專(zhuān)利名稱(chēng)：抗微生物水包油乳液的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及一種有抗微生物作用的，含脂質(zhì)的水包油乳液，它能通過(guò)接觸使傳染性病原體滅活。
人們已經(jīng)知道，如果通過(guò)機(jī)械攪動(dòng)，例如用超勻化器(ultra-disperser)，將一種水不混溶性液相混入水相中，那末，為了形成穩(wěn)定的水包油分散體，常常需要加入乳化劑，其分子吸附在油微滴表面，形成一種連續(xù)的膜，使二個(gè)相鄰的微滴不能直接接觸。油滴內(nèi)還可以包含能溶于有機(jī)介質(zhì)的物質(zhì)，如固醇。
除了分散在水相中的分散的油微滴外，水包油乳液中還可以包含其它脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，例如小的脂囊泡(即通常是由幾個(gè)基本同心的并由水相層使其彼此隔開(kāi)的脂雙層組成的脂質(zhì)球)，微胞(micelle，如由50-200個(gè)兩親分子形成一個(gè)小簇，其極性頭部基團(tuán)向外面對(duì)著水相，而非極性尾部向里與水相分隔開(kāi))，或者片層狀結(jié)構(gòu)(其每個(gè)微粒是由平行的甘油酯雙層組成的脂質(zhì)分散體，由水薄層分隔開(kāi))。這些脂質(zhì)結(jié)構(gòu)是由于疏水作用力驅(qū)使非極性殘基(即長(zhǎng)碳?xì)滏?遠(yuǎn)離水而形成的。
病原性細(xì)菌、病毒或真菌侵入的入口主要是皮膚和粘膜，以及上、下呼吸道。任何感染的第一步都是傳染性病原體在皮膚或粘膜上附著或移生，然后侵入并在體內(nèi)散布開(kāi)。因此，本發(fā)明的目的是提供一種抗微生物乳液，它能通過(guò)接觸來(lái)破壞微生物的膜結(jié)構(gòu)，從而使傳染性病原體滅活。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一種用于通過(guò)接觸滅活傳染性病原體的，穩(wěn)定的抗微生物水包油乳液。該乳液包含分散在水“連續(xù)相”中的含脂質(zhì)油“不連續(xù)相”的帶正電荷的微滴。據(jù)信，油不連續(xù)相是通過(guò)破壞傳染性病原體的膜結(jié)構(gòu)而使其滅活的。該乳液對(duì)細(xì)菌、病毒和酵母菌具有廣譜抗微生物活性。
本發(fā)明的抗微生物乳液主要由分散在水連續(xù)相(如水)中的帶正電荷的油不連續(xù)相微滴組成。不連續(xù)相含有選自如下種類(lèi)的甘油酯甘油一油酸酯(GMO)，甘油三油酸酯(GTO)，甘油一月桂酸酯(GMO)和甘油二月桂酸酯(GTL)，還含有一個(gè)作為正電荷生成劑的陽(yáng)離子含鹵素化合物，優(yōu)選的是具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物。微滴中還可含有固醇，如膽固醇或植物固醇。該微滴看來(lái)是通過(guò)與包含在細(xì)菌、病毒或真菌膜中的帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)相結(jié)合，從而破壞其膜結(jié)構(gòu)并殺滅病原體的。
當(dāng)例如吞服、吸入或用于皮膚時(shí)，本發(fā)明的抗微生物乳液是無(wú)毒性和安全的。這個(gè)結(jié)果是出乎預(yù)料的，因?yàn)楹芏嗑哂蠧12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物，如果單獨(dú)給藥都是極毒的。例如，本發(fā)明優(yōu)選的陽(yáng)離子含鹵素化合物，十六烷基吡啶鎓氯化物(CPC)對(duì)上呼吸道、粘膜和皮膚組織有嚴(yán)重的刺激作用，并導(dǎo)致嚴(yán)重的損傷。但是，當(dāng)以本發(fā)明的乳液形式給藥時(shí)，沒(méi)有發(fā)生這種有害的作用。并且，本發(fā)明的乳液，對(duì)加熱或暴露于相當(dāng)強(qiáng)度的酸和堿都是穩(wěn)定的。
油不連續(xù)相的正電荷是由具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物提供的。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物選自十六烷基吡啶鎓氯化物(CPC)，十六烷基吡啶鎓溴化物(CPB)，十六烷基三甲基銨溴化物(CTAB)，十六烷基二甲基乙基銨溴化物(CDEAB)。能使用的具有C12-C16鏈的其它陽(yáng)離子含鹵素化合物包括十六烷基三甲基銨氯化物，十六烷基芐基二甲基銨氯化物，十六烷基三丁基鏻溴化物，十二烷基三甲基銨溴化物和十四烷基三甲基銨溴化物。
油不連續(xù)相還可包含至少一種選自如下種類(lèi)的固醇膽固醇、膽固醇衍生物、氫化可的松、植物固醇、以及它們的混合物。在此所用的術(shù)語(yǔ)“膽固醇衍生物”，包括但不限于膽固醇的硫酸酯或磷酸酯衍生物。優(yōu)選的固醇包括植物固醇，如大豆固醇。
