專利名稱：磷脂組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種磷脂組合物。具體來說，本發(fā)明涉及一種作為乳化劑使用能夠制得乳劑的磷脂組合物，該乳劑在進(jìn)行加熱滅菌時不易發(fā)生反乳化作用，其pH也不易降低。
磷脂組合物通常由含磷脂的天然物質(zhì)、如蛋黃、大豆或細(xì)菌中制得。磷脂組合物的制備方法因所用磷脂的來源而異。例如，在使用蛋黃作為磷脂來源的情況下，一般是用一種醇作用于干燥蛋黃，從中萃取磷脂成分，然后從萃取物中除去醇，制得磷脂組合物。這種方法中，根據(jù)需要一般用丙酮對上述磷脂組合物進(jìn)行純化處理，而純化處理也會從上述磷脂組合物中除去中性脂類。
所得磷脂組合物廣泛用作乳化劑，用于制備藥品、化妝品、食品及諸如此類。在這些領(lǐng)域中，將該磷脂組合物用作乳化劑所制得的乳劑(如脂肪乳)通常在使用前要進(jìn)行加熱滅菌。因此需要乳劑能耐受加熱滅菌；也就是說，需要乳劑在加熱滅菌過程中不易發(fā)生反乳化作用。而且，考慮到乳劑在加熱滅菌時經(jīng)常會發(fā)生pH降低，pH的變化要盡可能地小。但是，常規(guī)的磷脂組合物從這點(diǎn)上來看不能夠令人滿意。
因此，本發(fā)明的一個主要的目的即是提供一種新穎的能夠制得乳劑的磷脂組合物，該乳劑不存在上述問題。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明人進(jìn)行了廣泛研究，結(jié)果終于完成了本發(fā)明。
本發(fā)明提供了一種含有兩種或以上磷脂的磷脂組合物，該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的電導(dǎo)率和pH分別在130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種上述磷脂組合物的制備方法，和一種含有該磷脂組合物的乳化劑。
以下將對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
本發(fā)明中，磷脂包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸、其溶血形式的化合物、或神經(jīng)鞘磷脂。進(jìn)一步的磷脂組合物是含有兩種或兩種以上上述磷脂的組合物，該組合物中磷脂含量為20％或以上，其余成分主要由中性脂類組成。
這樣的磷脂組合物的具體實例包括一種一般含有至少20％磷脂的磷脂組合物，該磷脂由有機(jī)溶劑(醇)從蛋黃中萃取而得，或者是再將該磷脂組合物純化至磷脂含量為80％或以上而得的磷脂組合物；和一種一般含有至少50％磷脂的磷脂組合物，該磷脂組合物是由大豆色拉油制備方法中的脫膠步驟所得的含水膠質(zhì)脫水而得，或者是再將該磷脂組合物純化至磷脂含量至少為80％而得的磷脂組合物。
經(jīng)測量，本發(fā)明的磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液所具有的電導(dǎo)率在130至220μS/cm的范圍內(nèi)，pH在6.5至9.5的范圍內(nèi)。本文所用“去離子水”指不含溶解的離子的純凈水，具體來說，指電導(dǎo)率不超過2μS/cm的純凈水。進(jìn)一步地，“磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液”指用一種均化器將5重量份磷脂組合物分散在95重量份去離子水中而得。而且本發(fā)明中的電導(dǎo)率也是在20℃測量上述磷脂組合物的5重量％懸液的電導(dǎo)率所得的值，測量使用一種電導(dǎo)儀(如“DS-14電導(dǎo)儀”，日本屈場制作所制造)；pH也是在20℃測量上述磷脂組合物的5重量％懸液的pH所得的值，測量使用一種pH計(如“F-22pH計”，日本屈場制作所制造)。
