專利名稱：植物細胞組織培養(yǎng)的教學試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物細胞組織培養(yǎng)的教學試劑盒，用于生物科學實驗導(dǎo)論教學中的植物細胞組織培養(yǎng)實驗。
背景技術(shù)：
目前，我國生物科學實驗教學面臨投入大、產(chǎn)效低的窘境，一般的實驗室都需要同時配置實驗教師和實驗員。在實驗前需要做大量的準備工作，往往先要購買與實驗相關(guān)的多種試劑和材料，然后根據(jù)實驗的要求、實驗的人數(shù)情況進行分組配制。這些工作的完成需要一定數(shù)量的實驗人員配置，同時購買的試劑和材料往往都大于實際需要的用量，因而存在不同程度的浪費，提高了實驗成本。同時實驗準備工作的技術(shù)難度也很高，對每個實驗小組的使用量，對每種試劑、每種材料用量的精確度量及分配，都要求細致準確，以保證實驗的正常進行。由此可見，準備實驗需要消耗和浪費大量的人力、物力、財力，急需一種新的準備實驗的方式。國產(chǎn)和進口科研試劑盒雖然在我國生物科學研究中應(yīng)用已非常普遍，具有方便、快捷、高效和結(jié)果準確可靠的特點，但是至今在國內(nèi)尚未見到適用于生物科學實驗導(dǎo)論教學的試劑盒專利產(chǎn)品。同時由于科研試劑盒一般都是針對某一特定實驗環(huán)節(jié)的，具有很強的技術(shù)特征，其內(nèi)容很難適應(yīng)面上的教學實驗。因而，發(fā)明一種適用于生物科學實驗教學的教學試劑盒顯得尤為必要和迫切。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足和實際需要，提供一種適用于植物細胞組織培養(yǎng)的教學試劑盒，可以方便的直接用來完成教學實驗，保證實驗的高效率，節(jié)約實驗成本。
為實現(xiàn)這樣的目的，本發(fā)明針對植物細胞組織培養(yǎng)實驗，將試劑和材料分別以小包裝形式分組裝在試劑盒內(nèi)，并按10組一個實驗教學標準班進行優(yōu)化配置，每組中各個小包裝內(nèi)的材料根據(jù)一個實驗小組的使用量設(shè)計，包括鑷子、眼科剪、解剖針、小培養(yǎng)皿、錫箔紙、煙草無菌苗、三角瓶(50ml)、封口膜、酒精棉球等。每個試劑盒內(nèi)裝有十組小包裝，并配備使用手冊，可供一個標準班開展實驗。
本發(fā)明的教學試劑盒含有植物細胞組織培養(yǎng)實驗的全套材料和試劑。試劑盒內(nèi)分組安放10組小包裝材料，每組包括一把鑷子、一把眼科剪、兩支解剖針、一套6cm小培養(yǎng)皿、一張錫箔紙、一瓶煙草無菌苗、一只三角瓶(50ml)、一條封口膜、一袋酒精棉球等。另外試劑盒還配有共用的一袋蔗糖(4g)、一袋瓊脂粉(3g)、一瓶培養(yǎng)基母液(可制備成200ml培養(yǎng)基)、一管滅菌激素(含0.535μmol的萘乙酸和0.22μmol的6-芐基腺嘌呤)，一袋次氯酸鈉消毒粉(0.5g)，一瓶70％的酒精，一包滅菌濾紙(10片)等。試劑和材料的用量是經(jīng)過歷年來多次實驗教學摸索得到的優(yōu)化值其中培養(yǎng)基母液30ml，可制備成200ml培養(yǎng)基，內(nèi)含有NH4NO3330mg、KNO3380mg、CaCl266.4mg、MgSO4·7H2O 74mg、KH2PO434mg、FeSO4·7H2O 5.56mg、Na2EDTA·2H2O 7.46mg、KI 0.166mg、H3BO31.24mg、MnSO4·7H2O 4.46mg、ZnSO4·2H2O 1.72mg、Na2MoO4·2H2O 50μg，CuSO4·5H2O 