專利名稱：一種從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，特別涉及一種采用堿水提取 黃酮和乙醇提取生物堿的工藝。
背景技術(shù)：
我國(guó)是世界上種桑養(yǎng)蠶最早的國(guó)家，也是中華民族對(duì)人類文明的偉大貢獻(xiàn)之一。 桑樹的栽培已有七千多年的歷史。栽培范圍廣泛，東北自哈爾濱以南；西北從內(nèi)蒙古南部至 新疆、青海；南至兩廣，東至臺(tái)灣；西至四川、云南；長(zhǎng)江中下游各地栽培最多。桑葉為?？?Moraceae)桑屬植物桑(Morns dba L.)的葉，味苦、甘，性寒，歸肺、 肝經(jīng)，具有疏散風(fēng)熱、清肺潤(rùn)燥、平肝明目、涼血止血之功效?！侗静菥V目》記載桑葉乃手、足 陽(yáng)明之藥，治勞熱咳嗽，明目長(zhǎng)發(fā)，止消渴。桑葉含有含牛膝留酮、脫皮留酮、保留醇、蕓香甙、桑甙、異槲皮甙、傘形花內(nèi) 酯、東莨菪甙、葫蘆巴堿(trigonelline、膽堿等。桑葉中黃酮類成分含量豐富，含量約占干 葉重的1. 0% 3. 0%，是植物莖葉中黃酮類化合物含量較高的一種。黃酮類化合物因其生 理活性多種多樣，引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛重視，研究進(jìn)展很快。它具有良好的自由基、抗 氧化、抗衰老、降血脂、免疫調(diào)節(jié)、抗菌等生理活性，具有廣闊的應(yīng)用前景。桑葉生物堿具有 降血糖作用?，F(xiàn)有提取桑葉黃酮和生物堿多是乙醇提取或水煎煮，再經(jīng)大孔樹脂吸附、萃取或 離子柱。如專利200810236144 “一種聯(lián)產(chǎn)桑葉黃酮、多糖和生物堿”，公開的方法采用水加 熱浸提、大孔樹脂吸附。還有專利03101988“一種含有桑葉總堿浸膏的制劑其制備的方法” 公開的方法采用熱水溶解、離子交換樹脂純化。乙醇和熱水提取，同時(shí)溶出兩種成分，分離
純化較難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了克服以上述已有工藝缺陷和不足，發(fā)明人根據(jù)桑葉黃酮和生 物堿的性質(zhì)差異，反復(fù)試驗(yàn)，特提供一種從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法。本發(fā)明的目的是這樣來實(shí)現(xiàn)的一種從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于包括以下幾個(gè)步驟1)將桑葉粉碎，用6-10倍量ph9_12堿水30_50°C動(dòng)態(tài)提取1_3小時(shí)，提取2_3次， 合并水提取液，藥渣再加入4-6倍量85-95%乙醇和活性炭回流提取2-3次，合并醇提液；2)將步驟1)水提取液調(diào)ph5_7加入大孔樹脂柱吸附，水_醇洗脫，收集桑葉黃酮 流分，加入活性炭回流脫色后，減壓濃縮phl-3靜置結(jié)晶；3)濾出粗結(jié)晶物堿醇溶解調(diào)ph2-4結(jié)晶，濾出再用70-80%乙醇回流溶解結(jié)晶，濾 出結(jié)晶物干燥即得桑葉總黃酮；4)將步驟1)醇提液調(diào)至中性，回收乙醇至膏狀，加丙酮溶解濾過，加入氧化鋁短 粗柱，收集下柱液回收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出結(jié)晶再用85-90%乙醇回流溶解結(jié)晶，干燥即得桑葉生物總堿。步驟1)中的堿可選氫氧化鈉或氫氧化鈣。優(yōu)選氫氧化鈣。步驟2)、3)、4)中的調(diào)ph的可選鹽酸、硫酸或磷酸的一種。步驟2)中大孔樹脂可選D101或SPD100，水-醇洗脫為水洗中性再5-6BV50-70% 乙醇洗脫桑葉黃酮。步驟1)、2)中活性炭為針劑類醫(yī)藥活性炭，加入量液體的1_3%，脫色時(shí)間為1-2 小時(shí)。步驟3)中的堿醇為Ph9-12的90-95 %乙醇?xì)溲趸c溶液。步驟4)中的氧化鋁為120-200目中性氧化鋁。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)堿水低溫提取，黃酮易溶出而生物堿無溶出；堿 化后再提取生物堿，雜質(zhì)少；酸堿處理黃酮含量高、操作簡(jiǎn)單；氧化鋁短柱處理生物堿周期短。