專利名稱：放射性過渡金屬－亞氨雜二膦絡(luò)合物、它們的制備以及其放射性藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及放射性過渡金屬-亞氨雜絡(luò)合物(heterocomplex)、包含所述絡(luò)合物的放射性藥物以及生產(chǎn)其的方法。更具體而言，本發(fā)明的絡(luò)合物包含放射性锝或錸的亞氨衍生物以及與之配位的兩個(gè)不同配體。
背景技術(shù)：
99mTc-亞氨核通常僅在一系列適于研發(fā)锝放射性藥物的新核中被引用(Archer C.等人，WO 91/03262以及其中引用的參考文獻(xiàn))。盡管使用99Tc和無放射性的Re在“載體添加(carrier added)(ca)”水平或換言之在宏觀水平上獲得一些其中明確確定存在有亞氨基的實(shí)例，但是這種在“無載體添加(nca)”水平或換言之在微觀水平的化學(xué)的轉(zhuǎn)移迄今為止仍然遇到嚴(yán)重的障礙。術(shù)語“宏觀”或“載體添加”水平指在10-3至10-5M濃度范圍內(nèi)發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)。該反應(yīng)在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室(必要時(shí)允許有低水平的放射性)采用1至200mg的非放射性Re或放射性99Tc進(jìn)行。術(shù)語“微觀”或“無載體添加”水平指采用微克至納克級(jí)的放射性99mTc或放射性188Re在10-6至10-9M濃度范圍內(nèi)發(fā)生的反應(yīng)(還參見IUPAC化學(xué)術(shù)語總目錄(Compendium of Chemical Terminology)，第2版(1997)，其中“無載體添加”的定義為“…放射性同位素的制備，其中放射性同位素基本不含所述元素的穩(wěn)定同位素…”)。這些反應(yīng)通常在醫(yī)院的核醫(yī)學(xué)部進(jìn)行，用于臨床目的(Deutsch，E.，Libson，K.，锝化學(xué)的最新進(jìn)展橋聯(lián)無機(jī)化學(xué)與核醫(yī)學(xué)(Recent advances in technetium chemistrybridging inorganic chemistry andnuclear medicine)，Comments Inorg.Chem.，3，83-103，1984)。
通過用99Tc在宏觀水平進(jìn)行研究，僅報(bào)道了5種Tc(V)-亞氨絡(luò)合物的晶體結(jié)構(gòu)。它們包括[Tc(NR)Cl3(PPh3)2]，其中R為苯基(Nicholson T.等人，Inorg.Chim.Acta，187(1991)51)或甲苯基(Dilworth J.等人，Technetium in Chemistry and Nuclear Medicine-3，Raven出版社，紐約，(1990)，109)。通過改變鹵離子(由Cl變?yōu)锽r)和/或膦(由PPh3變?yōu)镻MePh2和PMe2Ph)，已經(jīng)生成三種其它的苯基-亞氨化合物，即[Tc(NPh)Cl3(PMePh2)2]、[Tc(NPh)Br3(PMePh2)2](Rochon F.D.等人，Inorg.Chem.34(1995)2273)和[Tc(NPh)Cl2(PMe2Ph)3]+(Nicholson T.等人，Inorg.Chim.Acta，230(1995)205)。
盡管如此，未曾具體地公開以微觀水平成功轉(zhuǎn)移上述制備的可能性，甚至也沒有這方面的建議。
所有上述絡(luò)合物均為與理想的八面體相比略有變形的六次配位化合物。其配位層完全被不會(huì)帶來強(qiáng)的空間位阻的單齒配體(鹵離子和單膦)所填充。在此處，Tc原子離開中間基面(mean basal plane)僅0.11而指向亞氨單元。亞氨核基本是直線型的(Tc＝N-C的平均角度為175.7°)，相當(dāng)一部分的Tc-N鍵表現(xiàn)出雙鍵特性(平均值為1.71；參見G.Bandoli等人，Coord.Chem.Rev.，214(2001)43)。
在Tc(V)-亞氨化合物的配位層中引入螯合配體的可能性分別由不同的作者加以證實(shí)。Nicholson等人(Inorg.Chim.Acta，196(1992)27)引入簡(jiǎn)單的二齒二膦，即1，2-二(二苯膦)乙烷(dppe)，以生成[Tc(NPh)Cl3(dppe)]。Tisato等人(J.Organom.Chem.637-639(2001)772)利用1，2-二(二苯膦)二茂鐵基(dppf)來生成相似的[Tc(NPh)Cl3(dppf)]絡(luò)合物。類似地，通過使用二齒的(2-二苯膦(diphenylphosphine))苯胺(H2dpa)或四齒的N，N′-二[(2-二苯膦)苯基]丙-1，3-二胺合成了錸(Re)絡(luò)合物(Refosco F.等人，J.Chem.Soc.Dalton Trans 1998，923-930)。
