 N’-亞芐基肼羧酸叔丁酯 向溶于99％乙醇(100ml)中的肼基甲酸叔丁酯(10.0g,75.64mmol)的溶液中加入苯甲醛(7.64毫升，75.64mmol)并將該混合物攪拌60分鐘。將該混合物冷卻至0℃，過濾且用冷乙醇洗滌沉淀物，干燥，得到13.47g(81％)的N’-亞芐基肼羧酸叔丁酯，該產物為白色結晶。
Mp 184-186℃
1H NMR(CDCl3):δ1.52(s,9H,(CH3)C)；7.34-7.92(m,7H，芳香氫)N’-亞芐基-N-甲基肼羧酸叔丁酯 向溶于無水四氫呋喃(20ml)中的N’-亞芐基肼羧酸叔丁酯(2.0g,9.07mmol)的溶液內加入碘甲烷(4.54毫升，72.6mmol)并將該溶液冷卻至0℃。緩慢加入氫化鈉(60％的礦物油分散體，1.09g,27.2mmol)且在室溫下將該混合物攪拌3天。加入四氫呋喃(50ml)并過濾該混合物。將濾液真空濃縮，在硅膠(100g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到1.97g(93％)N’-亞芐基-N-甲基肼羧酸叔丁酯，該產物為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.58(s,9H,(CH3)3C)；3.34(s,3H,N-CH3)N-甲基-肼羧酸叔丁酯 向溶于無水四氫呋喃(50ml)中的N’-亞芐基-N-甲基肼羧酸叔丁酯(1.97g,8.41mmol)的溶液內加入鈀/碳(10％,0.2g)且將該混合物與氫接觸。在消耗了260ml氫氣后，用硅藻土過濾該混合物并濃縮，得到1.25g(100％)N-甲基肼甲羧酸叔丁酯。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.5(s,9H,(CH3)3C-O)；3.05(s,3H,N-CH3)N-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙?；?肼羧酸叔丁酯 向溶于二氯甲烷(10ml)中的(2R)-(N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基)-3-苯丙酸(0.6g,1.5mmol)溶液中加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.22g,1.65mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.29g,1.50mmol)且將混合物冷卻至0℃。隨后加入N-甲基-肼羧酸叔丁酯(0.22g,1.50mmol)和二異丙基乙基胺(0.33毫升，1.95mmol)且在室溫下將混合物攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(20ml)且用水(20ml)、飽和碳酸氫鈉(20ml)、鹽水(20ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾并且真空濃縮。所得產物在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到0.65g(82％)N’-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-苯基丙?；?-N-甲基肼羧酸叔丁酯，該產物為白色泡沫。
向溶于二氯甲烷(4ml)中的N’-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-苯基丙?；?-N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.65g,1.23mmol)的溶液中加入三(2-氨乙基)胺(4ml)且將該混合物在室溫下攪拌60分鐘。隨后加入二氯甲烷(50ml)并用鹽水(2×20ml)、磷酸鹽緩沖液(pH=6,2×20ml)、水(20ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮，得到0.34g(90％)的N-甲基-N’-((2R)-2-(甲氨基)-3-苯基丙酰基)肼羧酸叔丁酯，該產物為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.3+1.45(s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)；2.2(s,3H,N-CH3)2.5(s,3H,N-CH3)N’-[(2R)-2-(N-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙?；?-N-甲基氨基)-3-苯基丙?；鵠-N-甲基肼羧酸叔丁酯 向溶于二氯甲烷(10ml)中的(2R)-[N-(9H-芴-9-基甲氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-萘-2-基丙酸(0.6g,1.33mmol)溶液內加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.18g,1.33mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.25g,1.33mmol)且將混合物冷卻至0℃。加入N-甲基-N’-((2R)-2-(甲氨基)-3-苯基丙酰基)肼羧酸叔丁酯(0.34g,1.11mmol)和二異丙基乙基胺(0,25毫升，1.44mmol)并且在室溫下將該混合物攪拌過夜。加入二氯甲烷(50ml)并用鹽水(10ml)、飽和碳酸氫鈉(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮。所得產物在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到0.53g(64％)的N’-[(2R)-2-(N-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基)-3-苯基丙?；鵠-N-甲基肼羧酸叔丁酯，該產物為無色油狀物。
1H NMR(DMSO)選定峰δ1.25+1.55(2s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)；2.3+2.35(2s,3H,N-CH3,，旋轉異構體)；2.65+2.68(2s,3H,N-CH3，旋轉異構體)；2.95+3.0(2s,3H,N-CH3，旋轉異構體)N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N’-甲基肼基羰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯 0℃下，向溶于二氯甲烷(2ml)中的N’-[(2R)-2-(N-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙?；?-N-甲基氨基)-3-苯基丙?；鵠-N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.27g,0.36mmol)的溶液內加入三氟乙酸(2ml)并將該混合物攪拌90分鐘。隨后加入二氯甲烷(50ml)和飽和碳酸氫鈉(5ml)且用固體碳酸氫鈉滴定該混合物直至pH=7。分離水層并用二氯甲烷(20ml)提取，將合并的有機層用鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮，得到0.18g(78％)N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N’-甲基肼基羰基)-2-苯乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯，該產物為白色無定形粉末。
LC-MS:Rt=14.03分鐘，m/z=641.4(m+1)HPLC:Rt=13.80分鐘(H8)
N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯 向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N’-甲基肼基羰基)-2-苯乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯(0.18g,0.28mmol)的溶液中加入乙酸酐(0.053ml)和吡啶(0.027ml)且將該混合物攪拌過夜。真空濃縮該混合物并用二氯甲烷汽提3次，得到0.21g(110％)的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯，該產物為無色油狀物。
