本發(fā)明屬于個人護理組合物領(lǐng)域；特別是皮膚增亮組合物。
背景技術(shù)：
大多數(shù)人關(guān)心其皮膚色素沉著的程度。例如，具有老年斑或雀斑的人可能希望這種色素斑點不太明顯。其他人可能希望減輕由暴露于陽光引起的皮膚變暗或增亮其天然皮膚顏色。為了滿足這種需要，已經(jīng)進(jìn)行了許多嘗試來開發(fā)用于減少黑素細(xì)胞中色素產(chǎn)生的產(chǎn)品。然而，迄今為止已經(jīng)確認(rèn)的物質(zhì)往往具有低療效或不期望的副作用，例如毒性或皮膚刺激。因此，持續(xù)需要具有改進(jìn)的總體有效性的新的化妝用皮膚增亮劑。
常規(guī)的皮膚增亮組合物是基于使用被認(rèn)為控制黑色素分散或抑制酪氨酸酶的皮膚增亮劑。這些皮膚增亮劑包括煙酰胺、諸如壬二酸和曲酸的羧酸、植物提取物和氫醌等。作為維生素b3化合物的煙酰胺是在局部施用的組合物中廣泛使用的皮膚增亮劑。
de10133196(beiersdorf)公開了含有煙酸或其前體、衍生物或代謝物的局部組合物，用于改善皮膚狀況和(1)治療或預(yù)防干性皮膚、增強皮膚的屏障功能、用于治療、護理和預(yù)防敏感皮膚和/或用于治療和預(yù)防正常皮膚的生理體內(nèi)平衡的負(fù)面變化的癥狀；(2)治療或預(yù)防炎癥性皮膚病、特應(yīng)性濕疹、多形性光皮炎、銀屑病、白癜風(fēng)和敏感、瘙癢或刺激性皮膚；(3)治療或預(yù)防異常脂質(zhì)過氧化；(4)治療或預(yù)防皮膚的異常的神經(jīng)酰胺、脂質(zhì)和能量代謝、異常的經(jīng)皮水分流失、皮膚水合和水分含量降低和天然保濕因子含量改變；(5)治療或預(yù)防細(xì)胞間通訊減少、細(xì)胞內(nèi)dna合成缺陷、dna損傷、內(nèi)源性dna修復(fù)減少、金屬蛋白酶和/或其他蛋白酶的活化或?qū)ο鄳?yīng)的dna修復(fù)機制的抑制和結(jié)締組織組件的翻譯后修飾異常；(6)治療或預(yù)防皮膚透明質(zhì)酸和葡萄糖氨基聚糖含量異常；和(7)治療或預(yù)防頭頭皮屑及頭皮和皮膚老化。
據(jù)認(rèn)為，煙酰胺降低環(huán)腺苷酸(環(huán)狀3'-5'-amp)的有效濃度，環(huán)腺苷酸被認(rèn)為充當(dāng)介導(dǎo)各種激素包括參與黑色素分散的黑素細(xì)胞激活激素的作用的第二信使。環(huán)狀3'-5'-amp磷酸二酯酶是一種使環(huán)狀3'-5'-amp降解為腺苷-5'-單磷酸酯的酶。已經(jīng)顯示該酶的活性由煙酰胺激活。因此，煙酰胺被認(rèn)為降低了環(huán)狀3'-5'-amp的有效濃度，從而降低了黑色素顆粒的分散。另外，已經(jīng)顯示煙酰胺可以減少黑色素從黑素細(xì)胞到角質(zhì)形成細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。然而，已知煙酰胺對黑素細(xì)胞中的黑色素含量具有很小的直接影響或沒有影響。
仍然需要將環(huán)腺苷酸降低與黑素細(xì)胞中黑色素含量降低相結(jié)合的組合物。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)煙酰胺與mmp抑制劑加拉定(galardin)組合以協(xié)同方式降低黑素細(xì)胞中的黑色素含量。因此，本發(fā)明涉及一種組合物，其包含用于增亮皮膚的煙酰胺和加拉定的協(xié)同組合。因此，當(dāng)將組合物在體內(nèi)局部施用適當(dāng)長的時間時，可以使用該組合物來增亮皮膚或減少老年斑或雀斑。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種皮膚增亮組合物，其包含有效量的煙酰胺和有效量的加拉定(galardin)。
在第二方面，本發(fā)明提供了根據(jù)本發(fā)明的組合物用于增亮皮膚的用途。
在第三方面，本發(fā)明提供了一種增亮人皮膚的方法，該方法包括將根據(jù)本發(fā)明的組合物施用到皮膚上的步驟。
