專利名稱：作為gsk-3抑制劑的螺環(huán)狀氨基喹諾酮的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了治療GSK-3介導(dǎo)的疾病的化合物、組合物和方法。本發(fā)明提供的化 合物為作為GSK-3抑制劑的螺環(huán)狀氨基喹諾酮。
背景技術(shù)：
糖原合成酶激酶(GSK-3)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，具有由不同基因編碼 的 a 和旦異構(gòu)體[Coghlan 等人，Chemistry & Biology, 7，793-803 (2000)以及 Kim 和 Kimmel, Curr. Opinion Genetics Dev.，10，508-514 (2000) ]。GSK-3 已經(jīng)與各種疾病相關(guān) 聯(lián)，包括糖尿病、阿耳茨海默氏病、CNS紊亂如躁狂抑郁性紊亂和神經(jīng)退行性疾病以及心肌 肥厚[參見，例如，W0 99/65897 ；W0 00/38675 ；和Haq等人，J. Cell Biol. (2000) 151,117] 這些疾病可源于或者可導(dǎo)致GSK-3參與的特定細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的異常運(yùn)行。已發(fā)現(xiàn)GSK-3可磷酸化一系列調(diào)節(jié)蛋白并調(diào)整這些調(diào)節(jié)蛋白的活性。這包括糖原 合成酶(其為碳源合成所需的速率限制性酶)、微管相關(guān)蛋白Tau、基因轉(zhuǎn)錄因子連珠 蛋白、翻譯起始因子elF-2B以及ATP檸檬酸裂解酶、洋蟲膠、熱休克因子-l、C-Jim、C-myC、 c-myb、CREB和CEPB a。這些多樣化的靶標(biāo)使GSK-3與細(xì)胞代謝、增殖、分化和發(fā)育的許多 方面相關(guān)聯(lián)。GSK-3的小分子抑制劑已有報(bào)道[W0 99/65897 (Chiron)和W 00/38675 (SmithKline Beecham)]，然而，仍然需要尋找更有效治療GSK-3介導(dǎo)的疾病的治 療劑。發(fā)明概述本發(fā)明提供了由式⑴表示的化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R2為氫或低級烷基；R3 為氫、CN、C (0) R3\ C (NH) NH0H 或 5_ 四唑基；R3a 為 OH、烷氧基或 NHR3b ；
R3b為氫、NH2、OH或低級烷基；R5a和R5b各自獨(dú)立地為氫、低級烷基或芳烷基，其任選地被1至3個(gè)各自獨(dú)立地選 自Q°基團(tuán)的取代基取代；其中Q°為鹵素、氰基、硝基、NH2、烷基或烷氧基；R6為鹵素；在每種情況下，Ra和X3獨(dú)立地選自如下的⑴或(ii)(i)Ra為氫或低級烷基；且X3為取代或未取代的CfC3亞烴基、取代或未取代的3-6元環(huán)亞烴基或取代或未取 代的3-6元雜亞環(huán)基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；或者X3與它們鍵合的氮原子一起可形成5至7元飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)中 任選地含有一個(gè)或多個(gè)0或S原子或者一個(gè)或多個(gè)額外的N原子；Rb 為-(CHR7a) nR7、_NR7bR7、-OR7、_S (0) r_R7、-NR^COY'R7 或 _Y2C0NR7bR7 ；Y1 為鍵、0 或 NR7b;Y2 為鍵或 0 ；n 為 0 或 1 ；r為0至2的整數(shù)；R7為烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其 中R7任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7a為氫、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基， 其中R7a任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7b為氫、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或稠合雜環(huán)基芳基，其中R7b任選地 被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；其中Q1為鹵素、羥基、氧、硫代、氰基、硝基、疊氮基、巰基、甲酰基、羥基羰基、羥基 羰基烷基、烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷 氧基、商代烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、烷基羰 基、芳基羰基、雜芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨 基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基 羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、環(huán)烷基硫代、芳 基硫代、雜芳基硫代、芳烷基硫代、雜芳烷基硫代、烷基亞硫?；?、環(huán)烷基亞硫?；?、芳基亞 硫?；㈦s芳基亞硫?；?、芳烷基亞硫?；㈦s芳烷基亞硫?；?、烷基磺?；?、環(huán)烷基磺酰 基、芳基磺?；?、雜芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、雜芳烷基磺?；⑼檠趸酋；?、芳氧基磺 ?；?、未取代的或取代的氨基磺?；蛄u基磺?；?；X1 為 0 或 NR8;R8為氫或低級烷基；X2 為 CHyCKNR1 或 S ；R1為氫或低級烷基；A為鍵或取代或未取代的亞烴基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基 團(tuán)；其中Q2為烷基或鹵代烷基；
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p 為 0 或 1 ；q為0至2的整數(shù)。本發(fā)明還提供了包含式(I)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。本發(fā)明還提供了通過施用本發(fā)明提供的化合物和組合物治療、預(yù)防或改善GSK-3 介導(dǎo)的疾病的一種或多種癥狀的方法。發(fā)明詳述A.定義除非另行指明，此處所用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語的含義等同于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的 普遍理解。所有的專利、申請、公開的申請以及其它出版物均在此全文引用作為參考。對于 此處一個(gè)術(shù)語存在多個(gè)定義的情況，除非另行指明，應(yīng)采用本節(jié)所用定義。此處所用的術(shù)語烷基、烷氧基、羰基等的含義等同于本領(lǐng)域技術(shù)人員的通常理解。此處所用的烷基碳鏈，如非指明，包含1至20個(gè)碳、1至16個(gè)碳或1至6個(gè)碳，且 為直連或帶支鏈。在特定的實(shí)施方案中，烷基碳鏈包含1至6個(gè)碳。此處示例性的烷基基團(tuán) 包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、異丁基、正丁基、仲丁基、叔丁基、異戊基、新戊基、 叔戊基、異己基。此處所用的低級烷基指具有約1個(gè)碳至約6個(gè)碳的碳鏈。此處所用的烯基碳鏈，如非指明，包含2至20個(gè)碳、2至16個(gè)碳或2至6個(gè)碳，且 為直連或帶支鏈。在特定的實(shí)施方案中，烯基碳鏈包含2至6個(gè)碳。在特定的實(shí)施方案中， 包含2至20個(gè)碳原子的烯基碳鏈帶有1至8個(gè)雙鍵，而在特定的實(shí)施方案中，包含2至16 個(gè)碳的烯基碳鏈帶有1至5個(gè)雙鍵。在特定的實(shí)施方案中，2-6個(gè)碳的烯基碳鏈包含1-2個(gè) 雙鍵。此處示例性的烯基基團(tuán)包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、異丙烯基、1-丁 烯基、2- 丁烯基、3- 丁烯基、1，3- 丁二烯基。此處所用的低級烯基指具有約2個(gè)碳至約6個(gè) 碳的碳鏈。此處所用的炔基碳鏈，如非指明，包含2至20個(gè)碳、2至16個(gè)碳或2至6個(gè)碳，且 為直連或帶支鏈。在特定的實(shí)施方案中，炔基碳鏈包含2至6個(gè)碳。在特定的實(shí)施方案中， 包含2至20個(gè)碳原子的炔基碳鏈帶有1至8個(gè)三鍵，而在特定的實(shí)施方案中，包含2至16 個(gè)碳的炔基碳鏈帶有1至5個(gè)三鍵。在特定的實(shí)施方案中，2-6個(gè)碳的炔基碳鏈包含1-2個(gè) 三鍵。此處示例性的炔基包括但不限于乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基。此處所用的低級炔 基指具有約2個(gè)碳至約6個(gè)碳的碳鏈。此處所用的“烷氧基”包含1至20個(gè)碳、1至16個(gè)碳或1至6個(gè)碳，且為直連或帶
支鏈。在特定的實(shí)施方案中，烷氧基碳鏈包含1至6個(gè)碳。此處示例性的烷氧基基團(tuán)包括 但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、異丁氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、異 戊氧基、正戊氧基、新戊氧基、異己氧基。此處所用的“芳烷基”指其中一個(gè)氫原子被芳基取代的烷基基團(tuán)。此處所用的“鹵代基”、“鹵素”、或“鹵化物“指F、CI、Br或I。此處所用的“芳基”指包含6至19個(gè)碳原子的芳香族單環(huán)或多環(huán)基團(tuán)。芳基基團(tuán) 包括但不限于例如芴基、取代的芴基、苯基、取代的苯基、萘基和取代的萘基等基團(tuán)。此處所用的“環(huán)烷基”在特定的實(shí)施方案中指具有3至10個(gè)碳原子，在其它實(shí)施 方案中指具有3至6個(gè)碳原子的飽和的單或多環(huán)狀環(huán)系統(tǒng)；環(huán)烯基和環(huán)炔基指分別包括至 少一個(gè)雙鍵和至少一個(gè)三鍵的單或多環(huán)狀換系統(tǒng)。在特定的實(shí)施方案中，環(huán)烯基和環(huán)炔基
15基團(tuán)可包含3至10個(gè)碳原子，對于環(huán)烯基基團(tuán)，在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，可包含4至7個(gè)碳 原子，而環(huán)炔基基團(tuán)在進(jìn)一步的實(shí)施方案中可包含8至10個(gè)碳原子。該環(huán)烷基、環(huán)烯基和 環(huán)炔基環(huán)系統(tǒng)可由一個(gè)環(huán)或者兩個(gè)或多個(gè)環(huán)組成，這些環(huán)可以融合、橋接或螺旋連接的方 式連接在一起。此處所用的“雜環(huán)基”在一個(gè)實(shí)施方案中指3至約10元、在另一實(shí)施方案中指4至 7元、在進(jìn)一步的實(shí)施方案中指5至6元的單環(huán)或多環(huán)狀非芳香族環(huán)系統(tǒng)，其中該環(huán)系統(tǒng)中 一個(gè)或多個(gè)、在特定實(shí)施方案中1個(gè)至3個(gè)原子為雜原子，即，非碳元素，包括但不限于氮、 氧或硫。在該雜原子為氮的實(shí)施方案中，該氮任選地被烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷 基、雜芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、?；?、氨基羰基、烷氧基羰基、胍基 取代，或者該氮可被季銨化以形成銨基團(tuán)，其中所述取代基選自上述取代基。此處所用的“雜芳基”在特定實(shí)施方案中指約5至約15元的單環(huán)或多環(huán)狀芳香族 環(huán)系統(tǒng)，其中該環(huán)系統(tǒng)中的一個(gè)或多個(gè)原子、在一個(gè)實(shí)施方案中1個(gè)至3個(gè)原子為雜原子， 即，非碳的元素，包括但不限于氮、氧或硫。該雜芳基基團(tuán)可以可選地稠合至苯環(huán)。雜芳基基 團(tuán)包括但不限于呋喃基、咪唑基、嘧啶基、四唑基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-甲基吡咯基、 喹啉基和異喹啉基。此處所用的“稠合雜環(huán)基芳基”指與雜環(huán)基基團(tuán)稠合的芳基。在一個(gè)實(shí)施方案中， 稠合雜環(huán)基芳基中雜環(huán)基包含了約5-6個(gè)環(huán)原子而其芳基為苯基。稠合雜環(huán)基芳基可通過 該環(huán)系統(tǒng)的任意原子鍵合。代表性稠合雜環(huán)基芳基基團(tuán)包括1，3_苯并二氧戊環(huán)-4-基、1， 3-苯并二氧戊環(huán)-5-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)-6-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)-7-基、4- 二氫吲 哚基、5- 二氫吲哚基、6- 二氫吲哚基和7- 二氫吲哚基。此處所用的“稠合芳基雜環(huán)基”指與芳基基團(tuán)稠合的稠合雜環(huán)基。在一個(gè)實(shí)施方案 中，稠合芳基雜環(huán)基中的芳基為苯基而雜環(huán)基包含了約5-6個(gè)環(huán)原子。稠合芳基雜環(huán)基可 通過該環(huán)系統(tǒng)的任意原子鍵合。代表性的稠合芳基雜環(huán)基基團(tuán)包括1-二氫吲哚基、2-二氫 吲哚基、3- 二氫吲哚基、1，2，3,4-四氫喹啉-1-基、1，2，3，4-四氫喹啉-2-基、1，2，3，4-四 氫喹啉-3-基和1，2，3，4_四氫喹啉-4-基。此處所用的“鹵代烷基”指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子被鹵素取代的烷基基團(tuán)。此處 所用的“低級鹵代烷基”指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子被鹵素取代的低級烷基基團(tuán)。這樣的基 團(tuán)包括但不限于氯甲基、三氟甲基和1-氯-2-氟乙基。此處所用的“雜芳烷基”指其中一個(gè)氫原子被雜芳基取代的烷基基團(tuán)。此處所用的“鹵代烷氧基”指R0-，其中R為鹵代烷基基團(tuán)。此處所用的“環(huán)烷氧基”指R0-，其中R為環(huán)烷基基團(tuán)。此處所用的“芳氧基”指R0-，其中R為芳基。此處所用的“雜芳氧基”指R0-，其中R為雜芳基。此處所用的“雜環(huán)氧基”指R0-，其中R為雜環(huán)基。此處所用的“芳烷氧基”指R0-，其中R為芳烷基。此處所用的“雜芳烷氧基”指R0-，其中R為雜芳烷基。此處所用的“烷基羰基”指RC0-，其中R為烷基基團(tuán)。此處所用的“芳基羰基”指RC0-，其中R為芳基。此處所用的“雜芳基羰基”指RC0-，其中R為雜芳基。
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此處所用的“烷氧基羰基”指RC0-，其中R為烷氧基基團(tuán)。此處所用的“芳氧基羰基”指RC0-，其中R為芳氧基。此處所用的“芳烷氧基羰基”指RC0-，其中R為芳烷氧基。此處所用的“未取代的或取代的氨基羰基”指_C(0)NR' R，其中R'和R獨(dú)立地為 氫、烷基芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。此處所用的“烷基羰氧基”指_0C(0)R，其中R為烷基。此處所用的“芳基羰氧基”指_0C(0)R，其中R為芳基。此處所用的“芳烷基羰氧基”指_0C(0)R，其中R為芳烷基。此處所用的“烷氧基羰氧基”指_0C(0)0R，其中R為烷基。此處所用的“芳氧基羰氧基”指_0C(0)0R，其中R為芳基。此處所用的“芳烷氧基羰氧基”指_0C(0)0R，其中R為芳烷基。此處所用的“未取代的或取代的氨基羰氧基”指_0C(0)NR' R，其中R'和R獨(dú)立 地為氫、烷基芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。此處所用的“未取代的或取代的氨基”指-NR' R，其中R'和R獨(dú)立地為氫、烷基、 芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷基羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰 基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基磺?；?、環(huán)烷基磺?；?、芳基磺?；?雜芳基磺?；?、芳烷基磺?；螂s芳烷基磺酰基.
‘烷基硫代”指-SR，其中R為烷基。 ‘環(huán)烷基硫代”指-SR，其中R為環(huán)烷基。 ‘芳基硫代”指-SR，其中R為芳基。 ‘雜芳基硫代”指-SR，其中R為雜芳基。 ‘芳烷基硫代”指-SR，其中R為芳烷基。 ‘雜芳烷基硫代”指-SR，其中R為雜芳烷基。 ‘烷基亞硫酰基”指-S (0) R，其中R為烷基。 ‘環(huán)烷基亞硫酰基”指-S (0) R，其中R為環(huán)烷基。 ‘芳基亞硫?；敝?S (0) R，其中R為芳基。 ‘雜芳基亞硫?；敝?S (0) R，其中R為雜芳基。 ‘芳烷基亞硫?；敝?S (0) R，其中R為芳烷基。 ‘雜芳烷基亞硫酰基”指_S(0)R，其中R為雜芳烷基。 ‘烷基磺?；敝竉S(0)2R，其中R為烷基。 ‘環(huán)烷基磺酰基”指_S(0)2R，其中R為環(huán)烷基。 ‘芳基磺?；敝竉S(0)2R，其中R為芳基。 ‘雜芳基磺?！敝竉S(0)2R，其中R為雜芳基。 ‘芳烷基磺?；敝竉S(0)2R，其中R為芳烷基。 ‘雜芳烷基磺酰基”指_S(0)2R，其中R為雜芳烷基。 ‘烷氧基磺?；敝竉S(0)2R，其中R為烷氧基。 ‘未取代的或取代的氨基磺?；敝?S(0)2NR' R，其中R'和R獨(dú)立 地為氫、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。 此處所用的化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物包括鹽、酯、烯醇醚、烯醇酯、乙縮醛、此處所用的
此處所用的
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此處所用的
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此處所用的
此處所用的
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17縮酮、原酸酯、半縮醛、半縮酮、酸、堿、溶劑化物、水合物或其前藥。該種衍生物可由本領(lǐng)域 的技術(shù)人員通過已知用于該種衍生化的方法簡單地制備。所生成的化合物可被施用至動(dòng)物 或人，而沒有實(shí)質(zhì)性的毒性作用，且具有藥學(xué)活性或者為前藥。藥學(xué)上可接受的鹽包括但不 限于胺鹽，例如但不限于N，N' -二芐乙烯二胺，氯普魯卡因，膽堿，氨，二乙醇胺和其它羥 基烷基胺，乙二胺，N-甲葡胺，普魯卡因，N-芐基苯乙胺，1-對-氯芐基-2-吡咯烷-1'-基 甲基苯并咪唑，二乙胺和其它烷基胺，哌嗪和三(羥甲基)氨基甲烷；堿金屬鹽，例如但不限 于鋰，鉀和鈉；堿土金屬鹽，例如但不限于鋇，鈣和鎂；過度金屬鹽，例如但不限于鋅；以及 無機(jī)鹽，例如但不限于，磷酸氫鈉和磷酸氫二鈉；還包括但不限于無機(jī)酸的鹽，例如但不限 于鹽酸鹽和硫酸鹽；以及有機(jī)酸的鹽，例如但不限于醋酸鹽，乳酸鹽，蘋果酸鹽，酒石酸鹽， 檸檬酸鹽，抗壞血酸鹽，琥珀酸鹽，酪酸鹽，戊酸鹽，甲磺酸鹽和延胡索酸鹽。藥學(xué)上可接受 的酯包括但不限于酸性基團(tuán)(包括但不限于羧酸、磷酸、次膦酸、磺酸、亞磺酸和硼酸)的 烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和環(huán)烷基酯。藥學(xué)上可接受的烯醇醚包括但不限于式C = C(0R)的衍生物，其中R為氫、烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和環(huán)烷基。藥學(xué)上可接受的烯 醇酯包括但不限于式C = C(0C(0)R)的衍生物，其中R為氫、烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基 和環(huán)烷基。藥學(xué)上可接受的溶劑化物和水合物為化合物與一個(gè)或多個(gè)溶劑或水分子，或者 1至約100個(gè)，或1至約10個(gè)，或者1至約2、3或4個(gè)溶劑或水分子的絡(luò)合物。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明提供的化合物可具有手性中心。這種手性中心可以是(R)或(S) 構(gòu)型，或者為其混合物。因此，本發(fā)明提供的化合物可以是對映體純的，或立體異構(gòu)純或非 對映體混合物。此處所用的基本純的表示表現(xiàn)為足夠的同質(zhì)性，其不含可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員用 于評估雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)分析方法如薄層層析法(TLC)、凝膠電泳、高效液相層析(HPLC)、核磁共 振(NMR)和質(zhì)譜(MS)等容易測得的雜質(zhì)，或者該其使得進(jìn)一步純化不能可檢測地改變該 物質(zhì)的物理和化學(xué)屬性，例如酶催化活性和生物活性。純化所述化合物以生成基本化學(xué)純 的化合物的方法已為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知。然而，基本化學(xué)純的化合物可以是立體異構(gòu)體 的混合物。在這種情況下，進(jìn)一步的純化可能提高該化合物的特定活性。本發(fā)明意在包括 所有該種可能的異構(gòu)體，以及它們的外消旋和光學(xué)純形式。光學(xué)活性(+)和(_)、(R)_和 (S)-或(D)-和(L)-異構(gòu)體可采用手性合成原料或手性試劑制備或者通過常規(guī)技術(shù)(如反 相HPLC)拆分。當(dāng)此處所述的化合物包含烯烴雙鍵或其它幾何不對稱中心時(shí)，除非另行指 明，該化合物意在同時(shí)包括E和Z幾何異構(gòu)體。類似的，也意在包括所有互變異構(gòu)形式。此處所用IC5(I的指特定測試化合物在測試應(yīng)答的測定中實(shí)現(xiàn)最大應(yīng)答的50%抑 制時(shí)的數(shù)量、濃度或劑量。此處所用的EC5(i指可引發(fā)由特定測試化合物誘導(dǎo)、引起或增強(qiáng)的特定劑量依賴性 應(yīng)答的最大量50%的該特定測試化合物的劑量、濃度或數(shù)量。此處所用的治療指使得疾病或病癥的一種或多種癥狀得以改善或以其它方式被 有益地改變的任意方式。治療還包括此處組合物的任意藥學(xué)用途，例如用以治療糖尿病。此處所用的通過施用特定化合物或藥物組合物改善特定病癥的癥狀指任何與該 化合物或組合物的施用相關(guān)的減輕，無論這種減輕是永久或暫時(shí)的，持續(xù)或是短暫的。此處所用的術(shù)語“預(yù)防”指防止特定疾病或紊亂在曾患有該病或紊亂的患者體內(nèi) 復(fù)發(fā)和/或延長患有該疾病或紊亂的患者的緩解期。
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此處所用的術(shù)語“GSK-3介導(dǎo)的疾病”或“GSK-3介導(dǎo)的病癥”指GSK-3參與作用 的任意疾病或其它有害的病癥或狀態(tài)。該種疾病或病癥包括但不限于糖尿病、與糖尿病相 關(guān)的病癥、慢性神經(jīng)退化性病癥包括癡呆如阿耳茨海默氏病、帕金森氏癥、進(jìn)行性核上性麻 痹、亞急性硬化性全腦炎帕金森氏綜合征、腦炎后帕金森氏綜合征、拳擊手腦炎、關(guān)島帕金 森癥_失智復(fù)合癥、皮克氏病、皮層基底節(jié)變性、額顳癡呆、亨丁頓氏舞蹈癥、AIDS相關(guān)的 癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化、神經(jīng)外傷性疾病例如急性中風(fēng)、癲癇、情感障礙如抑 郁癥、精神分裂癥和雙向性精神障礙、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩 病、敗血病、胰癌、卵巢癌和骨質(zhì)疏松癥。B.化合物本發(fā)明提供了式(I)的化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R2為氫或低級烷基；R3 為氫、CN、C (0) R3\ C (NH) NH0H 或 5-四唑基；R3a 為 0H、烷氧基或 NHR3b ；R3b為氫、NH2、OH或低級烷基；R5a和R5b各自獨(dú)立地為氫、低級烷基或芳烷基，其任選地被1至3個(gè)各自獨(dú)立地選 自Q°基團(tuán)的取代基取代；其中Q°為鹵素、氰基、硝基、NH2、烷基或烷氧基；R6為鹵素；在每種情況下，獨(dú)立地選自如下的⑴或(ii)(i)Ra為氫或低級烷基；且X3為取代或未取代的亞烴基、取代或未取代的3-6元環(huán)亞烴基或取代或未取 代的3-6元雜亞環(huán)基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；或者X3與它們鍵合的氮原子一起可形成5至7元飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)中 任選地含有一個(gè)或多個(gè)0或S原子或者一個(gè)或多個(gè)額外的N原子；Rb 為-(CHR7a) nR7、_NR7bR7、-OR7、_S (0)「R7、-NR^COY'R7 或-Y2C0NR7bR7 ；Y1 為鍵、0 或 NR7b;Y2 為鍵或 0;n 為 0 或 1;1為0至2的整數(shù)；R7為烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其 中R7任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；
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R7a為氫、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基， 其中R7a任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7b為氫、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或稠合雜環(huán)基芳基，其中R7b任選地 被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；其中Q1為鹵素、羥基、氧、硫代、氰基、硝基、疊氮基、巰基、甲?；?、羥基羰基、羥基 羰基烷基、烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷 氧基、商代烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、烷基羰 基、芳基羰基、雜芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨 基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基 羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、環(huán)烷基硫代、芳 基硫代、雜芳基硫代、芳烷基硫代、雜芳烷基硫代、烷基亞硫酰基、環(huán)烷基亞硫酰基、芳基亞 硫?；?、雜芳基亞硫酰基、芳烷基亞硫酰基、雜芳烷基亞硫?；?、烷基磺?；h(huán)烷基磺酰 基、芳基磺酰基、雜芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、雜芳烷基磺?；?、烷氧基磺?；?、芳氧基磺 酰基、未取代的或取代的氨基磺酰基或羥基磺?；?；X1 為 0 或 NR8;R8為氫或低級烷基；X2 為 CHyCKNR1 或 S ；R1為氫或低級烷基；A為鍵或取代或未取代的Q-Q亞烴基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基 團(tuán)；其中Q2為烷基或鹵代烷基；p 為 0 或 1;且q為0至2的整數(shù)。在一個(gè)實(shí)施方案中，薩和儼各自為氫。在一個(gè)實(shí)施方案中，R2為氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X1是0。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y1是鍵。在另一實(shí)施方案中，R3為CN。在另一實(shí)施方案中，R3為C(0)R3a。在另一實(shí)施方案中，R3為C(NH)NH0H。在另一實(shí)施方案中，R3為5-四唑基。在一個(gè)實(shí)施方案中，R3a為0H。在一個(gè)實(shí)施方案中，X1為0而R2為氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Ra是氫。在一個(gè)實(shí)施方案中，X3為取代或未取代的CfQ亞烴基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選 自1至4個(gè)Q2基團(tuán)，其中Q2為烷基或鹵代烷基。在另一實(shí)施方案中，A為取代或未取代的亞烴基。在另一實(shí)施方案中，A被1至4個(gè)Q2基團(tuán)所取代，其中Q2為烷基或鹵代烷基；且p 為0。
在一個(gè)實(shí)施方案中，X2為CH2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X2是0。在另一實(shí)施方案中，A為CH2;p為0且q為2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X1是0。在特定的實(shí)施方案中，R6為F。在特定的實(shí)施方案中，該化合物具有式(la) 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R3 為氫、CN、C (0) R3\ C (NH) NH0H 或 5_ 四唑基；R3a 為 OH、烷氧基或 NHR3b ；R3b為氫、NH2、OH或低級烷基；R5a和R5b各自獨(dú)立地為氫或低級烷基；R6為鹵素；在每種情況下，Ra和X3獨(dú)立地選自如下的⑴或(ii)(i)Ra為氫或低級烷基；且X3為取代或未取代的CfQ亞烴基、取代或未取代的3-6元環(huán)亞烴基或取代或未取 代的3-6元雜亞環(huán)基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；或者X3與它們鍵合的氮原子一起可形成5至7元飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)中 任選地含有一個(gè)或多個(gè)0或S原子或者一個(gè)或多個(gè)額外的N原子；Rb 為-(CHR7a) nR7、_NR7bR7、-OR7、_S (0) r_R7、-NR^COY'R7 或-Y2C0NR7bR7 ；Y1 為鍵、0 或 NR7b;Y2 為鍵或 0;n 為 0 或 1;r為0至2的整數(shù)；R7為烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其 中R7任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7a為氫、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基， 其中R7a任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7b為氫、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或稠合雜環(huán)基芳基，其中R7b任選地 被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；其中Q1為鹵素、羥基、氧、硫代、氰基、硝基、疊氮基、巰基、甲?；⒘u基羰基、羥基 羰基烷基、烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷 氧基、商代烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨 基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基 羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、環(huán)烷基硫代、芳 基硫代、雜芳基硫代、芳烷基硫代、雜芳烷基硫代、烷基亞硫?；?、環(huán)烷基亞硫?；?、芳基亞 硫?；?、雜芳基亞硫?；⒎纪榛鶃喠蝓；㈦s芳烷基亞硫?；⑼榛酋；h(huán)烷基磺酰 基、芳基磺?；?、雜芳基磺?；?、芳烷基磺?；㈦s芳烷基磺?；⑼檠趸酋；?、芳氧基磺 ?；?、未取代的或取代的氨基磺?；蛄u基磺?；?；且Q2為烷基或鹵代烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(Ia)，其中R5a*R5b為氫。在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(1&)，其中鏟為^在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(1&)，其中鏟為((0)1^。在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(la)，其中R3為C(NH)NH0H。在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(la)，其中R3為5-四唑基。在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(1幻，其中滬為0扎在一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物具有式(Ia)，其中Ra為氫。在特定的實(shí)施方案中，該化合物具有式(lb) 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R6為鹵素；n為1-3 ；X3為取代或未取代的Q-Q 亞烴基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)，Q2為烷基或鹵代烷基；和其他變量如 本文別處所述。在特定的實(shí)施方案中，該化合物具有式(Ic) 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中n為1-3 ；X3為取代或未取代的Q-Q亞烴基，其 中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)，Q2為烷基或鹵代烷基；和其他變量如本文別處 所述。在特定的實(shí)施方案中，該化合物具有式(Id) 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中X3為取代或未取代的CfC3亞烴基，其中該取代 基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)，Q2為烷基或鹵代烷基；R3*CN、C(0)0H、C(0)NH2、C(NH) NH0H或5-四唑基；和其他變量如本文別處所述。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的化合物顯示了在無細(xì)胞GSK3激酶測定中對 GSK3不超過約20 iiM，在一個(gè)實(shí)施方案中不超過約1011] 、不超過約511]\1或不超過111]\1的 IC50O在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的化合物顯示了與至少一種其它類型的激酶相比對 GSK3具有選擇性的抑制活性。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的GKS3抑制劑基本沒有抗菌活性或具有極低 的抗菌活性。該抗菌活性可通過本領(lǐng)域已知的估算受試化合物的最小抑制濃度(MIC)的 方法進(jìn)行測定(例如，E. Coli and/or S. aureus, Clinical andLaboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial SusceptibilityTests for Bacteria That Grow Aerobically ；Approved Standard-Sixth Edition :CLSIdocument M7-A4. CLSI, Wayne, PA. (2003))。C.化合物的制備本發(fā)明提供的化合物可通過如下所示的本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法和類似于此 處實(shí)施例章節(jié)中所述的如下方法及這些方法的常規(guī)改變進(jìn)行制備。Kyorin Pharmaceutical Co.，Ltd.，日本未審查專利公布 S62-252772，Ube Industries, Ltd.，日本未審查的專利公布 S63-264439，Bayer AG,日本未審查的專利公布Hl-268679，Ihara Chemical Industry Co.，Ltd.，日本未審查的專利公布 H10-70584，Daiichi Seiyaku Co.，Ltd.，日本未審查的專利公布 S59-1489，Tokyo Tanabe Co.，Ltd.，日本未審查的專利公布 S62-53987，F(xiàn). Hoffinann-La Roche Ltd.，日本未審查的專利公布 S63-132891，H。Koga 等人，J. Med. Chem.，1980，23，1358，Y. Yoshida 等人，Synlett，2003，2139，I. Hayakawa 等人，Chem. Pharm. Bull, 1984，32，4907，S. Atarashi 等人，Chem. Pharm. Bull.，1987，35，1986，S. Atarashi 等人，J. Heterocyclic Chem.，1991，28，329，H. Egawa 等人，Chem. Pharm. Bull，1986，34，4098，L.A.Mitscher 等人，J. Med. Chem.，1987，30，2283，G.B.Mullen 等人，J. Med. Chem.，1988，31，1694，J. S. Kiely 等人，J. Med. Chem.，1988，31，2004，H. Ishikawa 等人，Chem. Pharm. Bull，1989，37，2103，V. D. Parikh 等人，J. Heterocyclic Chem.，1988，25，1567，
23
H. Ishikawa 等人，Chem. Pharm. Bull，1990，38，2459，P. Remuzon 等人，J. Med. Chem.，1991，34，29，D. J. Augeri 等人，J. Heterocyclic Chem.，1990，27，1509，T.Okada 等人，J. Heterocyclic Chem.，1991，28，1067，D.T.W.Chu 等人，J. Heterocyclic Chem.，1987，24，453，以及S. L. Dax 等人，J. Org. Chem.，1992，57，744。J. S. Kiely 等人，J. Heterocyclic Chem.，1989，26，1675。M.Fujita 等人，Chem. Pharm. Bull，1996，44，987。由本發(fā)明的通式(1)代表的化合物可通過合成1或常規(guī)方法的組合進(jìn)行制備。合成1 其中Xla 為 X1 或 N-PG1 (PG1 為保護(hù)基團(tuán))，而 A、R2、R3、R5a、R5b、R6、Ra、Rb、X1、X2、X3、 p和q如上所述。保護(hù)基團(tuán)PG1代表?；鶊F(tuán)(例如乙?；鶊F(tuán))、低級烷氧基羰基基團(tuán)(例如叔丁 氧基羰基基團(tuán))、芳氧基羰基基團(tuán)(例如，任選地具有取代基的苯甲氧基羰基基團(tuán))、芳烷基 基團(tuán)(例如芐基基團(tuán)和對甲氧基芐基基團(tuán))或者甲硅烷基基團(tuán)(例如三甲基甲硅烷基基團(tuán) 和叔丁基二甲基甲硅烷基基團(tuán))。當(dāng)通式⑵中的Xla代表X1時(shí)，可采用堿(例如三乙胺、卩比啶、異丙基乙胺和1，8_二 氮雜雙環(huán)十一炔)于合適的溶劑中(例如，N, N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、N-甲基吡咯烷 酮、甲苯、乙腈、四氫呋喃、甲醇、乙醇或其混合物)或者在無溶劑下在室溫至180°C下持續(xù) 1-48小時(shí)進(jìn)行通式⑵和通式(3)向通式(1)的轉(zhuǎn)化(即，流程1-A)。當(dāng)通式(2)中的表了時(shí)N-PG1，從通式(2)和通式(3)向通式(1)的轉(zhuǎn)化 (即，流程1-A)可在上述流程之后采用一般脫保護(hù)方法實(shí)現(xiàn)(例如ProtectingGroims in Organic Synthesis (John Wily 和 Sons(1999)中所述的方法)。在由本發(fā)明的通式(1)代表的化合物中，由通式(lb)或(Ic)代表的化合物也可 通過合成2制備。合成2
其中A、Ra、Rb、R2、R3b、R5a、R5b、R6、X1、X2、X3、p 和 q 如上所述?？刹捎们杌稃}(例如氰化鉀和氰化鈉)于合適的溶劑中(例如，N，N_ 二甲基甲 酰胺和二甲亞砜)在室溫至180°C下持續(xù)1-72小時(shí)進(jìn)行通式(la)向通式(lb)的轉(zhuǎn)化(即， 流程2-A)可替代地，可在合適的溶劑(例如二苯醚、均三甲基苯、N, N-二甲基甲酰胺、二甲 亞砜、甲苯、乙腈、四氫呋喃、甲醇、乙醇、乙酸或其混合物)中在室溫至250°C下持續(xù)1-72小 時(shí)進(jìn)行上述轉(zhuǎn)化。該反應(yīng)可在酸(例如氫氯酸)或銅鹽(例如氯化銅)缺失或存在下進(jìn)行。由通式(la)向通式(lc)的轉(zhuǎn)化(即，流程2-B)可按照如下進(jìn)行通式(la)首先 與亞硫酰氯、亞硫酰溴、乙酸酐、氯甲酸乙酯、氯甲酸甲酯等在合適的溶劑(例如N，N-二甲 基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃或其混合物)中于_15°C至室溫下反應(yīng)5分鐘至3小 時(shí)。這將羧基基團(tuán)轉(zhuǎn)化為反應(yīng)活性衍生化基團(tuán)。該反應(yīng)可在堿(例如吡啶和三乙胺)的存 在下進(jìn)行。然后，將該反應(yīng)產(chǎn)物與通式(4)在堿(例如吡啶和三乙胺)存在下在合適的溶 劑(例如N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃或其混合物)中在0°C至100°C的 溫度下反應(yīng)30分鐘至24小時(shí)。可替代地，所述轉(zhuǎn)化可按如下進(jìn)行將通式(la)與通式(4)通過使用縮合劑(例 如二環(huán)己基碳二亞胺、3-(3_ 二甲氨基丙基)-1_乙基碳二亞胺氯化物、氰基膦酸二乙酯、二 苯基磷酰疊氮化物和羰基二咪唑)在合適的溶劑(例如N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯 仿、四氫呋喃或其混合物)中于0°C至50°C的溫度下反應(yīng)1-24小時(shí)。該反應(yīng)可在堿(例如 吡啶、三乙胺和N-甲基嗎啡)的存在或缺失下進(jìn)行。在由本發(fā)明的通式(1)代表的化合物中，由通式(Id)、(le)或(If)代表的化合物 也可通過合成3制備。
其中A、Ra、R\ R2、R5a、R5b、R6、X1、X2、X3、p 和 q 如上所述。由通式(lea)至通式(Id)的轉(zhuǎn)化(即，流程3-A)可按如下進(jìn)行將通式(lea)與 脫羥基劑(例如三氟乙酸酐和三氯氧磷)在堿(吡啶和三乙胺)的存在下于合適的溶劑 (例如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃及其混合物)中在0°C至50°C的溫度下反應(yīng)1-24小時(shí)。反 應(yīng)后，該反應(yīng)產(chǎn)物可根據(jù)需要以堿(例如碳酸鉀、氫氧化鈉和NH硅膠)處理。由通式(Id)向通式(le)的轉(zhuǎn)化(即，流程3-B)可采用疊氮化物(例如疊氮化鈉 和三甲硅烷基疊氮化物)于合適的溶劑(例如2-丙醇、水及其混合物)中在鋅鹽(例如氯 化鋅和溴化鋅)的存在下在室溫至50°C下進(jìn)行1-24小時(shí)。通式(Id)向通式(If)的轉(zhuǎn)化(即，流程3-C)可采用羥胺在合適的溶劑(例如乙 醇、甲醇、N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃或其混合物)中在0°C至回流溫度下進(jìn)行1-24小 時(shí)。該反應(yīng)可在堿(例如重碳酸鉀、碳酸鈉、吡啶和三乙胺)的存在或缺失下進(jìn)行。在合成1中，由通式(2)代表的化合物可通過合成4生成。合成4 其中 A、R2、R3、R5a、R5b、R6、Xla、X2、p 禾口 q 如上所述