能用于形成本發(fā)明抗微生物水包油乳液的油，包括廣泛種類(lèi)的水不混溶物質(zhì)，例如大豆油，鱷梨油，角鯊烯油，芝麻油，橄欖油，卡諾拉(canola)油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花籽油，魚(yú)油，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，油是一種有香味的油如薄荷油。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，乳液中的至少一部分可能以如下脂質(zhì)結(jié)構(gòu)形式存在，包括但不限于單層，多層和少層的脂囊泡、微胞和片層狀結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明的抗微生物乳液可以以例如藥劑的形式(例如乳油，溶液和懸液)用于抑制多種傳染性病原體的生長(zhǎng)，包括細(xì)菌、病毒和真菌。因此本發(fā)明也提供了一種適合于藥用的抗微生物制劑，它由本發(fā)明的抗微生物乳液和藥用載體組成。該制劑可以以例如乳油、凝膠、噴霧劑漱口劑或脫臭劑的劑型，用于皮膚表面、粘膜或口腔表面局部給藥，以治療或預(yù)防如下的細(xì)菌感染痤瘡丙酸桿菌，淋病奈瑟氏球菌，表皮鏈球菌和表皮葡萄球菌。另外，該制劑也可以體內(nèi)給藥，例如口服或靜脈內(nèi)給藥。以這種全身性給藥法給予該制劑，能夠殺滅病原性微生物，例如細(xì)菌，如幽門(mén)螺旋桿菌，以及病毒，特別是有被膜病毒。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，以該制劑對(duì)一個(gè)病人口服給藥，用于治療人免疫缺損病毒(HIV)感染。
因此，本發(fā)明還進(jìn)一步提供了一種通過(guò)局部或全身性施用本發(fā)明的抗微生物乳液，來(lái)抑制傳染性病原體生長(zhǎng)的方法。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的抗微生物水包油乳液，它是由帶正電荷的油相微滴不連續(xù)在水連續(xù)相內(nèi)構(gòu)成的。
這里所用的術(shù)語(yǔ)“抗微生物”的含義是具有滅活傳染性病原體的能力。在此所用的術(shù)語(yǔ)“滅活”包括，但不局限于，殺滅有機(jī)體或抑制有機(jī)體生長(zhǎng)。所用的術(shù)語(yǔ)“傳染性病原體”包括，但不局限于真菌、病毒、細(xì)菌和移生蟲(chóng)。本發(fā)明的抗微生物乳液能滅活多種傳染性病原體?？磥?lái)，滅活是由油不連續(xù)相成分，通過(guò)瓦解病原體的膜結(jié)構(gòu)完成的。
這里所用的術(shù)語(yǔ)“乳液”，包括水不混溶的油相與水相混合時(shí)形成的經(jīng)典的水包油分散體或微滴，以及其它一些由于疏水作用力而形成的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，這種作用力驅(qū)使非極性殘基(即長(zhǎng)碳?xì)滏?遠(yuǎn)離水，而驅(qū)使極性頭部基團(tuán)朝向水。這些脂質(zhì)結(jié)構(gòu)包括，但不局限于單層、少層和多層的脂囊泡、微胞和片層狀或六方形結(jié)構(gòu)。這些其他脂質(zhì)結(jié)構(gòu)還含有選自如下種類(lèi)的，作為主要乳化劑的甘油酯甘油一油酸酯(GMO)，甘油三油酸酯(GTO)，甘油一月桂酸酯(GML)和甘油二月桂酸酯(GDL)，并含有作為正電荷生成劑的含鹵素的十二烷基至十六烷基陽(yáng)離子化合物。這些脂質(zhì)結(jié)構(gòu)還可以進(jìn)一步包含至少一種固醇，優(yōu)選的是植物固醇。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，GMO被用作主要乳化劑。在此所用的術(shù)語(yǔ)“主要乳化劑”指的是，在油不連續(xù)相中所包含的任何單一乳化劑中，按重量構(gòu)成最大部分的乳化劑。
本發(fā)明的抗微生物水包油乳液，可以用本專(zhuān)業(yè)人員熟知的經(jīng)典的乳液形成技術(shù)制成。簡(jiǎn)單地說(shuō)，使脂-油相在相當(dāng)大的切變力作用下與水相混合，可得到一種含直徑大約1微米的油微滴的水包油乳液。更具體地說(shuō)，通過(guò)將(a)一個(gè)油載體，(b)一個(gè)選自如下種類(lèi)的甘油酯GMO，GTO，GML，或GDL，和(c)一個(gè)具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物，以及任何摻入到脂-油相中的其它相容的甘油酯或乳化劑如多乙氧基醚60，和任何固醇或其它親油物質(zhì)混合，形成帶正電荷的含脂的油不連續(xù)相。
一旦形成了脂-油相，就可以將其同水相(例如水、鹽水或任何其它能使脂質(zhì)水合化的水溶液)一起加熱、混合，脂-油相對(duì)水相的體積比大約在1∶4至1∶2的范圍內(nèi)，優(yōu)選的是大約1∶3。用任何能產(chǎn)生強(qiáng)切變混合作用力的裝置都可以使脂-油相和水相混合，包括例如french沖壓機(jī)(press)，NovamixTM脂囊泡生成器(IGI公司，Buena N.J)，噴射混合器，或者還可以用二個(gè)如在美國(guó)專(zhuān)利4,895,452和4,911,928(在此引入作為參考)中所述注射器，手工進(jìn)行混合。
本發(fā)明的抗微生物水包油乳液具有對(duì)熱、酸或堿穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)。例如在后面實(shí)施例7中所示，當(dāng)被煮沸或者用1N硝酸或1N NaOH處理時(shí)，都未使本發(fā)明的乳液發(fā)生明顯的改變或被破壞。這種穩(wěn)定性使該乳液適合于醫(yī)用給藥，甚至可以體內(nèi)給藥。
本發(fā)明的抗微生物水包油乳液，可以用于以接觸的方式滅活多種傳染性病原體。如以下實(shí)施例中所述，能被本發(fā)明的乳液滅活的微生物包括多種細(xì)菌、真菌和病毒。更具體地說(shuō)，在此公開(kāi)的乳液可作為噴霧劑或漱口液局部用于滅活移生在口腔或咽喉部的細(xì)菌，如肺炎鏈球菌，A群β-溶血性鏈球菌，流感嗜血桿菌，和腦膜炎奈瑟氏球菌。對(duì)于移生在胃腸道中的細(xì)菌，如幽門(mén)卷旋桿菌，該乳液可用丸劑或液體劑型通過(guò)口服給藥來(lái)滅活。對(duì)于移生在陰道中的細(xì)菌和真菌，如淋病奈瑟氏球菌，陰道加德納氏菌，B群鏈球菌和白色念珠菌，該乳液可以以乳油、凝膠或栓劑劑型，通過(guò)局部用藥來(lái)滅活。在此公開(kāi)的乳液還可以以乳油或凝膠劑型，用于皮膚病治療，滅活或防止痤瘡丙酸桿菌，金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌和B群鏈球菌的繼發(fā)性感染。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗微生物乳液被用于預(yù)防革蘭氏陽(yáng)性菌感染。
