專利名稱：磺?；轷０被u乙氨基磺酰胺逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑的制作方法
相關申請本申請是共同所有和未決申請?zhí)?8/401,838(申請日1995年3月10日)的部分繼續(xù)申請。
背景技術：
本發(fā)明涉及逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑，尤其是涉及抑制逆轉錄病毒蛋白酶如人體免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶的新化合物，組合物和方法。本發(fā)明尤其涉及磺?；轷０被u乙胺磺酰胺蛋白酶抑制劑化合物，組合物和抑制逆轉錄病毒蛋白酶，預防逆轉錄病毒感染或逆轉錄病毒的傳播，以及治療逆轉錄病毒感染如HIV感染的方法。本發(fā)明還涉及制備這些化合物的方法以及用于這些制備的中間體。
在逆轉錄病毒復制循環(huán)過程中，gag和gag-pol基因轉錄產物被翻譯為蛋白質。接著這些蛋白質通過病毒編碼蛋白酶(或蛋白酶)處理產生病毒酶和病毒核的結構蛋白。最普遍的情況是gag前體蛋白被加工成核蛋白，pol前體蛋白被加工成病毒酶如逆轉錄酶和逆轉錄病毒蛋白酶。已經表明，用逆轉錄病毒蛋白酶正確加工前體蛋白酶對傳染病毒的裝配是必要的。例如，已經表明，在HIV的pol基因蛋白酶區(qū)域內的移碼突變阻止gag前體蛋白的加工。還表明，通過余留在HIV蛋白酶活動位點內的天冬氨酸的位點直接誘變阻止了gag前體蛋白的加工。因此，人們已經進行過通過抑制逆轉錄病毒蛋白酶的作用來抑制病毒復制的嘗試。
逆轉錄病毒蛋白酶抑制作用一般包括過渡態(tài)模擬物，在此逆轉錄病毒蛋白酶被暴露于模擬化合物，該化合物與gag和gag-pol蛋白質競相(一般以可逆轉方式)與酶結合，因而抑制結構蛋白質的具體加工和逆轉錄病毒蛋白酶本身的釋放。用這種方式可以有效地抑制逆轉錄病毒復制蛋白酶。
已經有人提出了抑制蛋白酶如抑制HIV蛋白酶的幾類化合物。例如，WO92/08701，WO93/23368，WO93/23379，WO94/04493，WO94/10136和WO94/14793(所有這些文獻在此引作參考)描述了含磺?；轷０被u基乙胺，磺?；轷０被u基乙基脲，磺?；轷０被u乙基磺酰胺和磺酰基烷酰氨基羥乙氨基磺酰胺等排物的逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑。其它這類化合物包括羥基乙胺等排物和還原酰胺等排物。例如，參見EP0 346 847；EP0 342 541；Roberts等人，“Rational Design of Peptide-Based Proteinase Inbibitor”，《科學》(Science)，248，358(1990)；和Erickson等人，”Design Activity，and 2.8 Crystal Structure of a C2Symmetric Inhibitor Complexed toHIV-1 Protease”，《科學》(Science)，249，527(1990)。例如，US5,157,041，WO94/04491，WO94/05639和美國專利申請?zhí)?8/294,468(申請日1994年8月23日)也描述了含羥基乙胺，羥基乙基脲或羥乙基磺酰胺等排物的逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑，上述文獻全部引為參考。
其它幾類已知的化合物也被用作蛋白水解酶血管緊張肽原酶抑制劑。例如，參見US4,599,198；UK2,184,730；GB2,209,752；EP O 264 795；GB2,200,115和USSIR H725。其中，GB2,200,115，GB2,209,752，EP0 264 795，US SIR H725和US4,599,198公開了含脲羥基乙胺血管緊張肽原酶抑制劑。EP468 641公開了血管緊張肽原酶抑制劑和制備這種抑制劑的中間體，這些抑制劑包括含磺酰胺的羥基乙胺化合物，如3-(叔丁氧羰基)氨基-環(huán)己基-1-(苯磺?；?氨基-2(5)-丁醇。GB2,200,115也公開了含氨磺酰的羥基乙胺血管緊張肽原酶抑制劑，EP0 264 795公開了某些含磺酰氨基的羥基乙胺血管緊張肽原酶抑制劑。但是，眾所周知，雖然血管緊張肽原酶和HIV蛋白酶都屬于天冬氨酰蛋白酶，這些化合物通常是有效的血管緊張肽原酶抑制劑，但不能預測它們對抑制HIV蛋白酶也有效。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及選擇性逆轉錄病毒蛋白酶抑制化合物，類似物和它們的可藥用鹽，酯和藥物前體。本發(fā)明化合物以磺?；轷０被u基乙胺磺酰胺抑制劑化合物為特征。本發(fā)明化合物在抑制逆轉錄病毒蛋白酶如人體免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶方面優(yōu)于其它化合物。而且，本發(fā)明還包括抑制逆轉錄病毒蛋白酶的藥物組合物，方法和治療或預防逆轉錄病毒感染如HIV感染的方法。本發(fā)明還涉及制備這種化合物的方法和用于制備的中間體。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了式(I)逆轉錄病毒蛋白酶抑制化合物及其可藥用鹽、藥物前體或酯，
其中n和t分別代表0，1或2；優(yōu)選n代表1和t代表1或2；R1代表氫，烷基，烯基，炔基，羥基烷基，烷氧基烷基，氰基烷基，-CH2CONH2，-CH2CH2CONH2，-CH2S(O)2NH2，-CH2SCH3，-CH2S(O)H3或-CH2S(O)2CH3基團；優(yōu)選R1代表氫，1-5個碳原子的烷基，2-5個碳原子的烯基，2-5個碳原子的炔基，1-3個碳原子的羥基烷基，有1-3個烷基和1-3個烷氧基碳原子的烷氧基烷基，1-3個碳原子烷基的氰基烷基，-CH2CONH2，-CH2CH2CONH2，-CH2S(O)2NH2，-CH2SCH3，-CH2S(O)CH3或-CH2S(O)2CH3基團；更優(yōu)選R1代表氫，1-3個碳原子的烷基，2-3個碳原子的烯基，2-3個碳原子的炔基或氰基甲基；進一步優(yōu)選R1代表氫，甲基，乙基或氰基甲基；更進一步優(yōu)選R1代表甲基或乙基；最優(yōu)選R1代表甲基；R2代表烷基，芳烷基，烷硫基烷基，芳硫基烷基或環(huán)烷基烷基；優(yōu)選R2代表1-5個碳原子的烷基，1-3個碳原子烷基的芳烷基，1-3個碳原子烷基的烷硫基烷基，1-3個碳原子烷基的芳硫基烷基或1-3個碳原子烷基和3-6員環(huán)碳原子的環(huán)烷基烷基；更優(yōu)選R2代表3-5個碳原子的烷基，芳甲基，1-3個碳原子烷基的烷硫基烷基，芳硫基甲基或5-6員環(huán)碳原子的環(huán)烷基甲基；進一步優(yōu)選R2代表異丁基，正丁基，CH3SCH2CH2-，芐基，苯硫基甲基，(2-萘硫基)甲基，4-甲氧基苯基甲基，4-羥基苯基甲基，4-氟苯基甲基或環(huán)己基甲基；再進一步優(yōu)選R2代表芐基，4-氟苯基甲基或環(huán)己基甲基；最優(yōu)選R2代表芐基；R3代表烷基，環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基；優(yōu)選R3代表1-5個碳原子的烷基，5-8員環(huán)的環(huán)烷基或3-6員環(huán)的環(huán)烷基甲基；更優(yōu)選R3代表丙基，異戊基，異丁基，丁基，環(huán)戊基甲基，環(huán)己基甲基，環(huán)己基或環(huán)庚基；進一步優(yōu)選R3代表異丁基或環(huán)戊基甲基；R4代表雜芳基或雜環(huán)基；優(yōu)選R4代表苯并稠合的5-6員環(huán)的雜芳基或苯并稠合的5-6員環(huán)的雜環(huán)基；或R4代表下式基團，
其中A和B分別代表O，S，SO或SO2；優(yōu)選A和B分別代表O；R6代表氘，烷基或鹵素；優(yōu)選R6代表氘，1-5個碳原子的烷基，氟或氯；更優(yōu)選R6代表氘，甲基，乙基，丙基，異丙基或氟；R7代表氫，氘，烷基或鹵素；優(yōu)選R7代表氫，氘，1-3個碳原子的烷基，氟或氯；更優(yōu)選R7代表氫，氘，甲基或氟；或R6和R7分別代表氟或氯；優(yōu)選R6和R7分別代表氟；或R4代表下式基團，
其中Z代表O，S或NH；及R9代表下列基團，
其中Y代表O，S或NH；X代表一個鍵，O或NR21；R20代表氫，烷基，烯基，炔基，芳烷基，雜芳烷基，雜環(huán)烷基，氨基烷基，N-單取代的或N，N-雙取代的氨基烷基，
其中所說取代基為烷基或芳烷基，羧基烷基，烷氧羰基烷基，氰基烷基或羥基烷基；優(yōu)選R20代表氫，1-5個碳原子的烷基，2-5個碳原子的烯基，2-5個碳原子的炔基，1-5個碳原子烷基的芳烷基，5-6員環(huán)和1-5個碳原子烷基的雜芳烷基，5-6員環(huán)和1-5個碳原子烷基的雜環(huán)烷基，2-5個碳原子的氨基烷基，2-5個碳原子烷基的N-單取代的或N，N-雙取代的氨基烷基，其中所說取代基為1-3個碳原子的烷基或1-3個碳原子烷基的芳烷基，1-5個碳原子的羧基烷基，1-5個碳原子烷基的烷氧羰基烷基，1-5個碳原子的氰基烷基或2-5個碳原子的羥基烷基；更優(yōu)選R20代表氫，1-5個碳原子的烷基，1-3個碳原子烷基的苯基烷基，5-6員環(huán)和1-3個碳原子烷基的雜環(huán)烷基，或2-3個碳原子的N-單取代的或N，N-雙取代的氨基烷基，其中所說取代基為1-3個碳原子的烷基；最優(yōu)選R20代表氫，甲基，乙基，丙基，異丙基，異丁基，芐基，2-(1-吡咯烷基)乙基，2-(1-哌啶基)乙基，2-(1-哌嗪基)乙基，2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基，2-(1-嗎啉基)乙基，2-(1-硫代嗎啉基)乙基或2-(N，N-二甲氨基)乙基；R21代表氫或烷基；優(yōu)選R21代表氫或1-3個碳原子的烷基；更優(yōu)選R21代表氫或甲基；最優(yōu)選R21代表氫；或-NR20R21代表雜環(huán)基；優(yōu)選-NR20R21代表5-6員雜環(huán)基；更優(yōu)選-NR20R21代表吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-甲基哌嗪基，4-芐基哌嗪基，嗎啉基或硫代嗎啉基；及R22代表烷基或R20R21N-烷基；優(yōu)選R22代表烷基或R20R21N-烷基，其中烷基是1-3個碳原子的烷基；更優(yōu)選R22代表1-3個碳原子的烷基；及優(yōu)選R4代表苯并噻唑-5-基，苯并噻唑-6-基，2-氨基-苯并噻唑-5-基，2-(甲氧羰基氨基)-苯并噻唑-5-基，2-氨基-苯并噻唑-6-基，2-(甲氧羰基氨基)-苯并噻唑-6-基，5-苯并噁唑基，6-苯并噁唑基，6-苯并吡喃基，3，4-二氫苯并吡喃-6-基，7-苯并吡喃基，3，4-二氫苯并吡喃-7-基，2，3-二氫苯并呋喃-5-基，苯并呋喃-5-基，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯(benzodioxol)-5-基，2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氘-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，1，4-苯并二噁烷-6-基，5-苯并咪唑基，2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基，6-喹啉基，7-喹啉基，6-異喹啉基或7-異喹啉基；更優(yōu)選R4代表苯并噻唑-5-基，苯并噻唑-6-基，苯并噁唑-5-基，2，3-二氫苯并呋喃-5-基，苯并呋喃-5-基，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氘-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，1，4-苯并二噁烷-6-基，2-(甲氧羰基氨基)苯并噻唑-5-基，2-(甲氧羰基氨基)苯并噻唑-6-基或2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基；最優(yōu)選R4代表苯并噻唑-5-基，苯并噻唑-6-基，2，3-二氫苯并呋喃-5-基，苯并呋喃-5-基，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氘-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，1，4-苯并二噁烷-6-基，2-(甲氧羰基氨基)苯并噻唑-6-基或2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基；及R5代表烷基，烯基，炔基或芳烷基；優(yōu)選R5代表1-5個碳原子的烷基，2-5個碳原子的烯基，2-5個碳原子的炔基或芳基取代的1-5個碳原子的烷基；更優(yōu)選R5代表1-5個碳原子的烷基，3-4個碳原子的烯基，3-4個碳原子的炔基或芳基取代的1-4個碳原子的烷基；進一步優(yōu)選R5代表1-5個碳原子的烷基或苯基取代的2-4個碳原子的烷基；最優(yōu)選R5代表甲基，乙基，丙基，異丙基或2-苯基乙基。
優(yōu)選地，-CH(OH)-基團的碳原子的絕對立體化學結構是(R)，而-CH(R1)-和-CH(R2)-基團的碳原子的絕對立體化學結構是(S)。
在式(I)化合物中特別令人感興趣的一組化合物是式(II)所包括的化合物或其可藥用鹽，藥物前體或酯，
其中t，R1，R2，R3，R4和R5定義如上。
在式(II)化合物中特別令人感興趣的一組化合物是式(III)所包括的化合物或其可藥用鹽，藥物前體或酯，
其中t，R1，R2，R3，R4和R5定義如上。
式(III)中更優(yōu)選的一組化合物或其可藥用鹽，藥物前體或酯是有下列特點的化合物，其中t代表2；R1代表甲基或乙基；R2代表芐基，4-氟苯基甲基或環(huán)己基甲基；R3代表丙基，異戊基，異丁基，丁基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)戊基甲基或環(huán)己基甲基；R4代表2，3-二氫苯并呋喃-5-基，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，苯并噻唑-6-基，2，2-二氘-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，1，4-苯并二噁烷-6-基；及R5代表甲基，乙基，丙基，異丙基或2-苯基乙基。
最有用的化合物如下N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基[氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基3-(甲磺?；?丙酰胺；
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，4-苯并二噁烷-6-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺；N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(苯并噻唑-6-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺；N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(苯并噻唑-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺；及N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺。
這里所用術語“烷基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，均指直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選含有1-8個，更優(yōu)選含有1-5個，最優(yōu)選含有1-3個碳原子的烷基。這類基團包括，例如，甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，異戊基，己基，辛基等等。術語“羥基烷基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，均指上面定義的烷基，但其中至少有一個氫被羥基取代，優(yōu)選1-3個氫被羥基取代，更優(yōu)選1-2個氫被羥基取代，最優(yōu)選一個氫被羥基取代。術語“烯基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，均指有一個或多個雙鍵并優(yōu)選有2-8個碳原子，更優(yōu)選有2-5個碳原子，最優(yōu)選有2-3個碳原子的直鏈或支鏈烴。適合的烯基包括，例如，乙烯基，丙烯基，2-甲基丙烯基，1，4-丁二烯基等等。術語“炔基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，均指有一個或多個三鍵并優(yōu)選有2-8個碳原子，更優(yōu)選有2-5個碳原子，最優(yōu)選有2-3個碳原子的直鏈或支鏈烴。適合的炔基包括，例如，乙炔基，丙炔基(炔丙基)，丁炔基等等。術語“烷氧基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指烷基醚基，其中術語烷基定義如上。適合的烷基醚基包括，例如，甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等等。術語“環(huán)烷基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指飽和或部分飽和的單環(huán)，雙環(huán)或三環(huán)烷基，其中每個環(huán)部分優(yōu)選含有3-8個環(huán)碳原子，更優(yōu)選含有3-7個環(huán)碳原子，最優(yōu)選含有5-6個環(huán)碳原子，而且可任選苯并稠合環(huán)系統(tǒng)，該稠合環(huán)可根據(jù)定義由限定的芳基任意替代。這類環(huán)烷基包括，例如，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，八氫萘基，2，3-二氫-1H-茚基，金剛烷基等等。這里所用“雙環(huán)”和“三環(huán)”是指包括稠合環(huán)的系統(tǒng)，如萘基和β-咔啉基和取代的環(huán)系，如聯(lián)苯基，苯基吡啶基，萘基和二苯基哌嗪基。術語“環(huán)烷基烷基”指上面定義的烷基被一個上面定義的環(huán)烷基取代。這種環(huán)烷基烷基的實例有環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基甲基，環(huán)戊基甲基，環(huán)己基甲基，1-環(huán)戊基乙基，1-環(huán)己基乙基，2-環(huán)戊基乙基，2-環(huán)己基乙基，環(huán)丁基丙基，環(huán)戊基丙基，環(huán)己基丁基等等。術語“苯并”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指從苯衍生的二價基團C6H4＝。術語“芳基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指任意被一個或多個取代基取代的苯基或萘基，所說取代基包括烷基，烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，氰基，鹵代烷基，羧基，烷氧羰基，環(huán)烷基，雜環(huán)基，烷?；被０被?，脒基，烷氧羰基氨基，N-烷基脒基，烷基氨基，二烷基氨基，N-烷基酰氨基，N，N-二烷基酰氨基，芳烷氧羰基氨基，烷硫基，烷基亞磺酰基，烷基磺?；鹊?。芳基的實例有苯基，對甲苯基，4-甲氧基苯基，4-(叔丁氧基)苯基，3-甲基-4-甲氧基苯基，4-CF3-苯基，4-氟苯基，4-氯苯基，3-硝基苯基，3-氨基苯基，3-乙酰氨基苯基，4-乙酰氨基苯基，2-甲基-3-乙酰氨基苯基，2-甲基-3-氨基苯基，3-甲基-4-氨基苯基，2-氨基-3-甲基苯基，2，4-二甲基3-氨基苯基，4-羥基苯基，3-甲基-4-羥基苯基，1-萘基，2-萘基，3-氨基-1-萘基，2-甲基-3-氨基-1-萘基，6 -氨基-2-萘基，4，6-二甲氧基-2-萘基，哌嗪基苯基等等。術語“芳烷基”和“芳烷氧基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指上面定義的烷基或烷氧基的至少一個氫原子被上面定義的芳基替代，如芐基，芐氧基，2-苯基乙基，二芐基甲基，羥基苯基甲基，甲基苯基甲基，二苯基甲基，二苯基甲氧基，4-甲氧基苯基甲氧基等等。術語“芳烷氧基羰基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指式如芳烷基-O-C(O)-的基團，其中術語“芳烷基”定義如上。芳烷氧基羰基的實例有芐氧羰基和4-甲氧基苯基甲氧羰基。術語“芳氧基”指式如芳基-O-的基團，其中術語“芳基”定義如上。術語“烷酰基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指從烷羧酸衍生的?；?，其實例包括乙酰基，丙酰基，丁酰基，戊酰基，4-甲基戊?；鹊?。術語“環(huán)烷基羰基”指式如環(huán)烷基-C(O)-的?；渲行g語“環(huán)烷基”定義如上，其實例有環(huán)丙基羰基，環(huán)己基羰基，金剛烷基羰基，1，2，3，4-四氫-2-萘酰基，2-乙酰氨基-1，2，3，4-四氫-2-萘酰基，1-羥基-1，2，3，4-四氫-6-萘酰基等等。