專利名稱：含有2,5-哌嗪二酮,3,6-雙(苯基甲基)-,(3s,6s)-的酸性提取物和飲料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S, 6S)-的酸性飲食品，更詳細(xì)地說，涉及含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)_的pH小于5的提·取物及飲料等。
背景技術(shù)：
在高度復(fù)雜化的現(xiàn)代社會(huì)，積極性降低已成為問題。例如有被稱作“動(dòng)機(jī)危機(jī)(motivation crisis)”的名詞,年輕人的動(dòng)機(jī)(motivation)降低已成為很大的問題。此夕卜，通常多數(shù)抑郁癥患者都顯示出積極性降低癥狀，所以希望開發(fā)出可改善積極性降低的藥劑。近年來，兩個(gè)氨基酸結(jié)合的“ニ肽”作為功能性物質(zhì)而受到注目。ニ肽可賦予單體氨基酸中不具備的物理性質(zhì)和新型功能，所以期待具有氨基酸以上應(yīng)用范圍的ニ肽。本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)作為2，5- ニ酮哌嗪衍生物的2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S, 6S) -(CA登記號(CA Registry Number) : 2862-51-3)(以下稱為“化合物A”。)具有學(xué)習(xí)積極性改善作用(相同日期的專利申請日本特愿2009 — 296164公報(bào))?？墒?，市場喜好酸性飲料。另ー方面，作為含有化合物A的飲料，作為液體存在將畜肉煮后而獲得的雞肉提取物，作為固形物存在雞肉湯料(Consomme )等。

發(fā)明內(nèi)容
但是，雞肉提取物、雞肉湯料(Consomme)等的pH為中性。因此，作為含有化合物A的飲料應(yīng)提供被市場喜好的酸性飲料，將這些中性的提取物等添加到酸性的液體中時(shí)，會(huì)產(chǎn)生沉淀，同時(shí)還具有雞肉提取物特有的味道·滑膩·粗糙，無法得到香味上也使人滿意的飲料。此外，因化合物A幾乎不溶于水，所以，無法直接在飲料中簡單地添加化合物A。因此，本發(fā)明的目的在于，提供可用于含有作為具有學(xué)習(xí)積極性改善作用的有用物質(zhì)的化合物A的酸性飲料制造的提取物及含有化合物A的酸性飲料。本發(fā)明者為解決上述課題而進(jìn)行深入研究，結(jié)果可得到含有化合物A同時(shí)添加到飲料中時(shí)也不產(chǎn)生沉淀的、且香味、ロ感良好的酸性提取物，從而完成了本發(fā)明。即本發(fā)明為以下[I] [20]。[I] 一種提取物，其特征在于，含有化合物A，pH小于5。[2]根據(jù)[I]中所述的提取物，其特征在于，化合物A含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比為 0. I ( μ g/100g) /Bx 以上。[3]根據(jù)[I]中所述的提取物，其特征在于，化合物A含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比為 6 ( μ g/100g) /Bx 以上。[4]根據(jù)[I] [3]中任一項(xiàng)所述的提取物，其特征在于，以I μ g/100g以上的濃度含有化合物A。[5]根據(jù)[I] [3]中任一項(xiàng)所述的提取物，其特征在于，以60μ g/100g以上的濃度含有化合物A。[6]根據(jù)[I] [5]中任一項(xiàng)所述的提取物，其特征在于，化合物A從天然物中提取。[7]根據(jù)[6]中所述的提取物，其特征在于，天然物為鳥獸肉類、魚貝類或貝類。[8]根據(jù)[6]或[7]中所述的提取物，其特征在于，天然物為雞肉。[9] 一種提取物干燥物，其特征在于，將[I] [8]中任一項(xiàng)所述的提取物干燥而·獲得。[10] ー種酸性飲料，其特征在于，添加[I] [8]中任一項(xiàng)所述的提取物而獲得。