美洲大蠊油脂抗腫瘤的用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了美洲大蠊油脂在制備抗腫瘤的藥物中的用途。本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，美洲大蠊油脂能夠有效抑制乳腺癌、直腸癌、肝癌等腫瘤細(xì)胞的生長，具有良好的抗腫瘤活性，為臨床用藥提供了新的選擇。
【專利說明】美洲大蠊油脂抗腫瘤的用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種美洲大蠊油脂及其制備方法和用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO)統(tǒng)計，每年世界有1000萬人患上癌癥，而死于癌癥人數(shù)占 全球死亡人數(shù)的12%。我國每年新增癌癥患者180萬，死亡140萬，而且我國癌癥發(fā)病率 呈急劇上升趨勢。在過去不到20年的時間里，我國癌癥發(fā)病率上升69%，死亡率增長了 29.4%。因此，癌癥正在嚴(yán)重威脅到世界人民和中國人民的健康。中醫(yī)藥治療腫瘤，是中國 在腫瘤治療領(lǐng)域的一大特色，且越來越受到重視。但目前很少見到直接用于腫瘤治療的中 成藥，這種狀況并不表明中醫(yī)藥中沒有治療腫瘤的藥物，而是對這類藥物的研發(fā)重視不夠， 還有巨大的潛力有待挖掘。
[0003] 腫瘤細(xì)胞一個主要特征就是無限增殖，通過抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫 瘤細(xì)胞凋亡，就可以有效控制腫瘤的增長，達(dá)到治療腫瘤的目的。目前，抑制癌細(xì)胞生長 和增殖是腫瘤治療的重要策略。另外，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生一種非凋亡的程序性死亡，即 Necroptosis，為一種新的治療腫瘤的途徑。但在治療腫瘤中，是各種途徑綜合作用結(jié)果。
[0004] 本領(lǐng)域公知地，藥物的抗癌機(jī)理復(fù)雜，目前報道的作用機(jī)理有：1、對腫瘤細(xì)胞的直 接抑制和殺滅作用；2、抑制腫瘤細(xì)胞分裂、增殖、誘導(dǎo)分化和（或）誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；3、 逆轉(zhuǎn)耐藥性；4、抗微管作用；5、抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶；6、增進(jìn)機(jī)體免疫功能；7、抑制腫瘤新生血 管；8、其它途徑（李忠，等，中醫(yī)腫瘤學(xué)科現(xiàn)狀分析與發(fā)展思路，中醫(yī)學(xué)報，2010-01-15)。 不同的腫瘤細(xì)胞，由于其染色體、基因、細(xì)胞表面標(biāo)記等分子水平和病理特征均存在顯著差 異，針對不同癌細(xì)胞，藥物產(chǎn)生的功效或機(jī)理可能不同，治療一種癌癥的藥物，不一定對另 一種癌癥有效，因此，也就出現(xiàn)了廣譜抗腫瘤藥（如環(huán)磷酰胺）和窄譜抗腫瘤藥（如鹽酸氮 芥）。
[0005] 美洲大蠊油脂富含脂肪酸及其酯類化合物組成。其中以不飽和脂肪酸酯類化合物 含量最高。本發(fā)明擬研究美洲大蠊油脂對腫瘤的影響。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供了美洲大蠊油脂的新用途。
[0007] 具體地，本發(fā)明提供了美洲大蠊油脂在制備抗腫瘤的藥物中的用途。
[0008] 進(jìn)一步地，所述的抗腫瘤藥物為抗乳腺癌、直腸癌或肝癌的藥物。
[0009] 優(yōu)選地，所述的抗腫瘤藥物為抗乳腺癌或直腸癌的藥物。
[0010] 其中，所述美洲大蠊油脂中含有12%?18% w/w十八碳烯酸、8%?12% w/w十八 碳二烯酸、10%?13% w/w十六燒酸。
[0011] 進(jìn)一步地，所述美洲大蠊油脂由如下方法制備：
[0012] 方法（1):取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用乙醇提取，合并提取液，減壓濃縮，濃縮 液再采用有機(jī)溶劑萃取，取萃取液，回收溶劑，即得美洲大蠊油脂；
[0013] 方法⑵：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用C02超臨界流體萃取，收集油脂，即得； [0014] 方法⑶：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用蒸汽熔煉法提取美洲大蠊油脂，即得。
