孕激素藥物脂微球注射液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了孕激素藥物脂微球注射液及其制備方法，其中，孕激素藥物脂微球注射液包含：以孕激素藥物黃體酮為主藥；以及藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑，所述藥用賦形劑包括：油相，乳化劑，滲透壓調(diào)節(jié)劑，穩(wěn)定劑，pH值調(diào)節(jié)劑，以及注射用水。該孕激素藥物脂微球注射液質(zhì)量穩(wěn)定、注射無(wú)刺激性、安全性高，可用于局部肌肉注射和靜脈注射，有利于提高患者臨床用藥的順應(yīng)性、豐富臨床用藥選擇性。
【專利說(shuō)明】
孕激素藥物脂微球注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]發(fā)明屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體的，本發(fā)明涉及孕激素藥物黃體酮脂微球注射 液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃體酮作為一種孕激素，人工受精手術(shù)時(shí)，主要使用其注射劑(肌肉注射），但是目 前的注射劑采用苯甲醇和大豆油作為溶劑，該劑型具有以下缺點(diǎn)：（1)油劑注射時(shí)，局部刺 激性大，疼痛感明顯，易引起患者的緊張和焦慮；（2)油劑擴(kuò)散較慢，已經(jīng)注射的藥液易回 滲，引起給藥劑量不準(zhǔn)確，同時(shí)易引起注射刺入點(diǎn)的疼痛及感染；（3)因?yàn)樵撍幱盟幹芷谳^ 長(zhǎng)(體外受精-胚胎移植術(shù)后常需注射黃體酮10~12周），長(zhǎng)期局部注射油劑，會(huì)引起局部肌 肉組織硬結(jié)等；（4)經(jīng)常出現(xiàn)局部紅腫等過(guò)敏反應(yīng)；（5)注射時(shí)，推注阻力大，醫(yī)生使用不方 便。
[0003] 因此，關(guān)于黃體酮相關(guān)制劑的研究仍有待加強(qiáng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決上述技術(shù)問(wèn)題之一或至少提供一種有用的商 業(yè)選擇。為此，本發(fā)明的目的在于提出一種質(zhì)量穩(wěn)定、注射無(wú)刺激性、易擴(kuò)散、安全性高、或 者使用方便的黃體酮脂微球注射液。
[0005] 在本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種黃體酮脂微球注射液。根據(jù)本發(fā)明的實(shí) 施例，該黃體酮脂微球注射液包括:黃體酮、以及藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑。
[0006] 本發(fā)明所述黃體酮脂微球注射液，其藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑包含:油相，乳化 劑，滲透壓調(diào)節(jié)劑，穩(wěn)定劑，pH值調(diào)節(jié)劑，以及注射用水。
[0007] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液中，所述油相選擇為 重量比為1:1的注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物。
[0008] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液中，所述乳化劑為蛋 黃卵磷脂，具體可以為選自蛋黃卵磷脂E-80、蛋黃卵磷脂PL-100M、蛋黃卵磷脂PC-98T的至 少一種。
[0009] 卵磷脂是脂微球中常用的乳化劑，是由不同磷脂組分組成的混合物，其中磷脂酰 膽堿是其主要成分，此外還含有磷脂酰絲氨酸、磷脂酰乙醇胺等成分。不同種類的卵磷脂磷 脂酰膽堿含量不同，乳化效果不同，對(duì)制劑穩(wěn)定性可能產(chǎn)生不同的影響，故選擇適當(dāng)?shù)娜榛?劑很重要。本發(fā)明以性狀、乳粒的平均粒徑(Z-Ave)、90%累積粒徑值(Di90)、多分散系數(shù) (PDI)作為主要指標(biāo)，制備樣品進(jìn)行考察，以確定合適的乳化劑，結(jié)果表明選擇精制蛋黃卵 磷脂E-80、PL-100M、以及PC-98T作為乳化劑，效果較理想。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液中，所述滲透壓調(diào)節(jié) 劑為注射用甘油。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液中，所述穩(wěn)定劑為選 自油酸、磷脂酰甘油、油酸鈉中的至少一種。
[0012] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液中，所述pH值調(diào)節(jié)劑 為選自三乙醇胺、氫氧化鈉和氫氧化鉀中的至少一種。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液包含：黃體酮5~40毫 克/_升、油相100暈克/_升、乳化劑8~16暈克/毫升、穩(wěn)定劑0.1~0.3暈克/毫升、滲透壓 調(diào)節(jié)劑22.5毫克/毫升、pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為4.0~8.0、以及余量的注射用水。
[0014] 本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過(guò)處方篩選，意外的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液處方 中采用重量比為1:1的大豆油和中鏈甘油三酯的混合物作為注射用油替代已上市制劑單獨(dú) 以大豆油作為注射用油，同時(shí)以磷脂酰甘油作為穩(wěn)定劑、以重量比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋黃卵磷脂PL-100M作為乳化劑，其制備得到的黃體酮脂微球注射液樣品的質(zhì)量更穩(wěn) 定。由此，根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施例，在本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液中，優(yōu)選所述穩(wěn)定劑 為選自磷脂酰甘油，優(yōu)選所述乳化劑為重量比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋黃卵磷脂PL-IOOM 0
[0015] 本發(fā)明的發(fā)明人同時(shí)意外的發(fā)現(xiàn)，雖然處方單獨(dú)使用大豆油作為注射用油和處方 中使用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物(兩者的重量比為1:1)作為注射用油制備得到的黃 體酮脂微球同樣對(duì)血管無(wú)刺激性，但注射單獨(dú)使用大豆油作為注射用油制備的脂微球注射 部位有肌肉硬結(jié)且有脂肪沉積形成，而注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物(兩者的重 量比為1:1)作為注射用油制備得到的黃體酮脂微球不會(huì)引起注射部位硬結(jié)及脂肪的沉積。
[0016] 本發(fā)明所制得的黃體酮脂微球注射液具有良好的粒徑分布，其平均粒徑150~ 300nm。本發(fā)明制備的黃體酮脂微球，其所用輔料均是注射級(jí)別，黃體酮脂微球可以用于局 部肌肉注射，也可用于靜脈注射給藥，避免了肝臟首過(guò)效應(yīng)，豐富了臨床用藥的選擇。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施例，本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮5~40 暈克/_升、注射用大顯油50_克/_升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂8~16暈 克/毫升、磷脂酰甘油〇. 1~〇. 3毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/毫升、氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為 4.0~8.0、以及余量的注射用水。具有上述比例的黃體酮脂微球注射液能夠表現(xiàn)出更優(yōu)越 的藥物性能，其質(zhì)量穩(wěn)定、安全性高、注射無(wú)刺激性，有利于患者臨床用藥安全。