專(zhuān)利名稱(chēng)：用于測(cè)定唾液體積的體外診斷劑的制作方法
專(zhuān)利說(shuō)明用于測(cè)定唾液體積的體外診斷劑 本發(fā)明涉及從口腔中收集唾液以檢測(cè)分析物的方法；用于獲得唾液的唾液收集溶液；用于生物液體的容器，該容器由底部部分和蓋部分組成，分別具有外側(cè)和內(nèi)側(cè)，其中，在蓋部分中設(shè)置一個(gè)空洞作為凹槽，在其中設(shè)置傳送裝置，該傳送裝置由在蓋部分的外側(cè)上的用于穿透收集器的裝置和在蓋部分的內(nèi)側(cè)上的具有兩個(gè)端部的突出物構(gòu)成；用于容納生物液體例如血液的可關(guān)閉的收集器，其具有朝向生物樣品的內(nèi)側(cè)；用于模仿生理學(xué)唾液的組成的唾液模擬溶液；用于定量唾液體積(Speichelvolumen)的校準(zhǔn)溶液；用于獲得唾液的測(cè)試試劑盒；以及它們的用途。
為了測(cè)定和分析臨床化學(xué)參數(shù)，在人體醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)上主要使用血液。但也存在著能再反映受檢者狀況的其他體液。它們?cè)诳蛇_(dá)性(Zugnglichkeit)方面有所差異。
血液作為研究材料具有以下缺點(diǎn)底物復(fù)雜，可用性(Verfügbarkeit)有限，為了獲得樣品需要專(zhuān)業(yè)人員并因而是耗時(shí)的，以及患者要遭受疼痛和應(yīng)激。
唾液只由三個(gè)大的和許多較小的唾液腺產(chǎn)生，主要在口腔中釋放。在獲得樣品時(shí)必須區(qū)分開(kāi)只由腺體形成并且一般從相應(yīng)的排泄管排出的腺唾液和來(lái)自口腔的混合唾液。對(duì)于科學(xué)研究(涉及確定的腺體類(lèi)型的生理學(xué)和病理學(xué)以及轉(zhuǎn)運(yùn)現(xiàn)象)首先需要腺唾液，而混合唾液主要可用于能夠推斷出血液組分的診斷性例行研究。
唾液是一種容易并且無(wú)應(yīng)激地即可獲得的用于一系列分析物測(cè)定的樣品材料。唾液研究尤其為許多疾病的診斷和治療控制提供了有價(jià)值的幫助。著眼點(diǎn)在于蛋白質(zhì)、激素、代謝物、電解質(zhì)和各種各樣的藥物。
使用唾液為臨床化學(xué)診斷帶來(lái)一系列優(yōu)點(diǎn)。對(duì)于受檢者而言，不用血液而使用唾液時(shí)，會(huì)產(chǎn)生很多各種各樣的優(yōu)點(diǎn)。
較小的受檢者載荷意味著，可以幾乎無(wú)應(yīng)激地取樣。因此唾液診斷特別是對(duì)于所有這樣的研究都是有意義的，即在所述研究中下丘腦-垂體-腎上腺軸線(xiàn)起作用。眾所周知，反復(fù)的靜脈穿刺會(huì)掩蓋很多動(dòng)力學(xué)功能測(cè)試的響應(yīng)。
此外，唾液診斷對(duì)于與常規(guī)取樣有關(guān)的所有研究都是有吸引力的，例如獲悉生物節(jié)律、排卵監(jiān)控和治療性監(jiān)控。
此外，與取血樣相比，受檢者的人為性貧血、感染和血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)更小。
使用唾液在取樣時(shí)還有成本較小的優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)樵谌藛T這方面來(lái)說(shuō)，由于無(wú)需使用受過(guò)訓(xùn)練的醫(yī)生或護(hù)理人員，因此總體而言產(chǎn)生比較低的成本。唾液甚至可以由受檢者自己來(lái)獲得，然后發(fā)送到合適的專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室。
在診斷方面，使用唾液還帶來(lái)一些優(yōu)點(diǎn)，例如反映出與不與蛋白質(zhì)結(jié)合的血漿級(jí)分，反映出細(xì)胞的濃度比例，沒(méi)有由于脂質(zhì)而產(chǎn)生的體積排斥效應(yīng)，和在一些藥物情況下，唾液濃度與藥理學(xué)效應(yīng)有著更好的相關(guān)性。
雖然在清醒狀態(tài)一直產(chǎn)生唾液，在24小時(shí)期間產(chǎn)生約1000ml，并且唾液可以經(jīng)口開(kāi)(Mundffnung)而容易地排出，但在實(shí)際中，特別是對(duì)于老年患者而言，在獲得唾液時(shí)也會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題。
現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)公開(kāi)了用于獲得唾液的多種方法或裝置。
最簡(jiǎn)單情況下，通過(guò)咀嚼運(yùn)動(dòng)刺激唾液流出。不過(guò)，在有些條件下，這種刺激還不夠，例如對(duì)于透析患者，老年受檢者而言，特別是在早晨于睡醒后。
另一種方法是用Salivette收集唾液，其中通過(guò)在棉花團(tuán)上咀嚼來(lái)獲得唾液。為了獲得唾液，將吸足唾液的棉花團(tuán)塞入Salivetten-懸置容器中并進(jìn)行離心。保留下來(lái)的、水樣澄清的唾液用于分析。如果在獲得唾液時(shí)使用固體載體，例如棉花，那么要檢驗(yàn)待檢測(cè)的物質(zhì)是否被所用的材料吸附。這特別是對(duì)于檢測(cè)藥物而言有重大意義。
也可以通過(guò)機(jī)械刺激例如咀嚼運(yùn)動(dòng)來(lái)刺激唾液流出。在此情況下，給服具有標(biāo)準(zhǔn)化尺寸的樹(shù)膠或石蠟，其中，受檢者必須經(jīng)一定時(shí)間，以例如70次咀嚼運(yùn)動(dòng)/分鐘的速度來(lái)咀嚼它們，其中，咀嚼運(yùn)動(dòng)的節(jié)奏可以通過(guò)節(jié)拍器進(jìn)行監(jiān)視，并且在1～2分鐘后收集在口腔中積聚的唾液。
為了獲得混合唾液，還可以使用吐的方法。在該方法中，在口腔中收集的唾液簡(jiǎn)單地被吐出。該過(guò)程可以以確定的時(shí)間間隔重復(fù)多次。
一種可選擇的獲得唾液的方法是從口腔中吸出，其中，通過(guò)抽吸器，經(jīng)過(guò)預(yù)先確定的時(shí)間將在口腔中收集的唾液吸出。
此外，在口腔中匯集的唾液易于通過(guò)向外滴而被收集在樣品容器中。
不過(guò)，所有以上所述獲得唾液的方法的共同缺點(diǎn)在于，對(duì)于患者或?qū)τ谕僖毫髁枯^少的人而言，只能收集到很少量的唾液，這種獲得是不可重復(fù)的，體積幾乎不能進(jìn)行定量，因此在診斷中使用是成問(wèn)題的。
本發(fā)明的目的是提供各個(gè)組成部分或一種可重復(fù)性地提取和定量唾液以用于進(jìn)一步分析目的的方法。
本發(fā)明目的分別獨(dú)立地通過(guò)以下內(nèi)容來(lái)實(shí)現(xiàn)從口腔中收集唾液以檢測(cè)分析物的方法，所述方法包括以下步驟(a)清潔口腔，(b)用唾液收集溶液刺激唾液分泌，(c)從口腔中除去唾液-唾液收集溶液混合物，并收集在容器中，(d)將唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移入可關(guān)閉的收集器中；唾液收集溶液，其由具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑(Mittel)、指示物和/或因子(Agens)和水組成；一種容器，其中在將該容器裝配好的狀態(tài)下，傳送裝置的突出物的接近底部部分的端部與底部部分的距離最大為3mm；一種可關(guān)閉的收集器，其中包含溶液，該溶液含有用于穩(wěn)定化或保存的試藥(Reagens)和用于使生物液體或其組分去溶劑化的試藥；唾液模擬溶液，其中含有鈉、鉀或鈣化合物，人血清白蛋白，尿素和水；由唾液收集溶液和/或唾液模擬溶液和疊氮化鈉、苯甲酸鉀和/或Thimerosal組成的校準(zhǔn)溶液；由唾液收集溶液和容器組成的測(cè)試試劑盒；以及它們的用途。在此證實(shí)有利的是，通過(guò)可標(biāo)準(zhǔn)化的方法和可標(biāo)準(zhǔn)化的組成部分提高了對(duì)于獲得的唾液所進(jìn)行的分析的可重復(fù)性和可信度。由于在分析步驟之一或在所使用的組成部分之一中取消了固相載體，因而證實(shí)有利的是，不會(huì)吸附待檢測(cè)的物質(zhì)。由于良好的重復(fù)性質(zhì)，本發(fā)明還可以用于其中需要多種唾液樣品的過(guò)程控制。受檢者與受檢者之間的可變性也較小。
通過(guò)具有刺激味覺(jué)的性質(zhì)的唾液收集溶液，提高了唾液分泌，因此提供更大的樣品量用于分析，并且保持多次唾液接收的波動(dòng)較低。
證實(shí)有利的是，唾液-唾液收集溶液混合物經(jīng)過(guò)整合在容器中或上的傳送裝置而轉(zhuǎn)移入可關(guān)閉的收集器中，其中，樣品和實(shí)施分析的人員之間不需要進(jìn)行接觸，因此感染風(fēng)險(xiǎn)顯著降低。
