本發(fā)明屬于生物提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種蜂膠的制備方法。

背景技術(shù)：

蜂膠是蜜蜂從植物芽孢或樹干上采集的樹脂，將其混入其上腭腺、蠟腺的分泌物加工而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物。是蜜蜂科動物中華蜜蜂等修補蜂巢所分泌的黃褐色或黑褐色的粘性物質(zhì)，可入藥。蜂膠(propolis)集動植物精華于一體，含有100多種能增進人類健康的類黃酮。蜂膠中含有300多種化學成分，其中包括芳香族和黃酮類、有機酸、萜烯類物質(zhì)、維生素、酶類等(castrosl，2001)，使它具有許多已被證實或正在被證實的生理功能。蜂膠具有：抗菌防腐作用(梁郁強等，1999；馬爾科相，1990)，抗病毒作用(amoros等，1992)，抗癌作用(sakamoto,1994；banskota,1998)，護肝作用(remirez,1997；ricardo,1994)，抗疲勞作用(吳粹文等，1997)；抗氧化、抗菌、消炎、抗病毒、保肝和抗癌等作用(alencar,s.m等，2007)。隨著對蜂膠的研究進一步深入，不斷發(fā)現(xiàn)其具有新的生理功能，如抑制脂肪氧化酶的活性、抗過敏作用、抗?jié)冏饔?、抑制血糖上升作用、改善代謝作用等。作為一種能夠增進健康、改善體質(zhì)的天然物質(zhì)，蜂膠受到了越來越多的關(guān)注。

目前市面上各種劑型的蜂膠種類繁多，但其配料都離不開“提純蜂膠膏”，而“提純蜂膠膏”的品質(zhì)好壞直接決定了各種蜂膠制品的質(zhì)量好壞。所以蜂膠提純工藝對下游蜂膠制品加工環(huán)節(jié)至關(guān)重要。蜂膠提取的方法很多，目前比較主流的是食用酒精浸提、二氧化碳超臨界萃取。實際生產(chǎn)實踐中由于食用酒精浸提安全性高、成本低等特點依然是各個廠家的首選。

食用酒精的蜂膠提純工藝看似簡單，實則不然。由于蜂膠成分復(fù)雜，全面提取十分困難，尤為重要的是毛膠中鉛含量很高，通過一般的沉降、過濾手段不僅時間長、效率低，而且除鉛效果并不理想。此外，現(xiàn)有蜂膠提純工藝大多注重浸提液的濃度以及浸提液與物料的配比，經(jīng)過多遍提取后，提取液的有效成分含量急劇降低，低濃度提取液極大地增加了濃縮的時間、成本，降低了生產(chǎn)效率，通知制備得到的蜂膠純度低。

因此，研究開發(fā)一種改善傳統(tǒng)食用酒精浸提工藝獲得高純度的蜂膠變得非常重要。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種蜂膠的制備方法，該方法制備得到的蜂膠可有效除去蜂膠中的重金屬物質(zhì)，且得到的蜂膠純度高。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用食用酒精溶液浸提后，再加入單寧，攪拌均勻，進行微波提取，得到提取液；

3)再將提取液進行離心分離，取上清液；

4)將上清液進行超濾，得到蜂膠。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟1)中，粉碎至100～150目。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，加入毛膠粉重量8～12倍的食用酒精溶液。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，食用酒精溶液的體積濃度為55～70％。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，加入的單寧量為毛膠粉重量的0.02～0.08％。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，微波提取的條件為：功率為250～400w，時間為18～25min。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟3)中，在5000～7000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離12～18min。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟4)中，所述超濾為：先用截留分子量為90kda～120kda的超濾膜進行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為50kda～70kda的超濾膜進行超濾分離。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

1、通過本發(fā)明方法有效克服了傳統(tǒng)采用乙醇提取獲得的蜂膠提取物中活性蛋白質(zhì)含量低問題(活性蛋白質(zhì)含量一般為1.9％左右)，按本發(fā)明蜂膠提取方法得到的蜂膠提取物中蛋白質(zhì)含量達到3.9％。

2、本發(fā)明方法采用單寧，環(huán)保，不會影響蜂膠的功效和營養(yǎng)，且可有效去除蜂膠的重金屬物質(zhì)，經(jīng)檢測，本發(fā)明方法制得的蜂膠不含有任何重金屬物質(zhì)。

3、按照本發(fā)明方法制備蜂膠，得到的蜂膠產(chǎn)品純度高，經(jīng)過hplc檢測，蜂膠純度可達到99％以上。

4、通過本發(fā)明方法制備蜂膠還能夠有效保持天然蜂膠的原有芳香味，還保留了蜂膠中α和β兩種淀粉酶及其它生物活性物質(zhì)。

具體實施方式

以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。

實施例1

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至100目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量12倍的體積濃度為55％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.06％的單寧，攪拌均勻，在功率為250w條件下微波提取25min，得到提取液；

3)再將提取液在5000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離16min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為90kda的超濾膜進行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為70kda的超濾膜進行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過hplc檢測，蜂膠純度可達到99.2％。

實施例2

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至150目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量11倍的體積濃度為60％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.08％的單寧，攪拌均勻，在功率為300w條件下微波提取24min，得到提取液；

3)再將提取液在5500r/min轉(zhuǎn)速下離心分離18min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為95kda的超濾膜進行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為65kda的超濾膜進行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過hplc檢測，蜂膠純度可達到99.5％。

實施例3

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至100目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量10倍的體積濃度為65％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.06％的單寧，攪拌均勻，在功率為350w條件下微波提取22min，得到提取液；

3)再將提取液在6000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離16min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為100kda的超濾膜進行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為60kda的超濾膜進行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過hplc檢測，蜂膠純度可達到99.7％。

實施例4

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至150目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量9倍的體積濃度為70％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.04％的單寧，攪拌均勻，在功率為400w條件下微波提取20min，得到提取液；

3)再將提取液在6500r/min轉(zhuǎn)速下離心分離14min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為110kda的超濾膜進行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為55kda的超濾膜進行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過hplc檢測，蜂膠純度可達到99.5％。

實施例5

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至100目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量8倍的體積濃度為65％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.02％的單寧，攪拌均勻，在功率為250w條件下微波提取18min，得到提取液；

3)再將提取液在7000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離12min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為120kda的超濾膜進行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為50kda的超濾膜進行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過hplc檢測，蜂膠純度可達到99.2％。