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮5毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 9暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3毫克/毫升、磷脂酰甘油0.2毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮5毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 6暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2毫克/毫升、磷脂酰甘油0.1毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮5毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 12暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4毫克/毫升、磷脂酰甘油0.3毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮10毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 9暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3毫克/毫升、磷脂酰甘油0.2毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮10毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 6暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2毫克/毫升、磷脂酰甘油0.1毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮10毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 12暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4毫克/毫升、磷脂酰甘油0.3毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮20毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 9暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3毫克/毫升、磷脂酰甘油0.2毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮20毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 6暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2毫克/毫升、磷脂酰甘油0.1毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮20毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 12暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4毫克/毫升、磷脂酰甘油0.3毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮40毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 9暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3毫克/毫升、磷脂酰甘油0.2毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮40毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 6暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2毫克/毫升、磷脂酰甘油0.1毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水。
[0029] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，本發(fā)明的黃體酮脂微球注射液包含:黃體酮40毫克/ _升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PC-98T 12暈克/ 毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4毫克/毫升、磷脂酰甘油0.3毫克/毫升、注射用甘油22.5毫克/ 毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水。
[0030] 在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供了一種制備前面所述的黃體酮脂微球注射液的 方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，該方法包括:將黃體酮和藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑混合，制 成黃體酮脂微球注射液。利用該方法，能夠快速有效地制備獲得前面所述的黃體酮脂微球 注射液，且操作簡(jiǎn)單方便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0031]根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述將黃體酮和藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑混合，制成黃 體酮脂微球注射液可以進(jìn)一步包括：
[0032] (1)將油相加熱至70°C~75°C，加入乳化劑、穩(wěn)定劑、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn) 行剪切處理至全部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0033] (2)將注射用水加熱至70°C，加入滲透壓調(diào)節(jié)劑，以便獲得形成水相的第二混合 物。
[0034] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0035] (4)用pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為4.0~8.0，補(bǔ)足注射用水至足量， 以便獲得第四混合物。
[0036] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵轮?氮?dú)怙柡?，以便獲得第五混合物。
[0037] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0038] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0039] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明所述制備黃體酮脂微球注射液的方法步驟 (3)中，將所述第一混合物和第二混合物混合是在剪切混合的條件下進(jìn)行的，其中，用乳化 機(jī)剪切混合的轉(zhuǎn)速可以為10000~20000rpm，剪切混合的時(shí)間可以為10~30min。
[0040] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，在本發(fā)明所述制備黃體酮脂微球注射液的方法中，所 述高壓均質(zhì)的次數(shù)為5~8次，高壓均質(zhì)的壓力控制在800~1200bar，均質(zhì)過(guò)程中溫度控制 在 30°C ~60°C。
[0041] 本發(fā)明的發(fā)明人通過(guò)比較不同的制備方法得出，在本發(fā)明所述的制備方法中，無(wú) 需采用化學(xué)的方法添加抗氧劑，而是采用物理的方法，在步驟(5)中，將所述第四混合物在 高壓均質(zhì)過(guò)程中均充入氮?dú)獾揭好嬉韵轮恋獨(dú)怙柡停沟帽景l(fā)明所述的黃體酮注射液體系 在高壓均質(zhì)過(guò)程中始終處于無(wú)氧的條件，使黃體酮在脂微球中不易被氧化或降解、同時(shí)也 阻止了處方中的易被氧化的輔料如蛋黃卵磷脂、注射用大豆油等的氧化，也進(jìn)一步提高黃 體酮注射液制劑的穩(wěn)定性。應(yīng)用本發(fā)明所述的處方及工藝方法制備得到的黃體酮脂微球注 射液樣品，于40°C及室溫條件下定期進(jìn)行黃體酮注射液外觀、粒度以及藥物含量、雜質(zhì)含量 的考察，結(jié)果本發(fā)明的樣品穩(wěn)定性明顯優(yōu)于以大豆油單獨(dú)作為注射用油的黃體酮脂微球注 射液樣品。而且，本發(fā)明的樣品粘度小、易擴(kuò)散，在體內(nèi)易代謝，所以在進(jìn)行局部肌肉注射時(shí) 不會(huì)引起局部肌肉組織硬結(jié)及脂肪的沉積。
