專利名稱：存活蛋白肽疫苗的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療性疫苗，其包含一種或多種存活蛋白多肽片段。疫苗可用于諸如癌癥性疾病的預(yù)防性、改善性和/或治療性治療。本發(fā)明進(jìn)一步涉及組合治療的方法。
背景技術(shù)：
哺乳動(dòng)物免疫系統(tǒng)識(shí)別并與外來或異源材料反應(yīng)。該系統(tǒng)的一個(gè)重要方面是T細(xì)胞應(yīng)答。該應(yīng)答需要T細(xì)胞識(shí)別并與細(xì)胞表面分子的復(fù)合物(被稱為構(gòu)成人主要組織相容性復(fù)合物(MHC)的人白細(xì)胞抗原(HLA))和肽相互作用。該肽源自較大的分子，其由細(xì)胞加工，所述細(xì)胞也提呈HLA/MHC分子。T細(xì)胞和HLA/肽復(fù)合物的相互作用是受限制的，其需要T細(xì)胞特異針對(duì)HLA分子和肽的特定組合。如果不存在特異性T細(xì)胞，則即使存在其配偶復(fù)合物也沒有T細(xì)胞應(yīng)答。相似地，如果特異性復(fù)合物不存在而T細(xì)胞存在，則也沒有應(yīng)答。已經(jīng)很成熟的有，源自人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)的肽表位可通過MHC分子而被細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)識(shí)別，而且大多數(shù)(如果不是全部的話)腫瘤表達(dá)該抗原。因此，在例如免疫接種和過繼T細(xì)胞治療的策略中，激動(dòng)人心的臨床努力將靶向于這些TAA，以在患者中產(chǎn)生有效的抗腫瘤CTL應(yīng)答?？墒强乖瓎适宰?體的免疫選擇對(duì)于大多數(shù)已知CTL表位在臨床腫瘤學(xué)中的治療潛力來說是嚴(yán)重的障礙，而且在靶向于不參與癌生長的抗原時(shí)，抗原缺陷性突變腫瘤的選擇是治療策略中公認(rèn)的局限性。原因是大多數(shù)被表征的肽源自對(duì)于腫瘤細(xì)胞的存活并不必要的多肽，所述多肽。因此，如果通過治療性手段(如免疫接種)誘導(dǎo)出針對(duì)這些肽抗原的強(qiáng)有力的CTL應(yīng)答，則缺少靶抗原表達(dá)的腫瘤細(xì)胞非?？赡芴颖芩a(chǎn)生的免疫應(yīng)答。需要癌癥性疾病的更有效的治療性疫苗和改良的治療方法。癌癥中也已經(jīng)暗示存在有通過T細(xì)胞識(shí)別細(xì)胞異常的機(jī)制。在W092/20356中，公開了基因家族，所述基因家族能被加工成肽，所述肽隨之在細(xì)胞表面上表達(dá)，并且使得腫瘤細(xì)胞通過特異性CTL裂解。這些基因被稱為MAGE家族，而且其據(jù)說編碼“腫瘤排斥抗原前體”或“TRAP”分子，而且源自其的肽被稱為“腫瘤排斥抗原”或“TRA”?？墒?，盡管通常認(rèn)可大多數(shù)(如果不是全部的話)腫瘤具有抗原性，但是僅有一些真正有免疫原性，即免疫系統(tǒng)能容易地控制腫瘤進(jìn)程。為了克服這缺陷，開始了幾個(gè)免疫治療試驗(yàn)，其用TAA衍生的肽來免疫接種。對(duì)于黑素瘤(已經(jīng)表征出具有最大數(shù)量的CTL所確定的TAA的腫瘤)，免疫接種誘導(dǎo)出了強(qiáng)有力的針對(duì)抗原的CTL應(yīng)答，而且一些患者的疾病完全消退了?？墒牵迷谶@些免疫接種試驗(yàn)中的大多數(shù)肽表位具有黑素細(xì)胞特異性，并且這些肽不能應(yīng)用于非黑素細(xì)胞來源的腫瘤。此夕卜，這些TAA在不同患者的腫瘤中異源表達(dá)，甚至在同一個(gè)患者得到的腫瘤轉(zhuǎn)移中能有所不同。可是，在近幾年，已經(jīng)鑒定出許多腫瘤特異性肽抗原，其在許多不同的癌中表達(dá)，即HER-2、Muc-1和端粒酶。也有顯示，通過適當(dāng)處理，出現(xiàn)在腫瘤中的腫瘤抗原可暴露于免疫系統(tǒng)。研究表明，免疫應(yīng)答的CD8+CTL分支，單獨(dú)或與CD4+Th細(xì)胞聯(lián)合構(gòu)成了適應(yīng)性免疫應(yīng)答的初級(jí)抗腫瘤效應(yīng)器分支。直到現(xiàn)在，關(guān)注點(diǎn)主要在于免疫應(yīng)答的CTL分支上。可是，變得更清晰的是，CD4T細(xì)胞應(yīng)答在腫瘤排斥中起必要作用，尤其在體內(nèi)誘導(dǎo)期或CTL應(yīng)答的擴(kuò)展中。因此，將I類限制性腫瘤抗原組合進(jìn)有效的腫瘤免疫接種規(guī)程中可能增加疫苗的有效性。凋亡是細(xì)胞自殺的遺傳程序，而凋亡抑制被暗示是涉及癌形成的重要機(jī)制，其通過延長細(xì)胞壽命、有利于轉(zhuǎn)化突變的積累而進(jìn)行。存活蛋白(survivin)是近來鑒定出的凋亡蛋白質(zhì)抑制劑(IAP)家族的成員。在約4百萬個(gè)轉(zhuǎn)錄子的綜合性基因表達(dá)分析中，存活蛋白被鑒定為頭等基因之一，其在許多種癌癥中始終被上調(diào)，而在正常組織中沒有被上調(diào)。