術語“芳烷酰基”指從芳基取代的烷羧酸衍生的?；?，如苯基乙?；?，3-苯基丙?；?氫化肉桂?；?，4-苯基丁?；?2-萘基)乙?；?，4-氯氫化肉桂酰基，4-氨基四氫肉桂?；?，4-甲氧基氫化肉桂?；鹊?。術語“芳酰基”指從芳基羧酸衍生的?；?，其中術語“芳基”定義如上。這種芳?；ㄈ〈臀慈〈郊柞；蜉良柞；绫郊柞；?-氯苯甲?；?-羧基苯甲?；?-(芐氧羰基)苯甲?；?-萘甲?；?-萘甲?；?，6-羧基-2-萘甲酰基，6-(芐氧羰基)-2-萘甲?；?-芐氧基-2-萘甲?；?，3-羥基-2-萘甲?；?，3-(芐氧基甲酰氨基)-2-萘甲?；鹊?。術語“雜環(huán)基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指飽和或部分飽和的單環(huán)，雙環(huán)或三環(huán)雜環(huán)基，其中至少含有一個，優(yōu)選1-4個，更優(yōu)選1-2個氮，氧或硫原子環(huán)員，每個環(huán)優(yōu)選有3-8個，更優(yōu)選3-7個環(huán)員，最優(yōu)選5-6員環(huán)。“雜環(huán)基”包括砜，亞砜，叔氮環(huán)的N-氧化物，以及碳環(huán)稠合和苯并稠合環(huán)系統(tǒng)。這種雜環(huán)基可以任意在至少一個，優(yōu)選1-4個，更優(yōu)選1-2個碳原子位置被鹵素，烷基，烷氧基，羥基，氧代，芳基，芳烷基，雜芳基，雜芳烷基，脒基，N-烷基脒基，烷氧羰基氨基，烷基磺酰氨基等取代，和/或在仲氮原子(即-NH-)位置被羥基，烷基，芳烷氧羰基，烷?；?，雜芳烷基，苯基或苯基烷基取代，和/或在叔氮原子(即＝N-)位置被環(huán)氧取代?！半s環(huán)烷基”指其中至少有一個氫原子被一個上述雜環(huán)基取代的上述烷基，如吡咯烷基甲基，四氫噻吩基甲基，吡啶基甲基等等。術語“雜芳基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指按上述所定義的芳基和雜環(huán)基取代方式任意取代的上述芳香雜環(huán)基。這種雜環(huán)基和雜芳基的實例有吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，嗎啉基，硫代嗎啉基，吡咯基，咪唑基(如咪唑-4-基，1-芐氧羰基咪唑-4-基等)，吡唑基，吡啶基(如2-(1-哌啶基-1-吡啶基和2-(4-芐基哌嗪-1-基)吡啶基等)，吡嗪基，嘧啶基，呋喃基，四氫呋喃基，噻吩基，四氫噻吩基及其亞砜和砜衍生物，三唑基，噁唑基，噻唑基，吲哚基(如2-吲哚基等)，喹啉基(如2-喹啉基，3-喹啉基，1-環(huán)氧-2-喹啉基等)，異喹啉基(如1-異喹啉基，3-異喹啉基等)，四氫喹啉基(如1，2，3，4-四氫-2-喹啉基等)，1，2，3，4-四氫異喹啉基(如1，2，3，4-四氫-1-氧-異喹啉基等)，喹喔啉基，β-咔啉基，2-苯并呋喃羰基，1-，2-，4-或5-苯并咪唑基，亞甲基二氧基苯-4-基，亞甲基二氧基苯-5-基，亞乙基二氧基苯基，苯并噻唑基，苯并吡喃基，苯并呋喃基，2，3-二氫苯并呋喃基，苯并噁唑基，苯硫基等等。術語“雜芳烷基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指其中至少一個氫原子被上面定義的雜芳基取代的上面定義的烷基，如苯并呋喃基甲基，3-呋喃基丙基，喹啉基甲基，2-噻吩基乙基，吡啶基甲基，2-吡咯基丙基，1-咪唑基乙基等等。術語“環(huán)烷基烷氧羰基”指從式如環(huán)烷基烷基-O-COOH的環(huán)烷基烷氧基羧酸衍生的?；?，其中環(huán)烷基烷基定義如上。術語“芳氧基烷?；敝甘饺绶蓟?O-烷?；孽；?，其中芳基和烷酰基定義如上。術語“雜環(huán)基烷氧羰基”指從雜環(huán)基烷基-O-COOH衍生的?；?，其中雜環(huán)基烷基定義如上。術語“雜環(huán)基烷?；敝笍碾s環(huán)基烷基羧酸衍生的?；?，其中雜環(huán)基定義如上。術語“雜環(huán)基烷氧羰基”指從雜環(huán)基烷基-O-COOH衍生的酰基，其中雜環(huán)基烷基定義如上。術語“雜芳氧基羰基”指從雜芳基-O-COOH代表的羧酸衍生的?；渲须s芳基定義如上。術語“氨基羰基”，不論是單獨還是聯(lián)合使用，指氨基取代的羰基(氨基甲?；?，其中氨基可以是含有下列取代基的伯，仲或叔氨基烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基等等。術語“氨基烷?；敝笍陌被〈耐榛人嵫苌孽；?，其中氨基可以是含有下列取代基的伯，仲或叔氨基烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基等等。術語“鹵素”指氟，氯，溴或碘。術語“鹵代烷基”指其中一個或多個氫原子被鹵素取代的上面定義的烷基。這種鹵代烷基的實例包括氯甲基，1-溴甲基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，1，1，1-三氟乙基等等。術語“離去基團”(L或W)一般指可以用親核試劑如胺，硫醇或醇親核試劑很容易置換的基團。這些離去基團對本領域技術人員來說是非常熟悉的。離去基團的實例包括但不限于N-羥基琥珀酰亞胺，N-羥基苯并三唑，鹵化物，三氟甲磺酸酯，甲苯磺酸酯等。優(yōu)選的離去基團都在適當?shù)胤接枰灾该鳌?br> 下面介紹式I化合物的制備方法。應該注意，所述一般方法，是用具有特定立體化學結構的化合物的制備方法表達的，例如，其中羥基的絕對立體化學結構被指定為(R)。但是，這些方法一般也可以用于相反構型的化合物，如用于羥基立體化學結構是(S)的化合物。另外，有(R)立體化學結構的化合物可以被用于制備有(S)立體化學結構的化合物。例如，用眾所周知的方法可將有(R)立體化學結構的化合物轉變成有(S)立體化學結構的化合物。
式I化合物的制備上述式I表示的本發(fā)明化合物可用流程I和II所示的一般方法制備。
流程I
a)脫保護；X＝Cl或Br。
流程II
a)保護；b)選擇性脫保護；c)AcS(CH2)nCH(R1)CO2H偶合；d)水解，R5L置換，氧化；e)脫保護；R4SO2X偶合(X＝Cl或Br)。
用適當?shù)倪€原劑將下式的氨基酸的N-保護的氯酮衍生物還原成相應的醇，
其中P代表氨基保護基，R2定義如上。適當?shù)陌被Ｗo基是本領域熟知的，包括芐氧羰基，叔丁氧羰基等。優(yōu)選的氨基保護基是芐氧羰基。優(yōu)選的N-保護的氯酮是N-芐氧羰基-L-苯丙氨酸氯甲基酮。優(yōu)選的還原劑是硼氫化鈉。還原反應在約-10-25℃，優(yōu)選0℃，在適當溶劑系統(tǒng)如四氫呋喃等溶劑中進行?？蛇x用商品N-保護的氯酮，如Bachem，Inc.，Torrance，California生產的?；蛘哂肧.J.Fittkau，J.Prakt.Chem.，315，1037(1973)所述方法制備氯酮，然后用本領域熟知的方法進行N-保護。
可直接使用鹵代醇，如下所述，但優(yōu)選將其與適當?shù)膲A，優(yōu)選在室溫下，在適當溶劑系統(tǒng)中反應，生成下式表示的N-保護的氨基環(huán)氧化物，
其中P和R2定義如上。適合制備氨基環(huán)氧化物的溶劑系統(tǒng)包括乙醇，甲醇，異丙醇，四氫呋喃，二噁烷等以及它們的混合物。從還原氯酮制備環(huán)氧化物的適當堿包括氫氧化鉀，氫氧化鈉，叔丁氧化鉀，DBU等等。優(yōu)選的堿是氫氧化鉀。
或者，根據(jù)共有和未決PCT專利申請PCT/US93/04804(WO93/23388)和PCT/US94/12201，和美國專利申請律師記錄C-2860(上述文獻的全部均在此引作參考)公開的制備手性環(huán)氧化物，手性氰醇，手性胺和其它用在逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑制備中的手性中間體的方法制備保護的氨基環(huán)氧化物，起始原料用DL-，D-或L-氨基酸，將其與適當?shù)陌被Ｗo基在適當溶劑中反應，生成氨基保護的氨基酸酯。為了便于說明，我們用下式表示的保護的L-氨基酸制備本發(fā)明抑制劑，
其中P3代表羧基保護基，如甲基，乙基，芐基，叔丁基，4-甲氧基苯基甲基等；R2定義如上；P1，P2和P’分別選自胺的保護基，包括但不限于芳烷基，取代的芳烷基，環(huán)烯基烷基和取代的環(huán)烯基烷基，烯丙基，取代的烯丙基，?；?，烷氧羰基，芳烷氧基羰基和甲硅烷基。芳烷基的實例包括但不限于芐基，鄰-甲基芐基，三苯甲基和二苯甲基，它們可以任意被鹵素，C1-C8烷基，烷氧基，羥基，硝基，亞烷基，氨基，烷基氨基，酰基氨基和?；〈?，還包括它們的鹽，如鏻鹽和銨鹽。芳基包括苯基，萘基，2，3-二氫化茚基，蒽基，杜烯基，9-(9-苯基芴基)和菲基，含有C6-C10環(huán)烷基的環(huán)烯基烷基或取代的環(huán)烯基烷基。適當?shù)孽；ㄆS氧羰基，叔丁氧羰基，異丁氧羰基，苯甲?；?，取代的苯甲?；?，丁?；阴；阴；?，三氯乙?；?，鄰苯二甲?；鹊?。優(yōu)選的P1和P2獨立選自芳烷基和取代的芳烷基。更優(yōu)選P1和P2分別為芐基。
或者，P1和/或P2和/或P’保護基與他們相連的氮原子形成雜環(huán)，如1，2-二(亞甲基)苯，苯二甲酰亞氨基，琥珀酰亞氨基，馬來酰亞氨基等，而且這些雜環(huán)可以進一步包括相連的芳基和環(huán)烷基環(huán)。另外，雜環(huán)基可以是單-，雙-或三-取代的雜環(huán)，如硝基苯二甲酰亞氨基。術語“甲硅烷基”指任意被一個或多個烷基，芳基和芳烷基取代的硅氧烷。
適當?shù)募坠柰榛Ｗo基包括但不限于三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，二甲基苯基甲硅烷基，1，2-二(二甲基甲硅烷基)苯，1，2-二(二甲基甲硅烷基)乙烷和二苯基甲基甲硅烷基。將胺功能團甲硅烷基化得到的單-或二-二甲硅烷基胺可用來制備氨基醇，氨基酸，氨基酸酯和氨基酸酰胺的衍生物。對于制備氨基酸，氨基酸酯和氨基酸酰胺衍生物，用羰基功能團的還原反應可以得到所需的單-或二-甲硅烷基氨基醇。將氨基醇甲硅烷基化可以生成N，N，O-三-甲硅烷基衍生物。從甲硅烷基醚部分除去甲硅烷基是很容易實現(xiàn)的，譬如用金屬氫氧化物或氟化銨試劑處理，既可以作為一個分開的反應步驟，又可以在制備氨基醛試劑的現(xiàn)場進行。適當?shù)募坠柰榛噭┯?，例如，三甲基甲硅烷基氯化物，叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物，苯基二甲基甲硅烷基氯化物，二苯基甲基甲硅烷基氯化物或它們與咪唑或DMF的結合產物。胺的甲硅烷基化和除去甲硅烷基保護基的方法對本領域技術人員是已知的。從相應氨基酸，氨基酸酰胺或氨基酸酯制備這些胺的衍生物的方法也是有機化學，包括氨基酸/氨基酸酯或氨基醇化學領域技術人員已知的。
然后將氨基保護的L-氨基酸酯還原成相應的醇。例如，氨基保護的L-氨基酸酯可用二異丁基氫化鋁在-78℃在適當溶劑如甲苯中還原。優(yōu)選的還原劑包括氫化鋁鋰，硼氫化鋰，硼氫化鈉，硼烷，三-叔丁氧基氫化鋁鋰，硼烷/THF復合物。最優(yōu)選的還原劑是二異丁基氫化鋁(DiBAL-H)的甲苯。然后，例如通過Swern氧化反應將所得醇轉化成相應的下式表示的醛，
其中P1，P2和R2定義如上。接著，將該醇的二氯甲烷溶液加到草酰氯的二氯甲烷和DMSO的二氯甲烷冷溶液(-75--68℃)中并攪拌35分鐘。
可接受的氧化劑包括，例如，三氧化硫-吡啶復合物和DMSO，草酰氯和DMSO，乙酰氯或酐和DMSO，三氟乙酰氯或酐和DMSO，甲磺酰氯和DMSO或四氫噻吩-S-氧化物，甲苯磺酰溴和DMSO，三氟甲磺酰酐(三氟甲磺酸酐)和DMSO，五氯化磷和DMSO，二甲基磷酰氯和DMSO，及氯甲酸異丁酯和DMSO。Reetz等人[AngewChem.，99，p.1186，(1987)和Angew Chem.Int.Ed.Engl.，26，p.1141，(1987)]報道的氧化條件是用草酰氯和DMSO，在-78℃進行。
本發(fā)明描述的優(yōu)選氧化方法是三氧化硫吡啶復合物，三乙胺和DMSO在室溫下進行反應。該體系無需純化便可以極高的產率得到所需手性保護的氨基醛，即無需經過色譜法純化數(shù)公斤中間體，并減少了大規(guī)模操作的危害。在室溫下反應就不必采用為使方法更適于商業(yè)化生產而采用的低溫反應器。
反應可以在惰性氣氛中如氮氣或氫氣，或者正?；蚋稍锏目諝庵?，在大氣壓或帶正壓(高于大氣壓)的密封容器中進行。優(yōu)選氮氣環(huán)境。另外，胺堿包括，例如，三丁胺，三異丙胺，N-甲基哌啶，N-甲基嗎啉，氮雜雙環(huán)壬烷，二異丙基乙胺，2，2，6，6-四甲基哌啶，N，N-二甲氨基吡啶，或這些堿的混合物。三乙胺是優(yōu)選的堿。用作溶劑的純DMSO的替代物包括DMSO與非質子性或鹵化溶劑，如四氫呋喃，乙酸乙酯，甲苯，二甲苯，二氯甲烷，二氮乙烷等的混合物。偶極非質子傳遞共溶劑包括乙腈，二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，乙酰胺，四甲基脲及其環(huán)形類似物，N-甲基吡咯烷酮，四氫噻吩砜等。不用N，N-二芐基苯丙氨醇(pheny1alaninol)，而用上面討論過的苯丙氨醇衍生物，可以得到相應的N-一取代的(P1或P2＝H)或N，N-二取代的醛。
此外，進行相應的芐基(或其它適當?shù)谋Ｗo基)氮保護的苯丙氨酸，取代的苯丙氨酸或苯丙氨酸衍生物環(huán)烷基類似物的酰胺或酯衍生物的氫化還原反應可得到醛。氫化轉移是避免醛縮合條件下采用的醛合成的附加方法，參見Oppenauer Oxidation。
例如，使用鈉汞齊與HCl的乙醇溶液或氨中的鋰、鈉、鉀或鈣，采用還原保護的苯丙氨酸和苯丙氨酸類似物或它們的酰胺或酯衍生物的方法也可以制備本發(fā)明所需的醛。該反應溫度可以從約-20℃到約45℃，優(yōu)選約5-25℃。獲得氮保護的醛的兩種附加方法包括用漂白粉使相應的醇在催化量2，2，6，6-四甲基-1-吡啶氧基游離基存在下的氧化反應，以及用催化量四丙基過釕酸銨在N-甲基嗎啉-N-氧化物存在下將醇氧化成醛的反應。
或者，用氫和一種催化劑如在碳酸鋇或硫酸鋇上的Pd，用或不用附加催化調節(jié)劑如硫或硫醇(Rosenmund Reduction)可以還原上述保護的苯丙氨酸或苯丙氨酸衍生物的酰氯衍生物。
然后將從Swern氧化反應得到的醛與鹵代甲基鋰試劑反應，該試劑通過烷基鋰或芳基鋰化合物與用式X1CH2X2表示的二鹵代甲烷反應當場制成，其中X1和X2分別代表l，Br或Cl。例如，將醛和氯碘甲烷的THF溶液冷卻到-78℃，再加入正丁基鋰的己烷溶液。所得產物是下式表示的相應的氨基保護的環(huán)氧化物的非對映體混合物。
該非對映體可以通過，例如，色譜法分離，或者經過隨后一步反應步驟后分離非對映體產物。為制備連接R2的碳上有(S)立體化學結構的化合物可用D-氨基酸代替L-氨基酸。
向手性氨基醛添加氯甲基鋰或溴甲基鋰是高度非對映有擇的。優(yōu)選地，氯甲基鋰或溴甲基鋰當場從由二鹵代甲烷與正丁基鋰的反應制備?？山邮艿膩喖谆u代甲烷包括氯碘甲烷，溴氯甲烷，二溴甲烷，二碘甲烷，溴氟甲烷等等。例如，溴化氫到甲醛轉化的加合產物的磺酸酯也是亞甲基化劑。四氫呋喃是優(yōu)選的溶劑，但是溶劑如甲苯，二甲氧基乙烷，二氯乙烷，二氯甲烷也可以單獨或混合使用。偶極非質子傳遞溶劑如乙腈，DMF，N-甲基吡咯烷酮也可以用作溶劑或溶劑混合物的一部分。反應可以在惰性氣氛如氮氣或氬氣中進行。正丁基鋰可用其它有機金屬試劑替代，如甲基鋰，叔丁基鋰，仲丁基鋰，苯基鋰等等。反應可在約-80-0℃之間進行，但優(yōu)選在約-80--20℃之間進行。最優(yōu)選的反應溫度是在-40--15℃之間?？梢灾惶砑右淮卧噭谔囟l件下優(yōu)選添加多次試劑。優(yōu)選的反應壓力是大氣壓，但在某種條件下如高濕環(huán)境中可選用正壓。
本發(fā)明環(huán)氧化物轉化的其它方法包括其它種類的帶電亞甲基化前體的取代反應，接著用堿處理，形成類似的陰離子。這些種類的實例包括三甲基氧化锍甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯，四甲基鹵化銨，甲基二苯基氧化锍鹵化物，其中鹵化物是氯化物，溴化物或碘化物。
本發(fā)明的醛向它們的環(huán)氧化物衍生物轉化可以分多步進行。例如，向保護的氨基醛中加入例如由丁基鋰或芳基鋰試劑制成的苯硫基甲烷陰離子，然后將所得保護的氨基硫醚醇用已知氧化劑如過氧化氫，次氯酸叔丁酯，漂白粉或過碘化鈉氧化，得到亞砜。亞砜與，例如，甲基碘或溴甲烷，甲苯磺酸甲酯，甲磺酸甲酯，三氟甲磺酸甲酯，乙基溴，異丙基溴，芐基氯等的烷基化反應在有機或無機堿存在下進行?；蛘?，可以用，例如，上述烷基化試劑將保護的氨基硫醚醇烷基化，得到锍鹽，然后再用叔胺或無機堿將其轉化成所要的環(huán)氧化物。
用最優(yōu)選的條件以至少約85∶15的比例(S∶R)非對映選擇地形成所要的環(huán)氧化物。該產物可通過色譜法純化，得到非對映體和對映體的純產物，但更常用的辦法是直接用其制備逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑而不經純化。上述方法同樣適用于光學異構體混合物以及拆分的化合物。如果需要特定的光學異構體，則可以通過選擇起始原料如L-苯丙氨酸，D-苯丙氨酸，L-苯丙氨醇，D-苯丙氨醇，D-六氫苯丙氨醇等進行選擇，或在中間或最終步驟進行拆分。手性輔助劑如一或二當量樟腦磺酸，檸檬酸，樟腦酸，2-甲氧基苯基乙酸等等都可以用來生成本發(fā)明化合物的鹽，酯或酰胺。這些化合物或衍生物可用本領域技術人員已知的結晶或手性或非手性柱色譜分離得到。
然后將氨基環(huán)氧化物在適當溶劑系統(tǒng)中與等量或優(yōu)選過量所要的R3NH2胺反應，其中R3是氫或上面定義的基團。反應可以在很寬的溫度范圍內進行，如從約10℃到約100℃，但優(yōu)選而非必須在溶劑開始回流的溫度下進行。適當?shù)娜軇┫到y(tǒng)包括質子，非質子和偶極非質子傳遞有機溶劑，例如，溶劑中包含醇如甲醇，乙醇，異丙醇等等，醚如四氫呋喃，二噁烷等等，和甲苯，N，N-二甲基甲酰胺，二甲亞砜和它們的混合物。優(yōu)選的溶劑是異丙醇。所得產物是可用下式表示的3-(N-保護的氨基)-3-(R2)-1-(NHR3)-丙-2-醇衍生物(以下稱為氨基醇)，
其中P，P1，P2，R2和R3如上所述。或者，可用鹵代醇代替氨基環(huán)氧化物。
然后將上面定義的氨基醇在適當溶劑中與磺酰氯R4SO2Cl，磺酰溴R4SO2Br或對應的磺酸酐，優(yōu)選在酸性清除劑存在下反應。適于進行反應的溶劑包括二氯甲烷，四氫呋喃等。適當?shù)乃嵝郧宄齽┌ㄈ野罚拎さ?。根?jù)所用環(huán)氧化物，所得磺酰胺衍生物可用下式表示，
其中P，P1，P2，R2，R3和R4定義如上。這些中間體可用于制備本發(fā)明抑制劑化合物。
或者，從打開的環(huán)氧化物得到的保護的氨基醇可以進一步在新引入的氨基上用保護基P’保護，保護基P’不能用除去氨基保護基P或P1和P2的方式除去，即P’只能選擇性去除。本領域技術人員可以選用P’，P，P1和P2的適當結合。例如，適當結合方式有P＝Cbz和P’＝Boc；P’＝Cbz和P＝Boc；P1＝Cbz，P2＝芐基和P’＝Boc；以及P1＝P2＝芐基和P’＝Boc。由下式表示的所得化合物
可以通過剩下的成過程得到下式化合物，
其中n，t，P’，R1，R2，R3和R5定義如上。上述剩下的合成過程可以根據(jù)需要或者通過一次加入所要的殘基或基團，或者在一步中用多個殘基或基團制成的反應分子進行。剛說的前者是接續(xù)合成方法，后者是會聚合成方法。合成的轉變在這個階段也是可能的。然后，有選擇地除去保護基P’，將所得胺與磺酰氯R4SO2Cl，磺酰溴R4SO2Br或對應的磺酸酐，優(yōu)選在酸性清洗劑存在下反應，形成本發(fā)明化合物，
其中n，t，R1，R2，R3，R4和R5定義如上。這種選擇性脫保護和向磺酰胺的轉化既可以在合成結束時進行，也可以根據(jù)需要在適當?shù)闹虚g步驟完成。流程lI概括了(這種方法的)一個實例。
式R4SO2X的磺酰鹵可通過適當?shù)姆蓟?，雜芳基和苯并稠合的雜環(huán)格利雅試劑或鋰試劑與磺酰氯或二氧化硫反應，然后用鹵素，優(yōu)選用氯氧化來制備。芳基，雜芳基和苯并稠合的雜環(huán)格利雅試劑或鋰試劑可以從相應的商品或用本領域已知方法很容易從商品起始原料制成的他們的鹵化物(如氯或溴)制備。還有，可以用氯在水存在和精心控制的條件下將硫醇氧化成磺酰氯。另外，用試劑如PCl5，SOCl2，ClC(O)C(O)Cl等可將磺酸如芳基磺酸轉化成磺酰鹵，也可以用適當脫水試劑將其轉化成酸酐?；撬峥梢砸来斡帽绢I域已知方法制備。有些磺酸是商品。也可以用亞磺酰鹵(R4SOX)或硫基鹵(R4SX)代替磺酰鹵來制備其中-SO2-部分分別被一個-SO-或-S-部分替代的化合物。芳基磺酸，苯并稠合的雜環(huán)磺酸或雜環(huán)磺酸可以用本領域已知方法通過芳香環(huán)的磺?；瘉碇苽?，例如，通過與硫酸，SO3，SO3復合物如DMF(SO3)，吡啶(SO3)，N，N-二甲基乙酰胺(SO3)等反應制成。優(yōu)選通過芳香化合物與DMF(SO3)和SOCl2或ClC(O)C(O)Cl反應制備芳基磺酰鹵。該反應可以分步進行也可以在一釜內完成。
芳基磺酸，苯并稠合的雜環(huán)磺酸，雜芳基磺酸，芳基硫醇，苯并稠合的雜環(huán)硫醇，雜芳基硫醇，芳基鹵，苯并稠合的雜環(huán)鹵化物，雜芳基鹵化物等是商品或用本領域已知標準方法很容易從商品化起始原料制成。例如，下式代表的一些磺酸(R4SO3H)，