[0042] 本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)一步的通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):在本發(fā)明所述制備黃體酮脂微球注射液 中，若高壓均質(zhì)的次數(shù)低于5次、或者是高于8次；高壓均質(zhì)的壓力低于SOObar，或者是高于 1200bar;高壓均質(zhì)的溫度控制低于30°C，或者是高于60°C，則所得到的處方樣品ΗΠ 有明顯 增加的趨勢(shì)。故本發(fā)明所述的方法，高壓均質(zhì)的次數(shù)為5~8次，高壓均質(zhì)的壓力控制在800 ~1200bar，均質(zhì)過(guò)程中溫度控制在30°C~60°C。所得的黃體酮脂微球注射液檢測(cè)結(jié)果為： 平均粒徑為150~300歷，0丨90彡35011111，粒度分布系數(shù)?01均在0.1以下4!1值為4.0~8.0 〇 [0043]由本發(fā)明所述方法制備得到的樣品在2~HTC環(huán)境下放置24個(gè)月，外觀及性狀無(wú) 變化，未出現(xiàn)分層、絮凝等現(xiàn)象，藥物含量、雜質(zhì)水平、粒徑等均無(wú)明顯改變，表明了本發(fā)明 所述的黃體酮脂微球注射液具有良好的穩(wěn)定性，可以很好的滿足臨床用藥的穩(wěn)定性要求。
[0044] 根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施例，可以進(jìn)一步對(duì)制備獲得的黃體酮脂微球注射液進(jìn)行灌 裝，包裝，得到黃體酮脂微球注射液產(chǎn)品。
[0045] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，所述制備黃體酮脂微球注射液的方法包括：
[0046] (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷 脂PL-100M、蛋黃卵磷脂PC-98T、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0047] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，將所得到的混合物攪拌均勻，以便 獲得形成水相的第二混合物。
[0048] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，并將所得到的混合物在轉(zhuǎn)速15000rpm 下剪切混合15min，或者說(shuō)將所述第一混合物和第二混合物混合過(guò)程中邊混合邊剪切，剪切 的轉(zhuǎn)速為15000rpm，剪切時(shí)間為15min，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0049] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為7.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0050] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)6次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡?，且控制溫度?0°C，控制壓力在lOOObar，以便獲得第五混合物。
[0051 ] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0052] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0053]根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，所述制備黃體酮脂微球注射液的方法包括：
[0054] (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷 月旨PC-98T、蛋黃卵磷脂PL-100M、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0055] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，將所得到的混合物攪拌均勻，以便 獲得形成水相的第二混合物。
[0056] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，并將所得到的混合物在轉(zhuǎn)速1000 Orpm 下剪切處理30min，或者說(shuō)將所述第一混合物和第二混合物混合過(guò)程中邊混合邊剪切，剪切 的轉(zhuǎn)速為1000 Orpm，剪切時(shí)間為30min，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0057] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為8.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0058] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)8次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡?，且控制溫度?0°C，控制壓力在SOObar，以便獲得第五混合物。
[0059] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0060] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0061] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，所述制備黃體酮脂微球注射液的方法包括：
[0062] (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷 脂PL-100M、蛋黃卵磷脂PC-98T、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0063] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，將所得到的混合物攪拌均勻，以便 獲得形成水相的第二混合物。
[0064] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，并將所得到的混合物在轉(zhuǎn)速20000rpm 剪切l(wèi)Omin，或者說(shuō)將所述第一混合物和第二混合物混合過(guò)程中邊混合邊剪切，剪切轉(zhuǎn)速為 20000rpm，剪切時(shí)間為IOmin，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0065] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為4.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0066] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)5次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡停铱刂茰囟仍?0°C，控制壓力在1200bar，以便獲得第五混合物。
[0067] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0068] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0069] 本發(fā)明的發(fā)明人通過(guò)血管刺激性試驗(yàn)證明：本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液對(duì) 血管無(wú)刺激性，可用于局部肌肉注射以及靜脈注射用藥，提高了臨床用藥的順應(yīng)性、豐富了 臨床用藥選擇。
[0070] 本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)一步通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)證明，本發(fā)明的樣品在進(jìn)行局部肌肉注射 時(shí)，不會(huì)引起局部肌肉組織硬結(jié)及脂肪沉積。
[0071] 利用本發(fā)明所述處方及制備方法得到的黃體酮脂微球注射液，其制備工藝簡(jiǎn)單、 制劑質(zhì)量穩(wěn)定、注射無(wú)刺激性、安全性高、使用方便。
[0072]根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液具有下列優(yōu)點(diǎn)：
[0073] 1、本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液，在處方中采用重量比為1:1的大豆油和中 鏈甘油三酯的混合物作為注射用油替代已上市制劑單獨(dú)以大豆油作為注射用油，得到的脂 肪乳對(duì)血管無(wú)刺激性，而采用大豆油單獨(dú)作為注射用油制備的樣品對(duì)血管具有一定的刺激 性，本發(fā)明提高了臨床用藥的安全性。