盡管有上述結(jié)果，但是為穩(wěn)定99mTc-亞氨核而作出的連續(xù)大量努力仍然出人意料地遭到失敗，因?yàn)闆]有發(fā)現(xiàn)適宜的給電子原子組合來支持該基團(tuán)，然而正相反，當(dāng)為有幾分相似的99mTc-氧絡(luò)(99mTc-oxo)核和99mTc-氮絡(luò)(99mTc-nitrido)核時(shí)則成功地實(shí)現(xiàn)了該目標(biāo)。氧絡(luò)部分[99mTc(O)]3+、亞氨部分[99mTc(NR)]3+和氮絡(luò)部分[99mTc(N)]2+為等電子核，其中金屬為5+氧化態(tài)，并且在此處認(rèn)為锝-亞氨基是氧核與氮核的中間狀態(tài)。先前的研究已經(jīng)確定Tc(V)-氧絡(luò)基團(tuán)可容易被四齒配體所穩(wěn)定，如在用于臨床的放射性藥物Ceretec、Technescan和Neurolite中的N4-六甲基丙烯胺肟(HM-PAO)、N3S-巰基乙酰基三甘氨酰(MAG3)和N2S2-雙半胱乙酯(ECD)所證明的。另一方面，Tc(V)-氮絡(luò)基團(tuán)優(yōu)選兩種不同多齒配體的組合。先前有關(guān)99Tc-亞氨絡(luò)合物的研究已經(jīng)證明通常獲得變形的八面體環(huán)境，其配位作用由單齒配體、優(yōu)選叔單膦和鹵離子構(gòu)成。嘗試用多種多齒螯合配體來替換原型前體[Tc(NPh)Cl3(PPh3)2]中存在的基于磷的單齒供體未能成功，這表明亞氨基僅被單齒單膦配體所穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)可能用三齒雜二膦配體L1來替換兩個(gè)單齒三苯膦取代基，其中所述L1在連接所述兩個(gè)膦基團(tuán)的間隔鏈中包含給電子雜原子，而不影響所得[(Me＝N-R)Y2(L1)]+Y-化合物中亞氨基的穩(wěn)定性，其中Y為離去基團(tuán)如鹵原子、羥基或烷氧基。該三齒雜二膦螯合物的面式構(gòu)型使兩個(gè)Y基團(tuán)順式配位，所述Y基團(tuán)從而易于被適宜的二齒配體L2取代，得到最終所需的[(Me＝N-R)L1L2]+Z-金屬雜絡(luò)合物。
因此，本發(fā)明首先提供了式(I)的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合化合物[(Me＝N-R)L1L2]+Z-(I)，其中Me為選自99mTc、186Re和188Re的放射性過渡金屬；R為直鏈或支鏈的C1-C15烷基或鏈烯基，其任選被-O-、-S-、-N(R′)-間隔，其中R′為H或C1-C6烷基，和/或任選被鹵素、羥基、C1-C5烷氧基、羧基、酯、硫醇、伯氨或仲氨或者酰氨基取代，或者R為苯基或芳基，R任選被生物活性物質(zhì)取代，其中所述生物活性物質(zhì)選自糖、氨基酸、脂肪酸、維生素、激素、肽和兒茶酚胺，所述兒茶酚胺任選經(jīng)肽鍵與上述其它生物活性物質(zhì)結(jié)合；L1為式(II)的三齒雜二膦配體
其中R1、R2、R3和R4可以相同或不同，如R所定義；X為氧、硫或NR5，其中R5為氫或R；n為1至5的整數(shù)；L2為二齒配體，其包含兩個(gè)選自氧、硫和氮的給電子原子的組合，其中所述原子優(yōu)選帶有負(fù)電荷且被2至4元間隔基隔開，所述間隔基為脂肪鏈或芳環(huán)一部分，L2任選與上述所定義的生物活性物質(zhì)結(jié)合；Z-為帶有單個(gè)負(fù)電荷的抗衡離子，選自Cl-、Br-、OH-、ClO4-、烷氧離子且優(yōu)選EtO-，以及四氟硼酸根離子。
優(yōu)選的R為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、辛基、癸基、十二烷基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、苯基、芐基、甲苯基、4-甲氧基芐基、4-乙氧基芐基或水楊基。
優(yōu)選的式(II)三齒雜二膦配體L1為其中n＝2的那些。最優(yōu)選的配體L1選自(C6H5)2PCH2CH2N(H)CH2CH2P(C6H5)2；(C6H3)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(C6H5)2；(CH3)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(CH3)2；(C6H5)2PCH2CH2SCH2CH2P(C6H5)2；(C6H5)2PCH2CH2OCH2CH2P(C6H5)2；(C6H5)2PCH2CH2N(CH2CH2OCH3)CH2CH2P(C6H5)2。