其中A，B，Z，R6，R7和R9定義如上，已經由商品1，2-苯二硫醇，2-巰基苯酚，1，2-苯二醇，2-氨基苯并噻唑，苯并噻唑，2-氨基苯并咪唑，苯并咪唑等制成，上述各化合物的制備見Carter，美國專利4,595,407；Ehrenfreund等人，美國專利4,634,465；Yoder等人，《雜環(huán)化學雜志》(J.Heterocycl.Chem.)，4166-167，(1967)；Cole等人，《澳洲化學雜志》(Aust.J.Chem.)，33675-680，(1980)；Cabiddu等人，《合成》(Synthesis)，797-798(1976)；Ncube等人，《四面體通訊》(Tet.Letters)，2345－2348，(1978)；Ncube等人，《四面體通訊》(Tet.Letters)，255-256，(1977)；Ansink&Cerfontain，Rcc.Trav.Chim.Pays-Bas，108395-403，(1989)；及Kajihara&Tsuchiya，EP638564A1，上述各文獻在此全部引作參考。例如，1，2-苯二硫醇，2-巰基苯酚或1，2-苯二醇可與R6R7C(L’)2，其中L’如下定義，優(yōu)選Br或I，在堿如氫氧化物存在下反應，或與R6R7C＝O在酸如甲苯磺酸或P2O5存在下反應，制成下式表示的取代的苯并稠合雜環(huán)，
然后被磺酰化成上述磺酸。例如，CF2Br2或CD2Br2與1，2-苯二硫醇，2-巰基苯酚或1，2-苯二醇在堿存在下反應，分別生成下式化合物，
其中A和B是O或S，而D是氘原子。還有，當A和/或B代表S時，可用下述方法將硫氧化成砜或亞砜衍生物。
制備完磺酰胺衍生物之后，在不影響分子剩余部分的條件下除去氨基保護基P或P1和P2氨基保護基。所用方法是本領域已知的，包括酸性水解，氫解等等。優(yōu)選方法涉及除去保護基如除去芐氧羰基，是用鈀炭在適當溶劑系統(tǒng)如醇，乙酸等或它們的混合物中進行氫解反應。如果保護基是叔丁氧羰基，則可用無機或有機酸如HCl或三氟乙酸，在適當溶劑系統(tǒng)如二噁烷或二氯甲烷中除去，所得產物是胺鹽衍生物。
在上述鹽的中和反應之后將該胺與砜/亞砜烷?；衔锘蚱涔鈱W異構體(例如基團-CH(R1)-是R和S構型)，對應于下式，
其中n，t和R5定義如上，L是離去基團如鹵化物，酸酐，活化酯等?；蛘撸?亞砜烷?；衔锘蚱涔鈱W異構體可以被偶合成保護的胺，
接著進行脫保護，并偶合于R4SO2X，其中X是Cl或Br，以及P’，R2，R3和R4定義如上。
對于n是1的砜/亞砜烷?；衔锟梢杂眠~克爾加成方法通過式R5SH硫醇與下式取代的異丁烯酸酯反應制成。
這種取代的異丁烯酸酯是商品或可用本領域已知的標準方法很容易地從商品化的起始原料制備。邁克爾加成法是在適當溶劑中和在適當堿存在下進行，生成下式表示的相應的硫醇衍生物，
其中P3，R1和R5定義如上。在邁克爾加成法中所用的適當溶劑包括醇，例如甲醇，乙醇，丁醇等，以及醚如THF和乙腈，DMF，DMSO等，并包括它們的混合物。適當?shù)膲A包括I族金屬醇鹽，如甲醇鈉，乙醇鈉，丁醇鈉等，以及I族金屬氫化物，如氫化鈉，和它們的混合物。通過在適當溶劑中用適當氧化劑氧化硫醇衍生物，將硫醇衍生物轉化成相應的砜或亞砜。
適當?shù)难趸瘎┌ǎ?，過氧化氫，偏過硼酸鈉，過硫酸氫鉀制劑(過氧一硫酸鉀)，偏氯過氧基苯甲酸，高碘酸等，還包括它們的混合物。適當?shù)娜軇┌ㄒ宜?針對偏過硼酸鈉)，對其它過酸，用醚如THF和二噁烷，以及乙腈，DMF等，還包括它們的混合物。
用適當?shù)膲A如氫氧化鋰，氫氧化鈉等，包括它們的混合物，在適當溶劑如THF，乙腈，DMF，DMSO，二氯甲烷等，包括它們的混合物中，將砜/亞砜轉化成相應的下式表示的游離酸。
然后可以將該游離酸轉化成砜/亞砜烷?；衔?，
其中n，t和R5定義如上，L是離去基團如鹵化物，酸酐，活化酯等?；蛘撸帽绢I域已知方法，例如通過形成非對映體鹽或酯，并結晶或色譜分離，將該游離酸拆分成其光學異構體(例如基團-CH(R1)-是R和S構型)，然后將其轉化成砜/亞砜烷酰基化合物。
或者，分別將下式表示的硫醚或相應的保護的硫醇
其中n，L，R1和R5定義如上，偶合成下列胺之一，
接著轉化成本發(fā)明蛋白酶抑制劑。P4是硫保護基，如乙?；郊柞；取Ｒ阴；捅郊柞；梢酝ㄟ^用無機堿或胺，優(yōu)選氨，在適當?shù)娜軇┤缂状迹掖?，異丙醇，甲苯或四氫呋喃中處理除去。?yōu)選的溶劑是甲醇。
例如，可以將商品化的酸
偶合于下列胺之一，
然后將硫基脫乙?；?，用適當?shù)膲A如氫氧化物，或胺如氨進行水解，然后將所得硫醇與R5L’化學劑反應，其中R5和L’定義如上，得到有下列結構之一的化合物，
或它們的特定非對映異構體。然后，可以用適當?shù)难趸瘎?如上所述)將硫氧化成相應的砜或亞砜，制得所需的中間體。經過進一步反應或直接制成磺酰胺抑制劑?；蛘撸瑢⒃撍峄騊3保護的酸脫乙?；cR5L’化學劑反應，脫保護及用適當?shù)难趸瘎?如上所述)氧化成相應的砜或亞砜，得到有下式化合物，
其中t和R5定義如上。然后可將這種砜/亞砜羧酸偶合于上述胺中間體，通過進一步反應制成磺酰胺抑制劑，或偶合成磺酰胺胺化物，直接生成磺酰胺抑制劑。R5L’化學劑中的L’是離去基團，如鹵化物(氯化物，溴化物，碘化物)，甲磺酸酯，甲苯磺酸酯，三氟甲磺酸酯。硫醇與R5L’的反應在適當堿如三乙胺，二異丙基乙胺，1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(DBu)等存在下，在適當溶劑如甲苯，四氫呋喃或二氯甲烷中進行。優(yōu)選的堿是DBU，優(yōu)選的溶劑是甲苯。如果R5是甲基，則R5L’可以是甲基氯，甲基溴，甲基碘或硫酸二甲酯，優(yōu)選甲基碘。
或者，下式表示的取代的異丁烯酸酯
其中L’是前面定義的離去基團，P3定義如上，R10代表能在雙鍵還原反應后可生成R1的殘基，與R5SM反應，然后如上所述進行氧化反應，或與適當磺?；瘎┤缡絉5SO2M表示的亞磺酸進行反應，其中R5定義如上，M代表適于形成該酸的鹽如鈉鹽的金屬，制成下式表示的相應的的砜，
其中P3，R5和R’10定義如上。然后將該砜脫保護，形成相應的羧酸。例如，如果P3是叔丁基，則可以用酸如鹽酸或三氟乙酸處理將其除去。優(yōu)選的方法是用4N鹽酸的二噁烷。
然后用不對稱氫化催化劑如釕-BINAP復合物的不對稱氫化所得羧酸，生成下式之一代表基本純的所要異構體還原產物，
其中R1和R5定義如上。如果更活潑的異構體為R-立體化學結構，可用Ru(R-BINAP)不對稱氫化催化劑。如果更活潑的異構體為S-立體化學結構，可用Ru(S-BINAP)不對稱氫化催化劑。如果兩種異構體都是活潑的，或希望得到兩種非對映體的混合物，則可用氫化催化劑如鉑或鈀炭來還原上述化合物。然后如上所述將還原的化合物偶合于胺。
上述化學反應一般是公開了它們對制備本發(fā)明化合物最廣泛的應用。但反應也可能偶然不適用于本公開范圍內的每個化合物。對于發(fā)生這種情況的化合物本領域技術人員應該很容易理解。在所有這類情況中，本領域技術人員既可以進行常規(guī)的修改而成功地完成反應，例如，通過對干擾基團進行適當?shù)谋Ｗo，通過改用另一種常用試劑，或通過修改反應條件等等，也可以用這里公開的其它反應或常規(guī)反應來制備本發(fā)明相應的化合物。在所有制備方法中，所有起始原料都是已知的或很容易用已知原料制成。
無需進一步解釋，相信每一個本領域技術人員都可以根據(jù)前面的說明最大限度的利用本發(fā)明。因此，下面優(yōu)選的具體實例僅僅是為了說明本發(fā)明而不以任何方式限制公開的范圍。
所有所用的試劑都無需純化。所有質子和碳NMR譜都是在VarianVXR-300或VXR-400核磁共振譜儀上獲得的。
下列實施例將說明制備本發(fā)明抑制劑化合物的方法和用于本發(fā)明抑制劑化合物制備的中間體。
實施例1
2S-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇的制備方法1通過N，N-雙(苯基甲基)-L-苯丙氨酸苯基甲酯的DIBAL還原反應制備2S-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇步驟1將L-苯丙氨酸(50.0g，0.302moL)，氫氧化鈉(24.2g，0.605mol)和碳酸鉀(83.6g，0.605mol)的水溶液(500mL)加熱到97℃。然后緩慢加入芐基溴(108.5mL，0.605mol)(添加時間約為25min)。將混合物在氮氣下和97℃攪拌30分鐘。將溶液冷卻到室溫并用甲苯(2×250mL)萃取。合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮成油。用下述方法確定產物的性質。TLC分析(10％乙酸乙酯/己烷，硅膠)表明主要部分的Rf值＝0.32，是所要的三芐基化的化合物N，N-雙(苯基甲基)-L-苯丙氨酸苯基甲酯。該化合物可用柱色譜(硅膠，15％乙酸乙酯/己烷)純化。通常該產物已經純到無需進一步純化即可直接用于下步反應。1H NMR譜數(shù)據(jù)與文獻發(fā)表的一致。1H NMR(CDCL3)，3.00和3.14(ABX-system，2H，JAB＝14.1Hz，JAX＝7.3Hz和JBX＝5.9Hz)，3.54和3.92(AB-System，4H，JAB＝13.9Hz)，3.71(t，1H，J＝7.6Hz)，5.11和5.23(AB-System，2H，JAB＝12.3Hz)，和7.18(m，20H).EIMSm/z434(M-1).
步驟2將上步反應得到的芐基化苯丙氨酸苯基甲酯(0.302mol)溶解于甲苯(750mL)，并冷卻至-55℃。以保持溫度在-55--50℃的速率加入1.5MDIBAL的甲苯(443.9mL，0.666mol)溶液(添加時間約為1br)。將混合物在氮氣下攪拌20分鐘，然后慢慢加入甲醇(37mL)將反應淬滅在-55℃。將該冷溶液倒入冷(5℃)1.5N HCl溶液(1.8L)。濾出沉淀的固體(約138g)用甲苯洗滌。將所得固體懸浮于甲苯(400mL)和水(100mL)的混合物。將混合物冷卻至5℃，并用2.5N NaOH(186mL)處理，然后在室溫攪拌直至固體溶解。從水相中分離出甲苯層，用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮至75mL(89g)。在剩余物中加入乙酸乙酯(25mL)和己烷(25mL)使所要的醇產物開始結晶。30min后，再加入50mL己烷促進結晶。濾出固體并用50mL己烷洗滌，得到34.9g第一批產物。通過重新過濾母液分離出第二批產物(5.6g)。將兩批產物合并，并從乙酸乙酯(20mL)和己烷(30mL)重結晶，得到40gβS-2-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇，從L-苯丙氨酸算起產率是40％。從濃縮的母液重結晶可以得到另外7g(7％)產物。產物的TLC分析結果，Rf＝0.23(10％乙酸乙酯/己烷，硅膠)；1H NMR(CDCL3)2.44(m，1H，)，3.09(m，2H)，3.33(m，1H)，3.48和3.92(AB-System，4H，JAB＝13.3Hz)，3.52(m，1H)和7.23(m，15H)；[α]D25+42.4(c1.45，CH2Cl2)；DSC 77.67℃；元素分析C23H25ON，理論值C，83.34；H，7.60；N，4.23；實測值C，83.43；H，7.59；N，4.22。
在手性固定相上的HPLCCyclobond I SP柱(250×4.6mmI.D.)，流動相pH4.2的甲醇/三乙基乙酸銨緩沖液(5842，v/v)，流速0.5ml/min，用檢測器在230nm和0℃檢測。保留時間11.25min，所需產品對映體保留時間12.5min。
方法2通過L-苯丙氨醇的N，N-二芐基化反應制備βS-2-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇將L-苯丙氨酸(176.6g，1.168mol)加到攪拌的碳酸鉀(484.6g，3.506mol)的水溶液(710mL)中。在氮氣下將混合物加熱到65℃。然后以保持溫度在60-68℃的速度加入芐基溴(400g，2.339mol)的3A乙醇(305mL)溶液。將此兩相溶液在65℃攪拌55min，然后在劇烈攪拌的同時將其冷卻到10℃。用2.0L自來水稀釋產物并攪拌5分鐘，使產物中的無機物溶解。通過減壓過濾分離產物，用水洗滌直到pH為7。將所得粗產物在空氣中干燥過夜，得到半干的固體(407g)，再從1.1L乙酸乙酯/庚烷(體積為1∶10)重結晶。產物在-8℃經過濾分離，然后用1.6L冷(-10℃)乙酸乙酯/庚烷(體積為1∶10)洗滌，空氣干燥，得到339g(產率88％)βS-2-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇，m.p.＝71.5-73.0℃。如果需要，可以從母液得到更多產物。其特性分析與方法1制備的化合物一致。
實施例2
2S-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛的制備方法1將2S-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇(200g，0.604mol)溶解于三乙胺(300mL，2.15mol)。將混合物冷卻至12℃，并以保持溫度在8-17℃的速度加入三氧化硫/吡啶復合物(380g，2.39mol)的DMSO(1.6L)溶液(添加時間約為1.0hr)。將溶液在室溫和氮氣下攪拌1.5小時，這時用TLC分析(33％乙酸乙酯/己烷，硅膠)反應已完成。用冰水冷卻反應混合物，用1.6L冷水(10-15℃)淬滅45分鐘。所得溶液用乙酸乙酯(2.0L)萃取，5％檸檬酸(2.0L)和鹽水(2.2L)洗滌，MgSO4(280g)干燥并過濾。在35-40℃的旋轉蒸發(fā)器中除去溶劑，然后真空干燥，得到198.8g 2S-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛為淺黃色油(99.9％)。所得粗產物已足夠純，無需進一步純化即可用于下一步反應。該化合物的分析數(shù)據(jù)與文獻發(fā)表的相符。[α]D25＝-92.9°(c1.87，CH2Cl2)；1H NMR(400MHz，CDCl3)，2.94和3.15(ABX-System，2H，JAB＝13.9Hz，JAX＝7.3Hz和JBX＝6.2Hz)，3.56(t，1H，7.1Hz)，3.69和3.82(AB-System，4H，JAB＝13.7Hz)，7.25(m，15H)和9.72(s，1H)；HRMS(M+1)C23H24NO，計算值330.450；實測值330.1836.
元素分析C23H23ON，理論值C，83.86；H，7.04；N，4.25；實測值C，83.64；H，7.42；N，4.19。
在手性固定相上的HPLC(S，S)Pirkle-Whelk-O 1柱(250×4.6mm I.D.)，流動相己烷/異丙醇(99.5∶0.5，v/v)，流速1.5ml/min，用UV檢測器在210nm檢測。S-異構體的保留時間8.75min.，R-對映體的保留時間10.62min.。
方法2將草酰氯(8.4mL，0.096mol)的二氯甲烷(240mL)溶液冷卻到-74℃，然后以保持溫度在-74℃的速度緩慢加入DMSO(12.0mL，0.155mol)的二氯甲烷(50mL)溶液(添加時間約為1.25hr)。將混合物攪拌5分鐘，然后加入βS-2-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇(0.074mol)的100mL二氯甲烷溶液(添加時間約為20分鐘，溫度-75--68℃)。將所得溶液在-78℃和氮氣下攪拌35分鐘，然后用10min加入三乙胺(41.2mL，0.295mol)(溫度-78--68℃)，其間銨鹽沉淀。將冷混合物攪拌30min，然后加水(225mL)。從水相中分離出二氯甲烷層，先后用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。剩余物用乙酸乙酯和己烷稀釋，然后過濾進一步除去銨鹽。將濾液濃縮得到αS-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛，無需進一步純化即可用于下步反應。
方法3在βS-2-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇(1.0g，3.0mmoL)，N-甲基嗎啉(0.531g，4.53mmol)，2.27g分子篩(4A)和9.1mL乙腈混合物中加入四丙基過釕酸銨(TPAP，53mg，0.15mmol)。將混合物在室溫攪拌40分鐘，然后減壓濃縮將剩余物懸浮于15mL乙酸乙酯，用硅膠板過濾。減壓濃縮濾液，得到含接近50％的αS-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛為淺黃色油。
方法4在βS-2-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醇(1.0g，3.02mmol)的9.0mL甲苯溶液中加入2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基(4.69mg，0.03mmol)，游離基(TEMPO)，溴化鈉(0.32g，3.11mmol)，9.0mL乙酸乙酯和1.5mL水。將混合物冷卻到0℃，并用25分鐘緩慢加入2.87mL含碳酸氫鈉(0.735g，8.75mmol)的5％家用漂白粉水溶液和8.53mL水。將混合物在0℃攪拌60分鐘，再添加兩次漂白粉(每次1.44mL)，然后攪拌10分鐘。用20mL(每次)乙酸乙酯萃取水相兩次。合并的有機相依次用含有25mg碘化鉀的4.0mL溶液，4.0mL水，20mL 10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水溶液洗滌。用硫酸鎂干燥有機溶液，過濾并減壓濃縮，得到1.34g含有少量所需醛產物αS-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛的粗油。
方法5按照本實施例方法1所述相同方法，只是使用了3.0當量的三氧化硫吡啶復合物，可以相近的產率分離出αS-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛。
實施例3
N，N-二芐基-3-(S)-氨基-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷的制備方法1將αS-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛(191.7g，0.58mol)和氯碘甲烷(56.4mL，0.77mol)的四氫呋喃(1.8L)溶液在充有氮氣的不銹鋼反應器中冷卻到-30--35℃(也可以冷卻到更冷的溫度如-70℃，但溫度高一些更容易實現(xiàn)大規(guī)模生產)。然后，以保持溫度在-25℃以下的速度加入正丁基鋰的己烷溶液(1.6M，365mL，0.58mol)，之后，將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。用以下方式添加其它試劑(1)在25℃以下加入氯碘甲烷(17mL)，然后加入正丁基鋰(110mL)。添加完后將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。重復上述過程一次。(2)在25℃以下加入氯碘甲烷(8.5mL，0.11mol)，然后加入正丁基鋰(55mL，0.088mol)。添加完后將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。重復上述過程5次。(3)在25℃以下加入氯碘甲烷(8.5mL，0.11moL)，然后加入正丁基鋰(37mL，0.059mol)。添加完后將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。重復上述過程一次。停止外部冷卻，用4-16小時使混合物升至室溫，直到TLC(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)指示反應已完成。將反應混合物冷卻到10℃，用1452g16％氯化銨溶液(將232g氯化銨溶解于1220mL水中制成)淬滅，保持溫度在23℃以下。將混合物攪拌10分鐘，分離有機相和水相。用乙酸乙酯(2×500mL)萃取水相。將乙酸乙酯層與四氫呋喃層合并。合并的溶液用硫酸鎂(220g)干燥，過濾，并在65℃的旋轉蒸發(fā)器中濃縮。將棕色油狀殘余物在70℃真空(0.8bar)干燥1hr，得到222.8g粗產物。(該粗產物的重量大于100％，由于該產物在硅膠上相對不穩(wěn)定，所以，該粗產物通常被直接用于下步反應而無需純化)。用質子NMR測定該粗混合物的非對映體之比為(2S)/(2R)＝86∶14。混合物中少和多的兩部分非對映體的特性用TLC(硅膠，10％乙酸乙酯/己烷)進行分析，得到Rf分別為0.29和0.32。每種非對映體的分析樣品經硅膠色譜(3％乙酸乙酯/己烷)純化得到，并分析如下N，N，αS-三(苯基甲基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺1H NMR(400MHz，CDCl3)2.49和2.51(AB-System，1H，JAB＝2.82)，2.76和2.77(AB-System，1H，JAB＝4.03)，2.83(m，2H)，2.99 & 3.03(AB-System，1H，JAB＝10.1Hz)，3.15(m，1H)，3.73 & 3.84(AB-System，4H，JAB＝14.00)，7.21(m，15H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)139.55，129.45，128.42，128.14，128.09，126.84，125.97，60.32，54.23，52.13，45.99，33.76；HRMS(M+1)C24H26NO，計算值344.477；實測值344.2003。
N，N，αS-三(苯基甲基)-2R-環(huán)氧乙烷甲胺1H NMR(300MHz，CDCl3)2.20(m，1H)，2.59(m，1H)，2.75(m，2H)，2.97(m，1H)，3.14(m，1H)，3.85(AB-System，4H)，7.25 (m，15H).