通過(guò)經(jīng)在容器中的過(guò)濾裝置從唾液-唾液收集溶液混合物中除去個(gè)別組分，可及早去除既會(huì)影響分析物也會(huì)妨礙分析本身的顆粒。
通過(guò)使用含有具有保存和還原性質(zhì)的溶液的可關(guān)閉的收集器，一方面改善了唾液-唾液收集溶液混合物的穩(wěn)定性，和另一方面改善了會(huì)對(duì)接下來(lái)的分析產(chǎn)生負(fù)面影響的各種各樣的蛋白質(zhì)，特別是糖蛋白的去除(例如通過(guò)離心)。
有利地，使用校準(zhǔn)溶液，從而既能夠?qū)ν僖后w積進(jìn)行定量，也能夠?qū)τ纱舜_定的分析物進(jìn)行定量。
通過(guò)比較唾液-唾液收集溶液混合物的指示物和/或因子的濃度和/或消光度(Extinktion)與在提取前在唾液中存在的指示物和/或因子的濃度和/或消光度，可以有利地防止分析結(jié)果被干擾性成分所歪曲，所述成分是受檢者在獲得唾液前短時(shí)間內(nèi)例如通過(guò)攝取食物等而服用的。
將在抽成真空的收集器中存在的唾液-唾液收集溶液混合物進(jìn)行離心，任選事先進(jìn)行混合，從而可以使干擾性組分遷移入顆粒狀沉淀(Pellet)，并將澄清的上清液用于分析，以便獲得可重復(fù)的結(jié)果。
證實(shí)有利的是，將唾液-唾液收集溶液混合物用于分析，從而能夠分析易于獲得的樣品材料。
可以在標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量設(shè)備上進(jìn)行分析，因而無(wú)需昂貴的儀器，也不需要受過(guò)特別訓(xùn)練的人員來(lái)操作儀器。
具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑選自無(wú)機(jī)和/或有機(jī)食用酸和/或其鹽或者它們的混合物，包括磷酸、乳酸、檸檬酸、抗壞血酸，因此受檢者不會(huì)由于可能無(wú)意地吞咽下唾液收集溶液而遭受危險(xiǎn)。
具有味覺(jué)性質(zhì)的試劑也可以是活性物質(zhì)，例如毛果蕓香堿，因此可以使用市場(chǎng)上已存在的藥劑，其相容性已得到千百次測(cè)試和評(píng)價(jià)。
具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑的濃度選自下限為0.0005％，特別是0.01％，優(yōu)選1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍，其中，通過(guò)所選的濃度來(lái)最佳地刺激唾液流出，但不會(huì)對(duì)受檢者造成危害。
還證實(shí)有利的是，含有染料作為指示物，因此可以簡(jiǎn)便地可視地檢測(cè)唾液-唾液收集溶液混合物。所述染料是水溶性的，因此可以簡(jiǎn)便地并因而低成本地制備唾液收集溶液。
所述染料優(yōu)選引起黃色著色，并且選自酒石黃、姜黃素、藏紅(Safran)、喹啉黃(Chinolingelb)、日落黃FCF、橙黃S(GelborangeS)、蟲(chóng)紅、洋紅酸、洋紅、胡蘿卜素或者它們的混合物，因此所獲得的唾液-唾液收集溶液混合物可以用在實(shí)驗(yàn)室或醫(yī)生診所(Arztpraxen)中已存在的設(shè)備進(jìn)行測(cè)量。
所述染料也可以選自核黃素、核黃素-5′-磷酸、葉綠素和葉綠酸、葉綠素和葉綠酸的含銅絡(luò)合物、焦糖、簡(jiǎn)單的焦糖、亞硫酸鹽堿液(Sulfitlaugen)-焦糖、氨-焦糖、亞硫酸銨-焦糖、植物炭，辣椒色素、辣椒黃素、辣椒玉紅素、甜菜紅、甜菜苷、花色素、氧化鐵和氫氧化鐵、偶氮玉紅、二藍(lán)光酸性紅(Carmoisin)、麗春紅4R、胭脂蟲(chóng)紅A、Allurarot AC、專(zhuān)利藍(lán)V、靛藍(lán)、靛卡紅、亮藍(lán)FCF、綠S、亮黑BN、黑PN、棕HT、蕃茄紅素、β-阿樸-8′-胡蘿卜素醛(C 30)，β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸(C 30)-乙酯、葉黃素、由美拉德化合物構(gòu)成的物質(zhì)和/或它們的混合物，因此可以實(shí)現(xiàn)許多各種著色，因而能夠進(jìn)行顏色編碼(Farbcodierung)。
染料的濃度選自下限為0.0001％，特別是0.005％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍，因此可以保持在制備唾液收集溶液時(shí)染料的成本很低。
當(dāng)使用在醫(yī)藥產(chǎn)品和/或體外診斷劑或者藥用物質(zhì)意義上的因子時(shí)，證實(shí)有利的是，使用其安全性已經(jīng)在臨床研究中被評(píng)價(jià)或者為此提供關(guān)于生理學(xué)和病理學(xué)狀況的信息的物質(zhì)。
有利地，摻入可以用常規(guī)使用的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量設(shè)備進(jìn)行測(cè)定的因子，從而可以在任何通常實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行分析。
添加選自以下的至少一種代表物作為因子膽紅素，醋氨酚，酸性磷酸酶，白蛋白，肌酸酐，醇，堿性磷酸酶，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶，氨，淀粉酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素，非綴合和綴合的，尿素，鈣，碳酸氫鹽，膽堿酯酶，LDL或HDL膽固醇，溶菌酶，淀粉酶，肌酸激酶，肌酸激酶-MB，氯化物，卡馬西平，肌酸酐，C-反應(yīng)性蛋白，直接膽紅素，地高辛，二氧化碳，鐵，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶，葡萄糖，磁性HDL-膽固醇試藥，鉀，乳酸鹽，乳酸脫氫酶，鋰，脂酶，無(wú)機(jī)化合物，例如微量元素，礦物質(zhì)，如鎂、鈉，新生的膽紅素，苯巴比妥，磷，苯妥英，撲米酮，腦脊液蛋白(Liquorprotein)，水楊酸鹽，總膽紅素，茶堿，總鐵結(jié)合容量的試藥，總蛋白質(zhì)，甘油三酯，尿蛋白，尿酸，β-微球蛋白，皮質(zhì)類(lèi)固醇激素或性激素結(jié)合性球蛋白，硫氰酸鹽，運(yùn)鐵蛋白，各種脂質(zhì)，脂蛋白，蛋白質(zhì)，碳水化合物，特別是水溶性碳水化合物，維生素，特別是水溶性維生素，例如B族、C族和F族維生素，無(wú)機(jī)化合物，例如微量元素，礦物質(zhì)，激素，例如醛固酮，雄甾烯二酮，皮質(zhì)醇，二氫表雄甾酮，或其硫酸酯，雌二醇，雌三醇，黃體酮，睪酮，或者它們的混合物，對(duì)此，使用食品法所允許的藥劑來(lái)制備唾液收集溶液，因此其作用已經(jīng)被列為安全的那一類(lèi)。
所述因子的濃度選自下限為0.0000000001％，特別是0.00005％，優(yōu)選0.001％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍，由此使用了生理學(xué)上安全的濃度。
在一個(gè)進(jìn)一步變化形式中，可以使用芳香物質(zhì)和/或增味劑，因此可以改善唾液收集溶液的味道，從而還可以額外地刺激唾液流出，并增加分泌出的唾液的體積。
所述芳香物質(zhì)選自糖類(lèi)和/或糖交換物(Zuckeraustauschstoffe)，例如蔗糖、麥芽糖、果糖，和/或甜味劑，例如糖精、天冬甜素，和/或它們的混合物，從而一方面非糖尿病的人不必放棄其所習(xí)慣的味道，另一方面即使糖尿病人也可以放心地用該唾液收集溶液進(jìn)行漱口，而不必在吞咽時(shí)擔(dān)心胰島素休克。
所述芳香物質(zhì)和/或增味劑是天然和/或合成來(lái)源的，選自水果，如蘋(píng)果，覆盆子，櫻桃，草莓，檸檬，甜檸檬，橙，甘草，藥草，奎寧，咖啡因，茶素(Teein)或它們的混合物，從而使用了這樣的物質(zhì)，人類(lèi)已經(jīng)習(xí)慣于所述物質(zhì)，與之相關(guān)的是令人愉快的感覺(jué)或味道經(jīng)歷。
所述芳香物質(zhì)和/或增味劑的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選1％的范圍，因此可以實(shí)現(xiàn)最佳的味道調(diào)整，因此提高唾液收集溶液的可接受性。
pH值選自下限為3，優(yōu)選3.5，特別是4，和上限為6，優(yōu)選5，特別是4.5的范圍，因此最佳地刺激唾液分泌，此外還降低pH值，即接近血漿pH值，從而表現(xiàn)出較小的波動(dòng)。