5μg、CoCl2·6H2O 5μg、肌醇20mg，煙酸100μg、鹽酸吡哆醇100μg、鹽酸硫胺素20μg、甘氨酸400μg，配制出的培養(yǎng)基最適合實驗材料的生長；滅菌激素含0.535μmol的萘乙酸和0.22μmol的6-芐基腺嘌呤，這種激素的濃度與配比適合于豌豆莖尖簇生芽生成；蔗糖(4g)1袋，給予培養(yǎng)基2％的碳源供實驗材料的生長；瓊脂粉(3g)1袋，使固體培養(yǎng)基的物理硬度適合材料的生長；煙草無菌苗10瓶，使教師在無菌材料的制備與培育上節(jié)省了大量的準備時間和精力；用錫箔紙進行培養(yǎng)三角瓶的封口，方便學生在火焰上封口的滅菌操作，減少接種后的污染，同時也保證了培養(yǎng)的濕度，即使沒有培養(yǎng)箱設(shè)備也可在室內(nèi)光照培養(yǎng)；封口膜的使用有效的避免了莖尖長時間培養(yǎng)后培養(yǎng)基易干燥和污染的問題；酒精棉球的配量每人可對手進行3～4次消毒，充分考慮到初學者因各種原因?qū)嶒炛袛嗪蟮睦^續(xù)實驗；次氯酸鈉以消毒粉(0.5g)形式配在試劑盒中，實驗前配制成溶液，避免了消毒液存放時間過長的失效問題；試劑盒中另備一本試劑盒使用手冊。
本發(fā)明的試劑盒中一組材料可供一組學生(2-3人)使用，十組材料可供一個標準班(30人)開展實驗。還可以根據(jù)不同的需要配備相應(yīng)的實驗指導(dǎo)教材和光盤。
實驗之前，實驗老師或準備人員只需要做簡單的準備工作將蔗糖和瓊脂粉加到培養(yǎng)基母液，并稀釋定容到200ml，制備成固體MS(Murashige & Skoog)培養(yǎng)基。其中150ml用于50ml三角瓶的分裝，每瓶15ml，封口滅菌；滅菌后，另外50ml培養(yǎng)基加滅菌激素后分裝到10個6cm小培養(yǎng)皿中(無菌操作)；將煙草無菌苗分發(fā)到各組，每組一瓶，豌豆幼苗可以從市場上購買，并分發(fā)到各組，每組20～30棵。將剪刀、鑷子、封口膜、酒精棉球分發(fā)到各組，每組一套，解剖針每組兩根；將次氯酸鈉消毒粉(0.5g)溶于500ml蒸餾水中，每組分裝50ml(或?qū)嶒灂r共同使用)；將70％消毒酒精(100ml)，每組分裝10ml(或?qū)嶒灂r共同使用)。
實驗時，學生首先完成第一部分實驗內(nèi)容，煙草無菌苗的快速切繁-繼代培養(yǎng)。具體操作點燃酒精燈，用酒精棉球擦拭雙手，打開生長有煙草無菌苗的三角瓶，三角瓶的瓶口在酒精燈外焰上燒過滅菌。用無菌鑷子夾出1株幼苗，用滅菌手術(shù)剪將無菌苗剪成0.5-1cm的小段，要求每段至少包含一個生長點，直接剪入盛有MS培養(yǎng)基的三角瓶中(實驗前按試劑盒使用手冊要求和試劑盒配備的藥品操作已準備好)，每一個切段必須直接接觸培養(yǎng)基，三角瓶口在酒精燈火焰上燒過滅菌，重新封口。15～25℃，每天16h光照條件下培養(yǎng)4周后，觀察。
再完成第二部分實驗內(nèi)容，豌豆苗莖尖培養(yǎng)。取發(fā)芽6天的豌豆幼苗10株，剪取1cm左右的莖尖，浸入70％的酒精(約10ml)中1min，再浸入飽和次氯酸鈉溶液(約50ml)中消毒15min，用無菌水沖洗5次，在滅菌濾紙上吸干水分，放入滅菌培養(yǎng)皿中。在雙目解剖鏡下，用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~露出生長錐，用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個葉原基的生長錐。將挑好的莖尖移到含有激素的MS培養(yǎng)基上誘導(dǎo)簇生芽的形成，用封口膜將培養(yǎng)皿封好。將培養(yǎng)皿置于26℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)六周，形成簇生芽，經(jīng)繼代培養(yǎng)后，可用于生根培養(yǎng)。