二齒配體L2優(yōu)選在兩個(gè)給電子原子之間包含如上定義的2或3元間隔基。適宜的給電子原子的組合優(yōu)選帶有負(fù)電荷，為[O-，O-]、[N-，O-]、[S-，O-]、[N-，N-]、[N-，S-]和[S-，S-]。優(yōu)選的二齒配體是兒茶酚陰離子(2-)、碳酸根(2-)、1，2-氨基苯酚陰離子(2-)、1，2-苯二硫醇陰離子(2-)、乙二醇陰離子(2-)、乙二胺陰離子(2-)、乙二硫醇陰離子(2-)、1，2-苯二胺陰離子(2-)、1，2-氨基硫代苯酚陰離子(2-)、硫代水楊酸根(2-)或1，2-氨基乙醇陰離子(2-)等。
二齒配體L2優(yōu)選載有如上所定義的生物活性物質(zhì)。在所述的生物活性物質(zhì)中，優(yōu)選的是兒茶酚胺，如多巴胺、左旋多巴(L-DOPA)和3-羥酪胺(3-hydroxythyramine)。兒茶酚胺反過來可經(jīng)肽鍵與其它生理活性物質(zhì)結(jié)合。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，維生素H與多巴胺結(jié)合。
式(I)的放射性化合物可通過使式(III)的中間化合物[(Me＝N-R)Y2(L1)]+Y-(III)與二齒配體L2反應(yīng)而獲得，其中Me、R、L1和L2如上定義，且Y為鹵素(優(yōu)選氯或溴)、羥基或烷氧基(優(yōu)選乙氧基)，或者是可容易地進(jìn)行親核取代反應(yīng)的離去基團(tuán)。
該反應(yīng)通常在有機(jī)溶劑中進(jìn)行，可存在有有機(jī)堿或者在緩沖條件下進(jìn)行，優(yōu)選在磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行。優(yōu)選的溶劑為醇和氯化溶劑。優(yōu)選的有機(jī)堿為叔胺，更優(yōu)選為三乙胺。反應(yīng)溫度為室溫至溶劑的回流溫度。
終產(chǎn)物采用常規(guī)技術(shù)進(jìn)行分離和純化，所述常規(guī)技術(shù)如下述實(shí)驗(yàn)部分詳細(xì)描述的成鹽、結(jié)晶和色譜法。
按照下述流程

圖1的描述，由放射性過渡金屬氧化物依次合成式(III)的中間化合物，其中所述的放射性過渡金屬氧化物優(yōu)選是99mTcO4-、186ReO4-或188ReO4-，更優(yōu)選是99mTcO4-，將其在酸性含水醇溶液中以及在適宜亞氨供體(D)的存在下用過量叔單膦(優(yōu)選PPh3)處理，得到式(IV)的亞氨絡(luò)合物，其中Me、R和Y如上定義。然后用上述配體L1繼續(xù)處理，得到所需的式(III)中間體。
流程圖1 根據(jù)本發(fā)明，適宜的亞氨供體D優(yōu)選是1-取代-2-乙?；?，最優(yōu)選是1-苯基-2-乙?；?PAH)。
L1與式(IV)亞氨絡(luò)合物的反應(yīng)優(yōu)選在有機(jī)溶劑如醇、氯化溶劑、乙腈或其混合物中進(jìn)行，可以存在或不存在有機(jī)堿如三乙胺，溫度為室溫至溶劑的回流溫度。所需式(III)中間體的最終純化在下述實(shí)驗(yàn)部分充分描述。最終得以證明本發(fā)明的優(yōu)選的99mTc-亞氨雜絡(luò)合物可經(jīng)三步法以高锝酸鈉為原料在微觀水平獲得，其中所述高锝酸鈉從市售99Mo/99mTc發(fā)生器中洗脫而得。在第一步，將高锝酸鹽在鹽酸酸化的含水醇溶液中以及在1-苯基-2-乙酰基肼的存在下用過量叔單膦處理。在第二步，加入在有機(jī)溶劑中的三齒雜二膦配體，得到中間絡(luò)合物[99mTc(NPh)Cl2(L1)]+Y-。通過用磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)pH至7-4和通過加入優(yōu)選的二齒配體L2，以高的放射化學(xué)產(chǎn)率生成所需的亞氨雜絡(luò)合物(參見表1)。
本發(fā)明的優(yōu)選絡(luò)合物為[99mTc(NPh)(PNHP)(O，N-ap)]；[99mTc(NPh)(PNHP)(O，O-car)]；[99mTc(NPh)(PNMeP)(O，N-ap)]；[99mTc(NPh)(PNMeP)(S，N-atp)]；[99mTc(NPh)(PNMeP)(O，O-cat)]；[99mTc(NPh)(PNMeP)(S，O-tsal)]；[99mTc(NPh)(PNMeP)(S，S-bdt)]；其中，PNHP指(C6H5)2PCH2CH2N(H)CH2CH2P(C6H5)2；PNMeP指(C6H5)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(C6H5)2；O，N-ap指2-氨基苯酚陰離子(2-)；S，N-atp指2-氨基硫代苯酚陰離子(2-)；O，O-cat指兒茶酚陰離子(2-)；O，O-car指碳酸根(2-)；S，O-tsal指硫代水楊酸根(2-)；S，S-bdt指1，2-苯二硫醇陰離子(2-)已經(jīng)使用[99Tc(NPh)Cl3(PPh3)2]和[Re(NPh)Cl3(PPh3)2]作為前體在宏觀水平對(duì)含亞氨絡(luò)合物的反應(yīng)活性進(jìn)行了充分研究。