朝向底部部分的端部的距離選自下限為0.1mm，特別是0.5mm，優(yōu)選1mm，和上限為3mm，特別是2mm，優(yōu)選1.5mm的范圍，因此還可以傳送十分小的體積，從而即使用少量唾液-唾液收集溶液混合物也可進(jìn)行高價(jià)值的分析。
在所述容器的一種進(jìn)一步變化形式中的規(guī)劃是，在傳送裝置之前或之中安裝過(guò)濾裝置，從而除去妨礙分析的顆粒。
過(guò)濾裝置由選自以下的材料形成玻璃棉、棉花、濾紙、泡沫橡膠、再生的纖維素、三乙酸纖維素、尼龍、硝化纖維素、聚二氟乙烯(PVDF)、PVP、聚醚磺酸酯(Polyethersulfonat)，它們對(duì)于生物樣品具有很好的過(guò)濾性質(zhì)。
在可選的實(shí)施方案中，可以安裝膜形式的過(guò)濾裝置，從而可以將其直接整合在傳送裝置中，而不需要額外的或只是最小的空間來(lái)對(duì)其進(jìn)行安裝。
有利地，過(guò)濾裝置的孔徑選自下限為1μm，特別是10μm，優(yōu)選20μm，和上限為100μm，特別是60μm，優(yōu)選50μm的范圍，從而一方面去除了唾液-唾液收集溶液混合物的大部分污染性顆粒，另一方面保證沒(méi)有阻塞危險(xiǎn)的通過(guò)性。
用于穩(wěn)定化或保存的試藥可以是苯甲酸鉀、山梨酸鉀、疊氮化鈉和/或Thimerosal，從而可以較長(zhǎng)時(shí)間保存該唾液-唾液收集溶液混合物，而不會(huì)因細(xì)菌或酶作用而對(duì)分析物的耐久性造成危害。
苯甲酸鉀或山梨酸鉀的濃度選自下限為0.05％，特別是0.1％，優(yōu)選1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍，疊氮化鈉或Thimerosal的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為1％，特別是0.5％，優(yōu)選0.2％的范圍，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)于所希望的效果即穩(wěn)定化或保存的最好的作用。
用于去溶劑化的試藥是硫酸銨、氯化鈉、氯化鉀和/或氯化鈣，從而例如可以改變蛋白質(zhì)，特別是糖蛋白和蛋白聚糖的表面性質(zhì)，并且這些蛋白質(zhì)可以通過(guò)離心而去除，而不會(huì)妨礙接下來(lái)的分析。
用于去溶劑化的試藥的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍，從而雖然出現(xiàn)效果降低，但并沒(méi)有改變分析物，其中所述分析可被歪曲。
所述溶液的體積選自下限為5μl，特別是20μl，優(yōu)選30μl，和上限為500μl，特別是100μl，優(yōu)選50μl的范圍，在此情況下可以實(shí)現(xiàn)9.5ml收集器的內(nèi)側(cè)的最佳涂覆。
在一種進(jìn)一步變化形式中，用所述溶液對(duì)收集器的內(nèi)側(cè)進(jìn)行噴灑，并任選進(jìn)行干燥，因此保證不改變總體積，從而可以準(zhǔn)確無(wú)誤地對(duì)唾液量進(jìn)行定量。
將收集器抽成真空也被證實(shí)是有利的，因?yàn)橐源朔绞酵僖?唾液收集溶液混合物自動(dòng)地從容器轉(zhuǎn)移到收集器中，因而不會(huì)對(duì)進(jìn)行樣品獲取或分析的人員造成危害。
唾液模擬溶液的鈉、鉀或鈣化合物的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為20％，特別是10％，優(yōu)選5％的范圍，人血清白蛋白的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是2.5％，優(yōu)選1％的范圍，以及尿素的濃度選自下限為0.0005％，特別是0.001％，優(yōu)選0.01％，和上限為2％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍，從而模仿了唾液的生理學(xué)濃度，以此方式可以與天然的唾液相比較。
在一種進(jìn)一步變化形式中，乳鐵蛋白的濃度選自下限為0.000001％，特別是0.00001％，優(yōu)選0.0001％，和上限為0.1％，特別是0.01％，優(yōu)選0.005％的范圍，因此含有在天然的唾液中可以檢測(cè)的其他成分，由此提高可重復(fù)性。
此外，明膠的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍，因此同樣模仿了唾液的天然組成。
唾液模擬溶液的pH值選自下限為5，優(yōu)選5.5，特別是6，和上限為7.5，優(yōu)選7，特別是6.5的范圍，可以實(shí)現(xiàn)定量過(guò)程的優(yōu)化。
在校準(zhǔn)溶液中，以近似反比的比例含有唾液收集溶液和唾液模擬溶液，從而可以進(jìn)行定量。
可以分別以梯度含有唾液收集溶液和唾液模擬溶液的體積，從而能夠進(jìn)行定量。
疊氮化鈉、苯甲酸鉀、山梨酸鉀和/或Thimerosal的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍，在此情況下可以延長(zhǎng)溶液的耐久性。
有利地，測(cè)試試劑盒包含唾液收集溶液和容器，從而受檢者在沒(méi)有醫(yī)務(wù)專(zhuān)業(yè)人員的情況下也可獲得唾液樣品。
通過(guò)測(cè)試試劑盒中的可關(guān)閉的收集器，可以將樣品發(fā)送出去。
測(cè)試試劑盒中的唾液模擬溶液和/或至少一種校準(zhǔn)溶液使得能夠?qū)ν僖后w積進(jìn)行定量。
在測(cè)試試劑盒的一種進(jìn)一步變化形式中，包括至少一個(gè)微量滴定板、比色皿(Küvette)和/或使用說(shuō)明書(shū)，從而一方面可以使用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量設(shè)備來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)，另一方面即使是未受訓(xùn)練的人員也可以實(shí)施定量。
附圖為

圖1容器的橫截面； 圖2用經(jīng)分光光度計(jì)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)直線(xiàn)對(duì)唾液體積進(jìn)行定量而得到的結(jié)果。
首先需要說(shuō)明的是，在不同地描述的實(shí)施方案中，為相同的部件設(shè)定相同的參考標(biāo)記或相同的構(gòu)件名稱(chēng)，其中，包含在整個(gè)說(shuō)明書(shū)中的公開(kāi)內(nèi)容根據(jù)意義可以應(yīng)用于具有相同參考標(biāo)記或相同構(gòu)件名稱(chēng)的相同部件上。此外，在本說(shuō)明書(shū)中所選用的位置說(shuō)明，例如上、下、側(cè)等基于直接描述以及所示的圖，當(dāng)位置改變時(shí)，根據(jù)意義可以應(yīng)用于新的位置。此外，來(lái)自所示和所述的不同實(shí)施例的單個(gè)特征或特征組合還可以描繪獨(dú)立的、有創(chuàng)造性的或根據(jù)本發(fā)明的解決方案。
本發(fā)明描述了收集并定量唾液或體積的方法。此外還描述了為此所需的各個(gè)組成部分。
以下描述了唾液收集系統(tǒng)的各個(gè)組成部分，在此需指出的是，即使每個(gè)組成部分本身也已是一項(xiàng)發(fā)明。
唾液收集溶液由至少一種味覺(jué)刺激物、一種指示物和/或因子和水組成。所述味覺(jué)刺激物用于刺激唾液分泌。所述味覺(jué)刺激物由無(wú)機(jī)和/或有機(jī)食用酸和/或其鹽或者它們的混合物形成。作為有機(jī)食用酸，例如可以使用抗壞血酸、乳酸等。優(yōu)選使用檸檬酸。代替所述有機(jī)和/或無(wú)機(jī)食用酸例如磷酸，或者除了它們之外，還可以使用活性物質(zhì)，例如毛果蕓香堿，以用于刺激唾液分泌。除已經(jīng)提及的無(wú)機(jī)和有機(jī)食用酸外，還可以使用它們的鹽，例如鈉鹽或鉀鹽。
具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑的濃度可以選自下限為0.0005％，特別是0.01％，優(yōu)選1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍。
此外，該唾液收集溶液還包含指示物和/或因子，其中所述指示物優(yōu)選由染料形成。在指南94/36/EG的意義上的采用各有效措辭的所有染料都是可考慮的。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用水溶性的并且引起黃色著色的染料。作為引起黃色著色的染料，提供了酒石黃、姜黃素、藏紅、喹啉黃、日落黃FCF、橙黃S、蟲(chóng)紅、洋紅酸、洋紅、胡蘿卜素或者它們的混合物。