[11] ー種酸性飲料，其特征在于，含有化合物A，pH小于5。[12]根據(jù)[10]或[11]中所述的酸性飲料，其特征在于，化合物A含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比為O. I ( μ g/100g) /Bx以上。[13]根據(jù)[10] [12]中任一項(xiàng)所述的酸性飲料，其特征在于，以I μ g/100g以上的濃度含有化合物A。[14]根據(jù)[10] [13]中任一項(xiàng)所述的酸性飲料，其特征在于，所述飲料中不含有沉淀。[ 15]根據(jù)[10] [13]中任一項(xiàng)所述的酸性飲料，其特征在于，所述飲料中含有沉淀，從飲料中回收的每Ig沉淀中所含有的蛋白質(zhì)為0. Olmg以下。[16] ー種容器裝飲料，其特征在于，裝入了 [10] [15]中任ー項(xiàng)所述的飲料。[17] —種制造方法，其為[I]中所述的提取物的制造方法，其特征在于，包含(I)以鳥獸肉類、魚貝類或貝類為原料，通過在液體中加熱而除去這些原料中所含有的水溶性蛋白質(zhì)的預(yù)處理工序；(2)在所述預(yù)處理后交換液體，再次加熱的エ序；(3)添加酸的エ序；及(4)過濾所得到的液體樣品的エ序。[18]根據(jù)[17]中所述的制造方法，其特征在于，所述エ序(3)中添加的酸選自磷酸、蘋果酸及檸檬酸中的ー種以上。[19] 一種制造方法，其為[11]中所述的飲料的制造方法，其特征在于，包含(I)以鳥獸肉類、魚貝類或貝類為原料，通過在液體中加熱而除去這些原料中所含有的水溶性蛋白質(zhì)的預(yù)處理工序；(2)在所述預(yù)處理后交換液體，再次加熱的エ序；(3)添加酸的エ序；及(4)過濾所得到的液體樣品的エ序。[20]根據(jù)[19]中所述的制造方法，其特征在于，所述エ序(3)中，添加的酸選自磷酸、蘋果酸及檸檬酸中的ー種以上。本發(fā)明提供含有具有學(xué)習(xí)積極性改善作用、無副作用且安全性高的化合物A、同時(shí)即使添加到飲料中時(shí)也不產(chǎn)生沉淀的酸性提取物。本發(fā)明的提取物不損壞飲食物原本的呈味，可添加到飲料等中，可用于被市場喜好的酸性飲料的制造中。本發(fā)明的酸性提取物或飲料、進(jìn)ー步添加這些的飲食品也可作為對改善學(xué)習(xí)積極性有用的飲食品而長期持續(xù)攝取。


圖I表示通過攝取試驗(yàn)樣品，小鼠找到逃生平臺(tái)的時(shí)間是否因重復(fù)試驗(yàn)而縮短的試驗(yàn)結(jié)果。圖2表示通過攝取試驗(yàn)樣品，小鼠找到逃生平臺(tái)的時(shí)間是否因重復(fù)試驗(yàn)而縮短的試驗(yàn)結(jié)果。圖3表示通過攝取試驗(yàn)樣品，小鼠找到逃生平臺(tái)的時(shí)間是否因重復(fù)試驗(yàn)而縮短的試驗(yàn)結(jié)果。圖4表示對使用各種原料而獲得的提取物中的化合物A定量的結(jié)果。
具體實(shí)施例方式以下對本發(fā)明的實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說明。く酸性提取物〉本發(fā)明的酸性提取物含有作為具有學(xué)習(xí)積極性改善作用的有用物質(zhì)的化合物A，同時(shí)在添加到酸性飲料中時(shí)也不產(chǎn)生沉淀。本發(fā)明的酸性提取物在酸性飲料中也無沉淀，可適用。本發(fā)明的酸性提取物為如下提取物，可抑制對飲料整體的香味、ロ感的影響，同時(shí)可將化合物A高濃度添加到飲料中的提取物。根據(jù)這些特征，可擴(kuò)大飲料香味設(shè)計(jì)的自由度。本發(fā)明的提取物為酸性，在本說明書中酸性指pH小于5。本發(fā)明液的pH小于5，優(yōu)選為4. 5以下，進(jìn)ー步優(yōu)選為4以下。此外，本發(fā)明的提取物的方式之ー為如下提取物，pH小于5、高濃度含有化合物A且化合物A含量(yg/lOOg)和白利度(Bx)的比為O. I以上，優(yōu)選為6 ( μ g/100g) /Bx以上的提取物。