若電導(dǎo)率小于130μS/cm，則將該磷脂組合物用作乳化劑所制得的乳劑的pH在對乳劑進(jìn)行加熱滅菌時易發(fā)生顯著降低。另一方面，若電導(dǎo)率大于220μS/cm，則該乳劑在加熱滅菌時易發(fā)生反乳化作用。有鑒于此，本發(fā)明的磷脂組合物具有上述范圍的電導(dǎo)率是必要的。電導(dǎo)率的優(yōu)選范圍為150至200μS/cm。
而且，即使電導(dǎo)率在130至220μS/cm的范圍內(nèi)，若pH低于6.5，則將該磷脂組合物用作乳化劑所制得的乳劑在加熱滅菌時還是易發(fā)生反乳化作用。另一方面，若pH高于9.5，則不僅該乳劑在加熱滅菌時易發(fā)生反乳化作用，而且該乳劑的pH易顯著降低。因此，對本發(fā)明的磷脂組合物來說，具有上述范圍的pH也是必要的。優(yōu)選的pH范圍為7.0至9.0。
進(jìn)一步地，本發(fā)明的磷脂組合物含有兩種或兩種以上磷脂。僅含有一種磷脂的磷脂組合物用作乳化劑所制得的乳劑在加熱滅菌過程中容易發(fā)生反乳化作用，即使該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的電導(dǎo)率和pH分別在130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi)也是如此。
以下將對本發(fā)明磷脂組合物的代表性的制備方法進(jìn)行描述。
用醇作用于干燥的蛋黃，從中萃取磷脂成分，得到粗磷脂組合物(磷脂含量約20至60％)，然后從萃取液中除去醇，或者，進(jìn)一步用1至10倍于上述粗磷脂組合物的丙酮處理該粗磷脂組合物，以除去中性脂類(三?；视?、膽甾醇等)，得到磷脂含量高達(dá)80％或以上如95至99％的磷脂組合物，將該磷脂組合物溶于3至20倍于磷脂組合物的極性溶劑(甲醇、乙醇、二氯甲烷、丙酮、水或諸如此類)或極性溶劑與非極性溶劑(正戊烷、正己烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、苯或諸如此類)的混合溶劑，然后使所得溶液與離子交換樹脂接觸，使電導(dǎo)率和pH分別達(dá)到130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi)，再在減壓下蒸餾除去溶劑，得到所需的磷脂組合物。
用于上述方法的離子交換樹脂的實例包括強(qiáng)酸或弱酸型陽離子交換樹脂(前者例如包括“Amberlite IR 120B”和“Amberlite IR 200C”,Rohm & Haas公司制造，“Dowex 50W”和“Dowex MSC-1”,Dow化學(xué)公司制造，“DouLite C-20”和“DouLite C-25D”,DiamondShamrock公司制造；后者例如包括“Amberlite IRC 50”、“AmberliteIRC 84”、“Dowex CCR-2”和“DouLite CC-4”)，和強(qiáng)堿或弱堿型陰離子交換樹脂(前者例如包括“Amberlite IRA400”、“AmberliteIRA900”、“Dowex1”和“DouLite A-101D”，后者例如包括“AmberliteIRA68”和“Amberlite IRA45”)。這些離子交換樹脂根據(jù)需要可單獨(dú)使用，也可兩種或兩種以上結(jié)合使用。
現(xiàn)在參考下列實施例和試驗例，將對本發(fā)明進(jìn)行更為具體的描述。注意本發(fā)明中“％”指“重量％”。實施例1用一種醇(95％乙醇)從干燥蛋黃中萃取磷脂成分，減壓下從萃取液中除去溶劑(乙醇)，然后用6倍于殘余物的丙酮處理之，制得下列純化的蛋黃磷脂組合物。
組成磷脂酰膽堿 78.0(％)磷脂酰乙醇胺18.3膽甾醇 2.0其他雜質(zhì)余量總計100.0(％)電導(dǎo)率710μS/cm
將100g上述蛋黃磷脂組合物溶于500ml己烷-甲醇(80∶20)。向此溶液中加入10ml強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂(“AmberliteIR 120B”(H型)，Rohm&Haas公司制造)和20ml強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂(“Amberlite IRA400”(OH型)，Rohm & Haas公司制造)，混合物攪拌30分鐘。然后，過濾除去離子交換樹脂，減壓蒸餾除去溶劑，得到具有下列組成的磷脂組合物，其電導(dǎo)率和pH分別為172μS/cm和7.5。