通式(5)和通式(6)至通式(7)的轉(zhuǎn)化(S卩，流程4-A)可按如下進(jìn)行將通式 (5)與乙酸酐和鄰酸酯(例如鄰甲酸乙酯和鄰乙酸乙酯)的混合物在100°C至150°C下反 應(yīng)1-8小時(shí)，然后將反應(yīng)產(chǎn)物與通式(6)在合適的溶劑(例如甲苯、四氫呋喃、甲醇、乙醇、 叔丁醇或其混合物)中在室溫下反應(yīng)1-24小時(shí)。該反應(yīng)可在堿(碳酸鉀、碳酸鈉、t-BuOK、 t-BuONa、三乙胺和吡啶)的存在或缺失下進(jìn)行。由通式(7)至通式⑶的轉(zhuǎn)化(即，流程4-B)可采用堿(例如氫化鉀、氫化鈉、碳 酸鉀、碳酸鈉、t-BuOK和t-BuONa)或氟化物鹽(例如氟化鉀和氟化鈉)于合適的溶劑(例 如N，N- 二甲基甲酰胺、二甲亞砜、四氫呋喃或其混合物)中在0°C至150°C下進(jìn)行1-24小 時(shí)。由通式⑶至通式⑵的轉(zhuǎn)化(即，流程4-C)可在堿(例如三乙胺、吡啶、異丙基 乙胺和1，8_ 二氮雜雙環(huán)十一炔)的存在下于合適的溶劑(例如N，N-二甲基先按、二甲亞 砜、甲苯、乙腈、四氫呋喃、甲醇、乙醇或其混合物)中或無溶劑狀態(tài)下在室溫至180°C下進(jìn) 行1-24小時(shí)。在通式(2)代表的化合物中，由通式(2a)代表的化合物也可通過合成5制備。 其中A、R2、R3、R6、Xla、X2、p 和 q 如上所述。由通式(10)和通式(6)至通式(11)的轉(zhuǎn)化(即，流程5-A)可通過與流程4_A類 似的方法進(jìn)行。由通式(11)至通式(12)的轉(zhuǎn)化(即，流程5-B)可通過與流程4-B類似的方法進(jìn) 行。由通式(12)至通式(13)的轉(zhuǎn)化(即，流程5-C)可通過一般硝化例如在濃縮的硫 酸中使用硝化試劑(例如硝酸鉀、硝酸鈉和硝酸)的反應(yīng)進(jìn)行。該反應(yīng)可在0°C至50°C進(jìn) 行1-8小時(shí)。由通式(13)至通式(2a)的轉(zhuǎn)化(即，流程5_D)可采用金屬(例如還原鐵、錫和 鋅)在酸(例如氫氯酸和乙酸)的存在下于合適的溶劑(例如四氫呋喃、甲醇、乙醇、水或 其混合物)中或在無溶劑狀態(tài)下在室溫至120°C下進(jìn)行1-48小時(shí)。
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可替代地，可通過采用金屬催化劑(例如披鈀碳、披鉬活性炭、氧化的鉬和蘭尼 鎳)于合適的溶劑(例如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、乙酸及其混 合物)中在室溫至80°C下氫化1-24小時(shí)進(jìn)行該轉(zhuǎn)化。該反應(yīng)可在常壓至0. 5Mpa的氫氣氛 圍中進(jìn)行。此外，可通過采用連二亞硫酸鈉在合適的溶劑(例如水、甲醇、乙醇、四氫呋喃或 其混合物)中在室溫至100°C下還原1-24小時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)化。在合成4或合成5中，通式(15)、(16)、(17)和(18)的化合物也可通過合成6制 其中R5 為氫、N02 或 R5aR5bN_，而 A、R\ Rb、R2、R6、Xla、X2、p 和 q 如上所述。由通式(14)至通式(15)的轉(zhuǎn)化(即，流程6-A)可通過與流程2_B類似的方法進(jìn) 行。由通式(15)至通式(16)的轉(zhuǎn)化(即，流程6-B)可通過與流程3_A類似的方法進(jìn) 行。由通式(16)至通式(17)的轉(zhuǎn)化(即，流程6-C)可通過與流程3_B類似的方法進(jìn) 行。由通式(16)至通式(18)的轉(zhuǎn)化(即，流程6-D)可通過與流程3_C類似的方法進(jìn) 行。在合成5中通式(13)代表的化合物中，由通式(13b)代表的化合物也可通過合成 7制備。合成7
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其中R3aa為烷氧基，X為鹵素，而A、R2、R5、R6、Xla、X2、p和q如上所述。由通式(13a)和通式(19)至通式(20)的轉(zhuǎn)化(S卩，流程7_A)可在合適的溶劑 (例如四氫呋喃、二乙醚或其混合物)中在_78°C至0°C的溫度下進(jìn)行1-24小時(shí)。該轉(zhuǎn)化可 在銅鹽(例如碘化銅和氯化銅)缺失或存在下進(jìn)行。通式(20)向通式(13b)的轉(zhuǎn)化(即，流程7-B)可采用二氧化錳在合適的溶劑(例 如二氯甲烷、氯仿、甲苯、乙醇或其混合物)中在室溫至130°C下進(jìn)行1-120小時(shí)?？商娲兀鲛D(zhuǎn)化可采用醌化合物(例如二氯二氰基-對-苯醌和四氯苯醌) 在室溫至130°C下進(jìn)行1-24小時(shí)。在合成5中通式(13)代表的化合物中，由通式(13d)代表的化合物可通過合成8 制備。 由通式(13c)向通式(21)的轉(zhuǎn)化(S卩，流程8-A)可采用碳酸銨在合適的溶劑 (例如N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙醇、甲醇、水或其混合物)中在室溫至_78°C下進(jìn)行 1-72小時(shí)。 由通式(21)至通式(13d)的轉(zhuǎn)化(即，流程8-B)可采用亞硝酸酯(例如，亞硝酸 叔丁酯、亞硝酸戊酯、亞硝酸異戊酯)在銅鹽(例如氯化銅和溴化銅)存在下在合適的溶劑 如乙腈中在0°C至100°C下進(jìn)行1-48小時(shí)?？商娲兀鲛D(zhuǎn)化可按如下進(jìn)行將通式(21)與亞硝酸鹽(例如亞硝酸鉀和亞 硝酸鈉)在酸(例如氫氯酸、硫酸和乙酸)存在下在合適的溶劑(例如，四氫呋喃、1，4_ 二 噁烷、H20或其混合物)中在0°C至室溫下反應(yīng)5分鐘至1小時(shí)，然后，用銅鹽(例如氯化 銅和溴化銅)在合適的溶劑(例如，例如，四氫呋喃、1，4_ 二噁烷、H20或其混合物)中在 0°C -100°c下處理該反應(yīng)產(chǎn)物1-48小時(shí)。在合成1-8中，具有代表N-PG1的取代基Xla的化合物可通過常規(guī)方法如 Protecting Groups in Organic Synthesis (John Wily and Sons (1999))中所述的方法轉(zhuǎn) 化為取代基Xla為NH的化合物。
在合成1-8中，具有代表芳烷基基團(tuán)(其任選地具有取代基)的取代基或 R5b的化合物可通過常規(guī)方法，例如，通過采用酸(例如氫氯酸和三氟乙酸)、無機(jī)堿(例如 碳酸鉀和氫氧化鈉)、有機(jī)堿(例如胼)、季銨鹽(例如四丁基氟化銨)和金屬(例如披鈀 碳)的催化還原轉(zhuǎn)化為取代基R5a和/或R5b為H的化合物。在合成1-8中，具有代表烷氧基羰基基團(tuán)的取代基R3的化合物可通過常規(guī)方法， 例如無溶劑反應(yīng)或在合適的溶劑(例如甲醇、乙醇、四氫呋喃、水或其混合物)在堿(例如 氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鉀和碳酸鈉)或酸(例如硫酸、氫氯酸和乙酸)存在下在室溫至 120°C下反應(yīng)1-48小時(shí)轉(zhuǎn)化為取代基R3為C00H的化合物。由通式(1)表示的化合物的光學(xué)異構(gòu)體可通過前述合成1-8或常規(guī)方法的組合采 用光學(xué)活性起始原料制備?？商娲兀@些光學(xué)異構(gòu)體可由通式(1)代表的外消旋體通過采用光學(xué)活性酸或 堿的分步結(jié)晶或采用手性支持物的色譜制備得到。以下顯示了化合物制備的某些示例性反應(yīng)圖解合成9 合成10 在一個(gè)實(shí)施方案中，合成9的產(chǎn)物為8-氨基-9-氟-7-氧-10- (2_ (吡啶_2_基 氨基)乙氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸 (8)，如合成11所示。合成11 D.藥物組合物本發(fā)明提供的藥物組合物包含治療活性量的一種或多種此處所述的可用于預(yù)防、 治療或改善GSK-3介導(dǎo)的疾病的一種或多種癥狀的化合物。本發(fā)明提供的化合物的藥物組合物可全身或局部或口服或腸胃外施用，例如直 腸、皮下、肌肉內(nèi)、靜脈或經(jīng)皮施用。所述組合物包含一種或多種本發(fā)明提供的化合物。所述化合物可被配制成適當(dāng) 的藥物制劑，例如用于口服施用的溶液、懸浮液、片劑、分散片劑、丸劑、膠囊、顆粒、粉末、細(xì) 微粉末、注射劑、緩釋制劑或酏劑，或者用于腸胃外施用的無菌溶液或懸浮液，以及配制為 透皮貼劑制劑和干粉吸入器。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物可根據(jù)常規(guī)藥物 制備技術(shù)通過添加常規(guī)賦形劑、填充劑、結(jié)合劑、崩解劑、涂層劑、糖衣劑、PH調(diào)節(jié)劑、助溶劑 或者水性或非水性溶劑進(jìn)行制備。一般而言，上文所述的抗體通過本領(lǐng)域公知的技術(shù)和程 序(例如，參見 Ansel Introduction to Pharmaceutical DosageForms，Seventh Edition 1999)被配制成為藥物組合物。在所述組合物中，有效量的一種或多種化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與適當(dāng) 的藥物載體或溶媒相混合。如上所述，所述化合物可在配制前被衍生為相應(yīng)的鹽、酯、烯醇 醚或酯、堿、溶劑化物、水合物或前藥。所述化合物在所述組合物中的濃度能夠在施用時(shí)有 效遞送能夠治療、預(yù)防或改善GSK-3介導(dǎo)的疾病的一種或多種癥狀的量。所述組合物通常被配制為可進(jìn)行單劑量施用。為了配制組合物，可將一定重量百 分比的化合物以使所治療的疾病被減輕或改善的有效濃度溶解、懸浮、分散或以其它方式 混合在選定的溶媒中。適用于施用本發(fā)明提供的化合物的藥物載體包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已
32知的適于特定施用模式的任意載體或溶媒。此外，所述化合物可配制為所述組合物中的單一藥物活性成分，或者可聯(lián)合其它 活性成分。包含靶向組織的脂質(zhì)體(例如，靶向腫瘤的脂質(zhì)體)的脂質(zhì)體懸浮液也可被用 作藥學(xué)上可接受的載體。這些可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行制備。例如，脂質(zhì)體 制劑可參照本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行制備。簡單而言，可通過在燒瓶中干燥蛋磷脂酰膽堿和 腦磷脂酰絲氨酸(摩爾比7 3)形成如多層囊泡(MLV)等脂質(zhì)體。添加不含二價(jià)陽離子 的磷酸鹽緩沖液(PBS)中的本發(fā)明化合物溶液，然后振蕩燒瓶直至脂質(zhì)膜被分散。洗滌所 得的囊泡以去除未封裝的化合物，離心成為圓球，然后重懸浮于PBS。所述活性化合物以足以顯示治療有用效果、且不對所治療患者產(chǎn)生不想要的副作 用的有效量包含在藥學(xué)上可接受的載體中。所述治療有效量濃度可通過在此處所述的體外 和體內(nèi)系統(tǒng)中測試化合物，然后從其外推為人用劑量進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)確定。在所述藥物組合物中的活性化合物的濃度將取決于所述活性化合物的吸收、失活 和排泄速率，所述化合物的物理化學(xué)特性，給藥方案，施用量以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其 它因素。例如，所述遞送的量足以改善GSK-介導(dǎo)的疾病的一種或多種癥狀。在特定的實(shí)施方案中，治療有效的劑量應(yīng)當(dāng)形成約0. lng/ml至約50-100 y g/ml 的活性成分血清濃度。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物提供了約0. OOlmg至約2000mg 化合物/公斤體重/天的劑量。可制備藥物單位劑形式以提供每個(gè)劑量單位形式約lmg至 約lOOOmg，在特定的實(shí)施方案中，從約10mg至約500mg的必要活性成分或必要成分組合。所述活性成分可立即施用，或者可被分為一定量的更小劑量，從而以一定的時(shí)間 間隔施用。應(yīng)理解確切的劑量和治療時(shí)間與待治療疾病相關(guān)聯(lián)，并可通過已知的測試方案 憑經(jīng)驗(yàn)確定，或者可從體內(nèi)或體外測試數(shù)據(jù)推斷得到。應(yīng)注意濃度和劑量值也可隨著待緩 和的疾病的嚴(yán)重性而有所變化。應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步理解對于任何特定的個(gè)體，應(yīng)根據(jù)個(gè)體需求和 施用或管理施用所述組合物的人員的專業(yè)判斷隨時(shí)間調(diào)整具體的劑量方案，且本發(fā)明提供 的濃度范圍僅作為示例，無意對所主張的組合物的范圍或?qū)嵤?gòu)成限制。藥學(xué)上可接受的衍生物包括酸、堿、烯醇醚或酯、鹽、酯、水合物、溶劑化物和前藥 形式。可通過選擇衍生物使得其藥物代謝動(dòng)力學(xué)屬性優(yōu)于相應(yīng)的中性化合物。因此，有效量的此處所述的一種或多種所述化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與 適當(dāng)?shù)挠糜谌?、表面或局部施用的藥物載體或溶媒混合以形成藥物組合物。所包含的化 合物的量能夠有效治療或預(yù)防激酶介導(dǎo)的，包括但不限于GSK-3介導(dǎo)的疾病，或者改善其 一種或多種癥狀?；钚曰衔镌谒鼋M合物中的濃度將取決于該活性化合物的吸收、失活 和排泄速率，給藥方案，施用量，具體的制劑以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。所述化合物預(yù)期以適當(dāng)?shù)耐緩绞┯茫?，口服、腸胃外、直腸、表面和局部施用。 對于口服施用，可配制膠囊和片劑。所述組合物呈液態(tài)、半液態(tài)或固態(tài)形式，并可配制為適 于各種施用途徑的形式。用于腸胃外、皮膚內(nèi)、皮下或表面應(yīng)用的溶液或懸浮液可包括如下任意成分無菌 稀釋劑，例如注射用水，鹽溶液，不揮發(fā)性油，聚乙二醇，甘油，丙二醇，二甲基乙酰胺或其它 合成溶劑；抗菌劑，例如苯甲醇和甲基對羥苯甲酸酯；抗氧化劑，例如抗壞血酸和亞硫酸氫 鈉；螯合劑，例如乙二胺四乙酸(EDTA)；緩沖液，例如醋酸鹽，檸檬酸鹽和磷酸鹽；以及調(diào)節(jié) 張力的藥劑，例如氯化鈉或右旋糖。腸胃外制劑可裝入由玻璃、塑料或其它適當(dāng)材料制成的安瓿、一次性注射器或者單或多劑量的小瓶中。例如，當(dāng)化合物顯示溶解性不足時(shí)，可使用增溶化合物的方法。這種方法已為本領(lǐng) 域技術(shù)人員所知，并包括但不限于使用共溶劑，例如二甲亞砜(DMS0)，使用表面活性劑，例 如TWEEN ,或者溶解于碳酸氫鈉水溶液。在混合或添加所述化合物時(shí)，所得的混合物可以是溶液、懸浮液、乳液等。所得混 合物的形式取決于多種因素，包括目標(biāo)施用模式以及該化合物在所選載體或溶媒中的可溶 性。有效濃度足以改善待治療的疾病、紊亂或病癥的癥狀，并可通過經(jīng)驗(yàn)確定。所述藥物組合物可作為包含適當(dāng)量所述化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物的單 位劑型(例如，片劑、膠囊、丸劑、粉末、顆粒、無菌腸胃外溶液或懸浮液、和口服溶液或懸浮 液、以及油水乳液)施用至人和動(dòng)物。所述治療活性化合物及其衍生物被配制為單位劑型 或多重劑型進(jìn)行施用。此處所用的單位劑型指本領(lǐng)域已知的適用于人和動(dòng)物個(gè)體并單獨(dú)包 裝的物理分散單元。每個(gè)單位劑量包含了足以形成所需治療效果的預(yù)定量的所述治療活性 化合物，以及所需的藥物載體、溶媒或稀釋劑。單位劑型的示例包括安瓿和注射器以及單獨(dú) 包裝的片劑和膠囊。單位劑型可分成若干份施用，或者施用多個(gè)單位劑型。多重劑型是包 裝在單獨(dú)容器中的多個(gè)相同的單位劑型，并以分離的單位劑型施用。示例性的多重劑型包 括小瓶，片劑或膠囊的瓶子或品脫或加侖瓶。因此，多重劑型是不被分離包裝的多個(gè)單位劑 型。還可制備緩釋制劑。緩釋制劑的適當(dāng)示例包括，含有本發(fā)明提供的所述化合物 的固體疏水聚合物的半透過性基質(zhì)，其中所述基質(zhì)為固定形狀的物品，例如，膜或微膠囊。 緩釋基質(zhì)的示例包括聚酯、水凝膠(例如，聚(2-羥乙基-甲基丙烯酸甲酯)，或聚(乙烯 醇))、聚乳酸、L"谷氨酸和乙基-L-谷氨酸鹽的共聚物、非降解乙烯_醋酸乙烯酯、可降解 乳酸-羥基乙酸共聚物如LUPR0NDEP0T (由乳酸-羥基乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林組成的 可注射微球)和多聚-D-(-)_3-羥丁酸。乙烯-醋酸乙烯酯和乳酸-羥基乙酸等聚合物能 夠在100天以上釋放分子，特定的水凝膠可在更短的時(shí)間內(nèi)釋放蛋白。當(dāng)包于膠囊內(nèi)的化 合物在身體內(nèi)長時(shí)間存留時(shí)，它們可能由于暴露在37°C的潮濕環(huán)境下而變性或聚集，從而 導(dǎo)致生物活性的喪失及其結(jié)構(gòu)的可能改變?？筛鶕?jù)所涉及的作用機(jī)制設(shè)計(jì)合理的穩(wěn)定化策 略。例如，如果據(jù)發(fā)現(xiàn)所述聚集機(jī)制是通過硫_ 二硫化物交換形成分子間S-S鍵，則可通過 修飾硫氫基殘基，從酸性溶液凍干，控制含水量，使用適當(dāng)?shù)奶砑觿?，和形成特定的聚合?基質(zhì)組合物實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定化?？芍苽浒?. 005%至100%的活性成分，其余為無毒性載體的劑型或組合物。對 于口服施用，可通過加入任意常用的賦形劑(例如，藥物級甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、 滑石、纖維素衍生物、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、橄欖油、芝麻油、可可脂、乙二醇、交聯(lián)羧 甲基纖維素鈉、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂或糖精鈉)形成藥學(xué)上可接受的非毒性組合物。這種 組合物包括溶液、懸浮液、片劑、膠囊、粉劑和緩釋劑型，例如，但不限于，植入物和微膠囊化 的遞送系統(tǒng)，以及可生物降解的生物相容性聚合物，例如膠原蛋白、乙烯醋酸乙烯酯、聚酸 酐、聚乙醇酸、聚原酸酯、聚乳酸及其它。制備這些組合物的方法已為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知。 組合物可包含約0. 001% -100%的活性成分，在特定的實(shí)施方案中，包含約0. 1-85%或約 75-95%的活性成分。所述活性化合物或藥學(xué)上可接受的衍生物可與防止該化合物被身體迅速清除的
34載體(例如延時(shí)配方或涂層)一起制備。所述組合物可包含其它活性化合物以獲得所需的屬性組合。為治療或預(yù)防目的， 本發(fā)明提供的所述化合物或此處所述其藥學(xué)上可接受的衍生物還可與另一本領(lǐng)域已知對 此處涉及的一種或多種疾病或醫(yī)學(xué)病癥(例如，GSK-3介導(dǎo)的疾病)有治療價(jià)值的藥理試 劑一起有益地施用。應(yīng)理解，這種聯(lián)合療法構(gòu)成了本發(fā)明提供的所述組合物和治療方法的
另一方面。本發(fā)明提供的無乳糖組合物可包含本領(lǐng)域公知的以及如在美國藥典(USP) SP(XXI)/NF(XVI)中列舉的賦形劑。一般而言，無乳糖組合物包含藥上學(xué)相容且藥學(xué)上可接 受的量的活性成分、結(jié)合劑/填充劑以及潤滑劑。示例性的無乳糖劑型包含活性成分、微晶 纖維素、預(yù)膠化淀粉以及硬脂酸鎂。本發(fā)明進(jìn)一步包括包含本發(fā)明提供的化合物的無水藥物組合物和劑型。例如， 添加水(例如，5%)是制藥領(lǐng)域廣泛采用的一種模擬長期貯存以測定如保質(zhì)期或制劑長 期穩(wěn)定性等特性的方法。例如，參見 Jens T. Carstensen, DrugStability principles & Practice, 2d. Ed. , Marcel Dekker，NY，NY，1995，第 379-80 頁。實(shí)際上，水和熱可加速一些 化合物的分解。因此，水的作用對制劑可能具有非常重要的影響，因?yàn)樵谥苿┑纳a(chǎn)、處理、 包裝、貯存、運(yùn)輸以及使用中常遇到水分和/或濕氣。此處所述的無水藥物組合物和劑型可采用無水或低含水量的成分并在低水分或 低濕度條件下制備。在特定的實(shí)施方案中，包含了乳糖和至少一種具有伯胺或仲胺的活性 成分的藥物組合物和劑型在生產(chǎn)、包裝和/或貯存過程中在遇到水分和/或濕氣時(shí)可以是 無水的。無水藥物組合物的制備和貯存應(yīng)當(dāng)保持其無水性質(zhì)。相應(yīng)的，在特定的實(shí)施方案 中，可以使用本領(lǐng)域已知的防水材料包裝無水組合物從而使之包含在適當(dāng)?shù)闹苿┰噭┖?中。合適包裝的示例包括但不限于密封箔、塑膠、單位劑量容器(例如，小藥水瓶)、泡罩包 裝以及條狀包裝?？诜┬涂诜幬飫┬涂梢允枪腆w、凝膠或液體。固體劑型為片劑、膠囊、顆粒和散裝粉劑。 口服片劑的類型包括壓縮的、可咀嚼的片劑以及包被有腸溶衣、糖衣或膜的片劑。膠囊可以 是硬膠囊或軟凝膠膠囊，而顆粒和粉末可以非泡騰或泡騰形式提供，并混合其它本領(lǐng)域技 術(shù)人員已知的成分。在特定的實(shí)施方案中，所述制劑為固體劑型，例如膠囊或片劑。所述片劑、丸劑、膠 囊、錠劑等可包含如下任意成分或性質(zhì)類似的化合物結(jié)合劑、稀釋劑、崩解劑、潤滑劑、助 流劑、甜味劑以及調(diào)味劑。結(jié)合劑的示例包括微晶纖維素、黃芪樹膠、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠溶液、蔗 糖和淀粉糊。潤滑劑包括滑石、淀粉、硬脂酸鎂或鈣、石松子和硬脂酸。稀釋劑包括，例如， 乳糖、蔗糖、淀粉、高嶺土、鹽、甘露醇和磷酸二鈣。助流劑包括但不限于膠體二氧化硅。崩 解劑包括交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉乙醇酸鈉、褐藻酸、玉米淀粉、馬鈴著淀粉、膨潤土、甲 基纖維素、瓊脂和羧甲基纖維素。著色劑包括，例如，任意批準(zhǔn)的水溶性FD和C染料，其混 合物；以及懸浮在水合氧化鋁中的水不溶的FD和C染料。甜味劑包括蔗糖、乳糖、甘露醇和 人工甜味劑(如糖精)和任何數(shù)量的噴霧干燥調(diào)味料。調(diào)味劑包括從水果等植物中提取的天然調(diào)味料，以及能產(chǎn)生快感的合成化合物的混合物，例如，但不僅限于，薄荷和水楊酸甲 酯。潤濕劑包括丙二醇單硬脂酸酯，山梨糖醇酐單油酸酯，二甘醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月 桂酸醚。腸溶衣包括脂肪酸、脂肪、蠟、蟲膠、氨化蟲膠和醋酸纖維素鄰苯二甲酸酯。膜覆層 包括羥乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇4000和醋酸纖維素鄰苯二甲酸。當(dāng)需要口服施用時(shí)，所述化合物可提供于在胃內(nèi)的酸性環(huán)境中對其進(jìn)行保護(hù)的組 合物中。例如，所述組合物可配制在能在胃中保持完整性，并在腸中釋放所述活性化合物的 腸溶衣中。所述組合物聯(lián)合解酸劑或其它該類成分進(jìn)行配制。當(dāng)所述劑量單位形式為膠囊時(shí)，除了上述類型的物質(zhì)外，它可包含液體載體(例 如脂肪油)。此外，劑量單位形式可包含各種可改變該劑量單位的物理形式的其它物質(zhì)， 例如，糖衣和其它腸溶劑。所述化合物還可作為酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑、噴灑劑 (sprinkle)、口香糖等施用。糖漿中除了所述活性化合物外可包含作為甜味劑的蔗糖和某 些防腐劑、染料以及著色劑和調(diào)味劑。所述活性物質(zhì)還可與其它不損害所需作用的活性物質(zhì)混合，或者與補(bǔ)充該所需作 用的物質(zhì)(例如解酸劑、H2阻斷劑和利尿劑)相混合。所述活性成分為此處所述的化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物。可包含更高濃度，最高為質(zhì)量比約98%的所述活性成分。包含在片劑中的藥學(xué)上可接受的載體為結(jié)合劑、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、 調(diào)味劑以及潤濕劑。腸溶片劑由于腸溶衣而能抵御胃酸的作用，并在中性或堿性的腸內(nèi)溶 解或崩解。糖衣片為壓縮片劑，其中應(yīng)用了不同層的藥學(xué)上可接受的物質(zhì)。包膜片為壓縮片 劑，其上包被了聚合物或其它適用的覆層。復(fù)壓片為采用前述藥學(xué)上可接受的物質(zhì)通過一 個(gè)以上壓縮循環(huán)壓制的片劑。著色劑也可用于上述劑型。調(diào)味劑和甜味劑可用于壓縮片、 糖衣片、復(fù)壓片和咀嚼片。調(diào)味和甜味劑可特別用于咀嚼片和錠劑的形成。液體口服劑型包括水溶液、乳液、懸浮液、溶液和/或從非泡騰顆粒復(fù)原的懸浮液 以及從泡騰顆粒復(fù)原的泡騰制劑。水溶液包括，例如，酏劑和糖漿。乳液或者為水包油型， 或者為油包水型。酏劑為透明、甜味的水醇制劑。用于酏劑的藥學(xué)上可接受的載體包括溶劑。糖漿為 糖(例如，蔗糖)的濃縮水溶液，并可包含防腐劑。乳液是一種兩相體系，其中一種液體以 細(xì)小顆粒形式完全分散在另一種液體中。用于乳液的藥學(xué)上可接受的載體為非水性液體、 乳化劑和防腐劑。懸浮液使用藥學(xué)上可接受的懸浮劑和防腐劑。用于將復(fù)原為液體口服劑 型的非泡騰顆粒的藥學(xué)上可接受的物質(zhì)包括稀釋劑、甜味劑和潤濕劑。用于將復(fù)原為液體 口服劑型的泡騰顆粒的藥學(xué)上可接受的物質(zhì)包括有機(jī)酸和二氧化碳源。著色劑和調(diào)味劑可 用于上述所有劑型。溶劑包括甘油、山梨醇、乙醇和糖漿。防腐劑的示例包括甘油、尼泊金甲酯和丙酯、 苯甲酸、苯甲酸鈉和乙醇。用于乳液的非水性液體的示例包括礦物油和棉花籽油。乳化劑的 示例包括明膠、阿拉伯樹膠、斑脫土，以及表面活性劑，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。 懸浮劑包括羧甲基纖維素鈉、膠質(zhì)、黃芪膠、硅酸鎂鋁以及阿拉伯樹膠。稀釋劑包括乳糖和 蔗糖。甜味劑包括蔗糖、糖漿、甘油和人工甜味劑如糖精。潤濕劑包括丙二醇單硬脂酸酯、 山梨糖醇酐單油酸酯、二甘醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月桂酸醚。有機(jī)酸包括檸檬酸和酒石 酸。二氧化碳源包括重碳酸鈉和碳酸鈉。著色劑包括任意批準(zhǔn)的水溶性FD和C染料，及其 混合物。調(diào)味劑包括從水果等植物中提取的天然調(diào)味料，以及能產(chǎn)生愉快味覺的合成化合
36物的混合物。對于固體劑型，所述含于例如碳酸丙烯、植物油或甘油三酸酯中的溶液或懸浮液 可裝填在凝膠膠囊中。這種溶液及其制備和膠囊化披露于美國專利4，328，245 ；4, 409，239 和4，410，545。對于液體劑型，所述液體(例如，含于聚乙二醇)可被足量的藥學(xué)上可接受 的液體載體(例如，水)稀釋，從而易于定量施用。可替代地，液體或半固體口服制劑可通過將所述活性化合物或鹽溶解或分散在植 物油、甘油、甘油三酸酯、丙二醇酯(例如碳酸丙二酯)和其它這類載體中，并將這些溶液或 懸浮液包封于硬或軟凝膠膠囊殼中得到制備。其它有用的制劑包括但不限于包含本發(fā)明提 供的化合物，二烷基化單或聚亞烷基二醇，包括但不限于1. 2，2- 二甲氧基甲烷、二甘醇二 甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350- 二甲醚、聚乙二醇-550- 二甲醚、聚乙 二醇-750- 二甲醚，其中350、550和750指該聚乙二醇的大約平均分子量，以及一種或多種 抗氧化劑，例如二丁基羥基甲苯(BHT)、二丁基羥基茴香醚(BHA)、沒食子酸丙酯、維生素E、 對苯二酚、羥基香豆素、乙醇胺，卵磷脂、腦磷脂、抗壞血酸、蘋果酸、山梨糖醇、磷酸、硫二丙 酸及其酯類、和二硫代氨基甲酸鹽的制劑。其它的制劑包括但不限于包含藥學(xué)上可接受的縮醛的水醇溶液。在這類制劑中所 用的醇為具有一個(gè)或多個(gè)羥基基團(tuán)的任意藥學(xué)上可接受的水混溶溶劑，包括但不限于丙二 醇和乙醇?？s醛包括但不限于低級烷基醛(例如乙醛二乙縮醛)的二(低級烷基)縮醛。在所有的實(shí)施方案中，片劑和膠囊制劑可參照本領(lǐng)域技術(shù)人員的已知技術(shù)進(jìn)行包 被，從而改變或維持所述活性成分的溶解。因此，例如，它們可以用常規(guī)的可腸內(nèi)消化的包 衣(例如水楊酸苯酯，蠟和醋酸纖維素鄰苯二甲酸)進(jìn)行包被?？勺⑸湮?、溶液和乳液本發(fā)明也預(yù)期腸胃外施用，其一般特征為通過皮下、肌肉或靜脈注射。可注射物 可制備為常規(guī)形式，可以是液體溶液或懸浮液，適于在注射前配制為溶液或懸浮液的固體 形式，或者作為乳液。適用的賦形劑為，例如，水、鹽水、右旋糖、甘油或乙醇。此外，根據(jù)需 要，待施用的所述藥物組合物還可包含微量的無毒性輔助物質(zhì)，例如潤濕或乳化劑、PH緩 沖劑、穩(wěn)定劑、助溶劑、以及其它該類藥劑，例如，醋酸鈉、山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺 以及環(huán)式糊精。此處還預(yù)期通過緩慢釋放或持續(xù)釋放系統(tǒng)從而維持恒定劑量水平的灌輸。 簡單而言，本發(fā)明提供的化合物被分散在固相內(nèi)部基質(zhì)(solidirmer matrix)，例如聚甲基 丙烯酸甲酯、聚丁基丙烯酸甲酯、塑化或未塑化聚氯乙烯、塑化尼龍、塑化聚乙醇對苯、天然 橡膠、聚異戊二烯、聚異丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡膠、聚二甲基硅 氧烷、碳酸鹽巖有機(jī)硅共聚物、親水聚合物例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝膠、膠原蛋 白、交聯(lián)聚乙烯醇和部分交聯(lián)水解聚醋酸乙烯酯中，該固相內(nèi)部基質(zhì)被不溶于體液的外部 聚合物膜(如聚乙烯、聚丙烯、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡膠、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯 與醋酸乙烯酯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、離子聚對苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡膠、環(huán) 氧氯丙烷橡膠、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物、以及乙烯/乙烯氧 基醇共聚物)所包圍。所述化合物在釋放速率控制步驟中擴(kuò)散通過所述外部聚合物膜。在 這類腸胃外組合物中包含的活性化合物的比例高度依賴于它的特性性質(zhì)，以及該化合物的 活性和個(gè)體需求。所述組合物的腸胃外施用包括靜脈、皮下和肌肉施用。腸胃外施用的制劑包括易
37于注射的無菌溶液、無菌干燥可溶性產(chǎn)品(例如凍干粉)、易于在使用前與溶劑混合的制劑 (例如可皮下注射片劑)、易于注射的無菌懸浮液、易于在使用前與溶媒混合的無菌干燥可 溶性產(chǎn)品以及無菌乳液。所述溶液可以是水性溶液或非性水溶液。在靜脈施用時(shí)，適用的載體包括生理鹽水或磷酸緩沖鹽(PBS)，以及包含增厚劑和 助溶劑(例如，葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物)的溶液。用于腸胃外制劑的藥學(xué)上可接受的載體包括水性溶媒、非水性溶媒、抗菌劑、等張 劑、緩沖液、抗氧化劑、局部麻醉劑、懸浮劑和分散劑、乳化劑、掩蔽劑或螯合劑、以及其它藥 學(xué)上可接受的物質(zhì)。水性溶媒的示例包括氯化鈉注射液、林格注射液、等滲右旋糖注射液、無菌注射用 水、右旋糖和乳酸鹽林格注射液。非水性腸胃外溶媒包括植物來源的不揮發(fā)性油、棉籽油、 玉米油、芝麻油和花生油。應(yīng)向包含苯酚或甲酚、汞制劑、苯甲醇、氯丁醇、甲基和丙基對羥 基苯甲酸酯、硫柳汞、苯扎氯銨和芐索氯銨的包裝于多劑量容器的腸胃外制劑添加抑菌或 抑真菌濃度的抗菌劑。等張劑包括氯化鈉和右旋糖。緩沖液包括磷酸鹽和檸檬酸鹽?？寡?化劑包括硫酸氫鈉。局部麻醉劑包括鹽酸普魯卡因。懸浮和分散劑包括羧甲基纖維素鈉， 羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯酮。乳化劑包括聚山梨醇酯80(TWEEN 80)。金屬離 子的掩蔽和螯合劑包括EDTA。藥學(xué)上可接受的載體還包括用于水混容性溶媒的乙醇、聚乙 二醇和丙二醇；以及用于PH調(diào)節(jié)的氫氧化鈉、鹽酸、檸檬酸或乳酸?？烧{(diào)節(jié)所述藥學(xué)活性化合物的濃度，使得注射提供可生成所需藥理作用的有效 量。如本領(lǐng)域所知，確切劑量取決于該患者或動(dòng)物年齡、體重和狀況。單位劑量的腸胃外制劑包裝于安瓿、小瓶或帶有針頭的注射器中。如本領(lǐng)域已知 和實(shí)踐，所有的腸胃外施用的制劑應(yīng)當(dāng)被滅菌。舉例而言，靜脈或動(dòng)脈輸注包含活性化合物的無菌水溶液是有效的施用模式。另 一實(shí)施方案是包含活性物質(zhì)的無菌水性或油性溶液或懸浮液，根據(jù)需要注射以生成所需的 藥理活性?？勺⑸湮镌O(shè)計(jì)用于局部或全身施用。一般地，治療有效劑量經(jīng)配制包含針對待治 療組織的至少約0. 1 % w/w至約90% w/w或更高，例如超過1 % w/w的活性化合物濃度。該 活性成分可一次施用，或者可被分為一定量的更小劑量，從而以一定的時(shí)間間隔施用。應(yīng)理 解確切的劑量和治療時(shí)間與待治療組織的功能相關(guān)聯(lián)，并可通過已知的測試方案憑經(jīng)驗(yàn) 測定或可從體內(nèi)或體外測試數(shù)據(jù)推斷得到。應(yīng)注意濃度和劑量值也可隨著待治療個(gè)體的年 齡而有所變化。應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步理解對于任何特定的個(gè)體，應(yīng)根據(jù)個(gè)體需求和施用或管理施用 所述組合物的人員的專業(yè)判斷隨時(shí)間調(diào)整具體的劑量方案，且本發(fā)明提供的濃度范圍僅作 為示例，無意對所主張的劑型的范圍或?qū)嵤?gòu)成限制。所述化合物可以被微粒化或其它適當(dāng)?shù)男问奖粦腋?，或者可被衍生化以生成更?易溶的活性產(chǎn)物或生成前藥。所得混合物的形式取決于多種因素，包括目標(biāo)施用模式以及 該化合物在所選載體或溶媒中的可溶性。該有效濃度足以改善疾病的癥狀，并可通過經(jīng)驗(yàn) 確定。凍干粉此處還感興趣的是凍干粉，其可復(fù)原為溶液、乳液和其它混合物進(jìn)行施用。它們還 可被復(fù)原并配制為固體或凝膠。
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所述無菌凍干粉可通過將本發(fā)明提供的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物溶解 于適當(dāng)?shù)娜軇┖笾苽洹Ｋ鋈軇┛砂鰪?qiáng)穩(wěn)定性的賦形劑或所述粉末或由所述粉末制備 的復(fù)原溶液的藥理成分?？墒褂玫馁x形劑包括但不限于右旋糖、山梨醇、果糖、玉米糖漿、木 糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它適當(dāng)?shù)乃巹?。所述溶劑還可包含緩沖液，例如檸檬酸鹽、磷 酸鈉或鉀或者本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它所述類緩沖液，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述緩沖液 約為中性PH。對所述溶液進(jìn)行無菌過濾后，在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行凍干， 以提供所需的劑型。一般而言，所得的溶液將被分配到小瓶中進(jìn)行凍干。每個(gè)小瓶將包含 單獨(dú)劑量(即，10-1000mg或100-500mg)或多重劑量的所述化合物。所述凍干粉將被貯存 在適當(dāng)?shù)臈l件下，例如約4°C下或室溫下。以注射用水復(fù)原所述凍干粉提供了用于腸胃外施用的劑型。為進(jìn)行復(fù)原，可在每 毫升無菌水或其它合適的載體中添加約l_50mg、約5-35mg、或約9_30mg的凍干粉。確切的 量取決于所選的化合物。所述數(shù)量可通過經(jīng)驗(yàn)確定。表面施用可按照描述制備表面施用混合物，以進(jìn)行局部和全身施用。所得混合物可以是 溶液、懸浮液、乳液等，并被配制成乳膏、凝膠、軟膏、乳劑、溶液、酏劑、涂劑、懸浮液、酊劑、 膏齊IJ、泡沫劑、氣霧劑、灌洗劑、噴霧劑、栓劑、繃帶，皮膚貼劑或任意其它適于表面施用的劑 型。所述化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物可被配制成氣霧劑以進(jìn)行表面應(yīng)用，例如 吸入(例如，參見美國專利4，044，126,4, 414，209和4，364，923，其描述了傳遞可用于治療 炎性疾病(特別是哮喘)的類固醇的氣霧劑)。用于向呼吸道施用的所述類劑型可作為用 于噴霧器的氣霧劑或溶液，或者作為吸入的微細(xì)粉末，其可單獨(dú)使用或與乳糖等惰性載體 混合。在這個(gè)情況下，所述劑型的顆粒將具有小于50微米或小于10微米的直徑。所述化合物可配制成表面應(yīng)用，例如以凝膠、乳膏和涂劑的形式表面應(yīng)用于(例 如眼中的)皮膚和粘膜，并應(yīng)用于眼部或腦池內(nèi)或椎管內(nèi)。在透皮遞送和向眼部或粘膜施 用，或者吸入療法中可考慮表面施用。也可施用活性化合物單獨(dú)的或其與其它藥學(xué)上可接 受的賦形劑聯(lián)合的鼻部溶液。這些溶液，特別是針對眼部使用的溶液，可用適當(dāng)?shù)柠}配制為pH約5-7的 0.01% -10%等張溶液。用于其它施用途徑的組合物本發(fā)明還預(yù)期其它施用途徑，例如表面應(yīng)用、透皮貼劑以及直腸施用。舉例來說，用于直腸施用的藥物劑型為用于全身作用的直腸栓劑、膠囊和片劑。此 處所用的直腸栓劑指用于插入直腸的固體，其在體溫下溶化或軟化，從而釋放一種或多種 藥理或治療活性成分。用于直腸栓劑的藥學(xué)上可接受的物質(zhì)為基質(zhì)或溶媒以及提高熔點(diǎn)的 藥劑。基質(zhì)的示例包括可可脂(可可油)，甘油-明膠，carbowax (聚乙二醇)和脂肪酸的 單、雙和甘油三酸脂的適當(dāng)混合物?？墒褂酶鞣N基質(zhì)的組合。用于提高栓劑熔點(diǎn)的藥劑包 括鯨蠟和蠟。直腸栓劑可通過壓縮法或通過制模進(jìn)行制備。直腸栓劑的示例性重量為約2 至3克。用于直腸施用的片劑和膠囊可采用相同的藥學(xué)上可接受的物質(zhì)，通過口服施用制 劑相同的方法進(jìn)行制備。
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緩釋組合物本發(fā)明提供的活性成分可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的控釋方式或遞送裝置 施用。其示例包括但不限于披露于美國專利3，845，770,3, 916，899,3, 536，809,3, 598，123、 和 4，008，719,5, 674，533,5, 059，595,5, 591，767,5, 120，548,5, 073，543,5, 639，476、 5，354，556,5，639，480,5，733，566,5，739，108,5，891，474,5，922，356,5，972，891, 5，980，945,5，993，855,6，045，830,6，087，324,6，113，943,6，197，350,6，248，363, 6，264，970,6, 267，981,6, 376，461,6, 419，961,6, 589，548,6, 613，358,6, 699，500 以及 6，740，634的內(nèi)容，其內(nèi)容分別在此引用作為參考。所述劑型可通過使用如羥丙基甲基纖維 素、其它聚合物質(zhì)、凝膠、滲透膜、滲透系統(tǒng)、多層涂層、微顆粒、脂質(zhì)體、微球體或其組合以 不同比例提供所需的釋放曲線從而用于提供一種或多種活性成分的緩釋或控釋。本領(lǐng)域技 術(shù)人員已知的適用控釋劑型(包括此處所述的劑型)可容易地選擇用于本發(fā)明提供的活性 成分。所有的控釋藥物產(chǎn)品的共同目標(biāo)為較其非控釋對照改進(jìn)藥物療法。在一個(gè)實(shí)施方 案中，一種優(yōu)化設(shè)計(jì)的控釋制劑在藥物治療中的使用特征為通過最小量的藥物治愈或在最 短的時(shí)間內(nèi)控制癥狀。在特定的實(shí)施方案中，控釋制劑的優(yōu)點(diǎn)包括延長藥物的活性、減少用 藥頻率以及提高患者適應(yīng)性。此外，控釋制劑可用于影響作用發(fā)生的時(shí)間以及其它特征，例 如藥物的血液水平以及從而影響副作用(例如，不良作用)的發(fā)生。大多控釋制劑被設(shè)計(jì)成最初釋放能夠迅速產(chǎn)生所需療效的藥物(活性成分)量， 然后逐漸并且持續(xù)釋放另一藥物量以在更長時(shí)間內(nèi)維持這種治療或預(yù)防效果的水平。為在 體內(nèi)維持這種藥物的恒定水平，所述藥物應(yīng)當(dāng)從所述劑型中以一定速率釋放從而能夠取代 被代謝或從體內(nèi)排泄的藥物量。活性成分的控釋可受到各種條件刺激，包括但不限于PH、溫 度、酶、水或其它生理?xiàng)l件或化合物。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑可通過靜脈輸注、植入性滲透泵、透皮貼劑、脂 質(zhì)體或其它施用模式進(jìn)行施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，可使用泵(例如，參見CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14 201(1987) ；Buchwald 等人，Surgery 88 507(1980) ；Saudek 等人， N.Engl. J.Med. 321 :574(1989))。在另一實(shí)施方案中，可施用聚合材料。在另一實(shí)施方 案中，控釋系統(tǒng)可被放置在治療靶標(biāo)附近，即，從而僅需要全身劑量的一部分(例如，參見 Goodson，Medical Applicationsof Controlled Release，vol. 2，第 115-138 頁(1984)。在部分實(shí)施方案中，控釋裝置被導(dǎo)入個(gè)體體內(nèi)不適當(dāng)免疫激活或腫瘤位點(diǎn)的附 近。其它控釋系統(tǒng)在Langer (Science 249 1527-1533 (1990))的綜述中被討論。所述活性 成分被分散在固相內(nèi)部基質(zhì)(solid inner matrix)，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚丁基丙烯 酸甲酯、塑化或未塑化聚氯乙烯、塑化尼龍、塑化聚乙醇對苯，天然橡膠，聚異戊二烯、聚異 丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡膠、聚二甲基硅氧烷、碳酸鹽巖有機(jī)硅 共聚物、親水聚合物例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝膠、膠原蛋白、交聯(lián)聚乙烯醇和部 分交聯(lián)水解聚醋酸乙烯酯中，該固相內(nèi)部基質(zhì)被不溶于體液的外部聚合物膜(如聚乙烯、 聚丙烯、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡膠、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯與醋酸乙烯酯共聚物、 偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、離子聚對苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡膠、環(huán)氧氯丙烷橡膠、乙烯/ 乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物、以及乙烯/乙烯氧基醇共聚物)所包圍。 然后所述活性成分在釋放速率控制步驟中擴(kuò)散通過所述外部聚合物膜。在這類腸胃外組合