LC-MS:Rt=16.48分鐘，m/z=683.0(m+1)HPLC:Rt=15.81分鐘(H8)(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺 向溶于二氯甲烷(4ml)中的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酸氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯(0.21g,0.31mmol)的溶液中加入三(2-氨乙基)胺(4ml)且將該混合物攪拌60分鐘。隨后加入二氯甲烷(50ml)并用鹽水(2×20ml)、磷酸鹽緩沖液(pH=6,2×20ml)、水(20ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮，得到0.13g(92％)的(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺，該產物為無色油狀物。
LC-MS:Rt=8.57分鐘，m/z=461.2(m+1)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 向溶于二氯甲烷(5ml)中的(2E)-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.1g,0.42mmol)的溶液內加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.06g,0.42mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.08g,0.42mmol)且將混合物冷卻至0℃。隨后加入(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺(0.13g,0.28mmol)和二異丙基乙基胺(0.062毫升，0.36mmol)且在室溫下將混合物攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(50ml)且用水(10ml)、飽和碳酸氫鈉(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮。所得產物在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到0.12g(63％)((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯，該產物為無色油狀物。
將溶于二氯甲烷(2ml)中的((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.1g,0.146mmol)溶液冷卻至0℃并加入三氟乙酸(2ml)，將該混合物攪拌30分鐘。隨后加入二氯甲烷(50ml)和飽和碳酸氫鈉(5ml)，用固體碳酸氫鈉滴定該混合物直至pH=7。分離水層且用二氯甲烷(20ml)提取，將合并的有機層用鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。將所得產物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上樣至C-18 Sep-PakClassic柱體(2.0g，購自WatersTM)上，該柱體已經預先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗滌。隨后將由水/乙腈/三氟乙酸(10、50和70％乙腈在水/三氟乙酸(0.1％)中的溶液)組成的梯度洗脫劑通過該Sep-Pak柱。合并相關餾分且冷凍干燥得到0.086g(84％)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；?N’-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺的三氟乙酸鹽，該產物為白色無定形粉末。
LC-MS:Rt=9.255分鐘，m/z=586.4(m+1)HPLC:Rt=31.47分鐘(A1)；Rt=33.30(B1)1H NMR(DMSO)選定峰δ5.3(dd,1H,C=CH-CO)5.7(t,1H,CH-CH2C6H5)6.15(d,1H,CH2-CH=C)6.4(m,1H,CH-CH2C10H7)實施例4(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 N,N’,N’-三甲基肼羧酸叔丁酯 0℃下，向溶于無水四氫呋喃(40ml)中的肼基羧酸叔丁酯(1.0g,7.56mmol)的溶液中加入氫化鈉(60％的油分散體，2.73g,68mmol)和碘甲烷(11.3毫升，181mmol)且將該混合物攪拌3天。隨后加入四氫呋喃(100ml)并過濾該懸浮液，將濾液真空濃縮。將所得產物溶解在乙酸乙酯中并在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫并且濃縮，得到0.53g(40％)的N,N’,N’-三甲基肼羧酸叔丁酯，該產物為薄油。
1H NMR(CDCl3):δ1.48(s,9H,(CH3)3C-O)；2.6(s,6H,2N-CH3)2.9(s,3H,N-CH3)N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯 向溶于二氯甲烷(4ml)中的N,N’,N’-三甲基肼羧酸叔丁酯(0.52g,2.99mmol)的溶液內加入三氟乙酸(4ml)并將該混合物攪拌60分鐘。將該混合物真空濃縮且用二氯甲烷汽提3次，得到0.61g的N,N,N’-三甲基肼三氟乙酸鹽，該產物為薄油。
隨后將(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯基丙酸(1.0g,3.58mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.34g,1.79mmol)并攪拌30分鐘。隨后加入N,N,N’-三甲基肼三氟乙酸鹽(0.37g,1.96mmol)和二異丙基乙基胺(0.92g,5.34mmol)的混合物且將該混合物攪拌2天。
加入二氯甲烷(50ml)并用水(50ml)洗滌該混合物。有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×10ml)和水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮，并且在硅膠(100g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到0.30g的N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，該產物是無定形粉末。
HPLC:Rt=13.03分鐘(H8)1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.23+1.35(2s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)2.25+2.42+2.45(3s,6H,N-N(CH3)2，旋轉異構體)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 將溶于二氯甲烷(1ml)中的N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g,0.89mmol)的溶液內加入三氟乙酸(1ml)并將該混合物攪拌30分鐘。將該混合物真空濃縮，用二氯甲烷汽提3次并且懸浮在二氯甲烷(甲醇/氨)(1∶1)(2ml)中，沉淀出三氟乙酸銨。隨后加入乙醚(10ml)并過濾該混合物，真空濃縮濾液，得到0.31g(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸三甲基肼，該產物為油狀物。
