專利名稱：：一種抗糖尿病新藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，特別涉及一種抗糖尿病新藥。
背景技術(shù)：
：糖尿病是由于遺傳和環(huán)境因素相互作用，引起胰島素絕對或相對分泌不足以及靶組織細胞對胰島素敏感性降低，弓l起蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征，其中以高血糖為主要標志。臨床典型病例可出現(xiàn)多尿、多飲、多食、消痩等表現(xiàn)，即"三多一少"癥狀，糖尿病是最常見的慢性病之一，隨著人們生活水平的提高，人口老齡化以及肥胖率的增加，糖尿病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。糖尿病在中國的發(fā)病率達到2%，據(jù)統(tǒng)計，中國已確診的糖尿病患者達4000萬，并以每年100萬的速度遞增。其中，1型糖尿病患者占10%，^II型糖尿病患者占90%。I型糖尿病患者在確診后的5年內(nèi)很少有慢性并發(fā)癥的出現(xiàn)，而II型糖尿病患者在確診之前就已經(jīng)有慢性并發(fā)癥發(fā)生。據(jù)統(tǒng)計，有50%新診斷的11型糖尿病患者己存在一或種一種以上的慢性并發(fā)癥，有些患者是因為并發(fā)癥才發(fā)現(xiàn)患糖尿病的。1985年全球糖尿病患者估計約3000萬人。到1995年該數(shù)字突破13500萬。目前WHO預(yù)測2025年將上升到驚人的30000萬。該現(xiàn)狀使專用于糖尿病的健康護理資源不斷增加(www.who.int)。美國大約有1570萬人患有糖尿病，占人口總數(shù)5.9%，其中2/3患II型糖尿病。每天約有2200人被診斷為糖尿病。2001年大約有798，000人被診斷患有糖尿病(AmericanDiabetesAssociation,www.diabetes.org)。在美國，糖尿病是疾病導致死亡的第六大原因。根據(jù)死亡證明資料，1996年因糖尿病導致198140人死亡。在美國，糖尿病是花費最多的健康問題之一。與糖尿病治療直接相關(guān)的健康護理和其它花費，以及喪失生產(chǎn)力的代價，每年達98億美元。1999年全球抗糖尿病藥物銷售總計約12.7億美元，預(yù)期每年增長率為15%，因此，研制這一種有效的預(yù)防和治療糖尿病的藥物，在世界范圍內(nèi)扼制糖尿病的發(fā)生迫在眉睫。原有治療糖尿病使用的胰島素、磺酰脲類、雙胍類藥物，雖降糖作用明顯，但存在諸多副作用，而且價格昂貴，耐藥性強。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對糖尿病藥物存在的不足，研制和開發(fā)選擇性強，無副作用，高效價廉抗糖尿病新藥。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的我們利用遍及全國各地，廣泛分布于我國東北地區(qū)的野生草藥翻白草，將翻白草和茶葉以l:11:10或10:l的比例由下面步驟制得；a、將翻白草洗凈、曬干、切片，并粉碎過篩至2550目；b、在蒸餾水中浸泡0.516小時；c、加熱煮沸10120分鐘；d、冷卻至室溫并保持3小時5小時后以常法浸提；e、將浸提液用多層紗布過濾；f、將所得過濾液在25℃4℃條件下，冷浸泡茶葉1-24小時；g、以常法浸提后用多層紗布過濾茶葉渣；h、將所得過濾液經(jīng)真空冷凍干燥至-140°C-150。C得產(chǎn)品原藥干粉；其中蒸餾水用量以翻白草50克，蒸餾水3000ml量計算。將原藥干粉溶解在25Q/^的生理鹽水中，經(jīng)0.2微米孔徑濾膜過濾滅菌，制得抗糖尿病新藥口服液?？固悄虿≡幐煞劭勺鳛樘悄虿∷幬锏脑纤?，與可藥用載體或賦形劑制成抗糖尿病片劑、沖劑、膠囊制劑、滴丸制劑。