在手性固定相上的HPLCPirkle-Whelk-O 1柱(250×4.6mmI.D.)，流動相己烷/異丙醇(99.5∶0.5，v/v)，流速1.5ml/min，用UV檢測器在210nm檢測。(8)的保留時間9.38min.，對映體(4)的保留時間13.75min.。
方法2氮氣下將0.074mol粗醛和氯碘甲烷(7.0mL，0.096mol)的四氫呋喃(285mL)溶液冷卻到-78℃，然后以保持溫度在-75℃的速度加入1.6M正丁基鋰的己烷溶液(25mL，0.040mol)(添加時間約為15min)。第一次添加之后再加入氯碘甲烷(1.6mL，0.022mol)，接著加入正丁基鋰(23mL，0.037mol)，并保持溫度在-75℃。將混合物攪拌15min。在-75℃用45分鐘將每種試劑分4次以上添加，所說試劑為氯碘甲烷(0.70mL，0.010mol)和正丁基鋰(5mL，0.008moL)。除去冷卻浴，用1.5hr使溶液升至22℃。將混合物倒入300mL飽和氯化銨水溶液。分離四氫呋喃相。水相用乙酸乙酯(1×300mL)萃取。合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到棕色油(27.4g)。該產物無需純化即可用于下步反應。所需的非對映體可在適當?shù)牟襟E通過重結晶純化。該產物也可經色譜法純化。
方法3將αS-[雙(苯基甲基)氨基]苯丙醛(178.84g，0.54mol)和溴氯甲烷(46mL，0.71mol)的四氫呋喃(1.8L)溶液在充有氮氣的不銹鋼反應器中冷卻到-30--35℃(也可以冷卻到更冷的溫度如-70℃，但溫度高一些更容易實現(xiàn)大規(guī)模生產)。然后，以保持溫度在-25℃以下的速度加入正丁基鋰的己烷溶液(1.6M，340mL，0.54mol)，之后，將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。用以下方式添加其它試劑(1)在25℃以下加入溴氯甲烷(14mL)，然后加入正丁基鋰(102mL)。添加完后將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。重復上述過程一次。(2)在25℃以下加入溴氯甲烷(7mL，0.11mol)，然后加入正丁基鋰(51mL，0.082mol)。添加完后將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。重復上述過程5次。(3)在25℃以下加入溴氯甲烷(7mL，0.11mol)，然后加入正丁基鋰(51mL，0.082moL)。添加完后將混合物在-30--35℃攪拌10分鐘。重復上述過程一次。停止外部冷卻，用4-16小時使混合物升至室溫，直到TLC(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)指示反應已完成。將反應混合物冷卻到10℃，用1452g 16％氯化銨溶液(將232g氯化銨溶解于1220mL水中制成)淬滅，保持溫度在23℃以下。將混合物攪拌10分鐘，分離有機相和水相。用乙酸乙酯(2×500mL)萃取水相。將乙酸乙酯層與四氫呋喃層合并。合并的溶液用硫酸鎂(220g)干燥，過濾，并在65℃的旋轉蒸發(fā)器中濃縮。將棕色油狀殘余物在70℃真空(0.8bar)干燥1hr，得到222.8g粗產物。
方法4按照本實施例方法3所述同樣的方法進行，只是反應溫度改為-20℃。所得N，N，αS-三(苯基甲基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺是純度比方法3的小些的非對映體混合物。
方法5按照本實施例方法3所述同樣的方法進行，只是反應溫度改為-70--78℃。所得N，N，αS-三(苯基甲基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺是非對映體混合物，它無需純化即可直接用于下步反應。
方法6按照本實施例方法3所述同樣的方法進行，只是連續(xù)添加溴氯甲烷和正丁基鋰是在-30--35℃進行。按照實施例方法3所述進行反應和處理之后，以相似的產率和純度分離出所要的N，N，αS-三(苯基甲基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺。
方法7按照本實施例方法2所述同樣的方法進行，只是用二溴甲烷代替氯碘甲烷。按照實施例方法2所述進行反應和處理之后，分離出所要的N，N，αS-三(苯基甲基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺。
實施例4
N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基4-苯基丁基]-N-異丁胺的制備用2min時間在粗N，N-二芐基-3(S)-氨基-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(388.5g，1.13mol)的異丙醇(2.7L)(或乙酸乙酯)溶液中加入異丁胺(1.7kg，23.1mol)，反應溫度從25℃升至30℃。將溶液加熱到82℃，并在此溫度攪拌1.5小時。將溫溶液在65℃減壓濃縮。將棕色油狀剩余物轉移到一個3L燒瓶中，并真空(0.8mmHg)干燥16h，得到450g 3S-[N，N-二(苯基甲基)氨基-4-苯基丁-2R-醇的粗油。
所需主要非對映體產物的分析樣品是通過用硅膠色譜(40％乙酸乙酯/己烷)純化少量粗產物樣品得到的。TLC分析硅膠，40％乙酸乙酯/己烷；Rf＝0.28；HPLC分析ultrasphere ODS柱，25％三乙氨基-/磷酸鹽緩沖液pH 3-乙腈，流速1mL/min，UV檢測器；保留時間7.49min；HRMS分析C28H27N2O(M+1)，計算值417.616，實測值417.2887。少數(shù)非對映體產物3S-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2S-醇的分析樣品也是通過用硅膠色譜(40％乙酸乙酯/己烷)純化少量粗產物樣品得到的。
實施例5
N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·草酸鹽的制備用15分鐘時間在草酸(8.08g，89.72mmol)的甲醇(76mL)溶液中加入粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇{39.68g，含有約25.44g(61.06mmol)的3(S)，2(R)異構體和約4.49g(10.78mmol)的3(S)，2(S)異構體}的乙酸乙酯(90mL)溶液。將混合物在室溫攪拌約2小時。通過過濾分離出固體，用乙酸乙酯(2×20mL)洗滌，真空干燥約1小時，得到21.86g(異構體回收率為70.7％)97％非對映體純鹽(根據(jù)HPLC峰面積)。HPLC分析Vydec-肽/蛋白質C18柱，UV檢測器254nm，流速2mL/min，梯度{A＝0.05％三氟乙酸的水，B＝0.05％三氟乙酸的乙腈，0min.75％A/25％B，30min.10％A/90％B，35min.10％A/90％B，37min.75％A/25％B}；保留時間10.68min.(3(S)，2(R)異構體)和9.73min.(3(S)，2(S)異構體)。m.p.174.99℃。微量分析計算值C71.05％，H7.50％，N5.53％；實測值C71.71％，H7.75％，N5.39％。
或者，將草酸二水合物(119g，0.94mol)加到帶有機械攪拌器和滴加漏斗的5000mL圓底燒瓶中。加入甲醇(1000mL)，攪拌混合物直到其完全溶解。用20分鐘時間加入粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇的乙酸乙酯溶液(1800mL，0.212g氨基醇異構體/mL，0.9160mol)。將混合物攪拌18小時，然后分6批以400G離心，分離出固體產物。每一批用125mL乙酸乙酯洗滌。然后收集該鹽，在1托(壓力)下干燥過夜，得到336.3g產物(氨基醇總量的71％)。HPLC/MS(電噴)分析結果與所要產物的一致(m/z417[M+H]+)。
或者，將粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇(5g)溶解于甲基-叔丁醚(MTBE)(10mL)，并加入草酸(1g)的甲醇(4mL)。將混合物攪拌約2小時。濾出產生的固體，用冷MTBE洗滌并干燥，得到2.1g白色固體，非對映體含量約為98.9％(根據(jù)HPLC峰面積)。
實施例6N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·乙酸鹽的制備在粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇的甲基-叔丁醚(MTBE)(45mL，1.1g氨基醇異構體/mL)溶液中滴加乙酸(6.9mL)。將混合物在室溫攪拌約1小時。真空除去溶劑，得到85％非對映體純度的棕色油(根據(jù)HPLC峰面積)。將棕色油按以下方法結晶將0.2g油溶解于加熱著的第一種溶劑，得到清澈溶液，再加入第二種溶劑直到溶液變得渾濁，再將混合物加熱直到清澈，加入約99％純度的非對映體晶種，然后將混合物冷卻到室溫，并放入冰箱過夜。濾出晶體，用第二種溶劑洗滌并干燥。根據(jù)HPLC的峰面積計算晶體的非對映體純度，結果列于表1.表1
或者，將粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇(50.0g，含有約30.06g(76.95mmol)3(S)，2(R)異構體和約5.66g(13.58mmol)3(S)，2(S)異構體)溶解于甲基-叔丁醚(45.0mL)。在所得溶液中用約10min.加入乙酸(6.90mL，120.6mmol)。將混合物在室溫攪拌約1小時，然后減壓濃縮。通過在甲基-叔丁醚(32mL)和庚烷(32omL)中重結晶純化油狀剩余物。濾出產生的固體，用冷庚烷洗滌并真空干燥1小時，得到21.34g(異構體回收率為58.2％)96％非對映體純度的單乙酸鹽(根據(jù)HPLC峰面積)。m.p.105-106℃。微量分析計算值C75.53％，H8.39％，N5.87％；實測值C75.05％，H8.75％，N5.71％。
實施例7N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·L-酒石酸鹽的制備將粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇(10.48g，含有約6.72g(16.13mmol)3(S)，2(R)異構體和約1.19g(2.85mmol)3(S)，2(S)異構體)溶解于四氫呋喃(10.0mL)。在所得溶液中用約5min.加入L-酒石酸(2.85g，19mmol)的甲醇(5.0mL)溶液。將混合物在室溫攪拌約10min.，然后減壓濃縮。將甲基-叔丁醚(20.0mL)加到油狀剩余物中，并將混合物在室溫攪拌約1小時。濾出產生的固體，得到7.50g粗鹽。在室溫下通過從乙酸乙酯和庚烷重結晶純化粗鹽，得到4.13g(異構體回收率為45.2％) 95％非對映體純度的L-酒石酸鹽(根據(jù)HPLC峰面積)。微量分析計算值C67.76％，H7.41％，N4.94％；實測值C70.06％，H7.47％，N5.07％。
實施例8N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·二鹽酸鹽的制備將粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇(10.0g，含有約6.41g(15.39mmol)3(S)，2(R)異構體和約1.13g(2.72mmol)3(S)，2(S)異構體)溶解于四氫呋喃(20.0mL)。在所得溶液中用約5min。加入鹽酸(20mL，6.0N)。將混合物在室溫攪拌約1小時并減壓濃縮。剩余物在0℃從乙醇重結晶，得到3.20g(異構體回收率為42.7％)98％非對映體純度的二鹽酸鹽(根據(jù)HPLC峰面積)。微量分析計算值C68.64％，H7.76％，N5.72％；實測值C68.79％，H8.07％，N5.55％。
實施例9N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·甲苯磺酸鹽的制備將粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇(5.0g，含有約3.18g(7.63mmol)3(S)，2(R)異構體和約0.56g(1.35mmol)3(S)，2(S)異構體)溶解于甲基-叔丁醚(10.0mL)。在所得溶液中用約5min。加入甲苯磺酸(2.28g，12mmol)的甲基-叔丁醚(2.0mL)溶液。將混合物在室溫攪拌約2小時并減壓濃縮。剩余物在0℃從叔丁醚和庚烷重結晶，過濾，用冷庚烷洗滌并真空干燥，得到1.85g(異構體回收率為40.0％)97％非對映體純度的單甲苯磺酸鹽(根據(jù)HPLC峰面積)。
實施例10N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·甲磺酸鹽的制備將粗3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2(R)-醇(10.68g，含有約6.85g(16.44mmol)3(S)，2(R)異構體和約1.21g(2.90mmol)3(S)，2(S)異構體)溶解于四氫呋喃(10.0mL)。在所得溶液中加入甲磺酸(1.25mL，19.26mmol)。將混合物在室溫攪拌約2小時并減壓濃縮。油狀剩余物在0℃從甲醇和水重結晶，過濾，用冷庚烷甲醇/水洗滌并真空干燥，得到2.40g(異構體回收率為28.5％)98％非對映體純度的單甲磺酸鹽(根據(jù)HPLC峰面積)。
實施例11N-芐基-L-苯丙氨醇的制備方法1在惰性氣體中將L-苯丙氨醇(89.51g，0.592mol)溶解于375mL甲醇，然后加入35.52g(0.592mol)冰醋酸和50mL甲醇，再加入62.83g(0.592mol)苯甲醛的100mL甲醇。將混合物冷卻到約15℃，在約40分鐘后加入134.6g(2.14mol)氰基硼氫化鈉的700mL甲醇，并且保持溫度在15-25℃之間。將混合物在室溫攪拌18小時。減壓濃縮混合物，并將其在1L 2M氫氧化銨溶液和2L乙醚之間分配。乙醚相依次用1L1M氫氧化銨溶液，500mL水(×2)和500mL鹽水洗滌，并用硫酸鎂干燥1小時。過濾乙醚相，減壓濃縮，粗產物在110mL乙酸乙酯和1.3L己烷中重結晶，得到115g(產率81％)N-芐基-L-苯丙氨醇為白色固體。
方法2將L-苯丙氨醇(5g，33mmol)和3.59g(33.83mmol)苯甲醛溶解于充有惰性氣體的Parr振動器中的55mL的3A乙醇，并將混合物升溫至60℃2.7小時。將混合物冷卻到約25℃，加入0.99g 5％鈀炭，然后將混合物在60psi氫氣中和40℃氫化10小時。濾出晶體，減壓濃縮產物，粗固體產物從150mL庚烷重結晶，得到3.83g(產率48％)N-芐基L-苯丙氨醇為白色固體。
實施例12N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醇的制備將N-芐基-L-苯丙氨醇(2.9g，12mmol)溶解于3mL三乙胺，并加入27mL甲醇和5.25g(24.1mmol)二碳酸二叔丁酯。將混合物升溫至60℃35分鐘，然后減壓濃縮。將剩余物溶解于150mL乙酸乙酯，依次用10mL冷的(0-5℃)稀鹽酸(pH2.5-3，兩次)，15mL水和10mL鹽酸洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。將產生的粗油經硅膠色譜(乙酸乙酯∶己烷，12∶3為洗脫劑)純化，得到3.98g(97％產率)無色油。
實施例13
N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醛(phenylalaninal)的制備方法1在0.32g(0.94mmol)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醇的2.8mL甲苯溶液中加入2.4mg(0.015mmol)2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基，游離基(TEMPO)，0.1g(0.97mmol)溴化鈉，2.8mL乙酸乙酯和0.34mL水。將混合物冷卻到0℃，并用30分鐘慢慢加入4.2mL含0.23g(3.0mL，2.738mmol)碳酸氫鈉的5％家用漂白粉。將混合物在0℃攪拌10分鐘。再分三次(每次0.4mL)加入漂白粉，并在每次添加后攪拌10分鐘以消耗掉全部原料。允許將兩相混合物分離。水相用8mL甲苯萃取兩次。合并的有機相依次用1.25mL含0.075g碘化鉀，硫酸氫鈉(0.125g)和水(1.1mL)的溶液，1.25mL 10％硫代硫酸鈉水溶液，1.25mL pH7的磷酸鹽緩沖液和1.5mL鹽水溶液洗滌。有機溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮，得到0.32g(產率100％)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醛。
方法2在10℃向2.38g(6.98mmol)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醇的3.8mL(27.2mmol)三乙胺溶液中加入4.33g(27.2mmol)三氧化硫吡啶復合物的17mL二甲亞砜。將混合物升至室溫并攪拌1小時。加水(16mL)并用20mL乙酸乙酯萃取混合物。有機相依次用20mL5％檸檬酸，20mL水和20mL鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并過濾。減壓濃縮濾液得到2.37g(產率100％)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醛。
實施例14
3(S)-[N-(叔丁氧羰基)-N-芐基氨基]-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷的制備方法1將2.5g(7.37mmol)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醛和0.72mL氯碘甲烷的35mL THF溶液冷卻到-78℃。慢慢加入4.64mL正丁基鋰(1.6M于己烷，7.42mmol)，同時保持溫度在-70℃以下。在-70--75℃攪拌混合物10分鐘。依次加入兩批0.22mL氯碘甲烷和1.4mL正丁基鋰，并在每次添加后在-70--75℃攪拌10分鐘。再依次加入四批0.11mL氯碘甲烷和0.7mL正丁基鋰，并在每次添加后在-70--75℃攪拌10分鐘。將混合物升至室溫3.5小時。在5℃用24mL冰冷的水使產物驟冷。分離兩相，水相用30mL乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機相用10mL水洗滌三次，然后用10mL鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮，得到2.8g黃色粗油。該粗油(產率＞100％)為非對映體環(huán)氧化物N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺和N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2R-環(huán)氧乙烷甲胺的混合物。該粗混合物無需純化即可直接用于下步反應。
方法2在2.92g(13.28mmol)三甲基氧化锍碘化物的45mL乙腈懸浮液中加入1.49g(13.28mmol)叔丁醇鉀，再加入3.0g(8.85mmol)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醛的18mL乙腈，并將混合物在室溫攪拌1小時?；旌衔镉?50mL水稀釋并用200mL乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機相依次用100mL水和50mL鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮，得到3.0g黃色粗油。將粗產物經硅膠色譜(乙酸乙酯/己烷1∶8作為洗脫劑)純化，得到1.02g(產率32.7％)兩種非對映體N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺和N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2R-環(huán)氧乙烷甲胺的混合物。
方法3在0.90g(4.42mmol)三甲基碘化锍的18mL乙腈懸浮液中加入0.495g(4.42mmol)叔丁醇鉀，再加入1.0g(2.95mmol)N-(叔丁氧羰基)-N-芐基-L-苯丙氨醛的7mL乙腈，并將混合物在室溫攪拌1小時?；旌衔镉?0mL水稀釋并用80mL乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機相依次用100mL水和30mL鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮，得到1.04g黃色粗油。將粗產物是兩種非對映體N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺和N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2R-環(huán)氧乙烷甲胺的混合物。
實施例15
3S-[N-(叔丁氧羰基)-N-(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2R-醇的制備在500mg(1.42mmol)粗環(huán)氧化物(兩種非對映體N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺和N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2R-環(huán)氧乙烷甲胺的混合物)的0.98mL異丙醇溶液中加入0.71mL(7.14mmol)異丁胺。將混合物加熱至回流，在85-90℃回流1.5小時。減壓濃縮混合物，產生的油經硅膠色譜(氯仿∶甲醇，100∶6作為洗脫劑)純化，得到330mg 3S-[N-(叔丁氧羰基)-N-(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2R-醇為無色油(產率54.5％)，同時分離出3S-[N-(叔丁氧羰基)-N-(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2S-醇。如果用純的N，αS-二(苯基甲基)-N-(叔丁氧羰基)-2S-環(huán)氧乙烷甲胺作原料，色譜純化之后可以86％產率分離出3S-[N-(叔丁氧羰基)-N-(苯基甲基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2R-醇。
實施例16
3S-(N-叔丁氧羰基)氨基-4-苯基丁-1，2R-二醇的制備在0℃向1g(3.39mmol)2S-(N-叔丁氧羰基)氨基-1S-羥基-3-苯基丁酸(Nippon Kayaku，Japan的商品)的50mL THF溶液中加入50mL硼烷-THF復合物(液體，1.0M于THF)，同時保持溫度在5℃以下。將反應混合物升至室溫并攪拌16小時。將混合物冷卻到0℃并慢慢加入20mL水以消耗掉過量的BH3以及驟冷產生的混合物，同時保持溫度在12℃以下。將驟冷的混合物攪拌20分鐘并減壓濃縮。產生的混合物用60mL乙酸乙酯萃取三次。合并的有機相依次用20mL水和25mL飽和氯化鈉溶液洗滌，然后減壓濃縮，得到1.1g粗油。將粗產物經硅膠色譜(氯仿/甲醇，10∶6作洗脫劑)純化，得到900mg(94.4％產率)3S-(N-叔丁氧羰基)氨基-4-苯基丁-1，2R-二醇為白色固體。
實施例17
3S-(N-叔丁氧羰基)氨基-2R-羥基-4-苯基丁-1-基甲苯磺酸酯的制備在0℃向744.8mg(2.65mmol)3S-(N-叔丁氧羰基)氨基-4-苯基丁-1，2R-二醇的13mL吡啶溶液中一次加入914mg甲苯磺酰氯。將混合物在0-5℃攪拌5小時。在反應混合物加入6.5mL乙酸乙酯和15mL 5％碳酸氫鈉水溶液的混合物，并攪拌5分鐘。將所得混合物50mL用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機相依次用15mL水和10mL飽和氯化鈉溶液洗滌，然后減壓濃縮，得到約1.1g黃色大塊固體。將粗產物經硅膠色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶3作洗脫劑)純化，得到850mg(74％產率)3S-(N-叔丁氧羰基)氨基-2R-羥基-4-苯基丁-1-基甲苯磺酸酯為白色固體。
實施例18
3S-[N-(叔丁氧羰基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2R-醇的制備向90mg(0.207mmol)3S-(N-叔丁氧羰基)氨基-2R-羥基-4-苯基丁-1-基甲苯磺酸酯的0.143mL異丙醇和0.5mL甲苯溶液中加入0.103mL(1.034mmol)異丁胺。將混合物升至80-85℃并攪拌1.5小時。將所得混合物在40-50℃減壓濃縮，并用硅膠色譜(氯仿/甲醇，10∶1作洗脫劑)純化，得到54.9mg(76.8％產率)3S-[N-(叔丁氧羰基)氨基]-1-(2-甲基丙基)氨基-4-苯基丁-2R-醇為白色固體。
實施例19
N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺的制備步驟A在-2℃向75.0g(0.226mol)N-芐氧羰基-L-苯丙氨酸氯甲基酮的807mL甲醇和807mL四氫呋喃混合溶液中用100分鐘時間加入13.17g(0.348mol，1.54當量)固體硼氫化鈉。在40℃減壓除去溶劑，剩余物溶解于乙酸乙酯(約1L)。依次用1M硫酸氫鉀，飽和碳酸氫鈉和飽和氯化鈉溶液洗滌所得溶液。無水硫酸鎂干燥后過濾，減壓除去溶液。在所得油中加入己烷(約1L)，并通過渦旋使溫度升至60℃。冷卻到室溫后收集固體，用2L己烷洗滌。將所得固體從熱乙酸乙酯和己烷重結晶，得到32.3g(43％產率)N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1-氯-4-苯基-2(S)-丁醇。m.p.150-151℃和M+Li+＝340。
步驟B室溫下在6.52g(0.116mol，1.2當量)氫氧化鉀的968mL絕對乙醇中加入32.3g(0.097mol)N-CBZ-3(S)-氨基-1-氯-4-苯基-2(S)-丁醇。攪拌15分鐘減壓除去溶劑，并將所得固體溶解于二氯甲烷。用水洗滌后用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)(stripping)，得到27.9g白色固體。從熱乙酸乙酯和己烷重結晶，得到22.3g(77％產率)N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2(S)-環(huán)氧-4-苯基-丁烷。m.p.102-103℃和MH+＝298。
步驟C將N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2(S)-環(huán)氧-4-苯基-丁烷(1.00g，3.36mmol)和異丁胺(4.90g，67.2mmol，20當量)的10mL異丙醇加熱回流1.5小時。將溶液冷卻至室溫，真空濃縮，然后倒入100mL攪拌的己烷，使產物從溶液結晶。通過過濾分離產物再空氣干燥，得到1.18g，95％N-[[3(S)-苯基甲基氨基甲酰基]氨基-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-[N-(2-甲基丙基)]胺C22H30N2O3。m.p.108.0-109。5℃和MH+m/z＝371。
實施例20 -1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯的制備從N-[3(S)-芐氧羰基氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異戊胺(1.47g，3.8mmol)，三乙胺(528μL，3.8mmol)和苯磺酰氯(483μL，3.8mmol)的反應得到[2R-羥基-3-[(3-甲基丁基)(苯磺?；?氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯。經硅膠柱色譜純化，用含1％乙醇的氯仿洗脫，得到純產物。
元素分析C29H36N2O5S計算值C，66.39；H，6.92；N，5.34；實測值C，66.37；H，6.93；N，5.26。
實施例21
