專利名稱：一種從荷葉中同步提取黃酮和生物堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及農(nóng)副產(chǎn)品深加工領(lǐng)域，特別是一種從荷葉中同步提取黃酮和生物 堿的方法。
背景技術(shù)：
荷葉為天然藥食兩用成分，荷葉中含有豐富的黃酮和生物堿等生物活性因子， 其"三降"和減肥等功效近年來倍受關(guān)注。
目前，研究提取荷葉中的黃酮和生物堿的文獻(xiàn)報(bào)道較多。如專利文獻(xiàn)
ZL02139048. 7、 CN 200610141952.0、 CN 200610085626. 2都公開了荷葉黃酮的 提取方法；CN 200610069039.4、 CN 200710009464. 9雖然公開了同時提取分離 荷葉黃酮和生物堿方法，但其缺點(diǎn)在丁-產(chǎn)品雜質(zhì)含量高、純度低，沒能達(dá)到國 家二類新藥對提取物純度的要求。非專利文獻(xiàn)如"荷葉黃酮及生物堿的提取研 究"(陳海光等，《食品科學(xué)》，2002， 23 (1): 69-72)報(bào)道了水提法工藝;"HP-20 樹脂分離與純化荷葉黃酮的技術(shù)研究"(肖文軍等，《天然產(chǎn)物研究與開發(fā)》， 2007， 19 (4): 692-695)報(bào)道了大孔樹脂純化荷葉黃酮；"荷葉總生物堿的提 取與純化研究"(李宇亮等，《應(yīng)用化工》，2007， 36 (1): 4-6)報(bào)道了90%乙醇 提取，大孔樹脂純化荷葉總生物堿。至今為止，荷葉中黃酮和生物堿的提取還 沒有工業(yè)化生產(chǎn)，其技術(shù)仍處于研究探索階段。
現(xiàn)有關(guān)于荷葉黃酮和生物堿提取的技術(shù)方案，其缺陷在于提取液上柱前未進(jìn) 行脫脂去雜，更未去除大分子雜質(zhì)，上柱后對樹脂污染很大，產(chǎn)品得率低，純 度不高，難T大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從荷葉中同步提取黃酮和生物堿的方法，該方 法不僅可以運(yùn)用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)，而且制備的產(chǎn)品純度高，滿足國家二類新 藥原料提取物的要求。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是 一種從荷葉中同歩提取黃酮和生物堿的方 法，其特征在于:包括以下步驟，
1.1. 將新鮮荷葉清洗、風(fēng)干，粉碎，過20目，得荷葉粉末；
1.2. 將荷葉粉末與50% 70%、 pH為2 3的乙醇溶液，按質(zhì)量比1: 15 20 混合置入提取釜中，升溫到60 7(TC提取2 3次，每次1 2小時，合并提取 液；
1.3. 減壓濃縮提取液至乙醇量的1/10 1/15，得濃縮提取液，再過濾除去沉 淀物；
1.4. 加入石油醚，攪拌萃取，靜置30分鐘 1小時，除去脂溶性雜質(zhì)，得萃 余液；
1.5. 用0. lmol/LNaOH溶液調(diào)萃余液pH值為8 11，靜置，過濾除去堿不溶 性雜質(zhì)，用0. lmol/L醋酸溶液調(diào)pH值至中性，加入萃余液10 15倍的蒸餾水 稀釋后，在溫度為25t:壓力為0.15Mpa的環(huán)境下用5040PP聚丙烯超濾膜過濾， 除去水溶性大分子雜質(zhì)，直至料液剩10% 20%，加蒸餾水透析2 3次，得超 濾濃縮液；
1. 6.將超濾濃縮液加入裝有苯乙烯系凝膠強(qiáng)酸陽離子交換樹脂的上端，直至 生物堿吸附飽和，用2 3倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離子交換的殘 余料液以及2 3倍樹脂量(V/V) 30%乙醇溶液洗滌吸附力較生物堿弱的雜質(zhì);