因化合物A是具有學(xué)習(xí)積極性改善作用的有用物質(zhì)，所以，優(yōu)選在提取物中的含量越高越好。具體地說，優(yōu)選為I μ g/100g以上,更優(yōu)選為60 μ g/100g以上,進(jìn)ー步優(yōu)選為75μ g/100g以上。但是，白利度高的提取物指高濃度含有來自原料的各種物質(zhì)(例如苦味成分)，這些物質(zhì)不僅不適合飲料，對香味、ロ感的影響也很大，大多不適合添加到飲料中。因此，優(yōu)選提取物的白利度越低越好。且此處所述的Bx可用市售的Bx測定儀計(jì)算測量。因此，優(yōu)選大量含有作為有用物質(zhì)的化合物A且白利度低的提取物，即化合物A的含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比值高的提取物。具體地說，優(yōu)選化合物A含量(yg/100g)和白利度(Bx)的比為0. I (yg/100g)/Bx以上，更優(yōu)選為6以上，進(jìn)ー步優(yōu)選為10以上。此種提取物無論是否高含量含有化合物A，但由于Bx相對低，所以向飲料中的配合量少也無妨，具有增加飲料設(shè)計(jì)的自由度的優(yōu)點(diǎn)。其結(jié)果，可制備外觀優(yōu)異(無沉淀·混濁)、不損壞香味的飲料?；衔顰的濃度可用各種方法定量，例如可通過高效液相色譜法(HPLC)定量。本發(fā)明的酸性提取物是液狀提取物，可直接飲用，也可添加在飲食品中。且提取物可通過冷凍干燥、凍干等エ序容易地制成粉末，且因所得到的提取物粉末為水溶性，所以，可簡單地溶于水等液體中飲用。且通過形成粉末形態(tài)而容易地添加到各種飲食品中并易被、利用。還可形成軟膠囊或片劑的形態(tài)。軟膠囊、片劑是包裹本發(fā)明提取物、提取物粉末或顆粒的軟膠囊、片劑。添加提取物或提取物粉末的飲食品的種類和形態(tài)無任何限制。能以例如片劑及膠囊劑等的片劑形態(tài)的健康食品、酸奶、加工食品、甜點(diǎn)類、小零食(例如ロ香糖、糖果、果凍)等的固體食品、咖啡、烏龍茶、紅茶、清涼飲料、保健飲料等液體飲料等的形態(tài)提供。此外，還包含寵物食品、動(dòng)物用飼料。く酸性飲料〉本發(fā)明的飲料為含有化合物A、pH小于5的酸性飲料。此外，本發(fā)明的方式之ー是如下飲料，含有化合物A、pH小于5且化合物A含量/Bx為O. I ( μ g/100g) /Bx以上的飲 料。因化合物A是作為具有學(xué)習(xí)積極性改善作用的有用物質(zhì)，所以優(yōu)選飲料中的含量越高越好。具體地說，優(yōu)選為I μ g/100g以上,更優(yōu)選為60 μ g/100g以上,進(jìn)ー步優(yōu)選75μ g/100g 以上。優(yōu)選化合物A的含量高，但因白利度高的飲料在香味、ロ感方面等不優(yōu)選，所以，優(yōu)選白利度越低越好。因此，優(yōu)選大量含有作為有用物質(zhì)的化合物A且白利度低的飲料，即化合物A的含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比值高的飲料。具體地說，化合物A含量Ug/100g)和白利度(Bx)的比優(yōu)選為0. I ( μ g/100g)/Bx以上，更優(yōu)選為6以上，進(jìn)ー步優(yōu)選為10以上。本發(fā)明的飲料具有如下特征，即具有學(xué)習(xí)積極性改善效果可長期持續(xù)攝取，同時(shí)還具有香味、ロ感好且外觀也良好的特征。特別是使用上述本發(fā)明的提取物制造的飲料具有如下特征，無論是否高含量含有化合物A，但因添加到飲料中時(shí)不產(chǎn)生來自提取物的沉淀，所以在所得到的飲料中不含有來自提取物的沉淀。在此處，配合提取物的液體具有液體自身不含有沉淀的液體(例如使用透明果汁的飲料，代表性飲料有使用透明果汁的蘋果汁等)和液體自身含有沉淀的液體(例如使用混濁果汁的飲料，代表性飲料有使用混濁果汁的橙汁等)。在不含有沉淀成分的液體中添加本發(fā)明的提取物而制備的飲料，在其所得到的飲料中也不含有沉淀。另ー方面，在使用混濁果汁的飲料等其自身具有沉淀成分的飲料中添加本發(fā)明的提取物而制備的飲料雖含有來自混濁果汁的沉淀，但實(shí)質(zhì)上不含有來自本發(fā)明提取物的沉淀。