隨后將(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.35g,1.07mmol)溶解在二氯甲烷(20ml)中并加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.15g,1.07mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.21g,1.07mmol)的混合物且攪拌30分鐘。隨后加入(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸三甲基肼(0.21g,0.89mmol)和二異丙基乙基胺(0.20ml)并將該混合物攪拌過夜。加入二氯甲烷(30ml)并用水(10ml)洗滌該混合物。有機層用碳酸氫鈉水溶液(10ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，濃縮為油狀物，并且在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(3∶7)洗脫，得到0.43g的N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯，該產物為油狀物。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ0.92+1.22(2s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)5.0+5.3(2t,1H,CH-CH2C6H5，旋轉異構體)6.3+6.45(2t,1H,CH-CH2C10H7,旋轉異構體)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺 0℃下，向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.43g,0.79mmol)溶液內加入三氟乙酸(2ml)并攪拌30分鐘。將該混合物真空濃縮且用二氯甲烷汽提3次。將所得油狀物溶解在甲醇/氨(2ml)中并加入二氯甲烷(20ml)和硅膠(5g)，真空濃縮。通過過濾用二氯甲烷(50ml)和二氯甲烷(甲醇/氨)(9∶1)提取所得粉末，將合并的提取液真空濃縮，得到0.36g粗產物，該產物為泡沫。
將(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.12g,0.48mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中并加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.065g,0.48mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.092g,0.48mmol)的混合物且攪拌30分鐘。然后，加入所得粗產物(0.18g,0.40mmol)和二異丙基乙基胺(0.09g,0.53mmol)的混合物且將該混合物攪拌過夜。
加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)洗滌該混合物。有機層用碳酸氫鈉水溶液(10ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，濃縮得到0.14g的無色油狀物。將油狀物溶解在二氯甲烷(2ml)中，冷卻至0℃，加入三氟乙酸(2ml)并將混合物攪拌30分鐘。用二氯甲烷(50ml)和水(10ml)停止該反應混合物，用固體碳酸氫鈉滴定直至pH-7。分離有機層并用水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。
將所得產物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上樣至C-18 Sep-Pak Classic柱體(2.0g，購自WatersTM)上，該柱體預先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗滌。隨后將由水/乙腈/三氟乙酸(10、15、20和25％乙腈在水/三氟乙酸中的溶液)組成的梯度洗脫劑通過Sep-Pak。合并相關餾分和冷凍干燥，得到0.072g(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺的三氟乙酸鹽，該產物為白色無定形粉末。
LC-MS:Rt=9.96分鐘，m/z=572.4(m+1)HPLC:Rt=35.28分鐘(A1)；Rt=37.45(B1)1H NMR(DMSO)選定峰δ5.1(t,1H,CH-CH2C6H5)6.1(t,1H,CH2-CH=C)6.2(d,1H,C=CH-CO)6.4(t,1H,CH-CH2C10H7)實施例53-氨基甲基-N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺 向溶于二氯甲烷(10ml)中的3-[(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)甲基]苯甲酸(0.18g,0.48mmol)溶液中加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.065g,0.48mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.092g,0.48mmol)且將混合物冷卻至0℃。隨后加入(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺(0.18g,0.40mmol)和二異丙基乙基胺(0.089毫升，0.52mmol)且在室溫下將混合物攪拌過夜。隨后加入二氯甲烷(50ml)且用水(10ml)、飽和碳酸氫鈉(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮。所得產物在硅膠(40g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到0.12g(37％)(3-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]芐基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯，該產物為無色油狀物。
向溶于二氯甲烷(4ml)中的(3-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲?；鵠芐基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯(0.12g,0.15mmol)的溶液中加入三(2-氨乙基)胺(4ml)且將該混合物攪拌90分鐘。隨后加入二氯甲烷(50ml)并用鹽水(2×20ml)、磷酸鹽緩沖液(pH=6,2×20ml)、水(20ml)、鹽水(10ml)洗滌該混合物，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮。
將所得產物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上樣至C-18 Sep-Pak Classic柱體(0.25g，購自WatersTM)上，該柱體預先用乙腈(10ml)和水(10ml)洗滌。隨后將由水/乙腈/三氟乙酸(10、30和70％乙腈在水/三氟乙酸中的溶液)組成的梯度洗脫劑洗脫Sep-Pak(2g)。合并相關餾分且冷凍干燥得到0.08g(77％)3-氨基甲基-N-甲基N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺的三氟乙酸鹽，該產物為無定形粉末。
LC-MS:Rt=9.87分鐘，m/z=580.2(m+1)HPLC:Rt=35.28分鐘(A1)；Rt=37.43(B1)1H NMR(DMSO)選定峰δ5.7(t,1H,CH-CH2C6H5)6.2(t,1H,CH-CH2C10H7)6.8-7.9(m,16H，芳香氫)實施例6(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 N-(1-(N’N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨酸甲酸叔丁酯 將溶于二氯甲烷中的(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯基丙酸(3.0g,10.74mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(2.06g,10.74mmol)和1-羥基-7-氮雜苯并三唑(1.46g,10.74mmol)的溶液攪拌30分鐘。隨后加入N’,N’-二甲基肼(1.23g,16.11mmol)和二異丙基乙基胺(2.39毫升，13.96mmol)的混合物且將該混合物攪拌過夜。