本發(fā)明的教學試劑盒提供了植物細胞組織培養(yǎng)實驗的全套材料和試劑，實驗老師不需要進行繁瑣的計算和稱量，只需簡單的配制、滅菌和分裝就可完成繁瑣的實驗準備，使學生開展煙草無菌苗的快速切繁和豌豆苗莖尖培養(yǎng)實驗。這樣一方面減少了實驗人員配置，另一方面也使得實驗教學快捷、高效，學生可獲得比較標準、可靠的實驗結(jié)果。
本發(fā)明為生物科學實驗導(dǎo)論教學提供了一種經(jīng)濟實用的教學試劑盒，將實驗試劑和材料按10組一個實驗教學標準班進行優(yōu)化配置，避免了不必要的浪費，節(jié)約了試劑和材料。實驗時，教師閱讀試劑盒使用手冊后，只要按照說明將每組所需的材料和試劑進行簡單的配制、滅菌和分裝后分發(fā)到各組結(jié)合講解即可進行實驗教學，省去了繁瑣的實驗準備，節(jié)約了教師的時間和精力。同時，工作效率的提高使得實驗人員的配置可以有一定的減少。學生根據(jù)教師的課堂講解以及試劑盒附有的使用手冊，可以在較短的時間內(nèi)對實驗內(nèi)容有很好的掌握并順利完成實驗。本發(fā)明的試劑盒使植物細胞組織培養(yǎng)實驗?zāi)軌蚋咝?、快速的完成并取得良好的實驗效果，可將實驗準備所需要消耗的財力、物力、人力降到最低?br>

圖1為本發(fā)明試劑盒所包含的試劑和藥品的展示。
圖中，1.試劑盒，2.培養(yǎng)基母液(可制備成200ml培養(yǎng)基)1瓶，3.蔗糖(4g)1袋，4.瓊脂粉(3g)1袋，5.鑷子10把，6.眼科剪10把，7.解剖針20根，8.小培養(yǎng)皿(6cm)10套，9.錫箔紙10片，10.煙草無菌苗10瓶，11.三角瓶(50ml)10瓶，12.封口膜10條，13.酒精棉球10袋，14.滅菌激素(含0.535μmol的萘乙酸和0.22μmol的6-芐基腺嘌呤)，15.次氯酸鈉消毒粉(0.5g)，16.滅菌濾紙(1包)，17.70％的酒精(100ml)，18.試劑盒使用手冊具體實施方式

以下結(jié)合附圖對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步描述。
圖1為本發(fā)明提供的教學試劑盒的一個實施例，試劑盒中包含了植物細胞組織培養(yǎng)實驗所需的全套材料和試劑。如圖1所示，實驗試劑和材料按10組一個實驗教學標準班進行優(yōu)化配置，每組中的材料為一個實驗小組的使用量，包括一把鑷子5、一把眼科剪6、兩支解剖針7、一套小培養(yǎng)皿8(6cm)、一片錫箔紙9、一瓶煙草無菌苗10、一只50ml三角瓶11、一條封口膜12、一袋酒精棉球13。另外還配有10組共用的一瓶培養(yǎng)基母液2(可制備成200ml培養(yǎng)基)、一袋4g裝蔗糖3、一袋3g裝瓊脂粉4、一管滅菌激素14、一袋0.5g裝次氯酸鈉消毒粉15、一包滅菌濾紙16，一瓶100ml 70％的酒精17以及試劑盒使用手冊18。
其中所述培養(yǎng)基母液為30ml，內(nèi)含有NH4NO3330mg、KNO3380mg、CaCl266.4mg、MgSO4·7H2O 74mg、KH2PO434mg、FeSO4·7H2O 5.56mg、Na2EDTA·2H2O 7.46mg、KI 0.166mg、H3BO31.24mg、MnSO4·7H2O 4.46mg、ZnSO4·2H2O 1.72mg、Na2MoO4·2H2O 50μg，CuSO4·5H2O 5μg、CoCl2·6H2O 5μg、肌醇20mg，煙酸100μg、鹽酸吡哆醇100μg、鹽酸硫胺素20μg、甘氨酸400μg。