[0074] 2、本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液以磷脂酰甘油代替油酸作為穩(wěn)定劑、以重量 比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋黃卵磷脂PL-100M作為乳化劑，其制備得到的黃體酮脂微 球注射液樣品的質(zhì)量更穩(wěn)定。同時(shí)，利用磷脂酰甘油作為穩(wěn)定劑，大大提高了黃體酮脂微球 注射液的穩(wěn)定性。
[0075] 3、本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液，不僅對(duì)血管無(wú)刺激性，且在進(jìn)行局部肌肉 注射時(shí)，不會(huì)引起局部肌肉組織硬結(jié)及脂肪沉積，提高了臨床用藥的順應(yīng)性。而采用大豆油 單獨(dú)作為注射用油制備的樣品會(huì)引起組織硬結(jié)及脂肪沉積。
[0076] 4、本發(fā)明中的制劑組成均是注射級(jí)別，還可以用于靜脈注射給藥，豐富了給藥選 擇，可滿足更多的臨床用藥需求。因?yàn)辄S體酮口服給藥時(shí)，90%的藥物因?yàn)楦闻K首過(guò)效應(yīng)而 失活，既影響了療效而且增加了肝臟的負(fù)擔(dān)。而本發(fā)明提供的黃體酮脂微球注射液，質(zhì)量穩(wěn) 定，靜脈注射后可避免肝臟首過(guò)效應(yīng)。
[0077] 5、在本發(fā)明所述的制備方法中，無(wú)需采用化學(xué)的方法添加抗氧劑，而是采用物理 的方法，在步驟(5)中，將所述第四混合物在高壓均質(zhì)過(guò)程中均充入氮?dú)獾揭好嬉韵轮恋獨(dú)?飽和，使得本發(fā)明所述的黃體酮脂微球注射液體系在高壓均質(zhì)過(guò)程中始終處于無(wú)氧的條 件，使黃體酮在脂微球中不易被氧化或降解、同時(shí)也阻止了處方中的易被氧化的輔料如蛋 黃卵磷脂、注射用大豆油等的氧化，也進(jìn)一步提高黃體酮脂微球注射液的穩(wěn)定性。
[0078] 本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點(diǎn)將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變 得明顯，或通過(guò)本發(fā)明的實(shí)踐了解到。
【附圖說(shuō)明】
[0079] 圖1顯示了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例3制得的黃體酮脂微球注射液的粒徑分布圖；
[0080] 圖2顯示了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例制得的黃體酮脂微球注射液對(duì)新西蘭大白兔耳部 血管的刺激性，給藥七天后兔耳照片。A為陽(yáng)性對(duì)照組(市售注射液樣品），B為試驗(yàn)組(本發(fā) 明實(shí)施例2制備的樣品）。
【具體實(shí)施方式】
[0081] 下面通過(guò)參考附圖描述的實(shí)施例是示例性的，旨在用于解釋本發(fā)明，而不能理解 為對(duì)本發(fā)明的限制。
[0082] 本發(fā)明實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或 條件或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市購(gòu)獲 得的常規(guī)廣品。
[0083] 實(shí)施例1黃體酮脂微球注射液處方篩選 [0084] 1、穩(wěn)定劑的篩選
[0085]脂微球注射液所用的穩(wěn)定劑，可增大分子間作用力與乳滴的表面電荷，通過(guò)靜電 斥力提高乳劑的物理穩(wěn)定性，增大脂微球界面膜的強(qiáng)度，增大藥物溶解性。故需要考察不同 的穩(wěn)定劑(磷脂酰甘油、油酸鈉、油酸)和處方中穩(wěn)定劑的用量。平均粒徑、Di90、PDI與注射 乳劑用藥的安全性及穩(wěn)定性密切相關(guān)，在相同的工藝條件下平均粒徑、Di90、H)I更小的處 方通常具有更好的物理穩(wěn)定性，以平均粒徑、Di90、H)I為考察指標(biāo)，對(duì)含有不同穩(wěn)定劑的處 方進(jìn)彳丁比$父，相關(guān)指標(biāo)見表1、表2。
[0086]表1、不同種類及不同用量的穩(wěn)定劑的處方(配制成1000ml)
[0089] 試驗(yàn)方法(配置量為1000ml):稱取注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物(兩者 的重量比為1:1)加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷脂PC-98T、黃體酮、穩(wěn)定劑，將所得到的 混合物進(jìn)行剪切處理至全部溶解分散均勻，作為油相。取適量注射用水加熱至70°C，加入注 射用甘油并將得到的混合物攪拌均勻，作為水相。保持水相的溫度不變，將油相加入水相 中，邊加入邊剪切混合，然后加入適量氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH值在4.0~8.0，補(bǔ)足注射用水至 足量。經(jīng)高壓均質(zhì)6次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵轮恋獨(dú)怙柡停⒖刂茰囟仍?50 °C，控制壓力在1000 bar，經(jīng)0.65μπι濾膜過(guò)濾，灌裝，并在121°C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌12min，以 便獲得黃體酮脂微球注射液。檢測(cè)各樣品外觀及平均粒徑等相關(guān)指標(biāo)，結(jié)果見表2。
[0090] 表2、不同種類及不同用量的穩(wěn)定劑的處方的相關(guān)指標(biāo)
[0093]試驗(yàn)結(jié)果表明：當(dāng)以性狀、平均粒徑、Di90、PDI作為考察指標(biāo)制備樣品進(jìn)行考察 時(shí)，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的穩(wěn)定劑選用磷脂酰甘油時(shí)，效果較好，優(yōu)選本發(fā)明所述磷脂酰甘油在0.1 ~0.3暈克/_升。
[0094] 2、乳化劑的篩選
[0095]分別用蛋黃卵磷脂E-80、PL-100M、PC-98T作為乳化劑制備樣品，以性狀、平均粒 徑、Di9〇、roi作為考察指標(biāo)，對(duì)乳化劑進(jìn)行篩選。不同蛋黃卵磷脂的處方組成及相關(guān)指標(biāo)見 表3、表4 〇
[0096]表3、不同卵磷脂種類處方(配制成1000ml)
[0099] 試驗(yàn)方法(配置量為1000ml):稱取注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至 70°C~75°C，加入蛋黃卵磷脂、黃體酮、磷脂酰甘油，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，作為油相。取適量注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油并將得到的混合 物攪拌均勻，作為水相。保持水相的溫度不變，將油相加入水相中，邊加入邊剪切混合，加入 氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至7.0,補(bǔ)足注射用水至足量。經(jīng)高壓均質(zhì)6次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充 入氮?dú)獾揭好嬉韵轮恋獨(dú)怙柡?，并控制溫度?0°C，控制壓力在1000 bar，經(jīng)0.65μπι濾膜過(guò) 濾，灌裝，并在121Γ下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。檢測(cè)各樣品外 觀及平均粒徑等相關(guān)指標(biāo)，結(jié)果見表4。
[0100]表4、不同卵磷脂種類處方的相關(guān)指標(biāo)
[0102]試驗(yàn)結(jié)果表明，使用本發(fā)明處方11所述的重量比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋 黃卵磷脂PL-100M作為乳化劑時(shí)，其處方為淡黃色乳狀液體，流動(dòng)性好，在瓶壁均勻鋪展然 后緩慢散開；且同等工藝條件下使用重量比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋黃卵磷脂PL-100M混合物作為乳化劑時(shí)，制備出的樣品平均粒徑、Di90、H)I數(shù)值最優(yōu)，因此優(yōu)選本發(fā)明使 用重量比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋黃卵磷脂PL-100M作為乳化劑。
[0103]實(shí)施例2黃體酮脂微球注射液的制備 [0104]處方：
[0106] 制法：