向該混合物中加入乙酸乙酯(100ml)且用水(20ml)洗滌。有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×10ml)和水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空濃縮，并且在硅膠(100g)上層析，用庚烷∶乙酸乙酯(2∶3)洗脫，得到2.19g N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)乙基)]氨酸甲酸叔丁酯，該產物為無定形粉末。
HPLC:Rt=10.81分鐘(H8)1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.25+1.30+1.45+1.50(4s,9H,(CH3)3C-O，旋轉異構體)2.45+2.50+2.60(3s,6H,N-N(CH3)2，旋轉異構體)2.80(s,3H,N-CH3)(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸N’,N’二甲基肼 向溶于二氯甲烷(5ml)中的N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.19g,6.81mmol)的溶液內加入三氟乙酸(2ml)并在室溫下攪拌90分鐘。將該混合物真空濃縮且用二氯甲烷(3×2ml)汽提3次，定量生成(2R)-2-甲基氨基-3-苯丙酸N’,N’二甲基肼的三氟乙酸鹽。
1H NMR(CDCl3)選定峰δ2.30(s,3H,HN-CH3)；2.45+2.50(2s,6H,N-N(CH3)2，旋轉異構體)N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
將溶于二氯甲烷(20ml)中的2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸(1.77g,5.37mmol)的溶液內加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.73g,5.37mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(1.03g,5.37mmol)并將該混合物攪拌30分鐘。隨后加入(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸N’,N’-二甲基肼(2.41g,5.37mmol)和二異丙基乙基胺(3.7ml,21.5mmol)并在室溫下攪拌過夜。將混合物真空濃縮，并且在硅膠(100g)上用二氯甲烷(90)甲醇/氨(10/1)層析，得到2.52g N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，該產物為黃色油狀物。
LC-MS:Rt=13.18分鐘，m/z=53.2(m+1)HPLC:Rt=14.12分鐘(H8)1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.15+1.25+1.30+1.45(4s,9H,(CH3)3-C，旋轉異構體)(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺 在0℃下，向溶于二氯甲烷(5ml)中的N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(2.52g,4.73mmol)溶液中加入三氟乙酸(5ml)并攪拌60分鐘。真空濃縮該混合物且用二氯甲烷汽提3次，定量得到(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺的三氟乙酸鹽，該產物為黃色油狀物。
HPLC:Rt=7.61分鐘(H8)LC-MS:Rt=7.72分鐘，m/z=433.2(m+1)
((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 向溶于二氯甲烷(5ml)中的(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.35g,1.42mmol)的溶液中加入1-羥基-7-氮雜苯并三唑(0.193g,1.42mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(0.272g,1.42mmol)的混合物且攪拌30分鐘。隨后加入所得(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺粗產物和二異丙基乙基胺(0.61毫升，3.55mmol)的混合物且將該混合物攪拌過夜。將混合物真空濃縮且在硅膠(40g)上用乙酸乙酯(95)甲醇/10％氨(5)層析，得到0.37g((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯，該產物是油狀物。
HPLC:Rt=14.51分鐘(H8)LC-MS:Rt=13.39分鐘，m/z=658.4(m+1)0℃下向溶于二氯甲烷(3ml)中的((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.36g,0.55mmol)的溶液中加入三氟乙酸(3ml)且將該混合物攪拌30分鐘。加入二氯甲烷(50ml)和水(10ml)并且用固體碳酸氫鈉滴定該溶液直至pH＞7。用二氯甲烷(25ml)提取水層并將合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾且真空濃縮。
將所得產物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上樣至C-18 Sep-Pak Classic柱體(0.25g，購自WatersTM)上，該柱體預先用乙腈(10ml)和水(10ml)洗滌。隨后將由水/乙腈/三氟乙酸(10、30和70％乙腈在水/三氟乙酸中的溶液)組成的梯度洗脫劑通過該Sep-Pak(2g)。合并相關餾分且冷凍干燥，得到196mg(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酰胺的三氟乙酸鹽，該產物為白色無定形粉末。
HPLC:Rt=30.42分鐘(A1)；Rt=30.38(B1),Rt=8.40分鐘(H8)LC-MS:Rt=8.99分鐘，m/z=588.4實施例7(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(實施例6)的制備方法、用2(R)-2-(N-(叔-丁氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-(噻吩-2-基)丙酸代替(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯基丙酸來制備。
N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 LC-MS:Rt=8.92分鐘，m/z=328.4(m+1)
1H NMR(CDCl3)選定峰δ1.35+1.40+1.42+1.45(4s,9H,C-(CH3)3，旋轉異構體)2.45+2.55+2.60(3s,6H,(CH3)2N-N，旋轉異構體)2.80+2.85(2s,3H,N-CH3)N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=13.96分鐘(H8)；LC-MS:Rt=13.11分鐘，m/z=539.4(m+1)(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺 HPLC:Rt=7.41分鐘(H8)；LC-MS:Rt=7.74分鐘，m/z=439.2(m+1)((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=14.43分鐘(H8)；LC-MS:Rt=13.31分鐘，m/z=664.4(m+1)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 HPLC:Rt=30.03分鐘(H8),Rt=29.88分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.97分鐘，m/z=564.4(m+1)實施例8N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲基氨基甲基)苯甲酰胺
按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(實施例6)的方法、用3-[叔-丁氧基羰基甲基氨基)甲基]苯甲酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-5-甲基己-2-烯酸進行制備。