2R-羥基-3-[[(4-氨基苯基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備步驟A氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(4-硝基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的制備在4.0g(10.8mmol)N-[3S-芐氧羰基氨基-2R-羥基-4-苯基]-N-異丁胺的50mL無水二氯甲烷溶液中加入4.5mL(3.27g，32.4mmol)三乙胺。將溶液冷卻到0℃，并加入2.63g(11.9mmol)4-硝基苯磺酰氯，在0℃攪拌30分鐘后在室溫攪拌1小時。加入乙酸乙酯，依次用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥和濃縮，得到5.9g粗產物。將其從乙酸乙酯/己烷重結晶，得到4.7g純氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(4-硝基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯，m/e＝556(M+H)。
步驟B2R-羥基-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備將3.0g(5.4mmol)氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(4-硝基苯基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的20mL乙酸乙酯溶液在35psig氫氣中用1.5g 10％鈀炭催化劑氫化3.5小時。過濾除去催化劑，濃縮溶液，得到2.05g所要的2R-羥基-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺，m/e＝392(M+H)。
實施例22
2R-羥基-3-[[(3-氨基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備步驟A氨基甲酸，[2R-羥基-3-[(3-硝基苯磺?；?](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的制備在1.1g(3.0mmol)N-[3S-芐氧羰基氨基-2R-羥基-4-苯基]-N-異丁胺的15mL無水二氯甲烷溶液中加入1.3mL(0.94g，9.3mmol)三乙胺。將溶液冷卻到0℃，并加入0.67g(3.0mmol)3-硝基苯磺酰氯，在0℃攪拌30分鐘后在室溫攪拌1小時。加入乙酸乙酯，依次用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥和濃縮，得到1.74g粗產物。將其從乙酸乙酯/己烷重結晶，得到1.40g純氨基甲酸，[2R-羥基-3-[(3-硝基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯，m/e＝562(M+Li)。
步驟B[2R-羥基-3-[(3-氨基苯基)磺酰基](2甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備將1.33g(2.5mmol)氨基甲酸，[2R-羥基-3-[(3-硝基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的40mL 1∶1甲醇/四氫呋喃溶液在40psig氫氣中用0.70g 10％鈀炭催化劑氫化1.5小時。過濾除去催化劑，濃縮溶液，得到0.87g所要的[2R-羥基-3-[(3-氨基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺。
實施例23
2R-羥基-3-[[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備步驟A5-(2，3-二氫苯并呋喃基)磺酰氯的制備在0℃和氮氣中向3.35g無水N，N-二甲基甲酰胺溶液中加入6.18g硫酰氯，形成固體。攪拌15分鐘后加入4.69g 2，3-二氫苯并呋喃，并將混合物在100℃加熱2小時。冷卻反應，將之倒入冰水，用二氯甲烷萃取，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到粗產物。將其從乙酸乙酯重結晶，得到2.45g 5-(2，3-二氫苯并呋喃基)磺酰氯。
步驟B氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的制備在1.11g(3.0mmol)N-[3S-芐氧羰基氨基-2R-羥基-4-苯基]-N-異丁胺的20mL無水二氯甲烷溶液中加入1.3mL(0.94g，9.3mmol)三乙胺。將溶液冷卻到0℃，并加入0.66g 5-(2，3-二氫苯并呋喃基)磺酰氯，在0℃攪拌15分鐘后在室溫攪拌2小時。加入乙酸乙酯，依次用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥和濃縮，得到1.62g粗產物。將其從乙醚重結晶，得到1.17g純氨基甲酸，[2R-羥基-3-[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯。
步驟C[2R-羥基-3-[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備將2.86g氨基甲酸，[2R-羥基-3-[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的30mL四氫呋喃溶液在50psig氫氣中用0.99g 10％鈀炭催化劑氫化16小時。過濾除去催化劑，濃縮濾液，得到1.99g所要的[2R-羥基-3-[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺。
實施例24
N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[2-甲基丙基]-3S-[N1-(苯基甲氧羰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁胺的制備在7.51g(20.3mmol)N-[3S-[(苯基甲氧羰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁基]-2-甲基丙胺的67mL無水四氫呋喃溶液中加入2.25g(22.3mmol)三乙胺。冷卻到0℃后加入4.4g(20.3mmol)二碳酸二叔丁酯，并在室溫連續(xù)攪拌21小時。真空除去揮發(fā)性物質，加入乙酸乙酯，依次用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥和濃縮，得到9.6g粗產物。經硅膠色譜純化，用30％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到8.2g純N-[[3S-(苯基甲基氨基甲酰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基]-1-[(2-甲基丙基)氨基-2-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]丁烷，質譜m/e＝477(M+Li)。
實施例25
2-甲基-3-[(2-苯基乙基)磺?；鵞丙酸N-羥基苯并三唑酯的制備步驟A將異丁烯酸甲酯(7.25g，72.5mmol)和苯乙硫醇(10.0g，72.5mmol)的100mL甲醇溶液在冰浴中冷卻，并用甲醇鈉(100mg，1.85mmol)處理。將溶液在氮氣中攪拌3h，然后真空濃縮，得到一種油。將其溶于乙醚，并用1N硫酸氫鉀水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到16.83g，97.5％2-(R，S)-甲基-4-硫代-6-苯基己酸甲酯為-種油。在SiO2上進行TLC，用20∶1(v/v)己烷∶乙酸乙酯洗脫，Rf＝0.41?；蛘哂?-溴-2-甲基丙酸甲酯代替異丁烯酸甲酯。
步驟B將2-(R，S)-甲基-4-硫代-6-苯基己酸甲酯(4.00g，16.8mmol)的100mL二氯甲烷溶液在室溫攪拌，并用間-氯過氧基苯甲酸(7.38g，39.2mmol)分批處理約40m.。將溶液在室溫攪拌16h，然后過濾，濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液，1N氫氧化鈉和飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到4.50g，99％所要的砜。將不純的砜溶解于100mL四氫呋喃，并用氫氧化鋰(1.04g，24.5mmol)的40mL水溶液處理。將溶液在室溫攪拌2m.，然后真空濃縮。剩余物用1N硫酸氫鉀水溶液酸化至pH＝1，然后用乙酸乙酯萃取三次。合并的乙酸乙酯溶液用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到白色固體。將固體投入沸騰的乙酸乙酯/己烷，然后靜置直到產生白色針狀物，經過過濾將其分離，空氣干燥后得到3.38g，79％2-(R，S)-甲基-3(β-苯乙基磺?；?-丙酸，m.p.91-93℃。
步驟C將2-(R，S)-甲基-3(β-苯乙基磺?；?-丙酸(166.1mg，0.65mmol)，N-羥基苯并三唑(HOBT)(146.9mg，0.97mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(145.8mg，0.75mmol)的4mL無水二甲基甲酰胺(DMF)溶液冷卻到0℃，并在氮氣中攪拌0.5h。然后，溶液用所要的保護氨基或磺酰胺等排中間體處理，并在室溫攪拌16h。將溶液倒入30mL 60％飽和碳酸氫鈉水溶液，然后將溶液潷析，剩下有機物。將有機剩余物投入二氯甲烷，先后用10％檸檬酸水溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。將混合物在硅膠上進行快速色譜分離，用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，可得到分離的非對映體。
實施例26
2-甲基-3-(甲磺?；?丙酸N-羥基苯并三唑酯的制備步驟A將2-(溴甲基)-丙烯酸甲酯(26.4g，0.148mol)的100mL甲醇溶液在室溫用甲基亞磺酸鈉(15.1g，0.l48mol)分批處理10分鐘。將溶液在室溫攪拌1.25h，然后真空濃縮。將剩余物放入水中，用乙酸乙酯萃取四次。合并的乙酸乙酯溶液用飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到20.7g白色固體。將其投入沸騰的丙酮/甲基叔丁醚，并靜置直到產生18.0g(68％)純2-(甲磺?；谆?丙烯酸甲酯。
步驟B將2-(甲磺?；谆?丙烯酸甲酯(970mg，5.4mmol)的15mL四氫呋喃溶液用氫氧化鋰(270mg，6.4mmol)的7mL水溶液處理。將溶液在室溫攪拌5m.，然后用1N硫酸氫鉀水溶液酸化至pH＝1，用乙酸乙酯萃取三次。合并的乙酸乙酯溶液用無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到793mg，89％2-(甲磺?；谆?丙烯酸，m.p.147-149℃。
步驟C將2-(甲磺?；谆?丙烯酸(700mg，4.26mmol)的20mL甲醇溶液與10％鈀炭催化劑一起裝入充有氮氣的Fisher-Porter瓶。將反應容器密封，先后用5次氮氣和5次氫氣沖洗。將壓力保持在50psig 16h，然后用氮氣替換氫氣。溶液通過硅藻土板過濾除去催化劑，真空濃縮濾液，得到682mg，96％2-(R，S)-甲基-3-甲磺?；帷?br> 步驟D將2-(R，S)-甲基-3(甲磺?；?丙酸(263.5mg，1.585mmol)，N-羥基苯并三唑(HOBT)(322.2mg，2.13mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(339.1mg，1.74mmol)的4mL無水二甲基甲酰胺(DMF)溶液冷卻到0℃，并在氮氣中攪拌0.5h。然后，溶液用所要的保護氨基或磺酰胺等排中間體處理，并在室溫攪拌16h。將溶液倒入60mL 60％飽和碳酸氫鈉水溶液，然后將溶液潷析，剩下有機物。將有機剩余物投入二氯甲烷，先后用10％檸檬酸水溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到所要的產物。
實施例26A
N-[2R-羥基-3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2-R，S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備步驟A將從實施例24得到的N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[2-甲基丙基]-3S-[N1-(苯基甲氧羰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁胺
溶解于乙醇，在45psi的氫氣中和5％Pd(C)催化劑存在下氫化，產生N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[2-甲基丙基]-3S-[N1-氨基]-2R-羥基-4-苯基丁胺。接著用標準方法后處理，濾除5％Pd(C)催化劑并在旋轉蒸發(fā)器中減壓蒸發(fā)濾液以除去溶劑，得到下式的胺。
步驟B將步驟A得到的胺在DMF中與實施例26得到的2-甲基-3-(甲磺?；?丙酸N-羥基苯并三唑酯在大約室溫的溫度下反應。將所得溶液用碳酸氫鈉溶液洗滌，乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液先后用檸檬酸溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥。濾除干燥劑，除去有機溶劑，得到下面產物。
實施例26B
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-3S-[2-R，S-甲基-3-(甲磺酰基)]丙酰胺的制備步驟A將從實施例26A得到的N-[2R-羥基-3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-3S-[2-R，S-甲基-3-(甲磺?；?]丙酰胺溶解于二噁烷/HCl，并將其在室溫攪拌約2小時。除去溶劑，剩余物在真空中干燥，生成下式的胺。
將剩余物在乙酸乙酯中攪拌，加入1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基磺酰氯后加入三乙胺，并將混合物在室溫攪拌。用乙酸乙酯稀釋反應混合物，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和濃縮，得到產物。如果需要進一步純化和/或分離該異構體(例如，見下式)，可對剩余物采用色譜法。
實施例27L-(+)-S-乙酰基-β-巰基異丁酸砜抑制劑的制備步驟A在一個圓底燒瓶中裝入所要的保護氨基或磺酰胺等排中間體(2.575mmol)，并在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(339.1mg，1.74mmol)存在下，在10mL CH2Cl2中與L-(+)-S-乙酰基-b-巰基丁酸偶合，并將其在室溫攪拌16h.真空濃縮溶液，剩余物倒入乙酸乙酯，用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到一種油。將其通過硅膠徑向色譜純化，用乙酸乙酯洗脫，得到純產物。
步驟B將步驟A產物(0.85mmol)的10mL甲醇溶液用無水氨在0℃處理約1m.。將溶液在室溫攪拌16h，然后真空濃縮，得到所要的產物，它無需進一步純化即可直接用于下步反應。
步驟C將步驟B產物(0.841mmol)的10mL無水甲苯溶液在氮氣中迅速連續(xù)用1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(128.1mg，0.841mmol)和甲基碘(119.0mg，0.841mmol)處理。在室溫0.5h后反應物用乙酸乙酯稀釋，用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。溶液用無水MgSO4干燥后過濾并真空濃縮，得到所要產物，可直接用于下步反應。
步驟D將步驟C產物(0.73mmol)和過硼酸鈉(500mg，3.25mmol)的30mL冰醋酸溶液加熱到55℃16h。將溶液真空濃縮，剩余物放入乙酸乙酯，用水，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到所要產物。
偶合磺?；衔锱c磺酰胺的一般方法將磺?；轷；衔?約1mmol)，N-羥基苯并三唑(1.5mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(1.2mmol)的混合物溶解于適當溶劑如DMF，并允許在0℃反應約30min.。將所要保護的氨基或磺酰胺等排中間體(1.05mmol)溶解于DMF，并加到上述混合物中，在室溫攪拌足夠長時間以使它們反應。然后，將溶液倒入飽和NaHCO3水溶液，并用如乙酸乙酯萃取。洗滌萃取液，干燥，過濾并濃縮。將所得物質從適當溶劑或溶劑的混合物如己烷和乙酸乙酯結晶，得到產物。
實施例28
2(S)-甲基-3-(甲磺?；?丙酸的制備步驟A在0℃向10g D-(-)-S-苯甲酰基-b-巰基異丁酸叔丁酯的20mL甲醇中鼓入氨氣。允許將反應物升至室溫并攪拌過夜，減壓濃縮。將所得固體(苯甲酰胺)和液體的混合物過濾，得到5.21g后來固化的淡色油。經識別為2(S)-甲基-3-巰基丙酸叔丁酯。
步驟B在0℃向5.21g 2(S)-甲基-3-巰基丙酸叔丁酯的75mL甲苯溶液中加入4.50g 1，8-二氮雜雙環(huán)并[5.4.0]十一-7-烯和1.94mL甲基碘。在室溫攪拌2.5小時后除去揮發(fā)性物質。加入乙酸乙酯，用稀鹽酸，水和鹽水洗滌，干燥并濃縮，得到2.82g淡色油，經識別為2(S)-甲基-3-(硫代甲基)丙酸叔丁酯。
步驟C在2(S)-甲基-3-(硫代甲基)丙酸叔丁酯的50mL乙酸溶液中加入5.58g過硼酸鈉，并將混合物加熱至55℃17小時。將反應物倒入水中，用二氯甲烷萃取，碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥并濃縮，得到2.68g 2(S)-甲基-3-(甲磺?；?丙酸叔丁酯為白色固體。
步驟D在2.68g 2(S)-甲基-3-(甲磺?；?丙酸叔丁酯中加入20mL 4N鹽酸/二噁烷，并將混合物在室溫攪拌19小時。減壓除去溶劑，得到2.18g粗產物，將其從乙酸乙酯/己烷重結晶，得到1.44g2(S)-甲基-3-(甲磺酰基)丙酸為白色晶體。
實施例29 ]-N-[2-羥基-3-[(2-甲基丙基)(3，4-二甲氧基苯磺?；?氨基]-1-(苯基甲基)丙基]-2-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備步驟A將N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(50.0g，0.168mol)和異丁胺(246g，3.24mol，20當量)的650mL異丙醇溶液加熱回流1.25小時。將溶液冷卻至室溫，真空濃縮，然后倒入攪拌著的1L己烷中，產物從溶液中結晶。過濾分離產物，空氣干燥，得到57.56g，92％N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基]N-異丁胺。m.p.108.0-109.5℃，MH+m/z＝371.
步驟B將N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基]N-異丁胺(1.5356g，4.14mmol)和三乙胺(522mg，5.17mmol)的15mL二氯甲烷溶液用3，4-二甲氧基苯磺酰氯(1.0087g，4.26mmol)在室溫處理14h。真空除去溶劑，將剩余物放入乙酸乙酯，然后用1NKHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到2.147g，90.5％白色固體。m.p.124-127℃，HRFABMS；M+Li；對于C30H38N2O7S+Li，計算值為577.2560，實測值為577.2604。
步驟C將氨基甲酸，步驟B產物(513mg，0.90mmol)的30mL甲醇溶液與20mg鈀黑催化劑和10mL甲酸一起在室溫攪拌15h。經硅藻土過濾除去催化劑，然后將濾液真空濃縮，并將剩余物放入乙酸乙酯。用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌乙酸乙酯溶液，無水MgSO4干燥并真空濃縮，得到白色固體，386mg，98％，m.p.123-130℃，F(xiàn)ABMS；M+Li+＝443，無需進一步純化即可直接用于下步反應。
步驟D將2(S)-甲基-3-甲磺?；?128mg，0.77mmol)，N-羥基苯并三唑(179.9mg，1.17mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(177.3mg，0.92mmol)的混合物溶解于1.5mL二甲基甲酰胺(DMF)，并允許在0℃反應30min.。將溶解于1mL DMF的步驟C得到的胺(359mg，0.82mmol)加到上述混合物中，并將混合物在室溫攪拌48h。然后將溶液倒入75mL飽和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到一種清澈的油。將其從己烷和乙酸乙酯結晶，得到178mg，40％純產物。m.p.130-133℃，HRFAB MS；M+Li；對于C27H40N2O8S2Li，計算值為591.2386，實測值為591.2396。
實施例30 ]-N-[2-羥基-3-[(3-甲基丁基)(4-氨基苯磺?；?氨基]-1-(苯基甲基)丙基]-2-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺的制備步驟A將N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(11.54g，38.81mmol)和異戊胺(66.90g，0.767mol，19.9當量)的90mL異丙醇溶液加熱回流3.1h。將溶液冷卻至室溫，真空部分濃縮，將剩余的溶液倒入攪拌著的200mL己烷中，產物從溶液中結晶。過濾分離產物，空氣干燥，得到11.76g，79％N-[[3(S)-苯基甲氧羰基]氨基-2(R)-羥基-4-苯基丁基]N-[(3-甲基丁基)]胺。m.p.118-122℃，F(xiàn)AB MSMH+＝385。
步驟B將N-[[3(S)-苯基甲氧羰基]氨基-2(R)羥基-4-苯基丁基]N-[(3-甲基丁基)]胺(1.1812g，3.07mmol)和三乙胺(325.7mg，3.22mmol)的20mL二氯甲烷溶液用4-硝基苯磺酰氯(767mg，90％純度，3.11mmol)在室溫處理10min.。真空除去溶劑，將剩余物放入乙酸乙酯，然后用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到2.3230g褐色固體。將其從乙酸乙酯和石油醚結晶，得到870mg，50％純產物。m.p.130-132℃，HRFAB MS；M+Li；對于C29H35N3O7SLi，計算值為576.2316，實測值為576.2350。
步驟C將步驟B產物(574mg，1.01mmol)的40mL甲醇溶液(該溶液沒有完全均勻)用70mg 10％鈀炭催化劑處理，并在室溫和42psig氫化15h。經硅藻土過濾除去催化劑，然后將濾液真空濃縮，得到白色固體。將其從氯仿結晶，得到400mg，91％產物，m.p.123-127℃，F(xiàn)AB MS；M+Li+＝412，無需進一步純化即可直接用于下步反應。
步驟D將2(S)-甲基-3-甲磺酰基丙酸(112.3mg，0.675mmol)，N-羥基苯并三唑(159.1mg，1.04mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(147.8mg，0.77mmol)的混合物溶解于1.0mL二甲基甲酰胺(DMF)，并允許在0℃反應30min.。將溶解于0.5mL DMF的步驟C得到的胺(261.9mg，0.646mmol)加到上述混合物中，并將混合物在室溫攪拌16.5h。然后將溶液倒入75mL飽和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到326.3mg白色泡沫。將其在硅膠上進行快速色譜純化，用乙酸乙酯洗脫，得到213.6mg，64％純產物為白色泡沫。FAB MS；MH+＝554。
實施例31 ]-N-[2-羥基-3-[(3-甲基丁基)(4-甲氧基苯磺?；?氨基]-1-(苯基甲基)丙基]-2-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺的制備步驟A將N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(11.54g，38.81mmol)和異戊胺(66.90g，0.767mol，19.9當量)的90mL異丙醇溶液加熱回流3.1h。將溶液冷卻至室溫，真空部分濃縮，將剩余的溶液倒入攪拌著的200mL己烷中，產物從溶液中結晶。過濾分離產物，空氣干燥，得到11.76g，79％N-[[3(S)-苯基甲氧羰基]氨基-2(R)-羥基-4-苯基丁基]N-[(3-甲基丁基)]胺。m.p.118-122℃，F(xiàn)AB MSMH+＝385。
步驟B通過注射器將4-甲氧基苯磺酰氯(630.6mg，3.05mmol)加到N-[[3(S)-苯基甲氧羰基]氨基-2(R)-羥基4-苯基丁基[N-[(3-甲基丁基)]胺(1.1515g，2.98mmol)和三乙胺(313.5mg，3.10mmol)的15mL二氯甲烷溶液中。將溶液在室溫攪拌40min.，然后真空濃縮。將剩余物溶解于乙酸乙酯，用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到1.5622g白色泡沫。將粗產物通過從己烷和乙酸乙酯的混合物重結晶進行純化，得到1.1047g，67％純產物。m.p.95-98℃，HRFAB MS；對于C30H38N2O6S，計算值為555.2529，實測值為555.2559。
步驟C將步驟B產物(970mg，1.68mmol)的30mL甲醇溶液用70mg 10％鈀炭催化劑處理，并在室溫和41psig氫化16h。過濾除去催化劑，真空濃縮濾液，得到清澈的油，靜置使其固化。m.p.81-85℃，F(xiàn)AB MS；MH+＝421，可直接用于下步反應。
步驟D將2(S)-甲基-3-甲磺?；?194mg，1.17mmol)，N-羥基苯并三唑(276mg，1.34mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(256mg，1.34mmol)的混合物溶解于3.5mL二甲基甲酰胺(DMF)，并允許在0℃反應30min.。將溶解于1.5mL DMF的步驟C得到的胺(451.1mg，1.07mmol)加到上述混合物中，并在室溫攪拌16h。然后將溶液倒入20mL飽和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯萃取4次。合并的乙酸乙酯萃取液用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到清澈的油，靜置使其結晶。將其從己烷和乙酸乙酯重結晶，得到517.6mg，85％純產物。m.p.125-129℃，HRFAB MS；對于C27H40N2O7S2，計算值為569.2355，實測值為569.2397。
實施例32 ]-N-[2-羥基-3[(2-甲基丙基)(4-甲氧基苯磺?；?氨基]-1-(苯基甲基)丙基]-2-甲基-3(甲磺酰基)丙酰胺的制備步驟A將N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2-(S)環(huán)氧-4-苯基丁烷(50.0g，0.168mol)和異丁胺(246g，3.24mol，20當量)的650mL異丙醇溶液加熱回流1.25小時。將溶液冷卻至室溫，真空濃縮，然后倒入攪拌著的1L己烷中，產物從溶液中結晶。過濾分離產物，空氣干燥，得到57.56g，92％N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基]N-異丁胺。m.p.108.0-109.5℃，MH+m/z＝371。
步驟B將N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基]N-異丁胺(1.1131g，3.00mmol)和三乙胺(324.0mg，3.20mmol)的20mL二氯甲烷溶液用4-甲氧基苯磺酰氯(715.4mg，3.46mmol)處理。將該溶液在室溫攪拌6h，然后真空濃縮。將剩余物溶解于乙酸乙酯，然后用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到清澈的油。該油從乙醚結晶，得到1.273g，78％白色固體為純產物。m.p.97-102℃，F(xiàn)AB MS；MH+＝541.
