一種制備藍莓花青素的新方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種制備藍莓花青素的新方法，具體是涉及一種酶解和微波相結(jié)合的方法。其特點是，包括如下步驟：a、用植物組織破壞提取法粉碎藍莓果實；b、將粉碎后的藍莓酶解；c、微波萃?。籨、采用大孔吸附樹脂對萃取液中的花青素進行吸附、純化處理，再經(jīng)過減壓濃縮、冷凍干燥，得到藍莓花青素。采用這種方法處理花青素，操作簡單，污染少，萃取時間短，提取率大，產(chǎn)品純度高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)藍莓花青素。
【專利說明】一種制備藍莓花青素的新方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物中有效成分的分離純化方法，特別是涉及一種制備藍莓花青素的新方法。
【背景技術(shù)】
[0002]藍莓，學(xué)名越橘，杜鵑花科越橘屬植物，多年生落葉或常綠灌木。藍莓果實多為深藍色，近圓形，是少有的藍色食物之一。果實營養(yǎng)豐富，含有維生素、蛋白質(zhì)、花青素及黃酮等多種活性成分，其中花青素含量位居所有水果、蔬菜之首。野生種藍莓每百克鮮果中花青素含量高達0.33-3.38g，栽培種每百克鮮果中一般為0.1-0.2g?；ㄇ嗨赜址Q花色素，是一類廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，屬黃酮類化合物，多以糖苷的形式存在，也稱花色苷?；ㄉ鼐哂锌寡趸?、抗腫瘤、保護肝臟、增強視力等多種生理功能，在食品、化妝、醫(yī)藥等方面有著巨大的應(yīng)用前景。
[0003]目前對花青素的提取的研究主要有水提或有機溶劑提取法、超臨界流體萃取法等。傳統(tǒng)的水提或溶劑提取法存在由于溫度過高會破壞花青素的結(jié)構(gòu)，影響其生物活性及產(chǎn)率降低等問題；現(xiàn)代的超臨界萃取法雖然提取率高，但因設(shè)備昂貴，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。而植物組織破碎提取、酶解-微波提取相結(jié)合的方式既可以較溫和的將植物組織破碎、分解，較大幅度提高得率，同時還不易破壞成分的立體結(jié)構(gòu)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種高效、低成本、高得率、高純度、適合工業(yè)化生產(chǎn)的制備藍莓花青素的方法。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案按照下列步驟進行:
1.用植物組織破碎提取法粉碎藍莓果，其中加入藍莓0.5-2倍重量比的30飛0%的乙醇溶液，植物組織破碎提取器轉(zhuǎn)速為1000-3000r/min，提取時間0.5-1.0min ；
2.向上述提取液中加入藍莓重量廣3%的纖維素酶，酶解溫度為60-80°C，調(diào)節(jié)提取液PH值為2-4，酶解時間為50-70min，減壓濃縮，得濃縮物；
3.將濃縮物加入40-60%的乙醇，固料比為1:15-20，置于微波中進行萃取，微波條件為:功率100-200W，提取時間為1.5-2min，之后離心除雜，得上清液；
4.將上清液加入到大孔吸附樹脂柱，先用2-3倍樣品液的蒸餾水洗脫，再用60-80%的乙醇溶液洗脫，洗脫液體積為樣品液的15-20倍，收集洗脫液，最后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，冷凍干燥得到藍莓花青素粉末。
[0006]步驟4中所述的大孔吸附樹脂型號為NKA-9、D-101、AB_8等。
[0007]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用植物組織破碎提取法處理原料，整個過程僅在數(shù)秒至數(shù)十秒內(nèi)完成，同時由于免去了加熱，從而可有效的避免花青素成分的破壞。酶解-微波提取法提取花青素，對藍莓花青素成分的損耗低，提取率大，產(chǎn)品的純度高。本發(fā)明方法簡單，容易實施，使用效果好。[0008]下面將結(jié)合【具體實施方式】進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
[0009]【具體實施方式】:
實施例1:稱取藍莓鮮果100g，用植物組織破碎提取法粉碎藍莓果，加入藍莓0.5倍重量比的30%的乙醇溶液，植物組織破碎提取器轉(zhuǎn)速為1500r/min，提取時間1.0min ;向上述提取液中加入藍莓重量1%的纖維素酶，酶解溫度為60°C，調(diào)節(jié)提取液PH值為2，酶解時間為50min，減壓濃縮，得濃縮物；向濃縮液中加入40%的乙醇，固料比為1:15，置于功率100W的微波中進行提取，提取時間為1.5min，之后離心除雜，得上清液；將上述上清液加入到AB-8大孔吸附樹脂柱，先用2倍樣品液的蒸餾水洗脫，再用60%的乙醇溶液洗脫，洗脫液體積為樣品液的15倍，收集洗脫液，最后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，冷凍干燥得到藍莓花青素粉末
254.2mg,經(jīng)HPLC檢測，其純度為54.3%。
[0010]實施例2:稱取藍莓鮮果100g，用植物組織破碎提取法粉碎藍莓果，加入藍莓I倍重量比的50%的乙醇溶液，植物組織破碎提取器轉(zhuǎn)速為2000r/min，提取時間0.8min ;向上述提取液中加入藍莓重量2%的纖維素酶，酶解溫度為70°C，調(diào)節(jié)提取液PH值為3.5，酶解時間為60min，減壓濃縮，得濃縮物；向濃縮液中加入50%的乙醇，固料比為1:18，置于功率150W的微波中進行提取，提取時間為1.8min，之后離心除雜，得上清液；將上述上清液加入到NKA-9大孔吸附樹脂柱，先用3倍樣品液的蒸餾水洗脫，再用70%的乙醇溶液洗脫，洗脫液體積為樣品液的20 倍，收集洗脫液，最后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，冷凍干燥得到藍莓花青素粉末256.8mg,經(jīng)HPLC檢測，其純度為56.9%。
[0011]實施例3:稱取藍莓鮮果100g，用植物組織破碎提取法粉碎藍莓果，加入藍莓1.5倍重量比的40%的乙醇溶液，植物組織破碎提取器轉(zhuǎn)速為3000r/min，提取時間0.5min ;向上述提取液中加入藍莓重量3%的纖維素酶，酶解溫度為80°C，調(diào)節(jié)提取液PH值為4，酶解時間為70min，減壓濃縮，得濃縮物；向濃縮液中加入60%的乙醇，固料比為1:20，置于功率200W的微波中進行提取，提取時間為2.0min，之后離心除雜，得上清液；將上述上清液加入到D-101大孔吸附樹脂柱，先用2.5倍樣品液的蒸餾水洗脫，再用80%的乙醇溶液洗脫，洗脫液體積為樣品液的18倍，收集洗脫液，最后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，冷凍干燥得到藍莓花青素粉末
255.8mg,經(jīng)HPLC檢測，其純度為53.5%。
【權(quán)利要求】
1.一種制備藍莓花青素的新方法，包括以下步驟: a、用植物組織破碎提取法粉碎藍莓鮮果，其中加入藍莓0.5-2倍重量比的30飛0%的乙醇溶液，植物組織破碎提取器轉(zhuǎn)速為1000-3000r/min，提取時間0.5-1.0min ； b、向上述提取液中加入藍莓重量廣3%的纖維素酶，酶解溫度為60-80°C，調(diào)節(jié)提取液PH值為2-4，酶解時間為50-70min，減壓濃縮，得濃縮物； C、將濃縮物加入40-60%的乙醇，固料比為1:15-20，置于微波中進行萃取，微波條件為:功率10(T200W，提取時間為1.5-2min，之后離心除雜，得上清液； d、將上清液加入到大孔吸附樹脂柱，先用2-3倍樣品液的蒸餾水洗脫，再用60-80%的乙醇溶液洗脫，洗脫液體積為樣品液的15-20倍，收集洗脫液，最后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，冷凍干燥得到藍莓花青素粉末。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備藍莓花青素的新方法，其特征是，步驟b中所述的調(diào)節(jié)PH值的酸為鹽酸、硫酸等無機酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備藍莓花青素的新方法，其特征是，步驟d中所述的大孔吸附樹脂型號為NKA-9、D-101、AB-8等。
【文檔編號】C07D311/62GK103435588SQ201310412765
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月12日
【發(fā)明者】蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司