專利名稱：含異羥肟酸的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療與基質(zhì)金屬蛋白酶活性，尤其是溶基質(zhì)素活性過度和/或有害相關(guān)的疾病的化合物。具體地說，本發(fā)明涉及含異羥肟酸的化合物。
背景技術(shù)：
許多酶能夠降解結(jié)構(gòu)蛋白，是結(jié)構(gòu)上相關(guān)的金屬蛋白酶。其中包括人皮膚成纖維細(xì)胞膠原酶，人皮膚成纖維細(xì)胞明膠酶，人痰膠原酶和明膠酶，以及人溶基質(zhì)素。這些和血管緊張素轉(zhuǎn)化酶及腦啡肽酶一樣，是含鋅的金屬蛋白酶。溶基質(zhì)素及其相關(guān)的酶在介導(dǎo)許多疾病的癥狀中起重要作用，其中包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Mullins，D.E.等，Biochim Biophys Acta(1983)695117-214)；骨關(guān)節(jié)炎(Henderson，B.等，未來藥物(Drugs of the Future(1990)15495-508)；腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移(Ibid，Broadhurst，M.J.等，歐洲專利申請276,436(公開于1987)，Reich，R.等，48癌癥研究(Cancer Res)3307-3312(1988))；各種潰瘍疾病。潰瘍性疾病可能因堿灼傷或因綠膿桿菌、棘變形蟲屬、單純皰疹和牛痘病毒感染而發(fā)生在角膜。
其它以基質(zhì)金屬蛋白酶活性有害為特征的疾病還包括牙周病，大皰性表皮松解和鞏膜炎。由于基質(zhì)金屬蛋白酶與多種疾病有關(guān)，所以一直在試圖制備這些酶的抑制劑。在現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)中公開了許多這類抑制劑。其實例包括1988年9月13日Wolanin等的美國專利No.4,771,038，1988年5月10日Dichens等的美國專利No.4,743,587，1993年12月29日公開的Broadhurst等的歐洲專利公報575,844，1993年5月13日公開的Isomura等的國際專利公報No.WO93/09090，1992年8月12日公開的Beckett等的歐洲專利公報498,665，和1993年2月2日Galardy等的美國專利No.5,183,900。在本領(lǐng)域眾所周知的是，基質(zhì)金屬蛋白酶的抑制劑可用于治療由結(jié)構(gòu)蛋白的降解引起或至少部分由其引起的疾病。雖然已經(jīng)制備出了許多抑制劑，但是人們?nèi)匀恍枰糜谥委熯@些疾病的化合物。本發(fā)明化合物是對已有的可用于治療這類病情和疾病的藥物的增補，這類疾病的特征是損傷結(jié)構(gòu)蛋白的蛋白質(zhì)其活性有害。
發(fā)明綜述本發(fā)明涉及可用作基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，并由此用于治療以這類酶的活性過度為特征的疾病的化合物。此外，與現(xiàn)有技術(shù)中的化合物不同，這些化合物降低了其肽的特征，從而能夠提高其生物利用度和穩(wěn)定性。這一改進(jìn)十分重要，因為現(xiàn)有抑制劑的肽的性特征典型性地因蛋白質(zhì)水解作用而限制了其生物利用度。
具體地說，本發(fā)明涉及結(jié)構(gòu)如結(jié)構(gòu)式(I)所示的化合物

其中(A)(1)R1是氫，烷基，雜烷基，烯基，芐基，雜環(huán)，碳環(huán)，烴氧基，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基，碳環(huán)-雜烷基，雜環(huán)-雜烷基，碳環(huán)-硫代，雜環(huán)-硫代；(2)R2是氫，烷基，烯基，炔基，雜環(huán)，碳環(huán)，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基，或碳環(huán)-雜烷基；(3)R3是氫，烷基，碳環(huán)或雜環(huán)；(4)R4是烷基，雜烷基，烷基氨基，酰基氨基，羧基烷基，氨基烷基，碳環(huán)，雜環(huán)，雜環(huán)-雜烷基，雜環(huán)-烷基，或能夠帶電的基團(tuán)；和(5)R5是(a)-O-R6，其中的R6是氫，烷基或芐基；(b)-N(R9)CH(R10)(R11)，其中(i)R9是氫或烷基；和(ii)R10和R11各自為氫，烷基，芳基烷基，烴氧基酰基或氨基?；?；或(iii)R9和R10連同它們相連的氮原子和碳原子構(gòu)成一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；(c)氨基酸或具有2至3個氨基酸的肽，其中所述的氨基酸或肽通過其氨基與結(jié)構(gòu)式(I)相連；(d)烷基；(e)烯基；(f)碳環(huán)-烷基；或(g)碳環(huán)-烯基；(B)以及，其中(1)R3和R4可以共同構(gòu)成一個3-9個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；一個4-9個原子的多環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的單環(huán)雜環(huán)；或者
(2)R4和R5可以共同構(gòu)成一個3-13個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；或它們的藥學(xué)上認(rèn)可的鹽，可生物水解的酰胺或可生物水解的酯。
這些化合物至少能夠抑制一種哺乳動物基質(zhì)金屬蛋白酶。所以，在另一方面，本發(fā)明涉及含有結(jié)構(gòu)式(I)化合物的藥物組合物，以及使用這些化合物或含有這些化合物的藥物組合物治療以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病的方法。
可以通過將本發(fā)明化合物與某種靶向配體結(jié)合來命中出現(xiàn)于特定的不希望的部位的基質(zhì)金屬蛋白酶，這種配體對于上述部位的某種標(biāo)記，例如某種抗體或抗體片段或受體配體具有專一性。
本發(fā)明還涉及各種利用了這些化合物獨特特性的其它方法。所以，在另一方面，本發(fā)明涉及與固體載體結(jié)合的結(jié)構(gòu)式(I)化合物。這些結(jié)合物可用作純化所需基質(zhì)金屬蛋白酶的親和試劑。
在另一方面，本發(fā)明涉及與標(biāo)記結(jié)合的結(jié)構(gòu)式(I)化合物。因為本發(fā)明化合物與至少一個基質(zhì)金屬蛋白酶結(jié)合，可將標(biāo)記用于在體內(nèi)或體外細(xì)胞培養(yǎng)物中檢測較高濃度基質(zhì)金屬蛋白酶的存在。
此外，結(jié)構(gòu)式(I)化合物可以與載體結(jié)合，從而可將這些化合物用于免疫過程來制備特異性地與本發(fā)明化合物發(fā)生免疫反應(yīng)的抗體。然后，這些抗體既可用于治療，又可用于檢測抑制劑的劑量。