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 取1kg干燥桑葉，粉碎，加入lOLphlO的氫氧化鈣溶液，加熱至50°C動(dòng)態(tài)提取2 小時(shí)，提取兩次，合并提取液濾過鹽酸調(diào)ph至5加入500mlD101樹脂柱吸附，水洗中性， 3L65%乙醇洗脫桑葉黃酮，收集流分加入25g針劑類醫(yī)用活性炭回流脫色，鹽酸調(diào)節(jié)ph至1 靜置結(jié)晶，濾出再用PM的85%乙醇?xì)溲趸c溶液溶解濾過調(diào)ph至3結(jié)晶，濾出再用75% 乙醇回流溶解結(jié)晶，濾出干燥得桑葉黃酮21g，含量91 %。上述桑葉殘?jiān)尤?L90%乙醇和60g活性炭回流提取2小時(shí)，提取2次，合并濾液 鹽酸調(diào)至中性回收乙醇，膏狀物加入丙酮溶解，濾過加入中性氧化鋁短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出粗結(jié)晶再用90%乙醇回流溶解結(jié)晶，過濾結(jié)晶物干燥得桑葉生 物堿90%。實(shí)施例2 取1kg干燥桑葉，粉碎，加入6Lphl2的氫氧化鈣溶液，加熱至30°C動(dòng)態(tài)提取3 小時(shí)，提取3次，合并提取液濾過鹽酸調(diào)ph至7加入500mlD101樹脂柱吸附，水洗中性， 2. 5L70%乙醇洗脫桑葉黃酮，收集流分加入50g針劑類醫(yī)用活性炭回流脫色，鹽酸調(diào)節(jié)ph 至3靜置結(jié)晶，濾出再用phlO的90%乙醇?xì)溲趸c溶液溶解濾過調(diào)ph至2結(jié)晶，濾出再用 80%乙醇回流溶解結(jié)晶，濾出干燥得桑葉黃酮24g，含量90%。上述桑葉殘?jiān)尤?L85%乙醇和80g活性炭回流提取1小時(shí)，提取3次，合并濾液 鹽酸調(diào)至中性回收乙醇，膏狀物加入丙酮溶解，濾過加入中性氧化鋁短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出粗結(jié)晶再用85%乙醇回流溶解結(jié)晶，過濾結(jié)晶物干燥得桑葉生 物堿90%。實(shí)施例3 取1kg干燥桑葉，粉碎，加入lOLphlO的氫氧化鈉溶液，加熱至40°C動(dòng)態(tài)提取2小 時(shí)，提取兩次，合并提取液濾過鹽酸調(diào)ph至6加入500mlSPD100樹脂柱吸附，水洗中性，3L50 %乙醇洗脫桑葉黃酮，收集流分加入60g針劑類醫(yī)用活性炭回流脫色，鹽酸調(diào)節(jié)ph至2 靜置結(jié)晶，濾出再用Phl2的95%乙醇?xì)溲趸c溶液溶解濾過調(diào)ph至3結(jié)晶，濾出再用75% 乙醇回流溶解結(jié)晶，濾出干燥得桑葉黃酮22g，含量90%。上述桑葉殘?jiān)尤?L95%乙醇和50g活性炭回流提取2小時(shí)，提取2次，合并濾液 硫酸調(diào)至中性回收乙醇，膏狀物加入丙酮溶解，濾過加入中性氧化鋁短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出粗結(jié)晶再用90%乙醇回流溶解結(jié)晶，過濾結(jié)晶物干燥得桑葉生 物堿90%。實(shí)施例4 取5kg干燥桑葉，粉碎，加入50Lphl0的氫氧化鈣溶液，加熱至30°C動(dòng)態(tài)提取2 小時(shí)，提取兩次，合并提取液濾過硫酸調(diào)Ph至5加入2. 5LD101樹脂柱吸附，水洗中性， 15L60%乙醇洗脫桑葉黃酮，收集流分加入300g針劑類醫(yī)用活性炭回流脫色，硫酸調(diào)節(jié)ph 至1靜置結(jié)晶，濾出再用phlO的90%乙醇?xì)溲趸c溶液溶解濾過調(diào)ph至2結(jié)晶，濾出再用 75%乙醇回流溶解結(jié)晶，濾出干燥得桑葉黃酮120g，含量90%。上述桑葉殘?jiān)尤?5L90%乙醇和500g活性炭回流提取2小時(shí)，提取2次，合并濾 液鹽酸調(diào)至中性回收乙醇，膏狀物加入丙酮溶解，濾過加入中性氧化鋁短粗柱，收集下柱液 回收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出粗結(jié)晶再用90%乙醇回流溶解結(jié)晶，過濾結(jié)晶物干燥得桑葉 生物堿90%。