[0107] (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷 月旨PC-98T、蛋黃卵磷脂PL-100M、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0108] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，并將得到的混合物攪拌均勻，以便 獲得形成水相的第二混合物。
[0109] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，邊混合邊剪切，轉(zhuǎn)速15000rpm，時(shí)間 15min，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0110] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為7.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0111] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)6次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡?，并控制溫度?0°C，控制壓力在lOOObar，以便獲得第五混合物。
[0112] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0113] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0114] 對(duì)比實(shí)施例1
[0115] 處方： 黃體酮 10克 注射用大豆油100克 蛋黃卵磷脂E-80 12克 袖酸 0.2克
[0116] 注射用甘油 22.5克 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0117] (1)將注射用大豆油加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷脂E-80、油酸和黃體酮，將 得到的混合物剪切至全部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0118] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，并將所得到的混合物攪拌均勻，以 便獲得形成水相的第二混合物。
[0119] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，邊混合邊剪切，轉(zhuǎn)速15000rpm，時(shí)間 15min，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0120] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為7.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0121] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)6次，均質(zhì)過(guò)程中控制溫度在50°C，控制壓力 在1000 bar，以便獲得第五混合物。
[0122] (6)利用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0123] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0124] 實(shí)施例3黃體酮脂微球注射液的制備
[0125] 處方： 黃體酮 20克 注射用大豆油 50克
[0126] 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 6克 蛋黃卵磷脂PL 100M 2克 磷脂酰甘油 （U克： 注射用甘油 22,5克
[0127] 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000復(fù)升
[0128] 制法：
[0129] (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷 月旨PC-98T、蛋黃卵磷脂PL-100M、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0130] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，并將得到的混合物攪拌均勻，以便 獲得形成水相的第二混合物。
[0131] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，邊混合邊剪切，轉(zhuǎn)速1000 Orpm，時(shí)間 30min，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0132] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為8.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0133] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)8次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡停⒖刂茰囟仍?0°C，控制壓力在SOObar，以便獲得第五混合物。
[0134] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0135] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。制備獲得的黃體酮脂微球注射液的粒徑分布圖見圖 1〇
[0136] 實(shí)施例4黃體酮脂微球注射液的制備
[0137] 處方： 黃體酮10克 注射用大豆油 3.0克： 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 12克
[0138] 蛋黃卵磷脂PL-100M: 4克： 磷脂酰甘油 0J:克 注射用甘油 22.5克 氫氧化鈉適量 注射用水適量
[0139] 共計(jì)制成1000毫升
[0140] 制法：
[0141] (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°C~75°C，加入蛋黃卵磷 脂PL-100M、蛋黃卵磷脂PC-98T、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理至全 部溶解分散均勻，以便獲得含黃體酮油相的第一混合物。
[0142] (2)將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，并將得到的混合物攪拌均勻，以便 獲得形成水相的第二混合物。
[0143] (3)將所述第一混合物和第二混合物混合，邊混合邊剪切，轉(zhuǎn)速20000rpm，時(shí)間 lOmin，以便獲得形成初乳的第三混合物。
[0144] (4)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)第三混合物的pH值為4.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物。
[0145] (5)將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)5次，且高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡?，并控制溫度?0°C，控制壓力在1200bar，以便獲得第五混合物。
[0146] (6)用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物。
[0147] (7)將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121 °C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌 12min，以便獲得黃體酮脂微球注射液。
[0148] 實(shí)施例5黃體酮脂微球注射液的制備
[0149] 處方： 黃體酮 5克 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 9 % 蛋黃卵磷脂PL-100M 3克
[0150] 磷脂酰甘油 Q J克 注射用甘油 22.5吏 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0151] 制法:同實(shí)施例2
[0152] 實(shí)施例6黃體酮脂微球注射液的制備
[0153] 處方： 黃體酮 5克 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 6克 蛋黃卵磷脂PL-100M 2克
[0154] 磷脂酰甘油 0.1 α 注射用甘油 22.5克 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0155] 制法:同實(shí)施例3。