過量表達(dá)存活蛋白的實(shí)體惡性腫瘤包括肺、結(jié)腸、乳腺、胰腺、和前列腺癌以及惡性造血組織腫瘤。另外有報(bào)道，一系列黑素瘤和非黑素瘤皮膚癌總是呈存活蛋白陽性的。在大多數(shù)人癌癥中過量表達(dá)存活蛋白，暗示了腫瘤進(jìn)程中凋亡抑制所起的一般性作用，這一觀點(diǎn)得到下列觀察結(jié)果的證實(shí)，即:對(duì)于結(jié)直腸和膀胱癌、以及成神經(jīng)細(xì)胞瘤，存活蛋白的表達(dá)與不利的預(yù)后結(jié)果相關(guān)聯(lián)。存活蛋白作為另一種凋亡抑制劑在腫瘤血管發(fā)生期間在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，而且在血管發(fā)生期間反義靶向存活蛋白造成了內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，該細(xì)胞凋亡在體外能促進(jìn)毛細(xì)管樣脈管迅速萎縮。相反地，在正常成人組織中不能檢測(cè)到存活蛋白。由于存活蛋白在大多數(shù)人癌癥中過量表達(dá)而且抑制其功能能導(dǎo)致增加凋亡，因此該蛋白質(zhì)可能是治療性CTL應(yīng)答的靶位。存活蛋白蛋白及其潛在的診斷和治療應(yīng)用在US6，245，523中有披露，其納入本文參考。存活蛋白是16.5kDa細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)，其包含替換RING指結(jié)構(gòu)的單BIR和多電荷的羧基末端卷曲區(qū)域，當(dāng)轉(zhuǎn)移入B細(xì)胞前體時(shí)，其抑制生長因子(IL-3)撤退所誘導(dǎo)的凋亡。編碼存活蛋白的基因幾乎與效應(yīng)器細(xì)胞蛋白酶受體-1 (EPR-1)的序列一致，但指向相反的方向，因而這暗示了存在2個(gè)分離的基因以頭對(duì)頭的構(gòu)型重復(fù)。因此，存活蛋白可被描述為反義EPR-1產(chǎn)物。由于2個(gè)基因的方向相反，因此蛋白質(zhì)的編碼氨基酸序列是不同的。在功能上，通過上調(diào)其天然反義EPR-1轉(zhuǎn)錄子來抑制存活蛋白表達(dá)會(huì)造成大量凋亡并降低細(xì)胞生長。US6，245，523公開了分離純化的存活蛋白，而且它提供了編碼存活蛋白蛋白的核酸分子、和結(jié)合存活蛋白的抗體和其他分子。US6，245，523還公開了存活蛋白蛋白的抗凋亡活性片段及其變體，其中有氨基酸殘基插在所公開的存活蛋白序列的N-或C-末端、或其內(nèi)部。明確公開的是，該肽應(yīng)包含凋亡所需的關(guān)鍵功能性殘基，即第67位的Trp、第73位的Pro和第84位的Cys。以前已經(jīng)公開了，如ELISP0T試驗(yàn)所測(cè)的，可利用負(fù)載有存活蛋白肽的樹突細(xì)胞進(jìn)行免疫接種來產(chǎn)生弱特異性T細(xì)胞應(yīng)答(W02004/067023和Otto，K.等，J.Vaccine (2004))。應(yīng)答為每IO4個(gè)細(xì)胞小于30，接下去的臨床結(jié)果評(píng)估顯示疾病進(jìn)展。所以該疫苗僅有非常有限的用途。因此有極大重要性的是，要開發(fā)出能誘導(dǎo)出非常強(qiáng)的特異性T細(xì)胞應(yīng)答、 尤其是能誘導(dǎo)出疾病進(jìn)程被抑制的臨床響應(yīng)的疫苗。發(fā)明簡(jiǎn)述
本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)，即源自存活蛋白蛋白的MHC I類限制性肽能結(jié)合MHC I類HLA分子，并由此離體和在原位都能在患有范圍廣的癌癥的患者中弓I發(fā)CTL免疫應(yīng)答。用于治療前，必須與臨床結(jié)果相組合分析免疫應(yīng)答，以評(píng)估疫苗組合物治療癌癥的有效性。免疫后的特異性T細(xì)胞應(yīng)答可以是針對(duì)用于疫苗中的潛在抗原的有用測(cè)試，優(yōu)選疫苗組合物能引發(fā)出非常強(qiáng)的T細(xì)胞應(yīng)答，如每IO4個(gè)PBMC有超過50個(gè)釋放INF- Y的細(xì)胞，因?yàn)檫@可以增加用于治療癌癥的疫苗組合物的成功率。本發(fā)明公開了特別有效的疫苗組合物，其能誘導(dǎo)出部分或完全的腫瘤消退。顯然這些發(fā)現(xiàn)打開了新的治療手段的通路，由于存活蛋白顯示出在腫瘤細(xì)胞中普遍表達(dá)，所述治療手段通?？捎糜诳刂瓢┌Y性疾病。本文所述的疫苗組合物或免疫原性組合物能作為藥物組合物，因?yàn)樵撾哪墚a(chǎn)生能抗瘤形成的CTL應(yīng)答。所以,所屬疫苗組合物能作為治療性疫苗或治療或藥物組合物。