在不含有沉淀成分的液體中添加本發(fā)明的提取物而制備的飲料中，有無沉淀例如可通過如下操作確認(rèn)，即通過目測或離心分離不能回收到固形成分。另ー方面，在含橙汁的飲料等其自身具有沉淀成分的飲料中添加本發(fā)明的提取物而制備的飲料中，實(shí)質(zhì)上不含有來自本發(fā)明提取物的沉淀，例如可如下確認(rèn)，回收飲料中的沉淀，用十二烷基硫酸鈉(以下稱為“SDS”)等表面活性劑增溶的蛋白質(zhì)量極少。如果含有來自提取物的成分的沉淀，則通過表面活性劑進(jìn)行增溶處理會(huì)使來自提取物的蛋白質(zhì)增溶，但實(shí)質(zhì)上不含有來自提取物的沉淀時(shí)，則增溶量極少。另外，通過SDS進(jìn)行的蛋白質(zhì)的增溶可按照本領(lǐng)域技術(shù)人員周知的方法進(jìn)行，例如可通過使用SDS0. 025%溶液進(jìn)行。且增溶蛋白質(zhì)的量極少是指用SDS0. 025%溶液進(jìn)行增溶處理，結(jié)果沉淀的固形物量(濕重量)中實(shí)質(zhì)上不含有增溶蛋白質(zhì)量(0. 01mg/g沉淀以下,優(yōu)選為0. 001mg/g沉淀以下)。
在此，沉淀的固形物量(濕重)是指將飲料用離心分離機(jī)在3000 5000rpm下進(jìn)行I 5分鐘離心處理后回收的濕潤狀態(tài)的固形成分的重量。本發(fā)明飲料的pH小于5。優(yōu)選為pH4. 5以下，進(jìn)ー步優(yōu)選為4以下。本發(fā)明的飲料與通常的飲料同樣，可制成容器裝飲料。<提取物或飲料的制造方法>本發(fā)明為含有化合物A的酸性提取物或飲料。這些酸性提取物或飲料例如可根據(jù)以下制造方法制備。
(I)以鳥獸肉類、魚貝類或貝類為原料，通過在液體中加熱而除去這些原料中所含有的水溶性蛋白質(zhì)的預(yù)處理工序；(2)在所述預(yù)處理后交換液體，再次加熱的エ序；(3)添加酸的エ序；及(4)過濾所得到的液體樣品的エ序。在上述預(yù)處理工序(I)中使用的原料優(yōu)選高效得到作為有用成分的化合物A的天然物，特別是鳥獸肉類、魚貝類或貝類。在鳥獸肉類中，包含作為畜肉的牛、豬、馬、羊及山羊、作為獸肉的畜肉以外的肉，例如野豬、鹿，作為家禽肉的雞、火雞、鵪鶉、鴨子及紹興麻鴨(Anas platyrhyncha var. domestica)、作為野鳥肉的家禽肉以外的鳥類的肉，例如野鴨、雉、麻雀及斑鶇等。此外，還可使用通常飲食生活中所食用的魚貝類及貝類。其他，作為植物體，也可使用咖啡、可可等。在這些鳥獸肉、魚貝類及貝類中優(yōu)選使用可高效、高濃度得到化合物A的雞肉。使用雞肉時(shí)可大量得到化合物A的理由還不明了，但推測因雞肉的蛋白質(zhì)大量具有連續(xù)的苯丙氨酸(-Phe-Phe-)的結(jié)構(gòu)，大量生成ニ肽(Phe-Phe)，因而作為結(jié)果可大量得到目的化合物A。作為預(yù)處理工序(1)，只要進(jìn)行減少原料中含有的水溶性蛋白質(zhì)的處理即可，例如只要在水中100°C 160°C下煮(boil)30分鐘 數(shù)小時(shí)(優(yōu)選為3小時(shí) 8小時(shí)左右，進(jìn)ー步優(yōu)選為3小吋 4小時(shí)左右)即可。作為加熱裝置，可根據(jù)條件使用壓カ鍋、高壓滅菌器等。此外，預(yù)處理工序(I)中，對交換液體的次數(shù)無限制。例如在エ序(I)中，通過適當(dāng)追加水等的液體、原料，可調(diào)節(jié)提取物或飲料的濃度。此外，加熱エ序(2)優(yōu)選在高溫高壓(IOO0C以上、I大氣壓以上)下進(jìn)行，例如優(yōu)選為100°C以上，進(jìn)ー步優(yōu)選為125°C以上。而且加熱エ序(2)的加熱時(shí)間優(yōu)選為30分鐘 數(shù)小吋，進(jìn)ー步優(yōu)選為3 7小時(shí)左右。同樣作為加熱裝置，可根據(jù)條件使用壓カ鍋、高壓滅菌器等。