專利名稱：一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及到一種瓜蔞籽粗蛋白的提取 工藝。
背景技術(shù)：
瓜蔞又名天瓜、藥瓜、野苦瓜、栝蔞等。為葫蘆科瓜蔞屬多年生草質(zhì) 藤本植物。瓜蔞全身都是寶果實、莖葉、根塊均可入藥。整個干燥果實 中藥名稱全瓜蔞，果殼稱瓜蔞皮，種子稱瓜蔞籽，其藥用與食用價值極高: 據(jù)《本草綱目》記載有健胃、潤肺、化痰、散結(jié)、滑腸作用，主治痰熱咳 嗽、肺痰咳血、胸悶、消灣、和便秘等癥?，F(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究證明瓜蔞籽有擴張心臟冠脈、增加冠脈流量作用， 對急性心肌缺血有明顯的保護作用，對離體絨癌細胞增殖和艾滋病毒具有 強烈的抑制作用，對糖尿病有一定的治療作用，對高血壓、高血脂、高膽 固醇有輔助療效，同時能提高肌體免疫功能并有瘦身美容之功效。瓜萎籽的主要成分包括蛋白質(zhì)類、油脂類、氨基酸類、揮發(fā)油類、甾 醇類、三萜類及無機原素類。瓜萎籽蛋白是一種堿性植物蛋白質(zhì)，具有多 種生理功能，如引產(chǎn)抗孕、免疫抑制等功能，并能抑制人艾滋病病毒(HIV) 的復(fù)制和繁殖，其在食品和醫(yī)療上的用途越來越引起研究人員重視。然而 關(guān)于瓜蔞籽蛋白質(zhì)提取工藝的研究目前還處于起步階段，因此，研究出一 種科學(xué)提取工藝，將對瓜蔞籽蛋白質(zhì)在食品及醫(yī)療方面的研究和應(yīng)用起到 很大的推動與促進作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對目前瓜蔞籽蛋白質(zhì)提取工藝尚屬空白，提供一 種工藝簡單、實用、蛋白質(zhì)得率高的瓜蔞籽粗蛋白提取工藝。本發(fā)明的瓜蔞籽粗蛋白提取工藝包括以下步驟1) 將瓜蔞籽干燥、粉碎后過20 40目篩，用超臨界C02萃取法提取 油脂；2) 用堿溶酸沉法從剩余渣滓中提取蛋白，工藝參數(shù)為料液中殘渣 與稀堿液的質(zhì)量體積比(w/v)為1:5 1:40，稀堿液質(zhì)量濃度為0. 5 5%、 提取時間為30 120min、提取溫度為40 80°C，酸沉后冷凍離心得粗蛋 白提取物，干燥。干燥后可稱重并計算蛋白得率。所述油脂的超臨界萃取條件為萃取壓力為10 35MPa，分離壓力為 6 10MPa，萃取溫度為30 6(TC，分離溫度為30 60。C， C02流量為10 80L/h，萃取時間為1 5h。所述稀堿液優(yōu)選氫氧化鈉稀溶液。所述酸沉離心條件為用1 2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH為3. 8 4. 2，最優(yōu) 選為4. 1，溫度為0 5"C，沉降時間為8 15小時；在0 5'C下，1400 1600r/min離心15 25min。發(fā)明人通過研究得到所述稀堿液提取法最優(yōu)選的工藝參數(shù)為料液中 殘渣與稀堿液的質(zhì)量體積比(w/v)為1: 20、稀堿液質(zhì)量濃度為2%、提 取時間為60min、提取溫度為70'C。本發(fā)明的瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝具有以下優(yōu)勢1、 本發(fā)明的工藝對瓜蔞籽蛋白質(zhì)在食品及醫(yī)療方面的研究和應(yīng)用起 到很大的推動與促進作用；2、 本發(fā)明的提取工藝操作簡便，粗蛋白得率高，所采用化學(xué)試劑價 廉易得、無毒安全，便于產(chǎn)業(yè)化實施。
具體實施方式
下面通過實施例對本發(fā)明作進一步說明，以下實施例是為了更好地闡述本發(fā)明，而不是用來限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明可以按發(fā)明內(nèi)容所述的 任一方式實施。 實施例11、 原料、試劑與儀器設(shè)備1) 本發(fā)明供試瓜蔞籽原料由湖南威龍瓜蔞公司提供。2) 試劑與儀器設(shè)備如下試劑液態(tài)二氧化碳，氫氧化鈉(分析純)，氯化鈉(分析純)，稀鹽 酸，蒸餾水。儀器設(shè)備HA121-50-01C型超臨界萃取裝置系統(tǒng)，余姚市東方電工儀 器廠HH. W21. 420型電熱恒溫水箱，上海-恒科學(xué)儀器有限公司DHG^9620A型 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，SevenEasy型精密酸度計，LD5-10型臺式離心機，TDZ4B 型低速離心機，AUY120型電子分析天平。2、 瓜蔞籽粗蛋白的提取過程1) 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過30目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為20MPa，分離壓力為8MPa，萃取 溫度為45。C，分離溫度為45。C， C02流量為45L/h，萃取時間為3h，回收 油脂。2) 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入1Q/。的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 10，在5(TC下提取60min。用2mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. 1，在3"C下沉降11小時。 在3'C下，以1500r/min離心20min，得粗蛋白提取物，干燥后稱重為7. 44 克，計算粗蛋白質(zhì)得率。計算公式為粗蛋白得率(％)=干燥后粗蛋白提 取物重量/干燥瓜蔞籽重量X 100%，結(jié)果為7. 44%。實施例21、 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過40目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為35MPa,分離壓力為9MPa，萃取 溫度為55'C，分離溫度為45'C， CO2流量為60L/h，萃取時間為3h，回收 油脂。2、 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入2%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 10，在60。C下提取75min。用1. 5mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至3. 8，在4'C下沉降14小時。 在3"C下，以1600r/min離心15min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 78克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8. 78%。實施例31、 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過20目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為15MPa，分離壓力為9MPa，萃取 溫度為45。C，分離溫度為55'C, CO2流量為70L/h，萃取時間為4h，回收 油脂。2、 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入3%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 10，在70。C下提取90min。用1. 2mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. 0，在4'C下沉降14小時。 在3t下，以1400r/min離心25min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 38克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8. 38%。實施例41、 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過30目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為20MPa，分離壓力為10MPa，萃 取溫度為30'C，分離溫度為35'C, CO2流量為70L/h，萃取時間為4h，回 收油脂。2、 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入1%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 15，在70。C下提取75min。用1. 8mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. l，在4。C下沉降10小時。 在3。C下，以1400r/min離心25min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 19克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8. 19%。