組成磷脂酰膽堿 79.1(％)磷脂酰乙醇胺16.7膽甾醇 1.6其他雜質(zhì)余量總計100.0(％)該磷脂組合物的電導(dǎo)率和pH按下列方法測量(后述實施例和試驗例也使用類似的方法)。
將5g磷脂組合物加入到95g蒸餾水(電導(dǎo)率1.4μS/cm)中，混合物在20000轉(zhuǎn)每分的高速均化器(“PHYSCOTRON”，日本日音醫(yī)理科器械制作所制造)中攪拌5分鐘，得到一懸液。之后立即在20℃下分別用電導(dǎo)儀(“DS-14電導(dǎo)儀”，日本屈場制作所制造)和pH計(“F-22pH計”，日本屈場制作所制造)測量該懸液的電導(dǎo)率和pH。實施例2用醇(95％乙醇)從干燥蛋黃中萃取磷脂成分，減壓下從萃取液中除去溶劑(乙醇)，制得下列蛋黃磷脂組合物。
組成磷脂酰膽堿 51.9(％)磷脂酰乙醇胺8.1膽甾醇 5.7三?；视? 33.5其他雜質(zhì)余量總計100.0(％)電導(dǎo)率674μS/cm將100g上述蛋黃磷脂組合物溶于300ml己烷-甲醇(80∶20)。向此溶液中加入6ml強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂(“Amberlite IR 120B”(H型)，Rohm & Haas公司制造)和12ml強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂(“Amberlite IRA400”(OH型)，Rohm & Haas公司制造)，混合物攪拌30分鐘。然后，過濾除去離子交換樹脂，減壓蒸餾除去溶劑，得到具有下列組成的磷脂組合物，其電導(dǎo)率和pH分別為195μS/cm和7.6。
組成磷脂酰膽堿 52.3(％)磷脂酰乙醇胺7.5膽甾醇 5.6三?；视? 33.6其他雜質(zhì)余量總計100.0(％)實施例3將大豆色拉油制備方法的脫膠步驟中所得的含水膠質(zhì)用5倍于膠質(zhì)的丙酮處理，制得下列純凈的大豆磷脂組合物。
組成磷脂酰膽堿 27.5(％)磷脂酰乙醇胺24.0磷脂酰肌醇 15.0磷脂酸 11.5其他雜質(zhì)余量總計100.0(％)電導(dǎo)率994μS/cm將100g上述大豆磷脂組合物溶于500ml己烷-甲醇(80∶20)。向此溶液中加入8ml強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂(“Amberlite IR 120B”(H型)，Rohm & Haas公司制連)和16ml強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂(“Amberlite IRA400”(OH型)，Rohm & Haas公司制造)，混合物攪拌30分鐘。然后，過濾除去離子交換樹脂，減壓蒸餾除去溶劑，得到具有下列組成的磷脂組合物，其電導(dǎo)率和pH分別為156μS/cm和7.2。
組成磷脂酰膽堿 28.5(％)磷脂酰乙醇胺23.2磷脂酰肌醇 15.4
磷脂酸 10.7其他雜質(zhì)余量總計100.0(％)試驗例試驗方法(a)磷脂組合物的制備除了改變所用離子交換樹脂的總量、但不改變強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂與強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂之間的比例以外，按照與實施例1相同的方法制得八種具有不同電導(dǎo)率的磷脂組合物，如表1所示。這些樣品的pH也如表1所示。(b)乳劑(脂肪乳)的制備在加熱條件下，將每種如上制得的磷脂組合物(重量為24g，以磷脂計算)溶于400g大豆油。在用10000轉(zhuǎn)每分的高速攪拌機(jī)(日本特殊機(jī)化工業(yè)株式會社制造)攪拌10分鐘的同時，緩慢向此溶液中加入45g濃甘油和蒸餾水(使總量達(dá)到2升)，于是得到粗乳劑。之后，該乳劑進(jìn)一步用高壓均化器(日本IZUMI食品機(jī)械株式會社制造)在500kg/cm2壓力下處理5分鐘，得到細(xì)乳劑。于是制得八種不同的乳劑(脂肪乳)(1號至8號樣品)。