本發(fā)明的抗微生物水包油乳液還可以用于通過(guò)接觸滅活各種病毒，特別是具有被膜的病毒。例如，在此公開(kāi)的乳液可用于咽喉、口腔、性器官，皮膚或體內(nèi)給藥，來(lái)滅活或防止下列病毒的繼發(fā)性感染皰疹病毒(如單純皰疹病毒1型和2型，E-B病毒，巨細(xì)胞病毒，水痘病毒，和6型人皰疹病毒)，披膜病毒(如風(fēng)疹病毒)，黃病毒(如黃熱病毒)，冠狀病毒(如冠狀病毒)，彈狀病毒(如狂犬病毒)，絲狀病毒(如馬爾堡病毒)，副粘病毒(如麻疹病毒)，正粘病毒(如流感病毒)，布尼亞病毒(如加利福尼亞腦炎病毒)，嵌沙樣病毒(如淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒)，反轉(zhuǎn)錄病毒(如人免疫缺損病毒1型)，和肝DNA病毒(如乙型肝炎病毒)。本發(fā)明的乳液還可以用于體外滅活病毒，例如用于消毒被污染的血液制品。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，水包油乳液被用于滅活人免疫缺損病毒(HIV)。
本發(fā)明還提供了一種適合于藥用的抗微生物制劑，它是由本發(fā)明的抗微生物乳液和藥用載體組成的。在此所用的術(shù)語(yǔ)“藥用載體”是指任何適合于藥用的生理學(xué)相容的載體。用這種基質(zhì)和藥劑作為藥物活性物質(zhì)是本專(zhuān)業(yè)人員熟知的。除非某些常規(guī)的基質(zhì)或試劑與本發(fā)明的乳液是不相容的，否則可以考慮將它們用于藥物制劑中。
本發(fā)明還進(jìn)一步提供了通過(guò)局部或全身性給予本發(fā)明的抗微生物乳液來(lái)抑制傳染性病原體生長(zhǎng)的方法，優(yōu)選地是以藥物制劑的形式給藥。在此所用的術(shù)語(yǔ)“局部”，包括用于粘膜、口腔表面、皮膚、內(nèi)耳表面或者身體任何孔道的表面，如陰道或直腸。在此所用的術(shù)語(yǔ)“全身性”包括任何形式的體內(nèi)給藥，包括但不局限于口服和靜脈內(nèi)給藥。
以下的實(shí)施例將闡明本發(fā)明的功效。
實(shí)施例實(shí)施例1-GMO和GMS水包油乳液制備在此實(shí)施例中，制備了一系列具有以GMO或GMS作為主要乳化劑的，帶正電荷和帶負(fù)電荷的含脂質(zhì)水包油乳液。并選擇幾個(gè)乳液對(duì)其純度、pH和油微滴大小進(jìn)行了鑒定。
表1顯示了用于構(gòu)成幾個(gè)帶電荷的GMO和GMS水包油乳液脂-油相的各種化學(xué)成分的用量，它們是以甘油一油酸酯(GMO)或甘油一硬脂酸酯(GMS)作為主要的乳化劑，以十六烷基吡啶鎓氯化物(CPC)，十六烷基吡啶鎓溴化物(CPB)，十六烷基三甲基銨溴化物(CTAB)，或二甲基二十八烷基銨溴化物(DDDAB)作為正電荷生成劑，或者以油酸作為負(fù)電荷生成劑。表1GMO/ GMO/ GMO/GMS/ GMO/ GMS/CPCCPBCTABDDDABOLEICCPCGMO 3.43g 3.43g 3.43g -----3.43g-----GMS ----- ----- ----- 3.43g-----3.43g大豆固醇或0.96g 0.96g 0.96g 0.96g0.96g0.96g膽固醇吐溫600.84g 0.84g 0.84g 0.84g0.84g0.84g大豆油11g11g11g 11g 11g 11gCPC 130mg ----- ----- ----------130mgCPB ----- 150mg ----- ---------------CTAB ----- ----- 140mg ---------------DDDAB ----- ----- ----- 240mg----------油酸 ----- ----- ----- -----108mg-----為了制備如上表1所示的帶電荷的乳液，先將含下列成分的脂-油相在86℃加熱大約1小時(shí)約12-21％重量的GMO或GMS，0.8-0.9％重量的陽(yáng)離子含鹵素化合物(或0.7％重量的油酸)，67-80％重量的載體油如大豆油，3-5％重量的吐溫60(聚氧乙烯20脫水山梨醇一硬脂酸酯)，和3-6％重量的大豆固醇。然后在65℃，用5ml噴射機(jī)(syringe machine)將此脂-油相與含水的水相混合，方法如美國(guó)專(zhuān)利No.4,895,452所述，體積比為13份脂-油比37份水。
表2顯示表1所示乳液的pH值。表2同時(shí)顯示了乳液中脂-油微滴的大小，這是用配有循環(huán)水浴的庫(kù)爾特LS 130激光定徑儀測(cè)定的。表2乳液的 平均庫(kù)爾特大小 平均大小化學(xué)成分電荷pH (微米) (微米)GMO/CPC 正3.721.049 0.720-1.401GMO/CPB 正4.310.891 0.680-1.124GMO/CTAB 正4.821.143 0.647-1.358GMS/DDDAB正5.861.080 O.694-1.532GMO/油酸 負(fù)4.451.078 0.738-1.448GMS/CPC 正3.721.047 0.677-1.497實(shí)施例2-10N GMO水包油乳液制備在此實(shí)施例中，制備了一系列帶正電荷的水包油乳液，它們都是以GMO作為主要乳化劑，并且與實(shí)施例1相比較，具有高于10倍百分?jǐn)?shù)(10N)的陽(yáng)離子含鹵素化合物(十六烷基吡啶鎓氯化物(CPC)，十六烷基吡啶鎓溴化物(CPB)，十六烷基三甲基銨溴化物(CTAB)，十六烷基二甲基乙基銨溴化物(CDEAB)和氯芐烷銨(BAC))作為正電荷生成劑。
