專利名稱：：褐參的制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥衛(wèi)生
技術領域：
，具體涉及獲得具有較高人參皂甙含量，較好藥理活性的褐參的制備方法。
背景技術：
：人參，是一種半遮陰型多年生五加科植物，作為一種名貴藥材，目前至少應用于350余種中成藥、500余種保健品當中。據(jù)不完全統(tǒng)計，世界上約有89個國家在使用人參，受惠人口超過10億?，F(xiàn)代科學證明人參具有滋補強壯、延緩衰老、抗腫瘤、抗輻射等功能，對心腦血管疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、消化系統(tǒng)有較好的調節(jié)作用，同時，人參制品還具有美容、護膚、養(yǎng)發(fā)等顯著功效。人參的主要活性成分被認為是人參皂甙，包括二醇型和三醇型兩種，對人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、新陳代謝系統(tǒng)等均表現(xiàn)出較強的調節(jié)效果。此外，人參當中還包括一系列人參多糖、抗氧化芳香族化合物、木脂素、酸性多肽等活性物質。在一般的人參加工工藝中，很多人參活性成分會在蒸熟和干燥的工序中出現(xiàn)受熱分解，或出現(xiàn)伴隨梅拉德反應產(chǎn)生黑色物質的現(xiàn)象。為了彌補這些工藝上的缺陷，各國研究人員開發(fā)了多種人參處理的方法。例如，美國芝加哥大學Wang等人采用高溫蒸汽的方式連續(xù)處理西洋參果實(10012(TC條件下1小時，12(TC條件0.5至4小時)，發(fā)現(xiàn)多種人參皂甙成分含量發(fā)生了變化，同時具有抗癌活性的Rg3顯著升高，提升了改人參制品在抗腫瘤方面的效果[JAgricFoodChem2006,54:9936-9942]。此外，韓國李仲元將新鮮人參經(jīng)九次蒸熟與九次熟成工序，制成黑參[CN101442913;W02007/133014]，Sun等人報道黑參中用19種人參皂甙單體標定經(jīng)過9蒸9曬制得的黑參中低糖皂甙Rg2、Rg3、Rh2及CK等顯著增加[JPharmBiomedAnal2009,50(1):15-22]。這些工藝雖然提高了人參制品中某些皂甙的含量，例如Rg3、Rg5、Rh2等等，然而由于相當一部分人參皂甙牢固結合于人參纖維、果膠、淀粉等多糖或其他成分上，反復蒸煮會破壞其結構，使總含量下降5080%以上，這無疑降低了人參的藥用價值。金鳳燮等采用淀粉酶、纖維素內(nèi)切酶、霉菌浸出液作為酶源，浸泡人參提取物后，再利用水、乙醇、或甲醇提取皂甙，提高了皂甙的總回收率[ZL96115151.幻。然而，由于這些內(nèi)切糖苷酶自身活性及選擇性的原因，該工藝局限于對人參提取物的處理，并沒有涉及以整只鮮人參、生曬參、紅參、人參莖葉、花或果實為原材料來直接處理的工藝過程，而此類初加工人參制品具有非常廣闊的市場空間和使用范圍。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種簡單、高效、低成本、將大批量天然人參產(chǎn)品轉化成為褐參的制備方法。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的褐參的制備方法按照下述工序來進行①原料清洗在不損傷人參外型，保留老皮條件下用水清洗，去除表面泥沙及其它附著物。如果過度洗滌人參，必將造成原材料出現(xiàn)局部脫落現(xiàn)象，導致有效成分的損失，影3響最終產(chǎn)品品質o②糖苷酶酶解將清洗后的人參浸沒于含有緩沖液pH3.010.0的培養(yǎng)鍋內(nèi)，以每千克原料0.1100個酶活單位的比例，加入13-D-葡萄糖苷酶反應，該pH值范圍內(nèi)可保持P-D-葡萄糖苷酶活性維持在較高的水平；由于糖苷酶酶解工序中使得大量皂苷從植物多糖成分中剝離出來，因此，減少了高溫蒸汽加工過程中對皂苷成分的破壞。③高壓蒸煮將酶解后獲得的人參制品置于高壓蒸汽容器內(nèi)，在11013(TC蒸熟。蒸熟過程中將原料以麻布包裹或利用絲線捆扎多處，維持其固定形態(tài)。高壓蒸汽工序的蒸熟時間根據(jù)加工量的不同及最終產(chǎn)品要求而定，時間過長會導致梅拉德反應副反應大量產(chǎn)生。成品烘干待人參制品晾透后，在40IO(TC條件下烘干136小時，至水分含量低于15%。過度干燥會導致人參發(fā)生碳化現(xiàn)象，水分含量超標會影響產(chǎn)品保鮮期及后續(xù)包裝步驟難度。根據(jù)溫度的高低不同，成品烘干工序所持續(xù)的時間不同。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的一優(yōu)選的技術方案是所述人參為鮮人參、生曬參或紅參。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的一優(yōu)選的技術方案是所述緩沖液為枸櫞酸_磷酸氫二鈉、醋酸_醋酸鈉、磷酸二氫鉀_磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉_磷酸氫二鈉或枸櫞酸鹽水溶液。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的一優(yōu)選的技術方案是所述緩沖液優(yōu)選pH4.09.0。