具體說明本發(fā)明化合物是哺乳動物基質(zhì)金屬蛋白酶的抑制劑。這些化合物具有結(jié)構(gòu)式I所示的結(jié)構(gòu)

其中(A)(1)R1是氫，烷基，雜烷基，烯基，芐基，雜環(huán)，碳環(huán)，烴氧基，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基，碳環(huán)-雜烷基，雜環(huán)-雜烷基，碳環(huán)-硫代，或雜環(huán)-硫代；(以氫，烷基或碳環(huán)-烷基為佳；氫，甲基，乙基，異丙基或2-苯乙基更好)(2)R2是氫，烷基，烯基，炔基，雜環(huán)，碳環(huán)，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基，或碳環(huán)-雜烷基；(以C4-C10烷基，C4-C10烯基或碳環(huán)烷基為佳；癸基，2-甲基丙基，2-苯乙基或3-苯丙基更好)；(3)R3是氫，烷基，碳環(huán)或雜環(huán)；(以氫，烷基為佳；氫，甲基或乙基更好；以氫最佳)(4)R4是烷基，雜烷基，烷基氨基，?；被?，羧基烷基，氨基烷基，碳環(huán)，雜環(huán)，雜環(huán)-雜烷基，雜環(huán)-烷基，或能夠帶電的基團(tuán)；(以2-甲基丙基，羧基甲基，2-羧基乙基，4-氨基丁基，2-苯基乙基，3-苯基丙基，芐基或3-胍基丙基)為佳和(5)R5是(a)-O-R6，其中的R6是氫，烷基或芐基；(b)(較好的是)-N(R9)CH(R10)(R11)，其中(i)R9是氫或烷基；和(ii)R10和R11各自為氫，烷基，芳基烷基，烴氧基?；虬被；?；(較好的是，R10或R11的一個為氫)或(iii)R9和R10連同它們相連的氮原子和碳原子構(gòu)成一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；(c)氨基酸或具有2至3個氨基酸的肽，其中所述的氨基酸或肽通過其氨基與結(jié)構(gòu)式(I)相連；(d)烷基；(e)烯基；(f)碳環(huán)-烷基；或(g)碳環(huán)-烯基；(B)以及，其中(1)R3和R4可以共同構(gòu)成一個3-9個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；(以飽和的單環(huán)或多環(huán)碳環(huán)為佳，飽和單環(huán)碳環(huán)更好)或者(2)R4和R5可以共同構(gòu)成一個3-13個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；或它們的藥學(xué)上認(rèn)可的鹽，可生物水解的酰胺或可生物水解的酯。
較好的結(jié)構(gòu)式(I)化合物是R3，R4和R5都不結(jié)合成環(huán)的那些；以及只有R3和R4共同形成一個環(huán)的那些。最好的是R3，R4和R5都不結(jié)合成環(huán)的那些。
較好的R5基團(tuán)實例包括但不限于

專用語的定義與使用以下是本文中一系列專用語的定義。
“?；被颉棒驶笔囚人崛コu基后形成的基團(tuán)(即R-C(＝O))。較好的?；鶊F(tuán)包括(例如)乙?；?，甲?；捅；?。
“酰氧基”是具有?；〈难趸?即-O-酰基)；例如，-O-C(＝O)-烷基。
“?；被笔蔷哂絮；〈陌被?即-N-?；?；例如，-NH-C(＝O)-烷基。
“烴氧基?；笔蔷哂袩N氧基(-O-R-)取代基的?；?-C(＝O)-)，例如-C(＝O)-O-烷基。
“烯基”是具有2至15個碳原子的取代或非取代烴鏈基團(tuán)；除非另作說明，以2至10個碳原子為佳；4-10個碳原子更好。較好的是具有至少一個烯烴雙鍵的烯基取代基(包括例如乙烯基，烯丙基或丁烯基)。
“炔基”是具有2至15個碳原子的取代或非取代烴鏈基團(tuán)；除非另作說明，以2至10個碳原子為佳；4-10個碳原子更好。鏈中具有至少一個碳-碳三鍵。
“烴氧基”是具有烴鏈取代基的氧基，其中的烴鏈?zhǔn)峭榛蛳┗?即-O-烷基或-O-烯基)。較好的烴氧基包括(例如)甲氧基，乙氧基，丙氧基或烯丙氧基。
“烷基”是非取代或取代的，具有1至15個碳原子的飽和烴鏈基團(tuán)；除非另作說明，以1至10個碳原子為佳；4至10個碳原子更好。較好的烷基包括(例如)取代或非取代的甲基，乙基，丙基、異丙基和丁基。
“烷基氨基”是具有一個或兩個烷基取代基的胺基(即-N-烷基)。
“氨基?；笔蔷哂幸粋€氨基取代基的酰基(即-C(＝O)-N)；例如，-C(＝O)-NH2。氨基?；械陌被鶊F(tuán)可以是非取代的(即伯胺)或被一個或兩個烷基取代，即形成仲胺或叔胺。
“芳基”是芳香族的碳環(huán)基團(tuán)。較好的芳基基團(tuán)包括(例如)，苯基，甲苯基，二甲苯基，異丙苯基和萘基。
“芳基烷基”是被芳基取代的烷基，較好的芳基烷基包括芐基、苯乙基和苯基丙基。
“芳基氨基”是被一個芳基取代的胺基(即-NH-芳基)。
“芳氧基”是具有一個芳基取代基的氧基(即-O-芳基)。
“能夠帶電”指能夠帶電荷的基團(tuán)(例如季銨基團(tuán))，或在合適的pH下會帶電的基團(tuán)(如羧基或氨基)。
“碳環(huán)”是非取代或取代，飽和、不飽和或芳香族的烴環(huán)基團(tuán)。碳環(huán)是單環(huán)，或是稠環(huán)，橋環(huán)或螺環(huán)之類多環(huán)體系。單環(huán)碳環(huán)通常含有3至9個原子，3至6個更好。但是，如果R4和R5一起成環(huán)，這樣的單環(huán)以具有3-13個原子為佳。多環(huán)碳環(huán)含有7至17個原子，以7至13個為佳。
“碳環(huán)-烷基”是被一個碳環(huán)取代的非取代或取代烷基。碳環(huán)以芳基或環(huán)烷基為佳；芳基更好。較好的碳環(huán)-烷基包括芐基，苯乙基和苯基丙基。
“碳環(huán)-雜烷基”是被一個碳環(huán)取代的非取代或取代的雜烷基。碳環(huán)以芳基或環(huán)烷基為佳；芳基更好。雜烷基最好是2-氧雜丙基，2-氧雜乙基，2-硫雜丙基，2-硫雜乙基。
“碳環(huán)-硫代”是被一個碳環(huán)取代的硫原子。碳環(huán)以芳基或環(huán)烷基為佳；芳基更好。
“羧基烷基”是被一個羧基(即-C(＝O)OH)取代的非取代或取代烷基。
“環(huán)烷基”是飽和碳環(huán)基團(tuán)。較好的環(huán)烷基包括(例如)環(huán)丙基，環(huán)丁基和環(huán)己基。
“環(huán)雜烷基”是飽和的雜環(huán)。較好的環(huán)雜烷基包括(例如)嗎啉，哌啶，哌嗪和呋喃(furanyl)。
“稠環(huán)”是疊加在一起，例如共有兩個環(huán)原子的環(huán)。一個環(huán)可以與一個以上的環(huán)稠合。
“雜環(huán)-烷基”是被一個雜環(huán)取代的非取代或取代烷基。雜環(huán)基團(tuán)以芳基或環(huán)雜烷基為佳；芳基更好。
“雜環(huán)-雜烷基”是被一個雜環(huán)取代的非取代或取代雜烷基。雜環(huán)基團(tuán)以芳基或環(huán)雜烷基為佳；芳基更好。