這些前體與三齒雜二膦配體L1反應(yīng)，得到[Me(NPh)Cl2(L1)][Cl]類的中間化合物。該雜二膦配體由于插在二膦鏈中的電子供體X雜原子的存在而作為三齒供體，并產(chǎn)生三種不同的八面體構(gòu)型，如下述的式(IIIA)面式，順式、(IIIB)經(jīng)式，順式和(IIIC)經(jīng)式，反式所示。
面式，順式， 經(jīng)式，順式經(jīng)式，反式在式(IIIA)、(IIIB)和(IIIC)中，a表示配體L1所占的位置，b表示配體Y所占的位置。
在經(jīng)式，順式-[Me(NPh)Cl2(L1)]+中間化合物中，就亞氨核而言處于反位的鹵離子基團(tuán)可容易地被親核配體(如乙醇陰離子)所取代，這表明鹵離子配體是活性(labile)的，并且是良好的離去基團(tuán)。在類似的取代反應(yīng)中，順位鹵離子被二齒親核配體如乙二醇或兒茶酚等置換，生成[Me(NPh)L1L2]+Z-類的亞氨雜絡(luò)合物。因此，經(jīng)式，順式-[Me(NPh)Cl2L1]+和面式，順式-[Me(NPh)Cl2L1]+兩種異構(gòu)體均是生產(chǎn)混合的亞氨雜絡(luò)合物的有用中間體。反之，由于L1二膦的經(jīng)式配位以及反式鹵離子的構(gòu)型所施加的強(qiáng)的空間位阻，經(jīng)式，反式-[Me(NPh)Cl2L1]+異構(gòu)體以微不足道的產(chǎn)率生成雜絡(luò)合物。因此，中間化合物中鹵離子互為順位是獲得本發(fā)明的雜絡(luò)合物的基本必要條件。
在最終的雜絡(luò)合物中，L1配體的立體化學(xué)始終是面式的，二齒配體L2填充八面體赤道面上剩余的兩個(gè)位置。
在下述實(shí)施例中對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
實(shí)施例在下述實(shí)施例中所用的三齒雜二膦配體L1和二齒配體L2縮寫如下三齒雜二膦配體L1
PNHP ；(C6H5)2PCH2CH2N(H)CH2CH2P(C6H5)2PNMeP；(C6H5)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(C6H5)2MePNMePMe；(CH3)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(CH3)2PNOMeP ；(C6H5)2PCH2CH2N(CH2CH2OCH3)CH2CH2P(C6H5)2POP ；(C6H5)2PCH2CH2OCH2CH2P(C6H5)2PSP ；(C6H5)2PCH2CH2OCH2CH2P(C6H5)2二齒配體L2O，O-cat；兒茶酚陰離子(2-)O，O-car；碳酸根(2-)N，N-pda；1，2-苯二胺陰離子(2-)S，S-bdt；1，2-苯二硫醇陰離子(2-)O，O-eg；乙二醇陰離子(2-)N，N-eh；乙二胺陰離子(2-)S，S-edt；乙二硫醇陰離子(2-)O，N-ap；1，2-氨基苯酚陰離子(2-)S，N-atp；1，2-氨基硫代苯酚陰離子(2-)S，O-tsal；硫代水楊酸根(2-)O，N-ae；1，2-氨基乙醇陰離子(2-)使用99Tc和Re在宏觀(ca)水平的化學(xué)實(shí)施例1經(jīng)式，順式-[99Tc(NPh)Cl2(PNHP)][Cl]的合成于攪拌下向[Tc(NPh)Cl3(PPh3)2](45mg)的二氯甲烷/甲醇(5mL/1mL)溶液中加入1.1當(dāng)量的固體PN(H)P。上述褐色混合物在2分鐘內(nèi)變?yōu)楹志G色。在3小時(shí)后通入氮?dú)饬魇谷芤鹤兏伞⒂蜖顨埩粑镉靡颐烟幚?，并將所得褐綠色固體過濾。將固體粗品在濾器上用丙酮(2mL)洗滌。所得淺綠色固體在氮?dú)庵懈稍?產(chǎn)量22mg，60％)。產(chǎn)物可溶于氯化溶劑和乙腈，微溶于醇，不溶于乙醚。
31P-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)31.6(bs).
1H-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)9.70(bs，1H；N-H)，8.06(m，4H，PPh2)，7.51(m，13H，PPh2+NPhγ，α)，7.02(m，6H，PPh2)，6.86(t，2H，NPhβ)，3.97(bt，2H，CH2)，3.34(bm，6H，CH2).