然后，用氫氧化鈉水溶液將這些樣品的pH調(diào)至8.5。將每一份調(diào)節(jié)好pH的50ml樣品置于50ml小瓶中，然后用氮?dú)庵脫Q小瓶的液上空氣。將這些小瓶氣密密封，置于121℃高壓滅菌器中30分鐘進(jìn)行加熱滅菌，觀察樣品中是否因反乳化作用而有油滴生成，并測量樣品pH降低的程度。試驗結(jié)果觀察和測量結(jié)果如下表1所示。
表1<
注因反乳化作用而引起的油滴生成
◎沒有觀察到任何油滴○觀察到僅有非常少量油滴△觀察到有少量油滴×觀察到有大量油滴上表1所示結(jié)果證明，為了防止乳劑的反乳化作用、即為了使乳劑穩(wěn)定，也為了防止乳劑pH降低，磷脂組合物的電導(dǎo)率應(yīng)在130至220μS/cm范圍內(nèi)；該磷脂組合物優(yōu)選的電導(dǎo)率范圍為150至200μS/cm。試驗例2試驗方法(a)磷脂組合物的制備向30g試驗例1的1號磷脂組合物樣品(電導(dǎo)率16.3μS/cm,pH7.0)中加入蒸餾水使總重為600g?；旌衔镌诟咚倬?“PHYSCOTRON”，日本日音醫(yī)理科器械制作所制造)中攪拌，得到該磷脂組合物的5％懸液。向每一份如此得到的5％懸液中適當(dāng)加入氫氯酸或氫氧化鈉的水溶液和電導(dǎo)率調(diào)節(jié)劑，所得混合物冷凍干燥得到七種具有150至160μS/cm電導(dǎo)率和不同pH的磷脂組合物(9號至15號樣品)，如表2所示。
所用的電導(dǎo)率調(diào)節(jié)劑是一種濃度均為10mM的含有氯化鉀、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂和氯化鐵的水溶液。(b)乳劑(脂肪乳)的制備使用如上制得的9號至15號樣品，按照與上述試驗例1相同的方法制得乳劑，觀察是否因反乳化作用而有油滴生成，并按照與試驗例1相同的方法測量pH降低的程度。實驗結(jié)果觀察和測量結(jié)果如下表2所示。
表2
注因反乳化作用而引起的油滴生成◎沒有觀察到任何油滴○觀察到僅有非常少量油滴△觀察到有少量油滴×觀察到有大量油滴上表2所示結(jié)果證明，為了防止乳劑的反乳化作用、即為了使乳劑穩(wěn)定，也為了防止乳劑pH降低，不僅磷脂組合物的電導(dǎo)率應(yīng)在130至220μS/cm范圍內(nèi)，而且該磷脂組合物的pH也應(yīng)在6.5至9.5的范圍內(nèi)；該磷脂組合物優(yōu)選的pH范圍為7.0至9.0。試驗例3試驗方法(a)磷脂組合物的制備按照實施例1的方法制得磷脂組合物，所述磷脂組合物不用離子交換樹脂處理，而用日本專利未決申請128278/1994號公開的高效液相色譜法進(jìn)行純化，得到僅含有磷脂酰膽堿作為其磷脂成分的磷脂組合物。
高效液相色譜按下列條件進(jìn)行。
條件柱50mm(內(nèi)徑)×1000mm(長度)柱填充物硅膠(完全為多孔球形硅膠，粒徑為40至60微米)移動相乙醇/水=92/8v/v,150ml/min檢測紫外吸收(λ=204nm)所得磷脂組合物的磷脂酰膽堿含量測得為99.9％。該磷脂組合物的電導(dǎo)率和pH分別為60μS/cm和5.1。
向30g如上所得磷脂組合物中加入蒸餾水，使總重為600g，混合物在高速均化器中攪拌，得到該磷脂組合物的5％懸液。向每一份如此得到的5％懸液中適當(dāng)加入氫氧化鈉水溶液和與實驗例2所用相同的電導(dǎo)率調(diào)節(jié)劑，所得混合物冷凍干燥得到四種pH7.3至7.5和不同電導(dǎo)率的磷脂組合物(16號至19號樣品)，如表3所示。(b)乳劑(脂肪乳)的制備使用如上制得的16號至19號樣品，按照與上述試驗例1相同的方法制得乳劑，觀察是否因反乳化作用而有油滴生成，并按照與試驗例1相同的方法測量pH降低的程度。實驗結(jié)果觀察和測量結(jié)果如下表3所示。
表3