“雜環(huán)-硫代”是被一個雜環(huán)取代的硫原子。雜環(huán)基團(tuán)以芳基或環(huán)雜烷基為佳；芳基更好。
“雜原子”是氮，硫或氧原子。含有一個或多個雜原子的基團(tuán)可能含有不同的雜原子。
“雜烷基”是非取代或取代的，具有3至8個原子其中包括碳原子以及1或2個雜原子的飽和鏈基團(tuán)。
“雜環(huán)”是非取代或取代，飽和、不飽和或芳香族的環(huán)基，其中在環(huán)中包含碳原子和一個或多個雜原子。雜環(huán)是單環(huán)，或稠環(huán)、橋環(huán)或螺環(huán)等多環(huán)體系。單環(huán)雜環(huán)含有3至9個原子，4至7個原子更好。多環(huán)雜環(huán)含有7至17個原子，7至13個更好。
“雜芳基”是芳香族雜環(huán)基團(tuán)。較好的雜芳基包括(例如)噻吩基，呋喃基，吡咯基，吡啶基，吡嗪基，噻唑基，嘧啶基，喹啉基和四唑基。
“鹵代”，“鹵素”或“鹵化物”指氯、溴、氟或碘原子基團(tuán)。較好的鹵化物是氯和氟。
此外，本文中的“低級”烴基(例如“低級”烷基)指具有1至6個碳原子的烴鏈，1至4個更好。
“藥學(xué)上認(rèn)可的鹽”指在任意的酸基團(tuán)(例如羧基)處形成的陽離子鹽，或在任意的堿基團(tuán)(例如氨基)處形成的陰離子鹽。許多的這類鹽在本領(lǐng)域是眾所周知的，例如在Johston等于1987年9月11日公開的國際專利公報87/05297中所說明的(在此引用參考)。較好的陽離子鹽包括堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)，和堿土金屬鹽(例如鎂鹽和鈣鹽)。較好的陰離子鹽包括鹵化物(例如氯化物)。
“可生物水解的酯”指基本上不干擾該化合物的抑制活性的異羥肟酸的酯，或者該酯很容易在人或其它較低級動物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性的異羥肟酸。這樣的酯包括不會干擾異羥肟酸生物活性的那些。許多這類酯在本領(lǐng)域是眾所周知的，例如在Johnston等于1987年9月11日公開的國際專利公報87/05297中所說明的(在此引用參考)。這類酯包括低級烷基酯，低級酰氧基烷基酯(例如乙酰氧基甲基酯，乙酰氧基乙基酯，氨基羰基氧基甲基酯，新戊酰氧基甲基酯和新戊酰氧基乙基酯)，內(nèi)酯(例如2-苯并[c]呋喃酮基酯和硫代苯酞酯)，低級烴氧基酰氧基烷基酯(例如甲氧基羰基氧基甲基酯，乙氧基羰基氧基乙基酯和異丙氧基羰基氧基乙基酯)，烴氧基烷基酯，膽堿酯和烷基?；被榛?例如乙酰胺基甲基酯)。
“可生物水解的酰胺”指結(jié)構(gòu)式(I)化合物的酰胺，它不會影響這些化合物的金屬蛋白酶抑制活性，或者它們很容易在人或其它較低級動物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為具有活性的結(jié)構(gòu)式(I)所示的化合物。這些酰胺包括不會干擾結(jié)構(gòu)式(I)化合物生物活性的那些。許多這類酰胺是本領(lǐng)域眾所周知的，其中包括低級烷基酰胺(例如乙酰胺，丙酰胺等)，氨基酸酰胺(例如甘氨酰胺，丙氨酰胺，脯氨酰胺等)，多肽酰胺(例如丙氨酰丙氨酰胺，甘氨酰脯氨酰胺等)，烴氧基甲酰胺(例如甲氧基甲酰胺，芐氧基甲酰胺等)和烷基氨基甲酰胺(例如甲基氨基甲酰胺，乙基氨基甲酰胺等)。
“溶劑化物”指由溶質(zhì)(例如異羥肟酸)與溶劑(例如水)結(jié)合形成的復(fù)合物。參見J.Honig等，Van Nostrand化學(xué)詞典(The Van Nostrand Chemist’sDictionary)，p.650(1953)。本發(fā)明使用的藥學(xué)上認(rèn)可的溶劑包括不影響異羥肟酸生物活性的那些(例如水，乙醇，乙酸，N，N-二甲基甲酰胺)。
按照以上定義及本文中的使用，取代基本身可以是被取代過的。這樣的取代可以是單取代或多取代。這樣的取代基包括C.Hansch和A.Leo在“用于化學(xué)及生物學(xué)中相關(guān)性分析的取代基常數(shù)”(Substituent Constants for CorrelationAnalysis in Chemistry and Biology(1979))中所列出的那些，在此引用參考。較好的取代基包括(例如)烷基，烯基，烴氧基，羥基，氧代，硝基，氨基，氨基烷基(例如氨基甲基等)，氰基，鹵代，羧基，烴氧基?；?例如乙酯基(carboethoxy)等)，硫羥基，芳基，環(huán)烷基，雜芳基，雜環(huán)烷基(例如哌啶基，嗎啉基，吡咯烷基等)，亞氨基，硫代，羥基烷基，芳基氧基，芳基烷基，以及它們的組合。
本文中“哺乳動物基質(zhì)金屬蛋白酶”指在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的酶，它能夠在合適的試驗條件下催化膠原、明膠或蛋白多糖的降解。合適的試驗條件可參見例如美國專利No4,743,587，該專利引證了Cawston等在“分析生物化學(xué)”(AnalBiochem)(1979)99；340-345中所述的方法，Weingarten，H.等在“生物化學(xué)生理學(xué)研究通訊”(Biochem Biophy Res Comm)(1984)1391184-1187中描述了一種合成底物的使用。當(dāng)然，任何一種用于分析這類結(jié)構(gòu)蛋白降解作用的標(biāo)準(zhǔn)方法都可以使用。本文中提到的基質(zhì)金屬蛋白酶都是含鋅蛋白酶，它們在結(jié)構(gòu)上類似于人的溶基質(zhì)素或皮膚成纖維細(xì)胞膠原酶。當(dāng)然，可以在上述的試驗中測試候選化合物抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的活性。可使用分離的基質(zhì)金屬蛋白酶來證實本發(fā)明化合物的抑制活性，或者也可以使用含有這類能夠使組織降解的酶的粗提取物?；衔镆韵率潜景l(fā)明范圍內(nèi)的一系列較好的化合物，但不是全部。








通常，可利用以下方法來制備結(jié)構(gòu)式(I)的異羥肟酸化合物。衍生自N-烷基甘氨酸或N-烷基D-氨基酸的適當(dāng)保護(hù)(O-被保護(hù)或N，O-被保護(hù))的異羥肟酸與適當(dāng)取代的羧酸偶合?？梢允褂枚喾N碳化二亞胺試劑，以及混合酸酐法，或者肽偶合中常用的其他偶合法。用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)方法除去保護(hù)基團(tuán)后可得到所需的化合物。
組合物本發(fā)明的組合物包括(a)安全有效量的結(jié)構(gòu)式(I)化合物和(b)藥學(xué)上認(rèn)可的載體。
如上所述，許多疾病已知是由具破壞基質(zhì)的作用的金屬蛋白酶活性過度或有害而引起的。其中包括腫瘤轉(zhuǎn)移，骨關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，皮膚炎癥，潰瘍，特別是角膜潰瘍，對感染的反應(yīng)，牙周炎等。所以，本發(fā)明化合物可有效地治療與這種有害的活性相關(guān)的疾病。