[0156] 實(shí)施例7黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮 5克 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 12克 蛋黃卵磷脂PL-100M 4克
[0157] 磷脂酰甘油 0.3克 注射用甘油 22.5克 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0158] 制法：同實(shí)施例4。
[0159] 實(shí)施例8黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮 20克 注射用大豆油 50克
[0160] 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 9:克 蛋黃卵磷脂PL-100M 3克 磷脂酰甘油 0.2克 注射用甘油 22.5克
[0161] 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0162] 制法：同實(shí)施例2。
[0163] 實(shí)施例9黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮10克 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 6 M 蛋黃卵磷脂PL-IOOM 2克
[0164] 磷脂酰甘油 0.1克 柱.射用甘油 .22..5克. 氫氧化鈉適量 注射用水適量__ 共計(jì)制成1000毫升
[0165] 制法：同實(shí)施例3。
[0166] 實(shí)施例10黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮 20克 住射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 12克 蛋黃卵磷脂PL-100M 4克
[0167] 磷脂酰甘油 O克： 注射用甘油 22J克 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0168] 制法：同實(shí)施例4。
[0169] 實(shí)施例11黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮 40克 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 9克 蛋黃卵磷脂PL-100M 3克
[0170] 磷脂酰甘油 0.2克 注射用甘油 22,5克： 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0171] 制法：同實(shí)施例2。
[0172] 實(shí)施例12黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮 40克 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 6克： 蛋黃卵磷脂PL-100M 2克
[0173] 磷脂酰甘油 0.1克： 注射用甘油 22.5克 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制.成1000_毫升
[0174] 制法：同實(shí)施例3。
[0175] 實(shí)施例13黃體酮脂微球注射液的制備處方： 黃體酮 40克
[0176] 注射用大豆油 50克 中鏈甘油三酯50克 蛋黃卵磷脂PC-98T 12克 蛋黃卵磷脂PL-100M 使 磷脂酰甘油 0,3:克：
[0177] 注射用甘油 22.5克 氫氧化鈉適量 注射用水適量_ 共計(jì)制成1000毫升
[0178] 制法：同實(shí)施例4。
[0179] 實(shí)施例14
[0180] 測(cè)定本發(fā)明實(shí)施例2-實(shí)施例13及對(duì)比實(shí)施例1制得的黃體酮脂微球注射液的平均 粒徑、Di90以及roi，結(jié)果如表5:
[0181] 表5
[0183] 測(cè)定結(jié)果顯示，本發(fā)明實(shí)施例2-實(shí)施例13所述處方及制備方法得到的樣品粒徑、 Di90及roi優(yōu)于對(duì)比實(shí)施例1樣品，表明本發(fā)明樣品具有更好的穩(wěn)定性。
[0184] 實(shí)施例15藥物穩(wěn)定性考察
[0185] 加速試驗(yàn)，24°C條件下制劑樣品放置1個(gè)月穩(wěn)定性考察，結(jié)果見表6
[0186] 表6

LUITOj 加運(yùn)試驗(yàn)結(jié)采M不，本友明的樣品杈牷及PUl役W明M的雙化，樣品物埋椋足性艮 好;本發(fā)明樣品的雜質(zhì)含量顯著低于對(duì)比實(shí)施例樣品，樣品中藥物具有更好的穩(wěn)定性，表明 本發(fā)明樣品具有更好的穩(wěn)定性。
[0189] 長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)，5°C條件下制劑樣品放置兩年穩(wěn)定性考察，結(jié)果見表7。
[0190] 表7
[0193]長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明的樣品粒徑及Di90、PDI沒有明顯的變化，樣品 物理穩(wěn)定性良好;本發(fā)明樣品的雜質(zhì)含量顯著低于對(duì)比實(shí)施例樣品，樣品中藥物具有更好 的穩(wěn)定性，表明本發(fā)明樣品具有更好的穩(wěn)定性。
[0194] 實(shí)施例16血管刺激性試驗(yàn)
[0195] 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:新西蘭大白兔，雌雄兼用，體重2.0~2.5公斤。
[0196] 2、實(shí)驗(yàn)方法：
[0197]取健康、兩耳無(wú)損傷的新西蘭大白兔18只，隨機(jī)分成2組，每組9只。以已上市的黃 體酮注射液為陽(yáng)性對(duì)照，實(shí)施例2制備的黃體酮脂微球注射液樣品為試驗(yàn)組，以lml/d的體 積于兔耳緣靜脈注射給藥7天(試驗(yàn)組和陽(yáng)性對(duì)照組藥物的濃度相當(dāng)），觀察注射部位的血 管及其周圍組織的變化。
[0198] 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0199] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：陽(yáng)性對(duì)照組注射部位及周圍的組織有明顯的紅腫，注射部位周圍 的血管明顯的紅腫、顏色變深且有凸起(見圖2A)，表明陽(yáng)性對(duì)照組有明顯的刺激性。而本發(fā) 明制備的黃體酮脂微球注射液在試驗(yàn)組兔耳注射部位及周圍血管均未見紅腫及損傷性病 變(見圖2B)。結(jié)果表明利用本發(fā)明所述的處方及制備工藝得到的黃體酮脂微球注射液對(duì)血 管無(wú)刺激性，可用于局部肌肉注射，具有更好的耐受性及安全性，本發(fā)明提高了黃體酮的臨 床用藥順應(yīng)性。
[0200] 實(shí)施例17:注射樣品粘度測(cè)試試驗(yàn)
[0201] 采用平式粘度計(jì)分別測(cè)量市售注射樣品和實(shí)施例3樣品的粘度，結(jié)果市售樣品的 粘度約為51mpa · s，實(shí)施例3樣品的粘度約為1.6mpa · s。結(jié)果表明本發(fā)明的樣品粘度遠(yuǎn)小 于市售樣品，在臨床注射使用中本發(fā)明的樣品更容易操作，不會(huì)因?yàn)闃悠氛扯冗^(guò)大引起推 注困難、甚至是藥液倒流引起給藥量不準(zhǔn)確及引起感染。同時(shí)因?yàn)楸景l(fā)明樣品粘度小，藥液 更容易擴(kuò)散，不易引起油成分在注射部位的沉積。
[0202] 實(shí)施例18:注射樣品引起局部肌肉組織硬結(jié)及脂肪沉積相關(guān)試驗(yàn)
[0203] 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:新西蘭大白兔，雌雄兼用，體重2.0~2.5公斤。
[0204] 2、實(shí)驗(yàn)方法：
[0205]取健康新西蘭大白兔18只，隨機(jī)分成3組，每組6只。以對(duì)比實(shí)施例1制備的樣品為 參照組、以已上市的黃體酮注射液為陽(yáng)性對(duì)照，實(shí)施例4制備的樣品為試驗(yàn)組，以lml/d的注 射體積于兔后腿肌肉注射連續(xù)注射14天，檢查注射部位肌肉硬度及其周圍組織的變化。于 末次注射24小時(shí)后將動(dòng)物放血處死，剪開注射部位的皮膚觀察脂肪的沉積情況。
[0206] 3、試驗(yàn)結(jié)果：
[0207] 試驗(yàn)結(jié)果：陽(yáng)性對(duì)照組和參照組注射部位用手觸摸都能感受到明顯的粒狀硬結(jié)組 織，而本發(fā)明提供的試驗(yàn)組注射部位用手觸摸感受不到硬結(jié)組織;將注射部位的皮膚剪開， 觀察發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)性對(duì)照組和參照組在注射部位有明顯的肌肉結(jié)締，同時(shí)注射部位周圍有肉眼 可見的脂肪沉積（陽(yáng)性對(duì)照組多于參照組），試驗(yàn)組未注射部位及周圍未發(fā)現(xiàn)結(jié)締組織及脂 肪沉積。試驗(yàn)結(jié)果表明：本發(fā)明提供的脂微球注射液，更容易擴(kuò)散及代謝，不會(huì)引起注射部 位組織結(jié)締及脂肪沉積，臨床用藥的安全性更高。