實(shí)施例2經(jīng)式，順式-[Re(NPh)Cl2(PNHP)][Cl]的合成向[Re(NPh)Cl3(PPh3)2](104mg，0.11mmol)在CH2Cl2中的懸浮液中滴加過量的溶于CH2Cl2中的PNHP·HCl(75mg，0.16mmol)和50μl NEt3(0.38mmol)。將反應(yīng)混合物回流2小時(shí)，然后于室溫下攪拌過夜。所得溶液為橄欖綠色。除去溶劑，將綠色固體用乙醚和水洗滌并真空干燥。該固體在CDCl3中的31P-NMR譜在4.3和8.4ppm處顯示出兩個(gè)峰，這表示存在有兩種新的產(chǎn)物。通過從CH2Cl2/正己烷混合物中結(jié)晶獲得純產(chǎn)物。得到灰藍(lán)色晶體(終產(chǎn)率為30-40％)，該化合物經(jīng)鑒定為[Re(NPh)Cl2(PN(H)P)]Cl。該產(chǎn)物在空氣中是穩(wěn)定的，可溶于CH2Cl2和CHCl3，極易溶于EtOH和MeOH，不溶于H2O、己烷和Et2O。
31P-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)8.48(s).
1H-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)8.07(m，4H，PPh2)，7.71(d，2H，)，7.50(m，11H，PPh2+NPhγ)，7.03(m，6H，PPh2)，6.87(t，2H，NPhβ)，4.01(bt，2H，CH2)，3.39(bm，2H，CH2)，3.22(bm，4H，CH2)，9.5(b，1H，NH).
實(shí)施例3經(jīng)式，順式-[Re(NPh)(OEt)Cl(PNHP)][Cl]的合成向[Re(NPh)Cl3(PPh3)2](52mg，0.057mmol)在EtOH中的懸浮液中滴加過量的溶于EtOH中的PNHP·HCl(43mg，0.089mmol)和25μl NEt3(0.19mmol)。將反應(yīng)混合物回流4小時(shí)所得溶液為綠黃色。在氮?dú)饬飨聺饪s體積，并加入Et2O數(shù)小時(shí)后形成大的亮藍(lán)色的[Re(NPh)(OEt)Cl(PNHP)]Cl晶體。
31P-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)-0.20(s).
1H-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)9.5(b，1H，NH)，8.00(m，4H，PPh2)，7.53(m，13H，PPh2+NPh)，7.07(m，6H，PPh2)，6.87(t，2H，NPhβ)，3.99(bt，2H，CH2)，3.41(m，2H，CH2)，3.18(m，2H，CH2)，2.98(m，2H，CH2)，2.64(q，2H；O-CH2-CH3)，-0.13(t，3H；O-CH2-CH3).
實(shí)施例4面式，順式-[Re(NPh)Cl2(PNMeP)][Cl]的合成向[Re(NPh)Cl3(PPh3)2]在CH2Cl2中的懸浮液中加入略過量的PNMeP(86mg，0.19mmol)。將反應(yīng)混合物回流24小時(shí)。濃縮所得綠黃色溶液并加入Et2O。對(duì)沉淀進(jìn)行TLC分析，表明是不同產(chǎn)物的混合物，因此通過色譜柱進(jìn)行分離(硅膠，CHCl3/EtOH 3/2)。收集到三種級(jí)分，其中兩種為黃色，一種為綠色。綠色產(chǎn)物經(jīng)鑒定為[Re(NPh)Cl2(PNMeP)]Cl。
31P{H}-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)19.9(s).
1H-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)4.08，3.45 and 2.95(m，8H CH2)，2.61(s，3H，CH3).
實(shí)施例5經(jīng)式，反式-[Re(NPh)Cl2(PNMeP)][Cl]的合成將[Re(NPh)Cl3(PPh3)2](100mg，0.11mmol)和PNMeP·HCl(86mg，0.17mmol)在乙腈中混合。經(jīng)回流15分鐘，反應(yīng)混合物變?yōu)闇\綠色。另外回流數(shù)小時(shí)，沉淀出綠色固體。4小時(shí)后，將混合物降至室溫并過濾。所得綠色粉末用Et2O洗滌，產(chǎn)物可溶于CH2Cl2，極易溶于CHCl3，幾乎不溶于Et2O和苯。經(jīng)NMR分析證明，溶液中存在有兩種異構(gòu)體(產(chǎn)率70％)，經(jīng)鑒定為順式-[Re(NPh)Cl2(PNMeP)]Cl·HCl。
1H-NMR(300MHz，CD2Cl2，ppm)6.59(d)；6.74(t)；7.45(t)(5H，NPh)；7.10(m)；7.24(m)；7.37(m)；7.55(m)；7.70(m)；7.85(m)；7.96(m)(20H，PPh2)；3.74(m)；3.35(m)；3.08(m)(8H，CH2)；2.99(d)；2.69(d)CH3.31P{H}NMR(300MHz，CD2Cl2，ppm)-25.1(s)；-26.9(s).