通過閱讀以下詳細(xì)描述和所附權(quán)利要求，這些和其它方面、特征和優(yōu)點對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將變得顯而易見。為了避免疑義，本發(fā)明的一個方面的任何特征可以用于本發(fā)明的任何其它方面?！鞍ā币辉~意在表示“包含”，而不一定是“由...組成”或“由...構(gòu)成”。換句話說，列出的步驟或選項不需要是窮盡的。應(yīng)當(dāng)注意，在下面的描述中給出的示例旨在闡明本發(fā)明，并不意圖將本發(fā)明限于這些示例本身。類似地，除非另有說明，所有百分?jǐn)?shù)均為重量/重量百分?jǐn)?shù)。除了在操作例和比較例中，或者另外明確地指出，本說明書中表示反應(yīng)物質(zhì)或反應(yīng)條件的數(shù)量、物質(zhì)的物理性質(zhì)和/或用途的所有數(shù)字應(yīng)被理解為由“約”修飾。以“從x到y(tǒng)”的格式表示的數(shù)值范圍被理解為包括x和y。當(dāng)針對特定特征以“從x到y(tǒng)”的格式描述多個優(yōu)選范圍時，可以理解組合不同端點的所有范圍也是可以預(yù)期的。
具體實施方式
在本發(fā)明的第一方面，提供一種皮膚增亮組合物，所述組合物包含煙酰胺和加拉定(galardin)。
煙酰胺
煙酰胺也稱為尼克酰胺和吡啶-3-甲酰胺，是維生素b3的活性水溶性形式。其對于輔酶nadh和nadph是必不可少的，因此用于體內(nèi)的超過200個酶反應(yīng)，包括atp的形成。
本發(fā)明的組合物包含有效量的煙酰胺，通常濃度為組合物重量的0.001至10％，優(yōu)選至少0.01％，更優(yōu)選至少0.1％，還更優(yōu)選至少1％，甚至更優(yōu)選至少2％，還更優(yōu)選至少3％，或甚至至少4％；但優(yōu)選不超過組合物重量的9％，更優(yōu)選不超過8％，還更優(yōu)選不超過7％，還更優(yōu)選不超過6％，或甚至不超過5％。
加拉定
加拉定也稱為gm6001或伊洛馬司他，是具有以下結(jié)構(gòu)的廣譜基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑：
加拉定是可逆基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的異羥肟酸類的成員。異羥肟酸基團的陰離子態(tài)與活性位點鋅形成二齒絡(luò)合物。
基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp)在基質(zhì)重塑中的作用是已知的，并且是從各種細(xì)胞分泌的，包括皮膚細(xì)胞，如黑素細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。加拉定是一種廣譜合成基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp)抑制劑，對mmp-1、mmp-2、mmp-3、mmp-7、mmp-8、mmp-9、mmp-12、mmp-14、mmp-26具有很強的活性。20世紀(jì)90年代首次報道了其具有膠原蛋白類骨架，以促進(jìn)結(jié)合mmp的活性位點和異羥肟酸鹽結(jié)構(gòu)(r-co-nh-oh，其中r是有機殘基)，該結(jié)構(gòu)螯合位于mmp的催化結(jié)構(gòu)域中的鋅離子。據(jù)報道通過阻止原mmp轉(zhuǎn)化為活性形式來調(diào)節(jié)mmp。
考慮到黑色素是通過氧化氨基酸酪氨酸隨后進(jìn)行聚合形成的一組色素，令人驚訝的是，加拉定也與煙酰胺一起在降低黑素細(xì)胞中黑色素的含量中起作用。另外，加拉定也似乎沒有對酪氨酸酶的抑制起作用，酪氨酸酶是酪氨酸的氧化酶，并且是含銅蛋白質(zhì)，但不是金屬蛋白酶，如下文實施例中所證實的。
本發(fā)明突顯了加拉定通過與煙酰胺組合以協(xié)同方式調(diào)節(jié)原代人黑素細(xì)胞中黑色素含量中的作用。
