本發(fā)明屬于微生物應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及銅綠假單胞菌的新用途。

背景技術(shù)：

甲狀腺癌是最常見的甲狀腺惡性腫瘤，來源于甲狀腺上皮細(xì)胞，近年來發(fā)病率呈爆發(fā)式增長。甲狀腺癌易發(fā)生頸部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移,尤其是甲狀腺乳頭狀癌(ptc)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高達(dá)80％，微灶轉(zhuǎn)移的發(fā)生率更是高達(dá)90％。一旦出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移將增加術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險及患者的術(shù)后長期生存。

頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)是整塊切除頸部淋巴組織及周圍的脂肪、肌肉、神經(jīng)、血管等，它被廣泛應(yīng)用于治療頸部轉(zhuǎn)移癌。甲狀腺癌發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移后，頸部淋巴結(jié)清掃手術(shù)對甲狀腺癌患者的治療極為重要，直接影響該病的后續(xù)治療和隨訪，并與預(yù)后密切相關(guān)，美國內(nèi)分泌協(xié)會建議頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)作為甲狀腺癌的標(biāo)準(zhǔn)處理方式。

甲狀腺癌ptc最常見的轉(zhuǎn)移部位是中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)(vi區(qū))，其次是側(cè)頸區(qū)ii-v區(qū)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移報道也高達(dá)30-40％。相比較于中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)清掃，側(cè)區(qū)淋巴結(jié)清掃顯得更為重要：首先，中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)目前大部分指南均推薦進(jìn)行預(yù)防性清掃，而側(cè)區(qū)淋巴結(jié)僅推薦治療性清掃，這樣更容易遺漏側(cè)區(qū)；其次，側(cè)區(qū)淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，病例分期即為n1b，其預(yù)后將受到明顯影響：術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險明顯增加；再者，側(cè)區(qū)范圍大，手術(shù)范圍廣，淋巴結(jié)清掃手術(shù)難度大，術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率更高：常見的如術(shù)后出血(其發(fā)生率可高達(dá)3.3-10.5％)、側(cè)區(qū)淋巴漏(其發(fā)生率可高達(dá)8.3-13.5％)，這些并發(fā)癥處理困難，治療周期長，甚至需要二次手術(shù)。

銅綠假單胞菌(p.aeruginosa)原稱綠膿桿菌。在自然界分布廣泛，為土壤中存在的最常見的細(xì)菌之一。目前已有銅綠假單胞菌制劑在胃癌、乳腺癌、膀胱癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤中參與免疫治療的報道，其可以增加患者的化療承受能力、減輕化療的毒副作用，被廣泛應(yīng)用于惡性腫瘤的輔助治療中。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供銅綠假單胞菌的新用途。

本發(fā)明提供了銅綠假單胞菌在制備頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)的術(shù)中輔助用藥物中的用途。本發(fā)明還提供了銅綠假單胞菌在制備頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)的輔助用藥物中的用途，所述輔助用藥物為預(yù)防術(shù)后引流液出血、術(shù)后淋巴漏，降低引流量，和/或提早引流管拔除時間的藥物。

術(shù)中：指整個手術(shù)過程，包括頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)、安置引流管后的加藥處理。

其中，所述頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)為頸側(cè)區(qū)淋巴結(jié)清掃術(shù)。

其中，所述頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)為甲狀腺癌頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)。

其中，所述甲狀腺癌頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)為甲狀腺癌頸側(cè)區(qū)淋巴結(jié)清掃術(shù)。

其中，所述輔助用藥物為降低術(shù)后引流液出血、術(shù)后淋巴漏，降低引流量，和/或提早引流管拔除時間的藥物。

其中，所述藥物是以滅活銅綠假單胞菌為有效成分，加入藥學(xué)上常用的輔料制備而成的制劑。

其中，所述制劑為注射制劑或外用制劑；其中，所述制劑為銅綠假單胞菌注射液。

其中，所述銅綠假單胞菌注射液中，每毫升含銅綠假單胞菌1.6-2.0x10⁹個。

其中，所述銅綠假單胞菌注射液由下述方法制備而成：取銅綠假單胞菌msha菌毛株、培養(yǎng)、滅活、純化，加入pbs緩沖液稀釋，即可。

本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，在甲狀腺癌患者頸側(cè)區(qū)清掃術(shù)中，通過在術(shù)區(qū)使用滅活銅綠假單胞菌，可顯著減少術(shù)后引流液量、顯著縮短引流管的拔除時間、顯著減少術(shù)后出血及淋巴漏發(fā)生，從而有效加快患者術(shù)后快速康復(fù)，縮短術(shù)后住院時間，并且使用安全、可靠，為臨床甲狀腺癌輔助治療提供了一種新的藥物選擇，臨床應(yīng)用前景良好。

顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

附圖說明

圖150例頸側(cè)區(qū)清掃預(yù)防性使用滅活銅綠假單胞菌注射液組(實驗組)的總引流量明顯少于對照組(p＝0.048)。

圖2實驗組術(shù)后拔管時間及術(shù)后住院時間均明顯短于對照組(p<0.05)。

圖3實驗組術(shù)后引流液內(nèi)紅細(xì)胞計數(shù)明顯低于對照組(p<0.05)。

圖4實驗組術(shù)后引流液內(nèi)甘油三酯水平明顯低于對照組(p<0.05)。

圖5實驗組患者術(shù)后日最高體溫與對照組無差異(p>0.05)。

圖6實驗組患者術(shù)后疼痛(靜止或活動后)與對照組均無差異(p>0.05)。

具體實施方式

以下通過試驗例具體說明本發(fā)明的有益效果：

試驗例1銅綠假單胞菌對甲狀腺癌頸側(cè)區(qū)清掃術(shù)的術(shù)后臨床療效觀察

本發(fā)明使用的滅活銅綠假單胞菌注射液購自北京萬特爾生物制藥有限公司，也可自行采用銅綠假單胞菌(msha菌毛株)經(jīng)過培養(yǎng)、滅活、純化后以pbs緩沖液稀釋而成。