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的-反應的溫度為2545°C。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的-反應的時間為O.53小時。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的-時。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的90°C。根據(jù)本發(fā)明褐參的制備方法的-時。經(jīng)高效液相色譜分析，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品中多種低糖基人參皂甙Rg2，Rg3，Rh2及CK等均有顯著升高，并且總人參皂苷回收率高于70%，比現(xiàn)有工藝有較大幅度的提升。該產(chǎn)品可以進行后續(xù)切片、制粉、萃取等工序加工成為其他高品質的人參制品。我們將通過本工藝獲得的產(chǎn)品與市售人參加工品進行比較，列表如下表褐參與韓國黑參、美國西洋參比較優(yōu)選的技術方案是所述糖苷酶酶解工序中孵育優(yōu)選的技術方案是所述糖苷酶酶解工序中孵育優(yōu)選的技術方案是所述蒸煮時間優(yōu)選14小-優(yōu)選的技術方案是所述烘干的溫度優(yōu)選35優(yōu)選的技術方案是所述烘干時間優(yōu)選336小產(chǎn)品名稱美國西洋參韓國黑參褐參原材料西洋參果鮮水參鮮人參、生曬參、紅參、人參莖葉、花及果實等產(chǎn)品顏色黑褐色黑色褐色深灰加工次數(shù)1次9次1次人參皂甙總量變化下降80%顯著下降(50%)下降30%人參皂甙單體變化Rg3為主增加Rg6,F4,Rk3,Rh4，Rg3(r,s，)Rs3(r,s)Rkl，Rg5,Rs4,PPD增加2Rg3(s,r)CK，Rh2,Rg2(Flower)Andothers本發(fā)明區(qū)別現(xiàn)有技術的有益效果是將鮮人參、生曬參、紅參、人參莖葉、花及果實等粗原料經(jīng)P-D-葡萄糖苷酶水解后，在合適的加熱溫度和時間條件下進行高溫蒸汽處理，和加熱烘干程序，從而獲得具有稀有皂苷含量高、總皂甙損失少、產(chǎn)品構型完整等優(yōu)點的人參制品，同時，該工藝簡單、效率高、成本低。下面結合附圖對本發(fā)明作進一步解釋說明。圖1十五種人參皂甙標準品高效液相色譜圖圖2鮮水參加工前后人參皂甙的變化色譜圖圖3生曬參加工前后人參皂甙的變化色譜圖圖4人參花加工前后人參皂甙的變化色譜圖圖5紅參加工前后人參皂甙的變化色譜圖具體實施方式實施例一以未經(jīng)加工的1千克鮮水參為原料，利用清水將粘附在其表皮上的雜質清洗干凈之后，將其浸沒于磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀配置的PH7.4的緩沖液內(nèi)。加入1個酶活單位的P-D-葡萄糖苷酶，在37t:恒溫孵育2小時后取出。將人參制品用麻布包裹后，放入蒸汽高壓鍋內(nèi)加熱到12(TC，維持4小時。出鍋涼透后，在55t:條件下，烘干18小時，得到褐參。將褐參樣品研磨成細粉過100目，細粉加入甲醇提取三次，每次浸泡812小時，每次加入甲醇與褐參粉末的比例分別為，i:io、i:5、i:5，采用已建立的分析方法(圖1)，利用高效液相色譜/紫外進行人參皂甙含量測定(圖2)。發(fā)現(xiàn)鮮水參中的人參皂甙Rbl、Rc、Rb2、Rd顯著減少，但抗癌活性高的Rg3含量有了明顯的提升。不同pH值的緩沖液對酶解效果的影響分別采用醋酸-醋酸鈉(pH4.0)，枸櫞酸-磷酸氫二鈉(pH5.0)，枸櫞酸-氫氧化5鈉_鹽酸(pH6.0)，磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀(pH8.0)，磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉(pH9.0)，來配置不同pH值的緩沖液，考察不同酸度條件下，P-D-葡萄糖苷酶。發(fā)現(xiàn)緩沖液pH值為6至8左右時，酶水解速度較快，一般0.5小時左右即可達到要求。然而，緩沖液pH值過低或過高會影響酶活力，使得反應時間延長。酶水解處理后的生曬參經(jīng)高溫蒸制和烘干后，經(jīng)高效液相色譜檢測發(fā)現(xiàn)(圖3)，人參皂甙Rgl，Re消失RblC，D，B2，D均減少，而Rg6，F(xiàn)4，Rk3，Rh4，Rgs(S-，R-)，CK禾PPPD顯著增加。實施例二采用實施例一所描述的步驟，對人參莖葉、花及果實進行原料清洗和糖苷酶酶解工序。在高壓蒸汽工序中，由于該類原材料比較細小，需要采用較高溫度和較短時間來進行蒸制，本實施例選擇溫度13(TC，時間1小時。然而，在烘干過程中，為了避免人參制品快速脫水導致的焦糊現(xiàn)象，采用較低溫度和較長時間來進行干燥，本實施例選擇溫度35°C，時間36小時，成品含水量低于15%。采用和實施例一相同的檢測手段對所獲得樣品進行檢測(表一)，其中人參花經(jīng)處理后的色譜圖(圖4)，發(fā)現(xiàn)處理后Re和Rgl無變化，Rg3，(R-S-)Rhl，Rg2，CK及Rh2顯著增加。