[0208] 在本說(shuō)明書的描述中，術(shù)語(yǔ)"第一"、"第二"僅用于描述目的，而不能理解為指示或 暗示相對(duì)重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有"第一"、"第二"的特 征可以明示或者隱含地包括一個(gè)或者更多個(gè)該特征。在本發(fā)明的描述中，"多個(gè)"的含義是 兩個(gè)或兩個(gè)以上，除非另有明確具體的限定。
[0209] 在本說(shuō)明書的描述中，參考術(shù)語(yǔ)"一個(gè)實(shí)施例"、"一些實(shí)施例"、"示例"、"具體示 例"、或"一些示例"等的描述意指結(jié)合該實(shí)施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特 點(diǎn)包含于本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施例或示例中。在本說(shuō)明書中，對(duì)上述術(shù)語(yǔ)的示意性表述不 必須針對(duì)的是相同的實(shí)施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)可以在任 一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技 術(shù)人員可以將本說(shuō)明書中描述的不同實(shí)施例或示例以及不同實(shí)施例或示例的特征進(jìn)行結(jié) 合和組合。
[0210] 盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，可以理解的是，上述實(shí)施例是示例 性的，不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對(duì)上述 實(shí)施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種黃體酮脂微球注射液，其特征在于，包含： 黃體酮；以及 藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑，所述藥用賦形劑包括:油相，乳化劑，滲透壓調(diào)節(jié)劑，穩(wěn)定 劑，pH值調(diào)節(jié)劑，以及注射用水。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃體酮脂微球注射液，其特征在于，所述油相為重量比為1:1 的注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物， 任選地，所述乳化劑為蛋黃卵磷脂，優(yōu)選為選自蛋黃卵磷脂E-80、蛋黃卵磷脂PL-100M、 蛋黃卵磷脂PC-98T中的至少一種， 任選地，所述滲透壓調(diào)節(jié)劑為注射用甘油， 任選地，所述穩(wěn)定劑為選自油酸、磷脂酰甘油、油酸鈉中的至少一種， 任選地，所述pH值調(diào)節(jié)劑為選自三乙醇胺、氫氧化鈉和氫氧化鉀中的至少一種。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃體酮脂微球注射液，其特征在于，所述穩(wěn)定劑為磷脂酰甘 油， 任選地，所述乳化劑為重量比為3:1的蛋黃卵磷脂PC-98T與蛋黃卵磷脂PL-100M的混合 物。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的黃體酮脂微球注射液，其特征在于，包含： 黃體酮5~40暈克/毫升、所述油相100暈克/毫升、所述乳化劑8~16暈克/毫升、所述穩(wěn) 定劑0.1~0.3毫克/毫升、所述滲透壓調(diào)節(jié)劑22.5毫克/毫升、所述pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為4.0 ~8.0、以及余量的注射用水， 優(yōu)選地，所述黃體酮脂微球注射液包含： 黃體酮5~40暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃 卵磷脂8~16暈克/毫升、磷脂酰甘油0.1~0.3暈克/毫升、注射用甘油22.5暈克/毫升、氫氧 化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0~8.0、以及余量的注射用水。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的黃體酮脂微球注射液，其特征在于，包含下列之一： 黃體酮5暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷 脂PC-98T 9暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3暈克/毫升、磷脂酰甘油0.2暈克/毫升、注射 用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水， 黃體酮5暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷 脂PC-98T 6暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2暈克/毫升、磷脂酰甘油0.1暈克/毫升、注射 用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水， 黃體酮5暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵磷 脂PC-98T 12暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4暈克/毫升、磷脂酰甘油0.3暈克/毫升、注射 用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水， 黃體酮1〇_克/_升、注射用大顯油50_克/_升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 9暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3暈克/毫升、磷脂酰甘油0.2暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水， 黃體酮1〇_克/_升、注射用大顯油50_克/_升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 6暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2暈克/毫升、磷脂酰甘油0.1暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水， 黃體酮1〇_克/_升、注射用大S·油50_克/_升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 12暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4暈克/毫升、磷脂酰甘油0.3暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水， 黃體酮20_克/_升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 9暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3暈克/毫升、磷脂酰甘油0.2暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水， 黃體酮20_克/_升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 6暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2暈克/毫升、磷脂酰甘油0.1暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水， 黃體酮20_克/_升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 12暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4暈克/毫升、磷脂酰甘油0.3暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水， 黃體酮40暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 9暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 3暈克/毫升、磷脂酰甘油0.2暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.0、以及余量的注射用水， 黃體酮40暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 6暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 2暈克/毫升、磷脂酰甘油0.1暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.0、以及余量的注射用水， 黃體酮40暈克/毫升、注射用大顯油50暈克/毫升、中鏈甘油三酯50暈克/毫升、蛋黃卵 磷脂PC-98T 12暈克/毫升、蛋黃卵磷脂PL-100M 4暈克/毫升、磷脂酰甘油0.3暈克/毫升、注 射用甘油22.5毫克/毫升、適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為4.0、以及余量的注射用水。