本發(fā)明的組合物包含有效量的加拉定，通常濃度為組合物重量的0.00001至10％，優(yōu)選至少0.0001％，更優(yōu)選至少0.001％，還更優(yōu)選至少0.001％，甚至更優(yōu)選至少0.1％，還更優(yōu)選至少0.5％，或甚至至少1％；但優(yōu)選為不超過組合物重量的8％，更優(yōu)選為不超過5％，還更優(yōu)選為不超過4％，甚至更優(yōu)選為不超過3％，還更優(yōu)選為不超過2％，甚至更優(yōu)選為不超過1.5％。
其他成分
本發(fā)明的組合物還可以包含化妝學(xué)上可接受的媒介，其可以用作組合物中使用的皮膚增亮劑的稀釋劑、分散劑和/或載體，以便當(dāng)將組合物施用于皮膚時促進(jìn)它們的分布。適用于本發(fā)明的化妝學(xué)上可接受的媒介可以是含水的、無水的或乳液；含水的或乳液，特別是油包水乳液或水包油乳液是最優(yōu)選的。存在的水通常構(gòu)成組合物的余量。優(yōu)選地，水以組合物的5-99重量％、更優(yōu)選20-80重量％、還更優(yōu)選40-80重量％的濃度存在。
除了水之外，有機溶劑也可以用作本發(fā)明的組合物內(nèi)的載體。
潤膚劑也可以用作本發(fā)明組合物中的化妝學(xué)上可接受的載體。潤膚劑通常為硅油和合成酯的形式。硅油可以是揮發(fā)性和非揮發(fā)性的。揮發(fā)性硅油優(yōu)選選自含有3-9個、優(yōu)選4-5個硅原子的環(huán)狀或線性的聚二甲基硅氧烷。用作潤膚劑材料的非揮發(fā)性硅油包括聚烷基硅氧烷、聚烷基芳基硅氧烷和聚醚硅氧烷共聚物。用于本發(fā)明的基本上不揮發(fā)的聚烷基硅氧烷包括例如聚二甲基硅氧烷。
可以使用的酯類潤膚劑有：
a)具有10-20個碳原子的脂肪酸的烯基或烷基酯。其實例包括異花生醇新戊酸酯、異壬酸異壬酯、油醇肉豆蔻酸酯、油醇硬脂酸酯和油醇油酸酯；
b)醚酯，如乙氧基化脂肪醇的脂肪酸酯；
c)多元醇酯。乙二醇單脂肪酸酯和乙二醇二脂肪酸酯，二甘醇單脂肪酸酯和二甘醇二脂肪酸酯，聚乙二醇(200-6000)單脂肪酸酯和聚乙二醇(200-6000)二脂肪酸酯，丙二醇單脂肪酸酯和丙二醇二脂肪酸酯，聚丙二醇2000單油酸酯，聚丙二醇2000單硬脂酸酯，乙氧基化丙二醇單硬脂酸酯，甘油單脂肪酸酯和甘油二脂肪酸酯，聚甘油多脂肪酸酯，乙氧基化甘油單硬脂酸酯，1,3-丁二醇單硬脂酸酯，1,3-丁二醇二硬脂酸酯，聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯，脫水山梨醇脂肪酸酯和聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯，是令人滿意的多元醇酯。
d)蠟酯、如蜂蠟、鯨蠟、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、硬脂酸硬脂酯和山崳酸二十烷醇酯。
e)甾醇類酯，其實例是膽固醇脂肪酸酯。
潤膚劑可以以組合物重量的0.1-50％、優(yōu)選1-20％存在于組合物中。
在本發(fā)明的組合物中，也可以含有10-30個碳原子的脂肪酸作為化妝學(xué)上可接受的載體。這些脂肪酸的示例性實例是壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、羥基硬脂酸、油酸、亞油酸、蓖麻油酸、花生酸、山崳酸、芥酸及其混合物。
多元醇類的保濕劑也可以用作本發(fā)明組合物中的化妝學(xué)上可接受的載體。保濕劑有助于增加潤膚劑的有效性、減少結(jié)垢、刺激積垢的去除并改善皮膚感覺。典型的多元醇包括：甘油，聚亞烷基二醇，更優(yōu)選亞烷基多元醇及其衍生物，包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇及其衍生物，山梨醇，羥丙基山梨醇，己二醇，1,3-丁二醇，1,2,6-己三醇，乙氧基化甘油，丙氧基化甘油及它們的混合物。為獲得最佳效果，保濕劑優(yōu)選為丙二醇或透明質(zhì)酸鈉。組合物中保濕劑的濃度可以在組合物重量的0.5-30％，優(yōu)選1-15％的范圍內(nèi)。