實施例5
1、 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過30目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為35MPa，分離壓力為7MPa,萃取 溫度為40'C，分離溫度為45'C， CO2流量為50L/h，萃取時間為5h，回收 油脂。2、 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入2%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 15，在50'C下提取90min。用1. 2mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. O，在3。C下沉降15小時。 在3。C下，以1500r/min離心20min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 22克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8.22 %。
實施例6
1、采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過30目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為30MPa，分離壓力為7MPa，萃取 溫度為5(rC，分離溫度為35。C， CO2流量為60L/h，萃取時間為4.5h，回 收油脂。2、通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入3%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 15，在6(TC下提取60min。用2mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. 1 ，在4。C下沉降14小時。 在3'C下，以1500r/min離心20min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 93克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8. 93%。實施例71、 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過40目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為28MPa，分離壓力為8MPa，萃取 溫度為40'C，分離溫度為5(TC， CO2流量為50L/h,萃取時間為2h，回收 油脂。2、 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入1%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 20，在6(TC下提取90min。用1. 6mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至3. 8，在4。C下沉降14小時。 在3'C下，以1400r/min離心25min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 32克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8.32%。實施例81、采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過30目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為20MPa，分離壓力為7MPa，萃取 溫度為45'C，分離溫度為45'C, CO2流量為60L/h，萃取時間為3h,回收 油脂。2、通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入2%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 20，在70。C下提取60min。用1. 2mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. l,在4。C下沉降14小時。 在3。C下，以1400r/min離心25min，粗蛋白提取物干燥后稱重為9. 04克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為9. 04%。實施例91、 采用超臨界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蔞籽100克，粉碎后過20目篩，置于超臨界萃取釜中萃 取油脂，超臨界萃取條件為萃取壓力為30MPa，分離壓力為8MPa，萃取 溫度為40'C,分離溫度為3(TC， CO2流量為50L/h，萃取時間為3h，回收 油脂。2、 通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液殘渣中加入3%的氫氧化鈉溶液，其中料液殘渣與 稀氫氧化鈉溶液質(zhì)量體積比(w/v)為l: 20，在5(TC下提取75min。用1. 2mol/L鹽酸將上述提取液pH值調(diào)至4. 0，在4'C下沉降14小時。 在3'C下，以1400r/min離心25min，粗蛋白提取物干燥后稱重為8. 96克， 計算粗蛋白質(zhì)得率為8. 96%。
權(quán)利要求
1、一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其特征在于，包括以下步驟1)將瓜蔞籽干燥、粉碎后過篩，用超臨界CO2萃取法提取油脂；2)用堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白，工藝參數(shù)為∶料液中殘渣與稀堿液的質(zhì)量體積比(w/v)為1∶5～1∶40，稀堿液濃度為0.5～5％、提取時間為30～120min、提取溫度為40～80℃，酸沉后冷凍離心得粗蛋白提取物，干燥。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其特征在于， 瓜蔞籽干燥、粉碎后過20 40目篩。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其特征在于， 油脂的超臨界C02萃取條件為萃取壓力為10 35MPa,分離壓力為6 10MPa， 萃取溫度為30 60°C,分離溫度為30 60°C, 0)2流量為10 80L/h，萃取時 間為l 5h。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其特征在于， 所述稀堿液為氫氧化鈉稀溶液。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1 4任一項所述的一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其 特征在于，所述料液殘渣與稀堿液的質(zhì)量體積比為1: 20、稀堿液質(zhì)量濃度為 2%、提取時間為60min、提取溫度為7(TC。
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其特征在于， 所述酸沉離心條件為所述酸沉離心條件為用1 2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH為 3. 8 4. 2，溫度為0 5°C，沉降時間為8 15小時；在0 5°。下，1400 1600r/min離心15 25min。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，其特征在于， 所述酸沉離心條件為用1 2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH為4. 1。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種瓜蔞籽粗蛋白的提取工藝，包括以下步驟1)將瓜蔞籽干燥、粉碎后過篩，用超臨界CO₂萃取法提取油脂；2)通過堿溶酸沉從剩余渣滓中提取蛋白，工藝參數(shù)為料液中殘渣與稀堿液的質(zhì)量體積比(w/v)為1∶5～1∶40，稀堿液質(zhì)量濃度為0.5～5％、提取時間為30～120min、提取溫度為40～80℃，酸沉后冷凍離心得粗蛋白提取物，干燥。本發(fā)明工藝簡單實用、粗蛋白得率高，便于產(chǎn)業(yè)化實施。
文檔編號C07K1/30GK101215319SQ20081003052
公開日2008年7月9日 申請日期2008年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月21日
發(fā)明者李赤翎 申請人:長沙理工大學(xué)