40物中包含的活性成分的比例高度依賴于它的特殊性質(zhì)，以及個(gè)體需求。靶向劑型本發(fā)明提供的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物還可配制為靶向待治療個(gè)體的 身體的特定組織、受體或其它區(qū)域。許多這類靶向方法已為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知。所有 這種靶向方法均預(yù)期用于本發(fā)明的組合物。靶向方法的非限制性示例可參見，例如，美國 專利 6，316，652,6, 274，552,6, 271，359,6, 253，872,6, 139，865,6, 131，570,6, 120，751、 6，071，495,6，060，082,6，048，736,6，039，975,6，004，534,5，985，307,5，972，366, 5，900，252,5, 840，674,5, 759，542 和 5，709，874。在一個(gè)實(shí)施方案中，包含組織靶向脂質(zhì)體(例如，腫瘤靶向脂質(zhì)體)的脂質(zhì)體懸浮 液也可被用作藥學(xué)上可接受的載體。這些可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行制備。例 如，脂質(zhì)體制劑可參照美國專利4，522，811所述進(jìn)行制備。簡單而言，可通過在燒瓶中干燥 蛋磷脂酰膽堿和腦磷脂酰絲氨酸(摩爾比7 3)形成如多層囊泡(MLV)等脂質(zhì)體。添加 含于缺乏二價(jià)陽離子的磷酸鹽緩沖液(PBS)中的本發(fā)明化合物的溶液，然后振蕩燒瓶直至 脂質(zhì)膜分散。洗滌所得囊泡以去除未封裝的化合物，離心稱為圓球，然后重懸浮于PBS。制造物品所述化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物可被包裝為包括包裝材料、本發(fā)明提供的 化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物(其可用于治療、預(yù)防或改善與激酶活性，包括但不限 于GSK-3活性相關(guān)的一種或多種癥狀)，以及說明所述化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物 可用于治療、預(yù)防活改善激酶介導(dǎo)的疾病的一種或多種癥狀(包括但不限于GSK-3介導(dǎo)的 疾病)標(biāo)簽的制造物品。本發(fā)明提供的物品包括包裝材料。用于包裝藥物產(chǎn)品的包裝材料已為本領(lǐng)域技術(shù) 人員公知。例如，參見美國專利5，323，907,5, 052，558和5，033，252。藥物包裝材料的示例 包括但不限于泡罩包裝、瓶、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶以及適用于選定劑型 及目標(biāo)施用和治療模式的任意包裝材料。本發(fā)明包括本發(fā)明化合物和組合物的多種劑型。E.治療方法 本發(fā)明還提供了所述化合物和組合物的使用方法。所述方法同時(shí)包括所述化合物 和組合物的體外和體內(nèi)使用。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通過施用本發(fā)明化合物和組合物抑制GSK-3作 用的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括將GSK-3與本發(fā)明提供的化合物接觸。F.化合物活性的評估本發(fā)明提供的化合物的GSK3抑制活性可采用此處所述的實(shí)驗(yàn)以及本領(lǐng)域普通技 術(shù)人員公知的實(shí)驗(yàn)簡單地檢測。用于鑒定GSK3特異性抑制劑的示例性方法包括無細(xì)胞和基于細(xì)胞的GSK3激酶實(shí) 驗(yàn)。無細(xì)胞GSK3激酶實(shí)驗(yàn)檢測通過與多肽GSK3直接相互作用來發(fā)揮功能的抑制劑，而基 于細(xì)胞的GSK3激酶實(shí)驗(yàn)即可以檢測通過與GSK3本身直接相互作用來發(fā)揮功能的抑制劑也 可以檢測通過干擾GSK3表達(dá)或者干擾生成成熟活性GSK3所需的翻譯后加工來發(fā)揮功能的 抑制劑。美國申請20050054663描述了示例性的無細(xì)胞和基于細(xì)胞的GSK3激酶實(shí)驗(yàn)。此 處所用的示例性實(shí)驗(yàn)簡述如下在30 °C 下 20mM MOPS, pH 7. 0(10mM 乙酸鎂、0. 2mM EDTA、2mMEGTA、30mM 氯
41化鎂、62. 5 ii M磷酸-糖原合成酶肽-2、5 ii M ATP、10mM^-磷酸甘油、ImM原釩酸鈉和 ImM 二硫蘇糖醇)中存在或不存在不同濃度化合物的條件下，孵育10-25ng重組全長人 GSK3 0 (Upstate) 1小時(shí)。然后進(jìn)行KinaseGlo螢光素酶反應(yīng)。激酶反應(yīng)完成后，添加等體積的KinaseGlo螢光素酶試劑(Promega)，在5-10分鐘 內(nèi)用發(fā)光板讀取器讀取發(fā)光。化合物活性表達(dá)為相對于最大劑量下觀察到的最大抑制的抑 制百分比，然后使用曲線擬合軟件(GraphPad Prizm)計(jì)算IC5(1值。
實(shí)施例實(shí)施例1 8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[2_(2_吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)戊 烷-1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸1A)3-[1_(羥甲基)環(huán)戊氨基]-2-(2，3，4，5_四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯的制備。 將3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(3. 17g，12mmol)、乙酸酐(3. 34mL, 3. 6g,30mmol)和原甲酸三乙酯(3. OOmL, 2. 6g，18mmol)的攪拌溶液在130°C下加熱1. 5小 時(shí)。將該混合物真空濃縮并高真空干燥3小時(shí)。將粗產(chǎn)物溶解于Et0H(15mL)，并冷卻至0°C， 然后極為緩慢地添加1-氨基-1-環(huán)戊烷甲醇(1.01g，8.8mmol)。1.5小時(shí)后，蒸發(fā)去除溶 劑以得到成為黃色油的標(biāo)題化合物(3. lg粗產(chǎn)物)，其可不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。1B)9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3 ‘ (2 ‘ H)-[7H]吡啶并[1，2， 3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。向3-[1_(羥甲基)環(huán)戊氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲?；?丙烯酸酯(570mg， 1. 46mmol)的THF(lOmL)溶液在冰冷下添加K0H(164mg，2. 93mmol)的碎片。1. 5小時(shí)后添 加更多的K0H(80mg，1. 42mmol)，然后將反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌過夜。用0. 5N HC1 酸化該反應(yīng)混合物至PH2。過濾收集白色沉淀物以得到可用于下一步驟的粗制標(biāo)題化合物 (454mg, 1. 3mmol,89% )。1C)9' ,10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3' (2 ‘ H)-[7H]吡啶并[1，2， 3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。
將9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3' (2 ‘ H)-[7H]吡啶并[1，2， 3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(13. 2g，38mmol)在乙酸 / 水/H2S04(8 6 lv/v, 75mL)混合物中的溶液回流加熱2小時(shí)。將該反應(yīng)混合物注入冰水。形成沉淀物并通過過 濾收集，用水洗滌，然后干燥得到成為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(10. 5g，32. 7mmol,86% )。ID) 9'，10' -二氟-8'-硝基 _7'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3' (2' H)-[7H]吡 啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6-羧酸的制備。將9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[1，2， 3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(1.8g，5.6mm0l)在濃H2S04(10mL)中的溶液在0°C下用 固體KN03(736mg，7. 29mmol)分批處理。0°C下攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入500mL冰 水中，過濾所得的沉淀物，并用冰水洗滌。干燥所得的固體得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合 物(1.8g,88% )。IE)8'-氨基-9'，10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3' (2' H)-[7H]吡 啶并[1,2, 3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。將9'，10' -二氟-8'-硝基-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)戊烷-1，3' (2' H)-[7H]吡啶 并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(3.9g，0.01mmol)的乙醇 / 乙酸(1 1, v/v, lOOmL)溶液在大氣壓下10% Pd/C(390mg)上80°C下氫化18小時(shí)。然后添加200mL DMF， 加熱該反應(yīng)混合物至澄清。在Celite過濾去除催化劑，將其用熱DMF洗滌兩次，將合并的 濾出液真空干燥得到標(biāo)題化合物(2. 85g，73% )，其作為粗品用于下一步驟。
1F)8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[2_(2_吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán) 戊烷-1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。
將8'-氨基-9' 10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，3' (2' H)-[7H]吡啶 并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(500mg, 1. 37mmol)和 N_ (2-吡啶基)-1，2-乙 二胺(226mg，1. 64mmol)以及19 y L三乙胺在DMSO(5mL)中的溶液90°C下攪拌24小時(shí)。 將反應(yīng)混合物注入水中，過濾收集形成的沉淀物。使粗制產(chǎn)品通過硅膠柱(CH2C12/CH30H 10 lv/v)，然后從二乙醚重結(jié)晶得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(284mg，42%)。MS(EP) m/z 454 (M++1)。(計(jì)算得到 C23H24FN504，453. 18)。實(shí)施例2 8-氨基-9-氟-10- (2- (4_甲基喹啉_2_基氨基)-乙氨基)_7_氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。將8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_i j]-喹啉 _3， 1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸(13mg，0. 04mmol)、m-(4-甲基喹啉-2-基)乙烷-1，2-二胺(10mg， 0. 05mmol)和11 y L三乙胺在DMS0(0. 3mL)中的溶液在90°C下攪拌72小時(shí)。冷卻該反應(yīng) 混合物并凍干過夜。將粗產(chǎn)物投入CH2C12，通過制備TLC純化得到成為黃色固體的8-氨 基-9-氟-10-(2-(4-甲基喹啉-2-基氨基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪 [2,3,4-ij]喹啉 _3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸(0. 8mg,4% )0 MS(EP)m/z :518(礦+1)。(計(jì)算 得到 C28H28FN504，517.21)。實(shí)施例3 :10-(3-(lH-l，2，4-三唑-1-基)丙基氨基)_8_氨基_9_氟_7_氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 將 8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_i j]-喹啉 _3， 1 ‘-環(huán)戊烷]-6-羧酸(13mg，0.04mmol)、3-(-lH-l，2，4-三唑-1-基)丙-1-胺(5mg， 0. 04mmol)和5. 5 y L三乙胺在DMS0(0. 3mL)中的溶液在90°C下攪拌24小時(shí)。冷卻該 反應(yīng)混合物并凍干過夜。將粗產(chǎn)物投入ACN，并通過制備HPLC純化得到成為黃色固體的 10-(3-(111-1，2，4-三唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4] 噁嗪[2，3，4-ij]喹啉 _3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸(3. 2mg,18% ) MS (EP)m/z :443 (M++1)。
(計(jì)算得到 C21H23FN604，442. 18)。實(shí)施例4 :8_氨基-9-氟-10-(3-(4-氟苯基)丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(3-(4-氟苯基)丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)-[[1，4]噁 嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似 的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 470 (M++1)。(計(jì)算得到 C25H25F2N304,469. 18)。實(shí)施例5 8-氨基-10-(3-(3，4_ 二氫喹啉_1(2H)_基)_丙基氨 基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧 酸。
8-氨基-10-(3-(3，4-二氫喹啉-1(2H)_ 基)丙基氨基)_9_ 氟 _7_ 氧 _2，7_ 二 氫螺環(huán)_[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸采用與 上述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :507(M++1)。(計(jì)算得到C28H31FN404， 506. 23)。實(shí)施例6 8-氨基-10- (4- (4-氯苯基)丁 _2_基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(4-(4-氯苯基)丁 _2_ 基氨基)_9_ 氟 _7_ 氧 _2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類 似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 500 (M++1)。(計(jì)算得到 C26H27C1FN304,499. 17)。實(shí)施例7 8-氨基-9-氟-10- (3-(呋喃_2_氨甲酰)_丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二
瞧O O氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-9-氟-10- (3-(呋喃_2_氨甲酰)丙基氨基)~7~氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似 的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 485 (M"+l)。(計(jì)算得到 C24H25FN406,484. 18)。實(shí)施例8 8-氨基-10-(3-(金剛烷氨甲酰)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2,3,4-ij]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基_10-(3-(金剛烷氨甲酰)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似 的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 553 (M++1)。(計(jì)算得到 C3(1H37FN405，552. 27)。實(shí)施例9 :8_氨基-9-氟-10-(2-(4-氟苯氧基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2,3,4-ij]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(2-(4-氟苯氧基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]嚼 嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的 合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 472 (M++1)。(計(jì)算得到 C24H23F2N305，471. 16)。實(shí)施例10 :8_氨基-10-(2-(4-氯-3-甲基苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-10-(2-(4-氯-3-甲基苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例 所述類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 502 (M++1)。(計(jì)算得到C25H25C1FN305，501. 15)。實(shí)施例11 10-(2-(1H-吲哚-3-基硫)乙氨基)_8_氨基_9_氟_7_氧_2，7_ 二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
10-(2-(1H-吲哚-3-基硫)乙氨基)_8_氨基_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類 似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 509 (M++1)。(計(jì)算得到 C26H25FN404S, 508. 16)。實(shí)施例12 :8_氨基-10-(2-(4-氯苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3-1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。8-氨基-10-(2-(4-氯苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]嚼 嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的 合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 487. 9 (M++1)。(計(jì)算得到 C24H23C1FN305，487. 13)。實(shí)施例13 :8-氨基-10-(2-(2，4-二氯苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-10-(2-(2，4-二氯苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述 類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z :521.9(M++1)。(計(jì)算得到 C24H22C12FN305, 521. 09)。實(shí)施例14 :8-氨基-10-(3-(3，4-二甲氧基苯基)丙基氨基)_9_氟-氧_2，7_ 二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(3-(3，4-二甲氧基苯基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述 類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z :512(M++1)。(計(jì)算得到C27H30FN306，511. 21)。實(shí)施例15 8-氨基-10-(2_(2，6- 二甲基喹啉_4_基氨基)-乙氨 基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(2-(2，6-二甲基喹啉-4-基氨基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸采用與 上述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :532(M++1)。(計(jì)算得到C29H3(lFN504， 531. 23)。實(shí)施例16:8-氨基-9-氟-10-(2_(3-甲基-1H_1，2，4-三唑-5-基硫)乙氨 基)-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-9-氟-10-(2-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基硫)乙氨基)_7_ 氧 _2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z :474.9(M++1)。(計(jì)算得到C21H23FN604S， 474. 15)。實(shí)施例17 :8_氨基-10-(2-(4-環(huán)己基苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(2-(4-環(huán)己基苯氧基)乙氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似 的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 536 (M++1)。(計(jì)算得到 C3(1H34FN305，535. 25)。實(shí)施例18 8-氨基-9-氟-10-(2-(1-甲基-1H-咪唑_2_基硫)_乙氨 基)-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基硫)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-i j]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10- 二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-i j]-喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例 所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :474(M++1)。(計(jì)算得到C22H24FN504S,473. 15)。實(shí)施例19 8-氨基-9-氟-7-氧-10- (2_ (哌啶基磺酰基)-乙氨基)_2，7_ 二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(哌啶-1-基磺?；?乙氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-i j]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類 似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 509 (M++1)。(計(jì)算得到 C23H29FN406S，508. 18)。實(shí)施例20 :8-氨基-10-(2_(1，1-二氧-1H-1X-6-苯并[d]異噻唑-3-基氨基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧
酸。
8-氨基-10-(2-(1，1_ 二氧-1H-1X-6-苯并[d]異噻唑-3-基氨基)乙氨 基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可 由 8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]_ 噁嗪[2，3，4-0_]-喹啉-3，1'-環(huán) 戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :541.9(M++1)。 (計(jì)算得到 C25H24FN506S, 541. 14)。實(shí)施例21 :8_氨基-9-氟-7-氧-10-(2_(1-苯基-1H-四唑-5-基硫)乙氨基)_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(1-苯基-1H-四唑-5-基硫)乙氨基)_2，7_ 二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-i j]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10- 二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-i j]-喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例 所述類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 538 (M++1)。(計(jì)算得到C25H24FN704S，537. 16)。實(shí)施例22 :10-(3-(lH-苯并[d]咪唑基)_2_羥基丙基氨基)_8_氨 基-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-i j]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 10- (3- (1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-羥基丙基氨基)-8-氨基_9_氟氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-i j]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)-[[1，4]噁嗪-[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上 述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :508.0(M++1)。(計(jì)算得到C26H26FN505， 507. 19)。實(shí)施例23:8-氨基-10-(3_(乙基(苯基)氨基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3)4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-10-(3-(乙基(苯基)氨基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例 所述類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 495 (M++1)。(計(jì)算得到C27H31FN404,494. 23)。實(shí)施例24 :8_氨基-9-氟-10-(2-( 二氫吲哚-1-基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2,3,4-ij]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(2-( 二氫吲哚-1-基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類 似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 479 (M++1)。(計(jì)算得到C26H27FN404，478. 20)。實(shí)施例25 :8_氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(對甲苯氧基)乙氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(對甲苯氧基)乙氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]嚼 嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的 合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 468 (M++1)。(計(jì)算得到 C25H26FN305,467. 19)。實(shí)施例26 :8_氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)_2，7_ 二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2,3,4-ij]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1,4] 噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似 的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 453 (M++1)。(計(jì)算得到 C24H25FN404，452. 19)。實(shí)施例27 :8_氨基-10-(3-(2-氯苯基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(3-(2-氯苯基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]嚼 嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的 合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 486 (M++1)。(計(jì)算得到 C25H25C1FN304,485. 15)。實(shí)施例28 8-氨基-9-氟-10- (3_ (4_甲氧基苯基)丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-9-氟-10-(3-(4-甲氧基苯基)丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似 的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 482 (M++1)。(計(jì)算得到 C26H28FN305，481. 20)。實(shí)施例29 :8_氨基-10-(3-(3，4-二乙氧基苯基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(3-(3，4-二乙氧基苯基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述 類似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 540 (M++1)。(計(jì)算得到C29H34FN306，539. 24)。實(shí)施例30 8-氨基-9-氟-10- (2_ (2-甲基喹啉_4_基氨基)-乙氨基)_7_氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(2-(2-甲基喹啉-4-基氨基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述 類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :518(M++1)。(計(jì)算得到C28H28FN504，517. 21)。實(shí)施例31 8-氨基-10- (4- (2_氯苯基)丁 _2_基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-10-(4-(2-氯苯基)丁 _2_ 基氨基)_9_ 氟 _7_ 氧 _2，7_ 二氫螺環(huán)-[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例 所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :500(M++1)。(計(jì)算得到C26H27C1FN304，499. 17)。實(shí)施例32 :8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)丙基 氨基)-2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸。 8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3_(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)丙基氨基)_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸采用與 上述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :484(M++1)。(計(jì)算得到C25H3(lFN504， 483. 23)。實(shí)施例33 :8_氨基-9-氟-10-(3-(3-甲氧基苯基)丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(3-(3-甲氧基苯基)丙基氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類 似的合成步驟制備得到。MS (EP)m/z 482 (M++1)。(計(jì)算得到C26H28FN305，481. 20)。實(shí)施例34 8-氨基-9-氟_10_ (2_ (4-甲氧基苯氧基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫 螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 8-氨基-9-氟-10-(2-(4-甲氧基苯氧基)乙氨基)_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述 類似的合成步驟制備得到。MS(EP)m/z :484(M++1)。(計(jì)算得到C25H26FN306,483. 18)。實(shí)施例35 8-氨基-9-氟-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)-6-1H-四唑_5_基)螺環(huán)-[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-7 (2H)-酮鹽酸化物35A)9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉_3，
1'-環(huán)戊烷]-6-氨甲酰的制備。 將9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉-3， 1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸(3g,8. 2mmol)懸浮于S0C12 (25ml)，回流3小時(shí)，直至得到澄清溶 液。反應(yīng)完成后，真空去除S0C12。用二噁烷稀釋剩余的固體，并在冰浴中冷卻。在劇烈攪 拌下小心添加濃NH40H溶液。形成沉淀物，通過過濾采集，并用水洗滌。將固體真空干燥得 到2.2g(75%產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。該化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。35B)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉-3，
1'-環(huán)戊烷]-6-氨甲酰的制備。 向9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1'-環(huán)戊烷]-6-氨甲酰(lg，2. 7mmol)的水/甲醇混合物(1 lv/v,30mL)的懸浮液中 添加連二亞硫酸鈉(Na2S204，3. 75g,22mmol)。將該懸浮液回流5小時(shí)，直至所有的起始原料 消失。完成后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并添加50ml水。20分鐘后，通過過濾收集淺黃色 固體，并用水洗滌。真空干燥固體得到660mg(73%產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物，其可不經(jīng)進(jìn)一步純 化用于下一步驟。35C)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉-3，
1-環(huán)戊烷]-6-腈的制備。 向8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1'-環(huán)戊烷]-6-氨甲酰(lg，2.9mmol)和三乙胺(2mL, lOmmol.)在DCM(20ml)中的冷溶 液中逐滴添加P0C13(780 u 1,8. 7mmol.)，并在0°C下額外攪拌5小時(shí)。形成深色的混合物。 反應(yīng)完全后，真空去除DCM，并用水洗滌該殘留物數(shù)次。將固體真空干燥得到540mg(58.7% 產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。該產(chǎn)物除了在DMF和DMS0外都非常易溶，并可不經(jīng)進(jìn)一步純化用于 下一步驟。350)8-氨基-9，10-二氟-6-(111-四唑-5-基)螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹
啉_3，1'-環(huán)戊烷]_7(2H)_酮的制備。 向腈 8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1-環(huán)戊烷]-6-腈(180mg,0. 56mmol)在異丙醇和水(1 lv/v, 15ml)中的混合物中添加 80mg疊氮化鈉(1. 14mmole)和170mg氯化鋅(1. 14mmole)。將混合物加熱至110°C達(dá)18小 時(shí)。過濾收集沉淀物并用水洗滌。將固體真空干燥得到135mg(67%產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。 該化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。 35E) 8-氨基-9-氟-10- (3_ (吡啶_2_基)-丙基氨基)-6-1H-四唑_5_基)螺環(huán)噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_7(2H)_酮鹽酸化物的制備。 MS (EP)m/z All. 5 (M+l)。(計(jì)算得到 C24H25FN802，476. 51)。化合物36-42可由8_氨基-9，10- 二氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán)[1，4]噁嗪[2，3， 4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-腈或8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁 嗪[2，3，4-ij]_喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸采用與上述實(shí)施例所述類似的合成步驟制備 得到。實(shí)施例36 :8_氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)_2，7_ 二氫螺 環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-腈鹽酸化物。 MS (EP)m/z 434. 4 (M+l)。(計(jì)算得到 C24H24FN502，433. 48)。實(shí)施例37 :10-(3-(lH-咪唑-1-基)丙基氨基)_8_氨基_9_氟_7_氧_2，7_ 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-腈鹽酸化物的制備。
MS (EP)m/z 423. 4 (M+l)。(計(jì)算得到 C22H23FN602，422. 46)。實(shí)施例38 :8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)丙基 氨基)-2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_腈鹽酸化物。 MS (EP)m/z 465. 5 (M+l)。(計(jì)算得到 C25H29FN602，464. 54)。實(shí)施例39 :8_氨基-9-氟-10-(3-(4_氟苯基)-3-(4_甲氧基苯基)丙基氨 基)-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸。 MS (EP)m/z 576. 6 (M+l)。(計(jì)算得到 C32H31F2N305，575. 6)。實(shí)施例40 :8_氨基-10-(3-(4-氯苯基)丙基氨基)_9_氟_7_氧_2，7_ 二氫螺環(huán) [[1,4]噁嗪[2,3,4-ij]喹啉-3，1-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 MS (EP)m/z 486. 9 (M+l)。(計(jì)算得到 C25H25C1FN304，485. 94)。實(shí)施例41 8-氨基-10-(3-(3，5- 二甲基-1H-吡唑基)丙基氨 基)-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧
酸。 MS (EP)m/z 470. 5 (M+l)。(計(jì)算得到 C24H28FN504，469. 51)。實(shí)施例42 :8_氨基-9-氟-10-(3-(5_甲基_1H_吡唑_4_基)丙基氨基)_7_氧_2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 MS (EP)m/z 456 (M+l)。(計(jì)算得到 C23H26FN504，455. 48)。實(shí)施例43 8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[3_(1_咪唑)丙基]螺環(huán)[環(huán)戊烷-1， 3' -(2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-甲脒43A)8'-氨基 _9'，10' -二氟 _7'-氧螺環(huán) _ [環(huán)戊烷 _1，3 ‘ (2' H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-甲脒的制備。 向8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[1，4]噁嗪-[2，3，4_i j]喹啉 _3， 1'-環(huán)戊烷]-6-腈(400mg，1. 26mmol)在5ml乙醇/ 二甲基甲酰胺(50 50，v v)中 的溶液中添加氫氧化銨(260mg，3. 78mmol)和碳酸鉀(521mg，3. 78mmol)。將反應(yīng)混合物加 熱至回流達(dá)3小時(shí)，然后冷卻至室溫。濾走未溶解的無機(jī)物質(zhì)，真空濃縮濾出液得到固體物 質(zhì)，將其重懸浮于甲醇(50mL)中，過濾，用甲醇洗滌，并真空干燥得到成為黃色固體的標(biāo)題 化合物(200mg，45%產(chǎn)率)。MS (EP)m/z 351 (M+l)。(計(jì)算得到 C16H16F2N403, 350. 12)。43B)8'-氨基-9'-氟-氧-10' -[3_(1_咪唑基)-丙基]螺環(huán)[環(huán)戊 烷-1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-甲脒的制備。
該標(biāo)題化合物可參照上文步驟由8'-氨基-9' ,10' -二氟-7'-氧螺環(huán)-[環(huán) 戊烷_1，3' (2' 11)-[711]吡啶并[1，2，3-(16][1，4]苯并噁嗪]-6'-甲脒制備得到。MS(EP) m/z 426. 4 (M+l)。(計(jì)算得到 C19H20FN902 , 42 5 . 42)。實(shí)施例44 8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' _[2_(吡啶_2_基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán) Tg-1，3(2H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]_6'-羧酸44A)3-[1_(羥甲基)環(huán)丁氨基]_2_ (2，3，4，5_四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯的制 將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(2. 00g，7. 57mmol)、 Ac20(4. 29mL,45. 4mmol)和原甲酸三乙酯(2. 51mL，15. lmmol)的溶液在 120°C 下加熱 3 小時(shí)。真空濃縮該混合物并高真空干燥。將粗產(chǎn)物溶解于甲苯(30mL)，并在冰冷下添加 (1-氨基環(huán)丁基)甲醇(1.04g，7. 57mmol)在甲苯(5mL)中的懸浮液、三乙胺(1. 06mL， 7.57mmol)。將混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，并真空濃縮得到粗產(chǎn)物。通過柱層析(己 烷EtOAc 10 1 — 1 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為白色固體的標(biāo)題化合物(1.57g， 55% )。(400MHz，CDC13) 8 0. 95-1. 11 (3H，m)，1. 85-1. 90 (1H，m)，1. 91-2. 07 (2H，m)， 2. 17-2. 26 (2H, m)，2. 27-2. 36 (2H, m)，3. 80-3. 83 (2H, m)，4. 00-4. 10 (2H, m)，6. 95-7. 13 (1H, m) ,8. 17-8. 22 (1H, m) ,9. 87-11. 36 (1H, m). ESIMS (+) :376[M+H]+。44B)9‘，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3‘ (2' H)-[7H]吡啶并[1，2， 3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。
在氬氣氛圍下，將3-[1_(羥甲基)環(huán)丁氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙 烯酸乙酯(1. 52g，4. 05mmol)的DMF(lOmL)溶液添加至冰冷的含于油的60% NaH(356mg,
8. 91mmol)在DMF (10mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物攪拌4小時(shí)，并注入冰水中。用AcOEt 萃取產(chǎn)物，用MgS04干燥并通過柱層析(己烷EtOAc 2 1—AcOEt)純化該粗產(chǎn)物以得 到成為白色固體的標(biāo)題化合物(604mg，44% )。Mp 255-256°C . 'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 29 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 91-2. 07 (2H, m)，2. 16-2. 22 (2H, m)，2. 65-2. 76 (2H, m)， 4. 24 (2H, q, J_7. 3Hz)，4. 62 (2H, s)，7. 62 (1H, dd, J = 10. 4，7. 9Hz)，8. 80 (1H, s) ESIMS (+) 336[M+H]+。 44C)9'，10' -二氟 _8'-硝基 _7 ‘-氧螺環(huán) _ [環(huán)丁烷 _1，3 ‘ (2' H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。 將9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3' (2 ‘ H)-[7H]吡啶并[1， 2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(580mg, 1. 73mmol)在濃 H2S04(7mL)中的溶液 在0°C下用固體KN03(245mg，2.42mmol)分批處理。將反應(yīng)混合物在0 °C下攪拌1小時(shí)， 并注入冰水中。過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌，并干燥得到成為淺黃色固體的標(biāo)題化 合物(600mg，91 % )。i-WR(400MHz，DMS0d6) 8 1. 30 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 93-2. 09 (2H, m)，2. 16-2. 25 (2H, m)，2. 73-2. 80 (2H, m)，4. 26 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 69 (2H, s)，8. 87 (1H, s). ESIMS(+) :381[M+H] +。44D)8'-氨基-9' ,10' -二氟-7'-氧螺環(huán) _ [環(huán)丁烷 _1，3 ‘ (2' H)-[7H] 吡啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。
將9'，10' -二氟-8'-硝基-7'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3 ‘ (2' H)-[7H]吡 啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(580mg, 1. 53mmol)在 DMF(30mL)中的 溶液在50°C氫氣氛圍下用10%Pd/C(60mg)處理3小時(shí)。用Celite過濾除去催化劑，并將 濾出液注入冰水中。攪拌1小時(shí)后過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌，并干燥得到成為淺黃 色固體的標(biāo)題化合物(468mg,88% )。t-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 29 (3H, t, J = 7. 3Hz)， 1. 92-2. 02 (2H, m)，2. 10-2. 19 (2H, m)，2. 61-2. 69 (2H, m)，4. 23 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 39 (2H, s)，7. 38 (2H, brs) ,8. 65 (1H, brs). ESIMS (+) :351[M+H]+。44E)8'-氨基-9'，10' -二氟 _7'-氧螺環(huán) _ [環(huán)丁烷 _1，3 ‘ (2' H)-[7H] 吡啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。
將8'-氨基-9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3' (2 ‘ H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]_6 ‘-羧酸乙酯(440mg，1. 26mmol)在 Ac0H-H20-H2S04(2 1 0. 3v/v，9. 9mL)混合物中的溶液在100°C下加熱3小時(shí)。將反應(yīng) 混合物注入冰水，并攪拌。30分鐘后，過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為 黃色固體的該標(biāo)題化合物(384mg,94% )。^-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 94-2. 03 (2H, m)， 2. 14-2. 20 (2H, m)，2. 69-2. 77 (2H, m)，4. 44 (2H, s)，7. 32 (2H, brs)，8. 91 (1H, s)，14. 67 (1H, s)。ESIMS(+) :323[M+H] +。44F)8'-氨基-9'-氟_7'-氧-10' -[2_(2_吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán) 丁烷-1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。將8'-氨基-9'，10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3 ‘ (2 ‘ H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(360mg，l. 12mmol)、N-2-吡啶 yl-1， 2-乙二胺(230mg，1. 68mmol)和三乙胺(0. 234mL, 1. 68mmol)在 DMS0(5mL)中的溶液 在100°C下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入冰水，并攪拌30分鐘。過濾收集所得的沉淀 物，用水洗滌，懸浮于EtOH(lOmL)，并回流攪拌1小時(shí)。將懸浮液冷卻至室溫，過濾收集 所得的沉淀物，并干燥得到成為白色固體的標(biāo)題化合物(459mg，93% )。'H-NMR(400MHz, DMS0d6) 8 1. 91-2. 03 (2H, m)，2. 08-2. 17 (2H, m)，2. 61-2. 69 (2H, m)，3. 44-3. 48 (2H, m)， 3. 58-3. 66 (2H, m)，6. 35-6. 40 (1H, m)，6. 45-6. 49 (2H, m)，6. 71 (1H, t, J = 5. 5Hz)，6. 88 (2H, brs, 7. 35 (1H, td，J = 6. 7，1. 8Hz)，7. 97 (1H, dd，J = 4. 9，1. 2Hz)，8. 71 (1H, s)，15. 30 (1H, s). HRESIMS(+) :440.17267(-0. 74mmu)。實(shí)施例45 8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[2_(2_吡啶基氨基)乙氨基)螺環(huán)[環(huán)丁 烷-1，2' (3' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de]苯并氧氮雜卓]-6'-羧酸45A)3-[[1_(羥甲基)環(huán)戊基]-甲氨基]_2_ (3，4，5，6_四氟苯甲酰基)丙烯酸乙 酯的制備。
將3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(7. 93g, 30. Ommol), Ac20(17. OmL, 180mmol)和原甲酸三乙酯(10. OmL, 60. lmmol)的溶液在120°C下加熱3小、時(shí)。真空濃縮該 混合物并高真空干燥。將粗產(chǎn)物溶解于無水甲苯(120mL)中，并在0°C下緩慢添加[1_(氨 甲基)-環(huán)丙基]]甲醇(3. 04g，30. lmmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，蒸發(fā)去除 溶劑。通過柱層析(己烷EtOAc 1 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物 (10. 5g,94% )。NMR(400MHz, CDC13) 6 0. 50-0. 70(4H，m)，0. 97，1. 10(各 t，J = 7. 3Hz，總 3H)，1. 66 (1H, t，J = 4. 9Hz)，3. 47 (2H, d，J = 6. 1Hz)，3. 56 (2H, d，J = 4. 9Hz)，4. 01-4. 09 (2H m) ,6. 96-7. 13(1H，m)，8. 06-8. 12 (1H，m)，9. 71，11. 1(各 br，總 1H). ESIMS (+) :375[M+H]。45B)10'，11' -二氟-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1，3 ‘ (4' H) _[2H，8H]吡啶并[1， 2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備 將NaH(2. 29g，57. 3mmol，60%;含于油中)的 DMF(llOmL)溶液冷卻至 0°C，并用含 于DMF(15mL)的3_[[1_(羥甲基)環(huán)戊基]甲氨基]_2_(3，4，5，6-四氟苯甲?；?氨基丙 烯酸乙酯(9. 76g，26. Ommol)逐滴處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后在85°C 下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入冰水中，過濾所得的沉淀物并用水洗滌。將所得的固體 溶解于100mL Et0H-CH2Cl2 (2 1)并過濾。將濾出液濃縮至70mL，過濾收集所得的沉淀 物，用EtOH洗滌并干燥得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(6. 73g,77% )。i-NMR(400MHz CDCI3) 6 0. 65 (2H, t, J = 6. 1Hz)，0. 82 (2H, t, J = 6. 1Hz)，1. 41 (3H, t, J = 7. 3Hz)， 4. 21 (2H, s)，4. 35 (2H, s)，4. 39 (2H, q, J = 7. 3Hz)，8. 05 (1H, dd, J = 10. 4，8. 6Hz)，8. 25 (1H, s). ESIMS(+) :335[M+H] +。45C)9'，10' -二氟 _8'-硝基 _7 ‘-氧螺環(huán) _ [環(huán)丁烷 _1，2 ‘ (3' H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。
10' ,11' -二氟 _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，2' (3' H)-[7H]吡啶并[1，2， 3，_ef]_苯并氧氮雜卓]_7'-羧酸乙酯可通過對本文別處所示的步驟的常規(guī)修改制備得 到。將 10'，11' -二氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，2' (3' H)-[7H]吡啶并[l，2，3，-ef] 苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1.50g，4.47mmol)在濃H2S04(15mL)中的溶液在0°C下用 固體KN03(633mg，6. 26mmol)分批處理。在0°C下攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入100mL 冰水中，過濾所得的沉淀物。以DMF重結(jié)晶所得的固體，用EtOH洗滌并干燥得到成為淡黃 色固體的標(biāo)題化合物(651mg, 38% ) o iH-WRQOOMHZ，DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)， 1. 76-2. 00 (2H, m)，2. 15-2. 25 (2H, m)，2. 27-2. 40 (2H, m)，4. 23 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 53 (2H, s)，8. 69 (1H, s). ESIMS (+) :381[M+H] +。45D)8'-氨基-9'，10' -二氟 _7'-氧螺環(huán) _ [環(huán)丁烷 _1，2 ‘ (3' H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。將9'，10' -二氟-8'-硝基-7'-氧-螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，2' (3' H)-[7H]吡 啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(450mg，l. 15mmol)和 10%Pd/C(40. 5mg) 的DMF(20mL)溶液在氫氣氣氛下(0. 3MPa)于50°C下攪拌3小時(shí)。用Celite過濾除去催化 劑，并真空濃縮濾出液。將所得的固體溶解于EtOH-CH2Cl2(l 5)并過濾。除去CH2C12，過 濾所得的沉淀物，用EtOH洗滌，并干燥得到成為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(270mg，67% )。 'H-NMR (400MHz, DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 74-1. 96 (2H, m)，2. 02-2. 13 (2H, m)，2. 14-2. 25 (2H, m)，4. 20 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 33 (2H, s)，7. 33 (2H, brs)，8. 43 (1H, s). ESIMS(+) :350[M+H] +。45E)8'-氨基-9' ,10' -二氟-7'-氧螺環(huán) _ [環(huán)丁烷 _1，2 ‘ (3' H)-[7H] 吡啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。
將8'-氨基-9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，2' (3' H)-[7H]吡 啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(247mg，0. 705mmol)和 1M NaOH 水溶液 (3. 5mL)的Et0H(3.5mL)溶液在50°C下攪拌1. 5小時(shí)。去除溶劑，并將殘留物溶解在水中。 將溶液用2M HC1酸化至pH 7，過濾所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為黃色固體的標(biāo) 題化合物(216mg,95% )。^-WR(400MHz，DMS0-d6) 8 1. 73-1. 97(2H，m)，2. 04-2. 27(4H，m)， 4. 50 (2H, s)，7. 25 (2H, brs)，8. 76 (1H, s)，14. 67 (1H, s) ESIMS (+) 322 [M+H] +。45F)8'-氨基-9'-氟_7'-氧-10' -[2_(2_吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán) 丁烷-1，2' (3' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。 將8'-氨基-9',10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，2' (3' H)-[7H]吡啶并 [1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(200mg，0. 621mmol)、三乙胺(0. 130mL，0. 933mmol) 和N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(128mg，0. 933mmol)在DMS0(4mL)中的溶液在100°C下攪拌3 小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入冰水，過濾所得的沉淀物，用乙醇洗滌并干燥得到成為黃色固體的 標(biāo)題化合物(223mg，82%)。'H-NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 1. 30-1. 50 (2H, m), 1. 53-1. 73 (1H, m)，3. 01-3. 12 (2H, m)，3. 19-3. 30 (2H, m)，3. 94 (2H, s)，5. 65 (1H, brs)，6. 01-6. 12 (2H, m)， 6. 29 (1H, t, J = 5. 5Hz)，6. 43 (2H, brs)，6. 90-7. 01 (1H, m)，7. 52-7. 60 (1H, m)，8. 13 (1H, s)， 14. 90 (1H, s) HRESIMS (+) :440. 17258 (計(jì)算得到 C22H23FN504，440. 17341)。實(shí)施例46 9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙 氨基]螺環(huán)[環(huán)丙烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸46A)3-[1_(2-羥乙基)環(huán)丙基氨基]_2_(2，3，4，5，-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯 的制備。
將3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(3. 09g，11. 7 讓 ol)、Ac20(6. 7mL， 70. 9mmol)和原甲酸三乙酯(3. 90mL，23. 5mmol)的溶液在120°C下加熱3小時(shí)。真空濃縮 該混合物并高真空干燥。將粗產(chǎn)物溶解于無水甲苯(40mL)中，并在0°C下極為緩慢地添加 (1-氨基-環(huán)丙基)_乙醇(1.82g，11.7mm0l)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并用甲 苯稀釋。用水、鹽水洗滌該有機(jī)層，并干燥。蒸發(fā)去除溶劑，并通過柱層析(己烷EtOAc 2:1 — 1: 1)純化粗產(chǎn)物得到成為黃色油的標(biāo)題化合物(2.99g，68%)。iH-NMRGOOMHz， CDC13) 6 0. 85-0. 92 (2H, m), 0. 94-1. 11 (5H, m), 1. 85-1. 91 (2H, m), 3. 85-3. 89 (2H, m)， 3. 99-4. 09 (2H, m) ,6. 95-7. 13 (1H, m) ,8. 19 (1H, d, J = 14. 1Hz) ,9. 84，11. 2(各 d，J = 13. 4Hz，總 1H). EIMS(+)375[M] +。 46B)10' ,11' -二氟-2' ,3' -二氫-8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丙烷 _1，4' _[4H，8H] 吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。將NaH(617mg，15.4mmol，60% ；含于油中)的 DMF(30mL)溶液冷卻至 0°C，并用含 于DMF(4mL)的3-[1_(2_羥乙基)環(huán)丙基氨基]_2_(2，3，4，5，-四氟苯甲酰基)丙基氨基丙 烯酸乙酯(2. 63g，7. Olmmol)逐滴處理。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，并在80°C下繼續(xù)攪 拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入冰水中，過濾所得的沉淀物并用水洗滌。將所得的固體溶解于 100mL EtOH并過濾。將濾出液濃縮至50mL，過濾收集所得的沉淀物，用EtOH洗滌并干燥得 到成為淡褐色固體的標(biāo)題化合物(1. 43g,61% )。i-WR(400MHz，DMS0-d6) 8 1. 03(2H,br)， 1. 18 (2H, br)，1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，2. 03-2. 73 (2H, br)，4. 21 (2H, q, J-7. 3Hz)，7. 66 (1H, dd, J = 10. 4,7. 9Hz),8. 51 (1H, s) EIMS (+) 335 [M]+。46C)10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -硝基 -氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。
將10'，11'-三氟-2' ,3' -二氫-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1，4' _[4H，8H]吡 啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1.2g,3. 58mmol)在濃 H2S04 (15mL) 中的溶液在0°C下用固體KN03(510mg，5.04mmol)分批處理。在0°C下攪拌2小時(shí)后，將反 應(yīng)混合物注入冰水中，過濾所得的沉淀物。用EtOH洗滌所得的固體，干燥得到成為褐色固 體的標(biāo)題化合物(554mg,41% )。(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 02 (2H, br)，1. 10-1. 27 (5H, m)，1. 91-2. 86 (2H, br)，4. 21 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 61 (2H, br)，4. 52 (2H, br)，8. 58 (1H, s) EIMS (+) 380 [M]+. HREIMS (+) 380. 0856 (計(jì)算得到 C17H14F2N206, 380. 0820)。46D)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。將10'，11' -二氟 2'，3' -二氫-9'-硝基-8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丙烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[1,2,3-ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(500mg, 1, 31mmol) 和10% Pd/C(100mg)的DMF(30mL)溶液在氫氣氣氛下于50°C下攪拌1. 5小時(shí)。用Celite 過濾除去催化劑，并真空濃縮濾出液。將所得的固體溶解于012(12和EtOH(3 l，65mL)并 過濾。除去CH2C12，過濾分離所得的沉淀物，用EtOH洗滌，并干燥得到成為淺褐色固體的標(biāo) 題化合物(355mg,77% )。^-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 0. 99(2H,br)，1. 13(2H,br)，1. 25 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 64-2. 91 (2H, br)，4. 18 (2H, q, J = 7. 3Hz) 54. 35 (2H, br)，7. 46 (2H, br)， 8. 35 (1H, s). EIMS (+) 350 [M] +。46E)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。將 9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丙烷-1， 4' [4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(320mg，0. 913mmol) 含于Ac0H-H20-H2S04(6 4 lv/v,5. 3mL)的溶液回流加熱1小時(shí)。將該反應(yīng)混合物
注入冰水，并過濾收集該沉淀物，用水洗滌，得到標(biāo)題化合物。iH-NMRGOOMHz DMS0，) 8 0. 63-1. 55 (4H, br), 1. 90-3. 11 (2H, br) ,3,78-4. 96 (2H, br), 7. 40 (2H, s) ,8. 64 (1H, s)， 14. 5(1H，s). EIMS(+)322[M] +。 46F)9'-氨基-10'-氟-2'，3' -二氫 _8'-氧-11' _[2_(2_ 吡啶基氨基) 乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丙烷_1，4' _[411，811]吡啶并[1，2，3-時(shí)][1，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸的制備。將9'-氨基-10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫-8'-氧-螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[1,2,3, -ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]_7'-羧酸(150mg，0. 465mmol)、 三乙胺(0. 100mL,0. 717mmol)和 N_2_ (吡啶基)-1，2-乙二胺(95. 5mg,0. 696mmol)在 DMS0(2mL)中的溶液在100°C下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入冰水中，過濾所得的沉淀 物并用乙醇洗滌。將所得的固體溶解于DMF并過濾。將濾出液注入水中，過濾所得的沉淀 物，用水洗滌并干燥得到成為深黃色固體的標(biāo)題化合物(95.6mg，47% )。'H-NMR(400MHz, DMSO) 8 0. 81-1. 50 (4H, m)，3. 40-3. 51 (2H, m)，3. 55-3. 66 (2H, m)，3. 80-4. 60 (4H, m)， 6. 32 (1H, brs)，6. 40-6. 50 (2H, m)，6. 70 (1H, t, J = 5. 5Hz)，9. 97 (2H, brs)，7. 30-7. 40 (1H, m)，7. 90-8. 00 (1H, m)，15. 14 (1H, s) HRESIMS (+) :440. 17315 (計(jì)算得到 C22H22FN504， 440.17340)。實(shí)施例47:9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫-8'-氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙 氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸47A) (1-羥基環(huán)丁基)_乙酸乙酯的制備 通過注射器將三甲基氯硅烷(1. 14mL，8. 92_ol)添加至鋅粉(7. 97g，0. 122mol) 在無水Et20(200mL)的懸浮液中。將混合物在室溫下攪拌15分鐘。將該混合物加熱至 回流，去除熱源，添加溴乙酸乙酯(10. 3mL，92.9mmol)，該添加的速率使得該醚溶液略微沸 騰。將該混合物回流一小時(shí)，然后再在室溫下攪拌一小時(shí)。添加在醚(30mL)中的環(huán)戊酮 (6. 00g，75. 9mmol)溶液，同時(shí)通過間歇冷卻將混合物的溫度保持在19_20°C。室溫下攪拌 一小時(shí)后，將混合物注入冰凍的25%氨水中(400mL)。用醚萃取水相，用K2C03干燥合并 的相。過濾并蒸發(fā)溶劑，得到成為無色油的標(biāo)題化合物(6.50g，54% )。^-NMR(400MHz, CDC13) 6 1. 29 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 47-1. 64 (1H, m)，1. 76-1. 87 (1H, m)，1. 93-2. 06 (2H, m)， 在室溫下將H2S04(2. 20mL，41.3mmOl)緩慢加入1_羥基環(huán)丁基乙酸乙酯(6. 45g， 40. 8mmol)和芐腈(40mL，0. 392mol)的混合物中。將混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，并在80°C下 繼續(xù)攪拌1小時(shí)。在冰水浴中冷卻該混合物，添加2N NaOH溶液，直至混合物達(dá)到pH = 7。 用乙酸乙酯萃取該混合物，用無水Na2S04干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并真空濃縮。對殘 留物快速層析(AcOEt 己烷=5 1)得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(5.40g，51% )。 iH-WR(400MHz，CDC13) 6 1. 22 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 84-2. 07 (2H, m)，2. 22-2. 32 (2H, m)， 2. 44-2. 55 (2H, m)，3. 05 (2H, s)，4. 11 (2H, q, J = 7. 3Hz)，6. 73 (1H, s)，7. 39-7. 52 (3H, m)， 7. 72-7. 79 (2H, m)。47C)2-[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]乙醇的制備。將LiAlH4(3.88g，0. 102mol)在室溫下添加至1_ (苯甲酰基氨基)_環(huán)丁基乙酸乙 酯(5. 30g，20. 3mmol)的THF(lOOmL)溶液。將混合物攪拌1小時(shí)，然后再回流一小時(shí)。將混 合物在冰水浴中冷卻，加入數(shù)滴水，再將該混合物靜置過夜。用乙酸乙酯稀釋該混合物，用 無水Na2S04干燥，過濾，并真空濃縮。蒸餾該殘留物得到成為無色油的標(biāo)題化合物(2.53g， 61% )。^-WR(400MHz，CDC13) 8 1. 69-1. 86(2H，m)，1. 88(2H，t，J = 5. 5Hz)，1. 92-2. 09 (4H, m)，3. 73 (2H, s)，3. 87 (2H, t, J = 5. 5Hz)，7. 22-7. 35 (5H, m)。47D)2-[1_氨基環(huán)丁基]乙醇的制備。 將 10%Pd_C(500mg)加入 2_[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]乙醇(4. 00g, 19. 5mmol)的 EtOH(lOOmL)溶液，將該混合物在0. 5Mpa H2氣氛下室溫?cái)嚢?小時(shí)。過濾該混合物，并真空 濃縮濾出液。蒸餾該殘留物得到成為無色油的標(biāo)題化合物(1. 65g,73% )。i-NMR(400MHz， CDC13) 6 1. 60-1. 72 (2H, m)，1. 75 (2H, t, J = 5. 5Hz)，1. 77-1. 87 (2H, m)，2. 03-2. 13 (2H, m)， 3. 81 (2H, q, J = 5. 5Hz)。
68
47E)3-[1_(2-羥乙基)環(huán)丁氨基-]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯的 制備。 將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸酯(3. 67g，13. 9mmol)、 Ac20(7. 89mL，83. 5mmol)和原甲酸三乙酯(4. 63mL，27. 8mmol)的溶液在120°C下加熱3小 時(shí)。真空濃縮該混合物并高真空干燥。在0°C下向該混合物在無水甲苯(50mL)中的溶液 緩慢添加含于無水甲苯(20mL)的1-氨基-1_(2-羥乙基)環(huán)丁烷(1. 60g，13. 9mmol)。 將所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)去除溶劑。對殘留物快速層析(AcOEt 己烷 =1:1)得到成為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(3. 30g,61% )。'H-NMR(400MHz, CDC13) 8 0. 96(0. 6H，t，J = 7. 3Hz)，1. 09(2. 4H，t，J = 7. 3Hz)，1. 85-2. 03(12H，m)，2. 06-2. 13 (2H, m)，2. 20-2. 30 (2H, m)，2. 32-2. 43 (2H, m)，3. 82-3. 88 (2H, m)，4. 02 (0. 4H, q, J = 7. 3Hz)， 4. 07 (1. 6H, q, J = 7. 3Hz)，6. 94-7. 03 (0. 2H, m)，7. 05-7. 13 (0. 8H, m)，8. 23-8. 30 (1H, m)， 10. 05-10. 17(0. 2H, m)，11. 36-11. 50(0. 8H, m)。47F)10' ,11' -二氟-2' ,3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H] 吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。向3-[1-(2_羥乙基)環(huán)丁氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯 (2. 80g，7. 19mmol)的DMF(30mL)溶液添加NaH(350mg，8. 75mmol)。將混合物在室溫下攪拌 30分鐘，然后再在80°C下加熱30分鐘。在0°C下向該混合物中分批添加水，過濾分離所得的 沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(655mg，26% )。'H-NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 67-1. 79 (1H, m)，1. 91-2. 04 (1H, m)，2. 42-2. 53 (4H, m)，2. 67 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 24 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 55 (2H, t, J = 6. 7Hz)，7. 72 (1H, dd, J = 10. 4 和 7. 9Hz)，8. 41(1H，s)。47G)10'，11' -二氟 _2'，3' -二氫 _9'-硝基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。
將10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫-8'-氧-螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，4 ‘ -[4H， 8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(925mg,2. 65mmol)在濃 H2S04(llmL)中的溶液在0°C下用固體KN03(363mg，3. 59mmol)分批處理。在0°C下攪拌2小 時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入冰水中，合并過濾所得的沉淀物并用水洗滌。對殘留物快速層析 (CH2Cl2-MeOH = 10 1)得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(822mg,79% ) 屯-匪R(400MHz， DMS0-d6) 8 1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 68-1. 78 (1H, m)，1. 90-2. 03 (1H, m)，2. 40-2. 58 (4H, m)，2. 69 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 24 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 63 (2H, t, J = 6. 7Hz)，8. 44 (1H, s)。47H)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2'，3' 二氫-9'-硝基 _8'-氧-螺環(huán)-[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(770mg, 1. 95mmol) 的DMF(70mL)溶液在氫氣氣氛下于50°C下用10% Pd/C(200mg)處理1小時(shí)。用Celite 過濾除去催化劑，并真空濃縮濾出液。對殘留物快速層析(CH2Cl2-MeOH= 10 1)得到 成為無色固體的標(biāo)題化合物(559mg，79% )。lH-NMR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 65-1. 77 (1H, m)，1. 87-2. 01 (1H, m)，2. 35-2. 62 (6H, m) ,4. 21 (2H, q, J = 7. 3Hz)， 4. 31-4. 42 (2H, bit)，7. 40-7. 60 (2H, brs)，8. 23 (1H, s)。 471)9'-氨基-10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。 將 2N Na0H(7. 0mL，14. Ommol)在室溫下加入 9'-氨基-10' ,11' -二氟 ， 3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧 氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(513mg，1.41mm0l)在EtOH(14mL)中的混合物，并將混合物在50°C下加熱3小時(shí)。將2N HC1 (7. OmL)和水加入該反應(yīng)混合物。過濾收集所得的沉淀 物，用水洗滌，并干燥得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(427mg，90%)。'H-NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 1. 64-1. 77 (1H, m)，1. 89-2. 02 (1H, m)，2. 56-2. 70 (2H5br)，4. 30-4. 50 (2H, br)， 7. 35-7. 52 (2H, brs)，8. 47 (1H, s)，14. 60 (1H, s)。 47J)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基) 乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷-1，4' _[411，811]吡啶并[1，2，3-時(shí)][1，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸的制備。將9'-氨基-10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(186mg，0. 553mmol)、 N2-吡啶基-1，2-乙二胺(115mg，0. 838mmol)和三乙胺(117 ii L)在 DMS0(2. 5mL)中 的溶液在120°C下攪拌4小時(shí)。在0°C下將反應(yīng)混合物分批添加至冰水，并向該混 合物添加2N HC1(3滴)。過濾分離所得的沉淀物，用EtOH洗滌，并干燥得到成為黃 色固體的標(biāo)題化合物(165mg，66 % )。i-WR (400MHz，DMS0_d6)51. 61-1. 74 (1H, m)， 1. 84-2. 00 (1H, m)，2. 30-2. 65 (6H, m)，3. 40-3. 50 (2H, m)，3. 52-3. 62 (2H, m)，4. 10-4. 33 (2H, br)，6. 20-6. 30 (1H，m)，6. 42-6. 51 (2H, m)，6. 69 (1H, t, J = 5. 5Hz)，6. 90-7. 08 (2H, br) ,7. 32-7. 40(1H, m) ,7. 97(1H, dd, J = 4. 3 禾口 1. 2Hz)，8. 26(1H, s)，15. 23(1H, s) HRESIMS (+) 454. 18677 (計(jì)算得到 C23H25FN504，454. 18906)。實(shí)施例48 9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙 氨基]螺環(huán)[環(huán)戊烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸48A)3-[1_(2-羥乙基)環(huán)戊氨基]-2-(2，3，4，5_四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制備。 將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(20. 3g，76. 8mmol)、 Ac20(44. 0mL，0. 465mol)和原甲酸三乙酯(25. 6mL，0. 154mol)的溶液在120°C下加熱3小 時(shí)。真空濃縮該混合物，并在高真空下干燥。在0°C下將含于無水甲苯(50mL)的1-氨