不言而喻還可以使用引起唾液收集溶液呈現(xiàn)其他顏色的染料，例如核黃素、核黃素-5′-磷酸、葉綠素和葉綠酸、葉綠素和葉綠酸的含銅絡(luò)合物、焦糖、簡(jiǎn)單的焦糖、亞硫酸鹽堿液-焦糖、氨-焦糖、亞硫酸銨-焦糖、植物炭，辣椒色素、辣椒黃素、辣椒玉紅素、甜菜紅、甜菜苷、花色素、氧化鐵和氫氧化鐵、偶氮玉紅、二藍(lán)光酸性紅、麗春紅4R、胭脂蟲(chóng)紅A、Allurarot AC、專(zhuān)利藍(lán)V、靛藍(lán)、靛卡紅、亮藍(lán)FCF、綠S、亮黑BN、黑PN、棕HT、蕃茄紅素、β-阿樸-8′-胡蘿卜素醛(C 30)，β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸(C 30)-乙酯、葉黃素、由美拉德化合物構(gòu)成的物質(zhì)和/或它們的混合物。
所述染料的濃度選自下限為0.0001％，特別是0.005％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍，從而確保引起唾液收集溶液呈現(xiàn)出可以例如通過(guò)光度法檢測(cè)的顏色。
與在唾液收集溶液中所使用的染料的濃度相獨(dú)立地，還額外地在預(yù)先確定的波長(zhǎng)下測(cè)定唾液收集溶液的消光度。
代替指示物或者另外，還可以向唾液收集溶液中混入因子。
對(duì)于用作因子，可以考慮在醫(yī)藥產(chǎn)品(根據(jù)指南93/42/EWG，采用各有效措辭)、體外診斷劑(根據(jù)指南98/79/EG，采用各有效措辭)和/或藥用物質(zhì)意義上的物質(zhì)，特別是其安全性已經(jīng)在臨床研究進(jìn)行評(píng)價(jià)的那些。作為因子，還可以使用根據(jù)指南95/2/EG沒(méi)有被定義為染料或甜味劑，但可以作為食品使用的那些物質(zhì)。
作為因子，提供了膽紅素，醋氨酚，酸性磷酸酶，白蛋白，肌酸酐，醇，堿性磷酸酶，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶，氨，淀粉酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素，非綴合和綴合的，尿素，鈣，碳酸氫鹽，膽堿酯酶，LDL或HDL膽固醇，溶菌酶，淀粉酶，肌酸激酶，肌酸激酶-MB，氯化物，卡馬西平，肌酸酐，C-反應(yīng)性蛋白，直接膽紅素，地高辛，二氧化碳，鐵，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶，葡萄糖，磁性HDL-膽固醇試藥，鉀，乳酸鹽，乳酸脫氫酶，鋰，脂酶，無(wú)機(jī)化合物，例如微量元素，礦物質(zhì)，如鎂、鈉，新生的膽紅素，苯巴比妥，磷，苯妥英，撲米酮，腦脊液蛋白，水楊酸鹽，總膽紅素，茶堿，總鐵結(jié)合容量的試藥，總蛋白質(zhì)，甘油三酯，尿蛋白，尿酸，β-微球蛋白，皮質(zhì)類(lèi)固醇激素或性激素結(jié)合性球蛋白，硫氰酸鹽，運(yùn)鐵蛋白，各種脂質(zhì)，脂蛋白，蛋白質(zhì)，碳水化合物，特別是水溶性碳水化合物，維生素，特別是水溶性維生素，例如B族、C族和F族維生素，無(wú)機(jī)化合物，例如微量元素，礦物質(zhì)，激素，例如醛固酮，雄甾烯二酮，皮質(zhì)醇，二氫表雄甾酮，或其硫酸酯，雌二醇，雌三醇，黃體酮，睪酮，或者它們的混合物。
所述因子的濃度選自下限為0.0000000001％，特別是0.00005％，優(yōu)選0.001％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍。
在一種進(jìn)一步變化形式中，還可以向該唾液收集溶液中添加芳香物質(zhì)和/或增味劑，其例如增強(qiáng)檸檬酸味道或使該唾液收集溶液變甜，例如，這例如可以用糖類(lèi)或糖交換物，如蔗糖、麥芽糖、果糖，和/或甜味劑，如糖精、天冬甜素，和/或它們的混合物來(lái)實(shí)現(xiàn)。作為甜味劑，可以使用在指南94/35/EG意義上的采用各有效措辭的所有物質(zhì)。
為了改善唾液收集溶液的味道，還可以添加天然以及合成來(lái)源的芳香物質(zhì)和/或增味劑，它們模擬了蘋(píng)果，覆盆子，櫻桃，草莓，檸檬，甜檸檬，橙，甘草，藥草，奎寧，咖啡因，茶素或它們的混合物的味道。
所述芳香物質(zhì)和/或增味劑的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選1％的范圍。
唾液收集溶液的pH值選自下限為3，優(yōu)選3.5，特別是4，和上限為6，優(yōu)選5，特別是4.5的范圍。
為避免污染，用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法對(duì)唾液收集溶液進(jìn)行消毒，例如通過(guò)無(wú)菌過(guò)濾或者高壓滅菌和任選隨后分成等份。將唾液收集溶液裝入防碎的容器中，并密封。有利地，還避光保存唾液收集溶液。
使用體積選自下限為0.5ml，優(yōu)選1ml，特別是2ml，和上限為10ml，優(yōu)選7ml，特別是5ml的范圍的唾液收集溶液來(lái)沖洗口腔。證實(shí)特別有利的是，用體積為4ml的唾液收集溶液來(lái)沖洗口腔。不言而喻，用唾液收集溶液沖洗口腔可以重復(fù)多次。在用唾液收集溶液沖洗口腔之前，口腔粘膜例如通過(guò)用水漱口而進(jìn)行清潔。還證實(shí)有利的是，在用唾液收集溶液沖洗口腔之前約30～60分鐘時(shí)間內(nèi)不攝入食物，也不攝入液體，以避免可能歪曲分析。為了還能夠排除這樣的偏差，可以測(cè)定在接收唾液之前在受檢者口腔中存在的指示物或因子的濃度，并且在進(jìn)一步分析中例如通過(guò)借助于校正系數(shù)來(lái)考慮它們。
唾液收集溶液在口腔中停留的時(shí)間選自下限為20秒，優(yōu)選30秒，特別是45秒，和上限為10分鐘，優(yōu)選4分鐘，特別是3分鐘的范圍。證實(shí)特別有利的是，唾液收集溶液在口腔中保留1～2分鐘。
現(xiàn)在，如此獲得的由唾液和唾液收集溶液組成的混合物或其一等分試樣可以直接用于分析，或者離心，并用現(xiàn)有技術(shù)已知的用儀器的、濕法化學(xué)的(nass-chemisch)或免疫學(xué)的分析方法來(lái)測(cè)定上清液。
優(yōu)選地，在容器1中收集唾液-唾液收集溶液混合物，并進(jìn)一步進(jìn)行處理，隨后才定量體積或進(jìn)行分析。
以下列出了唾液收集溶液組成的多個(gè)實(shí)例，在此需注意的是，根據(jù)本發(fā)明的唾液收集溶液并不限于以下實(shí)例。
分別代替檸檬酸二氫鈉或單檸檬酸三堿價(jià)檸檬酸鈉，還可以使用它們的鉀化合物或鈣化合物。
在一個(gè)可選擇的實(shí)施方案中，通過(guò)測(cè)定唾液收集溶液的光密度(消光度)來(lái)確定所加入的染料的量。例如力求消光度的目標(biāo)值為2，通過(guò)加入相應(yīng)量的所希望的染料例如酒石黃來(lái)達(dá)到該目標(biāo)值。唾液收集溶液的光密度的目標(biāo)值選自下限為1.0，優(yōu)選1.2，特別是1.5，和上限為2.8，優(yōu)選2.6，特別是2.4的范圍。
唾液收集溶液中酒石黃的濃度選自下限為1mg/l，優(yōu)選10mg/l，特別是50mg/l，和上限為500mg/l，特別是250mg/l，優(yōu)選100mg/l的范圍。證實(shí)特別有利的是，酒石黃的濃度為50mg/l。
為了測(cè)定光密度(OD)(同義詞為“消光度”)，可以使用選自下限為380nm，優(yōu)選400nm，特別是420nm，和上限為800nm，680nm，特別是560nm的范圍的波長(zhǎng)。優(yōu)選地，在波長(zhǎng)450nm下測(cè)定含有酒石黃的唾液收集溶液的光密度。
如已經(jīng)在上述實(shí)施例中所指出的那樣，在唾液收集溶液的可選擇的實(shí)施方案中，不用染料或除染料之外還添加因子，例如葡萄糖。在唾液收集溶液中葡萄糖的濃度選自下限為1g/l，優(yōu)選2g/l，特別是3g/l，和上限為12g/l，優(yōu)選10g/l，特別是8g/l的范圍。證實(shí)特別有利的是，唾液收集溶液的葡萄糖濃度為4g/l。
因此，根據(jù)在唾液收集溶液組成中所使用的指示物和/或因子，它們不但可以落入醫(yī)藥產(chǎn)品或藥物范疇內(nèi)，而且可以落入食品范疇內(nèi)。
以下借助于在圖1中所示的標(biāo)記詳細(xì)解釋容器1的發(fā)明。
圖1中的容器1由底部部分2和蓋部分3構(gòu)成，分別具有內(nèi)側(cè)4和外側(cè)5，其中底部部分2是近似圓柱形的杯狀物。
底部部分2優(yōu)選由塑料，特別是聚丙烯形成。不言而喻，底部部分2還可以由其它材料，如聚苯乙烯、聚乙烯形成。
蓋部分3同樣由塑料，優(yōu)選由聚乙烯構(gòu)成，并且可以有顏色，或者由有色塑料制成。