表一人參莖葉、果實及花處理后單體皂甙變化*<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*注處理前單體皂甙相對含量設定為1。實施例三紅參是參的熟用品，其加工方法是經(jīng)過浸潤、清洗、分選、蒸制、晾曬、烘干等工序加工而成。紅參在蒸制過程中，因為熱處理會發(fā)生化學反應，成份上已經(jīng)發(fā)生變化。本發(fā)明所公開的工藝可以對該種人參產(chǎn)品進行深加工，從而獲得具有更高品質的人參制品。采用實施例一所描述的步驟，對紅參進行原料清洗和糖苷酶酶解工序。在高壓蒸汽工序中，由于該類原材料已經(jīng)經(jīng)過熟成，采用較低溫度和較短時間來進行蒸制，本實施例選擇溫度ll(TC，時間1小時。在烘干過程中，由于該種人參制品含水量較低，可以采用較高溫度和較短時間來進行干燥，本實施例選擇溫度9(TC，時間1小時，成品含水量即低于15%。高效液相色譜檢測表明(圖5)，紅參加工后變化基本同生曬參，說明本工藝的原材料適應性非常廣泛。由生曬參、紅參加工成褐參前后人參皂甙單體變化見表二。表二由生曬參、紅參加工成褐參前后人參皂甙單體<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注XT:HPLC分離時間。SP:標準品，白生曬白參。紅紅參HI:由白參生曬參制備的褐參，H2:由紅參制備的褐參表格中的數(shù)字為萬分之一。例如白參Rgl為13表示0.13%(g/100g)=1.3mg/g表中Hl(由白參制備的褐參)Rg3含量為27即0.27%(g/100g)=2.7mg/gH2(由紅參制備的褐參)Rg3含量為30即0.30%(g/100g)=3mg/g對比分析:A中國褐參中Rgl，Re均脫糖而轉化為Rg3，Rh2等稀有皂甙。因此"不上火"B褐參中Rg2，(心血管活性)Rg3，CK以及在HPLC分離到7276分鐘時候出現(xiàn)4個新峰，參考相關文獻，可能是Rg6;F4;Rk3;Rh4;C由白參及紅參加工后的褐參主要變化規(guī)律是在72分鐘以后的皂甙增加(Rg3rs;CK，Rh2及PPD，這些低分子區(qū)域皂甙具有顯著的生物活性。以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本
技術領域：
的技術人員在本發(fā)明披露的技術范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術方案及其發(fā)明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。權利要求一種褐參的制備方法，其特征在于，加工工藝為①原料清洗在不損傷人參外型，保留老皮條件下水洗干凈；②糖苷酶酶解人參浸沒于pH3.0～10.0的緩沖液內(nèi)，以每千克原料0.1～100個酶活單位的比例，加β-D-葡萄糖苷酶反應；③高壓蒸煮將酶解后獲得的人參制品置于高壓蒸汽容器內(nèi)，在110～130℃蒸熟；④成品烘干待人參制品晾透后，在40～100℃條件下烘干1～36小時，至水分含量低于15％。2.根據(jù)權利要求1所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述人參為鮮人參、生曬參或紅參。3.根據(jù)權利要求l所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述緩沖液為枸櫞酸-磷酸氫二鈉、醋酸_醋酸鈉、磷酸二氫鉀_磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉_磷酸氫二鈉或枸櫞酸鹽水溶液。4.根據(jù)權利要求1或3所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述緩沖液優(yōu)選pH4.09.0。5.根據(jù)權利要求1所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述糖苷酶酶解工序中孵育反應的溫度為2545°C。6.根據(jù)權利要求1或5所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述糖苷酶酶解工序中孵育反應的時間為O.53小時。7.根據(jù)權利要求1所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述蒸煮時間優(yōu)選14小時。8.根據(jù)權利要求1所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述烘干的溫度優(yōu)選3590°C。9.根據(jù)權利要求1或8所述的褐參的制備方法，其特征在于，所述烘干時間優(yōu)選336小時。全文摘要本發(fā)明公開了一種褐參的制備方法，將鮮人參、生曬參、紅參、人參莖葉、花及果實等粗原料經(jīng)β-D-葡萄糖苷酶水解后，在合適的加熱溫度和時間條件下進行高溫蒸汽處理，和加熱烘干程序，從而獲得人參制品。該制備方法生產(chǎn)的人參制品具有稀有皂苷含量高、總皂甙損失少、產(chǎn)品構型完整等優(yōu)點，同時，該方法工藝的簡單、效率高、成本低。文檔編號A61K36/258GK101780128SQ201010110099公開日2010年7月21日申請日期2010年2月9日優(yōu)先權日2010年2月9日發(fā)明者霍玉書,霍虹申請人:霍虹