步驟C將步驟B產物(930mg，1.68mmol)溶解于30mL甲醇，并在40psig用70mg 10％鈀炭催化劑在室溫氫化17b。經硅藻土過濾除去催化劑，然后真空濃縮濾液，得到704mg清澈的油，靜置使其固化。m.p.105-110℃，F(xiàn)AB MS；MH+＝407，無需進一步純化即可直接用于下步反應。
步驟D將2-甲基-3-(甲磺?；?丙酸(174.9mg，1.05mmol)，N-羥基苯并三唑(230mg，1.50mmol)和EDC(220.5mg，1.15mmol)的2mL DMF混合物在0℃攪拌0.5h，然后用步驟C得到的胺(401.2mg，0.99mmol)的1mL DMF處理。將混合物在室溫攪拌16h，然后將其倒入20mL飽和NaHCO3水溶液。水溶液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯溶液用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到一種清澈的油，260mg。經硅膠快速色譜純化，用己烷和乙酸乙酯洗脫，得到52.7mg，9.6％產物。m.p.87-92℃，HRFAB MS；對于C26H38N2O7S2，計算值為555.2199，實測值為555.2234。
實施例33 ]-N-[2-羥基-3-[(丁基)(4-甲氧基苯磺酰基)氨基]-1-(苯基甲基)丙基]-2-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備步驟A通過N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(1.48g，5.0mmol)與正丁胺(7.314g，100.0mmol)反應，得到1.50g，80％N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-丁胺。m.p.125-128℃，F(xiàn)AB MSMH+＝371。
步驟B將步驟A的胺(1.52g，4.10mmol)和三乙胺(488mg，4.82mmol)的30mL二氯甲烷用4-甲氧基苯磺酰氯(869mg，4.20mmol)在室溫處理3b。真空除去溶劑，將剩余物溶解于乙酸乙酯。乙酸乙酯溶液用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到白色固體。將其用乙醚洗滌，空氣干燥，得到1.71g，77％純產物。m.p.118-120℃，F(xiàn)AB MS；M+Li＝547。
步驟C將步驟B產物(1.514g，2.80mmol)的30mL甲醇在40psig用110mg 10％鈀炭催化劑在室溫氫化16b。經硅藻土過濾除去催化劑，然后濃縮濾液，得到白色固體，1.20g，100％，m.p.103-108℃，HRFAB MS；對于C21H30N2O4S，計算值為413.2086，實測值為413.2121，無需進一步純化即可直接用于下步反應。
步驟D將2(S)-甲基-3-(甲磺?；?丙酸(354.4mg，2.13mmol)，N-羥基苯并三唑(473.4mg，3.09mmol)和EDC(445.3mg，2.33mmol)的1.5mL DMF混合物在0℃攪拌25min.，然后用步驟C得到的胺(815mg，2.00mmol)的2mL DMF處理。將混合物在室溫攪拌16h，然后將其倒入50mL飽和NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯溶液用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到905mg白色泡沫。該產物經硅膠快速色譜純化，用乙酸乙酯/己烷洗脫，得到711.6mg，65％純產物。m.p.87-92℃，HRFAB MSM+Li；對于C26H38N2O7S2Li，計算值為561.2281，實測值為561.2346。
實施例34 ]-N-[2-羥基-3-[(丙基)(4-甲氧基苯磺酰基)氨基]-1-(苯基甲基)丙基]-2-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備步驟A將N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(6.06g，20.4mmol)與正丙胺(20.9g，0.35mol)的100mL異丙醇溶液加熱回流3h，然后真空濃縮溶液，得到一種固體。將其從己烷和乙酸乙酯結晶，得到6.53g，90％所要產物。m.p.120-123℃，F(xiàn)AB MSMH+＝357。
步驟B將步驟A的胺(620mg，1.74mmol)和三乙胺(250mg，2.47mmol)的15mL二氯甲烷溶液用4-甲氧基苯磺酰氯(371mg，1.79mmol)在室溫處理2.33b。真空除去溶劑，將剩余物溶解于乙酸乙酯，然后用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到1.0622g白色泡沫。粗產物經硅膠快速色譜純化，己烷和乙酸乙酯洗脫，得到615mg，67％純產物。m.p.88-92℃，HRFAB MS；對于C28H34N2O6S，計算值為533.2298，實測值為533.2329。
步驟C將氨基甲酸，步驟B產物(519mg，0.98mmol)的30mL甲醇在46psig用70mg 10％鈀炭催化劑在室溫氫化22h。經硅藻土過濾除去催化劑，真空濃縮濾液，得到白色固體，得到清澈的油，靜置使其固化，m.p.124-127℃，F(xiàn)AB MS；M+Li+＝399，387mg，100％，可直接用于下步反應。
步驟D將2(S)-甲基-3-(甲磺?；?丙酸(138.5mg，0.83mmol)，N-羥基苯并三唑(174.6mg，1.14mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(171.83mg，0.90mmol)的混合物溶解于2.5mL二甲基甲酰胺(DMF)，并允許在0℃反應30min.。將溶解于1.5mL DMF的步驟C得到的胺(304.9mg，0.78mmol)加到上述混合物中，并在室溫攪拌14.5h。然后將所得溶液倒入20mL飽和NaHCO3水溶液，用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯萃取液用5％檸檬酸水溶液，飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到白色固體。將其從己烷和乙酸乙酯重結晶，得到228mg，54％純產物。m.p.115-118℃，HRFAB MS；對于C27H40N2O7S2，計算值為541.2042，實測值為541.2064。
實施例35
氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(2-氨基苯并噻唑-6-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的制備將氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯(0.30g，0.571mmol)加到無水硫酸銅(1.20g)和硫代氰酸鉀(1.50g)充分混合的粉末中，接著加入無水甲醇(6mL)，并將所得棕黑色懸浮液加熱回流2h。過濾反應混合物，濾液用水(5mL)稀釋，然后加熱回流。將濾液濃縮，剩余物經色譜分離(乙酸乙酯∶己烷80∶20)得到0.26g(78％)所要化合物為固體。
實施例36
氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(苯并噻唑-6-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的制備方法1
將氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(2-氨基苯并噻唑-6-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯(0.25g，0.429mmol)加到亞硝酸異戊酯(0.116mL，0.858mmol)的二噁烷中，然后將混合物在85℃加熱。氮氣停止放出后濃縮反應混合物。剩余物經色譜分離(乙酸乙酯∶己烷5∶3)得到0.130g(53％)所要產物為固體。
方法2將粗苯并噻唑-6-磺酰氯的乙酸乙酯(100mL)加到N-[3S-芐氧羰基氨基-2R-羥基-4-苯基]-N-異丁胺(1.03g，2.78mmol)中，接著加入N-甲基嗎啉(4mL)。在室溫攪拌18h后，反應混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用檸檬酸(5％，100mL)，碳酸氫鈉(飽和的，100mL)和鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgSO4)和真空濃縮。剩余物用色譜法純化(硅膠，乙酸乙酯∶己烷1∶1)，得到0.340g(23％)所要產物。
實施例37
氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(2-氨基苯并噻唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯和氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(2-氨基苯并噻唑-7-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的制備將氨基甲酸，2R-羥基-3-[(3-氨基苯基磺?；?(2甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯(0.36g，0.685mmol)加到無水硫酸銅(1.44g)和硫代氰酸鉀(1.80g)充分混合的粉末中，接著加入無水甲醇(10mL)，并將所得棕黑色懸浮液加熱回流2h。過濾反應混合物，濾液用水(5mL)稀釋，然后加熱回流。在反應混合物中加入乙醇，冷卻并過濾。濃縮濾液，剩余物經色譜分離(乙酸乙酯∶己烷1∶1)得到0.18g(45％)7-異構體為固體。進一步用洗脫柱洗脫(乙酸乙酯∶己烷3∶2)，得到0.80g(20％)5-異構體為固體。
實施例38
3S-氨基-1-[N-(2-甲基丙基)-N-(4-甲氧基苯磺酰基)氨基]-4-苯基-2R-丁醇的制備步驟AN-芐氧羰基-3(S)-氨基-1-氯-4-苯基-2(S)-丁醇在N-芐氧羰基-L-苯基丙氨酸氯甲基酮(75g，0.2mol)的800mL甲醇和800mL四氫呋喃的混合溶液中用100min.加入硼氫化鈉(13.17g，0.348mol，1.54當量)。溶液在室溫攪拌2小時，然后真空濃縮。將剩余物溶解于1000mL乙酸乙酯，用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到一種油。在60℃將粗產物溶解于1000mL己烷，并允許冷卻至室溫，形成結晶。過濾出晶體，用充足的己烷洗滌。然后將固體從熱乙酸乙酯和己烷重結晶，得到32.3g，43％N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1-氯-4-苯基-2(S)-丁醇。m.p.150-151℃，F(xiàn)AB MSMLi+＝340。
步驟B3(S)-[N-(芐氧羰基)氨基]-1，2(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷用N-芐氧羰基-3(S)-氨基-1-氯-4-苯基-2(S)-丁醇(32.3g，0.097mol)處理氫氧化鉀(6.52g，0.116mol，1.2當量)的970mL絕對乙醇。將該溶液在室溫攪拌15分鐘，然后真空濃縮，得到白色固體。將該固體溶解于二氯甲烷，并用水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到白色固體。將其從己烷和乙酸乙酯結晶，得到22.3g，77％3(S)-[N-(芐氧羰基)氨基]-1，2(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷。m.p.102-103℃，F(xiàn)AB MSMH+＝298。
步驟CN-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基]-N-異丁胺將N-芐基羰基-3(S)-氨基-1，2-(S)-環(huán)氧-4-苯基丁烷(50.0g，0.168mol)和異丁胺(246g，3.24mol，20當量)的650mL異丙醇溶液加熱回流1.25小時。將溶液冷卻至室溫，真空濃縮，并倒入1L攪拌著的己烷中，溶液中形成結晶產物。過濾出產物，空氣干燥后得到57.56g，92％N-[3(S)-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基-4-苯基]-N-異丁胺。m.p.108.0-109.5℃，MS m/z＝371。
步驟D[2(R)-羥基-3-[N-(2-甲基丙基)-N-(4-甲氧基苯磺?；?氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯將步驟C的胺(936.5mg，2.53mmol)和三乙胺(288.5mg，2.85mmol)溶解于20mL二氯甲烷，并用4-甲氧基苯磺酰氯(461mg，2.61mmol)處理。將溶液在室溫攪拌16h，然后真空濃縮。將剩余物溶解于乙酸乙酯用1N KHSO4，飽和NaHCO3水溶液和飽和鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到1.234g清澈的油。將該油從乙醚和己烷混合物重結晶，得到729.3mg，56.5％產物。m.p.95-99℃，F(xiàn)AB MSMH+＝511。
步驟E3S-氨基-1-[N-(2-甲基丙基)-N-(4-甲氧基苯磺酰基)氨基]-4-苯基-2R-丁醇將步驟C得到的[2(R)-羥基-3-[N-(2-甲基丙基)-N-(4-甲氧基苯磺?；?氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯(671.1mg，1.31mmol)的10mL甲醇溶液用50mg 10％鈀炭在40psig和室溫中氫化15小時。用硅藻土過濾除去晶體，濃縮濾液，得到白色泡沫，474.5mg，96％。FAB MSMH+＝377。
實施例39
1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-磺酰氯的制備方法1在0℃和氮氣中向4.25g無水N，N-二甲基甲酰胺中加入7.84g磺酰氯，產生固體。攪拌15分鐘后加入6.45g 1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯，將混合物在100℃加入2小時。冷卻反應物，將其倒入冰水中，用二氯甲烷萃取，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到7.32g粗產物為黑色油。用硅膠色譜純化，20％二氯甲烷/己烷洗脫，得到1.9g(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰氯。
方法2在一個裝有機械攪拌器，冷凝器，加熱罩和等壓滴加漏斗的22L圓底燒瓶中加入三氧化硫DMF復合物(2778g，18.1mol)。然后加入二氯乙烷(4L)，并開始攪拌。用5分鐘時間通過滴加漏斗加入1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯(1905g，15.6mol)。將溫度升至75℃并保持22小時(9小時后NMR指示反應已完成)。將反應物冷卻至26℃，然后以保持溫度在40℃以下的速度(1.5小時)加入草酰氯(2290g，18.1mol)。將混合物加熱至67℃5小時后用冰浴冷卻至16℃。用水(5L)以保持溫度在20℃以下的速度淬滅反應。加完水后將混合物攪拌10分鐘。分離各相，有機相用水(5L)洗滌兩次。用硫酸鎂(500g)干燥有機相，過濾除去干燥劑。在50℃真空除去溶劑。允許冷卻所得溫液體使固體再次形成。1小時后用己烷(400mL)洗滌固體，過濾并干燥，得到所要的磺酰氯(2823g)。濃縮己烷洗液，所得固體用400mL己烷洗滌，得到另一部分磺酰氯(464g)。總共得到3287g產物(95.5％基于1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯)。
方法3根據(jù)EP583960(在此全部引作參考)所述方法制備1，4-苯并二噁烷-6-磺酰氯。
實施例40
1-[N-[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]-N(2-甲基丙基)氨基]-3(S)-[二(苯基甲基)氨基]-4-苯基-2(R)-丁醇的制備方法1在一個裝有機械攪拌器的5000mL三頸燒瓶中加入N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·草酸鹽(354.7g，0.7mol)和1，4-二噁烷(2000mL)，然后加入碳酸鉀(241.9g，1.75mol)的水(250mL)溶液。將所得不均勻混合物在室溫攪拌2小時，然后用15分鐘加入1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-磺酰氯(162.2g，0.735mol)的1，4-二噁烷(250mL)。將反應混合物在室溫攪拌18小時。將乙酸乙酯(1000mL)和水(500mL)充到反應器中，并繼續(xù)攪拌1小時。分離水相，用乙酸乙酯(200mL)萃取。合并的乙酸乙酯相用25％鹽水溶液(500mL)洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾和用乙酸乙酯(200mL)洗滌硫酸鎂后減壓除去濾液中的溶劑，得到所要的磺酰胺為粘性黃色泡沫狀油(440.2g，105％產率)。HPLC/MS(電噴)(m/z601[M+H]+)。
實施例41
1-[N-[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-3(S)-氨基-4-苯基-2(R)-丁醇·甲磺酸鹽的制備方法1將1-[N-[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠-N-(2-甲基丙基)氨基]-3(S)-[二(苯基甲基)氨基]-4-苯基-2(R)-丁醇(6.2g，0.010mol)溶解于甲醇(40mL)，然后在溶液中加入甲磺酸(0.969g，0.010mol)和水(5mL)溶液。將混合物放入裝有20％Pd(OH)2的碳(255mg，50％含水量)的500mL Parr氫化瓶中。將瓶子放入氫化器，并用5次氮氣和5次氫氣清洗。允許反應在35℃和63psi氫氣壓下進行18小時。再加入催化劑(125mg)，清洗后氫化反應再進行20小時。將混合物用硅藻土過濾，用甲醇(2×10mL)洗滌。減壓除去約1/3的甲醇，剩下的甲醇通過用甲苯在80托共沸蒸餾除去。分15，10，10和10mL幾次加入甲苯。將混合物中產生的結晶產物過濾，用每次10mL甲苯洗滌兩次。產生的固體在室溫和1托干燥6小時生成胺鹽(4.5g，84％)。HPLC/MS(電噴)測定證明含有所要產物(m/z421[M+H]+)。
方法2步驟A將N-[3(S)-[N，N-二(苯基甲基)氨基]-2(R)-羥基-4-苯基丁基]-N-異丁胺·草酸鹽(2800g，5.53mol)和THF(4L)加到裝有機械攪拌器的22L圓底燒瓶中。將碳酸鉀(1921g，13.9mol)水(2.8L)溶液加到上述THF漿液中，然后攪拌混合物1小時。將1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-磺酰氯(1281g，5.8mol)的THF(1.4L)溶液用25分鐘加到上述反應混合物中，再用200mL THF沖洗添加漏斗。將混合物攪拌14小時，然后加水(4L)。將混合物攪拌30分鐘，并分離各相。用THF(500mL)洗滌水相兩次。合并的THF相用硫酸鎂(500g)干燥1小時，然后過濾溶液，除去干燥劑，濾液用于下步反應。
步驟B在粗1-[N-[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠-N-(2-甲基丙基)氨基]-3(S)-[二(苯基甲基)氨基]-4-苯基-2(R)-丁醇的THF溶液中加水(500mL)，然后加入甲磺酸(531g，5.5mol)。攪拌溶液以保證完全混合，并將其加到5加侖高壓釜中。在高壓釜中與THF(500mL)一起加入Pearlman催化劑(200g 20％Pd(OH)2的C/50％水)。該反應器用氮氣和氫氣各沖洗4次。在反應器中充入60psig氫氣并以450rpm開始攪拌。16小時后用HPLC分析表明仍有少量單-芐基中間體存在。再加入催化劑(50g)，并將反應進行到第二天。通過硅藻土(500g)過濾溶液除去催化劑，并分5批真空濃縮溶液。在每一批中加入500mL甲苯，減壓共沸除去剩余的水。將所得固體分成3份，每份用2L甲基叔丁醚洗滌并過濾。在室溫和壓力小于1托的真空爐中除去剩余的溶劑，得到2714g所要的鹽。
如果需要，產物可以通過以下步驟進一步純化。將總共500mL甲醇和170g上步物質加熱回流直到全部溶解。冷卻溶液，加入200mL異丙醇，然后加入1000-1300mL己烷，產生白色固體沉淀。冷卻到0℃后收集沉淀，用己烷洗滌，得到123g所要物質。經過這一步驟初始的有機物為95∶5的醇非對映體混合物，它比99∶1的所要非對映體多。
實施例42
2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備步驟A2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸苯基甲酯的制備在3.19g(8.6mmol)N-[3S-芐氧羰基氨基-2R-羥基-4-苯基]-N-異丁胺的40mL無水二氯甲烷中加入0.87g三乙胺。將溶液冷卻到0℃，并加入1.90g(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰氯，在0℃攪拌15分鐘，然后在室溫攪拌17小時。加入乙酸乙酯，用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥并濃縮，得到粗產物。將其從乙醚/己烷重結晶，得到4.77g純2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸苯基甲酯。
步驟B2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備將4.11g氨基甲酸，2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基-，苯基甲酯的45mL四氫呋喃和25mL甲醇溶液在1.1g 10％鈀炭上和50psig氫氣中氫化16小時。過濾除去催化劑，濃縮濾液，得到1.82g所要的2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺。
實施例43
苯并噻唑-6-磺酰氯的制備步驟AN-(4-磺酰氨基苯基)硫脲的制備將磺胺(86g，0.5mol)，硫代氰酸銨(76.0g，0.5mol)和稀鹽酸(1.5N，1L)的混合物機械攪拌并加熱回流2hr。蒸餾掉約200mL水，然后濃縮反應混合物，得到固體。濾出固體，用冷水洗滌，空氣干燥，得到67.5g(59％)所要產物為白色粉末。
步驟B2-氨基-6-磺酰氨基苯并噻唑的制備將溴(43.20g，0.27mol)的氯仿(200mL)用1hr加到N-(4-磺酰氨基苯基)硫脲(27.72g，0.120mol)的氯仿(800mL)懸浮液中。加完后將反應混合物加熱回流4.5hr。真空除去氯仿，剩余物通過反復添加氯仿蒸餾。得到的固體用水(600mL)處理，接著用氫氧化銨使其堿化，然后加熱回流1hr。過濾冷反應混合物，用水洗滌，空氣干燥，得到22.0g(80％)所要產物為白色粉末。
步驟C苯并噻唑-6-磺酸的制備將2-氨基-6-亞磺酰氨基-苯并噻唑(10.0g，43.67mmol)的二噁烷(300mL)懸浮液加熱回流。分兩批在反應混合物中加入亞硝酸異戊酯(24mL)，看到劇烈放出氣體(小心起見，反應在屏蔽后面進行)。2hr后有紅色沉淀沉降在反應容器中。熱過濾反應混合物，固體用二噁烷洗滌并干燥。將固體從甲醇-水重結晶。2天后形成少量沉淀。濾除沉淀，真空濃縮母液，得到純產物為淡紅橙色固體(8.0g，85％)。
步驟D6-氯磺酰基苯并噻唑的制備將亞硫酰氯(4mL)加到苯并噻唑-6-磺酸(0.60g，2.79mmol)的二氯乙烷(15mL)懸浮液中。將反應混合物加熱回流，并在反應混合物中加入二甲基甲酰胺(5mL)，得到清澈溶液?；亓?.5hr后真空除去溶劑。通過二氯乙烷的蒸發(fā)逐出過量HCl和亞硫酰氯。
實施例44
2R-羥基-3-[[(1，4-苯并二噁烷-6-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸苯基甲酯的制備在含有Et3N(0.35mL，2.5mmol)的N-[3S-[(苯基甲氧羰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁基]-N-(2-甲基丙基)胺(0.5g，1.35mmol)的CH2Cl2(5.0mL)溶液中加入1，4-苯并二噁烷-6-磺酰氯(0.34g，1.45mmol)，并在0℃攪拌30min.。在室溫攪拌1小時后用CH2Cl2(20mL)稀釋反應混合物，用冷1N HCl(3×20mL)，水(2×20mL)，飽和NaHCO3(2×20mL)和水(3×20mL)，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。剩余物用快速色譜純化，35％EtOAc的己烷洗脫，得到所要產物為白色非晶狀固體，將其從MeOH結晶為白色粉末(0.65g，84％產率)。m.p.82-84℃，HRMS-FAB(MH+)C30H37N2O7S計算值569.2321，實測值569.2323.