在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及用作藥物的疫苗組合物，其包含一種或多種存活蛋白肽或存活蛋白肽變體(其中肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一)和配制用于油包水乳劑的佐劑(其包含礦物油和表面活性劑，其中所述佐劑含至多14.5體積百分比的所述表面活性劑)。本發(fā)明的一個(gè)方面涉及至多有50個(gè)氨基酸殘基的存活蛋白肽變體，其能結(jié)合HLA-B7，其包含選自下組的肽:APPAWQPFL(SEQ ID NO:13)和 RPPAWQPFL (SEQ ID NO:14)。其他方面涉及疫苗組合物，其包含一種或多種存活蛋白肽或肽變體，其中所述肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一，而且其中組合物包含:1.HLA-B7結(jié)合肽和/或HLA-Al和HLA-A2限制性肽和/或HLA-Al 和 HLA-B 35 限制性肽i1.和佐劑?！獋€(gè)方面涉及疫苗組合物，其包含三種或更多種存活蛋白肽或存活蛋白肽變體，其中肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一，而且其中，1.至少一種肽或肽變體選自HLA-Al結(jié)合肽的組，而且其中i1.至少一種肽或肽變體選自HLA-A2結(jié)合肽的組，而且其中，ii1.至少一種肽或肽變體選自HLA-B35結(jié)合肽的組，和佐劑。本發(fā)明的另一方面涉及疫苗組合物，其包含七種或更多種存活蛋白肽或存活蛋白肽變體，其中所述肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一，1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-Al結(jié)合肽的組，i1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A2結(jié)合肽的組，ill.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A3結(jié)合肽的組iv.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A24結(jié)合肽的組V.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-All結(jié)合肽的組v1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-B35結(jié)合肽的組
vi1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-B7結(jié)合肽的組和佐劑。實(shí)體腫瘤的發(fā)展依賴于血管形成。因此抑制血管發(fā)生可預(yù)防實(shí)體瘤的發(fā)展。腫瘤血管發(fā)生期間，在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)存活蛋白、bcl-2和Mcl-1，這暗示了利用本文所述的肽進(jìn)行免疫接種可具有抗血管形成的效應(yīng)。本發(fā)明的一個(gè)方面涉及用作藥物的疫苗，其包含一種或多種存活蛋白肽或肽變體(其中肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一)和佐齊U，其能在受試者腫瘤基質(zhì)中誘導(dǎo)出抗原特異性T細(xì)胞的浸潤。在另一方面，本發(fā)明涉及疫苗組合物，其包含:1.核酸，其編碼:a)存活蛋白多肽(SEQ ID NO:23)，b)存活蛋白肽或c)存活蛋白肽變體，其中肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一,和i1.佐劑。本發(fā)明的一個(gè)方面涉及包含一種或多種存活蛋白肽或存活蛋白肽變體和佐劑的疫苗組合物在制備藥物中的用途，所述疫苗組合物能在受試者中誘導(dǎo)出非常強(qiáng)的特異性細(xì)胞毒性T-細(xì)胞應(yīng)答。這是有重大意義的，因?yàn)榉浅?qiáng)的特異性T-細(xì)胞應(yīng)答可與較高的良好臨床響應(yīng)率相關(guān)。在這點(diǎn)上，非常強(qiáng)的`特異性T細(xì)胞應(yīng)答等于當(dāng)在施用疫苗組合物之前和之后通過ELISP0T試驗(yàn)測(cè)量時(shí)，每IO4個(gè)PBMC細(xì)胞有超過50個(gè)肽特異性點(diǎn)的應(yīng)答，本發(fā)明的一個(gè)方面涉及包含組件的試劑盒(kit in parts),其包括；1.疫苗組合物，其包含；a) 一種或多種存活蛋白肽或存活蛋白肽變體，其中肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一，b)和佐劑，和i1.第二藥物。