基-l-(2-羥乙基)環(huán)戊烷(9. 94g,76. 9mmol)緩慢添加至該混合物在無水甲苯(200mL) 中的溶液。將所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)去除溶劑。對殘留物快速層析 (AcOEt 己烷=2 1)得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(23. 2g，75% )。(400MHz， CDC13) 6 0. 96 (0. 6H, t, J = 7. 3Hz)，1. 09 (2. 4H, t, J = 7. 3Hz)，1. 48-1. 54 (1H，m)， 1. 74-1. 90 (6H, m)，1. 97-2. 06 (4H, m)，3. 78-3. 85 (2H, m)，3. 98-4. 10 (2H, m)，6. 95-7. 12 (1H, m)，8. 17-8. 24 (1H, m)，9. 81-9. 94(0. 3H, m)，11. 20-11. 35(0. 7H, m)。
48B)6，7，8_三氟-1，4_ 二氫-1-[1_(2-羥乙基)環(huán)戊基]_4_氧_3_喹啉羧酸乙 酯的制備。向3-[1-(2_羥乙基)_環(huán)戊氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯 (22. 7g，56. 3mmol)在 THF(200mL)中的冰凍溶液中添加 NaH(3. 60g，90. Ommol)，并將該混 合物在室溫下攪拌1小時(shí)。在0°C下向該混合物分批添加水。用乙酸乙酯提取所得的混 合物，并真空濃縮合并的有機(jī)萃取物。對殘留物快速層析(AcOEt 己烷=2 1)得到 成為無色固體的標(biāo)題化合物(14. lg,65% )。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t，J = 7. 3Hz)，1. 53-1. 75 (4H, m)，2. 10-2. 26 (4H, m)，2. 31-2. 44 (2H, m)，4. 23 (2H, q, J = 7. 3Hz)， 4. 55-4. 60 (1H, m)，7. 99-8. 07 (1H, m)，8. 80 (1H, s)。48C)10'，11' -二氟-2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，4' _[4H，8H] 吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。向6，7，8-三氟-1，4- 二氫_1-[1_ (2-羥乙基)環(huán)戊基]_4_氧_3_喹啉羧酸乙酯 (3. 84g, 10. Ommol)的 DMF(40mL)溶液添加 NaH(480mg，12. Ommol)，并將該混合物在 80°C下 加熱30分鐘。在0°C下用水分批處理該混合物。用乙酸乙酯提取所得的混合物，并真空濃縮 合并的萃取物。對殘留物快速層析(AcOEt 己烷=2 1)得到成為無色固體的標(biāo)題化合 物(1. 12g,31% )。t-WR(400MHz，DMS0-d6) 8 1.42(3H，t，J = 7. 3Hz)，1. 52-1. 64 (2H，m)， 1. 75-1. 88 (2H, m)，2. 11-2. 21 (2H, m)，2. 27-2. 37 (2H, m)，2. 47 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 39 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 47 (2H, t, J = 6. 7Hz)，7. 98 (1H, dd, J = 9. 8 和 7. 9Hz)，8. 67 (1H, s)。48D)10'，11' -二氟 _2'，3' -二氫 _9'-硝基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。
將10' ,11' -二氟 ,3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1，4' _[4H，8H]吡 啶并[1,2,3-ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(50. 0g,0. 138mmol)在濃H2S04(lmL) 中的溶液在0°C下用固體KN03(20.0mg，0. 199mmol)分批處理。在0°C下攪拌1小時(shí)后，將 反應(yīng)混合物注入冰水中，過濾合并所得的沉淀物，用水洗滌并溶解于CH2Cl2-Me0H(5 lv/ v)。真空濃縮合并的萃取物。對殘留物快速層析(CH2Cl2-MeOH= 10 1)得到成為黃色 固體的標(biāo)題化合物(26. 0mg,46% )。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 37 (3H, t, J = 7. 3Hz)， 1. 52-1. 66 (2H, m)，1. 78-1. 90 (2H, m)，2. 15-2. 30 (4H, m)，2. 50 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 36 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 55 (2H, t, J = 6. 7Hz)，8. 69 (1H, s)。48E)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-9'-硝基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[1,2,3-ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(2. 00g,4. 90mmol) 的DMF(120mL)溶液在氫氣氣氛下于50°C下用10% Pd/C(400mg)處理1. 5小時(shí)。用Celite 過濾除去催化劑，并真空濃縮濾出液。對殘留物快速層析(CH2Cl2-Me0H=10 1)得到成為 黃色固體的標(biāo)題化合物(527mg,28% )。t-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 26(3H，t，J = 7. 3Hz)， 1. 37-1. 50 (2H, m)，1. 65-1. 77 (2H, m)，2. 06-2. 25 (4H, m)，2. 36 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 20 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 30 (2H, t, J = 6. 7Hz)，7. 53 (2H, brs)，8. 47 (1H, s)。48F)9'-氨基-10'，11' -二氟 _2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。 將2N Na0H(6. 5mL，13. Ommol)在室溫下加入到9'-氨基-10'，11' -二氟_2'， 3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(482mg，1. 27mmol)在Et0H(13mL)中的混合物中，并將混合物在50°C 下加熱3小時(shí)。將2N HC1 (6. 5mL)和水加入該反應(yīng)混合物。過濾收集所得的沉淀物，用水 洗滌，并干燥得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(425mg，96%)。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 35-1. 52 (2H, m)，1. 65-1. 75 (2H, m)，2. 10-2. 30 (4H, m)，2. 43 (2H, t, J = 6. 7Hz)， 4. 34 (2H, t, J = 6. 7Hz)，7. 50 (2H, brs)，8. 67 (1H, s)，14. 5 (1H, brs)。
48G)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基) 乙氨基]螺環(huán)[環(huán)戊烷-1，4' _[411，811]吡啶并[1，2，3-時(shí)][1，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸的制備。將9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)戊烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，4]苯并氧氮雜卓]_7'-羧酸(200mg，0. 571mmol)和 N-(2-吡啶基)-1，2_ 乙二胺(118mg,0. 860mmol)在 DMS0(2.5mL)中的溶液在 100°C下攪 拌4小時(shí)。在0°C下向該反應(yīng)混合物分批添加冰水，過濾分離所得的沉淀物，并依次用水、 iPr20和EtOH洗滌。干燥所得的沉淀物以得到成為淡黃色固體的該標(biāo)題化合物(185mg， 69 % ) o (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 34-1. 49 (2H, m)，1. 60-1. 75 (2H, m)，2. 03-2. 23 (4H, m)，2. 34 (2H, t, J = 6. 7Hz)，3. 40-3. 55 (2H, m)，3. 55-3. 64 (2H, m)，4. 17 (2H, t, J-6. 7Hz)， 6. 25-6. 33 (1H, br)，6. 43-6. 51 (2H, m)，6. 69 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 06 (2H, br)，7. 35 (1H, ddd, J = 6. 7，6. 7 和 1. 8Hz)，8. 86 (1H, dd, J = 4. 9 和 1. 2Hz)，8. 49 (1H, s)，15. 1 (1H, brs) HRESIMS (+) 4678. 20118(計(jì)算得到 C24H27FN504，468. 20471)。實(shí)施例49 9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫-3'-甲基 -氧 11' -[2_(2_ 吡啶 基氨基)乙氨基]-螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜 卓]-7'-羧酸49A)2-(1_羥基環(huán)丁基)丙酸乙酯的制備。
通過注射器將三甲基氯硅烷(950ii L，7. 43_ol)添加至鋅粉(6. 65g，0. 102mol) 在無水Et20(170mL)的懸浮液中。將混合物在室溫下攪拌15分鐘，加熱至回流，去除熱源， 以使醚輕微沸騰的速率添加2-溴丙酸乙酯(10. lmL，77. 8mmol)。加熱至回流1小時(shí)后，將 混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。添加在Et20(10mL)中的環(huán)丁酮(5. 00g，63. 2mmol)溶液，同時(shí) 通過間歇冷卻將混合物的溫度保持在19-20°C。室溫下攪拌1小時(shí)后，將混合物注入冰凍的 25%氨水中(400mL)。用醚萃取水相，用K2C03干燥合并的有機(jī)相，濃縮，得到成為無色油的
標(biāo)題化合物(12. 9g, 100% )。'H-NMR(400MHz, CDC13) 6 1. 21 (3H, d, J = 6. 8Hz)，1. 29 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 51-1. 64 (1H, m)，1. 80-1. 90 (1H, m)，1. 96-2. 17 (4H, m)，2. 70 (1H, q, J = 7. 3Hz)，3. 44 (1H, s)，4. 18 (2H, qd, J = 7. 3 和 1. 2Hz)。49B)2-[1_(苯甲酰基氨基)環(huán)丁基]-丙酸乙酯的制備。 在室溫下將H2S04(3 . 90mL，73. 2mmol)緩慢加入2_(1_羥基環(huán)丁基)丙酸乙酯 (12. 5g，72. 6mmol)和芐腈(75mL)的混合物中。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后在80°C 下攪拌1小時(shí)。在冰水浴中冷卻該混合物，添加2N NaOH溶液，直至混合物達(dá)到pH = 7。用 乙酸乙酯萃取該混合物，用無水Na2S04干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并真空濃縮。對殘留 物快速層析(AcOEt 己烷=5 1)得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(9.24g，46% )。 iH-WR(400MHz，CDC13) 6 1. 25 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 30 (3H, d, J = 7. 3Hz)，1. 73-1. 87 (1H, m)，1. 98-2. 09 (2H, m)，2. 21-2. 32 (1H, m)，2. 53-2. 63 (1H, m)，2. 84-2. 94 (1H, m)，3. 11 (1H, q, J = 7. 3Hz)，4. 08-4. 20 (2H, m)，6. 88 (1H, brs)，7. 40-7. 52 (3H, m)，7. 75-7. 80 (2H, m)。49C)2-[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]丙醇的制備。 將LiAlH4(6. 30g，0. 166mol)添加至2_[1_(苯甲?；被?-環(huán)丁基]丙酸乙酯 (9. 07g，32. 9mmol)的THF(160mL)溶液中并將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后回流1 小時(shí)。用冰水浴冷卻該混合物，并加入數(shù)滴水。用乙酸乙酯稀釋該混合物，用無水Na2S04 干燥，過濾，并真空濃縮。蒸餾該殘留物得到成為淡黃色油的標(biāo)題化合物(6.92g，96%)。 ^-WR (400MHz，CDC13) 6 1. 00 (3H, d, J = 6. 7Hz)，1. 66-1. 77 (1H, m)，1. 81-1. 97 (2H, m)， 2. 02-2. 10 (1H, m)，2. 10-2. 24 (3J, m)，3. 59 (1H, dd, J = 11.0 和 7. 9Hz)，3. 71 (1H，d, J = 11. 6Hz)，3. 74 (1H，dd，J = 11. 0 和 3. 7Hz)，3. 89 (1H，d，J = 11. 6Hz)，7. 23-7. 36 (5H, m)。49D)2-(1_氨基環(huán)丁基)丙醇的制備。
將 10%Pd_C(700mg)加入到 2_[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]丙醇(6.81g，31. lmmol)的EtOH (150mL)溶液中，將該混合物在5kgf/cm2H2氣氛下室溫?cái)嚢?小時(shí)。過濾該混 合物，并真空濃縮濾出液。蒸餾該殘留物得到成為無色油的標(biāo)題化合物(2.96g，74%)。 iH-WR (400MHz，CDC13) 6 1. 03 (3H, d, J = 7. 3Hz)，1. 63-1. 74 (3H, m)，1. 78-1. 94 (2H, m)， 2. 10-2. 28 (2H, m)，3. 50 (1H, dd, J = 11. 0 和 4. 3Hz)，3. 91 (1H, dd, J = 11. 0 和 3. 1Hz)。49幻3-[1-(1-羥基-2-丙基)-環(huán)丁氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸 乙酯的制備。 將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸酯(6. 13g，23. 2mmol)、 Ac20(13. 2mL，0. 140mol)和原甲酸三乙酯(7. 80mL，46. 8mmol)的溶液在120°C下加熱3小 時(shí)。真空濃縮該混合物并高真空干燥。在0°C下向無水甲苯(100mL)中的殘留物混合物緩慢 添加含于無水甲苯(40mL)的2-(1_氨基環(huán)丁基)丙醇(3. 00g，23. 2mmol)。將該混合物在 室溫下攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)去除溶劑。對殘留物快速層析(AcOEt 己烷=1 1)得到成為無 色固體的標(biāo)題化合物(6. 23g,67% )。(400MHz，CDC13) 8 0. 95(0. 6H, t, J = 7. 3Hz)， 0. 97 (3H, d, J = 7. 3Hz)，1. 09 (2. 4H，t，J = 7. 3Hz)，1. 54 (1H, t, J = 4. 9Hz)，1. 85-2. 15 (3H, m)，2. 19-2. 50 (4H, m)，3. 62-3. 75 (2H, m)，4. 02 (0. 2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 07 (0. 8H, q, J =7. 3Hz)，6. 97-7. 13 (1H, m)，8. 24 (0. 8H, d, J = 15. 3Hz)，8. 25 (0. 2H, d, J = 15. 3Hz)， 10. 03 (0. 2H, d, J = 14. 1Hz)，11. 40 (0. 8H, d, J = 14. 1Hz)。49F) 10 ‘，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。在 0°C下將 NaH(40mg)添加至 3_[1_ (1_ 羥基 _2_ 丙基)-環(huán)丁氨基]_2_ (2，3，4， 5_四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯(404mg，1. OOmmol)的DMF(4mL)溶液。在0°C下攪拌一小時(shí) 后再添加NaH(40mg)。將混合物在0°C下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌1小時(shí)，并在70°C下攪拌 1小時(shí)。在0°C下向該混合物中分批添加水，過濾分離所得的沉淀物，用乙酸乙酯洗滌并干 燥得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(289mg，80% )。t-NMR(400MHz，DMS0_d6) 8 0. 93 (3H， d, J = 6. 1Hz)，1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 66-1. 77 (1H, m)，1. 85-2. 00 (1H, m)，2. 35 (1H, q,
J = 10. 4Hz)，2. 53-2. 69 (3H, m)，2. 96-3. 05 (1H, m)，3. 82 (1H, t, J = 11. 6Hz)，4. 24 (2H, qd, J = 7. 3 和 2. 4Hz)，4. 77 (1H, dd, J = 12. 9 和 8. 9Hz)，7. 73 (1H, dd, J = 10. 4 和 8. 6Hz)， 8. 25 (1H, s)。49G)10'，11' -二氟 _2'，3' -二氫 _3'-甲基 _9'-硝基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 在0°C 下用固體 KN03(377mg，3. 73mmol)分批處理在濃 H2S04(12mL)中的 10'， 11' -二氟 ，3' -二氫-3'-甲基-8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并 [l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1.00g,2. 75mmol)溶液。在0°C下攪拌2 小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入冰水中，合并過濾所得的沉淀物并用水洗滌。從DMF(20mL)重結(jié) 晶所得的固體，得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(923mg，82% )。t-NMR(400MHz，DMS0_d6) 8 0. 94 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 67-1. 78 (1H, m)，1. 83-1. 98 (1H, m)， 2. 40-2. 64 (4H, m)，2. 92-3. 05 (1H, m)，3. 98 (1H, t, J = 11. 6Hz)，4. 24 (2H, t, J = 7. 3Hz)， 4. 80 (1H, dd, J = 11. 6 和 7. 9Hz)，8. 25 (1H, s)。49H)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -甲基 -氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-3'-甲基 _9'-硝基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(900mg， 2. 20mmol)的DMF(55mL)溶液在氫氣氣氛下于50°C下用10% Pd/C(180mg)處理3小時(shí)。 用Celite過濾除去催化劑，并真空濃縮濾出液。用EtOH洗滌殘留物，過濾收集并干燥得 到成為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(756mg,91 % ) o 'H-NMR (400MHz, DMS0_d6) 8 0. 89 (3H, brs)，1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 65-1. 77 (1H, m)，1. 80-1. 95 (1H, m)，2. 30-2. 67 (4H, m)， 2. 82-2. 94 (1H, m)，3. 52-3. 66 (1H, m)，4. 15-4. 28 (2H, m)，4. 58-4. 70 (1H, m)，7. 40-7. 65 (2H, br) ,8. 05 (1H, s)。491)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -甲基 -氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。
將2N NaOH(lO.OmL)在室溫下加入 9'-氨基-10' ,11' -二氟 ,3' -二 氫-3'-甲基-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮 雜卓]-7'-羧酸乙酯(720mg，1. 90mmol)在Et0H(20mL)中的混合物，并將混合物在50°C 下加熱3小時(shí)。將2N HCl(lO.OmL)和水加入該反應(yīng)混合物。過濾收集所得的沉淀物，用 水洗滌，并干燥得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(654mg，98% )。t-NMR(400MHz，DMS0_d6) 8 0. 90 (3H, d，J = 5. 5Hz)，1. 64-1. 76 (1H, m)，1. 81-1. 96 (1H, m)，2. 35-2. 72 (4H, m)， 2. 88-3. 02 (1H, m)，3. 64 (1H, t, J = 11. 6Hz)，4. 60-4. 75 (1H, m)，7. 46 (2H, brs) ,8. 26 (1H, s)，14. 60 (1H, brs)。49J)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -氧 11' -[2_(2_ 吡 啶基氨基)乙氨基]-螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜 卓]-7' _羧酸的制備。 將9'-氨基-10' ,11 ‘ -二氟 ，3' -二氫-3'-甲基 _8 ‘-氧螺 環(huán)-[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸 (300mg，0. 856mmol)、N-2-(吡啶基)-1，2-乙二胺(177mg, 1. 29mmol)和三乙胺(180 u L) 在DMS0(4mL)中的溶液在120°C下攪拌5小時(shí)。在0 °C下向該反應(yīng)混合物分批加入冰 水，并用CH2C12萃取該混合物。用無水Na2S04干燥該合并的有機(jī)萃取物，過濾，并真空濃 縮。對殘留物快速層析(CH2Cl2-Me0H= 10 1)得到成為黃色無定形固體的標(biāo)題化合物 (177mg，44 % )。t-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 0. 86 (3H, d, J = 5. 5Hz)，1. 62-1. 73 (1H, m)， 1. 79-1. 93 (1H, m)，2. 25-2. 38 (1H, m)，2. 38-2. 64 (3H, m)，2. 80-2. 93 (1H, m)，3. 27-3. 50 (3H, m)，3. 52-3. 14 (2H, m)，4. 50-4. 60 (1H, m)，6. 28 (1H, brs)，6. 42-6. 52 (2H, m)，6. 69 (1H, t, J =5. 5Hz)，7. 01 (2H, brs), 7. 32-7. 40(lH，m)，7. 96(lH，dd，J = 4. 9 和 1. 2Hz)，8. 07(lH，s)， 15. 24 (1H, s). HRESIMS (+) 468. 20923 (計(jì)算得到 C24H27FN504，468. 20471)。實(shí)施例50:9'-氨基-10'-氟-2'，3' -二氫-2'-甲基 _8'-氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜 卓]-7'-羧酸50A)1_[(苯甲?；被?環(huán)丁基]乙醛的制備。
在-78°C下于30分鐘內(nèi)將DIBAL(40. 0mL，lM甲苯溶液)逐滴加入到攪拌中的 [1_(苯甲?；被?環(huán)丁基]乙酸乙酯(6. 86g，26. 3mmol)的THF(130mL)溶液中。在_78°C 下攪拌6小時(shí)后，在-78°C下于30分鐘內(nèi)向該混合物逐滴添加MeOH(lOmL)。然后向該混 合物添加飽和NH4C1 (20mL)水溶液，在室溫下將混合物攪拌1小時(shí)。用Et20萃取該混合 物，用無水Na2S04干燥，過濾，并真空濃縮。對殘留物快速層析(己烷Ac0Et = 2 1) 得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(1. 82g,32% )。'H-NMR(400MHz, CDC13) 6 1. 87-2. 07 (2H, m)，2. 25-2. 34 (2H, m)，2. 36-2. 45 (2H, m)，3. 28 (2H, s)，6. 57 (1H, brs)，7. 39-7. 45 (2H, m)， 7. 46-7. 53 (1H, m)，7. 70-7. 76 (2H, m)，9. 79 (1H, s)。50B)1-[1_(苯甲?；被?環(huán)丁基]-2-丙醇的制備。 在-0°C下將甲基氯化鎂(14.0mL，3M THF溶液)加入到攪拌中的[1_(苯甲酰基 氨基)環(huán)丁基]乙醛(2. 82g，13. Ommol)的THF(30mL)溶液中，并將該混合物在室溫下攪 拌5小時(shí)。在0°C下將飽和NH4Cl(10mL)水溶液加入該混合物，并用乙酸乙酯萃取所得的 混合物。用無水Na2S04干燥該合并的有機(jī)萃取物，過濾，并真空濃縮。對殘留物快速層析 (己烷AcOEt = 2:1)得到成為無色油的標(biāo)題化合物(2. 65g,87% )。t-NMR(400MHz， CDC13) 6 1. 25 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 77-2. 12 (5H, m)，2. 28-2. 40 (1H, m)，2. 52 (1H, q, J = 10. 4Hz)，2. 75-2. 85 (1H, m)，3. 26 (1H, d, J = 3. 7Hz)，3. 97-4. 07 (1H, m)，6. 91 (1H, brs)， 7. 39-7. 46 (2H, m)，7. 46-7. 53 (1H, m)，7. 75-7. 82 (2H, m)。50C)1-[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]-2-丙醇的制備。 將LiAlH4(1.20g，31.6mol)在室溫下添加至1_[1_(苯甲?；被?環(huán)丁基]丙 醇(2. 64g，11. 3mmol)的THF(40mL)溶液。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，并回流30分鐘。 用冰水浴冷卻該混合物，并加入數(shù)滴水。然后用乙酸乙酯稀釋該混合物，用無水Na2S04干 燥，過濾，并真空濃縮?？焖賹游?AcOEt)該殘留物得到成為無色油的標(biāo)題化合物(2.25g， 91 % ) 0 t-WR (400MHz，CDC13) 8 1. 21 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 63 (1H，dd, J = 13. 7 和 50D) 1-(1-氨基環(huán)丁基)-2-丙醇的制備。將10 % Pd-C(300mg)加入到 1_[1_(芐基氨基)環(huán) 丁基]_2_ 丙醇(2. 24g， 10. 2mmol)的Et0H(50mL)溶液中，將該混合物在5kgf/cm2H2氣氛下室溫?cái)嚢?0小時(shí)。過 濾該混合物，并真空濃縮濾出液。蒸餾該殘留物得到成為淡黃色油的標(biāo)題化合物(1.24g， 94% )。'H-NMR(400MHz, CDC13) 6 1. 17 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 43 (1H，ddd, J = 14. 7, 10. 4 和 1. 2Hz)，1. 61-1. 69 (1H, m)，1. 72 (1H, dd, J = 14. 7 和 1. 8Hz)，1. 75-1. 90 (3H, m)， 1. 93-2. 03 (1H, m)，2. 12-2. 20 (1H, m)，4. 00-4. 08 (1H, m)。50F)3-[1_(2-羥基丙基)環(huán)丁氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲?；?丙烯酸乙酯的 制備。將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(2. 45g，9. 27mmol)、 Ac20(5. 30mL,56. lmmol)和原甲酸三乙酯(3. 10mL, 18. 6mmol)的溶液在120°C下加熱3小 時(shí)。真空濃縮該混合物并高真空干燥。在0°C下將含于無水甲苯(10mL)的1-[1_氨基環(huán) 丁基]-2-丙醇(1.20g，9. 29mmol)緩慢添加至殘留物在無水甲苯(30mL)中的混合物，并在 室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)去除溶劑。對殘留物快速層析(AcOEt 己烷=1 1)得到成 為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(3. 10g,83% )。'H-NMR(400MHz, CDC13) 6 0. 95(0. 6H，t，J = 7. 3Hz)，1. 09 (2. 4H, t, J = 7. 3Hz)，1. 29 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 51 (1H, brs)，1. 83-2. 05 (4H, m)，2. 18-2. 35 (3H, m)，2. 41-2. 53 (1H, m)，3. 95-4. 15 (3H, m)，6. 96-7. 13 (1H, m)，8. 27 (0. 8H, d, J = 14. 7Hz)，8. 31(0. 2H, d, J = 14. 7Hz)，10. 30(0. 2H, d, J = 13. 4Hz)，11. 56(0. 8H, d, J = 13. 4Hz)。
804' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。在0°C下將NaH(40mg)添加至3_[1_(2_羥基1丙基)環(huán)丁氨基]_2_(2，3，4，5-四 氟苯甲?；?丙烯酸乙酯(404mg，1. OOmmol)的DMF(4mL)溶液。在0°C下攪拌1小時(shí)后添加 NaH(40mg)。將混合物在0°C下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌1小時(shí)，并在80°C下攪拌1小時(shí)。 在0°C下向該混合物中分批添加水，過濾分離所得的沉淀物，依次用水和iPr20洗滌并干燥 得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(244mg,67% )。力-匪R(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t，J =7. 3Hz)，1. 43 (3H, d，J = 6. 1Hz)，1. 72 (1H, q，J = 10. 4Hz)，1. 90-2. 04 (1H, m)，2. 24 (1H, q, J = 10. 4Hz)，2. 34-2. 43 (1H, m)，2. 53-2. 74 (4H, m)，4. 24 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 48-4. 58 (1H, m)，7. 72 (1H, qd, J = 10. 4 和 7. 9Hz)，8. 40 (1H, s)。50H)10'，11' -二氟-2'，3' -二氫 _2'-甲基 _9'-硝基 _8 氧-螺環(huán)[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-2'-甲基 _8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[1,2,3-ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(182mg，0. 501mmol) 在濃H2S04(2mL)中的溶液在0°C下用固體KN03(72. 0mg，0. 712mmol)分批處理。在0°C下 攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入冰水，過濾分離所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成 為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(190mg,93% )。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 45 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 61-1. 77 (1H, m)，1. 90-2. 03 (1H, m)，2. 29-2. 48 (3H, m)， 2. 57-2. 72 (3H, m)，4. 24 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 62-4. 73 (1H, m)，8. 43 (1H, s)。 501)9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫 _2'-甲基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。
將10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-2'-甲基 _9'-硝基 _8'-氧螺環(huán)-[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1.13g， 2. 77mmol)的DMF(70mL)溶液在氫氣氣氛下于50°C下用10% Pd/C(230mg)處理2小時(shí)。用 Celite過濾除去催化劑，并真空濃縮濾出液。用EtOH洗滌殘留物，過濾收集并干燥得到成 為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(824mg,79% )。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 26 (3H, t，J = 7. 3Hz)，1. 36 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 70 (1H, q, J = 10. 4Hz)，1. 86-2. 00 (1H, m)，2. 25 (1H, q, J = 10. 4Hz)，2. 30-2. 39 (1H, m)，2. 42-2. 63 (4H, m)，4. 14-4. 27 (2H, m)，4. 27-4. 37 (1H, m)， 7. 49 (2H, brs) ,8. 22 (1H, s)。50J)9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫 _2'-甲基 _8'-氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。將 2N Na0H(10. OmL)在室溫下加入到 9'-氨基-10' ,11' -二氟 ,3' -二 氫-2'-甲基-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮 雜卓]-7'-羧酸乙酯(768mg，2. 03mmol)在Et0H(20mL)中的混合物中，并將混合物在50°C 下加熱3小時(shí)。將2N HCl(lO.OmL)和水加入該反應(yīng)混合物。過濾收集所得的沉淀物，用 水洗滌，并干燥得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(703mg，99% )。t-NMR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 37 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 70 (1H, q, J = 11. 0Hz)，1. 88-2. 02 (1H, m)，2. 31 (1H, q, J = 11. 0Hz)，2. 37-2. 69 (5H, m)，4. 30-4. 42 (1H, m)，7. 43 (1H, brs) ,8. 47 (1H, s)，14. 61 (1H,50K)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -氧-11' -[2_(2_ 吡 啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜 卓]-7' _羧酸的制備。
將9'-氨基-10'，11' -二氟 _2，3' -二氫 _2'-甲基 _8'-氧螺環(huán)-[環(huán) 丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(351mg，1. OOmmol)、 N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(210mg, 1. 53mmol)和三乙胺(0. 22mL)的 DMS0(5mL)溶液在 120°C下攪拌5小時(shí)。在0°C下向該反應(yīng)混合物分批加入冰水，并用CH2C12萃取該混合物。 用無水妝2504干燥該合并的萃取物，過濾，并真空濃縮。對殘留物快速層析(CH2Cl2-MeOH = 10 1)得到成為黃色無定形固體的標(biāo)題化合物(278mg，59% )。(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 29 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 67 (1H, q, J = 10. 4Hz)，1. 84-1. 99 (1H, m)，2. 21 (1H, q, J =10. 4Hz)，2. 30-2. 40 (1H, m)，2. 40-2. 62 (4H, m)，3. 40-3. 50 (2H, m)，3. 53-3. 67 (2H, m)， 4. 08-4. 20 (1H, m)，5. 91 (1H, brs)，6. 42-6. 50 (2H, m)，6. 65 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 00 (2H, brs) ,7. 32-7. 38 (1H, m) ,7. 94(1H, dd, J = 4. 9 和 1. 2Hz) ,8. 25(1H, s)，15. 24(1H, s). HRESIMS (+) 467. 20453 (計(jì)算得到 C24H27FN504，468. 20471)。 實(shí)施例51 9'-氨基-10'-氟-8' _氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3' (4' H)_[2H，8H]吡啶并[1， 2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸51A)5-[[1_(羥甲基)環(huán)丁基]-甲基氨基]-2-(2，3，4，5_四氟苯甲酰基)丙烯酸 乙酯的制備。將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(2. 80g，10. 6mmol)、 Ac20(6. 01mL,63. 6mmol)和原甲酸三乙酯(3. 53mL，21. 2mmol)的溶液在 120°C 下加熱 3 小時(shí)。真空濃縮該混合物并高真空干燥。將粗產(chǎn)物溶解于甲苯(30mL)，并在冰冷下添加 [1_(氨甲基)環(huán)丁基]]甲醇鹽酸化物(1.60g，10. 6mmol)在甲苯(20mL)中的懸浮液和三乙 胺(1. 48mL, 10. 6mmol)。將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，并真空濃縮得到粗產(chǎn)物。通過柱層 析(己烷EtOAc 10 1 —2 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為白色固體的標(biāo)題化合物(1.88g， 46% )。(400MHz，CDC13) 8 0. 95-1. 12 (3H，m)，1. 66-1. 69 (1H，m)，1. 81-1. 91 (4H，m)， 1. 94-2. 03 (2H, m)，3. 57 (2H, d, J = 6. 7Hz)，3. 72 (2H, d, J = 4. 3Hz)，4. 00-4. 10 (2H, m)， 6. 96-7. 12 (1H, m)，8. 09-8. 15 (1H, m)，9. 65-11. 15 (1H, m)。51B)10'，11' -二氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3‘ (4' H) _[2H，8H]吡啶并[1， 2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。