且也可不進(jìn)行液體交換而連續(xù)進(jìn)行預(yù)處理工序(I)及加熱エ序(2)的エ序，也可在預(yù)處理工序后暫時(shí)取出肉，在進(jìn)行液體交換之后再進(jìn)ー步進(jìn)行加熱エ序。在預(yù)處理工序(I)之后進(jìn)行液體交換，而后進(jìn)行加熱エ序(2)的方法能得到白利度更低的樣品，所以優(yōu)選進(jìn)行液體交換。另外，為了防止植物體及動(dòng)物體會(huì)烤焦，エ序(I)及エ序(2)中的加熱處理優(yōu)選在溶劑中進(jìn)行。作為溶劑，優(yōu)選使用水、こ醇或這些的混合物等。即通過在含有蛋白質(zhì)(優(yōu)選大量具有連續(xù)的苯丙氨酸(-Phe-Phe-)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì))的植物體或動(dòng)物體中混合溶劑進(jìn)行加熱處理，回收該溶剤，從而獲得大量含有化合物A的溶液。
為使在酸性狀態(tài)下含有化合物A的液體(提取物)為不具有沉淀的狀態(tài)、或添加提取物而制成的酸性飲料不具有沉淀的狀態(tài)，必須對エ序(2)中得到的化合物A含有物進(jìn)行酸處理使其為酸性。該酸處理優(yōu)選在エ序(2)之后的エ序中進(jìn)行。作為所添加的酸無特別限定，優(yōu)選食品制造中通常使用的食品添加剤、食品原料。作為食品添加剤，例如可列舉己ニ酸、檸檬酸、乳酸、醋酸、葡萄糖酸內(nèi)脂、富馬酸、葡萄糖酸、冰醋酸、蘋果酸、酒石酸、磷酸、L-抗壞血酸等。此外，作為食品原料，可列舉衣康酸、植酸、α 一酮戊ニ酸、咸梅汁、糧食醋、果汁、麥芽醋、葡萄醋、蘋果醋、米醋等。只要是食品制造中通常使用的酸均可，優(yōu)選香味優(yōu)異的蘋果酸、檸檬酸、磷酸。此外，酸可以使用I種或I種以上，無特別限定。酸的添加量為用于調(diào)節(jié)到所希望的pH而需要的量，可根據(jù)添加的酸的種類及所希望的pH適當(dāng)確定。過濾エ序中的過濾強(qiáng)度可根據(jù)添加提取物而獲得的食品的形態(tài)適當(dāng)選擇，本領(lǐng)域技術(shù)人員也可適當(dāng)確定該過濾方法。例如在固體食品(例如片劑)中使用時(shí)及不希望飲料澄清時(shí)，例如使用罐裝飲料等看不見外觀的容器時(shí)等，可為過濾預(yù)加熱エ序后的沉淀物的程 度即可，也可利用過濾網(wǎng)進(jìn)行過濾。此外，在希望為澄清時(shí)，例如用于透明瓶、PET瓶裝飲料等中的情況下，需要進(jìn)行強(qiáng)過濾。可通過用過濾網(wǎng)過濾后使用膜進(jìn)行過濾(離子交換膜、RO膜、Zeta電位膜、UF膜)或使用珪藻土進(jìn)行過濾等來進(jìn)行澄清化。本發(fā)明提取物、飲料可直接使用大量含有該化合物A的溶液，也可根據(jù)需要進(jìn)行濃縮以進(jìn)ー步提高化合物A濃度后使用。濃縮可通過蒸發(fā)器、冷凍干燥等進(jìn)行。在濃縮前后，化合物A的含量雖有所增加，但化合物A的含量(單位μ g/100g)和白利度(Bx)的比幾乎無變化。這是因?yàn)橥ㄟ^濃縮白利度(Bx)也增高了。因此，通過濃縮化合物A的含量(單位μ g/100g)和白利度(Bx)的比為6以上的溶液，可得到以更高含量含有化合物A、比為6以上的提取物，即使?jié)饪s化合物A的含量(單位μ g/100g)和白利度(Bx)的比小于6的溶液可得到高含量含有化合物A的提取物，但也得不到化合物A的含量(單位:yg/100g)和白利度(Bx)的比為6以上的提取物。本發(fā)明的飲料可根據(jù)需要制成適當(dāng)?shù)娜萜餮b飲料。通過以下實(shí)施例更具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。實(shí)施例<實(shí)施例I >化合物A的學(xué)習(xí)積極性改善作用(I)有關(guān)學(xué)習(xí)積極性增加作用，使用該技術(shù)領(lǐng)域已知的方法、即Morris水迷宮學(xué)習(xí)(Morris Water Maze :MWM)進(jìn)行評價(jià)。首先，在直徑90cm、高度35cm的圓筒狀箱內(nèi)，加入用墨汁染成黑色的水至水深20cm,水溫為22 ± I °C。