表3顯示用于構(gòu)成帶正電荷的10N GMO乳液的脂-油相的各種化學(xué)成分的用量。表3 帶正電荷的10N乳液乳液的 GMO/ GMO/ GMO/GMO/ GMO/化學(xué)成分CPCCPBCTABCDEABBACGMO 3.43g 3.43g 3.43g 3.43g3.43g大豆固醇或 0.96g 0.96g 0.96g 0.96g0.96g膽固醇吐溫60 0.84g 0.84g 0.84g 0.84g0.84g大豆油 11g11g11g 11g 11gCPC 1.3g ----- ----- ----------CPB ----- 1.5g ----- ----------CTAB----- ----- 1.4g----------CDEAB ----- ----- ----- 1.3g -----BAC----- ----- ----- ----- 1.3g為了制備如表3所示的10N乳液，可先將含下列成分的脂-油相在86℃加熱大約1小時(shí)約19％重量的GMO，62％重量的載體油如大豆油，4.7％重量的吐溫60(聚氧乙烯20脫水山梨醇一硬脂酸酯)，5.4％重量的大豆固醇，和7.4-8.4％重量的陽(yáng)離子去污劑。然后在65℃，用5ml噴射機(jī)將此脂-油相與含水的水相混合(如美國(guó)專(zhuān)利4,895,452，其方法在此引入作為參考)，體積比為13份脂-油比37份水。實(shí)施例3-GMO和GMS水包油乳液對(duì)金黃色葡萄球菌8型的殺微生物活性在此實(shí)施例中，對(duì)表1所示的每種GMO和GMS乳液的殺微生物活性進(jìn)行了比較。為此目的，可按如下方法測(cè)定每種乳液殺滅金黃色葡萄球菌8型的能力將細(xì)菌接種于液體培養(yǎng)基內(nèi)(胰蛋白酶解酪蛋白大豆液體培養(yǎng)基或Schaedler’s液體培養(yǎng)基)，37℃培養(yǎng)1-7小時(shí)。再在波長(zhǎng)650nm測(cè)定每個(gè)液體培養(yǎng)物的光密度，并對(duì)每個(gè)培養(yǎng)物進(jìn)行定量。然后取1毫升每個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)物與1毫升乳液混合，或者與水混合作對(duì)照，作用10分鐘或30分鐘。然后對(duì)每個(gè)混合物作雙份定量培養(yǎng)。將含有細(xì)菌的平板在37℃培養(yǎng)18小時(shí)，然后進(jìn)行計(jì)數(shù)。
按如下公式測(cè)定被殺滅細(xì)菌的百分?jǐn)?shù)
A＝接種的細(xì)菌總數(shù)B＝與乳液混合后計(jì)數(shù)的細(xì)菌總數(shù)。
表4列出了每種乳液或水與2×107個(gè)細(xì)菌混合培養(yǎng)10分鐘或30分鐘后，金黃色葡萄球菌被殺滅的百分?jǐn)?shù)。表4制劑的 培養(yǎng)10分鐘后的培養(yǎng)30分鐘后的化學(xué)成分滅活百分?jǐn)?shù)(％)滅活百分?jǐn)?shù)(％)GMO/CPC 100 100GMO/CPB 100 100GMO/CTAB 99.99 99.99GMO/DDDAB650GMO/油酸 0 0GMS/CPC 650只有對(duì)照 500從表4可以看出，帶正電荷的甘油一油酸酯(GMO)乳液能滅活金黃色葡萄球菌8型，而帶正電荷的甘油一硬脂酸酯(GMS/CPC)乳液對(duì)此沒(méi)有滅活作用。此外，只是含有氯或溴的具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子化合物，即CPC、CPB或CTAB的乳液有顯著的殺微生物活性，含有二-十八烷基陽(yáng)離子化合物(DDDAB)或油酸(具有負(fù)電荷)的乳液沒(méi)有明顯的殺微生物活性。因此表明，用含有氯或溴，并含有具C12-C16鏈陽(yáng)離子化合物的GMO乳液，對(duì)滅活這種細(xì)菌，金黃色葡萄球菌，更有效。
為了測(cè)定在本發(fā)明的乳液中，改變其電荷生成劑濃度的影響，也可以用含有不同濃度CPC的GMO乳液，測(cè)定它們對(duì)金黃色葡萄球菌8型的殺微生物活性。表5顯示GMO乳液與107細(xì)菌混合培養(yǎng)10分鐘或30分鐘后，被殺滅的金黃色葡萄球菌的百分?jǐn)?shù)。表5金黃色葡萄球菌8型 培養(yǎng) 培養(yǎng)乳液的 的起始接種量 10分鐘后的30分鐘后的化學(xué)成分 滅活百分?jǐn)?shù) 滅活百分?jǐn)?shù)GMO/CPC10,000,000CFU100 100[1.8mg/ml乳液]GMO/CPC10,000,000CFU99.5 100
GMO/CPC10,000,000CFU5499.5
GMO/CPC10,000,000CFU3932
GMO/CPC10,000,000CFU0 0
GMO10,000,000CFU0 0GMO/油酸 10,000,000CFU0 0只有水 10,000,000CFU100表5表明，金黃色葡萄球菌8型菌對(duì)每毫升乳液CPC濃度大于0.23mg的GMO/CPC乳液的殺微生物作用是敏感的。實(shí)施例4-GMO水包油乳液對(duì)細(xì)菌和酵母菌的殺微生物活性在此實(shí)施例中，測(cè)定了實(shí)施例1中制備的，表1中所示的GMO/CPC乳液殺滅各種細(xì)菌和酵母菌的能力。
用上面實(shí)施例3所述的測(cè)定法，測(cè)定GMO/CPC乳液對(duì)多種細(xì)菌和真菌的殺微生物能力，方法僅作了如下改變先將酵母菌接種于Sabouraud’s液體培養(yǎng)基中，在30℃培養(yǎng)6小時(shí)，再與GMO/CPC乳液混合作用10分鐘或30分鐘，然后作平板接種，在37℃培養(yǎng)18小時(shí)后作計(jì)數(shù)測(cè)定。
將痤瘡丙酸桿菌在Schaedler’s液體培養(yǎng)基中厭氧培養(yǎng)24小時(shí)，與乳液混合作用10分鐘或30分鐘，然后在含有5％羊血的胰蛋白酶解酪蛋白大豆瓊脂板培養(yǎng)基上作平板接種，厭氧培養(yǎng)72小時(shí)后作計(jì)數(shù)測(cè)定。