本發(fā)明的單中心、隨機(jī)對照臨床實驗，已經(jīng)得到了四川大學(xué)華西醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，也在中國臨床實驗注冊(注冊號：chictr-ior-17010605)，

一、實驗方法

1、一般資料：

選取2016年10月至2017年4月的100例甲狀腺癌病人，所有病人術(shù)前已經(jīng)經(jīng)過穿刺證實頸側(cè)區(qū)淋巴結(jié)存在轉(zhuǎn)移，且需要行側(cè)頸淋巴結(jié)清掃，術(shù)前簽署知情同意書，然后采用計算機(jī)隨機(jī)分組分層方法進(jìn)行分組：實驗組(50例)及對照組(50例)。

2、治療方法：

實驗組在側(cè)頸淋巴結(jié)清掃、安置引流管后，給予滅活銅綠假單胞菌注射液2ml側(cè)區(qū)噴灑(主要沿頸內(nèi)靜脈外后側(cè)緣及鎖骨下靜脈上緣呈“l(fā)”型噴灑)；

對照組給予常規(guī)安置引流管，創(chuàng)面不給予任何其他材料。側(cè)區(qū)引流管的安置統(tǒng)一由“低領(lǐng)弧形切口”外緣切口下2cm打孔引出，體內(nèi)引流管預(yù)留5個側(cè)孔，沿鎖骨水平平面放置。

3、術(shù)后指標(biāo)采集：

術(shù)后常規(guī)飲食，不給予額外止血藥物，當(dāng)側(cè)區(qū)引流管引流液低于30ml時，拔除引流管。主要采集患者每日側(cè)區(qū)引流管引流液體積、及引流液中紅細(xì)胞計數(shù)、甘油三脂水平，記錄每日的最高體溫，采用vas評分分別評估靜止和運動后頸部疼痛。對于體溫升高及疼痛，我們不推薦使用激素類藥物控制。

4、統(tǒng)計差異性分析：

采用spss17.0對實驗組和對照組進(jìn)行統(tǒng)計分析。

二、實驗結(jié)果

1、有效性評價

見圖1-4。

結(jié)果顯示：甲狀腺癌患者頸側(cè)區(qū)清掃術(shù)中預(yù)防性使用滅活銅綠假單胞菌注射液，能顯著減少側(cè)區(qū)引流液(見圖1，術(shù)后側(cè)區(qū)引流液總數(shù)，實驗組vs對照組：171.5±91.8vs212.6±115.7ml，p<0.05)；加快引流管的拔除(見圖2，側(cè)區(qū)引流管拔除時間，實驗組vs對照組：3.4±1.0vs4.2±1.4天，p<0.05)，從而加快術(shù)后恢復(fù)，減少術(shù)后住院時間(見圖2，術(shù)后住院時間，實驗組vs對照組：5.7±1.5vs6.5±2.6天，p<0.05)。

而且，引流液的紅細(xì)胞計數(shù)在術(shù)后前2日內(nèi)，實驗組均明顯低于對照組(p<0.05)(見圖3)。

同時，引流液甘油三酯水平在術(shù)后第1天，實驗組均明顯低于對照組(p<0.05)(見圖3)，如果以引流液甘油三酯水平≥11.3mmol/l定義為有臨床意義的淋巴漏，實驗組有10例(20.0％)，對照組有18例(36.0％)，二者有統(tǒng)計學(xué)差異(p＝0.044，p<0.05)。

因此，在甲狀腺癌患者頸側(cè)區(qū)清掃術(shù)中，術(shù)中預(yù)防性使用滅活銅綠假單胞菌，可以顯著減少術(shù)后引流液量、顯著縮短引流管的拔除時間、顯著減少術(shù)后出血及淋巴漏發(fā)生，從而加快術(shù)后快速康復(fù)，縮短術(shù)后住院時間。

2、安全性評價

同時，觀察患者術(shù)后的體溫及頸部疼痛，見圖5-6。

患者術(shù)后的每日最高體溫變化結(jié)果見圖5，可見，連續(xù)術(shù)后觀察3天，兩組病人體溫均未見明顯差異。

對于患者術(shù)后頸部的疼痛，分為靜止?fàn)顟B(tài)及活動狀態(tài)，結(jié)果見圖6，實驗組與對照組病人疼痛評分并無差異(p>0.05)。

另外，所有實驗組50例病人，隨訪至少3個月，并未觀察到其他并發(fā)癥的發(fā)生。

因此，在甲狀腺癌患者頸側(cè)區(qū)清掃術(shù)中，術(shù)中預(yù)防性使用滅活銅綠假單胞菌是安全的。

綜上，在甲狀腺癌患者頸側(cè)區(qū)清掃術(shù)中，本發(fā)明通過在術(shù)區(qū)使用滅活銅綠假單胞菌，可顯著減少術(shù)后引流液量、顯著縮短引流管的拔除時間、顯著減少術(shù)后出血及淋巴漏發(fā)生，從而加快患者術(shù)后快速康復(fù)，并且使用安全、可靠，臨床應(yīng)用前景良好。