增稠劑也可以用作本發(fā)明的組合物的化妝學(xué)上可接受的載體的一部分。典型的增稠劑包括交聯(lián)的丙烯酸酯(例如carbopol982)、疏水改性的丙烯酸酯(例如carbopol1382)、纖維素衍生物和天然樹膠。有用的纖維素衍生物是羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素和羥甲基纖維素。適用于本發(fā)明的天然樹膠包括瓜耳膠、黃原膠、菌核、角叉菜膠、果膠以及這些樹膠的組合。組合物中增稠劑的濃度可以在0.0001-5重量％，通常為0.001-1重量％，最佳為0.01-0.5重量％的范圍內(nèi)。
總的來說，水、溶劑、硅氧烷、酯、脂肪酸、保濕劑和/或增稠劑將以組合物重量的1-99.9％、優(yōu)選80-99％的量構(gòu)成化妝學(xué)上可接受的載體。
表面活性劑也可以存在于本發(fā)明的組合物中。表面活性劑的總濃度范圍為組合物重量的0.1-40％，優(yōu)選1-20％，最佳為1-5％。表面活性劑可以選自陰離子、非離子、陽離子和兩性活性物質(zhì)。特別優(yōu)選的非離子表面活性劑是c10-c20脂肪醇或酸疏水物用每摩爾疏水物2-100摩爾的環(huán)氧乙烷或環(huán)氧丙烷縮合的那些；用2-20摩爾環(huán)氧烷縮合的c2-c10烷基酚；乙二醇的單脂肪酸酯和二脂肪酸酯；脂肪酸單甘油酯；脫水山梨醇，單c8-c20脂肪酸和二c8-c20脂肪酸；嵌段共聚物(環(huán)氧乙烷/環(huán)氧丙烷)；和聚氧乙烯脫水山梨醇以及它們的組合。烷基聚糖苷和糖脂肪酰胺(例如甲基葡糖酰胺)也是合適的非離子表面活性劑。
優(yōu)選的陰離子表面活性劑包括皂、烷基醚硫酸鹽和烷基醚磺酸鹽、烷基硫酸鹽和烷基磺酸鹽、烷基苯磺酸鹽、烷基和二烷基磺基琥珀酸鹽、c8-c20?；u乙磺酸鹽、?；劝彼猁}，c8-c20烷基醚磷酸鹽及它們的組合。
防曬劑包括通常用于阻擋紫外線光的那些材料。示例性化合物是paba、肉桂酸酯和水楊酸酯的衍生物。例如，可以使用avobenzophenone(parsol
本發(fā)明的組合物可以包括寬范圍的其它可選組分。ctfacosmeticingredienthandbook，第二版，1992其全部內(nèi)容通過引用并入本文，描述了皮膚護理工業(yè)中通常使用的各種非限制性的化妝品和藥物成分，其適用于本發(fā)明的組合物。
實例包括：抗氧化劑、粘合劑、生物添加劑、緩沖劑、著色劑、聚合物、收斂劑、香料、遮光劑、調(diào)理劑、去角質(zhì)劑、ph調(diào)節(jié)劑、防腐劑、天然提取物、精油、皮膚感覺劑、皮膚舒緩劑和皮膚愈合劑。
當(dāng)制備本發(fā)明的組合物時，通常將所需成分在約70℃至約80℃的溫度和大氣壓下以不特定的順序混合。
用于本發(fā)明組合物的包裝可以是貼、瓶、管、滾球施用器、推進(jìn)劑驅(qū)動的氣溶膠裝置、擠壓容器或加蓋罐。
在第二方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的組合物用于增亮皮膚的用途。
在第三方面，本發(fā)明涉及一種增亮人皮膚的方法，該方法包括將根據(jù)本發(fā)明的組合物施用到皮膚上的步驟。
現(xiàn)在將通過以下非限制性實施例來說明本發(fā)明。
實施例
實施例1：煙酰胺和加拉定對黑色素抑制作用的體外研究
材料
(i)原代人新生兒包皮黑素細(xì)胞、培養(yǎng)基254和人黑色素細(xì)胞生長添加成分-2(lifetechnologies)
(ii)加拉定(r)-n4-羥基-n1-[(s)-2-(1h-吲哚-3-基)1-甲基氨基甲?；?乙基]-2-異丁基-琥珀酰胺(sigma-aldrich)
(iii)煙酰胺(sigmaaldrich)
(iv)己基間苯二酚(sigmaaldrich)
(v)鈣黃綠素-am-鈣黃綠素乙酰氧基甲酯(sigmaaldrich)
(vi)dmso-二甲基亞砜(sigmaaldrich)
(vii)氫氧化鈉(merckspecialtiespvt.ltd.)