將陰道加德納氏菌在含有5％羊血的胰蛋白酶解酪蛋白大豆瓊脂板培養(yǎng)基上作平板接種后，在含5％CO2的空氣中，37℃培養(yǎng)72小時(shí)。從平板培養(yǎng)基上刮取菌落，接種于Schaedler’s液體培養(yǎng)基中，形成0.5McFarland標(biāo)準(zhǔn)密度。然后將這種液體培養(yǎng)基和細(xì)菌的混合物與乳液混合培養(yǎng)10分鐘或30分鐘，再在含5％羊血的胰蛋白酶解酪蛋白大豆瓊脂板培養(yǎng)基上作平板接種。將平板在含5％CO2的空氣中，37℃培養(yǎng)72小時(shí)后，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
表6列出了GMO/CPC乳液與105-108細(xì)菌混合培養(yǎng)10分鐘或30分鐘后，被殺滅的革蘭氏陽(yáng)性菌百分?jǐn)?shù)。對(duì)被列出的細(xì)菌通?？勺魅缦路诸?lèi)(a)移生在皮膚上的細(xì)菌，包括金黃色葡萄球菌(8型)，金黃色葡萄球菌(5型)，表皮葡萄球菌(977株)，B群鏈球菌(莢膜III型)，A群鏈球菌(β-溶血性)，和痤瘡丙酸桿菌；(b)移生在口咽部的細(xì)菌，包括A群鏈球菌(β-溶血性)肺炎鏈球菌(5型)和變異鏈球菌，以及(c)移生或感染陰道的細(xì)菌，包括陰道加德納氏菌，和B群鏈球菌(莢膜III型)。表6培養(yǎng) 培養(yǎng)接種量 10分鐘后的30分鐘后的革蘭氏陽(yáng)性菌(CFU)*滅活百分?jǐn)?shù)滅活百分?jǐn)?shù)金黃色葡萄球菌 2×10799.99 99.99(8型/菌血癥分離物)金黃色葡萄球菌 9×10610099.99(5型菌血癥分離物)表皮葡萄球菌8×105100100(977株)B群鏈球菌 2.9×10799.99 100(莢膜III型)A群β溶血性 3.3×10799.99 99.99(1型)鏈球菌(ATCC 12344)單核細(xì)胞增生1.3×10899.99 99.99李斯特氏菌(2型)(ATCC 19112)肺炎鏈球菌 6.4×107100100(5型)(ATCC 6305)變異鏈球菌 6.5×10696.2 96.8(ATCC 25179)痤瘡丙酸桿菌1.2×108100100(ATCC 6919)糞鏈球菌3.7×10799.36 99.98(ATCC 19433)陰道加德納氏菌 5.5×107100100(ATCC 14018)嗜酸乳酸桿菌5.0×105100100(ATCC 4356)*CFU＝菌落形成單位表6表明，能對(duì)人引起嚴(yán)重臨床感染的所有革蘭氏陽(yáng)性菌，對(duì)GMO/CPC乳液的殺微生物作用都非常敏感。
表7顯示GMO/CPC乳液與105-108革蘭氏陰性菌混合培養(yǎng)10分鐘或30分鐘后殺菌百分?jǐn)?shù)。表中的革蘭氏陰性菌包括移生在口咽部的如流感嗜血桿菌(莢膜6型)和腦膜炎奈瑟氏菌6型，移生在胃腸道的如幽門(mén)卷旋桿菌以及移生在陰道的如淋病奈瑟氏菌。表7培養(yǎng) 培養(yǎng)接種量 10分鐘后的 30分鐘后的革蘭氏陰性菌 (菌落形成單位) 滅活百分?jǐn)?shù) 滅活百分?jǐn)?shù)大腸桿菌O18K1型2.1×10797.1 96.7大腸桿菌O18K-型3.2×10789.7 99.6大腸桿菌J5 3×10794 85(差向異構(gòu)酶缺乏型)腦膜炎黃桿菌 2.1×1060 47.6A群(ATCC 13253)肺炎克雷伯氏菌O12K+型5×10798.3 99.9綠膿假單胞菌 3.8×10799 99FD-1型綠膿假單胞菌 8×10699.1 97.5MEP株2192流感嗜血桿菌 1×10799.99 99.99莢膜B型(ATCVC 33533)腦膜炎奈瑟氏菌 1.6×108100100(ATCC 13090)淋病奈瑟氏菌 1.2×106100100(ATCC 9793)幽門(mén)卷旋桿菌 3×106100100(ATCC 43504)幽門(mén)卷旋桿菌 4.7×106100100(ATCC 43629)幽門(mén)卷旋桿菌 2×106100100(ATCC 49503)幽門(mén)卷旋桿菌 7×106100100(ATCC 43579)表7表明，培養(yǎng)30分鐘后，對(duì)所有被測(cè)定的革蘭氏陰性菌，除腦膜炎黃桿菌外，至少有85％的接種細(xì)菌被滅活了。有莢膜的b型流感嗜血桿菌，b型腦膜炎奈瑟氏菌，淋病奈瑟氏菌，和幽門(mén)卷旋桿菌，對(duì)GMO/CPC乳液的殺微生物活性都非常敏感，與其它革蘭氏陰性菌相比較，這些細(xì)菌都具有較粗糙的脂多糖(LPS)類(lèi)。
表8顯示GMO/CPC乳液與105接種量細(xì)菌混合培養(yǎng)10分鐘或30分鐘后，對(duì)二種念珠菌殺滅的百分?jǐn)?shù)。表8培養(yǎng)培養(yǎng)接種量 10分鐘后的 30分鐘后的酵母菌 (菌落形成單位) 滅活百分?jǐn)?shù) 滅活百分?jǐn)?shù)白色念珠菌3.2×10562.562.5(臨床血分離物)熱帶念珠菌5.4×105100 100(臨床血分離物)表8表明只有與GMO/CPC乳液混合培養(yǎng)10-30分鐘后，對(duì)白色念珠菌才有明顯的滅活作用。實(shí)施例5-10N GMO乳液的殺微生物活性在此實(shí)施例中，測(cè)定了實(shí)施例2中制備的，表3所示的帶正電荷的10N GMO乳液，對(duì)二種革蘭氏陽(yáng)性菌，金黃色葡萄球菌8型和表皮葡萄球菌，以及二種革蘭氏陰性菌，大腸桿菌和幽門(mén)卷旋桿菌的殺微生物活性，方法如下將0.5ml Schaedler’s液體培養(yǎng)基加到冷凍干燥的細(xì)菌培養(yǎng)物中，再將此小瓶?jī)?nèi)的全部細(xì)菌接種到5％羊血瓊脂培養(yǎng)平板(TSA 11)上。然后將培養(yǎng)物在帶有Campy GasPAK的厭氧培養(yǎng)罐中37℃培養(yǎng)72小時(shí)。再將取自TSA 11平板培養(yǎng)基的72小時(shí)培養(yǎng)物接種到Schaedler’s液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至達(dá)到0.5 McFarland標(biāo)準(zhǔn)密度。