在氬氣氛圍和冰冷下，將5-[[1_(羥甲基)環(huán)丁基]甲氨基]-2_(2，3，4，5-四 氟苯甲?；?丙烯酸乙酯(1.88g，4.83mm0l)的DMF(lOmL)溶液添加至含于油的60% NaH(424mg,10. 6mmol)在DMF(15mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，并在 90°C下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。將混合物注入冰水，真空過濾收集所得的沉淀物，用乙醇和水洗滌 以得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(1. 41g,84% )。屯-匪R(400MHz，DMS0-d6) 6 1. 29 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 80-2. 09 (6H, m)，4. 24 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 43 (2H, s) ,4. 61 (2H, s)， 7. 73 (1H, dd, J = 10. 4，7. 9Hz)，8. 74 (1H, s) EIMS (+) 349 [M] +。51C)10'，11' -二氟-9'-硝基-8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1，3' (4' H)-[2H， 8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]_7'-羧酸乙酯的制備。將10，11_ 二氟-8-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3' (4 ‘ H) _[2H，8H]-吡啶并[1，2， 3-ef][l,4]苯并氧氮雜卓]-7-羧酸乙酯(1.29g,3. 69mmol)在濃H2S04(15mL)中的溶液 在0°C下用固體KN03(523mg，5. 17mmol)分批處理。在0 °C下攪拌3小時(shí)后，將反應(yīng)混合 物注入冰水中，過濾所得的沉淀物，用水洗滌，并懸浮于熱EtOH中。將反應(yīng)混合物回流攪 拌1小時(shí)，冷卻至室溫并過濾收集該沉淀物以得到成為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(1. 20g, 82%) o t-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t，J-7. 3Hz)，1. 80-1. 88 (1H，m)，1. 92-2. 00 (2H, m)，2. 02-2. 09 (3H, m)，4. 23 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 51 (2H, s)，4. 61 (2H, s)，8. 81 (1H, s). ESIMS(+) :395[M+H] +。51D)9'-氨基-10'，11' -二氟 _8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1，3' (4' H)-[2H， 8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]_7'-羧酸乙酯的制備。
將10'，11' -二氟-9'-硝基-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷-1，3' (4' H)[2H，8H] 吡啶并[1,2,3-ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1. 18g,2. 99mmol)在 DMF(60mL) 中的溶液在50°C氫氣氛圍(0. 35MPa)下用10% Pd/C(120mg)處理7小時(shí)。通過Celite過 濾去除催化劑，并向?yàn)V出液中添加硅膠(50g)。將混合物攪拌30分鐘，過濾去除硅膠，并真 空去除溶劑。用EtOH洗滌沉淀物，干燥得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(320mg，29%)。 iH-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 76-2. 04 (6H, m)，4. 17-4. 26 (4H, m)， 4. 51 (2H, s) ,7. 57 (2H, brs) ,8. 52 (1H, s). ESIMS (+) :365[M+H] +。51E)9'-氨基-10'，11' -二氟 _8' _ 氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1，3' (4' H)-[2H， 8H]吡啶并[1,2,3-ef] [1,4]苯并氧氮雜卓]_7' _羧酸的制備。將9'-氨基-10，11' -二氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3' -(4' H)-[2H， 8H]吡啶并[1,2,3-ef] [1，4]苯并氧氮雜卓]-7 ‘-羧酸乙酯(300mg,0. 823mmol)在 Ac0H-H20-H2S04(2 1 0. 3v/v，6.6mL)混合物中的溶液在100°C下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混 合物注入冰水，過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為褐色固體的標(biāo)題化合物 (242mg,87% )。t-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 76-2. 07 (6H, m) ,4. 27 (2H, s) ,4. 69 (2H, s)， 7. 48(2H，brs)，8. 92(1H，s)，14. 63(1H，s)。ESIMS (+) :337[M+H] +。51F)9'-氨基-10'-氟-8'-氧_ll_[2-(吡啶_2_基氨基)乙氨基]螺環(huán) [環(huán)丁烷_1，3' (4' H)-[2H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓-7'-羧酸的制備。將 9'-氨基-10'，11' -二氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，3' (4' H)-[2H，8H]
吡啶并[l，2，3-ef] [1，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(220mg，0. 654mmol)、N-2-吡啶基-1， 2-乙二胺(135mg,0. 981mmol)和三乙胺(0. 137mL,0. 981mmol)在 DMS0(5mL)中的溶液在 100°C下攪拌5小時(shí)。用Celite過濾除去沉淀物，向?yàn)V出液中添加水，過濾收集所得的沉淀 物，用EtOH洗滌并干燥得到成為淡褐色固體的標(biāo)題化合物(197mg，66% )。^-NMR(400MHz， DMS0-d6) 8 1. 73-1. 87 (3H, m)，1. 91-2. 06 (3H, m)，3. 43-3. 47 (2H, m)，3. 53-3. 60 (2H, m)， 4. 02 (2H, s)，4. 55 (2H, s)，6. 25-6. 32 (1H, m)，6. 45-6. 49 (2H, m)，6. 65-6. 73 (1H, m)， 7. 02 (2H, brs)，7. 35 (1H, td，J = 6. 7，1. 8Hz)，7. 95 (1H, dd，J = 5. 5，1. 2Hz)，8. 65 (1H, s)， 15. 25(1H, s) HRESIMS(+) :454. 18998 (+0. 93mmu)。實(shí)施例52 9'-氨基-10'-氟-8'-氧-11' -[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丙 烷-1，3' (4' H)-[2H，8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸52A) 3- [ [1-(羥甲基)環(huán)丙基]-甲基氨基]_2_ (五氟苯甲?；?丙烯酸乙酯的制備。 將3-氧-3-(五氟苯基)丙酸乙酯(7. 01g，24. 8mmol)、Ac20(14. OmL，148mmol)和 原甲酸三乙酯(8. 25mL，49. 6mmol)的溶液在120°C下加熱2小時(shí)。真空濃縮該混合物并 真空干燥。將粗產(chǎn)物溶解于無水甲苯(120mL)中，并在0°C下極為緩慢地添加[1_(氨甲 基)_環(huán)丙基]]甲醇(2.51g，24.8mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，蒸發(fā)去除溶 劑。通過柱層析(己烷EtOAc 2 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物 (7. 30g,75% ) o Mp. 74. 5-76. 0°C。1H_WR(400MHZ，CDC13) 8 0. 57-0. 63(4H,m), 1. 12(3H,t, J = 7. 3Hz)，1. 62 (2H, t, J = 5. 5Hz)，3. 50 (2H, d, J = 5. 5Hz)，3. 98-4. 17 (2H, m)，8. 17 (1H, d, J = 5. 5Hz)，11. 22 (1H, brs). EIMS (+) 393 [M]+.計(jì)算得到 C17H16F5N04 :C，51. 80 ；H，3. 90 ；N, 3. 56.實(shí)際測得:C,51. 91 ；H，4. 10 ；N，3. 56。52B)9' ,10,11'-三氟 _8' _ 氧螺環(huán) _[環(huán)丙烷-1，3' (4' H) _[2H，8H]吡啶并 [1,2,3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將 NaH (920mg, 23. Ommol, 60 % 含于油中)的 DMF (50mL)溶液冷卻至 0 °C，并用 含于DMF(lOmL)的3_[[1_(羥甲基)環(huán)丙基]甲氨基]_2_(五氟苯甲?；?丙烯酸乙酯(4. 10g, 10. 4mmol)逐滴處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，并在80°C下攪拌1 小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物注入冰水中，過濾所得的沉淀物并用水洗滌。將所得的固體溶 解于100mLEt0H-CH2Cl2(2 1)并過濾。將濾出液濃縮至30mL，過濾收集所得的沉淀物， 用EtOH洗滌并干燥得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(2.45g，67% )。M. p. 209_211°C。 iH-WR(400MHz，DMSO) 8 0. 56 (2H, t, J = 6. 1Hz)，0. 77 (2H, t, J = 6. 1Hz)，1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，4. 20 (2H, s)，4. 21 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 49 (2H, s). EIMS (+) 353 [M] +。
52C)10'，11' -二氟-9' _ (2，4_ 二甲氧基芐基氨基)_8 ‘-氧螺環(huán)[環(huán)丙烷_1， 3' (4' H)-[2H，8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。將9'，10' ,11 ‘-三氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1，3' (4 ‘ H)-[2H，8H]吡 啶并[1,2,3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1.51g，4. 27mmol)、三乙胺(0. 890mL,
6.34mmol)和2，4- 二甲氧基芐胺(0. 635mL，4. 29mmol)的甲苯(30mL)溶液在90°C下攪拌 6小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入水，并以EtOAc萃取。用水和鹽水洗滌有機(jī)層，用無水Na2S04干 燥，去除溶劑。通過柱層析(己烷EtOAc 2 3)純化該粗產(chǎn)物得到成為黃色固體的標(biāo)題 化合物(1.48g,69% )。M. p. 131-132°C . ^—WR(400MHz，CDC13) 8 0. 58 (2H, t, J = 5. 5Hz) ,0. 75 (2H, t, J =5. 5Hz)，1. 36 (3H, t, J-7. 3Hz)，3. 78 (3H, s)，3. 82 (3H, s)，4. 03 (2H, s)，4. 26 (2H, brs)， 4. 35 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 59 (2H, dd，J = 6. 1，3. 0Hz)，6. 37-6. 46 (2H, m)，7. 23 (1H, d, J =
7.9Hz)，8. 01 (1H, s)，10. 48 (1H, brs) EIMS (+) 500 [M] +。52D)9'-氨基-10'，11' -二氟 _8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丙烷 _1，3' (4' H)-[2H， 8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-9' _ (2，4-二甲氧基芐基氨基)-8'-氧螺環(huán)_ [環(huán)丙烷_1， 3' (4' H)-[2H，8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(1. 42g，2. 84mmol) 的三氟乙酸(30mL)溶液在室溫下攪拌15分鐘。用CH2C12稀釋反應(yīng)混合物，并用飽和 NaHC03、鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥。去除溶劑，將所得的固體溶解于DMF并過濾。將濾出
液注入水中，過濾所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(835mg， 84%) oM. p. 278-279"C^H-WR(400MHz，DMS0) 8 0. 50 (2H, dd, J = 6. 1,4. 8Hz) ,0. 71(2H，dd， J = 6. 1,4. 8Hz)，1. 25 (3H, t, J = 7. 3Hz) ,4. 03 (2H, s) ,4. 17 (2H, q, J = 7. 3Hz) ,4. 44 (2H, s)，7. 68 (2H, brs)，8. 32 (1H, s). ESIMS (+) 351 [M+H]。 52E)9'-氨基-10'，11' -二氟 -氧螺環(huán) _[環(huán)丙烷 _1，3' (4' H)-[2H， 8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將9'-氨基-10'，11' -二氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1，3' -(4' H)-[2H， 8H]吡啶并[1,2,3-ef]苯并氧氮雜卓]7'-羧酸乙酯(830mg,2. 37mmol)和1M NaOH 的Et0H(20mL)溶液在室溫下攪拌3分鐘。去除溶劑，并將殘留物溶解在水中。將溶液 用2MHC1酸化至pH 7，過濾所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為淡黃色固體的標(biāo)題 化合物(757mg,99% ) 'H-NMR 400MHz, DMSO) 8 0. 51 (2H, dd, J = 6. 1,4. 8Hz) ,0. 73 (2H, dd, J = 6. 1,4. 8Hz)，4. 07 (2H, s)，4. 62 (2H, s)，7. 58 (2H, brs) ,8. 67 (1H, s)，14. 66 (1H, s).ESIMS(+) :323[M+H]。52F)9'-氨基-10'-氟_8 ‘-氧-11' -[2_(2_吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán) [環(huán)丙烷_1，3' (4' H)-[2H，8H]吡啶并[l，2，3-ef]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。 將9'-氨基-10'，11' -二氟-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丙烷 _1，3' _(4' H)-[2H， 8H]吡啶并[1,2,3-ef]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙基乙基酯(505mg，1. 57mmol)、三乙胺 (0. 320mL，2. 30mmol)和 N_2_ 吡啶基-1，2-乙二胺(322mg，2. 35mmol)在 DMS0(8mL)中的溶 液在100°C下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入冰水，過濾所得的沉淀物，用乙醇洗滌并干燥 得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(595mg，86% )。'H-NMR(400MHz, DMSO) 8 0. 39 (2H, t, J = 6. 1Hz) ,0. 68 (2H, t, J = 6. 1Hz)， 3. 40-3. 50 (2H, m)，3. 52-3. 64 (2H, m)，3. 86 (2H, s)，4. 48 (2H, brs)，6. 28 (1H, brs)，
6.40-6. 50 (2H, m)，6. 66 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 09 (2H, brs)，7. 34 (1H, td，J = 6. 7，1. 8Hz)，
7.90-7. 98 (1H, m)，7. 90-8. 00 (1H, m)，8. 43 (1H, s)，15. 26 (1H, s). ESIMS (+) 440 [M+H] +。實(shí)施例53 9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸53A) (1-羥基環(huán)丁基)乙酸乙酯的制備。 通過注射器將三甲基氯硅烷(1. 14mL，8. 92_ol)添加至鋅粉(7. 97g，0. 122mol) 在無水Et20(200mL)的懸浮液中。將混合物在室溫下攪拌15分鐘，加熱至回流，去除熱源， 以使醚輕微沸騰的速率添加溴乙酸乙酯(10. 3mL，92. 9mmol)。加熱至回流1小時(shí)后，將混合 物在室溫下攪拌1小時(shí)。添加在醚(30mL)中的環(huán)戊酮(6. 00g，75. 9mmol)溶液，同時(shí)通過間 歇冷卻將混合物的溫度保持在19-20°C。室溫下攪拌1小時(shí)后，將混合物注入冰凍的25% 氨水中(400mL)。用醚萃取水相，用K2C03干燥合并的有機(jī)相，蒸發(fā)溶劑得到成為無色油的標(biāo) 題化合物(6. 50g,54% )。^-WR(400MHz，CDC13) 8 1. 29(3H，t，J = 7. 3Hz)，1. 47-1. 64(1H, m)，1. 76-1. 87 (1H, m)，1. 93-2. 06 (2H, m)，2. 12-2. 22 (2H, m)，2. 67 (2H, s)，3. 70 (1H, s)， 4. 19 (2H, q, J = 7. 3Hz)。53B) [1_(苯甲酰基氨基)環(huán)丁基]乙酸乙酯的制備。 在室溫下將H2S04 (2. 20mL, 41. 3mmol)緩慢加入(1_羥基環(huán)丁基)乙酸乙酯 (6. 45g，40. 8mmol)和芐腈(40mL，0. 392mol)的混合物中。將混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，并在 80°C下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。在冰水浴中冷卻該混合物，添加2N NaOH溶液，直至溶液達(dá)到pH = 7。用乙酸乙酯萃取該混合物，用無水Na2S04干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并真空濃縮。對 殘留物快速層析(AcOEt 己烷=5 1)得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(5. 40g，51%)。 ^-WR(400MHz，CDC13) 6 1. 22 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 84-2. 07 (2H, m)，2. 22-2. 32 (2H, m)， 2. 44-2. 55 (2H, m)，3. 05 (2H, s)，4. 11 (2H, q, J = 7. 3Hz)，6. 73 (1H, s)，7. 39-7. 52 (3H, m)， 7. 72-7. 79 (2H, m)。53C) [1_(苯甲?；被?環(huán)丁基]乙酸的制備。
在室溫下將3N K0H(10mL，30mmol)添加至1_(苯甲?；被?-環(huán)丁基乙酸乙 酯(3. 87g，14. 8mmol)的Et0H(30mL)溶液，并將混合物攪拌1小時(shí)。真空濃縮該反應(yīng)混合 物，并添加6N HCl(5.0mL)。過濾收集所得的沉淀物，用水和二異丙醚洗滌，并干燥得到成
89為無色固體的標(biāo)題化合物(3. 15g,91% )。^-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 76-1. 89 (2H, m)， 2. 16-2. 26 (2H, m)，2. 28-2. 40 (2H, m)，2. 90 (2H, s)，7. 43 (2H, t, J = 6. 7Hz)，7. 50 (1H, t, J =6. 7Hz)，7. 83 (2H, d, J = 6. 7Hz)，8. 45 (1H, s)，12. 00 (1H, brs)。53D) [1_(苯甲?；被?環(huán)丁基]乙酰胺的制備。 將[1_(苯甲酰基氨基)環(huán)丁基]乙酸(1. 00g，4. 29mmol)和亞硫酰氯(3. 20mL, 43.9mmol)的混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。真空濃縮該混合物。向冰水浴中冷卻的殘留 物在THF(30mL)的混合物中添加25 %氨水(30mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。用 Ac0Et-Me0H(3 lv/v)稀釋該混合物并用水洗滌。用無水Na2S04干燥有機(jī)相，過濾，并真 空濃縮得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(925mg，93% )。(400MHz，DMS0_d6)8 1. 75-1. 87 (2H, m)，2. 14-2. 23 (2H, m)，2. 37-2. 47 (2H, m)，2. 70 (2H, s)，6. 80 (1H, s)，7. 29 (1H, s)，7. 43 (2H, t, J = 6. 7Hz)，7. 50 (1H, t, J = 6. 7Hz)， 7. 82 (2H, d, J = 6. 7Hz)，8. 39 (1H, s)。53E)2-[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]乙胺的制備。 在室溫下30分鐘內(nèi)將LiAlH4(570mg，15.0mmol)分批加入到[1_(苯甲酰基氨基) 環(huán)丁基]乙酰胺(687mg，3.00mmol)的THF(30mL)溶液中，并將該混合物加熱回流5小時(shí)。 將混合物在冰水浴中冷卻，加入含水THF和數(shù)滴水，再將該混合物靜置過夜。用Celite過 濾該混合物，以無水Na2S04干燥該溶液。真空濃縮該溶液得到成為淡黃色油的標(biāo)題化合 物(609mg,99% )。t-WR(400MHz，CDC13) 6 1. 65-1. 80 (2H, m)，1. 82 (2H, t, J = 7. 3Hz)， 1. 86-2. 02 (4H, m)，2. 82 (2H, t, J = 7. 3Hz)，3. 65 (2H, s)，7. 20-7. 38 (5H, m)。53F)2-[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]-N-(叔丁氧基羰基)乙胺的制備。 將BoC20(230mg，1. 05mmol)加入到冰水浴中的2_[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]乙胺 (205mg, 1. OOmmol)的THF(lmL)溶液中。在冰水浴中將混合物攪拌30分鐘。真空濃縮該混 合物，對殘留物快速層析(AcOEt 己烷=2 1)得到成為無色固體的標(biāo)題化合物(164mg， 54 % )。i-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 36 (9H, s)，1. 60-1. 84 (6H, m)，1. 84-1. 94 (2H, m)，
2. 92-3. 04 (2H, m)，3. 53 (2H, s)，6. 83 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 21 (1H, t, J = 7. 3Hz)，7. 29 (2H, t, J = 7. 3Hz)，7. 35 (2H, d J = 7. 3Hz)。53G)2-(1_氨基環(huán)丁基)-N_(叔丁氧基羰基)乙胺的制備。 向2-[1_(芐基氨基)環(huán)丁基]-N-(叔丁氧基羰基)乙胺(117mg，0.384mmol)的 Et0H(5mL)溶液添加10% Pd_C(35mg)，并將混合物在5kgf/cm2H2氣體下和室溫下攪拌5小 時(shí)。過濾該混合物，并真空濃縮該濾出液。蒸餾該殘留物得到成為無色固體的標(biāo)題化合物 (76. 0mg,92%)。(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 37 (9H, s)，1. 49-1. 58(2H，m)，1. 62-1. 77 (4H, m)，1. 82-1. 91 (2H, m)，2. 92-3. 01 (2H, m)，6. 78 (1H, t, J = 5. 5Hz)。53H)3-[l-[2_(叔丁氧基羰基氨基)乙基]環(huán)丁氨基]-2- (2，3，4，5-四氟苯甲酰 基)丙烯酸乙酯的制備。 將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(5. 28g，20. Ommol)、 Ac20(ll. 4mL，0. 121mol)和原甲酸三乙酯(6. 66mL，40. Ommol)的溶液在 120°C 下加熱 3 小時(shí)。真空濃縮該混合物并高真空干燥。在0°C下將含于無水甲苯(30mL)的2-[1-(芐 基氨基)環(huán)丁基]-N-(叔丁氧基羰基)乙胺(4.29g，20.0mmol)緩慢添加至該殘留物 在無水甲苯(70mL)中的混合物中，并在室溫下攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)去除溶劑，對殘留物 快速層析(AcOEt 己烷=2 1)得到成為淡黃色油的標(biāo)題化合物(9. 10g，93%)。 ^-WR(400MHz，CDC13) 8 0. 98 (0. 7H，t，J = 7. 3Hz)，1. 10 (2. 3H，t，J = 7. 3Hz)，1. 43 (9H, s)， 1. 90-2. 07 (4H, m)，2. 17-2. 38 (4H, m)，3. 12-3. 23 (2H, m)，4. 00-4. 15 (2H, m)，4. 53-4. 65 (1H, br)，6. 95-7. 03 (0. 7H, m)，7. 05-7. 13 (0. 3H, m)，8. 13 (1H, d, J = 14. 1Hz)，9. 88 (0. 3H, d, J = 13. 5Hz)，11. 29(0. 7H3d, J = 13. 5Hz). HRMS (ESI+)對 C18H19F4N04 [M+H] + 計(jì)算得到， 489. 20126 ；實(shí)際測得 489. 20200。531)1' _(叔丁氧基羰基)-10'，11' -二氟-10'，11' -二氫-8'-氧螺環(huán) [環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將3-[1-[2_(叔丁氧基羰基氨基)乙基]環(huán)丁氨基]-2_(2，3，4，5-四氟苯甲酰 基)丙烯酸乙酯(500mg, 1. 02mmol)的DMF(5mL)溶液在冰水浴中冷卻。添加NaH(82. Omg， 2. 05mmol)，將混合物攪拌30分鐘，然后室溫下攪拌2小時(shí)。將混合物冷卻至0°C，向該混 合物中分批添加水。過濾合并所得的沉淀物，依次用水和二異丙醚洗滌，并干燥得到成為 淡黃色固體的標(biāo)題化合物(312mg,68% )。iH-WRQOOMHz，DMSO-de) 8 1. 28 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 42 (5H, s)，1. 54 (4H, s)，1. 67-1. 80 (1H, m)，1. 80-1. 95 (1H, m)，2. 10-2. 22 (1H, m)， 2. 22-2. 37 (2H, m)，2. 40-2. 56 (1H, m)，2. 65-2. 80 (2H, m)，4. 17-4. 37 (3H, m)，7. 93-8. 01 (1H, m)，8. 47 (0. 44H, s)，8. 51 (0. 56H, s)。
53J)10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -硝基 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸乙酯的制備。將1' _(叔丁氧基羰基)_10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸乙酯(5.50g， 12. 3mmol)在濃H2S04 (60mL)中的溶液在0°C下用固體KN03 (1. 37g，13. 6mmol)分批處理。在 0°C下攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入冰水中，合并過濾所得的沉淀物并用水洗滌。對殘 留物快速層析(CH2Cl2-AcOEt = 1:1)得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(3. 28g,68% ) iH-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 63-1. 75 (1H, m)，1. 85-1. 98 (1H, m)， 2. 35-2. 57 (6H, m)，3. 47-3. 55 (2H, m)，4. 22 (2H, q, J = 7. 3Hz)，6. 96-7. 02 (1H, m)，8. 32 (1H, s)。53K)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸乙酯的制備。將 10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-9'-硝基-8' _ 氧螺環(huán)[環(huán)丁烷-1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸乙酯(1. 23g，3. 13mmol)的 DMF(77mL)溶液在氫氣氣氛下于50°C下用10% Pd/C(250mg)處理1小時(shí)。用Celite過濾 除去催化劑，并真空濃縮濾出液。對殘留物快速層析(CH2Cl2-Me0H = 2 1)得到成為黃 色固體的標(biāo)題化合物(1. 00g,88% )。t-WR(400MHz，DMS0-d6) 8 1. 25(3H，X，J = 7. 3Hz)， 1. 62-1. 73 (1H, m)，1. 82-1. 96 (1H, m)，2. 24-2. 41 (4H, m)，2. 45-2. 60 (2H, m)，3. 27-3. 38 (2H,
m)，4. 19 (2H, q, J = 7. 3Hz)，5. 28-5. 34 (1H, m)，7. 10 (2H, brs)，8. 12 (1H, s)。53L)9'-氨基-10，11' -二氟-2' ,3' -二氫 _8 '-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷-1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7' _羧酸的制備。 將2N Na0H(7. 0mL，14. Ommol)在室溫下加入到 9 ‘-氨基-10'，11' -二 氟-2'，3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，4]_ 苯 并二氮卓]-7'-羧酸乙酯(515mg，1.41mm0l)在Et0H(15mL)中的混合物中，并將混合物 在50°C下加熱3小時(shí)。將2N HC1 (7. OmL)和水加入該反應(yīng)混合物。過濾收集所得的沉淀 物，用水洗滌，并干燥得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(397mg，83%)。'H-NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 1. 61-1. 73 (1H, m)，1. 82-1. 97 (1H, m)，2. 30-2. 44 (4H, m)，2. 55-2. 69 (2H, m)， 3. 25-3. 50 (2H, m)，5. 53-5. 59 (1H, br)，7. 03 (2H, brs)，8. 35 (1H, s)，14. 75 (1H, s)。53M)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基) 乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧
酸的制備。 將9'-氨基-10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫-8'氧-螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并二氮卓]-7'-羧酸(300mg，0. 895mmol)、 N2-吡啶基-1,2-乙二胺(185mg, 1. 35mmol)和三乙胺(0. 23mL)在DMS0(4mL)中的溶液在 120°C下攪拌5小時(shí)。向該反應(yīng)混合物分批加入冰水，并用012012萃取該混合物。用無水 Na2S04干燥有機(jī)層，過濾，并真空濃縮。對殘留物快速層析(CH2Cl2-MeOH= 10 1)得到成 為黃色固體的標(biāo)題化合物(259mg,64% )。(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 58-1. 70 (1H, m)， 1. 78-1. 92 (1H, m)，2. 21-2. 38 (4H, m)，2. 43-2. 60 (2H, m)，3. 19-3. 37 (2H, m)，3. 37-3. 51 (4H, m)，4. 50 (1H, t, J = 5. 5Hz)，5. 50-5. 58 (1H, br)，6. 42-6. 51 (2H，m)，6. 65 (1H, t, J = 5. 5Hz)， 6. 82 (2H, brs)，7. 36 (1H, td, J = 6. 7 和 1. 8Hz)，7. 95 (1H, dd, J = 4. 9 和 1. 2Hz)，8. 18 (1H, s)，15. 28 (1H, s). HRESIMS (+) 453. 20466 (計(jì)算得到 C23H26FN60，453. 20504)。實(shí)施例54:8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[草脲 胺-3，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸。54A) [3_(叔丁氧基羰基氨基)草脲胺_3_基]甲醇的制備。
向1_(叔丁氧基羰基氨基)環(huán)戊烷羧酸(6. 57g，28. 4mmol)的THF(60mL)溶液中室 溫下添加LiAlH4 (2. 89g，61. Omol)。攪拌5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入冰水冰攪拌30分鐘。 向該混合物添加AcOEt，并攪拌30分鐘。過濾該混合物并用AcOEt萃取濾出液。用水和鹽 水洗滌萃取混合物，用MgS04干燥，并真空濃縮。通過柱層析(己烷AcOEt 1 1)純化殘 留物得到成為無色固體的[3-(叔丁氧基羰基氨基)草脲胺-3-基]甲醇(2.82g，46%)。 iH-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 36 (9H, s)，1. 84-1. 91 (1H, m)，1. 93-2. 02 (1H, m)，3. 46 (2H, d, J = 5. 5Hz)，3. 59-3. 62 (1H, d, J = 8. 6Hz)，3. 66-3. 70 (3H, m)，4. 83 (1H, t, J = 5. 5Hz)， 6. 78 (1H, brs)。54B) (3-氨基草脲胺_3_基)甲醇鹽酸化物的制備。 將[3-(叔丁氧基羰基氨基)草脲胺-3-基]甲醇(2. 50g, 11. 5mmol)的4M HC1-二 噁烷(30mL)溶液室溫?cái)嚢?小時(shí)。真空濃縮該混合物，并干燥得到成為淡褐色油的(3-氨 基草脲胺-3-基)甲醇鹽酸化物(2. 17g，定量)。'H-NMR(400MHz, DMS0-d6) 6 1. 89-2. 01 (2H， m)，3. 51-3. 58 (2H, m)，3. 66 (2H, s)，3. 71-3. 76 (1H, m)，3. 86-3. 92 (1H, m)，8. 33 (3H, brs)。54C)3-[3-[l_(羥甲基)]草脲胺基氨基]_(2，3，4，5_四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯 的制備。 將 2,3,4,5-四氟苯甲酰基乙酸乙酯(3. 04g, 11. 5mmol)、Ac20(6. 52mL，69. Ommol) 和原甲酸三乙酯(3.83mL，23.0mmol)的溶液在120°C下加熱3小時(shí)。真空濃縮該混合物 并高真空干燥。將粗產(chǎn)物溶解于Et0H(50mL)，并添加(3-氨基草脲胺-3-基)甲醇鹽酸 化物(2. 17g,ll. 5mmol)和三乙胺(1. 92mL，13. 8mmol)。在室溫下攪拌17小時(shí)后，真空濃 縮該混合物得到粗產(chǎn)物。通過柱層析(己烷EtOAc 4:1 — 1:2)純化該粗產(chǎn)物得到 成為黃色油的3-[3-[1-(羥甲基)草脲胺基氨基]一(2，3，4，5_四氟苯甲?；?丙烯酸酯 (4. 18g,93% ) o ^-WR(400MHz，DMS0) 8 0. 87 (3H x 1/4，t，J = 7. 3Hz)，0. 99 (3H x 3/4, t, J = 7. 3Hz)，2. 09-2. 14 (2H, m)，3. 56-3. 74 (3H, m)，3. 78-3. 97 (5H, m)，5. 50 (1H x 1/4，t, J=5. 5Hz)，5. 54 (1H x 3/4，t, J = 5. 5Hz)，7. 33-7. 46 (1H, m)，8. 20-8. 27 (1H, m)，9. 88 (lHx 1/4，d, J = 14. 7Hz)，11. 27 (1H x 3/4，d, J = 14. 7Hz)。54D)9'，10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3‘ _2' H]-[7H]吡啶并[1，2， 3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。 在氬氣氣氛下和冰冷下向3-[3-[1_(羥甲基)草脲胺基氨基]-2_(2，3，4，5-四 氟苯甲?；?-丙烯酸酯(3. 94g，10. 6mmol)的DMF(50mL)溶液中添加含于油的60% NaH(892mg, 22. 3mmol)。60°C下攪拌5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物注入冰水，過濾收集所得的沉 淀物，用水和EtOH洗滌，并干燥得到成為無色固體的9' ,10' -二氟-7'-氧螺環(huán)-草 脲胺-3，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(2.93g， 79% )。(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)，2. 38-2. 42 (2H, m)，3. 78 (1H, d, J = 10. 4Hz)，3. 92-3. 98 (1H, m)，4. 09-4. 14 (1H, m)，4. 20-4. 25 (3H, m)，4. 57 (1H, d, J = 11. 6Hz)，4. 65 (1H, d, J = 11. 6Hz)，7. 67 (1H, dd, J = 10. 4,8. 6Hz)，8. 50 (1H, s)。54E)9'，10' -二氟 _8'-硝基 _7'-氧螺環(huán) _ [草脲胺-33' (2' H)-[7H]吡 啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。將9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3' (2 ‘ H)-[7H]吡啶并[1，2， 3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(2. 90g,8. 26mmol)在濃H2S04(40mL)中的溶液 在0°C下用固體KN03(1. 17g，11.6mm0l)分批處理。0 °C下攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物 注入冰水，過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為無色固體的9' ,10' -二 氟-8'-硝基-7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3' (2' H)-[7H]吡啶并-[l，2，3-de][l，4] 苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(3. 20g,98% )。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6) 8 1. 26 (3H, t, J = 7. 3Hz)，2. 41-2. 46 (2H, m)，3. 78 (1H, d, J = 10. 4Hz)，3. 92-3. 98 (1H, m)，4. 09-4. 14 (1H, m)， 4. 21-4. 29 (3H, m)，4. 62 (1H, d, J = 11. 6Hz)，4. 72 (1H, d, J = 11. 6Hz)，8. 53 (1H, s)。54F)8'-氨基-9'，10' -二氟 _7'-氧螺環(huán) _[草脲胺 _3，3 ‘ (2' H)-[7H] 吡啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯的制備。