將該淺綠色粉末(順式-[Re(NPh)Cl2(PNMeP)]Cl·HCl)在過量NEt3的存在下溶于CH2Cl2中。經(jīng)NMR分析證明其定量轉(zhuǎn)化為經(jīng)式，反式-[Re(NPh)Cl2(PNMeP)]Cl絡(luò)合物。
31P-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)19.9(s)1H-NMR(CDCl3，ppm)＝7.6-7.1(20H；PPh2)4.08，3.45和2.95(m，8H；亞甲基質(zhì)子)；2.61(s，3H；CH3).
實(shí)施例6面式-[99Tc(NPh)(O，O-cat)(PNHP)][ClO4]的合成向按照實(shí)施例1制備的[99Tc(NPh)Cl2(PNHP)][Cl](26mg，0.04mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入兒茶酚(5.2mg，0.047mmol)和三乙胺(6.7μL，0.047mmol)?；旌衔锏念伾⒓醋?yōu)樯钭仙?。將該溶液攪?小時(shí)，經(jīng)氮?dú)饬鳚饪s至2mL。向溶液中加入1滴NaClO4在MeOH中的飽和溶液。1天后，生成暗灰色晶體；在濾器上收集晶體，并用1×2mL MeOH洗滌。
31P-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)46.5(bs).
1H-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)7.77(t，4H)，7.49(t，4H，)，7.40(t，4H)，7.22(m，6H)7.02(m，7H)，6.87(m，2H)，6，71(m，2H)，3.5-2.7(8H).
實(shí)施例7面式-[Re(NPh)(O，O-cat)(PNHP)][Cl]的合成于室溫下向按照實(shí)施例2制備的[Re(NPh)Cl2(PNHP)]Cl在CH2Cl2(40mg，0.05mmol)中的淺藍(lán)色溶液中加入兒茶酚(H2cat)(5mg，0.045mmol)和20μl NEt3。反應(yīng)混合物立即變?yōu)榧t色。于室溫下將溶液攪拌過夜。15小時(shí)后除去溶劑，殘留物用乙醚處理，所得紅褐色固體過濾并用正己烷、乙醚和水洗滌數(shù)次。得到[Re(NPh)(O，O-cat)(PNHP)]Cl，終產(chǎn)率為53％。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)7.85-7.07(m，25H，NPh和PPh2)，6.91-6.73(m，4H，catH)。31P-NMR19.5(s)。將化學(xué)計(jì)量的NBu4BF4加入[Re(NPh)(O，O-cat)(PNHP)]Cl的CH2Cl2溶液中，并加入正己烷沉淀出橙紅色產(chǎn)物。根據(jù)元素分析，該粉末被鑒定為[Re(NPh)(O，O-cat)(PNHP)]的四氟硼酸鹽。
31P-NMR19.5(s).
元素分析ReN2C40H38O2P2BF4，MW 913.7計(jì)算值C 52.6，N 3.2，H 5.1實(shí)際值C 52.9，N 3.2，H 5.1.
實(shí)施例8面式-[Re(NPh)(O，O-eg)(PNHP)][Cl]的合成于室溫下向?qū)嵤├?的[Re(NPh)Cl2(PNHP)]Cl(40mg，0.05mmol)在CH2Cl2中的淺藍(lán)色溶液中加入30μl乙二醇和20μl NEt3。將反應(yīng)混合物回流1小時(shí)，然后于室溫下攪拌24小時(shí)。溶液變?yōu)榛疑Ｔ诰徛ㄈ氲獨(dú)饬鞒ト軇┖?，將油狀殘留物用乙醚處理，并將所得灰色固體過濾。將固體粗品在濾器上用正己烷和水洗滌純化。通過從CH2Cl2/正己烷溶液中結(jié)晶，得到灰色的[Re(NPh)(O，O-eg)(PNHP)]Cl晶體，該晶體也適合于X-射線衍射分析。
31P{H}NMR(300MHz，CD2Cl2)17.2.1H-NMR(300MHz，CDCl3)7.74-6.91(m，25H，NPh和PPh2)，4.98(b，1H，NH)，4.78(d，2H，CH2)，4.60(d，2H，CH2)，3.2-2.9(m，8H，PCH2CH2N).
實(shí)施例9面式-[Re(NPh)(O，O-eg)(PNMeP)][Cl]的合成向?qū)嵤├?的面式，順式-[Re(NPh)Cl2(PNMeP)]Cl(50mg，0.06mmol)在CH3CN中的溶液中加入30μl乙二醇和20μl NEt3。將反應(yīng)混合物回流24小時(shí)。濃縮暗綠色溶液，并將油狀殘留物溶于CH2Cl2中。通過水萃取除去過量的乙二醇。干燥有機(jī)相并回收綠色粉末(產(chǎn)率43％)，該粉末經(jīng)鑒定為面式-[Re(NPh)(O，O-eg)(PNMeP)]Cl。
1H-NMR(300MHz，CDCl3，δppm)6.98-7.48(m，25H，NPh和PPh2)；4.91-4.76(m，4H CH)；3.58(m)，3.27(m)e 2.27(m)(8H，-CH2CH2-PNP；2.34(s，3H，N-CH3).