然后將1ml等分量該細(xì)菌培養(yǎng)物與1ml水包油乳液混合作用10分鐘。再對(duì)每個(gè)混合物作雙份定量培養(yǎng)，并對(duì)原始的液體培養(yǎng)物作一份定量培養(yǎng)。將含有細(xì)菌的平板培養(yǎng)基在帶有Campy GasPaks的厭氧培養(yǎng)罐內(nèi)37℃培養(yǎng)72小時(shí)，然后進(jìn)行計(jì)數(shù)。按下面的公式計(jì)算被殺滅細(xì)菌的百分?jǐn)?shù)，結(jié)果顯示在表9內(nèi)。
A＝接種的細(xì)菌總數(shù)B＝與乳液或脂質(zhì)體混合后計(jì)數(shù)的細(xì)菌數(shù)表9列出了來(lái)自表3的10N GMO/CPC乳液與106-107細(xì)菌混合培養(yǎng)10分鐘后，被殺滅的每種細(xì)菌的百分?jǐn)?shù)。如表9中所標(biāo)明，10NGMO/CPC乳液是以未稀釋的形式和作了幾次稀釋的形式進(jìn)行測(cè)定。表9細(xì)菌 稀釋度 試驗(yàn)#1 試驗(yàn)#2金黃色葡萄球菌未稀釋NT100.00％8型 1∶10 99.99％8×10E7 CFU/mL1∶20 99.99％培養(yǎng)10分鐘1∶40 99.99％1∶80 96.25％表皮葡萄球菌 未稀釋NT100.00％977 1∶10 100.00％9×10E6 CFU/mL1∶20 100.00％培養(yǎng)10分鐘1∶40 99.98％1∶80 99.97％大腸桿菌 未稀釋 NT 99.99％02a，2b型 1∶10 99.99％1×10E7 CFU/mL1∶20 99.98％培養(yǎng)10分鐘1∶40 94.00％1∶80 50.00％幽門(mén)卷旋桿菌43579 未稀釋 100.00％100.00％培養(yǎng)10分鐘1∶10100.00％100.00％用于試驗(yàn)#1的接種物1∶20100.00％100.00％5×10E6 CFU/ml用于試驗(yàn)#2的接種物1∶4099.00％ 99.00％2×10E7 CFU/ml1∶8099.20％ 99.00％NT＝此數(shù)據(jù)未測(cè)定表9顯示，與直到1∶80稀釋度的10N GMO/CPC乳液混合培養(yǎng)10分鐘后，對(duì)被測(cè)定的每種細(xì)菌(除對(duì)大腸桿菌在高稀釋度(即1∶40和1∶80)以外)都有96％以上的滅活作用。在1∶10的乳液稀釋度，對(duì)每種細(xì)菌都有99.99-100％的滅活作用。實(shí)施例6-GMO水包油乳液和促融(fusogenic)脂囊泡對(duì)人免疫缺損病毒(HIV)的殺病毒活性在此實(shí)施例中，測(cè)定了實(shí)施例1中制備的GMO/CPC乳液和按如下所述方法制備的促融脂囊泡對(duì)HIV的殺病毒活性。
為了制備促融脂囊泡，將94.5克聚氧乙烯(POE)2硬脂醚(Brij72)，0.78克油酸，和36克膽固醇共同加熱熔化，形成液態(tài)脂質(zhì)相。然后取一份這種脂質(zhì)相0.53ml，與0.47ml角鯊烯混合，形成1.0ml脂-油相。在切變混合條件下，將此脂-油相與含有4.0ml磷酸緩沖液(PBS)的水相混合，形成脂囊泡，如在美國(guó)專(zhuān)利4,911,928中所述?！扒凶兓旌蠗l件”在此的含義是，相當(dāng)于通過(guò)一個(gè)1mm孔的相對(duì)流速為5-50m/秒的切變力。按體積對(duì)體積的比例，此混合液包含有4份稀釋劑和1份脂-油混合物，或者是11.7％脂質(zhì)∶8.3％油∶80％稀釋劑。
按如下方法測(cè)定GMO/CPC乳液和Brij 72促融脂囊泡對(duì)HIV的殺病毒活性用C8166細(xì)胞，一種HTLV-1轉(zhuǎn)化的T細(xì)胞系細(xì)胞，在20ml含10％PBS和50μg/ml慶大霉素的RPMI培養(yǎng)基內(nèi)，配制成含20×106細(xì)胞的細(xì)胞懸液，并分裝成0.4ml的等份。首先取100微升(μl)1000倍稀釋的HIV-1Mn病毒液與100μl無(wú)菌水或100μl GMO/CPC乳液在室溫下，在振蕩器上混合作用30分鐘，再向每個(gè)混合制劑加入1.8ml組織培養(yǎng)基，得到10-1稀釋液，然后配制病毒系列稀釋液(10-2到10-6)。取150μl 10-1稀釋液，在1.35ml RPMI培養(yǎng)基中再作5次系列稀釋?zhuān)瑯?gòu)成從10-2到10-6的系列10倍稀釋液。
然后每個(gè)稀釋液取2個(gè)0.4ml等份，加到如上述配制的C8166細(xì)胞等份懸液中。將該樣品在37℃培養(yǎng)2小時(shí)，6小時(shí)或24小時(shí)后，在磷酸鹽緩沖液中洗3次，重懸在新鮮的培養(yǎng)基中，并將每個(gè)稀釋液重復(fù)加入培養(yǎng)板的4個(gè)孔中。將細(xì)胞培養(yǎng)2周。在第7天和第14天觀察細(xì)胞病變效應(yīng)，并收集上清液，測(cè)定作為病毒增殖指示的p24含量。根據(jù)所測(cè)定的p24含量，計(jì)算組織培養(yǎng)感染劑量(TCID-50(log10))。結(jié)果如下對(duì)于與GMO/CPC乳液混合培養(yǎng)2小時(shí)的樣品，同與水混合的樣品相比較，在第7天病毒的TCID-50降低了4.5log，在第14天病毒的TCID-50降低了4.25log。
對(duì)于與GMO/CPC乳液混合培養(yǎng)6小時(shí)的樣品，同與水混合的樣品相比較，在第7天病毒的TCID-50降低了4.5log，在第14天病毒的TCID-50降低了5log。