本發(fā)明的一個(gè)方面描述了在受試者中刺激抗存活蛋白的強(qiáng)特異性T細(xì)胞應(yīng)答，所述方法包含:a)提供根據(jù)本發(fā)明所述的疫苗組合物，b)向受試者施用所述疫苗組合物，其中所述疫苗組合物可施用超過一次；和c)由此在受試者中刺激強(qiáng)特異性T細(xì)胞應(yīng)答，其中所述強(qiáng)特異性T細(xì)胞應(yīng)答是在施用疫苗組合物之前和之后通過ELISP0T試驗(yàn)所測(cè)得的每IO4個(gè)PBMC細(xì)胞有超過50個(gè)肽特異性點(diǎn)，d)在受試者中獲得強(qiáng)特異性T細(xì)胞應(yīng)答本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防疾病的方法，其包括；a)提供根據(jù)本發(fā)明所述的疫苗組合物，b)向受試者施用所述疫苗組合物，其中所述疫苗組合物可施用超過一次。在又一方面，本發(fā)明涉及治療或預(yù)防疾病的方法，其包括；
a)提供根據(jù)本發(fā)明所述的疫苗組合物，b)向受試者施用所述疫苗組合物，其中所述疫苗組合物可施用超過一次。c)由此在受試者中刺激強(qiáng)特異性T細(xì)胞應(yīng)答，其中所述強(qiáng)特異性T細(xì)胞應(yīng)答是在施用疫苗組合物之前和之后通過ELISP0T試驗(yàn)所測(cè)得的每IO4個(gè)PBMC細(xì)胞有超過50個(gè)肽特異性點(diǎn)，d)在受試者中獲得臨床響應(yīng)。在某些方面，本發(fā)明涉及在受試者腫瘤基質(zhì)中誘導(dǎo)抗原特異性T-細(xì)胞浸潤或在受試者中抑制血管發(fā)生的方法，其包括；

a)提供根據(jù)本發(fā)明所述的疫苗，b)向受試者施用所述疫苗組合物，c)在腫瘤基質(zhì)中達(dá)到抗原特異性T-細(xì)胞浸潤或抑制血管發(fā)生。組合治療方法，其包括同時(shí)、順序或以任意次序分開施用:a)根據(jù)本發(fā)明所述的疫苗組合物和，b)第二藥物。定義:AA:參見“氨基酸”。佐劑:疫苗佐劑是增強(qiáng)針對(duì)抗原的特異性免疫應(yīng)答的成分。氨基酸:實(shí)體，其包含由中央部分分隔的氨基末端部分(NH2)和羧基末端部分(COOH)，所述中央部分包含碳原子、或碳原子鏈，所述碳原子鏈包含至少一條側(cè)鏈或一個(gè)功能團(tuán)。NH2指出現(xiàn)在氨基酸或肽的氨基末端的氨基，而COOH指出現(xiàn)在氨基酸或肽的羧基末端的羧基。通用術(shù)語氨基酸包括天然和非天然氨基酸。列于J.Biol.Chem.，243:3552-59(1969)中并為37C.F.R.第1.822(b) (2)節(jié)所采納的標(biāo)準(zhǔn)命名的天然氨基酸屬于本文下表I所列的氨基酸組中。非天然氨基酸是未列于表I中的那些。非天然氨基酸的例子是列于諸如37C.F.R.第1.822(b) (4)節(jié)中的那些，其全部納入本文參考。本文所述的氨基酸殘基可以是“D”或“L”異構(gòu)型的。
權(quán)利要求
1.疫苗組合物，其包含: а.三種或更多種由5至20個(gè)氨基酸殘基組成的不同存活蛋白肽或存活蛋白肽變體，所述肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一， 1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-Al結(jié)合肽的組， .而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A2結(jié)合肽的組， ii1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-B35結(jié)合肽的組， 用作藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的疫苗組合物，其中所述組合物還包含配制用于油包水乳劑的佐劑，其包含礦物油和表面活性劑，其中佐劑包含至多14.5體積百分比的所述表面活性劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的疫苗組合物，其中所述表面活性劑是二縮甘露醇油酸酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述佐劑是Montanide ISA佐劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述HLA-Al限制性存活蛋白肽或肽變體具有選自SEQ ID N015,16，17或18的序列。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的疫苗組合物，其中HLA-Al結(jié)合肽是FTELTLGEF(SEQ ID NO:16)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述HLA-A2限制性存活蛋白肽或肽變體具有選自SEQ ID N01，2，3，4或5的序列。