此外，在蓋部分3中有一個(gè)空洞6，其是凹槽，其中設(shè)置了傳送裝置7，該傳送裝置由在蓋部分3的外側(cè)5上的用于穿透收集器的裝置8和在蓋部分3的內(nèi)側(cè)4上的具有兩個(gè)端部即上端部10和下端部11的近似管狀的突出物9構(gòu)成。穿透裝置8，例如針，安裝在傳送裝置7朝向蓋部分3的外側(cè)5的那一側(cè)上。在朝向容器1的內(nèi)側(cè)4的那一側(cè)上，形成近似管狀的突出物9，其為圓柱狀的管。在優(yōu)選同樣由塑料形成(特別是由聚丙烯形成)的管狀突出物9和穿透裝置8之間存在螺紋或插塞式連接，以便可以固定在蓋部分3的空洞6中。上述由底部部分和蓋部分構(gòu)成的容器1可從現(xiàn)有技術(shù)中獲知，例如由FirmaGreiner Bio-One，Vacuette-Urinbecher所公開(kāi)。
在容器1的根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案中，管狀突出物9的下端11和底部部分2的內(nèi)側(cè)4的底部之間的距離12選自下限為0.1mm，特別是0.5mm，優(yōu)選1mm，和上限為3mm，特別是2mm，優(yōu)選1.5mm的范圍。經(jīng)證實(shí)，距離12為1mm是特別有利的。管狀突出物9的下端11和容器1的底部部分2的底部之間較小的距離12尤其可用于將即使是小體積或殘留體積的生物液體，例如尿、唾液-唾液收集溶液混合物等經(jīng)管狀突出物9從容器1中除去。由于在分析唾液時(shí)還部分的檢測(cè)傳染性分析物，因此在使用本發(fā)明的容器1時(shí)還有利的是，樣品可以直接轉(zhuǎn)移入新的容器中，而不必由人從容器1中除去。
在容器1的一種進(jìn)一步變化形式中，設(shè)計(jì)安裝一個(gè)過(guò)濾裝置13。該過(guò)濾裝置13安裝在整合的傳送裝置7的范圍內(nèi)，例如可以位于穿透裝置8和傳送裝置7的管狀突出物9之間。在一個(gè)可選擇的實(shí)施方案中，過(guò)濾裝置13與管狀突出物9串接，或者安裝在管狀突出物9的走向上。通過(guò)過(guò)濾裝置13，將唾液-唾液收集溶液混合物的粒狀組分過(guò)濾掉。
過(guò)濾裝置13可以由不同材料組成，例如玻璃棉、棉花、濾紙、泡沫橡膠、再生的纖維素、三乙酸纖維素、尼龍、硝化纖維素、聚二氟乙烯(PVDF)、PVP、聚醚磺酸酯。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，過(guò)濾裝置13由三乙酸纖維素形成。
在過(guò)濾裝置13的一種進(jìn)一步變化形式中，其以膜形式安裝在傳送裝置7的范圍內(nèi)，特別是在穿透裝置8和管狀突出物9之間。
過(guò)濾裝置13的孔徑選自下限為1μm，特別是10μm，優(yōu)選20μm，和上限為100μm，特別是60μm，優(yōu)選50μm的范圍。經(jīng)證實(shí)，孔徑為30μm～40μm是特別有利的。
經(jīng)過(guò)所述穿透裝置，可以將唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移入經(jīng)更新的容器中?，F(xiàn)有技術(shù)已知的抽成真空的收集器適合于此。抽成真空的收集器例如為市場(chǎng)上的Firma Greiner Bio-One的名稱(chēng)為Vacuette或Firma Becton Dickinson的名稱(chēng)為Vacutainer的那些。通過(guò)使用抽成真空的容器，唾液-唾液收集溶液混合物自動(dòng)從容器1轉(zhuǎn)移入收集器中。
根據(jù)本發(fā)明的收集器含有一種由試藥組成的溶液，所述試藥不但賦予溶液保存和穩(wěn)定性質(zhì)，例如通過(guò)苯甲酸鉀、疊氮化鈉和/或Thimerosal，此外能夠使其去溶劑化，例如通過(guò)硫酸銨、氯化鈉和/或氯化鈣。在此引起水合物殼(Hydrathülle)發(fā)生還原，因此改變了蛋白質(zhì)，特別是糖蛋白或蛋白聚糖的表面性質(zhì)。從而可以在離心步驟期間將干擾性的蛋白質(zhì)去除掉，而將會(huì)在隨后的分析中進(jìn)行測(cè)定的其他物質(zhì)則保留在上清液中。
苯甲酸鉀的濃度選自下限為0.05％，特別是0.1％，優(yōu)選1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍，疊氮化鈉或Thimerosal的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為1％，特別是0.5％，優(yōu)選0.2％的范圍，用于去溶劑化的試藥的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
以下舉出了存在于收集器中的溶液的可能組成，其中該列舉對(duì)本發(fā)明不應(yīng)是限制性的。
優(yōu)選地，用包含上述成分選項(xiàng)的溶液噴灑抽成真空的收集器的內(nèi)側(cè)，以便一方面實(shí)現(xiàn)均勻涂覆收集器的內(nèi)側(cè)，另一方面不改變其中含有的試藥的體積以及因而不改變所述試藥的濃度。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，為了噴灑抽成真空的收集器的內(nèi)側(cè)，使用由包含濃度為0.5g/l的Natriumacit和濃度為1.5g/l的硫酸銨的溶液所形成的混合物。
為了噴灑容納能力近似10ml的抽成真空的收集器的內(nèi)側(cè)，所采用的溶液體積選自下限為5μl，優(yōu)選10μl，特別是20μl，和上限為100μl，優(yōu)選80μl，特別是50μl的范圍。經(jīng)證實(shí)，體積為30μl是特別有利的。不言而喻，如果使用具有更小或更大容納體積的收集器，則同樣相應(yīng)地減小或增大溶液的量。
在一種進(jìn)一步變化形式中，還可以對(duì)用溶液進(jìn)行噴灑的收集器的內(nèi)側(cè)進(jìn)行干燥。
可選擇地，所述溶液還以干燥過(guò)的狀態(tài)裝入收集器中，以便從而不影響其中所含有的液體的體積。
對(duì)于正從事該領(lǐng)域工作的技術(shù)人員而言，顯然還可以使用其他試藥，所述試藥同樣可以通過(guò)修飾表面性質(zhì)而有利于離心掉細(xì)胞組分，特別是糖蛋白，并且用其可以實(shí)現(xiàn)保存或穩(wěn)定化。
此類(lèi)根據(jù)本發(fā)明的抽成真空的收集器優(yōu)選用于從容器1中轉(zhuǎn)移唾液-唾液收集溶液混合物。
含有唾液-唾液收集溶液混合物的抽成真空的收集器在離心之前進(jìn)行顛倒、搖動(dòng)和/或渦旋振蕩，從而實(shí)現(xiàn)唾液-唾液收集溶液混合物與在抽成真空的收集器的內(nèi)側(cè)存在的試藥進(jìn)行徹底混合。在抽成真空的收集器中，唾液-唾液收集溶液混合物以大約1,800g離心約10分鐘。這樣選擇離心，即使得粒狀組分在離心過(guò)程中遷移入顆粒狀沉淀中。對(duì)上清液進(jìn)行進(jìn)一步分析。從上清液中可以測(cè)定出許多不同的分析物。
抽成真空的收集器的上清液在離心后一方面可以立即仍在收集器中采用光度法進(jìn)行測(cè)量，或者另一方面該上清液可以轉(zhuǎn)移入新的容器例如比色皿或微量滴定板中。
現(xiàn)在，如此獲得的上清液可以用于后續(xù)的進(jìn)一步分析中，例如在臨床化學(xué)中，或用于側(cè)流免疫測(cè)定法(Lateral Flow Immunoassays)。
為了定量測(cè)定唾液體積，使用根據(jù)本發(fā)明的唾液模擬溶液。唾液模擬溶液是一種含蛋白質(zhì)的溶液，其還被同意義地稱(chēng)為合成或人工唾液。該溶液至少由鈉、鉀或鈣化合物，人血清白蛋白，尿素和水組成。
鈉、鉀或鈣化合物的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為20％，特別是10％，優(yōu)選5％的范圍，人血清白蛋白的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是2.5％，優(yōu)選1％的范圍，以及尿素的濃度選自下限為0.0005％，特別是0.001％，優(yōu)選0.01％，和上限為2％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
在一種進(jìn)一步變化形式中，唾液模擬溶液含有乳鐵蛋白和/或明膠，以便能夠盡可能準(zhǔn)確地模仿天然唾液。為了溶解明膠，可以加熱該唾液模擬溶液，例如加熱到40℃。
乳鐵蛋白的濃度選自下限為0.000001％，特別是0.00001％，優(yōu)選0.0001％，和上限為0.1％，特別是0.01％，優(yōu)選0.005％的范圍，明膠的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
唾液模擬溶液的pH值為下限為5，優(yōu)選5.5，特別是6，和上限為7.5，優(yōu)選7，特別是6.5的值。