N-(3-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]芐基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=14.63分鐘(H8)；LC-MS:Rt=13.68分鐘，m/z=680.2(m+1)N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲基氨基甲基)苯甲酰胺 HPLC:Rt=31.17分鐘(A1),Rt=30.58分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.92分鐘，m/z=580.2(m+1)
實施例9(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(實施例4)的制備方法、用2(R)-N-叔-丁氧基羰基氨基-N-甲基-D-4,4’-聯苯基丙氨酸代替2(R)-(N-叔-丁氧基羰基氨基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸制備。
N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=16.70分鐘(H8)；LC-MS:Rt=17.29分鐘，m/z=573.4(m+1)(2R)-3-(聯苯-4-基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺 HPLC:Rt=8.56分鐘(H8)；LC-MS:Rt=10.51分鐘，m/z=473.2(m+1)((3E)-4-[N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=16.22分鐘(H8)；LC-MS:Rt=17.16分鐘，m/z=698.6(m+1)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺
HPLC:Rt=37.23分鐘(A1),Rt=38.88分鐘(B1),Rt=10.88分鐘(H8)；LC-MS:Rt=11.14分鐘，m/z=598.4(m+1)實施例10(2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(實施例4)的制備方法、用(2E)-4-(1-(叔-丁氧基羰基氨基)環(huán)丁基)丁-2-烯酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸制備上述化合物。
(1-((2E)-3-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲?；鵠烯丙基)環(huán)丁基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=15.75分鐘(H8)；LC-MS:Rt=16.63分鐘，m/z=684.2(m+1)
(2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 HPLC:Rt=35.28分鐘(A1),Rt=36.92分鐘(B1),Rt=10.48分鐘(H8)；LC-MS:Rt=10.57分鐘，m/z=584.4(m+1)實施例11(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺 按照(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺(實施例9)的制備方法但用N-氨基哌啶代替N,N’,N’-三甲基肼進行制備。
N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲酸叔丁酯 LC-MS:Rt=13.68分鐘，m/z=362.0(m+1)(2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(哌啶-1-基)丙酰胺 HPLC:Rt=5.55分鐘(H8)；LC-MS:Rt=6.87分鐘，m/z=262.4(m+1)N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=16.22分鐘(H8)；LC-MS:Rt=15.41分鐘，m/z=599.2(m+1)(2R)-3-(聯苯-4-基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]丙酰胺 HPLC:Rt=9.11分鐘(H8)；LC-MS:Rt=9.71分鐘，m/z=499.2(m+1)((3E)-4-[N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基氨基甲?；鵠-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=16.25分鐘(H8)；LC-MS:Rt=15.13分鐘，m/z=724.6(m+1)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺
HPLC:Rt=37.03分鐘(A1),Rt=35.93分鐘(B1),Rt=10.45分鐘(H8)；LC-MS:Rt=10.24分鐘，m/z=624.4(m+1)實施例12(2E)-4-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-萘基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例4)的制備方法，但用(2R)-2-(N-(叔-丁氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-(噻吩-2-基)丙酸代替(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯丙酸進行制備。
N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=12.88分鐘(H8)；LC-MS:Rt=13.29分鐘，m/z=342.2(m+1)(2R)-2-(甲基氨基)-3-(2-噻吩基)丙酰三甲基肼 HPLC:Rt=5.26分鐘(H8)；LC-MS:Rt=6.67分鐘，m/z=242.6(m+1)N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=15.85分鐘(H8)；(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺 HPLC:Rt=8.79分鐘(H8)；LC-MS:Rt=9.72分鐘，m/z=453.2(m+1)
((3E)-1,1-二甲基-4-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=15.83分鐘(H8)；LC-MS:Rt=16.19分鐘，m/z=678.2(m+1)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 HPLC:Rt=33.85分鐘(A1),Rt=35.38分鐘(B1)；LC-MS:Rt=10.02分鐘，m/z=578.2(m+1)實施例13(2E)-4-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例4)的制備方法，但用2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸代替(2R)-2-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸進行制備。
((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=13.85分鐘(H8)；LC-MS:Rt=14.24分鐘，m/z=522.2(m+1)(2R)-2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺
HPLC:Rt=9.02分鐘(H8)；LC-MS:Rt=9.06分鐘，m/z=422.2(m+1)((3E)-4-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基氨基甲?；?-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=13.98分鐘(H8)；LC-MS:Rt=15.24分鐘，m/z=647.4(m+1)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺 HPLC:Rt=30.56分鐘(A1),Rt=32.10分鐘(B1)；LC-MS:Rt=9.24分鐘，m/z=547.4(m+1)實施例14