對(duì)于與GMO/CPC乳液混合培養(yǎng)24小時(shí)的樣品，同與水混合的樣品相比較，在第7天和第14天病毒的TCID-50降低了4.0log；同與磷酸鹽緩沖液混合的樣品相比較，在第7天和第14天，TCID-50分別降低了3.75og和4.25og；同與含有POE 2硬脂醚的促融諾瓦體(novasome)混合的樣品相比較，在第7天和第14天TCID-50分別降低了4.0log和4.5log。
總之，這個(gè)實(shí)施例證明，在C8166組織培養(yǎng)測(cè)定中，GMO/CPC乳液使HIV-1Mn的感染性降低了4.0-5.0log。這些實(shí)驗(yàn)可以證明這些物質(zhì)對(duì)滅活病毒如HIV-1Mn的效果，也可以用任何其它有被膜病毒來(lái)作這種試驗(yàn)。實(shí)施例7-GMO水包油乳液的穩(wěn)定性在此實(shí)施例中，測(cè)定了實(shí)施例1中制備的GMO/CPC乳液，在加熱和存在酸和堿時(shí)的穩(wěn)定性，表10顯示煮沸1小時(shí)對(duì)GMO/CPC乳液的崩解或聚集作用，并顯示等體積1N硝酸與GMO/CPC乳液混合作用2小時(shí)，對(duì)GMO/CPC乳液的崩解或聚集作用，以及等體積1N NaOH與GMO/CPC乳液混合作用2小時(shí)，對(duì)GMO/CPC乳液的崩解或聚集作用。表10乳液的 平均庫(kù)爾特大小 平均庫(kù)爾特范圍化學(xué)成分 處理方式 (μm) (μm)GMO/CPC未煮沸1.0080.720-1.337GMO/CPC煮沸1小時(shí) 1.1670.654-1.517GMO/CPC未用酸處理1.0080.720-1.337GMO/CPC1N硝酸1.0620.675-1.5692小時(shí)GMO/CPC未用堿處理1.0080.720-1.337GMO/CPC1N NaOH 0.8040.658-0.9692小時(shí)表10顯示(a)煮沸1小時(shí)未引起乳液發(fā)生明顯的崩解或微滴大小改變；(b)用1N硝酸處理2小時(shí)，GMO/CPC乳液微滴大小或聚集狀態(tài)未發(fā)生明顯改變；(C)用1N NaOH處理2小時(shí)，引起乳液平均微滴大小降低20％，未瓦解乳液，也未發(fā)生聚集作用。
上述實(shí)施例1-7顯然表明，本發(fā)明的抗微生物水包油乳液對(duì)多種病毒細(xì)菌和酵母菌有顯著的殺微生物活性，甚至只需要極低濃度的陽(yáng)離子含鹵素化合物如CPC。并且本發(fā)明的乳液對(duì)熱、酸、堿是穩(wěn)定的，使它們非常適用于醫(yī)用給藥，無(wú)論是局部、口服或全身性給藥都可以。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，或者僅用常規(guī)實(shí)驗(yàn)就能確定出許多本發(fā)明特異性實(shí)施方案的等效物。這些等效物將被包括在權(quán)利要求之中。
權(quán)利要求
1.一種含有帶正電荷油不連續(xù)相微滴的水包油抗微生物乳液，其中不連續(xù)相微滴是分散在連續(xù)水相中的，該乳液包含a.一種油；b.一種甘油酯；c.一種具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物。
2.權(quán)利要求1的抗微生物乳液，其中的甘油酯選自甘油一油酸酯，甘油三油酸酯，甘油一月桂酸酯和甘油二月桂酸酯。
3.權(quán)利要求1的抗微生物乳液，其中的油選自大豆油，角鯊烯油，芝麻油，橄欖油，卡諾拉油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花油，魚(yú)油，鱷梨油，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物。
4.權(quán)利要求1的抗微生物乳液，其中的鹵素選自溴、氯、氟。
5.權(quán)利要求1的抗微生物乳液，其中的具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物選自十六烷基吡啶鎓氯化物，十六烷基吡啶鎓溴化物，十六烷基三甲基銨溴化物，十六烷基三甲基銨氯化物，十六烷基二甲基乙基銨溴化物，十六烷基芐基二甲基銨氯化物，十六烷基三丁基鏻溴化物，十二烷基三甲基銨溴化物和十四烷基三甲基銨溴化物。
6.權(quán)利要求1的抗微生物乳液，其中的乳液還含有至少一種選自如下種類(lèi)的固醇膽固醇，膽固醇衍生物，氫化可的松，植物固醇，以及它們的混合物。
7.權(quán)利要求1的抗微生物乳液，其中乳液的至少一部分是以選自如下種類(lèi)的帶正電荷的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)形式存在單層，多層和少層的脂囊泡，微胞和片層狀結(jié)構(gòu)。
8.一種適合于醫(yī)用給藥的抗微生物制劑，其包含權(quán)利要求1的抗微生物乳液和藥用載體。
9.一種含有帶正電荷油不連續(xù)相微滴的水包油抗微生物乳液，其中不連續(xù)相微滴是分散在連續(xù)水相中的，該乳液包含a.一種選自下列種類(lèi)的油大豆油，角鯊烯油，角鯊?fù)橛?，芝麻油，橄欖油，卡諾拉油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花油，魚(yú)油，鱷梨油，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物。b.甘油一油酸酯；c.十六烷基吡啶鏻氯化物。
10.一種適合于醫(yī)用給藥的抗微生物制劑，其包含權(quán)利要求9的抗微生物乳液和藥用載體。
11.一種抑制傳染性病原體生長(zhǎng)的方法，其包括局部應(yīng)用水包油抗微生物乳液的步驟，所說(shuō)的抗微生物乳液是以分散在連續(xù)水相中的帶正電荷的油不連續(xù)相微滴的形式存在的，該乳液包含a.一種油，b.一種甘油酯；和c.一種具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物。