注因反乳化作用而引起的油滴生成◎沒有觀察到任何油滴○觀察到僅有非常少量油滴△觀察到有少量油滴×觀察到有大量油滴上表3所示結(jié)果證明，為了防止乳劑的反乳化作用、即為了使乳劑穩(wěn)定，也為了防止乳劑pH降低，不僅磷脂組合物的電導(dǎo)率和pH應(yīng)當(dāng)分別在130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi)，而且該磷脂組合物應(yīng)當(dāng)含有兩種或兩種以上磷脂。
將本發(fā)明的磷脂組合物用作乳化劑能夠制得乳劑，該乳劑在進(jìn)行加熱滅菌時不易發(fā)生反乳化作用，其pH也不易降低。有鑒于此，預(yù)期本發(fā)明的磷脂組合物作為一種乳化劑，可廣泛應(yīng)用于藥品、化妝品、食品等一般包含加熱滅菌步驟的制備方法領(lǐng)域。
權(quán)利要求
1．一種含有兩種或兩種以上磷脂的磷脂組合物，該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的電導(dǎo)率和pH分別在130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi)。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的磷脂組合物，其中該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的電導(dǎo)率在150至200μS/cm的范圍內(nèi)。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或2的磷脂組合物，其中該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的pH在7.0至9.0的范圍內(nèi)。
4．一種用于制備如上述權(quán)利要求1至3中任一項的磷脂組合物的方法，該方法包括步驟將從含有磷脂的天然物質(zhì)萃取而得的粗磷脂組合物或者是進(jìn)一步純化處理粗磷脂組合物而得的純化的磷脂組合物溶于溶劑中，使所得溶液與離子交換樹脂接觸，和從溶液中除去溶劑。
5．根據(jù)權(quán)利要求4的用于制備如上述權(quán)利要求1至3中任一項的磷脂組合物的方法，該方法包括步驟用醇從干燥蛋黃中萃取磷脂成分，再從萃取液中除去醇，將所得粗磷脂組合物直接或者進(jìn)一步純化該粗磷脂組合物而得的純化的磷脂組合物溶于溶劑中，所述純化方法為用丙酮處理粗磷脂組合物，得到丙酮不溶性物質(zhì)，從丙酮不溶性物質(zhì)中除去丙酮，使所得溶液與離子交換樹脂接觸，和從溶液中除去溶劑。
6．一種含有磷脂組合物的乳化劑，該磷脂組合物含有兩種或兩種以上磷脂，該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的電導(dǎo)率和pH分別在130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi)。
7．根據(jù)權(quán)利要求6的乳化劑，其中該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的電導(dǎo)率在150至200μS/cm的范圍內(nèi)。
8．根據(jù)權(quán)利要求6或7的乳化劑，其中該磷脂組合物在去離子水中的5重量％懸液的pH在7.0至9.0的范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有兩種或兩種以上磷脂的磷脂組合物,該磷脂組合物在去離子水中的5重量%懸液的電導(dǎo)率和pH分別在130至220μS/cm和6.5至9.5的范圍內(nèi);其制備方法;及其用途。
文檔編號C07F9/10GK1208419SQ97191668
公開日1999年2月17日 申請日期1997年11月11日 優(yōu)先權(quán)日1996年11月13日
發(fā)明者奈良部均, 田邊圣子, 重松康彥, 石川范行, 山田滿里, 小林英明 申請人:Q·P·公司