用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法對(duì)該溶液進(jìn)行消毒，例如無(wú)菌過(guò)濾，并分成等份。
唾液模擬溶液的可能組成可以從以下實(shí)施例中獲知，在此需說(shuō)明的是，該對(duì)于根據(jù)本發(fā)明的唾液模擬溶液的列舉并不是限定性的。
在本發(fā)明的一種進(jìn)一步變化形式中，可以使用唾液模擬溶液來(lái)制備至少一種校準(zhǔn)溶液。
校準(zhǔn)溶液至少由唾液收集溶液和/或唾液模擬溶液和疊氮化鈉、苯甲酸鉀、山梨酸鉀和/或Thimerosal組成。
優(yōu)選地，校準(zhǔn)溶液由系列稀釋的唾液模擬溶液或唾液收集溶液組成，其中這兩種溶液以近似反比的比例存在。該稀釋系列可以以x(n+1)的濃度梯度提供，其中x是各使用的溶液的ml數(shù)，n是整的自然數(shù)。
在一個(gè)可能的實(shí)施方案中，所述稀釋系列包括五種不同濃度的唾液模擬溶液或唾液收集溶液。
疊氮化鈉、苯甲酸鉀、山梨酸鉀和/或Thimerosal的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
對(duì)于正從事該領(lǐng)域工作的技術(shù)人員而言，顯然可以使用多于或少于五種的校準(zhǔn)溶液，或者在稀釋系列的情況下，可以改變唾液模擬溶液與唾液收集溶液的比例，以便可以定量測(cè)定唾液體積。
以下示例性地列出一些組成以解釋說(shuō)明所述的校準(zhǔn)溶液，但這些也不是對(duì)本發(fā)明的限定。
所獲得的唾液體積的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)很重要，因?yàn)橛纱丝梢杂?jì)算出，在最初取出的生物樣品中存在多少量的以后測(cè)定的分析物。
通過(guò)使用不同的指示物，特別是染料或者因子，還可以相應(yīng)地不同地組合使用校準(zhǔn)溶液。例如，除了含有染料的唾液收集溶液外，還可以使用含有葡萄糖的唾液收集溶液作為校準(zhǔn)溶液。
代替所述的唾液模擬溶液，還可以使用蒸餾水來(lái)制備校準(zhǔn)溶液或其稀釋系列。但是為了達(dá)到唾液體積的更好的可量化性，優(yōu)選唾液模擬溶液。
為了避免污污，用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法對(duì)校準(zhǔn)溶液進(jìn)行消毒。
在一種進(jìn)一步變化形式中，將至少幾種上述成分組合成測(cè)試試劑盒。該測(cè)試試劑盒至少包括唾液收集溶液和用于容納唾液-唾液收集溶液混合物的容器1。該測(cè)試試劑盒可補(bǔ)充有可關(guān)閉的收集器、唾液模擬溶液、校準(zhǔn)溶液和/或?qū)φ杖芤?。任選地，還可以在測(cè)試試劑盒中添加在標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量設(shè)備中進(jìn)行評(píng)價(jià)的微量滴定板或比色皿，和/或使用說(shuō)明書(shū)。
在測(cè)試試劑盒中包含的空白對(duì)照溶液含有水或唾液模擬溶液。該空白對(duì)照溶液必須產(chǎn)生0的消光度。陽(yáng)性對(duì)照由含有染料或唾液收集溶液的水或者唾液模擬溶液形成。陽(yáng)性對(duì)照必須產(chǎn)生大于0的消光度。
圖2顯示了校準(zhǔn)溶液1～5的分光光度計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)直線(xiàn)，其中分別將1ml的校準(zhǔn)溶液1～5滴在1cm比色皿中，并在波長(zhǎng)450nm下在標(biāo)準(zhǔn)分光光度計(jì)中進(jìn)行測(cè)量。X-軸上是每毫升樣品中唾液體積的百分?jǐn)?shù)，其相應(yīng)于染料單位/ml唾液-唾液收集溶液混合物，在Y-軸上記錄了在波長(zhǎng)450nm下的消光度。
通過(guò)與校準(zhǔn)溶液1～5相對(duì)比地比較測(cè)量來(lái)自抽成真空的收集器的唾液-唾液收集溶液混合物在波長(zhǎng)450nm下的光密度，就可以測(cè)定每ml樣品的唾液的體積。
因此，在進(jìn)一步使用來(lái)自抽成真空的收集器的上清液中的唾液的情況下，在測(cè)定特別是定量測(cè)定分析物時(shí)，可以考慮最初獲得的唾液的量。
不言而喻，本發(fā)明不僅可以用于人類(lèi)醫(yī)學(xué)中，而且顯然地，以微小的改變，例如通過(guò)在唾液模擬溶液中使用相應(yīng)于動(dòng)物類(lèi)型的白蛋白，還可以用于獸醫(yī)學(xué)中。
收集唾液的方法和測(cè)試試劑盒或構(gòu)成其的組成部分也可以用于家庭護(hù)理領(lǐng)域中。
實(shí)施例1 在受檢者用2ml具有表中所示組成的唾液收集溶液進(jìn)行漱口之前，用蒸餾水沖洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物殘?jiān)蚱渌蓴_性成分。
唾液收集溶液 在每次用2ml唾液收集溶液進(jìn)行四次歷時(shí)一分鐘的漱口后，將全部的唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為2mm。此外，在容器1中在管狀突出物9的范圍內(nèi)安裝一個(gè)由玻璃棉制成的過(guò)濾裝置13。過(guò)濾裝置13的孔徑為50μm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行渦旋振蕩，并于4℃以2,000g離心30分鐘。丟棄顆粒狀沉淀，并在平板光度計(jì)中在波長(zhǎng)480nm下測(cè)定上清液的光密度，其中將250μl的唾液-唾液收集溶液混合物分別滴在微量滴定板的孔中。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣在波長(zhǎng)480nm下平行地測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～3的光密度。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例1中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于進(jìn)行光度法測(cè)定，作為陽(yáng)性對(duì)照，使用濃度為10U/ml的溶液1，相應(yīng)于濃度為10％，即0.1ml唾液/ml樣品，和濃度為90U/ml的溶液2，相應(yīng)于濃度為90％，即0.9ml唾液/ml樣品。測(cè)定的唾液體積為10ml。
實(shí)施例2 受檢者用6ml具有表中所示組成的唾液收集溶液進(jìn)行漱口。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口5分鐘后，將唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為0.9mm。此外，在容器1中在管狀突出物9的范圍內(nèi)，在穿透裝置8和管狀突出物9之間安裝一個(gè)硝化纖維素膜形式的過(guò)濾裝置13。過(guò)濾裝置13的孔徑為10μm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行搖動(dòng)，并在室溫下以1,500g離心1小時(shí)。丟棄顆粒狀沉淀，并在光度計(jì)中在波長(zhǎng)400nm下測(cè)定上清液的光密度。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣在波長(zhǎng)400nm下平行地測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～11的光密度。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例2中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于進(jìn)行光度法測(cè)定，作為陽(yáng)性對(duì)照，使用濃度為50U/ml的溶液，相應(yīng)于每ml樣品的唾液濃度為50％，即0.5ml唾液/ml樣品。在該示例性實(shí)驗(yàn)中取出的唾液體積為2ml。
實(shí)施例3 在受檢者用5ml具有表中所示組成的唾液收集溶液進(jìn)行漱口之前，用蒸餾水沖洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物殘?jiān)蚱渌蓴_性成分。