在該箱內(nèi)放入C57BL/6小鼠(雄性、9周齡)進(jìn)行曠場游泳實(shí)驗(yàn)(OSS)。進(jìn)行OSS吋，小鼠的行動(dòng)發(fā)生了變化即陷入相當(dāng)于抑郁狀態(tài)的狀態(tài)。進(jìn)行5天的OSS試驗(yàn)后，將小鼠分為7組。而后，在上述的直徑90cm、高度35cm的圓筒狀箱內(nèi)，設(shè)置直徑IOcm的逃生平臺(tái)并使水深為0. 5cm。將化合物A (Bachem AG (Bubendorf, Switzerland))或?qū)Ρ人幬锺R來酸氟伏沙明(f luvoxamine maleate)對上述分為7組的小鼠ロ服給藥。60分鐘后，在設(shè)置有上述逃生平臺(tái)的箱內(nèi)放入小鼠，測定直到小鼠找到設(shè)置在水面下的不可視的逃生平臺(tái)為止的時(shí)間(逃避潛伏期)，評價(jià)空間認(rèn)知的記憶學(xué)習(xí)カ(MWM)。作為對照小鼠，將生理鹽水對未進(jìn)行OSS的動(dòng)物給藥，以進(jìn)行MWM。MWM為I天5次，進(jìn)行10天。結(jié)果如圖I所示。圖I表明，未進(jìn)行OSS的小鼠(no OSS-Vehicle)逃避潛伏期因重復(fù)試驗(yàn)而縮短，但進(jìn)行了 OSS的小鼠的學(xué)習(xí)積極性降低，逃避潛伏期未縮短(OSS-Saline)。另ー方面，在將化合物A給藥的組中，隨著給藥量增加，逃避潛伏期縮短。在O. 02mg/kg給藥組中，與將生理鹽水對未進(jìn)行OSS的動(dòng)物給藥的對照組(OSS-Vehicle)相比，進(jìn)行MWM試驗(yàn)10天后的逃避潛伏期縮短了 20%左右。此外，在20mg/kg給藥組中，與大量使用SSRI的馬來酸氟伏沙明給藥組(OSS-Fluvoxamine)相比，進(jìn)行MWM試驗(yàn)10天后的到達(dá)時(shí)間基本為相同程度。由此表明，化合物A具有學(xué)習(xí)積極性増加作用。<實(shí)施例2 >學(xué)習(xí)積極性改善作用(2)用與實(shí)施例I同樣的方法，進(jìn)ー步追加0. 002mg/kg給藥組，同樣進(jìn)行MWM試驗(yàn)。進(jìn)行MWM試驗(yàn)7天后的到達(dá)逃生平臺(tái)的到達(dá)時(shí)間如圖2所示。給藥0. 02mg/kg以 上時(shí)可確認(rèn)出化合物A的效果。由動(dòng)物的有效量推算對人的給藥量吋，使用考慮到動(dòng)物品種差別的系數(shù)10 (食品的安全性評價(jià)、栗飯?jiān)罢选?nèi)山充編著、學(xué)會(huì)出版中心(日語原名食品の安全性評価、粟飯?jiān)罢选?nèi)山充編著、學(xué)會(huì)出版センター)、1987)，人給藥量為小鼠給藥量的I / 10。因此，上述有效的0.02mg/kg在人(50kg)中為0. Img /人。將含有化合物A的食品制成飲料，其容量為IOOml時(shí)，其有效濃度為I. O μ g/ml。<實(shí)施例3 >學(xué)習(xí)積極性改善作用(3)用與實(shí)施例I同樣的方法，將20mg/kg化合物A對小鼠給藥后進(jìn)行MWM試驗(yàn)。作為對比，在將直鏈狀的ニ肽(Phe-Phe) 20mg/kg給藥后進(jìn)行MWM試驗(yàn)。結(jié)果圖3所示。圖3表明，未能確認(rèn)出直鏈狀的ニ肽(Phe-Phe)具有顯著的作用，但與對照組(0SS — Vehicle)相比，可看出化合物A的顯著的學(xué)習(xí)積極性改善作用。即可知學(xué)習(xí)積極性改善作用需要有環(huán)狀ニ肽結(jié)構(gòu)。<實(shí)施例4 >原料的探討作為含有蛋白質(zhì)的原料，使用牛肉、豬肉、魚、鵪鶉肉、蜆貝、雞肉(BlackChicken, Chicken)。在動(dòng)物體中混合I倍量的水放入容器中，作為預(yù)處理工序，用高壓滅菌器進(jìn)行135°C 4小時(shí)的預(yù)處理，作為加熱エ序，進(jìn)行135°C 4小時(shí)的加熱處理。