1. 7.用8 10倍樹脂量(V/V) pH值為6 6. 5濃度為55 60%乙醇酸溶液洗 脫生物堿，減壓回收乙醇，冷卻生物堿洗脫液至開始析出生物堿晶體，在6 8 。C下靜置養(yǎng)晶，過濾，得生物堿粗品，再用5 6倍量的乙醚于70 8(TC條件下 萃取2 3次，每次萃取時間為40分鐘 1小時，合并萃取液，回收乙醚后， 析出生物堿晶體；
1. 8.將步驟1. 6中未被陽離子交換樹脂吸附的殘余料液，用層析聚酰胺樹脂 吸附荷葉黃酮至飽和，再用3 4倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離子交換 的殘余料液和洗滌吸附力較荷葉黃酮弱的雜質(zhì)；
1.9.用8 10倍樹脂量(V/V) 30 40%乙醇溶液洗脫荷葉黃酮，減壓濃縮至 黃酮洗脫液一半后，再用等量的、水飽和的乙酸乙酯萃取1 2次，減壓濃縮至 膏狀物，冷凍干燥、粉碎得荷葉黃酮粉末。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于l.用一歩法同時提取黃酮和生物堿，工藝簡便，易于操 作和大規(guī)模生產(chǎn)。2.采取去雜和后處理工藝，提高了荷葉黃酮和生物堿產(chǎn)品的 純度與品質(zhì)，滿足國家二類新藥原料提取物的要求。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明涉及農(nóng)副產(chǎn)品深加工領(lǐng)域，特別是一種從荷葉中同步提取黃酮和生物
堿的方法，其獨(dú)到之處在于:包括以下步驟，
l.l.將新鮮荷葉清洗、風(fēng)干，粉碎，過20目，得荷葉粉末；
1. 2.將荷葉粉末與50% 70%、 pH為2 3的乙醇溶液，按質(zhì)量比1: 15 20
混合置入提取釜中，升溫到60 7(TC提取2 3次，每次1 2小時，合并提取
液；
1.3.減壓濃縮提取液至乙醇量的1/10 1/15，得濃縮提取液，再過濾除去沉 淀物；
1.4.加入石油醚，攪拌萃取，靜置30分鐘 1小時，除去脂溶性雜質(zhì)，得萃 余液；
L5.用0. lmol/LNaOH溶液調(diào)萃余液pH值為8 11，靜置，過濾除去堿不溶 性雜質(zhì)，用0. lmol/L醋酸溶液調(diào)pH值至中性，加入萃余液10 15倍的蒸餾水 稀釋后，在溫度為25'C壓力為0. 15Mpa的環(huán)境下用5040PP聚丙烯超濾膜過濾， 除去水溶性大分子雜質(zhì)，直至料液剩10% 20%，加蒸餾水透析2 3次，得超 濾濃縮液；
1. 6.將超濾濃縮液加入裝有苯乙烯系凝膠強(qiáng)酸陽離子交換樹脂的上端，直至 生物堿吸附飽和，用2 3倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離子交換的殘 余料液以及2 3倍樹脂量(V/V) 30%乙醇溶液洗滌吸附力較生物堿弱的雜質(zhì)；
1. 7.用8 10倍樹脂量(V/V) pH值為6 6. 5濃度為55 60%乙醇酸溶液洗 脫生物堿，減壓回收乙醇，冷卻生物堿洗脫液至開始析出生物堿晶體，在6 8 。C下靜置養(yǎng)晶，過濾，得生物堿粗品，再用5 6倍量的乙醚于70 8CTC條件下 萃取2 3次，每次萃取時間為40分鐘 1小時，合并萃取液，回收乙醚后， 析出生物堿晶體；
1. 8.將步驟1. 6中未被陽離子交換樹脂吸附的殘余料液，用層析聚酰胺樹脂 吸附荷葉黃酮至飽和，再用3 4倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離子交換 的殘余料液和洗滌吸附力較荷葉黃酮弱的雜質(zhì)；
1.9.用8 10倍樹脂量(V/V) 30 40%乙醇溶液洗脫荷葉黃酮，減壓濃縮至 黃酮洗脫液一半后，再用等量的、水飽和的乙酸乙酯萃取1 2次，減壓濃縮至 膏狀物，冷凍干燥、粉碎得荷葉黃酮粉末。