6. -種制備權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的黃體酮脂微球注射液的方法，其特征在于，包 括:將黃體酮和藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑混合，制成黃體酮脂微球注射液， 任選地，所述將黃體酮和藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑混合，制成黃體酮脂微球注射液 進(jìn)一步包括： (1) 將油相加熱至70°C~75°C，加入乳化劑、穩(wěn)定劑、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪 切處理，以便獲得第一混合物； (2) 將注射用水加熱至70°C，加入滲透壓調(diào)節(jié)劑，將所得到的混合物攪拌均勻，以便獲 得第二混合物； (3) 將所述第一混合物和第二混合物混合，以便獲得第三混合物； (4) 用pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)所述第三混合物的pH值為4.0~8.0,補(bǔ)足注射用水至足量，以便 獲得第四混合物； (5) 將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)，且所述高壓均質(zhì)過(guò)程中均充入氮?dú)獾揭好嬉韵?至氮?dú)怙柡?，以便獲得第五混合物； (6) 用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物； (7) 將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121°C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌12min，以 便獲得黃體酮脂微球注射液。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，將所述第一混合物和第二混合 物混合是在10000~20000rpm的轉(zhuǎn)速下剪切混合10~30min， 任選地，步驟(5)中，所述高壓均質(zhì)是在800~1200bar的壓力下均質(zhì)5~8次，所述高壓 均質(zhì)的溫度控制在30°C~60°C。8. -種制備權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的黃體酮脂微球注射液的方法，其特征在于，包 括： (1) 將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°(：~75°(：，加入蛋黃卵磷脂?(：-98T、蛋黃卵磷脂PL-100M、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理，以便獲得 第一混合物； (2) 將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，將所得到的混合物攪拌均勻，以便獲得 第二混合物； (3) 將所述第一混合物和第二混合物混合，并將所得到的混合物在轉(zhuǎn)速15000rpm下剪 切處理15min，以便獲得第三混合物； (4) 用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所述第三混合物的pH值為7.0,補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物； (5) 將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)6次，其中，所述高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好?以下至氮?dú)怙柡停铱刂茰囟仍?0°C，控制壓力在lOOObar，以便獲得第五混合物； (6) 用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物； (7) 將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121°C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌12min，以 便獲得黃體酮脂微球注射液。9. 一種制備權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的黃體酮脂微球注射液的方法，其特征在于，包 括： (1) 將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°(：~75°(：，加入蛋黃卵磷脂?(：-98T、蛋黃卵磷脂PL-100M、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理，以便獲得 第一混合物； (2) 將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，將所得到的混合物攪拌均勻，以便獲得 第二混合物； (3) 將所述第一混合物和第二混合物混合，并將所得到的混合物在轉(zhuǎn)速lOOOOrpm下剪 切處理30min，以便獲得第三混合物； (4) 用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所述第三混合物的pH值為8.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物； (5) 將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)8次，其中，所述高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好?以下至氮?dú)怙柡?，且控制溫度?0°C，控制壓力在SOObar，以便獲得第五混合物； (6) 用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物； (7) 將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121°C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌12min，以 便獲得黃體酮脂微球注射液。10. -種制備權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的黃體酮脂微球注射液的方法，其特征在于， 包括： (1)將注射用大豆油和中鏈甘油三酯的混合物加熱至70°(：~75°(：，加入蛋黃卵磷脂?1^-100M、蛋黃卵磷脂PC-98T、磷脂酰甘油、黃體酮，將所得到的混合物進(jìn)行剪切處理，以便獲得 第一混合物； (2) 將注射用水加熱至70°C，加入注射用甘油，將所得到的混合物攪拌均勻，以便獲得 形成水相的第二混合物； (3) 將所述第一混合物和第二混合物混合，并將所得到的混合物在轉(zhuǎn)速20000rpm下剪 切處理lOmin，以便獲得第三混合物； (4) 用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所述第三混合物的pH值為4.0，補(bǔ)足注射用水至足量，以便獲得第 四混合物； (5) 將所述第四混合物進(jìn)行高壓均質(zhì)5次，其中，所述高壓均質(zhì)過(guò)程中充入氮?dú)獾揭好?以下至氮?dú)怙柡?，且控制溫度?0°C，控制壓力在1200bar，以便獲得第五混合物； (6) 用0.65μπι濾膜將所述第五混合物進(jìn)行過(guò)濾，以便獲得第六混合物； (7) 將所述第六混合物進(jìn)行灌裝，充入氮?dú)獗Ｗo(hù)，并在121°C下旋轉(zhuǎn)水浴滅菌12min，以 便獲得黃體酮脂微球注射液。
【文檔編號(hào)】A61K31/57GK106074383SQ201610604351
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年7月27日 公開號(hào)201610604351.2, CN 106074383 A, CN 106074383A, CN 201610604351, CN-A-106074383, CN106074383 A, CN106074383A, CN201610604351, CN201610604351.2
【發(fā)明人】周小順, 牟東升, 賀容麗, 李進(jìn)
【申請(qǐng)人】武漢科福新藥有限責(zé)任公司