將9'，10' -二氟-8'-硝基-7'-氧螺環(huán)[草脲胺_3，3‘ (2' H)-[7H]吡啶并 [1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(3. 15g,7. 95mmol)和鐵(2. 66mg，47. 7mmol) 在Ac0H(40mL)中的混合物在90°C下攪拌5小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮后，添加DMF，并 用Celite過濾該混合物。將濾出液注入水中，過濾收集所得的沉淀物并干燥得到成為無 色固體的8'-氨基-9'，10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺_3，3' (2' H)-[7H]吡啶 并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸乙酯(1. 54g,53% ) t-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 25 (3H, t, J-7. 3Hz)，2. 29-2. 38 (2H, m)，3. 72 (1H, d, J = 11. 0Hz)，3. 90-3. 96 (1H, m)， 4.06-4. 11 (1H, m)，4. 15 (1H, d, J = 11. 0Hz) ,4. 19 (2H, q, J = 7. 3Hz) ,4. 32 (1H, d, J = 11. 0Hz)，4. 41 (1H, d, J = 11. 0Hz)，7. 42 (2H, brs) ,8. 34 (1H, s)。54G)8'-氨基-9'，10' -二氟 _7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3 ‘ (2' H)-[7H]吡 啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。將8'-氨基-9'，10' -二氟-7' _ 氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3' (2 ‘ H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]_6 ‘-羧酸乙酯(1.51g，4. 12mmol)在 Ac0H-H20-H2S04(2 1 0. 3v/v，26. 4mL)混合物中的溶液在100°C下加熱2小時(shí)。將反應(yīng) 混合物注入冰水并攪拌。30分鐘后，過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為淡 黃色固體的8'-氨基-9'，10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺_3，3' (2' H)-[7H]吡 啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(1. 32g,95% ) 'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 2. 38-2. 44 (2H, m)，3. 76 (1H, d, J = 11. 0Hz)，3. 91-3. 97 (1H, m)，4. 09-4. 14(1H, m)， 4. 25 (1H, d, J = 11. 0Hz)，4. 38 (1H, d, J = 11. 0Hz)，4. 50 (1H, d, J = 11. 0Hz)，7. 36 (2H, brs) ,8. 59 (1H, s)，14. 62 (1H, s)。54H)8'-氨基-9'-氟_7'-氧-10' -[3_(2_吡啶基)丙基氨基]螺環(huán)[草 脲胺-13' (2H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸的制備。
將8'-氨基-9'，10' -二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3 ‘ (2 ‘ H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(300mg，0.887mmol)、3-(2-吡啶基)丙 胺(181mg, 1. 33mmol)和三乙胺(0. 185mL, 1. 33mmol)在 DMSO (4mL)中的溶液在 100 "C 下攪拌6小時(shí)。向該反應(yīng)混合物添加水和飽和NH4C1溶液至pH < 4，并攪拌30分 鐘。過濾收集所得的沉淀物，用水和EtOH洗滌并干燥得到成為淡黃色固體的8'-氨 基-9'-氟-7'-氧-10' -[3-(2_吡啶基)丙基氨基]螺環(huán)[草脲胺-3，3' (2' H)-[7H] 吡啶并[1,2,3-de] [1,4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(373mg,93% )。力-匪R(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 90-1. 98 (2H, m)，2. 26-2. 39 (2H, m)，2. 77 (2H, t, J = 7. 3Hz)，3. 42-3. 51 (2H, m)，
3.73 (1H, d, J = 10. 4Hz)，3. 91-3. 97 (1H, m)，4. 07-4. 13 (1H, m)，4. 16 (1H, d, J = 10. 4Hz)，
4.24 (1H, d, J = 11. 0Hz) ,4. 35 (1H, d, J = 11. 0Hz), 6. 01-6. 10 (lH5m), 6. 92 (2H, brs),
7.18 (1H, dd，J = 6. 7，5. 5Hz)，7. 24 (1H, d, J = 7. 9Hz)，7. 67 (1H, td，J = 7. 3，1. 8Hz)，
8.42 (1H, s)，8. 45 (1H, d, J = 4. 3Hz)，15. 27 (1H, s) HRESIMS (+) 455. 17350 (計(jì)算得到 C23H23FN405，455. 17307)。實(shí)施例55-81 通過采用上述步驟可制備實(shí)施例55-81的化合物 實(shí)施例82:9'-氨基-10'-氟 ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基 氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]。 將9'-氨基-10'-氟 _2，3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)-乙 氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[411，811]吡啶并[1，2，3-時(shí)][1，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸 (300mg,0. 662mmol)和氰化鈉(325mg，6. 63mmol)在無水 DMS0(6mL)中的混合物在 120°C下 攪拌3小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)混合物注入水(100mL)，并以EtOAc萃取。用水和鹽水洗滌萃取 混合物，用Na2S04干燥，并真空濃縮。通過柱層析(Chromatorex NH-DM2035 (Fuji Sylysia CHemical Co.，Ltd.) EtOAc)純化該殘留物得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(197mg， 12%) 0 (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 60-1. 72 (1H, m)，1. 80-1. 93 (1H, m)，2. 28-2. 44 (6H, m)，3. 39 (2H, q, J = 5. 5Hz)，3. 45-3. 53 (2H, m)，4. 10-4. 19 (2H, m)，5. 55 (1H, td，J = 6. 1， 2. 4Hz)，5. 64 (1H, d, J = 7. 9Hz)，6. 42-6. 47 (2H，m)，6. 61 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 01 (2H5brs)， 7. 31-7. 36 (1H, m)，7. 44 (1H, d, J = 7. 9Hz)，7. 94 (1H, dd，J = 4. 9，1. 2Hz) HRESIMS (+) 410. 19901 (計(jì)算得到 C22H25FN502，410. 19923)。實(shí)施例83-85 以下化合物可按上述制備9 ‘-氨基-10 ‘-氟-2 ‘，3 ‘ -二 氫-8'-氧-11' -[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并 [1,2,3-ef] [1,5]苯并氧氮雜卓]的相同方式進(jìn)行制備。該化合物參照實(shí)施例82的步驟制 備 在 0°C下將三乙胺(0. 14mL, 1. OOmmol)和氯甲酸乙酯(0. 076mL，0. 795mmol)添加 至9'-氨基-10'-氟-2'，3' -二氫-8'-氧-11' -[2-(2-吡啶基氨基)-乙氨基]螺 環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(300mg， 0. 662mmol)的DMF(5mL)溶液中。0°C下攪拌1. 5小時(shí)后，添加25% NH3水溶液(5mL)。將混 合物在室溫下攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入水(200mL)，并以EtOAc萃取。用水和鹽水洗 滌混合物，用Na2S04干燥，并真空濃縮。通過柱層析(CH2Cl2Me0H 50 1)純化該殘留物得 到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(270mg，90% )。t-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 62-1. 73 (IH,m)，1. 90 (1H, q, J = 9. 2Hz)，2. 28-2. 47 (6H, m)，3. 42 (2H, q, J = 5. 5Hz)，3. 49-3. 57 (2H, m)， 4. 11-4. 25(2H，m)，5. 85-5. 89(lH，m)，6. 42-6. 49(2H，m)，6. 64 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 08 (2H, brs)，7. 26 (1H, d, J = 4. 9Hz)，7. 31-7. 37 (1H, m)，7. 95 (1H, dd，J = 4. 9，1. 2Hz)，8. 26 (1H, s)，9. 13 (1H, d, J = 4. 9Hz) HRESIMS (+) :453. 20594 (計(jì)算得到 C23H26FN603，453. 20504)。
實(shí)施例87:8'-氨基-9'-氟-氧-10' -[3_(2_吡啶基)丙基氨基]螺 環(huán)[草脲胺_1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-氨甲酰。 該標(biāo)題化合物可參照實(shí)施例86的步驟由實(shí)施例54的化合物制備得到。'H-NMR (400MHz, DMS0_d6) 8 1. 88-1. 96 (2H，m)，2. 18-2. 25 (lH5m)，2. 30-2. 37 (1H， m)，2. 76 (2H, t, J = 7. 3Hz)，3. 37-3. 47 (2H, m)，3. 72 (1H, d, J = 10. 4Hz)，3. 91-3. 96 (1H, m)，4. 05-4. 12 (2H, m)，4. 21 (1H, d, J = 11. 6Hz)，4. 29 (1H, d, J = 11. 6Hz)，5. 62-5. 69 (1H, m)，7. 01 (2H, brs)，7. 17 (1H, dd，J = 6. 7，5. 5Hz) 57. 23 (1H, d, J = 7. 9Hz)，7. 33 (1H, d, J = 4. 3Hz)，7. 67 (lH5td, J = 7. 3，1. 8Hz)，8. 45 (1H, d, J = 4. 3Hz)，8. 48 (1H, s)，9. 18 (1H, d, J =4. 9Hz)。實(shí)施例88:9'-氨基-10'-氟 ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶 基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜 卓]-7'-碳酰胼。在 0°C下將三乙胺(0. 185mL, 1. 33mmol)和氯甲酸乙酯(0. 100mL, 1. 04mmol)添加 至9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫-8'-氧-11' -[2-(2_吡啶基-氨基)乙氨 基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸 (400mg,0. 882mmol)的DMF(6mL)溶液。0°C下攪拌1. 5小時(shí)后，添加一水合胼(4mL)。將混 合物在室溫下攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入水(100mL)中，過濾收集該固體，并干燥得 到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(369mg，89% )。t-WR(400MHz，DMS0d6) 8 1. 63-1. 73 (1H, m)，1. 83-1. 97 (1H, m)，2. 26-2. 55 (6H, m)，3. 42 (2H, q, J = 6. 1Hz)，3. 49-3. 57 (2H, m)， 4. 12-4. 25 (2H, m)，4. 47 (2H, d, J = 4. 3Hz)，5. 87 (1H，td，J = 6. 1，1. 8Hz)，6. 42-6. 48 (2H, m)，6. 64 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 07 (2H, brs)，7. 31-7. 37 (1H, m)，7. 95 (1H, dd, J = 5. 5， 1. 2Hz) ,8. 23 (1H, s), 10. 47 (1H, s). HRESIMS (+) :468. 2143 (計(jì)算得到 C23H27FN703, 468. 2159)。
實(shí)施例89:9'-氨基-10'-氟-2' ,3'-二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶 基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜 卓]-7'-碳氧肟酸。 在0°C下將三乙胺(0. 185mL, 1. 33mmol)和氯甲酸乙酯(0. 100mL, 1. 04mmol)添加 至9'-氨基-10'-氟-2'，3' -二氫-8'-氧-11' -[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺 環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(400mg， 0. 882mmol)的DMF(6mL)溶液。0°C下攪拌1. 5小時(shí)后，添加50% NH20H水溶液(3mL)。將 混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，并注入水(60mL)中。過濾收集所得的固體并干燥。從MeOH 重結(jié)晶該殘留物得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(135mg，33% )。t-NMR(400MHz，DMS0-d6) 8 1. 62-1. 73 (1H, m)，1. 84-1. 97 (1H, m)，2. 28-2. 56 (6H, m)，3. 42 (2H, q, J = 6. 1Hz)， 3. 50-3. 57 (2H, m)，4. 12-4. 26 (2H, m)，5. 87-5. 93 (1H, m)，6. 42-6. 48 (2H, m)，6. 64 (1H, t, J = 5. 5Hz)，7. 05 (2H, brs)，7. 32-7. 36 (1H, m)，7. 95 (1H, dd, J = 4. 9，1. 2Hz)，8. 22 (1H, s) ,9. 02 (1H, d, J = 1. 8Hz)，11. 54 (1H, d, J = 1. 8Hz) HRESIMS (+) :469. 2036 (計(jì)算得到 C23H26FN604，469. 2000)。實(shí)施例90:9 ‘-氨基-10 ‘-氟-2 ‘ ,3 ‘ -二 氫 _N_ 甲 基-8'-氧-11' -[2-(2_吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并 [l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-氨甲酰。 在 0°C 下將三乙胺(0. 185mL, 1. 33mmol)和氯甲酸乙酯(0. 100mL, 1. 04mmol)添 加至9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫-8'-氧-11' -[2-(2_吡啶基氨基)乙氨 基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸 (400mg，0. 882mmol)的DMF(6mL)溶液。在0°C下攪拌1. 5小時(shí)后，添加含于THF(4mL)的2M 甲胺。將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入水(60mL)，并以EtOAc萃取。用 水和鹽水洗滌萃取混合物，用Na2S04干燥，并真空濃縮。通過柱層析(CH2C12 MeOH 20 1) 純化該殘留物得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(370mg，90%)。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 62-1. 73 (1H, m)，1. 84-1. 97 (1H, m)，2. 28-2. 48 (6H, m)，3. 41 (3H, d, J = 4. 9Hz)， 2. 79 (2H, q, J = 5. 5Hz)，3. 49-3. 56 (2H, m)，4. 12-4. 24 (2H, m)，5. 85 (1H, td, J = 5. 5， 2. 4Hz)，6. 42-6. 48 (2H, m)，6. 61-6. 66 (1H, m)，7. 07 (2H, brs)，7. 31-7. 36 (1H, m)，7. 94 (1H,dd，J = 4. 9，1. 8Hz)，8. 25 (1H, s)，9. 64 (1H, q, J = 4. 9Hz) HRESIMS (+) :467. 2182 (計(jì)算得 到 C23H28FN603，467. 2207)。實(shí)施例91 9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙 氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-腈。91A)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-氨甲酰的制備。 將三乙胺(2. 50mL, 17. 9讓ol)和氯甲酸乙酯(1. 36mL，14. 2mmol)添加至9'-氨 基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-8' _氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[1， 2,3-ef] [1,5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(4. 00g, 11. 9mmol)的 DMF(200mL)溶液。在 0°C 下攪拌2小時(shí)后，添加25% NH3水溶液(7mL)，然后將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng) 混合物注入水中(1.5L)，過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為褐色固體的標(biāo) 題化合物(3.23g，81%)。'H-NMR(400MHz, DMS0d6) 8 1. 64-1. 76 (1H, m), 1. 87-2. 00 (1H,m), 2. 35-2. 48 (4H, m)，2. 53-2. 64 (2H, m)，4. 30-4. 42 (2H, m)，7. 33-7. 68 (3H, m)，8. 44 (1H, s)， 8. 94(1H, d, J = 4. 3Hz). ESIMS(+) :336[M+H]+。91B)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓-7'-腈的制備。 在0 °C 下將三乙胺(4. 38mL, 31. 4mmol)和三氟乙酸酐(2. 68mL, 19. 3mmol)的 CH2Cl2(30mL)溶液添加至 9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán) [環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7' _氨甲酰(1.70g， 5. 06mmol)在CH2C12 (120mL)中的懸浮液中。在0°C下攪拌1小時(shí)后，用水、飽和NaHC03水 溶液和鹽水洗滌該反應(yīng)混合物，用Na2S04干燥，并真空濃縮。通過柱層析(Chromatorex NH-DM2035(Fuji Sylysia CHemical Co. , Ltd.)己烷CH2C12 1 1)純化該殘留物得到 成為無色固體的標(biāo)題化合物(1. 12g,70% )。(400MHz，DMSO-de) 8 1. 62-1. 73 (1H, m)，1. 83-1. 96 (1H, m)，2. 35-2. 57 (6H, m)，4. 32-4. 42 (2H, m)，7. 48 (2H, brs )，8. 41 (1H, s). ESIMS(+) :318[M+H] +。91C)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[411，811]吡啶并[1，2，3-時(shí)][1，5]苯并氧氮雜卓]-7'-腈
的制備。
將9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[1,2,3-ef] [1,5]苯并氧氮雜卓]_7'-腈(830mg，2. 62mmol)、N2_(吡 啶基)-l，2-乙二胺(718mg,5. 23mmol)和三乙胺(0. 730mL,0. 330mmol)在 DMS0(16mL)中 的溶液在60°C下攪拌10小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)混合物注入冰水(150mL)。過濾收集所得的 沉淀物，用水洗滌并干燥。通過柱層析(Chromatorex NH-DM2035 (Fuji Sylysia CHemical Co. , Ltd.)己燒CH2C121 2 — CH2C12 — CH2C12 MeOHlOO 1)所得的固體得到成為 褐色固體的標(biāo)題化合物(860mg)。再次通過柱層析(CH2C12 MeOH 30 1)純化該固體得 到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(500mg,44% )。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 58-1. 72 (1H, m)，1. 80-1. 92 (1H, m)，2. 30-2. 47 (6H, m) ,3. 41 (2H, q, J = 6. 1Hz)，3. 48-3. 56 (2H, m)， 4. 13-4. 24 (2H, m)，5. 93-6. 01 (1H, m)，6. 42-6. 48 (2H, m)，6. 65 (1H, t, J = 6. 1Hz)， 7. 05 (2H, brs)，7. 31-7. 37 (1H, m)，7. 94 (1H, dd，J = 4. 9，1. 2Hz)，8. 16 (1H, s) HRESIMS (+) 435. 19403 (計(jì)算得到 C23H24FN602，435. 19443)。實(shí)施例92:8'-氨基-9'-氟-氧-10' -[3_(2_吡啶基)丙基氨基]螺 環(huán)[草脲胺 _1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈。 將8'-氨基-9' -二氟-7'-氧-10' -[3-(2_吡啶基)丙基氨基]-螺環(huán) [草脲胺 _1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-氨甲酰(165mg， 0. 364mmol)、P0Cl3(167mg，1. 09mmol)和三乙胺(0. 254mL, 1. 82mmol)在 CH2C12 (2mL)中 的混合物在室溫下攪拌10小時(shí)。向該反應(yīng)混合物添加飽和NaHC03水溶液至pH > 7，并 用AcOEt萃取。用鹽水洗滌有機(jī)層，用Na2S04干燥，并真空去除溶劑。通過柱層析(己 烷EtOAc 1 1 — EtOAc — EtOAc MeOH 10 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為黃色固 體的8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[3-(2_吡啶基)-丙基氨基]螺環(huán)[草脲 15-1,3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈(42. 4mg，27 % )。 'H-NMR (400MHz, DMS0-d6) 8 1. 88-1. 95 (2H, m) , 2. 17-2. 25 (1H, m), 2. 35-2. 42 (1H, m)， 2. 75 (2H, t, J = 7. 3Hz)，3. 38-3. 46 (2H5m)，3. 70 (1H, d, J-10. 4Hz)，3. 89 (1H, td，J = 8. 6，
5. 5Hz) ,3. 97 (1H, d, J = 10. 4Hz)，4. 13-4. 19 (1H, m)，4. 22 (1H, d, J = 11. 6Hz)，4. 24 (1H, d, J = 11. 6Hz)，5. 73-5. 80(lH，m)，6. 99 (2H, brs), 7. 18 (1H, dd, J = 6. 7,5. 5Hz)，7. 23 (1H, d, J = 7. 9Hz)，7. 67 (1H, td, J = 7. 3，1. 8Hz)，8. 23 (1H, s)，8. 45 (1H, d, J = 4. 3Hz) HRESIMS (+)436. 17877 (計(jì)算得到 C23H22FN503，436. 17849)。實(shí)施例 93:9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[3_(1_ 咪唑 基)丙基氨基]螺環(huán)-[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并_[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜 卓]-7'-腈。該標(biāo)題化合物可采用與上述實(shí)施例中所述類似的步驟由9'-氨基-10'， 11' -二氟 _2'，3' -二氫-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1,5]苯并氧氮雜卓]-7' _ 腈制備得到。'H-NMR(400MHz, CDC13) 8 1.80-2. 04(2H, m), 2. 06-2. 13 (1H, m)，2. 38-2. 55 (6H, m)，3. 44 (2H, dq, J = 2. 4,6. 7Hz)，4. 06 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 31-4. 40 (2H, m)，4. 46 (1H, td，J = 6. 7，1. 8Hz)，6. 50 (2H, brs)，6. 93 (1H, t, J = 1. 2Hz)，7. 09 (1H, t, J = 1. 2Hz)，7. 49 (1H, s)，7. 65 (1H, s) HRESIMS (+) :423. 19445 (計(jì)算 得到 C23H23FN602，423. 19448)。實(shí)施例94 9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶 基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜 卓]-7'-羧酸。94A)10'，11' -二氟 ,3' ,6'，7_ 四氫 -甲基 -硝基 -氧螺 環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的 制備。 將含于THF(10. 8mL，32. 4mmol)的3M甲基氯化鎂在氬氣氣氛下和_78°C下添加 至攪拌中的10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-9'-硝基-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷-1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，5]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(3. 88g,9. 84mmol) 和碘化亞銅(562mg，2. 95mmol)在THF(200mL)中的混合物。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24 小時(shí)，并注入水(1L)中。添加濃HC1 (50mL)至pH < 1，并將混合物攪拌30分鐘。用AcOEt 萃取粗產(chǎn)物，用飽和NaHC03水溶液和鹽水洗滌，用MgS04干燥并真空去除溶劑。通過柱層析 (己烷EtOAc 20 1 —5 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(1.71g， 42% )。t-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 09 (3H, d, J = 6. 1Hz)，1. 27 (3H, t, J = 7. 3Hz)， 1. 60-1. 69 (1H, m)，1. 72-1. 83 (1H, m)，1. 94-2. 15 (4H, m)，2. 24-2. 35 (1H, m)，2. 51-2. 57 (1H, m)，4. 28 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 39-4. 50 (2H, m)，4. 58-4. 63 (1H，m)，11. 64 (1H, s)。94B)10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -硝基 -氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2'，3'，6'，7'-四氫-6'-甲基 _9'-硝基 _8'-氧 螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯 (1.50g,3. 66mmol)和二氧化錳(32. 0g，366mmol)在CH2C12 (40mL)中的混合物在室溫下攪 拌40小時(shí)。通過Celite過濾該混合物，并真空濃縮濾出液。通過柱層析(己烷EtOAc 2:1 — 1: 2)純化該粗產(chǎn)物得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(168mg，ll% )。 iH-WR(400MHz，DMS0d6) 8 1. 25 (3H, t, J = 7. 3Hz)，1. 59-1. 67 (1H, m)，1. 81-1. 88 (1H, m)， 2. 08-2. 18 (1H, m)，2. 27 (3H, s)，2. 34-2. 54 (4H, m)，2. 80-2. 92 (1H, m)，4. 20-4. 27 (2H, m)， 4. 63-4. 83 (2H, m)。94C)9'-氨基-10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -氧螺環(huán)[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2' ,3' -二氫-6'-甲基-9'-硝基 -氧螺環(huán)-[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(160mg，
0.392mmol)和鐵(146mg,2. 35mmol)在AcOH(4mL)中的混合物在90°C下攪拌3小時(shí)。真 空濃縮該反應(yīng)混合物，并添加1M HC1水溶液(5. OmL)。用AcOEt萃取粗產(chǎn)物，依次用飽和 NaHCOyK溶液和鹽水洗滌，用MgS04干燥并真空去除溶劑。干燥殘留物得到成為淡黃色無定 形固體的標(biāo)題化合物(146mg,98% )。t-WR(400MHz，DMS0-d6) 8 1. 24 (3H, t, J = 7. 3Hz)，
1.58-1. 65 (1H, m)，1. 75-1. 87 (1H, m)，1. 93-2. 05 (1H, m)，2. 16 (3H, s)，2. 22-2. 34 (2H, m)，
2.37-2. 46 (1H, m)，2. 51-2. 60 (1H, m)，2. 68-2. 80 (1H, m)，4. 18-4. 24 (2H, m)，4. 26-4. 36 (1H, m)，4. 53-4. 64 (1H, m)，7. 23 (2H, brs)。94D)9'-氨基-10'，11' -二氟 ,3' -二氫 -甲基 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。
將9'-氨基-10'，H' -二氟-2'，3' -二氫 _6'-甲基 _8'-氧螺環(huán)-[環(huán) 丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯(136mg， 0. 359mmol)和lMNaOH水溶液(1. 4mL)在EtOH(l. 4mL)中的混合物回流攪拌5小時(shí)。真空濃 縮該反應(yīng)混合物，將殘留物溶解于水，添加2M HC1水溶液至pH < 3。真空過濾收集所得的 沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(110mg，87% )。^-NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 1. 53-1. 61 (1H, m)，1. 77-1. 85 (1H, m)，1. 97-2. 05 (1H, m)，2. 28-2. 40 (3H, m)， 2. 52-2. 58 (1H, m)，2. 60 (3H, s)，2. 76-2. 84 (1H, m)，4. 38 (1H, td, J-12. 2,4. 3Hz)，4. 62 (1H, dd, J = 12. 2,6. 7Hz)，7. 27 (2H, brs)，15. 18 (1H, brs)。94E)9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫 -甲基 -氧-11' -[2_(2_ 吡 啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜 卓]-7' _羧酸的制備。 將9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-6'-甲基-8'-氧螺環(huán)-[環(huán) 丁烷 _1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(lOOmg， 0. 285mmol)、N-(2-吡啶基)_1，2_ 乙二胺(58. 7mg，0. 428mmol)和三乙胺(0. 0597mL, 0. 428mmol)在DMS0(3mL)中的溶液在100°C下攪拌5小時(shí)。在反應(yīng)混合物注入飽和NH4C1 水溶液之后，用CH2C12萃取該粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用MgS04干燥并真空去除該溶劑。通過 薄層層析(EtOAc MeOH 20 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(70. 3mg, 53 % ) o (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 49-1. 59 (1H, m)，1. 72-1. 79 (1H, m)，1. 85-1. 92 (1H, m)，2. 23-2. 32 (2H, m)，2. 37-2. 45 (2H, m)，2. 57 (3H, s)，2. 66-2. 75 (1H, m)，3. 40-3. 47 (2H, m) ,3. 51-3. 62 (2H, m) ,4. 19 (1H, td, J = 12. 2，3. 7Hz)，4. 49 (1H，dd, J = 12. 2,6. 7Hz), 6. 10-6. 16 (1H, m)，6. 43-6. 49 (2H, m)，6. 64-6. 70 (1H, m)，6. 88 (2H, brs)，7. 34 (1H, t, J = 6. 7Hz)，7. 95-7. 96 (1H, m)，16. 08 (1H, brs) HRESIMS (+) :468. 20454 (計(jì)算得到 C24H26FN504， 468. 2047)。實(shí)施例95:9'-氨基-10'-氯-2' ,3' -二氫-8'-氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基)乙 氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸
95A) 10 ‘-氨基-11'-氟-2' ,3' -二氫 -硝基 -氧螺環(huán)[環(huán)丁 烷-1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-9'-硝基-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，5]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(5. 00g, 12. 7mmol) 和(NH4)2C03(11.0g，114mmol)在DMF(50mL)中的混合物在90°C下攪拌21小時(shí)。將反應(yīng)混合 物注入冰水，真空過濾收集所得的沉淀物，依次用熱AcOEt和熱EtOH洗滌并干燥得到成為 黃色固體的標(biāo)題化合物(2. 51g,50% ) ZH-WR(400MHz，DMS0-d6) 8 1. 24(3H，t，J = 7. 3Hz)， 1. 65-1. 76 (1H, m)，1. 88-2. 00 (1H, m)，2. 41-2. 46 (4H, m)，2. 60-2. 63 (2H, m)，4. 19 (2H, q, J =7. 3Hz)，4. 47-4. 50 (2H, m)，6. 07 (2H, brs)，8. 26 (1H, s)。95B)10'-氯-11'-氟-2'，3，-二氫 -硝基 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'-氨基-11'-氟-2' ,3' -二氫-9'-硝基-8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷_1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，5]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(2. 51g,6. 41mmol) 加入到亞硝酸叔丁酯(1. 14mL，9. 62mmol)和氯化銅(II) (1. 81g，12. 8mmol)在 CH3CN(64mL) 中的混合物中，將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入水(300mL)中，添加 濃HCl(50mL)至pH< 1，過濾收集所得的沉淀物，用熱EtOH洗滌并干燥得到成為淡黃色 固體的標(biāo)題化合物(2. 17g,82% )。iH-WRQOOMHz，DMS0_d6) 8 1. 25 (3H, t, J = 7. 3Hz)， 1. 67-1. 75 (1H, m)，1. 92-1. 99 (1H, m)，2. 41-2. 53 (4H, m)，2. 66-2. 69 (2H, m)，4. 22 (2H, q, J =7. 3Hz)，4. 60-4. 63 (2H, m)，8. 42 (1H, s)。95C)9'-氨基-10'-氯-11'-氟-2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸乙酯的制備。 將10'-氯-11'-氟-2'，3' -二氫-9'-硝基-8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，5]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(2. 17g,5. 28mmol) 和鐵(1.97g，31.7mmol)在Ac0H(50mL)中的混合物在90°C下攪拌5小時(shí)。真空濃縮該反應(yīng) 混合物，將殘留物溶解于AcOEt并攪拌30分鐘。以Celite過濾除去所得沉淀物。依次用水、 飽和NaHC03水溶液和鹽水洗滌濾出液，用MgS04干燥并真空去除溶劑。用熱EtOH洗滌粗產(chǎn) 物得到成為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(1. 03g,51%)。i-NMR (400MHz，DMS0-d6) 8 1. 25 (3H, t, J-7. 3Hz)，1. 65-1. 75 (1H, m)，1. 89-1. 96 (1H, m)，2. 38-2. 47 (4H, m)，2. 52-2. 59 (2H, m)， 4. 20 (2H, q, J = 7. 3Hz)，4. 30-4. 41 (2H, m)，7. 33-7. 55 (2H, m)，8. 23 (1H, s)。95D)9'-氨基-10'-氯-11'-氟 ,3' -二氫 -氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜卓]-7' _羧酸的制備。
將9'-氨基-10'-氯-11'-氟 _2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，5]苯并氧氮雜卓]-羧酸乙酯(1.03g,2. 70mmol) 在Ac0H-H20-H2S04(2 1 0. 3v/v，6. 6mL)混合物中的溶液在100°C下加熱2小時(shí)。添 加冰水，并將混合物攪拌30分鐘。真空過濾收集所得的沉淀物，用水洗滌，并干燥得到 成為無色固體的標(biāo)題化合物(908mg，95% )。'H-NMR(400MHz, DMS0_d6) 8 1. 65-1. 74(2H， m)，1. 88-1. 99 (2H, m)，2. 40-2. 69 (4H, m)，4. 25-4. 51 (2H, m)，7. 73 (2H, brs)，8. 49 (1H, s)， 14. 56 (1H, s)。95E)9'-氨基-10'-氯-2' ,3' -二氫 -氧-11' -[2_(2_ 吡啶基氨基) 乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷-1，4' _[411，811]吡啶并[1，2，3-時(shí)][1，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧 酸的制備。
將 9'-氨基-10'-氯-11'-氟 _2'，3' -二氫 _8'-氧螺環(huán)[環(huán)丁烷 _1， 4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef] [1，5]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸(900mg，2. 55mmol)、N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(525mg，3. 83mmol)和三乙胺(0. 534mL，3. 83mmol)在 DMSO(lOmL) 中的溶液在100°C下攪拌7小時(shí)。向該反應(yīng)混合物添加飽和NH4C1水溶液至pH < 3，真空過 濾收集所得的沉淀物并用水洗滌。通過薄層層析(CH2C12 MeOH 50 1)純化該粗產(chǎn)物得 到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(565mg，47% )。t-WR(400MHz，DMS0_d6) 8 1. 64-1. 72 (1H, m)，1. 86-1. 98 (1H, m) , 2. 32-2. 66 (6H, m) , 3. 40-3. 44(2H, m) , 3. 62-3. 66 (2H, m)， 3. 94-4. 53 (2H, m)，6. 00 (1H, t, J = 5. 5Hz)，6. 44-6. 47 (2H, m)，6. 66 (1H, t, J = 5. 5Hz)， 7. 07-7. 63 (3H, m)，7. 94 (1H, dd，J = 5. 5，1. 2Hz)，8. 29 (1H, s)，15. 15 (1H, s) HRESIMS (+) 470. 15831 (計(jì)算得到 C23H24C1N504，470. 1595)。實(shí)施例96-98 化合物96-98可采用與上文實(shí)施例中所述類似的合成步驟由8_氨基_9，10_ 二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]_喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]_6_羧酸或 9'-氨基-10'，11' -二氟-2'，3' -二氫-8'-氧螺環(huán) _[環(huán)丁烷 _1，4' _[4H，8H] 吡啶并[l，2，3-ef][l，4]苯并氧氮雜卓]-7'-羧酸制備得到。實(shí)施例96 :10-(3-(lH-咪唑-1-基)丙基氨基)_8_氨基_9_氟_7_氧_2，7_ 二 氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-羧酸。 MS (EP)m/z 442. 0 (M+1)。(計(jì)算得到 C22H24FN504，441. 18)。實(shí)施例97 9-氨基-10-氟_8_氧_11_ (3-(吡啶_2_基氨基)-吡咯烷基)_3， 8-二氫-2H-螺環(huán)[[1，4]氧氮雜卓[2，3，4-ij]喹啉_4，1'-環(huán)丁烷]_7_羧酸。 'H-NMR (400MHz, DMS0_d6) 61. 59-1. 73 (1H，m)，1. 81-1. 97 (2H，m)，2. 05-2. 19 (1H， m)，2. 47-2. 51 (6H, m)，3. 42-3. 53 (1H, m)，3. 85-3. 97 (3H, m) ,4. 11-4. 29 (3H, m)， 6. 44-6. 51 (2H, m)，6. 75 (1H, d, J = 6. 1Hz)，6. 94 (2H, brs)，7. 32-7. 39 (1H, m)，7. 96 (1H, dd，J = 6. 1，1. 2Hz)，8. 26(1H, s)，15. 13(1H, brs). HRESIMS(+) :480. 20547 (計(jì)算得到 C25H27FN504，480. 20471)。實(shí)施例98:8'-氨基-9'-氟7 ‘-氧-10 ‘ -(3-(吡啶-2-基氨基)吡 咯烷-1-基)-2'，7' -二氫-1' H-螺環(huán)[環(huán)戊烷-1，3'-吡啶并[3，2，l-ij]喹 啉]-6'-羧酸。