回收加熱處理后的液體，添加食品添加劑75%磷酸(日本化學(xué)エ業(yè)株式會(huì)社)，調(diào)節(jié)pH到3。而后，用こ臆、用預(yù)處理色譜柱(OASIS MAX (Waters:30mg/lcc))進(jìn)行洗脫，通過高效液相色譜法(HPLC)對化合物A含量進(jìn)行定量。HPLC的條件如下。結(jié)果如圖4所示。(HPLC 條件)·裝置Agilent IlOOseries·色譜柱Develosil C30-UG-5 (4. 6x150mm, 5 μ m)·流動(dòng)相A :水、流動(dòng)相B 100%こ腈溶液. 梯度時(shí)間(分鐘)溶劑B
O. OO20%
9.0020%
23.0028%
24.0070%
31.0070%
31. 1020%
40.0020% 注入量10 μ I· UV檢測器波長215nm 流速I. Oml/min·色譜柱溫度32°C另外，雖可直接從烘焙咖啡豆中回收含有化合物A的液體，但在提取烘焙豆的咖啡飲料中未能測出化合物A。<實(shí)施例5 >含有化合物A的酸性提取物的制造(I)作為除去水溶性蛋白質(zhì)的預(yù)處理工序，將雞肉(200g)及水(200g)加入裝置色譜柱部，使用400cc高溫高壓反應(yīng)器(株式會(huì)社AKIKO)進(jìn)行高溫高壓處理。(2)而后，作為加熱エ序，僅將上述容器中的液體取出，廢棄液體。加入與雞肉的質(zhì)量等量的水，再次與(I)同樣進(jìn)行高溫高壓處理。(3)將所得到的液體用40目左右的過濾網(wǎng)過濾。而后在濾液中添加食品添加用的酸(磷酸·檸檬酸·蘋果酸等)以調(diào)節(jié)PH為3，離心分離(6500rpm、5分鐘)，進(jìn)ー步用過濾網(wǎng)(300目)過濾后,用5μηι過濾器(住友3Μ公司制)過濾。另外，有關(guān)下述表I的提取物1，未進(jìn)行預(yù)處理工序。對于各個(gè)提取物，測定pH、化合物A的含量及Bx，計(jì)算出化合物A含量/Bx的比。且對于Bx，使用Bx測定儀(RX-5000a :株式會(huì)社愛宕制)測定。由表I的結(jié)果可知，通過(I)進(jìn)行除去預(yù)處理的水溶性蛋白質(zhì)的エ序，且將預(yù)處理 條件設(shè)定為高溫·長時(shí)間，可使(2)加熱エ序中得到的提取物的Bx變低。其結(jié)果表明，可得到化合物A的含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比值高的提取物。表I
權(quán)利要求
1.一種提取物，其特征在于，含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)-，pH小于5。
2.根據(jù)權(quán)利要求I中所述的提取物，其特征在干，2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(35，65)-含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比為 O. I ( μ g/100g) /Bx 以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求I中所述的提取物，其特征在干，2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)_ 含量(yg/100g)和白利度(Bx)的比為 6 ( μ g/100g) /Bx 以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求I 3中任一項(xiàng)所述的提取物，其特征在干，以Iμ g/100g以上的濃度含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)_，(3S，6S)-。
5.根據(jù)權(quán)利要求I 3中任一項(xiàng)所述的提取物，其特征在于，以60μg/100g以上的濃度含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)-。