實施例45 -(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺鹽酸鹽的制備步驟A[2R-羥基-3-[(4-氨基苯磺酰基)]-(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸叔丁酯的制備
將[2R-羥基-3-[(4-氨基苯磺?；?]-(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(3.7g，9.45mmol)和BOC-ON(2.33g，9.45mmol)和三乙胺(0.954g，9.45mmol)的四氫呋喃(60mL)混合物攪拌16小時，然后真空濃縮。將剩余物溶解于二氯甲烷(200mL)，用氫氧化鈉(1N，100mL)和檸檬酸(5％，100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮，得到1.18g(94％)所要產物為白色固體。
步驟B[2R-羥基-3-[(2-氨基苯并噻唑-6-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸叔丁酯的制備
將[2R-羥基-3-[(4-氨基苯磺酰基)](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸叔丁酯(1.12g，2.279mmol)加到充分混合的無水硫酸銅(4.48g)和硫代氰酸鉀(5.60g)粉末中，接著加入無水甲醇(35mL)，并將所得黑棕色懸浮液加熱回流2小時，反應混合物變成灰色。過濾反應混合物，濾液用水(50mL)稀釋并加熱回流。在反應混合物中加入乙醇，冷卻并過濾。濃縮濾液，剩余物經色譜純化(乙酸乙酯∶甲醇90∶10)，得到0.80g(78％)去保護化合物為固體。通過以下過程使其直接重新保護將所得固體(2.25g，5.005mmol)與BOC-ON(1.24g)和三乙胺(0.505g，5.005mmol)的四氫呋喃(20mL)混合物在室溫攪拌18小時。濃縮反應混合物，將剩余物溶解于二氯甲烷(200mL)，并用氫氧化鈉(1N，100mL)和檸檬酸(5％，100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮，得到的剩余物經色譜法純化(乙酸乙酯∶己烷3∶1)，得到1.8g(65％)所要產物為固體。
步驟C[2R-羥基-3-[(苯并噻唑-6-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸叔丁酯的制備
將[2R-羥基-3-[(2-氨基苯并噻唑-6-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸叔丁酯(1.80g，3.2755mmol)加到亞硝酸異戊酯(0.88mL)的二噁烷(20mL)溶液中，并在85℃加熱混合物。放出氮氣停止后濃縮反應混合物，剩余物經色譜純化(己烷∶乙酸乙酯1∶1)，得到1.25g(78％)所要產物為固體。
步驟D[2R-羥基-3-[(苯并噻唑-6-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺·鹽酸鹽的制備
將[2R-羥基-3-[(苯并噻唑-6-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基氨基甲酸叔丁酯(1.25g，2.3385mmol)加到二噁烷/HCl(4N，10mL)中，在室溫攪拌2小時后濃縮。用甲苯逐出過量HCl，得到1.0g(定量產率)所要產物。
實施例46
2(S)-甲基-3-(甲磺?；?丙酸的制備步驟A在200g(1.23mol)D-(-)-3-乙酰基-b-巰基異丁酸的1.0L甲醇溶液中加入161.0g(2.47mol)氫氧化鉀的500mL甲醇溶液，同時用冰浴冷卻保持溫度在10℃以下。另外攪拌20分鐘后加入117mL(156g，1.23mol)硫酸二甲酯，同時保持溫度在20℃以下。除去冰浴后再攪拌60分鐘。過濾掉鹽，減壓除去溶劑，并加入乙酸乙酯。分離出的水相用濃鹽酸酸化，用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到164g(99％)所要的2S-甲基-3-(甲硫基)丙酸，m/e＝133(M-H)。
步驟B在用冰浴冷卻在18℃的10.0g(74.6mmol)2S-甲基-3-(甲硫基)丙酸的150mL丙酮和30mL水的溶液中加入161.8g(263mmol)過硫酸氫鉀制劑。加入約一半后溫度升到24℃，停止添加，待溫度降到18℃后再繼續(xù)添加。在15-20℃攪拌15分鐘后除去冰浴，在室溫攪拌反應物1小時。濾出固體，用丙酮洗滌；濃縮濾液至約40mL，將剩余物溶解于200mL乙酸乙酯。乙酸乙酯相用無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到11.4g油。將該油溶解于最少量的乙酸乙酯，并加入己烷引起產生沉淀。收集沉淀，得到6.95g所要產物，m/e＝167(M+H)。
實施例47
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基[-2S-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺的制備在0℃和氮氣下向5.0g(30mmol)2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酸和6.90g(45mmol)N-羥基苯并三唑的30mL無水DMF溶液中加入6.34g(33mmol)EDC。約10分鐘后EDC全部溶解。在0℃60分鐘后加入事先用3.4mL(31.6mmol)4-甲基嗎啉中和的15.5g(30mmol)2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺甲磺酸酯的30mL無水DMF溶液。在0℃3小時后將混合物攪拌過夜17hr。減壓除去DMF，加入乙酸乙酯，用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉，水和鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到16g粗產物。用HPLC測定純度為88％。將產物在硅膠上進行色譜分離，用20-80℃乙酸乙酯/己烷洗脫，得到純產物。將其從乙酸乙酯/己烷重結晶，得到8.84g純產物。m.p.131.8-133.8℃。
或者，在0℃和氮氣下向35.0g(211mmol)2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酸和48.3g(315mmol)N-羥基苯并三唑的210mL無水DMF溶液中加入44.4g(231mmol)EDC。約30分鐘后EDC全部溶解。在0℃60分鐘后加入事先用24mL(22.3g)4-甲基嗎啉中和的108.8g(211mmol)2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺甲磺酸酯的350mL無水DMF溶液。在0℃2hr后將混合物攪拌過夜18hr。減壓除去DMF，加入1L乙酸乙酯，用5％檸檬酸，飽和碳酸氫鈉，水和鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到120.4g粗產物。用HPLC測定純度為90％。將產物從750-1000mL絕對乙醇結晶兩次，得到82.6g所要產物。用HPLC測定純度＞99％。
實施例48
1-[(2-甲基丙基)[(1，4-苯并二噁烷-6-基)磺?；鵞氨基]-3S-[(苯基甲氧羰基)氨基]-4-苯基丁-2R-醇的制備在含有Et3N(0.35mL，2.5mmol)的N-[3S-[(苯基甲氧羰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁基]-N-(2-甲基丙基)胺(0.5g，1.35mmol)的CH2Cl2(5.0mL)溶液中加入1，4-苯并二噁烷-6-磺酰氯(0.34g，1.45mmol)(根據(jù)文獻EP583960A2，1994所述方法制備的)，并在0℃攪拌30min.。在室溫攪拌1h后用CH2Cl2(20mL)稀釋反應混合物，用冷1N HCl(3×20mL)，水(2×20mL)，飽和NaHCO3(2×20mL)和水(3×20mL)，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。剩余物用快速色譜純化，35％EtOAc的己烷洗脫，得到所要的1，4-苯并二噁烷-磺酰胺為白色非晶狀固體，將其從MeOH結晶為白色粉末(0.65g，84％產率)。m.p.82-84℃，HRMS-FAB(MH+)C30H37N2O7S計算值569.2321，實測值569.2323.
實施例49
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，4-苯并二噁烷-6-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺酰基)丙酰胺的制備步驟A將1-[(2-甲基丙基)[(1，4-苯并二噁烷-6-基)磺?；鵠氨基]-3S-[(苯基甲氧羰基)氨基]-4-苯基丁-2R-醇(0.6g，1.06mmol)的THF(10mL)溶液在10％Pd/C(0.4g)存在下，在50psi和室溫下氫化12h。濾除催化劑，減壓濃縮濾液。
步驟B將步驟A得到的剩余物溶解于CH2Cl2(4.0mL)，并加到在DMF(2mL)和CH2Cl2(2mL)溶劑混合物中的2S-甲基-3-(甲磺酰基)丙酸(0.2g，1.2mmol)，HOBt(0.25g，1.6mmol)和EDC(0.24g，1.25mmol)的冷(0℃)混合物中，并在0℃攪拌2h。在室溫攪拌3h后用CH2Cl2(15mL)稀釋反應混合物，用冷0.5N NaOH(2×10mL)和水(3×15mL)洗滌，干燥(Na2SO4)并真空濃縮。剩余物經硅膠快速色譜純化，用EtOAc作為洗脫劑，得到所要的磺酰胺為白色非晶形粉末(0.5g，82％)。Rt＝19.9min.。FABMS m/z 589(M+Li)+；HRMS-FAB分析C27H39N2O8S2，計算值583.2148(MH)+，實測值583.2115。
實施例50
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(苯并噻唑-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備將2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酸(0.220g，1.325mmol)，羥基苯并三唑(0.178g，1.325mmol)和EDC(0.253g，1.325mmol)的DMF(20mL)混合物在室溫攪拌1h。加入[2R-羥基-3-[(苯并噻唑-6-磺?；?-(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺鹽酸鹽(0.620g，1.325mmol)，然后加入三乙胺(0.260g，2.66mmol)，并攪拌18h.將反應混合物真空濃縮，剩余物在乙酸乙酯(200mL)和檸檬酸(5％，100mL)之間分配。有機相用飽和碳酸氫鈉(100mL)和鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮。剩余物經硅膠快速色譜純化，用乙酸乙酯∶己烷3∶1洗脫，得到所要產物為粉末(0.330g，43％)。計算M＝581；實測M+Li＝588。
實施例51
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備步驟AN-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(乙酰硫基)丙酰胺的制備
將N-羥基苯并三唑(1.79g，11.6mmol)加到D-(-)-S-乙?；?巰基異丁酸(1.26g，7.8mmol)的15mL無水二甲基甲酰胺中，并在冰浴中冷卻。在該冷溶液中加入EDC(1.64g，8.5mmol)，并攪拌30分鐘。再向其中加入2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(3.27g，7.8mmol)，并攪拌16小時，同時升至室溫。除去溶劑，剩余物在乙酸乙酯和5％硫酸氫鉀水溶液之間分配。有機相用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并濃縮，質譜m/z＝571.8(M+Li)。
步驟BN-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-巰基丙酰胺的制備
將4.29g(7.8mmol)步驟A得到的S-乙?；衔锏?00mL無水甲醇在冰浴中冷卻。在溶液中鼓入1分鐘無水氨。塞住溶液，在室溫攪拌5小時以上。將其在旋轉蒸發(fā)器中濃縮，剩余物溶解于乙酸乙酯。用水和鹽水洗滌該有機溶液，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到3.9g游離硫醇，不用純化。
步驟CN-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲硫基)丙酰胺的制備
將1.65g(3.15mmol)步驟B的硫醇的25mL四氫呋喃溶液在冰浴中冷卻。在該冷溶液中加入0.52g(3.52mmol)DBU，接著加入0.22mL(3.5mmol)甲基碘。5分鐘后除去冰浴，在室溫幾小時后將反應物在旋轉蒸發(fā)器中濃縮。將剩余物溶解于乙酸乙酯。有機物用硫酸氫鉀，碳酸氫鈉和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到1.48g粗產物為白色泡沫。
步驟DN-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備向440mg(0.8mmol)步驟C的硫甲醚的10mL甲醇中加入1.52g(24.0mmol)過硫酸氫鉀制劑，接著加入10mL水。將該懸浮液在室溫攪拌4小時。將混合物在旋轉蒸發(fā)器中濃縮，用50mL水稀釋，并用乙酸乙酯萃取。有機相用碳酸氫鈉洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到390mg粗產物砜。經快速色譜純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷作洗脫劑，得到330mg所要化合物。質譜m/z＝575.4(M+Li)。
實施例52
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲基亞磺酰基)丙酰胺的制備攪拌的同時在N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲硫基)丙酰胺(1.04g，1.94mmol)的10mL冰醋酸溶液中加入220mg(1.94mmol)30％過氧化氫。1小時后加水稀釋停止反應，并小心加入飽和碳酸氫鈉使之中和。將所得水懸浮液用乙酸乙酯萃取，有機相5％硫酸氫鉀水溶液洗滌。乙酸乙酯相用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到非對映體亞砜的混合物。用快速色譜小心分離兩種非對映體，得到250mg快速移動的異構體1和250mg慢速移動的異構體2和400mg混合物。質譜m/z＝559.3(M+Li)異構體1和m/z＝559.3異構體2。
實施例53
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2，3-苯并呋喃-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備在0.170g(1mmol)2-(S)-甲基-3-甲磺?；岬?mL無水二甲基甲酰胺溶液中加入1.5當量N-羥基苯并三唑，并將溶液在冰浴中冷卻。向該溶液中加入0.19g(1.0mmol)EDC，并將溶液攪拌30分鐘。在溶液中加入2R-羥基-3-[[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(0.418g，1.0mmol)，并攪拌16小時。將反應物在旋轉蒸發(fā)器中濃縮。將剩余物溶解于乙酸乙酯，用5％硫酸氫鉀，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到粗油。經快速色譜(SiO2)純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到純化產物。質譜m/z＝573.5。
實施例54
5-氯磺?；?2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑的制備將2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑(5.0g，0.026mol)的氯磺酸(35.00mL)溶液在0℃攪拌30分鐘，在室溫攪拌3小時。將所得深色反應混合物倒入冰水混合物(200mL)，并在室溫攪拌30分鐘。濾出所得沉淀，用冷水(500mL)洗滌。將固體在一個用NaOH片干燥的高真空干燥器中干燥過夜，得到5-氯磺?；?2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑(5.9g，78％)為灰色粉末。
1H NMR(DMSO-d6)d3.89(s，3H)，7.55(d，J＝8.4Hz，1H)，7.65(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，1H).
(德國專利DE3826036)。
實施例55
N-[2R-羥基-3-[N1-[(2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠-N1-(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲基酯的制備在N-[3S-[(苯基甲氧羰基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁基]-N-(2-甲基丙基)胺(5.0g，13.5mmol)的二氯甲烷(70mL)冷溶液中加入三乙胺(5.95g，54.0mmol)，接著一小批一小批地加入5-氯磺?；?2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑(4.29g，14.85mmol)固體。將反應混合物在0℃攪拌30分鐘，在室溫攪拌2.5小時，直到氨基醇完全反應。冷卻混合物并過濾，濃縮濾液。將所得剩余物溶解于EtOAc(200mL)，連續(xù)用冷5％檸檬酸(3×50mL)，飽和碳酸氫鈉水溶液(3×50mL)和水(3×100mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮并真空干燥。剩余物用甲醇研制，冷卻，過濾，用MeOH-EtOAc(1∶1，v/v)洗滌，在干燥器中干燥，得到純N-[2R-羥基-3-[[(2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲基酯(6.02g，72％)為淺棕色粉末。FABMSm/z＝630(M+Li)；HRMSC31H38N5O7S(M+H)，計算值624.2492，實測值624.2488。
實施例56
2R-羥基-3-[[(2-氨基-苯并咪唑-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備將N-[2R-羥基-3-[[(2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯(0.36g，0.58mmol)的2.5N甲醇KOH(2.00mL)溶液在70℃和氮氣下加熱3小時。用水(10mL)稀釋反應混合物，并用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的有機萃取液用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。所得剩余物用反相HPLC純化，用10-90％CH3CH/H2O以70mL/min.的流速梯度洗脫(30min.)。合并適當?shù)酿s分并凍干，得到純2R-羥基-3-[[(2-氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(0.22g，58％)為白色粉末。FABMSm/z＝432(M+H)；HRMSC21H30N5O3S(M+H)，計算值432.2069，實測值432.2071。
實施例57
N-[2R-羥基-3-[[(2-氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯的制備在2R-羥基-3-[[(2-氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(0.22g，0.33mmol)的THF(3.00mL)溶液中加入三乙胺(0.11g，1.1mmol)和芐氧羰基琥珀酰亞胺(0.09g，0.36mmol)，并將反應混合物在室溫攪拌16小時。濃縮溶液，剩余物在EtOAc(15mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。有機相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。所得剩余物用反相HPLC純化，用10-90％CH3CH/H2O以70mL/min.的流速梯度洗脫(30min.).合并適當?shù)酿s分并凍干，得到純N-[2R-羥基-3-[[(2-氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯(0.12g，61％)為白色粉末。FABMSm/z＝566(M+H)；HRMSC29H36N5O5S(M+H)，計算值566.2437，實測值566.2434。
實施例58
2R-羥基-3-[[(2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺的制備將N-[2R-羥基-3-[[(2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸苯基甲酯(2.5g，0.4mmol)的的MeOH(10mL)和THF(50mL)溶液在室溫和60psi下及10％Pd/C(1.2g)存在下氫化16小時。過濾除去催化劑，減壓濃縮濾液。所得剩余物用乙醚研制，然后過濾。將這樣得到的固體物質用乙醚洗滌，真空干燥，得到純2R-羥基-3-[[(2-甲氧羰基氨基-苯并咪唑-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(1.5g，77％)為米白色粉末。Rt＝12.8min.；FABMSm/z＝490(M+H)；HRMSC23H32N5O5S(M+H)，計算值490.2124，實測值490.2142。
實施例59
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備將2-(S)-甲基-3-甲磺酰基丙酸(157.0mg，0.94mmol)，1-羥基苯并三唑水合物(144.0mg，0.94mmol)和1-(3-二甲氨基-丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(180.0g，0.94mmol)混合物溶解于二甲基甲酰胺(5.0mL)，并將溶液在室溫攪拌45分鐘。加入2R-羥基-3-[[(2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基)磺?；鵠(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(459mg，0.94mmol)和N-甲基嗎啉(202.0mg，2.0mmol)，并將反應物在室溫攪拌16小時。將溶液倒入乙酸乙酯(75mL)，乙酸乙酯相用10％乙酸水溶液(3×25mL)，飽和碳酸氫鈉水溶液(3×25mL)和飽和氯化鈉水溶液(25mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉干燥，真空除去溶劑。將所得剩余物溶解于熱乙酸乙酯(25mL)。將溶液冷卻到室溫，開始形成沉淀。加入己烷(25mL)，并將溶液在室溫攪拌2小時。真空過濾收集所得產物，得到純N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺為白色固體(395mg，65％)。FAB-MSC28H39N5O8S2，計算值m/z＝637(M+H)，實測值m/z＝644(M+Li)。
實施例60
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2-氨基苯并噻唑6-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺的制備在2-(S)-甲基-3-甲磺酰基丙酸(0.249g，1.5mmol)的5mL無水二甲基甲酰胺溶液中加入1.5當量N-羥基-苯并三唑，并將溶液在冰浴中冷卻。向該冷溶液中加入EDC(0.200g，1.5mmol)，并將溶液攪拌30分針。向溶液中加入2R-羥基-3-[[(2-氨基苯并噻唑-6-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(0.673g，1.5mmol)，并將反應物攪拌16小時。真空濃縮反應物，將剩余物溶解于乙酸乙酯，用5％硫酸氫鉀，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到粗油。經硅膠快速柱色譜純化，用1∶1∶0.1乙酸乙酯∶己烷∶甲醇洗脫，得到純N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2-氨基苯并噻唑-6-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺。FAB-MSm/z＝598.6(M+H)。
實施例61
N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-巰基丙酰胺的制備步驟AN-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(乙酰硫基)丙酰胺的制備將N-羥基苯并三唑(1.64g，10.7mmol)加到D-(-)-S-乙?；?β-巰基異丁酸(1.16g，7.1mmol)的12mL無水二甲基甲酰胺溶液中，并將溶液在冰浴中冷卻。向冷卻的溶液中加入EDC(1.5g，7.8mmol)，然后將反應物攪拌60分鐘。向溶液中加入2R-羥基-3-[[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺酰基](2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯基甲基)丙胺(3g，7.1mmol)，并將反應物攪拌16小時，同時升至室溫。除去溶劑，將剩余物在乙酸乙酯和5％硫酸氫鉀之間分配。有機相用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到3.7g(91％)所要產物為粗油。質譜m/z＝571.8(M+Li)。