12.權(quán)利要求11的方法，其中作為主要乳化劑的甘油酯選自甘油一油酸酯，甘油三油酸酯，甘油一月桂酸酯和甘油二月桂酸酯。
13.權(quán)利要求11的方法，其中的鹵素選自溴、氯和氟。
14.權(quán)利要求11的方法，其中具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物選自十六烷基吡啶鎓氯化物，十六烷基吡啶鎓溴化物，十六烷基三甲基銨溴化物，十六烷基二甲基乙基銨溴化物和氯芐烷銨。
15.權(quán)利要求11的方法，其中的油選自大豆油，角鯊烯油，芝麻油，橄欖油，卡諾拉油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花油，魚(yú)油，鱷梨油，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物。
16.權(quán)利要求11的方法，其中乳液還含有至少一種選自如下種類(lèi)的固醇膽固醇，膽固醇衍生物，氫化可的松，植物固醇，以及它們的混合物。
17.權(quán)利要求11的方法，其中所說(shuō)的局部應(yīng)用包括口腔應(yīng)用。
18.權(quán)利要求11的方法，其中所說(shuō)的局部應(yīng)用包括經(jīng)吸入應(yīng)用于粘膜。
19.權(quán)利要求11的方法，其中所說(shuō)的局部應(yīng)用包括陰道內(nèi)應(yīng)用。
20.權(quán)利要求11的方法，其中傳染性病原體是細(xì)菌。
21.權(quán)利要求11的方法，其中傳染性病原體是真菌。
22.權(quán)利要求11的方法，其中傳染性病原體是病毒。
23.權(quán)利要求22的方法，其中病毒是被膜病毒。
24.權(quán)利要求23的方法，其中的被膜病毒是HIV。
25.權(quán)利要求23的方法，其中的被膜病毒選自皰疹病毒，披膜病毒，黃病毒，冠狀病毒，彈狀病毒，絲狀病毒，副粘病毒，正粘病毒，布尼亞病毒，嵌沙樣病毒，反轉(zhuǎn)錄病毒和肝DNA病毒。
26.一種抑制傳染性病原體生長(zhǎng)的方法，其包括將水包油抗微生物乳液局部應(yīng)用于含有傳染性病原體部位，該抗微生物乳液是以分散在連續(xù)水相中的帶正電荷的油不連續(xù)相微滴的形式存在的，該乳液包含a.一種選自下列種類(lèi)的油大豆油，角鯊?fù)橛?，芝麻油，橄欖油，卡諾拉油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花油，魚(yú)油，鱷梨油，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物；b.甘油一油酸酯；和c.十六烷基吡啶鎓氯化物。
27.一種抑制體內(nèi)傳染性病原體生長(zhǎng)的方法，其包括對(duì)患者全身性施用一種水包油抗微生物乳液的步驟，該抗微生物乳液是以分散在連續(xù)水相中的帶正電荷的油不連續(xù)相微滴的形式存在的，該乳液包含a.一種選自如下種類(lèi)的油大豆油，角鯊烯油，芝麻油，橄欖油，卡諾拉油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花油，魚(yú)油，鱷梨油，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物；b.一種選自如下種類(lèi)的甘油酯甘油一油酸酯，甘油三油酸酯，甘油一月桂酸酯，甘油二月桂酸酯；和c.一種選自如下種類(lèi)的具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物十六烷基吡啶鎓氯化物，十六烷基吡啶鎓溴化物，十六烷基三甲基銨溴化物，十六烷基二甲基乙基銨溴化物和氯芐烷銨。
28.權(quán)利要求27的方法，其中乳液還含有至少一種選自下列種類(lèi)的固醇膽固醇，膽固醇衍生物，氫化可的松，植物固醇，以及它們的混合物。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所說(shuō)的全身性施用包括腸內(nèi)給藥。
30.權(quán)利要求27的方法，其中病原體選自細(xì)菌、真菌和病毒。
31.一種治療患者病原體感染的方法，其包括對(duì)患者全身性施用一種水包油抗微生物乳液的步驟，所述乳液含有分散在連續(xù)水相中的帶正電荷的油不連續(xù)相微滴，該乳液包含a.一種油，b.甘油一油酸酯；和c.十六烷基吡啶鎓氯化物。
32.一種在體外滅活傳染性病原體的方法，其包括使病原體與水包油抗微生物乳液接觸的步驟，該乳液是以分散在連續(xù)水相中的帶正電荷的油不連續(xù)相微滴的形式存在的，該乳液包含a.一種選自如下種類(lèi)的油大豆油，角鯊?fù)橛?，芝麻油，橄欖油，卡諾拉油，玉米油，菜籽油，紅花油，葵花油，魚(yú)油，凡士林，鱷梨油，甘油三酯的油和脂，香料油，水不溶性維生素，以及它們的混合物；b.一種選自如下種類(lèi)的甘油酯甘油一油酸酯，甘油三油酸酯，甘油一月桂酸酯，和甘油二月桂酸酯；和c.一種選自如下種類(lèi)的具有C12-C16鏈的陽(yáng)離子含鹵素化合物十六烷基吡啶鎓氯化物，十六烷基吡啶鎓溴化物和十六烷基三甲基銨溴化物。
33.權(quán)利要求32的方法，其中的病原體是病毒。
34.權(quán)利要求33的方法，其中的病毒是HIV。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種水包油抗微生物乳液，它包含一個(gè)選自如下種類(lèi)的，作為主要乳化劑的成分甘油一油酸酯，甘油三油酸酯，甘油一月桂酸酯，和甘油二月桂酸酯，還包含一個(gè)作為正電荷生成劑的，具有C
文檔編號(hào)A61P31/04GK1156404SQ95194248
公開(kāi)日1997年8月6日 申請(qǐng)日期1995年5月18日 優(yōu)先權(quán)日1994年5月20日
發(fā)明者D·C·萊特 申請(qǐng)人:諾瓦瓦克斯有限公司