所以，可將本發(fā)明化合物配制成用于治療或預(yù)防這類疾病的藥物組合物。使用的是標(biāo)準(zhǔn)藥物制劑技術(shù)。例如Remington藥物科學(xué)(Remington’sPharmaceutical Sciences)，Mach Publishing Company，Easton，Pa.，最新版中所述的那些方法。
“安全有效量”的結(jié)構(gòu)式(I)化合物指按照本發(fā)明的方法使用時，該量能夠在人或其它較低級動物體內(nèi)在活性部位有效地抑制基質(zhì)金屬蛋白酶，但沒有不良的副作用(例如毒性，刺激性或過敏反應(yīng))，相當(dāng)于具有合理的療效/風(fēng)險比。顯然，具體的“安全有效量”根據(jù)以下因素而不同，例如具體需要治療的病情，病人的生理情況，療程，同時進(jìn)行的治療(如果使用)的特性，具體的使用劑型，使用的載體，結(jié)構(gòu)式(I)化合物在其中的溶解度，和組合物較適宜的劑量方案。
本發(fā)明組合物最好是單位劑型的。本文中，“單位劑型”指根據(jù)較好的臨床實踐，適于以單劑量形式給人或其它較低級動物施用的本發(fā)明組合物，其中含有一定量結(jié)構(gòu)式(I)化合物。這些組合物宜包含約5mg(毫克)至約1000mg結(jié)構(gòu)式(I)化合物，約10mg至約500mg更好，約10mg至300mg還要好。
本發(fā)明組合物可以有多種劑型，可為(例如)適于口服、直腸給藥、外用或注射給藥的任意一種。根據(jù)要求的具體給藥途徑，可以使用多種本領(lǐng)域眾所周知的藥學(xué)上認(rèn)可的載體。其中包括固體或液體填充劑，稀釋劑，助水溶劑，表面活性劑和包囊物質(zhì)。其中可包含任選的藥物活性成份，這些成份應(yīng)基本上不影響結(jié)構(gòu)式(I)化合物的抑制活性。與結(jié)構(gòu)式(I)化合物聯(lián)用的載體的量應(yīng)足夠提供實用數(shù)量的物質(zhì)以用于按單位劑量施用結(jié)構(gòu)式(I)化合物。以下參考文獻(xiàn)中描述了用于制造本發(fā)明方法中所用劑型的技術(shù)和配方，全部文獻(xiàn)均在此引用參考現(xiàn)代制藥學(xué)(Morden Pharmaceutics)，第9章和第10章(Banker&Rhodes編，1979)；Lieberman等，藥物劑型片劑(Pharmaceutical Dosage FormsTablet)(1981)；Ansel，藥物劑型導(dǎo)論(Introduction to Pharmaceutical DosageForms)第2版(1976)。
具體地說，適于全身給藥的藥學(xué)上認(rèn)可的載體包括糖，淀粉，纖維素及其衍生物，麥芽，明膠，滑石粉，硫酸鈣，植物油，合成油，多元醇，藻酸，磷酸鹽緩沖液，乳化劑，等滲鹽水和無熱原水。適于注射給藥的載體包括丙二醇，油酸乙酯，吡咯烷酮，乙醇和芝麻油。較好的是，在注射給藥的組合物中，藥學(xué)上認(rèn)可的載體至少占組合物總重的約90％。
各種口服劑型均可使用，其中包括片劑、膠囊、顆粒劑和粗粉劑等固體劑型。這些口服劑型中含有安全有效量的結(jié)構(gòu)式(I)化合物，通常至少約5％，約25％至約50％更好。片劑可以是壓制片，研制片，腸溶片，糖衣片，膜衣片或多層壓制片，其中含有合適的粘合劑，潤滑劑，稀釋劑，崩解劑，色素，調(diào)味劑，助流劑和助熔劑。液體口服劑型包括水溶液，乳劑，懸浮劑，由非泡騰顆粒再生而成的溶液和/或懸浮劑，以及由泡騰顆粒再生而成的泡騰劑，其中含有合適的溶劑，防腐劑，乳化劑，懸浮劑，稀釋劑，甜味劑，助熔劑，色素和調(diào)味劑。較好的用于口服的載體包括明膠，丙二醇，棉籽油和芝麻油。
本發(fā)明的組合物還可以外用，即將組合物直接敷于或分散于受試者的表皮或上皮組織。這樣的組合物包括例如洗劑，霜劑，溶液，凝膠劑和固體。這些外用組合物宜含有安全有效量的結(jié)構(gòu)式(I)化合物，通常至少約0.1％，約1％至約5％更好。合適的外用載體最好能以連續(xù)膜的形式保留在皮膚上適當(dāng)位置，不會因出汗或浸水而流失。通常，載體是有機的，而且能夠?qū)⒔Y(jié)構(gòu)式(I)化合物分散或溶解于其中。這樣的載體包括藥學(xué)上認(rèn)可的潤膚劑，乳化劑，增稠劑和溶劑。
給藥方法本發(fā)明還提供了治療或預(yù)防人或其它較低級動物體內(nèi)與基質(zhì)金屬蛋白酶活性過度或有害相關(guān)的疾病的方法，即給所述的受試者施用安全有效量的結(jié)構(gòu)式(I)化合物。本文中，“與基質(zhì)金屬蛋白酶活性過度或有害相關(guān)的疾病”指各種以基質(zhì)蛋白降解為特征的疾病。本發(fā)明方法可用于治療例如骨關(guān)節(jié)炎，牙周病，角膜潰瘍，腫瘤轉(zhuǎn)移，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。
本發(fā)明的結(jié)構(gòu)式(I)化合物和組合物可以外用或全身給藥。全身給藥包括將結(jié)構(gòu)式(I)化合物引入機體組織的任意方法，例如關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥(尤其是在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療中)，鞘內(nèi)給藥，硬膜外給藥，肌內(nèi)給藥，透皮給藥，靜脈內(nèi)給藥，牙周內(nèi)給藥，皮下給藥，舌下給藥，直腸給藥和口服。本發(fā)明的結(jié)構(gòu)式(I)化合物以口服為佳。
抑制劑的具體給藥劑量與療程相互聯(lián)系。劑量與療程還取決于以下因素例如具體施用的結(jié)構(gòu)式(I)化合物，治療適應(yīng)癥，結(jié)構(gòu)式(I)化合物在需要抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的部位達(dá)到最低抑制濃度的能力，受試者的個人特性(例如體重)，對治療方案的順應(yīng)性，以及治療方法任何副作用的產(chǎn)生與程度。
通常，對成人(體重約70kg)，每天施用約5mg至約3000mg結(jié)構(gòu)式(I)化合物，約5mg至約1000mg較好，約10mg至約100mg更好。應(yīng)當(dāng)理解，這些劑量范圍只是舉例，日劑量可根據(jù)上述因素進(jìn)行調(diào)整。
治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的較好的給藥方法是口服或關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射。正如本領(lǐng)域已知和所實踐的，所有用于注射的制劑都必需是無菌的。對于哺乳動物，尤其是人(假設(shè)體重約70kg)，個體劑量以約10mg至約1000mg為宜。
較好的全身給藥方法是口服。個體劑量以約10mg至約1000mg為宜，約10mg至300mg更好。