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的疫苗組合物，其中HLA-A2結(jié)合肽是LMLGEFLKL(SEQID NO:5)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述HLA-B35限制性存活蛋白肽或肽變體具有選自SEQ ID N06，7，8和9的序列。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的疫苗組合物，其中HLA-B35結(jié)合肽是EPDLAQCFY(SEQID NO:9)。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述組合物含有肽FTELTLGEF (SEQ ID NO:16), LMLGEFLKL (SEQ ID NO:5)和 EPDLAQCFY (SEQ ID NO:9)。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其含有 a)七種或更多種由5至20個(gè)氨基酸殘基組成的存活蛋白肽或存活蛋白肽變體，其中所述肽變體的序列在整個(gè)長度上與SEQ ID NO:23的連續(xù)氨基酸序列至少85%同一，1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-Al結(jié)合肽的組， .而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A2結(jié)合肽的組， ii1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A3結(jié)合肽的組， iv.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-A24結(jié)合肽的組， V.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-All結(jié)合肽的組， v1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-B35結(jié)合肽的組， vi1.而且其中至少一種肽或肽變體選自HLA-B7結(jié)合肽的組， 用作藥物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的疫苗組合物，其中所述HLA-All結(jié)合肽選自DLAQCFFCFK(SEQ ID NO:19),DVAQCFFCFK(SEQ ID NO:45)、DFAQCFFCFK(SEQ ID NO:46)或DIAQCFFCFK(SEQ ID NO:47)。
14.根據(jù)權(quán)利要求12至13任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述HLA-A24結(jié)合肽選自STFKNWPFL(SEQ ID NO:41)或 SYFKNWPFL(SEQID NO:48)。
15.根據(jù)權(quán)利要求12至14任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述HLA-B7結(jié)合肽選自 LPPAWQPFL(SEQ ID NO:10), QPFLKDHRI(SEQ ID NO:11), CPTENEPDL(SEQ ID NO:6),TPERMAEAGF(SEQ ID NO:12), APPAffQPFL(SEQ ID NO:13), RPPAffQPFL(SEQ ID NO: 14)，RAIEQLAAM(SEQ ID NO:44), TAKKVRRAI(SEQ ID NO:49), RPIEQLAAM(SEQ ID NO:50)或TPKKVRRAI(SEQ ID NO:51)。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的疫苗組合物，其中所述HLA-B7結(jié)合肽選自LPPAWQPFL(SEQID NO: 10),QPFLKDHRI(SEQ ID NO: 11),CPTENEPDL(SEQ ID NO: 6),TPERMAEAGF(SEQ ID NO:12), APPAffQPFL(SEQ ID NO:13)或 RPPAWQPFL(SEQ ID NO:14)。
17.根據(jù)權(quán)利要求12至16任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中 b.所述HLA-Al 結(jié)合肽是 FTELTLGEF (SEQ ID NO: 16)，c.所述HLA-A2 結(jié)合肽是 LMLGEFLKL (SEQ ID NO:5), d.所述HLA-A3 結(jié)合肽是 RISTFKNWPK(SEQ ID NO:20)， e.所述HLA-A24 結(jié)合肽是 STFKNWPFL (SEQ ID NO:41)，f.所述HLA-Al I 結(jié)合肽是 DLAQCFFCFK (SEQ ID NO:19)， g.所述HLA-B35 結(jié)合肽是 EPDLAQCFY (SEQ ID NO:9)，而且 h.所述HLA-B7 結(jié)合肽是 LPPAWQPFL (SEQ ID NO:10)。