步驟BN-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-巰基丙酰胺的制備將4.29g(7.8mmol)步驟A所得S-乙?；衔锏?00mL無水甲醇溶液在冰浴中冷卻。向溶液鼓入1分鐘無水氨。塞住溶液，并在室溫攪拌5小時以上。將反應物在旋轉蒸發(fā)器中濃縮，剩余物溶解于乙酸乙酯。有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到3.9g(95.6％)游離硫醇，無需進一步純化即可使用。質譜m/z＝529.8(M+Li)。
實施例62按照上面各實施例的方法制備列于表2-8各化合物。
表2
錄入號 R3R41 異丁基2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基2 異丁基2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基3 環(huán)戊基甲基2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基4 環(huán)己基甲基2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基5 戊基甲基 1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基6 己基甲基 1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基7 環(huán)戊基甲基苯并呋喃-5-基8 環(huán)己基甲基苯并呋喃-5-基9 戊基甲基 2，3-二氫苯并呋喃-5-基10 己基甲基 2，3-二氫苯并呋喃-5-基11 異丁基1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基12 異丁基苯并呋喃-5-基13 異丁基2，3-二氫苯并呋喃-5-基14 異丁基1，4-苯并二噁烷-6-基15 異戊基1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基16 異戊基2，3-二氫苯并呋喃-5-基17 異戊基1，4-苯并二噁烷-6-基18 異丁基苯并噻唑-6-基19 異丁基2-氨基-苯并噻唑-6-基20 異丁基苯并噁唑-5-基21 戊基甲基 2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基22 環(huán)己基甲基2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基表3A
錄入號 R5CH3-Ph-CH3CH2-PhCH2-CH3CH2CH2-PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2-C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2- (CH3)2CH2-CH2＝CHCH2-3-丙炔基表3B
錄入號 R5CH3-Ph-CH3CH2-PhCH2-CH3CH2CH2-PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2-C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2- (CH3)2CH2-CH2＝CHCH2-3-丙炔基表3C
錄入號 R5CH3-Ph-CH3CH2-PhCH2-CH3CH2CH2-PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2-C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2- (CH3)2CH2-CH2＝CHCH2-3-丙炔基表3D
錄入號 R5CH3- Ph-CH3CH2- PhCH2-CH3CH2CH2- PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2- C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2-(CH3)2CH2-CH2＝CHCH2- 3-丙炔基表3E
錄入號 R5CH3- Ph-CH3CH2- PhCH2-CH3CH2CH2- PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2- C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2-(CH3)2CH2-CH2＝CHCH2- 3-丙炔基表3F
錄入號R5CH3- Ph-CH3CH2- PhCH2-CH3CH2CH2- PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2- C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2-(CH3)2CH2-CH2＝CHCH2- 3-丙炔基表3G
錄入號R5CH3- Ph-CH3CH2- PhCH2-CH3CH2CH2- PhCH2CH2-CH3CH2CH2CH2- C6H11-CH3CH2CH2CH2CH2-(CH3)2CH2-CH2＝CHCH2- 3-丙炔基表4A
錄入號 R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2- C6H5SCH2-(4-CH3OC6H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-表4B
錄入號 R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2- C6H5SCH2-(4-CH3OC5H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-
表4C
錄入號R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2-C6H5SCH2-(4-CH3OC6H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-表4D
錄入號R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2-C6H5SCH2-(4-CH3OC6H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-
表4E
錄入號R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2-C6H5SCH2-(4-CH3OC6H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-表4F
錄入號R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2-C6H5SCH2-(4-CH3OC6H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-
表4G
錄入號R2(CH3)2CHCH2- (4-FC6H5)CH2-CH3CH2CH2CH2- (萘-2-基)CH2-CH3SCH2CH2- C6H11CH2-C6H5CH2-C6H5SCH2-(4-CH3OC6H5)CH2- (萘-2-基)SCH2-表5A
錄入號 R3
表5B
錄入號 R3
表5C
錄入號 R3
表5D
錄入號 R3
表5E
錄入號 R3
表6B
錄入號 R1
表6C
錄入號 R1
表6D
錄入號R1
表6E
錄入號R1
表6F
錄入號R1
表6G
錄入號R1
表7
錄入號 R4
表8A
錄入號R4
表8B
錄入號R4
表8C
錄入號 R4
表8D
錄入號 R4
實施例62本發(fā)明化合物是有效的HIV蛋白酶抑制劑。采用下述酶測定法可以得出列于這里公開的實施例中的化合物能夠抑制HIV酶的結論。本發(fā)明優(yōu)選化合物及其IC50(抑制50％的濃度，即在此濃度抑制劑化合物降低酶活性50％)計算值示于表9。這種酶法如下所述。底物是2-Ile-Nle-Phe(p-NO2)-Gln-ArgNH2.陽性對照是MVT-101(Miller，M.等人，《科學》(Science)，246，1149(1989))。測定條件如下測定緩沖液20mM磷酸鈉，pH6.420％甘油1mM EDTA1mM DTT0.1％CHAPS將上述底物溶解于DMSO，然后用10倍測定緩沖液稀釋。最終在測定物質中底物的濃度為80μM。將HIV蛋白酶在測定液中稀釋使最終酶濃度為12.3納摩爾(以分子量為10,780為基礎)。
DMSO的最終濃度為14％，甘油的最終濃度為18％。將試驗化合物溶解于DMSO，并用DMSO稀釋成10倍試驗濃度；加入10μL酶制劑；將上述物質混合，然后在室溫培養(yǎng)15分鐘。酶反應在添加40μL底物后開始。在室溫及4個時間點(0，8，16和24分鐘時)監(jiān)測熒光的增加。每種測定都在兩個同樣條件的(滴定)孔中進行。
用類似方法通過一般性或具體地替換用于上述實施例的反應劑和/或本發(fā)明的操作條件來重復上述實施例，取得類似的成功。
實施例63各種化合物的有效性是用上述酶測定法和CEM細胞測定法確定的。
急性感染細胞的HIV抑制測定法是主要基于比色測定法(Pauwles等人，《(病毒方法雜志》(J.Virol.Methods)，20，309-321(1988))的自動四唑鎓方法。測定在96孔組織培養(yǎng)板中進行。CEM細胞，屬于CD4+細胞系，在由10％乳牛血清提供的RPMI-1640培養(yǎng)基(Gibco)中生長，然后用1，5-二甲基-1，50-二氟十一亞甲基聚甲溴化物(polybrene)(2μg/mL)處理。將80μL含有1×104細胞的培養(yǎng)基分散到組織培養(yǎng)板的各孔中。在每個孔中加入溶解于組織培養(yǎng)基的100μL試驗化合物(或沒有試驗化合物的培養(yǎng)基作為對照)，使其達到所要的最終濃度，然后將細胞在37℃培養(yǎng)1小時。用培養(yǎng)基將冷凍的HIV-1培養(yǎng)物稀釋到5×104TCID50/mL濃度(TCID50＝感染組織培養(yǎng)物中50％細胞所需的病毒劑量)，并將20μL體積的病毒樣品(含有1000 TCID50病毒)加到含有試驗化合物或只含培養(yǎng)基(感染對比細胞)的各孔中。一些孔只有培養(yǎng)基而沒有病毒(非感染對比細胞)。同樣，在含有試驗化合物的幾個孔中加入沒有病毒的培養(yǎng)基可測定試驗化合物的內在毒性?？傊?，組織培養(yǎng)板中進行了下列幾組實驗細胞 藥物 病毒1 + - -2 + + -3 + - +4 + + +在實驗2和4中試驗化合物的最終濃度為1，10，100和500μg/mL。疊氮胸苷(AZT)或雙脫氧肌苷(ddI)均可用作藥物陽性對照實驗。將試驗化合物溶解于DMSO，并稀釋成組織培養(yǎng)基，而且在任何情況下最終DMSO濃度不得超過1.5％。以適當?shù)臐舛葘MSO加到所有對比孔中。
加入病毒之后將細胞在37℃和潮濕的含5％CO2的氣氛中培養(yǎng)7天。根據(jù)需要在第0，2和5天加入試驗化合物。在第7天，各孔已經感染的細胞重新懸浮起來，這時從每個孔移出100μL懸浮的細胞作為樣品用于測定。在每100μL細胞懸浮液中加入20μL 5mg/mL 3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)，并將細胞在27℃和含5％CO2的氣氛中培養(yǎng)4小時。培養(yǎng)過程中由于存活細胞而使MTT代謝還原，使帶色甲產物(a colored formazanproduct)在細胞中生成。在每個樣品中加入100μL 10％十二烷基硫酸鈉的0.01N HCl來裂解細胞，并將樣品培養(yǎng)過夜。用Moleculor Devices微量板讀數(shù)器(microplate reader)測定每個樣品在590nm處的吸收。將每個孔的吸收值進行比較以評價病毒的對比感染，非感染對比細胞響應以及試驗化合物的細胞毒性和抗病毒效率。
表9錄入號化合物 IC50EC50(nM) (nM)
表9(續(xù))錄入號化合物IC50EC50(nM)(nM)
本發(fā)明化合物是有效的抗病毒化合物，尤其是如上所述的有效的逆轉錄病毒抑制劑。因此，本發(fā)明化合物是有效的HIV蛋白酶抑制劑?？梢粤舷?，本發(fā)明化合物也將抑制其它逆轉錄病毒如其它慢病毒屬，特別是其它種HIV如HIV-2，人類T-細胞白血病病毒，呼吸道合胞病毒，猴免疫缺陷病毒，豬白血病病毒，豬免疫缺陷病毒，嗜肝DNA病毒，巨細胞病毒和小RNA病毒。因此，本發(fā)明化合物對于治療和預防逆轉錄病毒感染和/或防止逆轉錄病毒感染傳播是有效的。
本發(fā)明化合物還可以有效地防止逆轉錄病毒在溶液中生長。無論是人體還是動物的細胞培養(yǎng)物如T-淋巴細胞都可以用于各種已知的方法如研究和診斷方法，包括校準物或參照物。在細胞培養(yǎng)物生長和貯存之前和期間本發(fā)明化合物可以有效的濃度加到細胞培養(yǎng)基中來防止不希望或不需要的可能偶然地，未知地或可知地存在于細胞培養(yǎng)物中的逆轉錄病毒的復制。這些病毒可能原本就存在于細胞培養(yǎng)物中，例如，在能夠于血液中或通過將其暴露于病毒來檢測HIV很久以前就知道人體T-淋巴細胞中存在有HIV。本發(fā)明化合物的應用將防止?jié)撛谥旅哪孓D錄病毒向研究者或臨床醫(yī)生未知的或偶然的暴露。
本發(fā)明化合物可以具有一個或多個不對稱碳原子，因此，它們能夠以它們的光學異構體以及外消旋或非外消旋混合體形式存在。光學異構體可以根據(jù)常規(guī)方法通過外消旋混合體的拆分得到，例如，通過用光學活性酸或堿處理形成非對映體鹽得到。適當?shù)乃嵊芯剖?，二乙?；剖?，二苯甲?；剖?，二甲苯?；剖岷驼聊X磺酸。然后通過結晶分離非對映體混合物，隨后從這些鹽中釋放出光學活性堿。另一種分離光學異構體的方法是使用最佳選取的手性柱色譜法，最大限度的分離對映體。再一種可用的方法是通過式I化合物與活化形式的光學純酸或光學純異氰酸鹽反應實現(xiàn)共價非對映體分子的合成。合成的非對映體可通過常規(guī)方法如色譜法，蒸餾法，結晶法或升華法來分離，然后水解，實現(xiàn)對映體純化合物的傳送。式I的光學活性化合物同樣可以用光學活性的起始原料得到。這些異構體可以是游離酸，游離堿，酯或鹽的形式。
本發(fā)明化合物可以從無機或有機酸衍生的鹽的形式使用。這些鹽包括但不限于乙酸鹽，己二酸鹽，藻酸鹽，檸檬酸鹽，天冬氨酸鹽，苯甲酸鹽，苯磺酸鹽，硫酸氫鹽，丁酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，二葡糖酸鹽(digluconate)，環(huán)戊丙酸鹽，十二基硫酸鹽，乙磺酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，半硫酸鹽(hemisulfate)，庚酸鹽，己酸鹽，甲酸鹽，鹽酸鹽，氫溴化物，氫碘化物，2-羥基-乙磺酸鹽，乳酸鹽，馬來酸鹽，甲磺酸鹽，煙酸鹽，2-萘磺酸鹽，草酸鹽，棕櫚酸鹽，果膠(酯)酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，新戊酸鹽，丙酸鹽，琥珀酸鹽，酒石酸鹽，硫代氰酸鹽，甲苯磺酸鹽，甲磺酸鹽和十一酸鹽。另外，含堿性氮的基團也可以用下列物質季銨化低級烷基鹵化物，如甲基，乙基，丙基和丁基氯化物，溴化物和碘化物；二烷基硫酸酯，如二甲基，二乙基，二丁基和二戊基硫酸酯；長鏈烴鹵化物，如癸基，肉桂基，肉豆蔻基和硬脂酰氯化物，溴化物，碘化物；芳烷基鹵化物如芐基和苯乙基溴化物，以及其它物質。水或油溶性或分散性產物也可以因此得到。
可以用于形成可藥用酸加成鹽的酸包括無機酸，如鹽酸，硫酸和磷酸；有機酸，如草酸，馬來酸，琥珀酸和檸檬酸。其它實例包括與堿金屬或堿土金屬形成的鹽，如鈉，鉀，鈣或鎂，或與有機堿形成的鹽。
以單劑或分劑量給宿主給藥的全日劑量可以，例如，每日0.001至10mg/kg(體重)，更優(yōu)選0.01-1mg。藥劑組合物可以含有這個劑量的幾分之一，然后湊成日劑量。
可以與載體物質結合形成單劑的活性成分的用量將根據(jù)所要治療的宿主和具體給藥的方式而變化。
用本發(fā)明化合物和/或組合物治療疾病的劑量規(guī)則要根據(jù)各種因素選擇，包括類型，年齡，體重，性別，食欲和病人的醫(yī)療條件，疾病的嚴重程度，給藥途徑，藥理學考慮如所用具體化合物的活性，效率，藥物動力學和毒性學等情況，無論所用藥物傳送體系還是本化合物作為復合藥物的一部分給藥。因此，實際使用的劑量規(guī)則可以變化很大，而且可以從上述優(yōu)選的劑量規(guī)則衍生。
本發(fā)明化合物可根據(jù)需要以含有常規(guī)無毒可藥用載體，輔劑和賦形劑的劑量單位制劑進行口服，胃腸外，噴射吸入，直腸或局部給藥。局部給藥也可以經皮膚給藥如皮膚貼劑或離子電滲儀。這里所用術語“胃腸外”療法包括皮下注射，靜脈內，肌肉內，胸骨內注射或灌輸技術。
可注射制劑如消毒注射水或油性懸浮液可根據(jù)本領域已知方法用適當分散或潤濕劑和懸浮劑制劑。滅菌注射劑也可以滅菌注射溶液或無毒胃腸外可用的稀釋劑或溶劑構成的懸浮液，如1，3-丁二醇溶液。在可用賦形劑和溶劑中可以使用水，林格溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，滅菌穩(wěn)定油常被用作溶劑或懸浮介質。為此，任何無刺激穩(wěn)定油都可以使用，包括合成的單-或二甘油酯。另外，脂肪酸如油酸也可以用于注射劑的制備。
藥物直腸給藥用的栓劑可以通過藥物與適當聚乙二醇混合來制備，聚乙二醇在常溫下是固體，而在直腸溫度是液體，因此它在直腸內融化并釋放藥物。
用于口服給藥的固體劑型可以包括膠囊劑，片劑，丸劑，粉劑和粒劑。在這些固體劑型中活性化合物可以與至少一種惰性稀釋劑如蔗糖，乳糖或淀粉混合。在正常情況下除惰性稀釋劑外這些劑型還可以包含其它物質，例如，潤滑劑如硬脂酸鎂。膠囊劑，片劑和丸劑還可以含有緩沖劑。片劑和丸劑還可以另制腸溶包衣。
用于口服給藥的液體劑型可以包括含有本領域常用惰性稀釋劑如水的可藥用乳化劑，溶液，懸浮劑，漿液和酏劑。這些組合物也可以含有輔劑如潤濕劑，調味劑和芳香劑。
本發(fā)明化合物除了可以作為單一活性藥劑給藥外還可以與一種或多種免疫調節(jié)劑，抗病毒劑或其它抗感染藥劑結合使用。例如，本發(fā)明化合物可與AZT，DDI，DDC或葡糖苷酶抑制劑如N-丁基-1-脫氧野尻霉素或其前體藥物結合給藥預防和/或治療AlDS。如果是結合給藥可以是各分開的組合物在同時或不同時配劑給藥，或者將治療劑做成單一組合物形式。
上文僅僅是為了說明本發(fā)明而不是對公開化合物加以限制。對本領域技術人員來說是明顯的變化或改變都將屬于本發(fā)明的范圍和性質之內，所說范圍將在權利要求書中定義。
一個本領域技術人員可以從上文的描述很容易地確定本發(fā)明的主要特征，并且不背離其精神和范圍就可以對本發(fā)明進行各種變化和修改以適用于各種用法和條件。
權利要求
1.下式表示的化合物或其可藥用鹽、藥物前體或酯，
其中n和t分別代表0，1或2；R1代表氫，1-5個碳原子的烷基，2-5個碳原子的烯基，2-5個碳原子的炔基，1-3個碳原子的羥基烷基，有1-3個烷基和1-3個烷氧基碳原子的烷氧基烷基，1-3個碳原子烷基的氰基烷基，-CH2CONH2，-CH2CH2CONH2，-CH2S(O)2NH2，-CH2SCH3，-CH2S(O)CH3或-CH2S(O)2CH3基團；R2代表1-5個碳原于的烷基，1-3個碳原子烷基的芳烷基，1-3個碳原子烷基的烷硫基烷基，1-3個碳原子烷基的芳硫基烷基或1-3個碳原子烷基和3-6員環(huán)碳原子的環(huán)烷基烷基；R3代表1-5個碳原子的烷基，5-8員環(huán)的環(huán)烷基或3-6員環(huán)的環(huán)烷基甲基；R4代表苯并稠合的5-6員環(huán)的雜芳基或苯并稠合的5-6員環(huán)的雜環(huán)基；或R4代表下式基團，
其中A和B分別代表O，S，SO或SO2；R6代表氘，1-5個碳原子的烷基，氟或氯；R7代表氫，氘，甲基，氟或氯；或R4代表下式基團，
其中Z代表O，S或NH；及R9代表下列基團，
其中Y代表O，S或NH；X代表一個鍵，O或NR21；R20代表氫，1-5個碳原子的烷基，2-5個碳原子的烯基，2-5個碳原子的炔基，1-5個碳原子烷基的芳烷基，5-6員環(huán)和1-5個碳原子烷基的雜芳烷基，5-6員環(huán)和1-5個碳原子烷基的雜環(huán)烷基，2-5個碳原子的氨基烷基，2-5個碳原子烷基的N-單取代的或N，N-雙取代的氨基烷基，其中所說取代基為1-3個碳原子的烷基，1-3個碳原子烷基的芳烷基，1-5個碳原子的羧基烷基，1-5個碳原子烷基的烷氧羰基烷基，1-5個碳原子的氰基烷基或2-5個碳原子的羥基烷基；R21代表氫或1-3個碳原子的烷基；或-NR20R21代表56員雜環(huán)基；及R22代表1-3個碳原子的烷基或1-3個碳原子烷基的R20R21N-烷基；及R5代表1-5個碳原子的烷基，2-5個碳原子的烯基，2-5個碳原子的炔基或芳基取代的1-5個碳原子的烷基。
2.權利要求1化合物或其可藥用鹽、藥物前體或酯，其中n代表1；t代表1或2；R1代表氫，1-3個碳原子的烷基，2-3個碳原子的烯基，2-3個碳原子的炔基或氰基甲基；R2代表3-5個碳原子的烷基，芳甲基，1-3個碳原子烷基的烷硫基烷基，芳硫基甲基或5-6員碳環(huán)的環(huán)烷基甲基；R3代表1-5個碳原子的烷基，3-6員環(huán)的環(huán)烷基甲基，環(huán)己基或環(huán)庚基；R4代表2-氨基-苯并噻唑-5-基，2-氨基-苯并噻唑-6-基，苯并噻唑-5-基，苯并噻唑-6-基，苯并噁唑-5-基，2，3-二氫苯并呋喃-5-基，苯并呋喃-5-基，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基或1，4-苯并二噁烷-6-基；或R4代表下式基團
其中A和B分別代表O；R6代表氘，甲基，乙基，丙基，異丙基或氟；R7代表氫，氘，甲基或氟；或R4代表下式基團，
其中Z代表O，S或NH；及R9代表下列基團，
其中Y代表O，S或NH；X代表一個鍵，O或NR21；R20代表氫，1-5個碳原子的烷基，1-3個碳原子烷基的苯基烷基，5-6員環(huán)和1-3個碳原子烷基的雜環(huán)烷基，或2-3個碳原子烷基的N-單取代的或N，N-雙取代的氨基烷基，其中所說取代基為1-3個碳原子的烷基；及R21代表氫或甲基；或-NR20R21代表吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-甲基哌嗪基，4-芐基哌嗪基，嗎啉基或硫代嗎啉基；及R22代表1-3個碳原子的烷基；及R5代表1-5個碳原子的烷基，3-4個碳原子的烯基，3-4個碳原子的炔基或芳基取代的1-4個碳原子的烷基。
3.權利要求2化合物或其可藥用鹽、藥物前體或酯，其中R1代表氫，甲基，乙基或氰基甲基；R2代表異丁基，正丁基，CH3SCH2CH2-，苯硫基甲基，(2-萘硫基)甲基，芐基，4-甲氧基苯基甲基，4-羥基苯基甲基，4-氟苯基甲基或環(huán)己基甲基；R3代表丙基，異戊基，異丁基，丁基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)戊基甲基或環(huán)己基甲基；及R4代表苯并噻唑-5-基，苯并噻唑-6-基，苯并噁唑-5-基，2，3-二氫苯并呋喃-5-基，苯并呋喃-5-基，1，3苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氘-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基或1，4-苯并二噁烷-6-基；或R4代表下式基團，
其中Z代表O，S或NH；及R9代表下列基團，
其中Y代表O，S或NH；X代表-個鍵，O或NR21；R20代表氫，甲基，乙基，丙基，異丙基，異丁基，芐基，2-(1-吡咯烷基)乙基，2-(1-哌啶基)乙基，2(1-哌嗪基)乙基，2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基，2-(1-嗎啉基)乙基，2-(1-硫代嗎啉基)乙基或2-(N，N-二甲氨基)乙基；R21代表氫；及R22代表甲基；及R5代表1-5個碳原子的烷基或苯基取代的2-4個碳原子的烷基。
4.權利要求3化合物或其可藥用鹽、藥物前體或酯，其中R1代表甲基或乙基；R2代表芐基，4-氟苯基甲基或環(huán)己基甲基；R4代表苯并噻唑-5-基，苯并噻唑-6-基，2，3-二氫苯并呋喃-5-基，苯并呋喃-5-基，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2-甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二甲基-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基， 2，2-二氘-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基，1，4-苯并二噁烷-6-基，2-(甲氧羰基氨基)苯并噻唑-6-基或2-(甲氧羰基氨基)苯并咪唑-5-基；及R5代表甲基，乙基，丙基，異丙基或2-苯乙基。
5.權利要求1化合物，包括N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺；N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(1，4-苯并二噁烷-6-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺；N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(苯并噻唑-6-基)磺酰基]氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺；N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(苯并噻唑-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺；或N-[2R-羥基-3-[(2-甲基丙基)[(2，3-二氫苯并呋喃-5-基)磺?；鵠氨基]-1S-(苯基甲基)丙基]-2S-甲基-3-(甲磺?；?丙酰胺。
6.含有權利要求1化合物和可藥用載體的組合物。
7.抑制逆轉錄病毒蛋白酶的方法，包括給藥有效量的權利要求1化合物。
8.治療逆轉錄病毒感染的方法，包括給藥有效量的權利要求6組合物。
9.防止逆轉錄病毒復制的方法，包括給藥有效量的權利要求1化合物。
10.防止逆轉錄病毒體外復制的方法，包括給藥有效量的權利要求1化合物。
11.治療AIDS的方法，包括給藥有效量的權利要求6組合物。
全文摘要
所選磺?；轷０被u乙氨基磺酰胺被作為有效的逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑,特別是HIV蛋白酶抑制劑。本發(fā)明涉及這種逆轉錄病毒蛋白酶抑制劑,尤其是涉及所選的新化合物,組合物和抑制逆轉錄病毒蛋白酶如人體免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶,預防逆轉錄病毒感染或逆轉錄病毒的傳播,以及治療逆轉錄病毒感染的方法。
文檔編號C07D263/56GK1183767SQ96193609
公開日1998年6月3日 申請日期1996年3月7日 優(yōu)先權日1995年3月10日
發(fā)明者D·P·格特曼, G·A·德克雷辛佐, J·N·弗雷斯科斯, M·L·瓦奎茲, J·A·斯科爾斯基, B·瓦達斯, S·那加拉雅, J·J·麥多那爾德 申請人:G·D·瑟爾公司