(viii)hepes-(4-(2-羥乙基)哌嗪-1-乙磺酸，n-(2-羥乙基)哌嗪-n'-(2-乙磺酸)(sigmaaldrich)
(ix)nacl-氯化鈉(fisherscientific)
(x)np40-nonidetp40(usb公司)
(i)pmsf-苯基甲磺酰氟(sigma-aldrich)
(xii)蛋白酶抑制劑混合物(sigma-aldrich)
(xiii)l-酪氨酸(sigma-aldrich)
方法
(i)細(xì)胞培養(yǎng)：
新生兒包皮原代人黑素細(xì)胞是從美國lifetechnologies采購的。將細(xì)胞在補充有人黑素細(xì)胞生長添加成分-2的培養(yǎng)基254中生長，并在37℃下保持在含有5％co2氣氛的加濕培養(yǎng)箱中。根據(jù)制造商的說明進(jìn)行細(xì)胞的保持和繼代培養(yǎng)。第3-6代之間的細(xì)胞用于實驗。
(ii)活性物質(zhì)添加：
將細(xì)胞以5×104/孔的密度接種在黑素細(xì)胞生長培養(yǎng)基(mgm)中的24孔板中，并在37℃/5％co2下溫育24小時。將活性物質(zhì)連同相關(guān)對照一起添加到細(xì)胞。活化處理后72小時，使用鈣黃綠素法測定細(xì)胞活力，然后測量細(xì)胞黑色素含量(在下文中描述)。
(iii)細(xì)胞活力測定
簡言之，移除廢棄的培養(yǎng)基，并用0.2ml1×pbs-ca-mg溶液洗滌細(xì)胞一次。將在pbs緩沖液中的新鮮1μm鈣黃綠素-am加入到每個孔中。在37℃下在co2培養(yǎng)箱中溫育板30分鐘。然后在tecanm1000平板讀數(shù)器中測定鈣黃綠素?zé)晒?在490nm下激發(fā)，并在520nm下發(fā)射)。
(iv)黑色素含量測定：
在鈣黃綠素測定后，用pbs(1×)沖洗培養(yǎng)物，并在搖床培養(yǎng)箱中使用naoh/dmso混合物在60℃下裂解1小時。在tecan平板讀數(shù)器(405nm濾光器)中測量黑色素含量，校正細(xì)胞數(shù)并表示為抑制％。
(v)體外人酪氨酸酶活性測定：
原代人黑素細(xì)胞裂解物用作酪氨酸酶的來源。在加入酪氨酸/dopa底物混合物之前，將人黑素細(xì)胞裂解物和測試活性物質(zhì)(不同濃度)一起溫育15分鐘。然后將測定板在37℃下溫育～14-16小時。在405nm處測量光密度并計算抑制％。
結(jié)果
表i
表ii
結(jié)論
上表(表i)突出顯示了通過將加拉定與煙酰胺組合獲得的黑素細(xì)胞中黑色素含量的協(xié)同降低。表i中的數(shù)據(jù)顯示，加拉定本身不會降低(1μm)或不會適度降低(10μm)原代人黑素細(xì)胞中的黑色素含量。然而，當(dāng)以不同比例將加拉定和煙酰胺組合在一起時，在每種活性物質(zhì)的特定測試濃度下獲得黑色素含量的協(xié)同降低。
表ii進(jìn)一步顯示，黑色素含量的這種降低不是通過直接調(diào)節(jié)酪氨酸酶的活性。煙酰胺也觀察到類似的結(jié)果。