18.根據(jù)權(quán)利要求12至17任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，還含有 1.選自HLA-B44結(jié)合肽的組的至少一種肽或肽變體，和/或， .選自HLA-B27結(jié)合肽的組的至少一種肽或肽變體，和/或， ii1.選自HLA-B51結(jié)合肽的組的至少一種肽或肽變體。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的疫苗組合物，其中所述HLA-B27結(jié)合肽選自ERMAEAGFI(SEQID NO:43),ERAKNKIAK(SEQ ID NO:52),DRERAKNKI(SEQ ID NO:53)，KEFEETAKK(SEQ ID NO:54), ERMAEAGFL (SEQ ID NO:55), ERMAEAGFF (SEQ ID NO:56), ERMAEAGFR(SEQ ID NO:57)，ERMAEAGFK (SEQ ID NO:58)或 KRFEETAKK (SEQ ID NO:59)。
20.根據(jù)權(quán)利要求18至19任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述HLA-B44結(jié)合肽選自KETNNKKKEY(SEQ ID NO:42), KETNNKKKEF(SEQID NO:60), EELTLGEFL(SEQ ID NO:61)，或EELTLGEFY(SEQ ID NO:62)。
21.根據(jù)權(quán)利要求18所述的疫苗組合物，其中 1.所述 HLA-B44 結(jié)合肽是 KETNNKKKEY (SEQ ID NO:42), j.所述 HLA-B27 結(jié)合肽是 ERMAEAGFI (SEQ ID NO:43)，而且 k.所述 HLA-B51 結(jié)合肽是 RAIEQLAAM(SEQ ID NO:44)。
22.根據(jù)權(quán)利要求12至21任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其中所述組合物未進(jìn)一步含有一種或多種Bcl-2肽。
23.根據(jù)權(quán)利要求12至22任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，所述組合物未進(jìn)一步含有一種或多種Be 1-2衍生妝。
24.根據(jù)權(quán)利要求1至23任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其含有至少一種另外的不屬于或不來源于存活蛋白肽的免疫原性蛋白或肽片段。
25.根據(jù)權(quán)利要求1至24任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其進(jìn)一步包含一種或多種選自以下組的肽或肽變體:ML-1AP，BCL-2，BCL-X，MCL-1或TRAG-3肽或其能結(jié)合HLAl類分子的肽變體。
26.根據(jù)權(quán)利要求1至25任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其進(jìn)一步包含一種或多種選自以下組的肽或肽變體:ML-1AP，BCL-X, MCL-1或TRAG-3肽或其能結(jié)合HLAl類分子的肽變體。
27.根據(jù)權(quán)利要求1至26任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，其含有選自下組的第二活性成 分: 1)抗癌藥物 2)化學(xué)治療劑，和 3)血管發(fā)生抑制劑。
28.權(quán)利要求1至27任一項(xiàng)的疫苗組合物，是用于癌癥治療方法中的疫苗組合物。
29.權(quán)利要求1至27任一項(xiàng)的疫苗組合物，是用于血管發(fā)生抑制方法中的疫苗組合物。
30.包含組件的試劑盒，其包括: · 1.根據(jù)權(quán)利要求1至29任一項(xiàng)所述的疫苗組合物，和 · .第二藥物，其中所述第二藥物是化學(xué)治療劑或血管發(fā)生抑制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療性疫苗，其包含一種或多種存活蛋白多肽片段。該疫苗可用于諸如癌癥性疾病的預(yù)防性、改善性和/或治愈性治療。本發(fā)明進(jìn)一步涉及組合治療的方法。
文檔編號(hào)A61K39/00GK103169958SQ20131005323
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2006年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月4日
發(fā)明者馬茲.H.安德森 申請(qǐng)人:薩瓦克公司