可通過外用來對全身給予結(jié)構(gòu)式(I)化合物，或?qū)κ茉囌哌M(jìn)行局部治療。結(jié)構(gòu)式(I)化合物的外用量取決于皮膚的敏感性，需要治療的組織的類型及其位置，施用的組合物和載體(如果有)，具體施用的結(jié)構(gòu)式(I)化合物，以及具體需要治療的疾病和要求達(dá)到的全身(區(qū)別于局部性)效果的程度等因素。
對全身治療的適應(yīng)癥來說，化合物以口服為佳。這些適應(yīng)癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎和腫瘤轉(zhuǎn)移。
利用靶向配體，本發(fā)明的抑制劑可以達(dá)到發(fā)生基質(zhì)金屬蛋白酶蓄積的特定位置。例如，為了使抑制劑達(dá)到腫瘤中的基質(zhì)金屬蛋白酶，可將抑制劑與某種抗體或其片段結(jié)合，這些抗體或其片段，正如免疫毒素的制備中眾所周知的，可與某種腫瘤標(biāo)記發(fā)生免疫反應(yīng)。靶向配體還可以是適合于腫瘤上某受體的配體。任何能與預(yù)期的靶組織的標(biāo)記發(fā)生特異性反應(yīng)的靶向配體均可使用。將本發(fā)明化合物與靶向配體偶合的方法是眾所周知的，而且與下文中與載體偶合的方法類似?？扇缜拔乃鰧⒔Y(jié)合物配成制劑施用。
對于局部疾病，以外用為宜。例如，為了治療角膜潰瘍，可對患眼直接施滴眼液或氣霧劑之類的制劑。用于角膜的治療，還可以將本發(fā)明化合物配制成凝膠劑或軟膏劑，或者可以將其包裹在膠原或親水性聚合物眼罩之中。也可以將材料作為接觸鏡片或貯庫或結(jié)膜下制劑的形式進(jìn)行內(nèi)置。用于治療皮膚炎癥，化合物可以凝膠劑、糊劑、膏藥或軟膏劑的形式局部外用。所以，治療的方式反映了病情的特性，在本領(lǐng)域中，任意選定途徑的合適制劑是可變的。
當(dāng)然，在前文中，本發(fā)明化合物可單獨施用也可以以混合物形式施用，組合物中還可以包含對適應(yīng)癥來說合適的其它藥物或賦形劑。
本發(fā)明的有些化合物還能夠在通常低于作用于哺乳動物金屬蛋白酶的濃度水平抑制細(xì)菌金屬蛋白酶。有些細(xì)菌金屬蛋白酶似乎對抑制劑的立體化學(xué)特性依賴性較低，但是非對映體之間在使哺乳動物蛋白酶失活的能力上被發(fā)現(xiàn)有顯著不同。所以，這種活性的模式可被用于區(qū)別哺乳動物的酶和細(xì)菌的酶。
抗體的制備和使用也可將本發(fā)明化合物用在免疫過程中，以制取對本發(fā)明化合物具有免疫特異性的抗血清。由于本發(fā)明化合物相對較小，它們可方便地與抗原性中性的載體，例如常用的鑰孔蝛血藍(lán)素(KLH)或血清白蛋白載體偶合。對那些具有羧基官能度的本發(fā)明化合物來說，可利用本領(lǐng)域眾所周知的方法來進(jìn)行與載體的偶合。例如，可將羧基殘基還原成醛，然后通過與蛋白質(zhì)載體的側(cè)鏈氨基反應(yīng)來進(jìn)行偶合，然后可隨意還原形成的亞氨鍵。也可以使用例如二環(huán)己基碳化二亞胺或其它碳化二亞胺脫水劑之類的縮合劑，使羧基殘基與側(cè)鏈氨基反應(yīng)。
也可以使用接頭化合物來進(jìn)行偶合同雙官能接頭和雜雙官能接頭都能夠向Pierce Chemical Company，Rockford，I11購得。然后可將形成的免疫原性復(fù)合物注射入合適的哺乳動物受試者，例如小鼠，家兔等。合適的免疫過程包括，按照程序在佐劑的存在下重復(fù)注射免疫原，從而加強血清中抗體的產(chǎn)生。利用本領(lǐng)域中目前標(biāo)準(zhǔn)的免疫測試法，使用本發(fā)明化合物為抗原，可方便地測得免疫血清的滴度。
可直接使用獲得的抗血清，或者采集外周血淋巴細(xì)胞或免疫動物的脾，使抗體產(chǎn)生細(xì)胞增殖，然后使用標(biāo)準(zhǔn)免疫測試技術(shù)鑒定合適的抗體細(xì)胞，制取單克隆抗體。
然后，可將多克隆制品或單克隆制品用于檢測涉及本發(fā)明化合物的治療或預(yù)防方法。在療程的不同時刻，利用使用本發(fā)明抗體制品的標(biāo)準(zhǔn)免疫技術(shù)，可對合適的樣本，例如采自血液、血清、尿液或唾液的樣本檢測其中是否存在所給予的抑制劑。
本發(fā)明的化合物還可以利用標(biāo)準(zhǔn)偶合法與閃爍照相標(biāo)記之類的標(biāo)記物，例如锝99或1-131偶合。給受試者施用標(biāo)記后的化合物，以確定體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶過量的位置。抑制劑選擇性地與基質(zhì)金屬蛋白酶結(jié)合的能力有利于原位反映這些酶的分布。該技術(shù)還可用在組織學(xué)方法中，而且標(biāo)記的本發(fā)明化合物可用在競爭性免疫測定中。
以下非限制性的實施例說明了本發(fā)明的化合物，組合物，方法及用途。
實施例13-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-異丁基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺的合成

4-甲基戊酸(150g，1.3mol)溶解在150ml苯中。緩慢加入草酰氯(163g，1.3mol)，將混合物加熱至50℃后攪拌1.5小時。產(chǎn)物經(jīng)140-145℃蒸餾得1。
在氬氣氛下將(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮(100g，565mmol)溶解在800ml四氫呋喃(THF)中，并冷卻至-78℃。滴加正丁基鋰(250ml，620mmol，2.5M的己烷溶液)，然后攪拌混合物15分鐘。緩慢加入4-甲基戊酰氯，1，(83.4g，85.7ml，620mmol)并繼續(xù)攪拌2小時后，用氯化銨終止反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取。用4∶1的己烷EtOAc在硅膠柱上純化產(chǎn)物得2。
在氬氣氛下將2(50g，181.8mmol)的THF(100ml)溶液冷卻至-78℃。緩慢加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(200ml，200mmol，1M的THF溶液)，混合物攪拌10分鐘。緩慢加入溴乙酸叔丁酯(29.5ml，200mmol)，3.5小時后，將反應(yīng)升溫至-10℃，并繼續(xù)攪拌1.5小時。用氯化銨終止反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取。用7∶1的己烷EtOAc在硅膠柱上純化產(chǎn)物得3。
在氬氣氛下將3(9.725g，25mmol)在4∶1THF-水(125ml)中的溶液冷卻至0℃。用注射器加入雙氧水(30％，10.2ml，100mmol)，然后加入LiOH·H2O(1.64g，40mmol)的水(50ml)溶液。1.5小時后，緩慢加入亞硫酸鈉(12.6g，100mmol)的水(75ml)溶液。用二氯甲烷萃取混合物3次。用HCl將水層酸化至pH2，用乙酸乙酯萃取4次。用鹽水洗滌乙酸乙酯層，然后用硫酸鎂干燥。過濾后，真空去除乙酸乙酯后得4。