實(shí)施例一
將新鮮荷葉清洗、風(fēng)干，粉碎，過20目，得荷葉粉末；然后將荷葉粉末與 50%、 pH為2的乙醇溶液，按質(zhì)量比h 15混合置入提取釜中，升溫到60'C提 取2次，每次1小時，合并提取液；減壓濃縮提取液至乙醇量的1/10，得濃縮 提取液，再過濾除去沉淀物；接著加入石油醚，攪拌萃取，靜置30分鐘，除去 脂溶性雜質(zhì)，得萃余液；用O. lmol/LNaOH溶液調(diào)萃余液pH值為8，靜置，過 濾除去堿不溶性雜質(zhì)，用0. lmol/L醋酸溶液調(diào)pH值至中性，加入萃余液10 倍的蒸餾水稀釋后，在溫度為25'C壓力為0. 15Mpa的環(huán)境下用5040PP聚丙烯 超濾膜過濾，除去水溶性大分子雜質(zhì)，直至料液剩10%，加蒸餾水透析2次， 得超濾濃縮液；再將超濾濃縮液加入裝有C004苯乙烯系凝膠強(qiáng)酸陽離子交換樹 脂的上端，直至生物堿吸附飽和，用2倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離 子交換的殘余料液以及2倍樹脂量(V/V) 30%乙醇溶液洗滌吸附力較生物堿弱 的雜質(zhì)；接下來用8倍樹脂量(V/V) pH值為6濃度為55%乙醇酸溶液洗脫生物 堿，減壓回收乙醇，冷卻生物堿洗脫液至開始析出生物堿晶體，在6'C下靜置 養(yǎng)晶，過濾，得生物堿粗品，再用5倍量的乙醚于7(TC條件下萃取2次，每次 萃取時間為40分鐘，合并萃取液，回收乙醚后，析出生物堿晶體，檢測生物堿 的純度約為93%，收率約為72%;將未被陽離子交換樹脂吸附的殘余料液，用層 析聚酰胺樹脂吸附荷葉黃酮至飽和，再用3倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā) 生離子交換的殘余料液和洗滌吸附力較荷葉黃酮弱的雜質(zhì)；最后用8倍樹脂量 (V/V) 30%乙醇溶液洗脫荷葉黃酮，減壓濃縮至黃酮洗脫液一半后，再用等量 的、水飽和的乙酸乙酯萃取l次，減壓濃縮至膏狀物，冷凍干燥、粉碎得荷葉 黃酮粉末,檢測荷葉黃酮的純度為89%,收率為68%。實(shí)施例二
將新鮮荷葉清洗、風(fēng)干，粉碎，過20目，得荷葉粉末；然后將荷葉粉末與
70%、 pH為3的乙醇溶液，按質(zhì)量比l: 15混合置入提取釜中，升溫到7(TC提 取3次，每次2小時，合并提取液；減壓濃縮提取液至乙醇量的1/15，得濃縮 提取液，再過濾除去沉淀物；接著加入石油醚，攪拌萃取，靜置1小時，除去 脂溶性雜質(zhì)，得萃余液；用O. lmol/L NaOH溶液調(diào)萃余液pH值為11 ，靜置， 過濾除去堿不溶性雜質(zhì)，用0. lmol/L醋酸溶液調(diào)pH值至中性，加入萃余液15 倍的蒸餾水稀釋后，在溫度為25'C壓力為0. 15Mpa的環(huán)境下用5040PP聚丙烯 超濾膜過濾，除去水溶性大分子雜質(zhì)，直至料液剩20%，加蒸餾水透析3次， 得超濾濃縮液;再將超濾濃縮液加入裝有C004苯乙烯系凝膠強(qiáng)酸陽離子交換樹 脂的上端，直至生物堿吸附飽和，用3倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離 子交換的殘余料液以及3倍樹脂量(V/V) 30%乙醇溶液洗滌吸附力較生物堿弱 的雜質(zhì)；接下來用10倍樹脂量(V/V) pH值為6. 5濃度為60%乙醇酸溶液洗脫 生物堿，減壓回收乙醇，冷卻生物堿洗脫液至開始析出生物堿晶體，在8匸下 靜置養(yǎng)晶，過濾，得生物堿粗品，再用6倍量的乙醚于8(TC條件下萃取3次， 每次萃取時間為l小時，合并萃取液，回收乙醚后，析出生物堿晶體，檢測生 物堿的純度約為92%,收率約為70%;;將未被陽離子交換樹脂吸附的殘余料液， 用層析聚酰胺樹脂吸附荷葉黃酮至飽和，再用4倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌 未發(fā)生離子交換的殘余料液和洗滌吸附力較荷葉黃酮弱的雜質(zhì);最后用10倍樹 脂量(V/V) 40%乙醇溶液洗脫荷葉黃酮，減壓濃縮至黃酮洗脫液一半后，再用 等量的、水飽和的乙酸乙酯萃取2次，減壓濃縮至膏狀物，冷凍干燥、粉碎得 荷葉黃酮粉末，檢測荷葉黃酮的純度為88%，收率為70%。