31P(CDCl3)＝24.3(s).
實(shí)施例10面式-[Re(NPh)(O，N-ap)(PNMeP)][Cl]的合成于室溫下向[Re(NPh)Cl3(PPh3)2](90mg，0.1mmol)在CH2Cl2中的懸浮液中加入PNMeP(53mg，0.11mmol)。5分鐘后加入1，2-氨基苯酚(17mg，0.16mmol)和20μl NEt3，并將反應(yīng)混合物回流。10分鐘后溶液由綠色變?yōu)樯詈稚??；亓?0分鐘后，將溶液于室溫下攪拌過夜。除去溶劑并將殘留物用乙醚處理。將紅褐色固體過濾并再次溶于CH2Cl2中。在硅膠柱上用CHCl3/MeOH 85/15洗脫，分離出黃色的副產(chǎn)物和紅色的面式-[Re(NPh)(O，N-ap)(PNMeP)][Cl]。
31P(CDCl3)＝17.8(d)，10.1(d)。
使用99mTc在微觀(nca)水平的化學(xué)實(shí)施例11中間體[99mTc(NPh)Cl2(L1)]+Y-的合成將0.1mL含有[99mTcO4]-(50Mbq)的生理鹽水加入裝有10mg PAH、3mg PPh3、0.1mL 1M HCl和1.5mL MeOH的小瓶中。將所得溶液于65℃加熱30分鐘。之后，加入0.2mL含有3mg適宜L1雜二膦配體(PNHP或PNMeP或PNOMeP)的醇溶液。所得溶液于65℃另外維持30分鐘。
對(duì)中間體[99mTc(NPh)Cl2(L1)]+絡(luò)合物進(jìn)行TLC分析，表明是不同產(chǎn)物的混合物。這與在宏觀水平所得的證據(jù)一致，在宏觀水平鑒定了某些中間絡(luò)合物。
實(shí)施例12[99mTc(NPh)L1L2]+Z-的合成該三步法制備包括首先生成具有通式[99mTc(NPh)Y2L1](Y＝鹵離子、水、羥基或烷氧基)的中間絡(luò)合物的混合物，之后通過與二齒配體L2反應(yīng)將其最終轉(zhuǎn)化為非對(duì)稱的化合物。具體而言，將0.250mL磷酸鹽緩沖液(1M，pH7.4)加入裝有如上獲得的中間化合物的小瓶中，之后加入0.2mL含有5mg適宜二齒配體L2的甲醇溶液。將混合物于65℃加熱1小時(shí)。通過TLC色譜法計(jì)算放射化學(xué)產(chǎn)率，報(bào)道于表1中。
表1TLC SiO2aEtOH/CHCl3/C6H6(1/2/1.5)；bCHCl3/MeOH(2％NH4OH20％)85/15；cCHCl3/MeOH(2％NH4OH 20％)90/10；dCHCl3/MeOH(2％NH4OH 20％)95/5

表1中化合物的Rf值與使用99Tc在宏觀水平所獲得的相應(yīng)化合物的Rf值完全一致，因而證明對(duì)于本發(fā)明的化合物，由宏觀水平轉(zhuǎn)移至微觀水平是可能的。
本發(fā)明的金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物被證明可用于放射性藥物領(lǐng)域，當(dāng)使用放射性金屬99mTc時(shí)可用于放射診斷造影，或者當(dāng)使用放射性金屬186Re和188Re時(shí)可用于放射療法。
因此，本發(fā)明還包括這些絡(luò)合物在診斷和/或治療性的放射性藥物領(lǐng)域中的用途以及包含所述化合物和可藥用載體和/或賦形劑的藥物組合物。
權(quán)利要求
1.式(I)的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合化合物[(Me＝N-R)L1L2]+Z-(I)，其中Me為選自99mTc、186Re和188Re的放射性過渡金屬；R為直鏈或支鏈的C1-C15烷基或鏈烯基，其任選被-O-、-S-、-N(R′)-間隔，其中R′為H或C1-C6烷基，和/或任選被鹵素、羥基、C1-C5烷氧基、羧基、酯、硫醇、伯氨或仲氨或者酰氨基取代，或者R為苯基或芳基，R任選被生物活性物質(zhì)取代，其中所述生物活性物質(zhì)選自糖、氨基酸、脂肪酸、維生素、激素、肽和兒茶酚胺，所述兒茶酚胺任選經(jīng)肽鍵與上述其它生物活性物質(zhì)結(jié)合；L1為式(II)的三齒雜二膦配體 其中R1、R2、R3和R4可以相同或不同，如R所定義；X為氧、硫或NR5，其中R5為氫或R；n為1至5的整數(shù)；L2為二齒配體，其包含兩個(gè)選自氧、硫和氮的給電子原子的組合，其中所述原子優(yōu)選帶有負(fù)電荷且被2至4元間隔基隔開，所述間隔基為脂肪鏈或芳環(huán)一部分，L2任選與上述所定義的生物活性物質(zhì)結(jié)合；Z-為帶有單個(gè)負(fù)電荷的抗衡離子，選自Cl-、Br-、OH-、ClO4-、EtO-和四氟硼酸根離子。
2.權(quán)利要求1的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，其中放射性過渡金屬為99mTc。
3.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，其中R選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、辛基、癸基、十二烷基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、苯基、芐基、甲苯基、4-甲氧基芐基、4-乙氧基芐基或水楊基。