在室溫下，在惰性氣體下，將0.230g(1.00mmol)4，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml(1.00mmol)4-乙基嗎啉和0.164g(1.00mmol)苯丙氨酰胺形成的混合物攪拌溶解在2mlN，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后在減壓下濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得5。
將叔丁酯5(0.376g，1.00mmol)溶解在3.5ml三氟乙酸中，在室溫下靜置1小時。減壓除去三氟乙酸后得產(chǎn)物6。
將20.0g(0.125mole)鹽酸O-芐基羥基胺和35.0ml(25.4g，0.251mole)三乙胺溶解在300ml二氯甲烷中，將此混合物冷卻至-78℃。在此混合物中緩慢加入溴乙酰溴(11.0ml，25.5g，0.126mole)，加完后再在-78℃攪拌溶液45分鐘。溶液用水萃取2次，有機相用硫酸鈉干燥，過濾，并減壓濃縮。殘留物以1∶1的己烷和乙酸乙酯處理，過濾分離出生成的沉淀7。
在冰浴中冷卻1.5g(6.15mmol)7在20ml DMF中的溶液，同時加入0.84ml(0.61g，6.0mmol)三乙胺。在冷卻的溶液中加入0.92ml(0.68g，9.2mmol)異丁胺后，攪拌混合物45分鐘，然后加入100ml水。用乙酸乙酯萃取混合物，有機相用硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得8。
在室溫下，在惰性氣體下，攪拌0.320g(1.00mmol)6，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml 4-乙基嗎啉和0.236g(1.00mmol)8在2mlDMF中的混合物，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得9。
在1大氣壓氫氣下，用10％鈀碳0.10g，氫解0.553g(1.00mmol)9在20ml甲醇中的溶液。過濾去除催化劑，減壓濃縮后分離得10。
實施例23-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-癸基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺(5)的合成

將2.36g(15.0mmol)癸胺和0.84ml(0.61g，6.0mmol)三乙胺溶解在15mlN，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，在冰浴中冷卻并攪拌。在冷卻的溶液中滴加1.22g(5.0mmol)1(按照實施例1中制備化合物7的方法來制備)，然后再攪拌45分鐘，然后去除冰浴。繼續(xù)攪拌30分鐘后，用100ml水稀釋混合物。用乙酸乙酯萃取混合物，然后，有機相用硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/異丙醇洗脫)，得2。
在室溫下，在惰性氣體下，將0.320g(1.00mmol)3(按照實施例1中制備化合物6的方法來制備)，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml 4-乙基嗎啉和0.320g(1.00mmo)2攪拌溶解在2mlDMF中，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/異丙醇洗脫)，得4。
在1大氣壓氫氣下，用10％鈀碳0.10g氫解0.300g(0.48mmol)4在20ml甲醇中的溶液。過濾去除催化劑，減壓濃縮后分離得5。
實施例33-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-癸基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酸，2-苯基乙基酰胺(6)的合成

在室溫下，在惰性氣體下，將0.230g(1.00mmol)1(按照實施例1中制備化合物4的方法來制備)，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml 4-乙基嗎啉和0.121g(1.00mmol)苯乙胺攪拌溶解在2mlDMF中，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機相用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后，得2。
將叔丁酯2(0.315g，0.94mmol)溶解在3.5ml三氟乙酸中，在室溫下靜置1小時。減壓除去三氟乙酸得產(chǎn)物3。
在室溫下，在惰性氣氛下，將0.250g(0.90mmol)3，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml(1.0mmol)4-乙基嗎啉和0.320g(1.00mmol)4(按照實施例2中制備化合物2的方法來制備)攪拌溶解在2mlDMF中，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/異丙醇洗脫)，得5。
在1大氣壓氫氣下，用10％鈀碳0.040g氫解0.111g(0.22mmol)5在5ml甲醇中的溶液。過濾去除催化劑，減壓濃縮后分離得6。
實施例43-{N-[ 1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(2-苯基乙基)氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺(6)的合成

在室溫在惰性氣氛下將1.70g(9.0mmol)N-t-BOC-D-丙氨酸，1，1.35g(10.0mmol)1-羥基苯并三唑，1.27ml(10.0mmol)4-乙基嗎啉和2.00g(12.5mmol)O-鹽酸芐基羥基胺攪拌溶解在20mlDMF中，同時加入1.92g(10.0mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液相用冷的1M鹽酸溶液萃取2次，用冷的1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮。以5MHCl的乙酸乙酯溶液30ml，將殘留物溶解于其中，攪拌5小時，然后低壓濃縮得鹽酸鹽形式的2。將此物質(zhì)與2.40g(20.0mmol)苯乙醛一起溶解在15ml甲醇中，并在冰浴中冷卻。在混合物中加入氰基氫硼化鈉(2.00g，31.8mmol)，2小時后去除冰浴。繼續(xù)攪拌20小時后，減壓濃縮混合物，將殘留物分配在水和乙酸乙酯中。有機相用硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/甲醇洗脫)，得3。
在室溫下，在惰性氣氛下，將0.250g(0.838mmol)3，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml(1.0mmol)4-乙基嗎啉和0.320g(1.00mmol)4(按照實施例1中制備化合物6的方法來制備)攪拌溶解在2mlDMF中，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/異丙醇洗脫)，得5。