唾液收集溶液 在用該唾液收集溶液漱口三分鐘后，將唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為3mm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行顛倒，并在室溫下以2,500g離心3分鐘。丟棄顆粒狀沉淀，并在分光光度計(jì)中在波長(zhǎng)380nm下測(cè)定上清液的光密度。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣在波長(zhǎng)450nm下平行地測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～5的光密度。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例3中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于進(jìn)行酶促光度法測(cè)定，作為陽(yáng)性對(duì)照，使用校準(zhǔn)溶液2和4。測(cè)定的唾液體積為6ml。
實(shí)施例4 在受檢者用3ml具有表中所示組成的唾液收集溶液進(jìn)行漱口之前，用蒸餾水沖洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物殘?jiān)蚱渌蓴_性成分。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口一分鐘后，將唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為1mm。此外，在容器1中在管狀突出物9的范圍內(nèi)安裝一個(gè)由三乙酸纖維素制成的過(guò)濾裝置13。過(guò)濾裝置13的孔徑為30μm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行顛倒，并在室溫下以1,800g離心10分鐘。丟棄顆粒狀沉淀，并在分光光度計(jì)中在波長(zhǎng)450nm下測(cè)定上清液的消光度。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣在波長(zhǎng)450nm下平行地測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～5的消光度。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例4中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于進(jìn)行光度法測(cè)定，使用兩個(gè)對(duì)照。對(duì)照1的濃度為20U/ml(％)，對(duì)照2的濃度為60U/ml(％)，其中1U/ml(％)相應(yīng)于在唾液-唾液收集溶液中有0.01ml唾液。取出的唾液體積為3ml。
實(shí)施例5 在受檢者每次用1.5ml具有表中所示組成的唾液收集溶液漱口至少4次之前，用蒸餾水沖洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物殘?jiān)蚱渌蓴_性成分。
唾液收集溶液 在每次用唾液收集溶液漱口一分鐘后，將唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為2mm。此外，在容器1中在管狀突出物9的范圍內(nèi)安裝一個(gè)由棉花制成的過(guò)濾裝置13。過(guò)濾裝置13的孔徑為70μm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行顛倒，并在4℃下以1,500g離心20分鐘。丟棄顆粒狀沉淀，并在分光光度計(jì)中在波長(zhǎng)420nm下測(cè)定上清液的光密度。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣在波長(zhǎng)420nm下平行地測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～5的光密度。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例5中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于進(jìn)行光度法測(cè)定，作為陰性對(duì)照，使用具有上表所示組成的唾液模擬溶液，和作為陽(yáng)性對(duì)照，使用校準(zhǔn)溶液1。所獲得的唾液體積為7ml。
實(shí)施例6 在受檢者用2ml具有表中所示組成的唾液收集溶液進(jìn)行漱口之前，用蒸餾水沖洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物殘?jiān)蚱渌蓴_性成分。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口一分鐘后，將唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為2mm。此外，在容器1中在管狀突出物9的范圍內(nèi)安裝一個(gè)由硝化纖維素制成的過(guò)濾裝置13。過(guò)濾裝置13的孔徑為40μm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行顛倒，并在室溫下以1,600g離心8分鐘。丟棄顆粒狀沉淀，并通過(guò)Elisa采用免疫學(xué)測(cè)定在上清液中的睪酮。此外，在用唾液收集溶液沖洗口腔之前測(cè)定唾液中的睪酮的濃度，以便考慮生理存在的睪酮。這可以證實(shí)，在開(kāi)始本發(fā)明的方法之前，在唾液中沒(méi)有睪酮。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣通過(guò)Elisa平行地測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～5的睪酮濃度。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例6中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于免疫學(xué)檢測(cè)，使用兩個(gè)對(duì)照。對(duì)照1的濃度為20ng/ml，對(duì)照2的濃度為60ng/ml。取出的唾液體積為3ml。
實(shí)施例7 在受檢者用3ml具有表中所示組成的唾液收集溶液進(jìn)行漱口之前，用蒸餾水沖洗嘴，以便除去可能存在于口腔中的食物殘?jiān)蚱渌蓴_性成分。
唾液收集溶液 在用唾液收集溶液漱口一分鐘后，將唾液-唾液收集溶液混合物收集在容器1中，其中，管狀突出物9與容器1的底部部分2的底部的距離為1mm。此外，在容器1中在管狀突出物9的范圍內(nèi)安裝一個(gè)由三乙酸纖維素制成的過(guò)濾裝置13。過(guò)濾裝置13的孔徑為80μm。
將該唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移到抽成真空的收集器中，該收集器用在下表中列出的溶液進(jìn)行涂覆。
含有試藥的溶液 將其中含有唾液-唾液收集溶液混合物的收集器進(jìn)行顛倒，并在室溫下以1,500g離心15分鐘。丟棄顆粒狀沉淀，并將上清液輸送至HPLC，并通過(guò)安裝在儀器中的軟件來(lái)測(cè)定濃度。
為了能夠進(jìn)行定量，同樣在HPLC中測(cè)量具有下表所示組成的校準(zhǔn)溶液1～5。
校準(zhǔn)溶液 用于制備校準(zhǔn)溶液的唾液收集溶液具有在實(shí)施例7中所示的組成，并且唾液模擬溶液具有在下表中所示的組成。
唾液模擬溶液 對(duì)于HPLC測(cè)定，同樣根據(jù)儀器的規(guī)定來(lái)測(cè)定陽(yáng)性對(duì)照。
實(shí)施例顯示了收集唾液的方法、唾液收集溶液、容器、可關(guān)閉的收集器、唾液模擬溶液、校準(zhǔn)溶液和測(cè)試試劑盒的可能的實(shí)施方案，在此需要注意的是，本發(fā)明并不限于這些具體說(shuō)明的實(shí)施方案本身，而是還可以是各實(shí)施方案彼此間的各種組合，這種變化可能性由于教導(dǎo)了通過(guò)目標(biāo)發(fā)明來(lái)進(jìn)行技術(shù)操作，因此位于正從事該技術(shù)領(lǐng)域的工作的技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。因此，保護(hù)范圍同時(shí)還包括所有可想到的實(shí)施方案，其通過(guò)組合所示的和所描述的實(shí)施方案的各個(gè)細(xì)節(jié)而是可以實(shí)施的。
按規(guī)定，最后要指出的是，為了更好地理解容器的構(gòu)造，這些組件或者說(shuō)容器的組件部分地以不按比例的和/或放大的和/或縮小的方式表示。
該獨(dú)立的創(chuàng)造性解決方案所基于的目的可以由說(shuō)明書(shū)看出。
參考標(biāo)記清單 1容器 2底部部分 3蓋部分 4內(nèi)側(cè) 5外側(cè) 6空洞 7傳送裝置 8穿透裝置 9突出物 10 端部 11 端部 12 距離 13 過(guò)濾裝置