4.權(quán)利要求3的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，其中R被生物活性物質(zhì)取代，所述物質(zhì)為選自多巴胺、L-DOPA和3-羥酪胺的兒茶酚胺，其任選經(jīng)肽鍵與權(quán)利要求1的另一生物活性物質(zhì)結(jié)合。
5.權(quán)利要求4的絡(luò)合物，其中多巴胺與維生素H結(jié)合。
6.權(quán)利要求1的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，其中L1選自(C6H5)2PCH2CH2N(H)CH2CH2P(C6H5)2；(C6H5)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(C6H5)2；(C6H5)2PCH2CH2N(CH2CH2OCH3)CH2CH2P(C6H5)2；(CH3)2PCH2CH2N(CH3)CH2CH2P(CH3)2；(C6H5)2PCH2CH2SCH2CH2P(C6H5)2；(C6H5)2PCH2CH2OCH2CH2P(C6H5)2。
7.權(quán)利要求1的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，其中L2包含兩個(gè)給電子原子的組合，該組合選自[O-，O-]、[N-，O-]、[S-，O-]、[N-，N-]、[N-，S-]和[S-，S-]，所述原子被2至4元間隔基隔開，其中所述間隔基為脂肪鏈或芳環(huán)一部分。
8.權(quán)利要求7的絡(luò)合物，其中L2選自兒茶酚陰離子(2-)、碳酸根(2-)、1，2-苯二胺陰離子(2-)、1，2-苯二硫醇陰離子(2-)、乙二醇陰離子(2-)、乙二胺陰離子(2-)、乙二硫醇陰離子(2-)、1，2-氨基苯酚陰離子(2-)、1，2-氨基硫代苯酚陰離子(2-)、硫代水楊酸根(2-)和1，2-氨基乙醇陰離子(2-)。
9.權(quán)利要求7的絡(luò)合物，其中L2與選自多巴胺、L-DOPA和3-羥酪胺的兒茶酚胺結(jié)合，所述兒茶酚胺任選與權(quán)利要求1的另一生物活性物質(zhì)結(jié)合。
10.權(quán)利要求9的絡(luò)合物，其中多巴胺與維生素H結(jié)合。
11.權(quán)利要求1的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，其中Z-為Cl-、ClO4-、EtO-或四氟硼酸根離子。
12.制備式(I)的放射性化合物的方法，該方法包括以下步驟-使過渡金屬氧化物MeO4-在鹽酸酸化的含水醇溶液和在1-取代-2-乙?；碌拇嬖谙屡c過量叔單膦反應(yīng)，得到式(IV)的亞氨絡(luò)合物[(Me＝N-R)Y3(PPh3)2](IV)，其中Me為99mTcO4-、186ReO4-或188ReO4-；R如權(quán)利要求1中定義；Y為Cl、Br或OH，-使所述式(IV)化合物與三齒雜二膦配體L1反應(yīng)，該反應(yīng)在選自醇、氯化溶劑、乙腈或其混合物的有機(jī)溶劑中進(jìn)行，存在或不存在有有機(jī)堿，溫度為室溫至溶劑的回流溫度，得到式(III)的中間化合物[(Me＝N-R)Y2(L1)]+Y-(III)其中Me、R、Y和L1如上定義，-在用磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)pH至7.4后，使所述式(III)中間化合物與二齒配體L2在醇溶液中反應(yīng)。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述1-取代-2-乙?；聻?-苯基-2-乙酰基肼。
14.權(quán)利要求12的方法，其中過渡金屬氧化物為99mTcO。
15.式(III)的中間化合物[(Me＝N-R)Y2(L1)]+Y-(III)其中Me、R、Y和L1如上定義。
16.式(I)的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，用于放射診斷造影。
17.式(I)的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物，用于放射療法。
18.藥物組合物，該組合物包含式(I)的放射性過渡金屬-亞氨雜二膦絡(luò)合物和可藥用的載體和/或賦形劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)的放射性金屬雜絡(luò)合物[(Me＝N－R)L
文檔編號(hào)C07F9/50GK1708321SQ200380102460
公開日2005年12月14日 申請(qǐng)日期2003年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月7日
發(fā)明者F·蒂薩托, C·博爾扎蒂, M·波爾基亞, F·雷福斯科 申請(qǐng)人:布雷克成像有限公司