本發(fā)明涉及一種智能釋放及緩釋花色苷的開關(guān)型介孔碳復(fù)合物的制備方法，屬于納米遞送。

背景技術(shù)：

1、花色苷作為藍(lán)莓中的主要生物活性物質(zhì)，具有抗氧化、抗癌、抗炎等多種生理功能?；ㄉ盏腸環(huán)吡喃氧正陽離子易受oh-攻擊，導(dǎo)致c環(huán)裂解，穩(wěn)定性降低。在加工體系中，花色苷的色澤和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性受到不同因素的影響，如ph值、溫度、光、氧和其他物質(zhì)的存在(包括金屬離子、碳水化合物、蛋白質(zhì)和二氧化硫)，加劇了花色苷在加工過程中的受損程度，導(dǎo)致產(chǎn)品品質(zhì)變差，進(jìn)而影響體內(nèi)吸收利用率。且在口服吸收利用時(shí)，花色苷急需載體將其遞送到特定位置，才能更好發(fā)揮生物活性。

2、介孔碳材料是近年來發(fā)現(xiàn)的一類新型非硅介孔材料，孔徑范圍(2～50nm)，已經(jīng)獲得了極大的關(guān)注及研究。介孔碳被證明可以有效提高藥物負(fù)載量，在生物醫(yī)學(xué)方面有良好的應(yīng)用前景，比如藥物傳遞、基因轉(zhuǎn)染、光熱治療、光動(dòng)力治療、生物傳感器等領(lǐng)域，主要是由于其具有比表面積高、孔容大、孔徑可調(diào)、介孔結(jié)構(gòu)有序開放且表面易于修飾等優(yōu)點(diǎn)，而且還具有較高的耐腐蝕性、良好的熱穩(wěn)定性和機(jī)械穩(wěn)定性，因此介孔碳球制備及其應(yīng)用成為近年來材料領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。由于其獨(dú)特的性質(zhì)及表面可功能化等特性，可以吸附相對(duì)更多的化合物，并保證化合物不被外界環(huán)境破壞，介孔碳球在藥物遞送方面展現(xiàn)出巨大的潛力，并被應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域。

3、介孔碳常被用于藥物載體，實(shí)現(xiàn)藥物傳遞到所需的組織、器官、細(xì)胞和亞細(xì)胞器官的目的?？捎行岣咧委熜运幬锏乃幚砘钚?，降低藥物毒副作用，克服藥物溶解性有限、生物利用度低等問題。本發(fā)明選用了臨床藥物鹽酸多巴胺及食品原料殼寡糖為碳前驅(qū)體，綠色環(huán)保，安全無毒。介孔載體作為藥物輸送系統(tǒng)的研究與開發(fā)將提供更多有效可行的治療技術(shù)前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于選取安全無毒原材料，制備口服藥物遞送載體，提供了一種智能釋放及緩釋花色苷的開關(guān)型介孔碳復(fù)合物的制備方法，所制備的介孔碳球形貌較好，大小均勻，將用于花色苷等化合物的智能遞送。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，原料易得，成本較低。得到的產(chǎn)品產(chǎn)量較高，產(chǎn)品分散性好，具有明顯的介孔結(jié)構(gòu)，制備穩(wěn)定。制備的介孔碳球?qū)ㄉ站哂休^好的吸附作用。改性介孔碳的外層羧基與酚酸的酚羥基通過酯鍵連接，作為封控改性介孔碳的“開關(guān)”。當(dāng)體內(nèi)腸道炎癥發(fā)生時(shí)，由于酯酶及活性氧的高表達(dá)，刺激“開關(guān)”打開，釋放出花色苷，實(shí)現(xiàn)介孔碳遞送花色苷在腸道炎癥部位的智能釋放及緩釋作用。

2、本發(fā)明利用改性介孔碳吸附花色苷，并在在外層修飾不同種類的多酚，改性介孔碳的外層羧基與酚酸的酚羥基通過酯鍵連接，作為封控介孔碳的“開關(guān)”。當(dāng)體內(nèi)腸道炎癥發(fā)生時(shí)，由于酯酶及活性氧的高表達(dá)，刺激“開關(guān)”打開，釋放出花色苷，實(shí)現(xiàn)介孔碳遞送花色苷在腸道炎癥部位的智能釋放及緩釋作用。目前在遞送花色苷方面還未有應(yīng)用，本發(fā)明從理論上探究介孔碳載體對(duì)花色苷加工穩(wěn)態(tài)及口服吸收利用的保護(hù)，為功能活性物質(zhì)的遞送提供理論依據(jù)。

3、本發(fā)明提供了一種智能釋放及緩釋花色苷的開關(guān)型介孔碳復(fù)合物的制備方法。

4、一種智能釋放及緩釋花色苷的開關(guān)型介孔碳復(fù)合物的制備方法，以含有羧基的改性介孔碳為載體負(fù)載花色苷，具體為：將含有羧基的改性介孔碳的內(nèi)層修飾大豆卵磷脂后負(fù)載花色苷，再將已負(fù)載花色苷的介孔碳的外層修飾具有不同酚羥基數(shù)目的酚酸，得一種智能釋放及緩釋花色苷的開關(guān)型介孔碳復(fù)合物。