權(quán)利要求
1.一種從荷葉中同步提取黃酮和生物堿的方法，其特征在于包括以下步驟，1. 1.將新鮮荷葉清洗、風(fēng)干，粉碎，過20目，得荷葉粉末；1. 2.將荷葉粉末與50％～70％、pH為2～3的乙醇溶液，按質(zhì)量比115～20混合置入提取釜中，升溫到60～70℃提取2～3次，每次1～2小時，合并提取液；1. 3.減壓濃縮提取液至乙醇量的1/10～1/15，得濃縮提取液，再過濾除去沉淀物；1. 4.加入石油醚，攪拌萃取，靜置30分鐘～1小時，除去脂溶性雜質(zhì)，得萃余液；1. 5.用0.1mol/L NaOH溶液調(diào)萃余液pH值為8～11，靜置，過濾除去堿不溶性雜質(zhì)，用0.1mol/L醋酸溶液調(diào)pH值至中性，加入萃余液10～15倍的蒸餾水稀釋后，在溫度為25℃壓力為0.15Mpa的環(huán)境下用5040PP聚丙烯超濾膜過濾，除去水溶性大分子雜質(zhì)，直至料液剩10％～20％，加蒸餾水透析2～3次，得超濾濃縮液；1. 6.將超濾濃縮液加入裝有苯乙烯系凝膠強(qiáng)酸陽離子交換樹脂的上端，直至生物堿吸附飽和，用2～3倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離子交換的殘余料液以及2～3倍樹脂量(V/V)30％乙醇溶液洗滌吸附力較生物堿弱的雜質(zhì)；1. 7.用8～10倍樹脂量(V/V)pH值為6～6.5濃度為55～60％乙醇酸溶液洗脫生物堿，減壓回收乙醇，冷卻生物堿洗脫液至開始析出生物堿晶體，在6～8℃下靜置養(yǎng)晶，過濾，得生物堿粗品，再用5～6倍量的乙醚于70～80℃條件下萃取2～3次，每次萃取時間為40分鐘～1小時，合并萃取液，回收乙醚后，析出生物堿晶體；1. 8.將步驟1.6中未被陽離子交換樹脂吸附的殘余料液，用層析聚酰胺樹脂吸附荷葉黃酮至飽和，再用3～4倍樹脂量(V/V)的蒸餾水洗滌未發(fā)生離子交換的殘余料液和洗滌吸附力較荷葉黃酮弱的雜質(zhì)；1. 9.用8～10倍樹脂量(V/V)30～40％乙醇溶液洗脫荷葉黃酮，減壓濃縮至黃酮洗脫液一半后，再用等量的、水飽和的乙酸乙酯萃取1～2次，減壓濃縮至膏狀物，冷凍干燥、粉碎得荷葉黃酮粉末。
全文摘要
本發(fā)明涉及農(nóng)副產(chǎn)品深加工領(lǐng)域，特別是一種從荷葉中同步提取黃酮和生物堿的方法，其獨(dú)到之處在于以新鮮荷葉為原料，依次經(jīng)過荷葉預(yù)處理、酸性醇溶液提取、石油醚脫脂、超濾膜濃縮、凝膠強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂富集純化生物堿，層析聚酰胺樹脂吸附純化荷葉黃酮等環(huán)節(jié)，采用一步法同時獲得生物堿和黃酮兩種產(chǎn)品。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于該方法不僅可以運(yùn)用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)，而且制備的產(chǎn)品純度高，滿足國家二類新藥原料提取物的要求。
文檔編號A61P3/10GK101366829SQ200810197028
公開日2009年2月18日 申請日期2008年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月19日
發(fā)明者云 劉, 楊紅鴿 申請人:楊紅鴿