在1大氣壓氫氣下，用10％鈀碳0.040g氫解0.120g(0.276mmol)5的5ml甲醇溶液。過濾去除催化劑，減壓濃縮后分離得6。
實施例5反式-1-(R)-{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(2-苯基乙基)氨基羰基}-2-(R)-{N-(2-苯基乙基)氨基羰基}環(huán)己烷(5)和反式-1-(S)-{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(2-苯基乙基)氨基羰基}-2-(S)-{N-(2-苯基乙基)氨基羰基}環(huán)己烷(6)的合成

室溫下，在惰性氣氛下將20.0g(0.130mol)反式-1，2-環(huán)己烷二羧酸酐，1，攪拌溶解在120mlDMF中，同時加入30.0g(0.248mol)苯基乙基胺?；旌衔飻嚢?4小時后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得2，此為非對映體混合物。
在室溫下，在惰性氣氛下，將1.25g(4.54mmol)2，0.676g(5.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.635ml(5.0mmol)4-乙基嗎啉和1.49g(5.00mmol)3(按照實施例4中制備化合物3的方法來制備)攪拌溶解在10mlDMF中，同時加入0.958g(5.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用冷1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/異丙醇洗脫)，得4。
在1大氣壓氫氣下，用10％鈀碳0.040g氫解0.120g(0.216mmol)4的5ml甲醇溶液。過濾去除催化劑，減壓濃縮。用水、乙腈和三氟乙酸進(jìn)行制備反相高效液相色譜純化，得5和6。
實施例62-(R)-{{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)-3-苯基丙基]-N-癸基氨基羰基}甲基}環(huán)己酮(6)和2-(S)-{{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)-3-苯基丙基]-N-癸基氨基羰基}甲基}環(huán)己酮(7)的合成

在室溫于惰性氣氛下將2.51g(9.0mmol)N-t-BOC-D-高苯丙氨酸，1，1.35g(10.0mmol)1-羥基苯并三唑，1.27ml(10.0mmol)4-乙基嗎啉和2.00g(12.5mmol)鹽酸O-芐基羥基胺攪拌溶解在20mlDMF中，同時加入1.92g(10.0mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用冷的1M鹽酸溶液萃取2次，用冷的1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮。以5M HCl的乙酸乙酯溶液30ml，將殘留物溶解于其中，攪拌5小時，然后減壓濃縮得鹽酸鹽形式的2。將此物質(zhì)與3.12g(20.0mmol)癸醛一起溶解在15ml甲醇中，并在冰浴中冷卻。在混合物中加入氰基氫硼化鈉(2.00g，31.8mmol)，2小時后去除冰浴。繼續(xù)攪拌20小時后，減壓濃縮殘留物，將殘留物分配在水和乙酸乙酯中。有機相用硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/甲醇洗脫)，得3。
在室溫下，在惰性氣氛下，將0.400g(0.942mmol)3，0.135g(1.00mmol)1-羥基苯并三唑，0.127ml(1.0mmol)4-乙基嗎啉和0.156g(1.00mmol)4攪拌溶解在2mlDMF中，同時加入0.192g(1.00mmol)鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺。將混合物攪拌24小時，然后減壓濃縮。用乙酸乙酯加二氯甲烷吸收殘留物，有機溶液用1M鹽酸溶液萃取2次，用1M氫氧化鈉溶液萃取2次，用水萃取1次，用鹽水萃取1次。有機相以硫酸鈉干燥，經(jīng)過濾，減壓濃縮后得到的殘留物以(硅膠)柱色譜純化(以二氯甲烷/異丙醇洗脫)，得5。
在1大氣壓氫氣下，用10％鈀碳0.050g氫解0.125g(0.222mmol)5的5ml甲醇溶液。過濾去除催化劑，減壓濃縮。用水、乙腈和三氟乙酸進(jìn)行制備反相高效液相色譜純化，得6和7。
實施例A根據(jù)本發(fā)明，制備口服片劑組合物，其中包含成份 含量3-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-癸基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺215.0mg乳糖120.0mg玉米淀粉70.0mg滑石粉 4.0mg硬脂酸鎂1.0mg2根據(jù)實施例2制備的異羥肟酸。使用具有結(jié)構(gòu)式I所示結(jié)構(gòu)的其他化合物，結(jié)果基本相同。
實施例B根據(jù)本發(fā)明，制備口服膠囊，其中包含成份含量(％w/w)3-{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(2-苯基乙基)氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺315％聚乙二醇85％3根據(jù)實施例3制備的異羥肟酸。使用具有結(jié)構(gòu)式I所示結(jié)構(gòu)的其他化合物，結(jié)果基本相同。
權(quán)利要求
1.結(jié)構(gòu)如結(jié)構(gòu)式I所示的化合物
其中(A)(1)R1是氫，烷基，雜烷基，烯基，芐基，雜環(huán)，碳環(huán)，烴氧基，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基，碳環(huán)-雜烷基，雜環(huán)-雜烷基，碳環(huán)-硫代，雜環(huán)-硫代；(2)R2是氫，烷基，烯基，炔基，雜環(huán)，碳環(huán)，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基，或碳環(huán)-雜烷基；(3)R3是氫，烷基，碳環(huán)或雜環(huán)；(4)R4是烷基，雜烷基，烷基氨基，?；被?，羧基烷基，氨基烷基，碳環(huán)，雜環(huán)，雜環(huán)-雜烷基，雜環(huán)-烷基，或能夠帶電的基團(tuán)；和(5)R5是(a)-O-R6，其中的R6是氫，烷基或芐基；(b)-N(R9)CH(R10)(R11)，其中(i)R9是氫或烷基；和(ii)R10和R11各自為氫，烷基，芳基烷基，烴氧基酰基或氨基?；?