實(shí)施例5 取10kg干燥桑葉，粉碎，加入lOOLphlO的氫氧化鈣溶液，加熱至40°C動(dòng)態(tài)提取 2小時(shí)，提取2次，合并提取液濾過鹽酸調(diào)ph至5加入5LSPD100樹脂柱吸附，水洗中性， 25L65%乙醇洗脫桑葉黃酮，收集流分加入500g針劑類醫(yī)用活性炭回流脫色，鹽酸調(diào)節(jié)ph 至2靜置結(jié)晶，濾出再用ph9的85%乙醇?xì)溲趸c溶液溶解濾過調(diào)ph至2結(jié)晶，濾出再用 75%乙醇回流溶解結(jié)晶，濾出干燥得桑葉黃酮215g，含量91 %。上述桑葉殘?jiān)尤?0L90%乙醇和500g活性炭回流提取2小時(shí)，提取2次，合并濾 液鹽酸調(diào)至中性回收乙醇，膏狀物加入丙酮溶解，濾過加入中性氧化鋁短粗柱，收集下柱液 回收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出粗結(jié)晶再用85%乙醇回流溶解結(jié)晶，過濾結(jié)晶物干燥得桑葉 生物堿90%。
權(quán)利要求
一種從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于包括以下幾個(gè)步驟1)將桑葉粉碎，用6-10倍量ph9-12堿水30-50℃動(dòng)態(tài)提取1-3小時(shí)，提取2-3次，合并水提取液，藥渣再加入4-6倍量85-95％乙醇和活性炭回流提取2-3次，合并醇提液；2)將步驟1)水提取液調(diào)ph5-7加入大孔樹脂柱吸附，水—醇洗脫，收集桑葉黃酮流分，加入活性炭回流脫色后，減壓濃縮ph1-3靜置結(jié)晶；3)濾出粗結(jié)晶物堿醇溶解調(diào)ph2-4結(jié)晶，濾出再用70-80％乙醇回流溶解結(jié)晶，濾出結(jié)晶物干燥即得桑葉總黃酮；4)將步驟1)醇提液調(diào)至中性，回收乙醇至膏狀，加丙酮溶解濾過，加入氧化鋁短粗柱，收集下柱液回收丙酮，加入氨水結(jié)晶，濾出結(jié)晶再用85-90％乙醇回流溶解結(jié)晶，干燥即得桑葉生物總堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于步驟1)中的堿 可選氫氧化鈉或氫氧化鈣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于步驟2)、3)、4) 中的調(diào)Ph的可選鹽酸、硫酸或磷酸的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于步驟2)中大孔 樹脂可選DlOl或SPD100，水一醇洗脫為水洗中性再5-6BV50-70%乙醇洗脫桑葉黃酮。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于步驟1)、2)中活 性炭為針劑類醫(yī)藥活性炭，加入量液體的1_3%，脫色時(shí)間為1-2小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于步驟3)中的堿 醇為ph9-12的90-95%乙醇?xì)溲趸c溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法，其特征在于步驟4)中的氧 化鋁為120-200目中性氧化鋁。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從桑葉中制備黃酮、生物堿的方法。工藝步驟包括堿水加熱提取黃酮，90-95％乙醇和活性炭再提取生物堿，黃酮提取液調(diào)酸過大孔樹脂柱，酸化結(jié)晶和70-80％乙醇溶解重結(jié)晶，生物堿提取液濃縮，丙酮再溶解，過氧化鋁短粗柱，氨化結(jié)晶和85-90％乙醇溶解重結(jié)晶。采用本發(fā)明生產(chǎn)桑葉黃酮、生物堿，工藝簡(jiǎn)單易工業(yè)化、原料利用率高，所得產(chǎn)品純度高、符合食品醫(yī)藥要求。
文檔編號(hào)A61P3/06GK101862371SQ20101013026
公開日2010年10月20日 申請(qǐng)日期2010年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月23日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司