5、上述技術(shù)方案中，所述含有羧基的改性介孔碳按下述方法制得：以實(shí)心二氧化硅球?yàn)槟０?，鹽酸多巴胺及殼寡糖為碳源，使碳源包裹在整個(gè)二氧化硅球上，充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤氚彼锰脊鑿?fù)合物后進(jìn)行高溫炭化；利用hf除去內(nèi)部的實(shí)心二氧化硅球，制得中空介孔碳(hmc)載體；中空介孔碳載體利用過硫酸銨和濃硫酸溶液改性，獲得含有羧基的改性介孔碳。

6、進(jìn)一步地，所述含有羧基的改性介孔碳按下述方法制得：

7、s1，實(shí)心二氧化硅球的制備：將無水乙醇，蒸餾水和氨水混合按體積比42.8：6：1混勻，再逐滴加入與氨水等體積的正硅酸乙酯，攪拌一定時(shí)間，離心，得到沉淀即為實(shí)心二氧化硅球，洗滌后干燥；

8、s2，中空介孔碳載體的制備：將實(shí)心二氧化硅球分散于50％的乙醇水溶液中，加入鹽酸多巴胺及殼寡糖，充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤氚彼?0℃攪拌12h，產(chǎn)物用水和乙醇洗滌后干燥，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下400℃～800℃下炭化2h；將中空介孔碳載體分散在5％hf溶液中除模板12h得到中空介孔碳載體；

9、s3，含有羧基的改性介孔碳的制備：中空介孔碳載體利用0.5mol/l～1mol/l過硫酸銨和0.4～0.5mol/l的濃硫酸溶液改性，獲得含有羧基的改性介孔碳。

10、上述技術(shù)方案中，步驟s2中，實(shí)心二氧化硅球于50％的乙醇水溶液中的濃度為0.5mg/ml。

11、上述技術(shù)方案中，步驟s2中，氨水與50％的乙醇水溶液的體積比為0.075:2。

12、上述技術(shù)方案中，將大豆卵磷脂溶于70％乙醇水溶液中，制備0.5mg/ml的大豆卵磷脂溶液，將含有羧基的改性介孔碳置于其中，攪拌均勻后超聲，離心，即得內(nèi)層修飾大豆卵磷脂的介孔碳，介孔碳與大豆卵磷脂的質(zhì)量比為4:1。

13、進(jìn)一步地，將內(nèi)層修飾大豆卵磷脂的介孔碳加入到花色苷溶液中，載體與花色苷的質(zhì)量比為2：0.5～2.5，混合均勻，磁力攪拌過夜，所述磁力攪拌速率為500～800r/min，攪拌時(shí)間為8～10h，其中，所述藍(lán)莓花色苷溶液為藍(lán)莓花色苷的酸性溶液，所述花色苷溶液濃度為0.5～2.5mg/ml；所述酸性溶液為ph為3.0的稀鹽酸水溶液。

14、進(jìn)一步地，向已負(fù)載花色苷的介孔碳溶液加入酚酸，攪拌1h，最終體系中大豆卵磷脂：花色苷：介孔碳：酚酸的質(zhì)量比為1：2：4：6，離心，取沉淀，洗2～3次，得一種智能釋放及緩釋花色苷的開關(guān)型介孔碳復(fù)合物。

15、進(jìn)一步地，所述酚酸為單寧酸、兒茶素、表沒食子酸沒食子酸酯中的一種。

16、上述技術(shù)方案中，殼寡糖和鹽酸多巴胺的摩爾比分別為加入1:0～1:2，不含0。

17、上述技術(shù)方案中，在室溫條件下加入碳源，實(shí)心二氧化硅和碳源質(zhì)量比為1:1.5。

18、本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明以實(shí)心介孔硅為模板，選用臨床藥物鹽酸多巴胺及食品原料殼寡糖為碳前驅(qū)體，綠色環(huán)保，安全無毒，制備方法簡(jiǎn)單，原料廉價(jià)、易得，適于放大生產(chǎn)。本發(fā)明所公開的中空介孔碳球，其粒徑尺寸、空腔大小、介孔殼層厚度和介孔孔徑皆可以通過改變多元共組裝和溶膠凝膠條件進(jìn)行調(diào)控；本發(fā)明所公開的空心介孔碳球，其介孔孔徑、比表面積和孔容皆可以通過焙燒條件進(jìn)行調(diào)控；本發(fā)明所公開的中空介孔碳球，兼?zhèn)溆薪榭卓椎琅c空腔協(xié)同作用的優(yōu)勢(shì)，可將花色苷收集于中空結(jié)構(gòu)中，可減緩花色苷被消化液分解。本發(fā)明以介孔碳為花色苷的遞送載體，綠色環(huán)保，安全無毒，制備方法簡(jiǎn)單，原料廉價(jià)、易得，適于放大生產(chǎn)。本發(fā)明所公開的花色苷遞送體系，其對(duì)花色苷有較高的包封率及負(fù)載率，使其加工穩(wěn)定性得到改善，生物利用率提高，復(fù)合物具有腸炎部位的智能響應(yīng)和緩釋的作用。