；或(iii)R9和R10連同它們相連的氮原子和碳原子構(gòu)成一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；(c)氨基酸或具有2至3個氨基酸的肽，其中所述的氨基酸或肽通過其氨基與結(jié)構(gòu)式(I)相連；(d)烷基；(e)烯基；(f)碳環(huán)-烷基；或(g)碳環(huán)-烯基；(B)以及，其中(1)R3和R4可以共同構(gòu)成一個3-9個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；或者(2)R4和R5可以共同構(gòu)成一個3-13個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；或它們的藥學(xué)上認(rèn)可的鹽，可生物水解的酰胺或可生物水解的酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1是氫，烷基或芳基烷基；較好的是氫，甲基，乙基，異丙基或2-苯基乙基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中R3是氫或烷基；以氫為佳。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物，其中R2是烷基，烯基，炔基，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基或碳環(huán)雜烷基；R2以C4-C10烷基，C4-C10烯基或碳環(huán)烷基為佳；R2是正癸基，2-甲基丙基，2-苯基乙基或3-苯基丙基更好。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中R4是烷基，雜烷基或氨基烷基；R4以2-甲基丙基或4-氨基丁基為佳。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中R5是-N(R9)CH(R10)(R11)，其中R9是氫；R10和R11各自為氫，烷基，芳基烷基，烴氧基?；虬被；?；較好的是，R10是氫或芳基烷基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其中(a)R10是氫，R11是芐基或氨基?；?，或(b)R10是芳基烷基，R11是氨基?；?br> 8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中的R3和R4可以共同構(gòu)成一個3-9個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；較好的是，所述的環(huán)是飽和的單環(huán)碳環(huán)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中的R4和R5可以共同構(gòu)成一個3-13個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)。
10.結(jié)構(gòu)如結(jié)構(gòu)式I所示的化合物
其中(A)(1)R1是氫，烷基，芐基，或碳環(huán)-烷基；(2)R2是烷基，烯基，碳環(huán)-烷基，雜環(huán)-烷基或碳環(huán)-雜烷基；(3)R3是氫，或烷基；(4)R4是烷基，雜烷基，或氨基烷基；和(5)R5是(a)-N(R9)CH(R10)(R11)，其中(i)R9是氫；和(ii)R10和R11各自為氫，烷基，芳基烷基，烴氧基酰基或氨基?；?；或(iii)R9和R10連同它們相連的氮原子和碳原子構(gòu)成一個4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或(b)氨基酸或具有2至3個氨基酸的肽，其中所述的氨基酸或肽通過其氨基與結(jié)構(gòu)式(I)相連；(B)以及，其中(1)R3和R4可以共同構(gòu)成一個3-9個原子的單環(huán)碳環(huán)；或者(2)R4和R5可以共同構(gòu)成一個3-13個原子的單環(huán)碳環(huán)；7-17個原子的多環(huán)碳環(huán)；4-9個原子的單環(huán)雜環(huán)；或7-17個原子的多環(huán)雜環(huán)；或它們的藥學(xué)上認(rèn)可的鹽，可生物水解的酰胺或可生物水解的酯。
11.一種化合物，選自3-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-異丁基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺；3-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-癸基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺；3-{N-[(N-羥基氨基羰基)甲基]-N-癸基氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酸，2-苯基乙基酰胺；3-{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(苯基乙基)氨基羰基}-2-(R)-異丁基丙酰-L-苯丙氨酰胺；反式-1-(R)-{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(2-苯基乙基)氨基羰基}-2-(R)-{N-(2-苯基乙基)氨基羰基}環(huán)己烷；反式-1-(S)-{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)乙基]-N-(2-苯基乙基)氨基羰基}-2-(S)-{N-(2-苯基乙基)氨基羰基}環(huán)己烷；2-(R)-{{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)-3-苯基丙基]-N-癸基氨基羰基}甲基}環(huán)己酮(6)；及2-(S)-{{N-[1-(R)-(N-羥基氨基羰基)-3-苯基丙基]-N-癸基氨基羰基}甲基}環(huán)己酮。
12.一種藥物組合物，其中包含(a)安全有效量的權(quán)利要求1至11所述化合物中任意一種；和(b)藥學(xué)上認(rèn)可的載體。
13.治療或預(yù)防人或其它較低級動物中與基質(zhì)金屬蛋白酶活性過度或有害相關(guān)的疾病的方法，所述的方法包含給所述個體施用安全有效量的權(quán)利要求1至11所述化合物中任意一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及含異羥肟酸的化合物,該化合物可用作基質(zhì)金屬蛋白酶的抑制劑,因而能治療與這些酶的活性過度相關(guān)的疾病。具體說,本發(fā)明涉及一種具有結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)所示結(jié)構(gòu)的化合物,其中:(A)R
文檔編號C07D295/18GK1171780SQ95197203
公開日1998年1月28日 申請日期1995年12月13日 優(yōu)先權(quán)日1994年12月29日
發(fā)明者K·E·耶爾姆 申請人:普羅克特和甘保爾公司