[0015] 更進(jìn)一步地，方法（1)中，乙醇濃度為70%?90% v/v，有機(jī)溶劑為正己烷、石油 醚、丙酮等中的任一種或兩種以上的組合。
[0016] 本發(fā)明還提供了一種美洲大蠊油脂的注射液，它含有美洲大蠊油脂、滲透壓調(diào)節(jié) 齊IJ、助溶劑。
[0017] 進(jìn)一步地，所述滲透壓調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、葡萄糖或甘露醇；所述助溶劑選自吐 溫、司盤或丙二醇。
[0018] 更進(jìn)一步地，每IOOOml注射液中含有0. 8?3g美洲大蠊油脂，5g氯化鈉，3?7g 聚山梨酯-80,余量為注射用水。
[0019] 本發(fā)明還提供了一種制備上述美洲大蠊油脂注射液的制備方法，它包括如下步 驟：
[0020] 取美洲大蠊油脂，加入氯化鈉、聚山梨酯-80,混勻，加注射用水，濾過，灌封，滅菌 即得。
[0021] 本發(fā)明還提供了一種美洲大蠊油脂的軟膠囊，它含有美洲大蠊油脂和植物油。
[0022] 進(jìn)一步地，所述植物油為大豆油。
[0023] 更進(jìn)一步地，所述軟膠囊劑內(nèi)容物包含0. 8?3重量份美洲大蠊油脂，500?700 重量份的大豆油。
[0024] 本發(fā)明還提供了制備上述美洲大蠊油脂軟膠囊的方法，它包括如下步驟：
[0025] 取美洲大蠊油脂，加入大豆油，混勻，壓制軟膠囊，干燥，即得。
[0026] 本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，美洲大蠊油脂能夠有效抑制乳腺癌、直腸癌、肝癌等腫瘤細(xì)胞的 生長，具有良好的抗腫瘤活性，為臨床用藥提供了新的選擇。
[0027] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

【具體實施方式】
[0028] 實施例1本發(fā)明美洲大蠊油脂的制備
[0029] (1)樣品一：取干燥美洲大蠊全蟲500g，經(jīng)粉碎后采用70 %?90 %的乙醇熱回流 提取，合并后減壓濃縮至小體積，再采用正己烷、石油醚、丙酮中任一溶劑進(jìn)行萃取，將萃取 物在室溫下濃縮干，得到提取物一。
[0030] (2)樣品二：取干燥美洲大蠊全蟲500g，經(jīng)粉碎后采用CO2超臨界流體萃取，采用 適當(dāng)方法精制后得到提取物二。
[0031] (3)樣品三：取干燥美洲大蠊全蟲500g，經(jīng)粉碎后采用蒸汽熔煉法提取美洲大蠊 油脂，采用適當(dāng)方法精制后得到提取物三。實驗說明本發(fā)明制備的促伸進(jìn)修復(fù)材料的修復(fù) 作用強(qiáng)，穩(wěn)定性好，安全性高，且制備方法簡單，具有良好的工業(yè)應(yīng)用前景。
[0032] 采用GC-MS法對以上三種美洲大蠊油脂樣品進(jìn)行成分分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，美洲大蠊 油脂中脂肪酸為主。美洲大蠊油脂所含的脂肪酸中，含量較高的不飽和脂肪酸有：十八碳烯 酸，十八碳二烯酸；含量較高的飽和脂肪酸有：十六烷酸。三份油脂樣品中十八碳烯酸含量 分別為：12. 97%、17. 66%、14. 23% ;十八碳二烯酸含量分別為：8. 06%、11. 23%、9. 17% ; 十六烷酸含量分別為：10. 12%、12. 34%、11. 35%。
[0033] 實施例2本發(fā)明美洲大蠊油脂注射液的制備
[0034]【處方】原料：美洲大蠊油脂800?3000mg ;輔料：氯化鈉5g、聚山梨酯-805g ;加 注射用水至l〇〇〇ml。
[0035] 【制備方法】取美洲大蠊油脂，加入氯化鈉、聚山梨酯-80,混勻，加注射用水至 1000ml，濾過，灌封于2ml安剖瓶中，滅菌30分鐘即得。
[0036] 實施例3本發(fā)明美洲大蠊油脂軟膠囊的制備
[0037] 【處方】原料：美洲大蠊油脂800?3000mg ;輔料：大豆油600g ;制成1000粒軟膠 囊。
[0038] 【制備方法】取美洲大蠊油脂，加入大豆油，混勻，壓制成1000粒軟膠囊，轉(zhuǎn)籠定型， 洗丸，干燥，即得。
[0039] 以下通過試驗例具體說明本發(fā)明的有益效果。
[0040] 試驗例1本發(fā)明美洲大蠊油脂抗癌活性的測定