2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-2-甲基丙酰胺 按照類似于(2E)-4-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)酰胺(實施例13)的方法，但用2-叔-丁氧基羰基氨基-2-甲基丙酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸進行制備。氨基甲?；?乙基氨基甲酰基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=13.51分鐘(H8)；LC-MS:Rt=13.68分鐘，m/z=607.4(m+1)2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-2-甲基丙酰胺 HPLC:Rt=29.8分鐘(A1),Rt=31.29分鐘(B1)；LC-MS:Rt=9.21分鐘，m/z=507.6(m+1)實施例15(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯基乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例4)的制備方法，用N-甲基-N-(哌啶-1-基)胺代替N,N’,N’-三甲基肼進行制備。
N-(哌啶-1-基)甲酰胺 在40℃下，將在密封管內的N-氨基哌啶(2.0ml,18.5mmol)和甲酸甲酯(2.3ml,37mmol)的溶液攪拌4天。真空濃縮該混合物，將其懸浮在醚(100ml)中且過濾，得到1.84g的N-(哌啶-1-基)甲酰胺，該產物為白色粉末。
1H NMR(CDCl3):δ1.40(m,6H,-CH2CH2CH2CH2CH2-)2.75(m,4H,-CH2CH2-N-CH2CH2-)6.80(d,1H,NH)7.90+8.30+8.35(3s,1H,CHO-N，旋轉異構體)N-甲基-N-(哌啶-1-基)胺 在0℃，向氫化鋁鋰(0.66g,17.4mmol)在干四氫呋喃(20ml)中的懸浮液中加入溶于四氫呋喃(20ml)中的N-(哌啶-1-基)甲酰胺(1.86g,14.5mmol)溶液并將混合物攪拌3小時。隨后加入乙酸乙酯(20ml)和6N鹽酸(30ml)且在減壓下除去四氫呋喃。該混合物用30％氫氧化鈉滴定至pH11，用二氯甲烷(3×100ml)提取水層，將合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾且真空濃縮。所得油狀物在硅膠(40g)上層析，用二氯甲烷(9)甲醇(1)洗脫，得到1.76g的N-甲基-N-(哌啶-1-基)胺，該產物為黃色薄油。
1H NMR(CDCl3):δ1.65+1.90(2m,6H,-CH2CH2CH2CH2CH2-，旋轉異構體)2.75(s,3H,N-CH3)3.25(m,4H,-CH2CH2-N-CH2CH2-)N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=15.12分鐘(H8)；LC-MS:Rt=15.74分鐘，m/z=376.4(m+1)(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(哌啶-1-基)丙酰胺 HPLC:Rt=7.15分鐘(H8)；LC-MS:Rt=8.56分鐘，m/z=276.4(m+1)N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=17.53分鐘(H8)；LC-MS:Rt=18.20分鐘，m/z=587.4(m+1)(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯基乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺 HPLC:Rt=9.61分鐘(H8)；
LC-MS:Rt=10.76分鐘，m/z=487.4(m+1)((3E)-1,1-二甲基-4-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲?；鵠丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=17.42分鐘(H8)；(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯基乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺 HPLC:Rt=38.85分鐘(A1),Rt=40.19分鐘(B1),Rt=11.42分鐘(H8)；LC-MS:Rt=12.11分鐘，m/z=612.4(m+1)實施例16(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯基乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例15)的制備方法，但用(2R)-2-(N-(叔-丁氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-(噻吩-2-基)丙酸代替(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯丙酸進行制備。
N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=14.85分鐘(H8)；LC-MS:Rt=15.39分鐘，m/z=382.2(m+1)(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-(哌啶-1-基)-3-(2-噻吩基)丙酰胺 HPLC:Rt=6.83分鐘(H8)；LC-MS:Rt=8.34分鐘，m/z=282.2(m+1)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=17.53分鐘(H8)；LC-MS:Rt=17.83分鐘，m/z=593.4(m+1)(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2(2-噻吩基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺 HPLC:Rt=9.48分鐘(H8)；LC-MS:Rt=10.62分鐘，m/z=493.4(m+1)((3E)-1,1-二甲基-4-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)氨基甲?；鵠丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=17.19分鐘(H8)；(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 HPLC:Rt=39.47分鐘(A1),Rt=41.43分鐘(B1),Rt=11.30分鐘(H8)；LC-MS:Rt=12.17分鐘，m/z=618.4(m+1)實施例17(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(實施例1)的制備方法，但用3-吡咯烷酮代替乙酸肼。
N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡咯烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=10.70分鐘(H8)；LC-MS:Rt=10.34分鐘，m/z=348.4(m+1)N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯 HPLC:Rt=14.22分鐘(H8)；LC-MS:Rt=14.84分鐘，m/z=559.4(m+1)(2R)-N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺 HPLC:Rt=8.26分鐘(H8)；(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 HPLC:Rt=29.21分鐘(A1),Rt=8.43分鐘(H8)；LC-MS:Rt=9.24分鐘，m/z=584.4(m+1)實施例18(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)酰胺