本發(fā)明的優(yōu)點及積極效果經(jīng)動物試驗發(fā)現(xiàn)本發(fā)明口服液能極為有效地降低鏈脲佐菌素誘發(fā)實驗性II型糖尿病小鼠的攝食量、體重、血糖和血液中糖化血紅蛋白的含量(P<0.01)，并提高葡萄糖耐受性，同時，本發(fā)明口服液極為顯著地降低四氧嘧啶誘導的I型糖尿病小鼠模型血糖水平，這些結(jié)果顯示本發(fā)明抗I型糖尿病和II型糖尿病的能力明顯優(yōu)于翻白草熱水提取液或茶葉冷水浸泡提取液，并且還發(fā)現(xiàn)翻白草和茶葉聯(lián)合使用具有強大的協(xié)同性抗糖尿病作用。圖1為抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對II型糖尿病小鼠小鼠血糖的影響的對比圖圖2為抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對小鼠糖耐量的影響對比曲線圖圖3為抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對小鼠糖化血紅蛋白的影響對比曲線圖具體實施例方式為了更進一步描述本發(fā)明，下面用具體實施例來說明實施例11、配料翻白草50克茶葉50克2、制備將新采集的生長在湖北省的翻白草洗凈，曬干,切片并粉碎，粉碎過篩至2550目。取50克粉碎后的翻白草加3000毫升的蒸留水浸泡0.5小時，然后將其煮沸30分鐘，之后漫漫冷卻到室溫狀態(tài)并保持3小時以常法浸提，浸提完畢后經(jīng)8層沙布過濾除翻白草藥渣得濾過液2000毫升。然后在4-C條件下用2000毫升濾液浸泡50克茶葉IO小時，浸提完畢后用2層沙布過濾除茶葉渣。將所得過濾液經(jīng)真空冷凍干燥-140。C得1克本發(fā)明抗糖尿病原藥干粉。將抗糖尿病原藥干粉溶解在25%生理鹽水中，經(jīng)0.2微米孔徑濾膜過濾滅菌，從而制備成抗糖尿病新藥口服液。其濃度每毫升含40毫克的干重物。藥效實驗1、對比藥液的制備a、翻白草水提口服液藥物原材料采集生長在湖北省的翻白草。翻白草洗凈,曬干，切片和粉碎，粉碎后各樣本達25-50目。取50克粉碎后的翻白草加3000毫升的蒸留水浸泡0.5至16小時(本試驗為半小時)，然后將其煮沸10至120分鐘(本試驗為30分鐘)，之后漫漫冷卻到室溫狀態(tài)并保持3小時浸提。浸提完畢后多層沙布過濾除翻白草藥渣(本試驗為8層沙布)得濾過液2000毫升。將所得濾過液經(jīng)真空冷凍干燥(-1400C)得0.5克翻白草水提口服液原藥干粉。將翻白草水提口服液原藥干粉溶解在25生理鹽水中，經(jīng)0.2微米孔徑濾膜過濾滅菌，從而制備成翻白草水提口服液。其濃度每毫升含20毫克的干重物。b、茶葉水提物口服液藥物原材料采集生長在廣東省的茶葉在250C至40C(本試驗為40C)條件下用這2000毫升蒸餾水冷浸泡50克茶葉1至24小時(本試驗為10小時)，浸提完畢后用2層沙布過濾除茶葉藥渣。將所得濾過液經(jīng)真空冷凍干燥(-1400C)得0.5克茶葉水提物口服液原藥干粉。將茶葉水提物口服液原藥干粉溶解在25生理鹽水中，經(jīng)0.2微米孔徑濾膜過濾滅菌，從而制備成茶葉水提物口服液口服液。其濃度每毫升含20毫克的干重物。2、藥效對比試驗及試驗結(jié)果分析a、抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對小鼠的急性毒性研究取六組8周齡的昆明小鼠(購買于南方醫(yī)科大學動物研究中心)，第一組和第二組各10只(5只雄性和5只雌性)，分別以單次劑量2g/kg和多次劑量0.4g/kg(QDX15)盛泰九號抗糖尿病口服液灌胃給予水提取物口服液，然后分別觀察1周和4周。第三組和第四組各10只(5只雄性和5只雌性)，分別以單次劑量lg/kg和多次劑量0.2g/kg(QDX15)翻白草水提口服液，然后分別觀察1周和4周。第五組和第六組各10只(5只雄性和5只雌性)，分別以單次劑量lg/kg和多次劑量0.2g/kg(QDX15)茶葉水提物口服液灌胃給予水提取物口服液，然后分別觀察1周和4周。在此試驗中，每兩天稱體重。