6.根據(jù)權(quán)利要求I 5中任一項(xiàng)所述的提取物，其特征在于，2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)_從天然物中提取。
7.根據(jù)權(quán)利要求6中所述的提取物，其特征在于，天然物為鳥獸肉類、魚貝類或貝類。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7中所述的提取物，其特征在于，天然物為雞肉。
9.一種提取物干燥物，其特征在于，將權(quán)利要求I 8中任一項(xiàng)所述的提取物干燥而獲得。
10.ー種酸性飲料，其特征在于，添加權(quán)利要求I 8中任一項(xiàng)所述的提取物而獲得。
11.ー種酸性飲料，其特征在于，含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)-，pH小于5。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11中所述的酸性飲料，其特征在于，2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)-，(3S，6S)_含量(μ g/100g)和白利度(Bx)的比為O. I ( μ g/100g)/Bx以上。
13.根據(jù)權(quán)利要求10 12中任一項(xiàng)所述的酸性飲料，其特征在于，以Iμ g/100g以上的濃度含有2，5-哌嗪ニ酮，3，6-雙(苯基甲基)_，(3S, 6S)-。
14.根據(jù)權(quán)利要求10 13中任一項(xiàng)所述的酸性飲料，其特征在于，所述飲料中不含有沉淀。
15.根據(jù)權(quán)利要求10 13中任一項(xiàng)所述的酸性飲料，其特征在于，所述飲料中含有沉淀，從飲料中回收的每Ig沉淀中所含有的蛋白質(zhì)為0. Olmg以下。
16.ー種容器裝飲料，其特征在于，裝入了權(quán)利要求10 15中任ー項(xiàng)所述的飲料。
17.—種制造方法，其為權(quán)利要求I中所述的提取物的制造方法，其特征在于，包含 (O以鳥獸肉類、魚貝類或貝類為原料，通過在液體中加熱而除去這些原料中所含有的水溶性蛋白質(zhì)的預(yù)處理工序； (2)在所述預(yù)處理后交換液體，再次加熱的エ序； (3)添加酸的エ序；及 (4)過濾所得到的液體樣品的エ序。
18.根據(jù)權(quán)利要求17中所述的制造方法，其特征在于，所述エ序(3)中添加的酸選自磷酸、蘋果酸及檸檬酸中的ー種以上。
19.一種制造方法，其為權(quán)利要求11中所述的飲料的制造方法，其特征在于，包含 (O以鳥獸肉類、魚貝類或貝類為原料，通過在液體中加熱而除去這些原料中所含有的水溶性蛋白質(zhì)的預(yù)處理工序；(2)在所述預(yù)處理后交換液體，再次加熱的エ序； (3)添加酸的エ序；及 (4)過濾所得到的液體樣品的エ序。
20.根據(jù)權(quán)利要求19中所述的制造方法，其特征在于，所述エ序(3)中，添加的酸選自磷酸、蘋果酸及檸檬酸中的ー種以上。
全文摘要
本發(fā)明提供含有作為具有學(xué)習(xí)積極性改善作用的有用物質(zhì)的2,5-哌嗪二酮,3,6-雙(苯基甲基)-,(3S,6S)-，可用于制造酸性飲料的提取物等。在含有2,5-哌嗪二酮,3,6-雙(苯基甲基)-,(3S,6S)-的提取物的制造中，通過包括酸處理工序，可得到即使添加到飲料中時(shí)也不產(chǎn)生沉淀的酸性提取物。本發(fā)明的提取物不損壞飲食物原本的呈味，可添加到飲料等中，可用于被市場喜好的酸性飲料的制造中。
文檔編號C07K5/06GK102665451SQ20108005922
公開日2012年9月12日 申請日期2010年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月25日
發(fā)明者山本憲司, 松林秀貴, 渡邊齊志 申請人:三得利控股株式會(huì)社, 食益補(bǔ)太平洋有限公司