按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例4)的制備方法，但用N-氨基哌啶代替三甲基肼進行制備。
HPLC:Rt=34.78分鐘(A1),Rt=33.74分鐘(B1)；LC-MS:Rt=9.81分鐘，m/z=598.4(m+1)實施例19(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例4)的制備方法，但用N-氨基吡咯烷代替三甲基肼進行制備。
HPLC:Rt=31.78分鐘(A1),Rt=30.78分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.92分鐘，m/z=584.4(m+1)實施例20(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲酰基}乙基)-N-甲基酰胺
按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例19)的制備方法，但用(2R)-叔-丁氧基羰基氨基-N-甲基-D-4,4’-聯苯基丙氨酸代替2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸。
HPLC:Rt=34.80分鐘(A1),Rt=34.04分鐘(B1)；LC-MS:Rt=9.46分鐘，m/z=610.4(m+1)實施例212-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀乙基)-2-甲基丙酰胺 按照類似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺(實施例4)的制備方法，但用3-芐氧基-2-叔-丁氧基羰基氨基丙酸代替2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸同時用N-叔-丁氧基羰基-a-氨基異丁酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸。
分離出兩種非對映異構體化合物1:
HPLC:Rt=32.20分鐘(A1),Rt=33.78分鐘(B1)；LC-MS:Rt=9.64分鐘，m/z=498.2(m+1)化合物2:
HPLC:Rt=31.05分鐘(A1),Rt=32.56分鐘(B1)；LC-MS:Rt=9.42分鐘，m/z=498.2(m+1)
實施例222-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-[(1R)-2-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺 按照類似于2-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀乙基)-2-甲基丙酰胺(實施例21)的制備方法，但用(2R)-2-甲基氨基-4-苯基丁酸N,N二甲基肼代替(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸N’,N’-二甲基肼進行制備。
分離出兩種非對映異構體化合物1:
HPLC:Rt=28.44分鐘(A1),Rt=28.73分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.21分鐘，m/z=498.4(m+1)化合物2:
HPLC:Rt=30.50分鐘(A1),Rt=30.50分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.61分鐘，m/z=498.4(m+1)實施例232-氨基-N-{2-芐氧基-1-[N-((1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]氨基甲?；鵠乙基}-2-甲基丙酰胺
按照類似于2-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯基丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺(實施例22)的制備方法，但用(2R)-2-氨基-4-苯基丁酸N,N二甲基肼代替(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丁酸N’,N’-二甲基肼進行制備。
分離出兩種非對映異構體化合物1:
HPLC:Rt=27.82分鐘(A1),Rt=27.78分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.41分鐘，m/z=484.4(m+1)化合物2:
HPLC:Rt=29.48分鐘(A1),Rt=29.58分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.67分鐘，m/z=498.4(m+1)實施例242-氨基-N-[(1R)-1-[(1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲?；鵠-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺 按照類似于2-氨基-N-{2-芐氧基-1-[N-((1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]氨基甲酰基]乙基}-2-甲基丙酰胺(實施例23)的制備方法，但用(2R)-2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸代替3-芐氧基-2-叔-丁氧基羰基氨基丙酸。
HPLC:Rt=25.65分鐘(A1),Rt=27.71分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.11分鐘，m/z=493.4(m+1)實施例25
2-氨基-N-[(1R)-1-{N-[(1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺 按照類似2-氨基-N-[(1R)-1-[(1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲?；鵠-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺(實施例24)的制備方法，但用(2R)-2-甲基氨基-4-苯基丁酸N,N’-二甲基肼代替(2R)-2-氨基-3-苯基丁酸N’,N’-二甲基肼。
HPLC:Rt=27.02分鐘(A1),Rt=27.31分鐘(B1)；LC-MS:Rt=8.07分鐘，m/z=507.4(m+1)。
權利要求
1．通式Ⅰ所示的化合物或其藥學上可接受的鹽 其中R1和R2獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；R3a是氫、由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或由一個或多個C1-6-烷基任選取代的芳基或雜芳基；R4a是由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或C1-7-?