試驗結(jié)束后，將受試小鼠處死，進行病理分析。結(jié)果表明在此試驗中，均未觀察到毒性，所有受試小鼠生長良好，無一死亡。b、抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對鏈脲佐菌素誘導II型糖尿病小鼠的影響研究II型糖尿病小鼠模型的建立2628克體重的小鼠(購買于南方醫(yī)科大學實驗動物中心)先以普通飼料喂養(yǎng)1周以適應(yīng)環(huán)境，從中隨機選取足夠數(shù)量生長正常的小鼠80只，飼喂高脂高糖飼料4周，然后腹腔注射購買于Sigma公司的鏈脲佐菌素(STZ)，每只小鼠的注射量分別為100mg/kg(鏈脲佐菌素稀釋在0.05mol/L的檸檬酸注射溶液中)，同時繼續(xù)飼喂高脂高糖飼料4周(高糖高脂伺料基礎(chǔ)飼料中加入10%蛋黃粉、10%熟豬油、1%膽固醇、0.5%脫氧膽酸鈉)，模型對照組注射0.05mol/L的檸檬酸溶液，每周監(jiān)測小鼠血糖值，以第4周測得值為準，選取血糖達到糖尿病級數(shù)并具有相似血糖水平的小鼠作為II型糖尿病模型小鼠，將模型小鼠隨機分為A、B、C、D四組，每組10只，其中A組為模型對照組，每天每只小鼠灌胃0.2ml生理鹽水，B、C、D三組分別每天每只灌胃0.2ml抗糖尿病口服液(O.4g/kg體重)，翻白草水提口服液(0.2g/kg體重)或茶葉水提物口服液(0.2g/kg體重)。各組小鼠連續(xù)灌胃36天，然后禁食過夜(15h)，眼球取血，測定各小鼠的血糖和糖化血紅蛋白含量。在灌胃ll天后，各組小鼠禁食過夜，眼內(nèi)眥取血，測定血糖，然后各組小鼠按2g/kg體重腹腔注射葡萄糖水溶液，分別于注射后0、10、30、60、90、120分鐘測定小鼠的血糖值，測定小鼠葡萄糖耐受性。見圖1，結(jié)果表明抗糖尿病口服液組(B組)，翻白草水提口服液組(C組)和茶葉水提物口服液組(D組)與模型對照組(A組)相比較發(fā)現(xiàn)，A組小鼠血糖有輕微的增加，但喂食前后差異無顯著性(P〉0.05);B、C、D三組小鼠喂食前后血糖濃度有顯著降低(P<0.01)，且B組較C、D組小鼠血糖下降更低，之間有顯著差異(P〈0.01)。見圖2，結(jié)果表明小鼠注射葡萄糖后120分鐘內(nèi)，B、C、D三組小鼠血糖濃度顯著低于A組(P<0.01)，且B組最低。見圖3，結(jié)果表明B、C、D三組小鼠糖化血紅蛋白的含量均顯著低于A組(P<0.01)，而且B組最低(P>0.05)。c.抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對鏈四氧嘧啶誘導I型糖尿病小鼠的影響研究第一步實驗動物I型糖尿病模型的建立:2628克體重的小鼠(購買于南方醫(yī)科大學實驗動物中心)，禁食16h，準備給予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液臨用前配制，濃度為12mg/ml。給藥方式為腹腔注射，劑量120mg/(kg體重)，一周后，于第8天斷食3小時后，眼眶內(nèi)眥采血，離心取上層血清在24小時內(nèi)用葡萄糖氧化酶法測定血糖。取血糖值〉12mmo1/L的糖尿病模型小鼠分組進行翻白草降血糖實驗。第二步實驗動物分組及處理取血糖值〉12mmo1/L的糖尿病模型小鼠40只，將模型小鼠隨機分為A、B、C、D四組，每組10只，其中A組為模型對照組，每天每只小鼠灌胃0.2ml生理鹽水，B、C、D三組分別每天每只灌胃0.2ml盛泰九號抗糖尿病口服液(O.4g/kg體重)，翻白草水提口服液(O.2g/kg體重)和茶葉水提物口服液(0.2g/kg體重)。正常小鼠10只作為對照組。給藥方式為灌胃，每天1次，時間30天。30天后，測血糖值，條件和方法同前。30d內(nèi)每周稱各組小鼠空腹體重，觀察體重變化。見表1抗糖尿病新藥口服液組，翻白草水提口服液組和茶葉水提物口服液組與糖尿病模型組比較，血糖降低差異有統(tǒng)計學意義(P〈0.0D，而且抗糖尿病口服液組降血糖能力最強。