i-WR (400MHz，DMSO-de) 8 1. 72-2. 04 (9H, m)，2. 08-2. 19 (1H, m)，3. 50-3. 58 (1H, m)，3. 71-3. 80 (1H, m)，3. 81-3. 90 (1H, m)，3. 95-4. 02 (1H, m)，4. 08 (2H, s)，4. 33-4. 42 (1H, m) 6. 44-6. 51 (2H, m)，6. 76 (1H, d, J = 6. 1Hz)，6. 88 (2H, brs)，7. 32-7. 38 (1H, m)，7. 97 (2H, dd, J = 4. 9,1. 2Hz),8.38 (1H, s),15. 19(1H, s). HRESIMS (+) :480. 20378 (計(jì)算得到 C25H27FN504，480. 20471)。實(shí)施例99 9-氨基-10-氟_6_甲基_11_ (2-(吡啶_2_基氨基)-乙氨基)_2H_螺 環(huán)[[1，4]氧氮雜卓[2，3，4-ij]喹啉 _4，1'-環(huán)丁烷]_8 (3H)-酮。 將9'-氨基-10'-氟-2' ,3' -二氫-6'-甲基 -氧-11' -[2_(2_ 吡 啶基氨基)乙氨基]螺環(huán)[環(huán)丁烷_1，4' _[4H，8H]吡啶并[l，2，3-ef][l，5]苯并氧氮雜 卓]-7'-羧酸(42. 7mg，0. 0913mmol)和氰化鈉(46. lmg,0. 913mmol)在無水 DMS0(2mL) 中的混合物在150°C下攪拌8小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)混合物注入NaHC03飽和水溶液，并以 EtOAc萃取。用鹽水洗滌萃取混合物，用MgS04干燥，并真空濃縮。通過制備TLC(SiliCagel 60 (Merck Co.，Ltd.) EtOAc MeOH 10 1)純化該殘留物以得到成為黃色固體的標(biāo)題 化合物(20. 8mg, 54 % )。^-NMR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 52-1. 60 (1H, m)，1. 73-1. 79 (1H, m)，2. 10 (3H, s)，3. 27-3. 33 (6H, m)，3. 37-3. 41 (2H, m)，3. 43-3. 51 (2H, m)，3. 96-4. 53 (2H, m)，5. 41-5. 47 (1H, m)，5. 57 (1H, s)，6. 42-6. 47 (2H, m)，6. 60 (1H, t, J = 5. 5Hz)，6. 84 (2H, brs)，7. 33 (1H, dd，J = 6. 7，1. 8Hz)，7. 93-7. 95 (1H, m) HRESIMS (+) -.424. 21446 (計(jì)算得到 C23H26FN502，424. 21488)。實(shí)施例100 8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[3_(4，6_雙三氟吡啶_2_基)丙基氨基] 螺環(huán)[草脲胺_1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈。 100A) 3-(4，6-雙三氟甲基吡啶-2-基)丙基氨基甲酸叔丁酯的制備。
向攪拌中的烯丙基氨基甲酸叔丁酯(1. 95g，12. 4mmol)的THF(12mL)溶液在氬氣 氣氛和室溫下添加0. 5mol/L 9-硼雙環(huán)[3. 3. 1]壬烷(29. 8mL, 14. 9mmol)。室溫下攪拌4小時(shí)后，向該反應(yīng)混合物添加2-溴-4，6-雙三氟甲基吡啶(3. 65g，12. 4mmol)的DMF(12mL) 溶液、Pd(0Ac)2(278mg，1. 24mmol)、DPPF(859mg，1. 55mmol) ^P K2C03 (2. 92g，21. lmmol)，并在 室溫下攪拌7小時(shí)。向該反應(yīng)混合物添加水，并用EtOAc萃取粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用NaS04 干燥并真空去除溶劑。通過柱層析(己烷EtOAc 10 1 —2 1)純化該粗產(chǎn)物得到成 為無色固體的叔丁基3-(4，6-雙三氟甲基吡啶-2-基)丙基氨基甲酸酯(3.41g，74%)。NMR (CDC13，400MHz) 8 1. 44 (9H, s) , 1. 96-2. 03 (2H5m)，2. 98-3. 02 (2H, m)， 3. 20-3. 25 (2H, m)，4. 71 (1H, brs)，7. 59 (1H, s)，7. 72 (1H, s). CIMS (+) 373 [M+H] +。100B)3-(4，6_雙三氟吡啶-2-基)丙胺的制備。 將3-(4，6-雙三氟甲基吡啶-2-基)丙基氨基甲酸叔丁酯(3. 10g，8. 33mmol)在 含于Et0Ac(20mL)的4mol/L氯化氫的溶液中室溫?cái)嚢?0分鐘。真空去除溶劑形成沉淀 物，添加lmol/L NaOH水溶液堿化，并用EtOAc萃取該粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用NaS04干燥并 真空去除溶劑。干燥沉淀物得到成為黃色油的3-(4，6-雙三氟吡啶-2-基)丙胺(2.26g，
定量)O匪R(DMS0-d6，400MHz) 8 1. 54 (2H, brs), 1. 73-1. 80 (2H, m), 2. 56 (2H, t, J = 6. 7Hz)，2. 96 (2H, t, J = 7. 9Hz)，8. 06 (1H, s)，8. 09 (1H, s). CIMS (+) 273 [M+H]+。100C)8'-氨基-9'，10-二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3‘ (2' H)-[7H]吡啶 并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-氨甲酰的制備。 將8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' _[3_(吡啶_2_基)丙基氨基]螺環(huán) [草脲胺 _1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-羧酸(l.OOg， 2. 96mmol)、氯甲酸乙酯(0.312mL，3. 26mmol)和三乙胺(0. 495mL，3. 55mmol)在 DMF(15mL) 中的溶液在氬氣氣氛下冰冷攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物添加25%NH3(lmL)水溶液并室溫?cái)?拌2小時(shí)。向該反應(yīng)混合物添加水并用EtOAc萃取該粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用NaS04干燥并真 空去除溶劑。將沉淀物干燥得到成為淡黃色固體的8'-氨基-9'，10-二氟-7'-氧螺環(huán) [草脲胺 _3，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-氨甲酰(186mg， 81% )。匪R (DMS0-d6,400MHz) 8 2. 25-2. 32 (1H, m)，2. 35-2. 42 (1H, m)，3. 74 (1H, d, J = 11. 0Hz)，3. 91-3. 97 (1H, m)，4. 06-4. 12 (1H, m)，4. 16 (1H, d, J = 11. 0Hz)，4. 34 (1H, d, J =11. 6Hz) ,4. 45 (1H, d, J-ll. 6Hz)，7. 41 (2H，brs ), 7. 54 (1H, d, J = 4. 3Hz)，8. 63 (1H，s)， 8. 98 (1H, d, J = 4. 3Hz)。100D)8'-氨基-9'，10-二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3‘ (2' H)-[7H]吡啶 并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈的制備。 向攪拌中的8'-氨基-9'，10-二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺_3，3‘ (2' H)-[7H] 吡啶并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]-6'-氨甲酰(860mg,2. 55mmol)和三乙胺(1. 78mL， 12. 8mmol)的CH2C12 (26mL)溶液在冰冷下添加磷酰氯(1. 17g，7. 65mmol)，并在室溫下攪拌 5小時(shí)。真空去除溶劑并向粗產(chǎn)物添加Me0H-H20(l 2，50mL)。攪拌30分鐘后，過濾收集 所得的沉淀物，用水洗滌并干燥得到成為淡黃色固體的8'-氨基-9'，10-二氟-7'-氧 螺環(huán)[草脲胺 _3，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈(683mg， 84% )。匪R (DMS0-d6, 400MHz) 8 2. 22-2. 29 (1H, m)，2. 42-2. 46 (1H, m)，3. 72 (1H, d, J =10. 4Hz)，3. 88 (1H, td, J = 8. 6,6. 1Hz)，4. 05 (1H, d, J = 10. 4Hz)，4. 16-4. 22 (1H, m)， 4. 37 (1H, d, J = 11. 6Hz)，4. 38 (1H, d, J = 11. 6Hz)，7. 40 (2H, brs) ,8. 46 (1H, s)。100E)8'-氨基-9'-氟-氧-10' _[3_ (4，6_雙三氟吡啶_2_基)丙基氨 基]螺環(huán)[草脲胺-1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈的制 備。將8'-氨基-9'，10_ 二氟-7'-氧螺環(huán)[草脲胺 _3，3 ‘ (2 ‘ H)-[7H]吡 啶并[l，2，3-de] [1，4]苯并噁嗪]-6'-腈(320mg，1.00mmol)、3-(4，6-雙三氟甲基吡 唆-2-基)丙胺(408mg，1. 50mmol)和三乙胺(0. 210mL，1. 50mmol)在 DMS0(5mL)中的溶 液在100°C下攪拌6小時(shí)，然后在120°C下攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物添加飽和NH4C1水 溶液至中和，用EtOAc萃取粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用NaS04干燥，并真空去除溶劑。通過 柱層析(己烷EtOAc 5:1 — 1: 1)純化該粗產(chǎn)物得到成為淡黃色固體的8'-氨 基-9'-氟-7'-氧-10' -[3-(4，6-雙三氟吡啶-2-基)丙基氨基]螺環(huán)[草脲胺-1， 3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈(387mg，68% )。匪R (DMS0-d6,400MHz) 8 1. 95-2. 02 (2H, m)，2. 17-2. 24 (1H, m)，2. 35-2. 42 (1H, HRESIMS (+) 572. 15292 (計(jì)算得到 C25H21F7N503)。實(shí)施例101-108 通過采用上述步驟可制備實(shí)施例101-108的化合物 實(shí)施例109 和 110:(+)-8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' _[3_(吡啶-2-基)丙基氨基]螺環(huán)[草 脲胺-1，3' (2' H)[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈和(-)-8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' _[3_(吡啶_2_基)丙基氨基]螺環(huán)[草 脲胺-1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁嗪]-6'-腈。 通過采用Chiralpak IA柱(Cp20X250 mm)并以流速為9mL/min的MeCN作為洗 脫液(1小時(shí))的制備性HPLC分離外消旋8'-氨基-9'-氟-7'-氧-10' -[3-(吡 啶-2-基)丙基氨基]螺環(huán)[草脲胺_1，3' (2' H)-[7H]吡啶并[l，2，3-de][l，4]苯并噁 嗪]-6 ‘-腈(250mg)。UV檢測器設(shè)置為254nm，注射環(huán)體積為5mL，注射量為34_36mg (含 于MeCN溶液)。實(shí)施例109 ； 102mg, > 99% 純度，含> 99% e. e. (Chiralpak IA 柱((p4.6><250 mm), MeCN, lmL/min, Rt = 13. 6min)，[ a ]D25+10. 2(c 1. 00，CHC13)實(shí)施例 110 ； 107mg, > 99 % 純度，含 > 99 % e. e. (Chiralpak IA 柱.((p4.6><250 mm), MeCN, lmL/min, Rt = 34. 35min)，[ a ]D25-7. 9 (c 1. 00，CHC13)實(shí)施例111-114:a) 3- (1-(羥乙基)環(huán)丙基氨基)_2_ (2,3,4,5-四氟苯甲?；?-丙烯酸乙酯
將攪拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(10. 0g，37. 8mmol)、乙酸 酐(50mL)和原甲酸三乙酯(10.0mL，56. 7mmol)的溶液在130°C下加熱3小時(shí)。真空濃縮 該混合物并高真空干燥5小時(shí)。將粗產(chǎn)物溶解于DCM(50mL)，然后在室溫下逐滴添加1-氨 基-1-環(huán)丙基甲醇(3.9g，45.3mmol)。1. 5小時(shí)后，蒸發(fā)去除溶劑以得到成為黃色固體的 標(biāo)題化合物(9g)，其可不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。MS(EP)m/z :362(M++1)。(計(jì)算得到 C16H15F4N04，361. 29) b)9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3，1'-環(huán)丙 烷]-6-羧酸乙酯將3-(1_(羥甲基)環(huán)丙基氨基)-2-(2，3，4，5_四氟-苯甲?；?丙烯酸乙酯 (300mg, 0. 83mmol)、K2C03 粉末(344mg，2. 49mmol)和 3ml 無水 DMF 的混合物在 CEMDiscover 微波爐中200°C加熱10分鐘。然后將樣品快速冷卻至室溫，得到深褐色液體。蒸發(fā)去除 DMF得到黑色固體。將該固體溶解于50ml乙酸乙酯，并用10ml水洗滌兩次。用Na2S04干 燥有機(jī)層得到成為淺黃色固體的標(biāo)題化合物，其可不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟(133mg， 0. 415mmol)。MS (EP)m/z :322(M++1)。(計(jì)算得到 C16H13F2N04, 321. 28)c)9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉一3，1'-環(huán) 丙烷]-6-羧酸向 9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3，1_ 環(huán)丙 烷]-6-羧酸乙酯(1.3g,4mmol)在EtOH/水(50 50v/v,55mL)中的溶液中添加K2C03粉 末(1. 65g，12mmol)，將混合物回流加熱2小時(shí)。去除溶劑至干燥。用2N乙酸將剩余的固體 酸化至PH6。形成沉淀物并通過過濾收集，用水洗滌，然后干燥得到成為淺黃色固體的標(biāo)題
化合物(0. 656g，2. 24mmol)。'H-NMR (400MHz, DMS0d6) 8 1. 29 (2H, t)，1. 8(2H，t) ,4. 56 (2H, s)，7.84(lH，m)，8.51(lH，s), 14. 3(1H, b) MS (EP)m/z :294 (M++1)。(計(jì)算得到 C14H9F2N04， 293. 22)d) 9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1'-環(huán)丙烷]-6-羧酸 該標(biāo)題化合物可采用與上文實(shí)施例所述類似的合成步驟由9，10- 二氟-7-氧-2， 7_ 二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)丙烷]-6-羧酸制備得到。MS(EP)m/z 339 (M++1)。(計(jì)算得到 Ci4H8F2N206，338. 22)e) 9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1'-環(huán)丙烷]-6-氨甲酰 該標(biāo)題化合物可采用與上文實(shí)施例所述類似的合成步驟由9，10- 二氟-8-硝 基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)丙烷]-6-羧酸制備得到。 'H-NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 1. 32 (2H, t)，1. 7 (2H, t)，4. 58 (2H, s)，7. 66 (1H, b)，8. 46 (1H, s)， 8. 59 (1H, b). MS(EP)m/z :338(M++1)。(計(jì)算得到 C14H9F2N305, 337. 24)。f)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1-環(huán)丙烷]-6-氨甲酰 該標(biāo)題化合物可采用與上文實(shí)施例所述類似的合成步驟由9，10- 二氟-8-硝 基-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1_環(huán)丙烷]_6_氨甲酰制備得到。iH-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 17 (2H, t)，1. 55 (2H, t) ,4. 26 (2H, s)，7. 30 (2H, b) ,8. 26 (1H, s) MS (EP)m/z 308 (M++1)。(計(jì)算得到 C14HnF2N303，307. 25)。g)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1,4]噁嗪[2，3，4_ij]喹啉 _3， 1'-環(huán)丙烷]-6-腈 該標(biāo)題化合物可采用與上文實(shí)施例所述類似的合成步驟由8-氨基-9，10- 二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1_環(huán)丙烷]_6_氨甲酰制備得到。 iH-WR (400MHz，DMS0_d6) 8 1. 18 (2H, t), 1. 77 (2H, t),4. 31 (2H, s)，7.41(2H，b),8. 51 (1H, s) MS (EP)m/z 290 (M++1)。(計(jì)算得到 C4H9F2N302, 289 . 24)。實(shí)施例111 10-(3_(111-吡唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1， 4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)丙烷]-6-腈 該標(biāo)題化合物可采用與上文實(shí)施例所述類似的合成步驟由8-氨基-9，10- 二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)丙烷]_6_腈和吡唑丙 胺制備得到。'H-NMR(400MHz, DMS0d6) 8 1. 16 (2H, t)，1. 58 (2H, t)，1. 99 (2H, m)，3. 65 (2H, m)，4. 16 (2H, s)，4. 26 (2H, m)，6. 29 (1H, s)，7. 49 (1H, s)，7. 63 (1H, s)，8. 04 (1H, s) MS (EP) m/ z 395 (M++1)。(計(jì)算得到 C20H19FN602, 394. 40)。實(shí)施例112 8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-3-基)丙基氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4] 噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)丙烷]-6-腈 將8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪-[2，3，4_i j]喹啉-3， 1'-環(huán)丙烷]-6-腈(150mg，0. 52mmol)、3-(吡啶-3-基)丙 胺(176mg, 1. 3mmol)和 三乙胺(108 ii L，1. 3mmol)的DMS0(3mL)溶液在120°C下攪拌15小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷 卻并濃縮。將粗產(chǎn)物投入乙腈并通過制備性HPLC純化得到成為黃色固體的該標(biāo)題化合 物(52. 9mg)。MS (EP)m/z 406. 2 (M++1)。(計(jì)算得到 C22H20FN502，405. 42) NMR(400MHz, D20) 8 1. 20 (2H, t)，1. 50 (2H, t)，2. 00 (2H, m，)，2. 94 (2H, m，)，3. 51 (2H, m)，4. 14 (2H, s)， 7. 86 (1H, m)，8. 03 (1H, m)，8. 41 (1H, m)，8. 52 (1H, m)，8. 58 (1H, s)實(shí)施例113 :8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1，4] 噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)丙烷]-6-腈將8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[[1，4]噁嗪-[2，3，4_i j]喹啉 _3， 1'-環(huán)丙烷]-6-腈(320mg，l. lmmol)、3-(吡啶-2-基)丙 胺(270mg, 2mmol)和三乙 胺(221 u L,2. 7mmol)的DMS0(8mL)溶液在120°C下攪拌15小時(shí)。將反應(yīng)混合物分批加入 水中，并用乙酸乙酯萃取。使用硫酸鈉干燥有機(jī)層并真空濃縮。通過柱層析(乙酸乙酯至乙 酸乙酯-MeOH 10 1)純化該干殘留物得到成為黃色固體的標(biāo)題化合物(76. 9mg)。MS (EP) m/z 406. 2 (M++1)。(計(jì)算得到 C22H20FN502，405. 42) NMR(400MHz, CD30D) 8 1. 15 (2H, t)， 1. 59 (2H, t)，2. 03 (2H, t)，2. 88 (2H, t)，3. 54 (2H, m)，4. 15 (2H, s)，7. 23 (1H, m)，7. 33 (1H, m)， 7. 74 (1H, m)，8. 04 (1H, s)，8. 42 (1H, m)實(shí)施例114:8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-4-基)丙基氨基)_2，7_ 二氫螺環(huán)[[1， 4]-噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1'-環(huán)戊烷]-6-腈該標(biāo)題化合物可采用與上文實(shí)施例所述類似的合成步驟由8-氨基-9，10- 二 氟-7-氧-2，7-二氫螺環(huán)[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉_3，1-環(huán)戊烷]-6-腈制備得到。
MS (EP)m/z 434. 2(M+1)。(計(jì)算得到 C24H24FN502，433. 49). 1H NMR(400MHz, DMS0) 8 8. 69(d, J = 6. 5Hz，2H)，8. 35 (s, IH)，7. 74(d, J = 6. 2Hz，2H)，5. 74 (s，IH)，4. 03(s，2H)， 3. 42-3. 37(m，2H)，2. 86-2. 82(m，2H)，1. 92-1. 90 (m，2H)，1. 88-1. 82(m，4H)，1. 71-1. 65 (m,
4H)在H印G2細(xì)胞中的糖原合成活性Hep G2 細(xì)胞由 Japanese Collection of Research Bioresources 得至lj，并在標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)基(低糖Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)，其含有10%胎牛血清，添加了 100U/ mL青霉素和100 ii g/mL鏈霉素)中，在潮濕和5% C02氣氛下37°C生長。該Ifep G2細(xì)胞以 含ImM EDTA的0.25%胰蛋白酶溶液收獲，并以IX 105細(xì)胞/微孔接種在12孔板上。培養(yǎng) 3天后，用磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)洗滌該細(xì)胞一次，并用添加了 100U/mL青霉素和100 y g/ mL鏈霉素的無血清低糖DMEM孵育。培養(yǎng)3小時(shí)后，向該無血清低糖DMEM中添加不同濃度 的本發(fā)明提供的化合物和2. 5 u Ci/mL D-[2」H]葡萄糖(PerkinElmer, Boston, MA, USA)。 還使用DMS0(0. 3%，終濃度)溶媒對照。每個(gè)微孔中反應(yīng)介質(zhì)的總體積為1. OmL無血清低 糖DMEM。37°C下孵育3小時(shí)后，吸出該介質(zhì)，用PBS洗滌細(xì)胞兩次，添加含有0. 4mg/mL載 體糖原的0. 25mL IN K0H。37°C下孵育30分鐘后，向每個(gè)微孔添加0. 25mL 48.8% (w/v) K0H以溶解細(xì)胞。95°C下孵育30分鐘后，向細(xì)胞溶解物添加1.5mL 95% (v/v)乙醇?？偺?原在-20°C下沉淀過夜。通過4°C下19，OOOXg離心30分鐘回收糖原沉淀物。將沉淀物 用lmL 70% (v/v)乙醇洗滌一次，并重懸浮于0.5mL水中。通過液體閃爍記數(shù)器(Packard Instrument Co.，Meriden，CT，USA)評估結(jié)合在糖原中的[3H]葡萄糖。動(dòng)物研究口服葡萄糖耐量試驗(yàn)iifi Crl j :CD1 (ICR) /Jn U S Charles River Laboratries Japan (YokOHama, H 本)獲得。所有的小鼠以標(biāo)準(zhǔn)飲食(Clea Japan，日本東京)喂養(yǎng)并任意飲水。在研究中 遵守了所有針對動(dòng)物管理和使用的制度準(zhǔn)則。將測試化合物懸浮于0. 3%羧甲基-纖維素 鈉鹽(CMC-Na ；Sigma, St. Louis, M0)中。禁食15-17小時(shí)后，向7周大的ICR小鼠口服施 用所述測試化合物(3、10、30、100或300mg/kg)或溶媒(0.3% CMC-Na) 0測試化合物處理 后30分鐘口服給用葡萄糖溶液(5g/kg)。在測試化合物處理前以及葡萄糖負(fù)荷后0、0. 5、 1和2小時(shí)后采用含EDTA‘2K的毛細(xì)管從尾靜脈采集血液樣本。將血液樣本2，500xg離心 5分鐘，將分離的血漿置于冰上，并在當(dāng)天進(jìn)行分析。血漿葡萄糖水平采用葡萄糖C II-測 試(Wako Pure Chemical Industries,日本大阪)進(jìn)行測定。將葡萄糖負(fù)荷后0. 5和1小 時(shí)的血漿葡萄糖水平的總和與溶媒處理比較，其結(jié)果以下降百分比表示。在表1 和 2 中，對 GSK3 3 的 IC5。(nM)表示如下A < 15 ;B = 16-60 ;C = 61-150 ； D > 150 ；ND =無數(shù)據(jù)。表1.示例性化合物及其活性。
124[1021] 表2.示例性化合物及其活性。
犬嘔吐研究雄性比格犬由Japan Laboratory Animals Inc.(日本東京)獲得。以標(biāo)準(zhǔn)飲食 (Oriental Yeast,日本東京)喂養(yǎng)。任意進(jìn)水。將測試化合物溶解于二甲亞砜(100mg/mL)， 然后用50%聚乙二醇400稀釋得到1、3和10mg/mL的濃度。經(jīng)頭靜脈向犬靜脈給用該化合 物(0. 1、0. 3和lmg/kg，0. lmL/kg)。在給用后0. 17、0. 5、1、2和4小時(shí)從相對的頭靜脈采集 血液樣本至含EDTA-2K的真空管(VEN0JECT II，Terumo,日本東京)并置于冰上。通過離 心(2200xg，10min,4°C )分離血漿樣本并在-20°C下貯存。將此血漿樣本與2體積的含有 內(nèi)標(biāo)的甲醇和乙腈(1 l,v/v)混合物混合，并13400Xg離心3分鐘。用15%乙腈將上清 液稀釋 20 倍，將 10-iiL 等份注入 LC/MS/MS 系統(tǒng)。在 Waters Alliance 2795S印arations Module (Waters Corp.，MA)上進(jìn)行HPLC分離。以采用正離子對在MRM模式中具有電噴霧 電離界面的 Micromass Quattro Ultima Pt (Waters Corp.)測定質(zhì)譜。本研究中測試了如下化合物 在一些實(shí)施方案中，所述測試化合物顯示了 0. 5-1小時(shí)范圍內(nèi)的T1/2。在一些實(shí)施 方案中，所述測試化合物顯示了 3-7i!m范圍內(nèi)的C1(tain。在一些實(shí)施方案中，在用所述測試 化合物處理的犬中檢查到了嘔吐。以上所述實(shí)施例的目的僅在于進(jìn)行示范，本領(lǐng)域的技術(shù)人員采用不超出常規(guī)的試 驗(yàn)將可以認(rèn)識到、或能夠確定具體化合物的許多等同物、材料和方法。所有這些等同都被認(rèn)為涵蓋在所主張的主題范圍內(nèi)且包含在所附權(quán)利要求書中。
權(quán)利要求
式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R2為氫或低級烷基；R3為氫、CN、C(O)R3a、C(NH)NHOH或5-四唑基；R3a為OH、烷氧基或NHR3b；R3b為氫、NH2、OH或低級烷基；R5a和R5b各自獨(dú)立地為氫、低級烷基或芳烷基，其任選地被1至3個(gè)各自獨(dú)立地選自Q0基團(tuán)的取代基取代；其中Q0為鹵素、氰基、硝基、NH2、烷基或烷氧基；R6為鹵素；在每種情況下，Ra和X3獨(dú)立地選自如下的(i)或(ii)(i)Ra為氫或低級烷基；且X3為取代或未取代的C1-C3亞烴基、取代或未取代的3-6元環(huán)亞烴基或取代或未取代的3-6元雜亞環(huán)基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；或者(ii)Ra和X3與它們鍵合的氮原子一起可形成5至7元飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)任選地含有一個(gè)或多個(gè)O或S原子或者一個(gè)或多個(gè)額外的N原子；Rb為-(CHR7a)nR7、-NR7bR7、-OR7、-S(O)r-R7、-NR7bCOY1R7或-Y2CONR7bR7；Y1為鍵、O或NR7b；Y2為鍵或O；n為0或1；r為0至2的整數(shù)；R7為烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其中R7任選地被1至5個(gè)取代基所取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7a為氫、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其中R7a任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7b為氫、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或稠合雜環(huán)基芳基，其中R7b任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；其中Q1為鹵素、羥基、氧、硫代、氰基、硝基、疊氮基、巰基、甲?；⒘u基羰基、羥基羰基烷基、烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、環(huán)烷基硫代、芳基硫代、雜芳基硫代、芳烷基硫代、雜芳烷基硫代、烷基亞硫?；h(huán)烷基亞硫?；⒎蓟鶃喠蝓；?、雜芳基亞硫?；?、芳烷基亞硫?；?、雜芳烷基亞硫?；?、烷基磺?；?、環(huán)烷基磺?；?、芳基磺酰基、雜芳基磺酰基、芳烷基磺?；?、雜芳烷基磺?；⑼檠趸酋；?、芳氧基磺?；⑽慈〈幕蛉〈陌被酋；蛄u基磺?；?；X1為O或NR8；R8為氫或低級烷基；X2為CH2、O、NR1或S；R1為氫或低級烷基；A為鍵或取代或未取代的C1-C2亞烴基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；其中Q2為烷基或鹵代烷基；p為0或1；且q為0至2的整數(shù)。FPA00001134722400011.tif
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R5a和R5b為氫。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R2為氫。
4.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X1為O。
5.如權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Y1為鍵。
6.如權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的化合物，其中R3為CN。
7.如權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的化合物，其中R3為C(0)R3a。
8.如權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的化合物，其中R3為C(NH)NHOH。
9.如權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的化合物，其中R3為5-四唑基。
10.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中R3a為浙。
11.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中X1為O而R2為氫。
12.如權(quán)利要求1-11任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Ra為氫。
13.如權(quán)利要求1-12任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X3為取代或未取代的C1-C3亞烴基， 其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)，其中Q2為烷基或鹵代烷基。
14.如權(quán)利要求1-13任意一項(xiàng)所述的化合物，其中A為取代或未取代的C1-C2亞烴基。
15.如權(quán)利要求14所述的化合物，其中A被1至4個(gè)Q2基團(tuán)所取代，其中Q2為烷基或 鹵代烷基；且P為0。
16.如權(quán)利要求1-15任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X2為CH2。
17.如權(quán)利要求1-15任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X2為O。
18.如權(quán)利要求16所述的化合物，其中A為CH2;p為0而q為2。
19.如權(quán)利要求16所述的化合物，其中X1為O。
20.如權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所述的化合物，其中R6為F。
21.如權(quán)利要求1所述的化合物，其具有式(Ia) 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R3 為氫、CN、C (0) R3\ C (NH) NHOH 或 5-四唑基；R3a為0H、烷氧基或NHR3b ；R3b為氫、NH2、0H或低級烷基；R5a和R5b各自獨(dú)立地為氫或低級烷基；R6為鹵素；在每種情況下，Ra和X3獨(dú)立地選自如下的⑴或( )(i)Ra為氫或低級烷基；且X3為取代或未取代的C1-C3亞烴基、取代或未取代的3-6元環(huán)亞烴基或取代或未取代的 3-6元雜亞環(huán)基，其中該取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；或(ii)Ra和X3與它們鍵合的氮原子一起可形成5至7元飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)中任選 地含有一個(gè)或多個(gè)O或S原子或者一個(gè)或多個(gè)額外的N原子；Rb 為-(CHR7a) nR7、-NR7bR7, -OR7、-S (0) fR7、-NR7bCOY1R7 或-Y2CONR7bR7 ； Y1為鍵、0或NR7b ； Y2為鍵或0 ； η為 或1 ； 1為O至2的整數(shù)；R7為烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其中R7 任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7a為氫、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、稠合雜環(huán)基芳基或稠合芳基雜環(huán)基，其中 R7a任選地被1至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；R7b為氫、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或稠合雜環(huán)基芳基，其中R71Mi選地被1 至5個(gè)取代基取代，每個(gè)取代基獨(dú)立地選自Q1基團(tuán)；其中Q1為商素、羥基、氧，硫代、氰基、硝基、疊氮基、巰基、甲?；?、羥基羰基、羥基羰基 烷基、烷基、商代烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧 基、鹵代烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、烷基羰基、 芳基羰基、雜芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰 基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧 基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、環(huán)烷基硫代、芳基硫 代、雜芳基硫代、芳烷基硫代、雜芳烷基硫代、烷基亞硫?；?、環(huán)烷基亞硫?；⒎蓟鶃喠蝓?基、雜芳基亞硫?；?、芳烷基亞硫酰基、雜芳烷基亞硫?；⑼榛酋；h(huán)烷基磺?；?、芳 基磺?；?、雜芳基磺?；⒎纪榛酋；㈦s芳烷基磺?；⑼檠趸酋；?、芳氧基磺?；?、未取代的或取代的氨基磺?；蛄u基磺?；?；且 Q2為烷基或鹵代烷基。
22.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中R5a和R5b為氫。
23.如權(quán)利要求21或22所述的化合物，其中R3為CN。
24.如權(quán)利要求21或22所述的化合物，其中R3為C(0)R3a。
25.如權(quán)利要求21或22所述的化合物，其中R3為C(NH)NH0H。
26.如權(quán)利要求21或22所述的化合物，其中R3為5-四唑基。
27.如權(quán)利要求24所述的化合物，其中R3a為0H。
28.如權(quán)利要求21-27任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Ra為氫。
29.一種化合物，其選自
30. 一種化合物，其選自
31.包含如權(quán)利要求1-30任意一項(xiàng)所述化合物及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。
32.用于治療、預(yù)防或改善GSK-3介導(dǎo)的疾病的方法，其包括施用如權(quán)利要求1-30意一項(xiàng)所述的化合物。
33.如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述GSK-3介導(dǎo)的疾病為糖尿病、與糖尿病相關(guān)的 病癥、阿耳茨海默氏病、帕金森氏癥、進(jìn)行性核上性麻痹、亞急性硬化性全腦炎帕金森氏綜 合征、腦炎后帕金森氏綜合征、拳擊手腦炎、關(guān)島帕金森癥_失智復(fù)合癥、皮克氏病、皮層基 底節(jié)變性、額顳癡呆、亨丁頓氏舞蹈癥、AIDS相關(guān)的癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化、 神經(jīng)外傷性疾病、抑郁癥、雙相情感性精神障礙、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病、潰瘍性結(jié)腸 炎、克羅恩病、敗血病、胰癌、卵巢癌或骨質(zhì)疏松癥。
34.如權(quán)利要求1-30任意一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療、預(yù)防或改善GSK-3介導(dǎo)的疾病。
35.如權(quán)利要求1-30任意一項(xiàng)所述的化合物在制備用于治療、預(yù)防或改善GSK-3介導(dǎo) 的疾病的藥物中的用途。
36.一種制造物品，其包含包裝材料，包含在該包轉(zhuǎn)材料中的可用于治療、預(yù)防或改善 GSK-3介導(dǎo)的疾病的權(quán)利要求1-30任意一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物，以 及說明該化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物被用于治療、預(yù)防或改善GSK-3介導(dǎo)的疾病的 標(biāo)簽。
全文摘要
本發(fā)明提供了具有式I的螺環(huán)狀氨基喹諾酮及包含該化合物的組合物。本發(fā)明提供的所述化合物和組合物可用于預(yù)防、改善或治療GSK-3介導(dǎo)的疾病。在式(I)中X1為O或NR8；A為鍵或取代或未取代的C1-C2亞烴基，其中所述取代基當(dāng)存在時(shí)選自1至4個(gè)Q2基團(tuán)；其中Q2為烷基或鹵代烷基；p為0或1；而q為0至2的整數(shù)。
文檔編號A61P25/00GK101855229SQ200880115090
公開日2010年10月6日 申請日期2008年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月12日
發(fā)明者中村凌子, 岡田恭子, 凱特琳·扎德寧斯, 李蓓, 歐娜·科茨歐瓦, 湯本和宏, 河野靖, 瀨戶茂樹, 福田恭通, 野村正寬 申請人:埃迪威克斯生物科學(xué)公司;杏林制藥株式會社