所述滅菌激素含0.535μmol的萘乙酸和0.22μmol的6-芐基腺嘌呤。
試劑盒中上述每個小包裝中材料的用量是歷年實驗教學得到的優(yōu)化值，一組材料供一組學生(2-3人)使用，十組材料可供一個標準班(30人)開展實驗。
實驗時，將試劑盒中的每組材料取出分到各個實驗小組，按照使用手冊的說明，教師進行講解即可指導(dǎo)學生完成實驗。另外，試劑盒內(nèi)還可以根據(jù)不同的需要配置相應(yīng)的配套實驗指導(dǎo)教材和光盤，結(jié)合教學進行實驗，效果更好。
權(quán)利要求
1.一種植物細胞組織培養(yǎng)的教學試劑盒，其特征在于將植物細胞組織培養(yǎng)實驗所需的試劑和材料按10組一個實驗教學標準班進行優(yōu)化配置；每組中的材料為一個實驗小組的使用量，包括一把鑷子(5)、一把眼科剪(6)、兩支解剖針(7)、一套6cm培養(yǎng)皿(8)、一片錫箔紙(9)、一瓶煙草無菌苗(10)、一只50ml三角瓶(11)、一條封口膜(12)、一袋酒精棉球(13)；另外還配有共用的一瓶培養(yǎng)基母液(2)、一袋4g裝蔗糖(3)、一袋3g裝瓊脂粉(4)、一管滅菌激素(14)、一袋0.5g裝次氯酸鈉消毒粉(15)、一包滅菌濾紙(16)，一瓶100ml 70％的酒精(17)以及試劑盒使用手冊(18)；其中所述培養(yǎng)基母液為30ml，內(nèi)含有NH4NO3330mg、KNO3380mg、CaCl266.4mg、MgSO4·7H2O 74mg、KH2PO434mg、FeSO4·7H2O 5.56mg、Na2EDTA·2H2O 7.46mg、KI 0.166mg、H3BO31.24mg、MnSO4·7H2O 4.46mg、ZnSO4·2H2O 1.72mg、Na2MoO4·2H2O 50μg，CuSO4·5H2O 5μg、CoCl2·6H2O 5μg、肌醇20mg，煙酸100μg、鹽酸吡哆醇100μg、鹽酸硫胺素20μg、甘氨酸400μg；所述滅菌激素含0.535μmol的萘乙酸和0.22μmol的6-芐基腺嘌呤。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的植物細胞組織培養(yǎng)的教學試劑盒，其特征在于試劑盒(1)內(nèi)還配備實驗指導(dǎo)教材和光盤。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物細胞組織培養(yǎng)的教學試劑盒，針對植物細胞組織培養(yǎng)實驗，將試劑和材料按10組一個實驗教學標準班進行優(yōu)化配置，包括培養(yǎng)基母液、蔗糖、瓊脂粉、鑷子、眼科剪、解剖針、小培養(yǎng)皿、錫箔紙、煙草無菌苗、三角瓶、封口膜、酒精棉球、滅菌激素、次氯酸鈉消毒粉、滅菌濾紙、70％的酒精等。每個試劑盒內(nèi)裝有十組小包裝，每個試劑盒內(nèi)配備使用手冊，可供一個標準班開展實驗。本發(fā)明應(yīng)用于生物科學實驗導(dǎo)論教學中，可節(jié)約教師實驗準備時間，減少實驗人員配置，降低實驗準備時的技術(shù)難度，使植物細胞組織培養(yǎng)實驗?zāi)軌蚋咝?、快速的完成并取得良好的實驗效果?br> 文檔編號G09B19/00GK1804940SQ2006100232
公開日2006年7月19日 申請日期2006年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月12日
發(fā)明者曹陽, 張霞, 祝新德, 陳熹兮, 張承康, 熊順子 申請人:上海交通大學