[0041] 方法：分別取對數(shù)生長期的MDA-MB-468乳腺癌細(xì)胞、H22肝癌細(xì)胞、CT26直腸癌 細(xì)胞，用0. 25%胰酶進(jìn)行消化后，制成單細(xì)胞懸液，用培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為5X104/ml， 接種于96孔板，每孔200iiL單細(xì)胞懸液（104個/孔）于5% C02,37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。 實驗組為分別加入終濃度為0. 2mg/ml、0. 4mg/ml、0. 8mg/ml、I. 6mg/ml的美洲大蠊油脂，每 個濃度組含有12個復(fù)孔，同時設(shè)加入不含美洲大蠊油脂的完全培養(yǎng)基的對照孔，含有12個 復(fù)孔。
[0042] 分別于藥物干預(yù)48h后，輕輕吸棄上清液，加入無血清DMEM高糖培養(yǎng)液每孔 200iiL，及MTT液每孔20iiL(5g/L)于5%C02,37°C恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h。輕輕棄去 上清液，各孔加入200 y L二甲基亞砜（DMSO)，待結(jié)晶物完全溶解，立即用酶聯(lián)免疫檢測儀， 測定各孔吸光度值（0D值），波長為570nm ;取12孔的平均值。
[0043] 細(xì)胞增殖平均抑制率計算。其公式為：細(xì)胞增殖平均抑制率=1_(實驗組A570值 / 對照組 A570 值）/12 X 100 %
[0044] 實驗結(jié)果：見表1。
[0045] 表1美洲大蠊油脂對3種癌細(xì)胞增值抑制率
[0046]

【權(quán)利要求】
1. 美洲大蠊油脂在制備抗腫瘤的藥物中的用途。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于：所述的抗腫瘤藥物為抗乳腺癌、直腸癌或 肝癌的藥物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊油脂中含有12%? 18% w/w十八碳烯酸、8%?12% w/w十八碳二烯酸、10%?13% w/w十六燒酸。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1?3任意一項所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊油脂由如下 方法制備： 方法（1):取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用乙醇提取，合并提取液，減壓濃縮，濃縮液再 采用有機(jī)溶劑萃取，取萃取液，回收溶劑，即得美洲大蠊油脂； 方法（2):取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用0)2超臨界流體萃取，收集油脂，即得； 方法（3):取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用蒸汽熔煉法提取美洲大蠊油脂，即得。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于：方法（1)中，乙醇濃度為70%?90% v/ V，有機(jī)溶劑為正己烷、石油醚、丙酮等中的任一種或兩種以上的組合。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于：所述藥物為注射液，它含有美洲大蠊油 月旨、滲透壓調(diào)節(jié)劑、助溶劑；或者，所述藥物為軟膠囊，它含有美洲大蠊油脂和植物油。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于：所述滲透壓調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、葡萄糖或 甘露醇；所述助溶劑選自吐溫、司盤或丙二醇。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的注射液，其特征在于每1000ml注射液中含有0. 8?3g 美洲大蠊油脂，5g氯化鈉，3?7g聚山梨酯-80,余量為注射用水。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于：所述植物油為大豆油。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于：所述軟膠囊劑內(nèi)容物包含0. 8?3重量 份美洲大蠊油脂，500?700重量份的大豆油。
【文檔編號】A61K9/08GK104415057SQ201410401925
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2014年8月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月22日
【發(fā)明者】蘇柘僮, 熊永愛, 鄒俊波 申請人:成都百草和濟(jì)科技有限公司