；籖5a是氫、由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基，或由一個或多個C1-6-烷基任選取代的芳基或雜芳基；或R3a和R4a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系由一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代；或R3a和R5a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系由一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代；或R4a和R5a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系，該雜環(huán)體系由一個或多個C1-6-烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代；或a和b獨立地為0、1或2；G是氫、-O-(CH2)k-R27， J是氫、-O-(CH2)L-R32 其中R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35和R36獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；k和L獨立地為0、1或2；D是 其中R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；n、m和q獨立地是0、1、2或3；p是0或1；M是-CR11=CR11a、亞芳基、亞雜芳基、-O-、-S-或價鍵；R11和R11a獨立地是氫或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；或D是R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R10獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；或R7和R8或R7和R9或R8和R9任選地形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j獨立地是1或2并且U是-O-、-S-或價鍵；n和m獨立地是0、1、2或3；o和p獨立地是0或1；M是-CR11=CR11a、亞芳基、亞雜芳基、-O-、-S-或價鍵；R11和R11a獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基。
2．根據權利要求1所述的化合物，其中R1是C1-6-烷基。
3．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R2是氫或C1-6-烷基。
4．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R3a是氫或C1-6-烷基。
5．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R4a是C1-6-烷基或C1-7-酰基。
6．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R5a是氫或C1-6-烷基。
7．根據權利要求1-3或6任一項所述的化合物，其中R3a和R4a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系。
8．根據權利要求1-4任一項所述的化合物，其中R4a和R5a與它們所連接的氮原子一起構成雜環(huán)體系。
9．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中a和b獨立地是1或2。
10．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中G是-O-(CH2)k-R27， 其中R27、R28、R29、R30和R31獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；k是0、1或2。
11．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中J是 或 其中R32、R33、R34、R35和R36獨立地是氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。
12．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中D是R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R10獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；n和m獨立地是0、1、2或3；o和p獨立地是0或1；M是-CR11=CR11a-、亞芳基、-O-或-S-；R11和R11a獨立地是氫，或由一個或多個芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基。
13．根據權利要求1-11任一項所述的化合物，其中D是R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R10獨立地是氫或由一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基任選取代的C1-6-烷基；n和m獨立地是0、1、2或3；o和p獨立地是0或1；M是價鍵。
14．根據權利要求12或13所述的化合物，其中R8和R9形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j獨立地是1或2并且U是-O-、-S-或價鍵。
15．根據上述權利要求任一項所述的化合物選自(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙?；禄?-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-芐基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺 3-氨基甲基-N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲氨基甲基)苯甲酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；?乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺 2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；?乙基)-2-甲基丙酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲?；?-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-芐基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲?；?-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；鶀-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(聯苯-4-基)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲?；?乙基]氨基甲?；鶀乙基)-N-甲基酰胺 2-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲?；鶀乙基)-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-(2-芐氧基-1-{N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{2-芐氧基-1-[N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基)氨基甲?；鵠乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲?；鵠-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺 和2-氨基-N-[(1R)-1-{N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
16．一種藥物組合物，該組合物含有上述權利要求任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性組份以及藥學上可接受的載體或稀釋劑。
17．一種用于促進哺乳動物腦垂體釋放生長激素的方法，該方法包括給所述哺乳動物給藥有效量的上述權利要求任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或上述任一項組合物權利要求中所述的組合物。
18．上述化合物權利要求任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于促進哺乳動物腦垂體釋放生長激素的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了通式(Ⅰ)所示的化合物及其在治療因生長激素缺乏所致醫(yī)學疾病中的應用。
文檔編號C07K5/08GK1288467SQ9980216
公開日2001年3月21日 申請日期1999年1月15日 優(yōu)先權日1998年1月16日
發(fā)明者邁克爾·安科森 申請人:諾沃挪第克公司