實驗期間，通過對動物體重的觀察可知，糖尿病模型組動物體重增長緩慢，其余各組動物體重均穩(wěn)定增長，但各組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P〉0.05),可認為翻白草各部分對糖尿病小鼠的體重沒有影響。表1為抗糖尿病口服液，翻白草水提口服液和茶葉水提物口服液對鏈四氧嘧啶誘導I型糖尿病小鼠的影響(X±S)對比列表<table><row><column>組別</column><column>動物數(shù)</column><column>實驗前</column><column>實驗后</column></row><row><column>正常對照組</column><column>10</column><column>7.5±1.1</column><column>8.5±1.8</column></row><row><column>糖尿病模型組(A)</column><column>10</column><column>16.9±3.2</column><column>15.4±2.6</column></row><row><column>抗糖尿病新藥口服液(B)</column><column>10</column><column>17.1±2.7</column><column>8.7±1.5</column></row><row><column>翻白草口服液</column><column>1016.8±2.8</column><column>11.5±2.3</column></row><row><column>茶葉口服液</column><column>10</column><column>16.5±3.1</column><column>12.8±1.5</column></row><table>權(quán)利要求1、一種抗糖尿病新藥，其特征在于將野生植物翻白草和茶葉以1∶1～1∶10或10∶1的比例由下面步驟制得；a、將翻白草洗凈、曬干、切片，粉碎過篩至25～50目；b、在蒸餾水中浸泡0.5～16小時；c、加熱煮沸10～120分鐘；d、冷卻至室溫并保持3小時～5小時后以常法浸提；e、將浸提液用多層紗布過濾；f、將所得過濾液在25℃～4℃條件下，浸泡茶葉1-24小時；g、以常法浸提后用多層紗布過濾茶葉渣；h、將所得過濾液經(jīng)真空冷凍干燥至-140℃～-150℃得產(chǎn)品原藥干粉；其中蒸餾水用量以翻白草50克，蒸餾水3000ml量計算。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗糖尿病新藥，其特征在于將原藥干粉溶解在25%的生理鹽水中，經(jīng)0.2微米孔徑濾膜過濾滅菌，得口服液。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗糖尿病新藥，其特征在于原藥干粉可作為糖尿病藥物的原料藥與可藥用載體或賦形劑制成抗糖尿病片劑、沖劑、膠囊制劑、滴丸制劑。全文摘要本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，特別涉及一種抗糖尿病新藥，它以野生植物翻白草和茶葉為原料，以1∶1～1∶10或10∶1的比例經(jīng)八步工藝步驟制取的原藥干粉，溶解在生理鹽水中從而制得抗糖尿病新藥口服液，原藥干粉還可與可藥用載體或賦形劑按傳統(tǒng)方法制成抗糖尿病片劑、沖劑、膠囊、滴丸制劑，其口服液用于動物試驗發(fā)現(xiàn)能有效地降低鏈脲佐菌素誘發(fā)實驗性II型糖尿病小鼠的攝食量、體重、血糖和血液中糖化血紅蛋白的含量，提高葡萄糖耐受性，并能顯著降低四氧嘧啶誘導的I型糖尿病小鼠模型血糖水平。文檔編號A61K36/82GK101204466SQ20071003131公開日2008年6月25日申請日期2007年11月9日優(yōu)先權(quán)日2007年11月9日發(fā)明者南張申請人:邱日輝;張南