權(quán)利要求
1.從口腔中收集唾液以檢測(cè)分析物的方法，所述方法包括以下步驟(a)清潔口腔，(b)用唾液收集溶液刺激唾液分泌，(c)從口腔中除去唾液-唾液收集溶液混合物，并收集在容器(1)中，(d)將唾液-唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移入可關(guān)閉的收集器中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于，通過(guò)具有刺激味覺(jué)的性質(zhì)的唾液收集溶液，提高了唾液分泌。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，唾液-唾液收集溶液混合物經(jīng)過(guò)整合在容器(1)中或上的傳送裝置(7)而轉(zhuǎn)移入可關(guān)閉的收集器中。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3之一的方法，其特征在于，通過(guò)在容器(1)中的過(guò)濾裝置(13)從唾液-唾液收集溶液混合物中除去個(gè)別組分。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4之一的方法，其特征在于，使用含有具有保存和還原性質(zhì)的溶液的可關(guān)閉的收集器。
6.根據(jù)權(quán)利要求1～5之一的方法，其特征在于，定量測(cè)定唾液的量。
7.根據(jù)權(quán)利要求1～6之一的方法，其特征在于，使用至少一種校準(zhǔn)溶液對(duì)唾液進(jìn)行定量。
8.根據(jù)權(quán)利要求1～7之一的方法，其特征在于，為了定量測(cè)定，比較唾液-唾液收集溶液混合物的指示物和/或因子的濃度和/或消光度與在提取前在唾液中存在的指示物和/或因子的濃度和/或消光度。
9.根據(jù)權(quán)利要求1～8之一的方法，其特征在于，將存在于真空的收集器中的唾液-唾液收集溶液混合物進(jìn)行離心，并任選事先進(jìn)行混合。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～9之一的方法，其特征在于，使用唾液-唾液收集溶液混合物進(jìn)行分析。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其特征在于，所述分析在標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量設(shè)備中進(jìn)行。
12.用于獲得唾液的唾液收集溶液，其特征在于，添加具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑、指示物和/或因子和水。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的唾液收集溶液，其特征在于，所述具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑選自無(wú)機(jī)和/或有機(jī)食用酸和/或其鹽或者它們的混合物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的唾液收集溶液，其特征在于，所述食用酸選自磷酸、乳酸、檸檬酸、抗壞血酸。
15.根據(jù)權(quán)利要求12的唾液收集溶液，其特征在于，所述具有味覺(jué)性質(zhì)的試劑是活性物質(zhì)，例如毛果蕓香堿。
16.根據(jù)權(quán)利要求12～15之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述具有刺激味覺(jué)性質(zhì)的試劑的濃度選自下限為0.0005％，特別是0.01％，優(yōu)選1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍。
17.根據(jù)權(quán)利要求12～16之一的唾液收集溶液，其特征在于，含有染料作為指示物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料是水溶性的。
19.根據(jù)權(quán)利要求17或18的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料引起黃色著色，并且選自酒石黃、姜黃素、藏紅、喹啉黃、日落黃FCF、橙黃S、蟲(chóng)紅、洋紅酸、洋紅、胡蘿卜素或者它們的混合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求17～19之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料選自核黃素、核黃素-5′-磷酸、葉綠素和葉綠酸、葉綠素和葉綠酸的含銅絡(luò)合物、焦糖、簡(jiǎn)單的焦糖、亞硫酸鹽堿液-焦糖、氨-焦糖、亞硫酸銨-焦糖、植物炭，辣椒色素、辣椒黃素、辣椒玉紅素、甜菜紅、甜菜苷、花色素、氧化鐵和氫氧化鐵、偶氮玉紅、二藍(lán)光酸性紅、麗春紅4R、胭脂蟲(chóng)紅A、Allurarot AC、專(zhuān)利藍(lán)V、靛藍(lán)、靛卡紅、亮藍(lán)FCF、綠S、亮黑BN、黑PN、棕HT、蕃茄紅素、β-阿樸-8′-胡蘿卜素醛(C 30)，β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸(C 30)-乙酯、葉黃素、由美拉德化合物構(gòu)成的物質(zhì)和/或它們的混合物。
21.根據(jù)權(quán)利要求17～20之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述染料的濃度選自下限為0.0001％，特別是0.005％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
22.根據(jù)權(quán)利要求12～16之一的唾液收集溶液，其特征在于，添加在醫(yī)藥產(chǎn)品、體外診斷劑和/或藥物意義上的因子。
23.根據(jù)權(quán)利要求12～16之一的唾液收集溶液，其特征在于，摻入可以用常規(guī)使用的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量設(shè)備進(jìn)行測(cè)定的因子。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的唾液收集溶液，其特征在于，添加選自以下的至少一種代表物作為因子膽紅素，醋氨酚，酸性磷酸酶，白蛋白，肌酸酐，醇，堿性磷酸酶，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶，氨，淀粉酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素，非綴合和綴合的，尿素，鈣，碳酸氫鹽，膽堿酯酶，LDL或HDL膽固醇，溶菌酶，淀粉酶，肌酸激酶，肌酸激酶-MB，氯化物，卡馬西平，肌酸酐，C-反應(yīng)性蛋白，直接膽紅素，地高辛，二氧化碳，鐵，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶，葡萄糖，磁性HDL-膽固醇試藥，鉀，乳酸鹽，乳酸脫氫酶，鋰，脂酶，無(wú)機(jī)化合物，例如微量元素，礦物質(zhì)，如鎂、鈉，新生的膽紅素，苯巴比妥，磷，苯妥英，撲米酮，腦脊液蛋白，水楊酸鹽，總膽紅素，茶堿，總鐵結(jié)合容量的試藥，總蛋白質(zhì)，甘油三酯，尿蛋白，尿酸，β-微球蛋白，皮質(zhì)類(lèi)固醇激素或性激素結(jié)合性球蛋白，硫氰酸鹽，運(yùn)鐵蛋白，各種脂質(zhì)，脂蛋白，蛋白質(zhì)，碳水化合物，特別是水溶性碳水化合物，維生素，特別是水溶性維生素，例如B族、C族和F族維生素，無(wú)機(jī)化合物，例如微量元素，礦物質(zhì)，激素，例如醛固酮，雄甾烯二酮，皮質(zhì)醇，二氫表雄甾酮，或其硫酸酯，雌二醇，雌三醇，黃體酮，睪酮，或者它們的混合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求23或24的唾液收集溶液，其特征在于，所述因子的濃度選自下限為0.0000000001％，特別是0.00005％，優(yōu)選0.001％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍。
26.根據(jù)權(quán)利要求12～25之一的唾液收集溶液，其特征在于，添加芳香物質(zhì)和/或增味劑。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的唾液收集溶液，其特征在于，所述芳香物質(zhì)選自糖類(lèi)或糖交換物，例如蔗糖、麥芽糖、果糖，和/或甜味劑，例如糖精、天冬甜素，和/或它們的混合物。
28.根據(jù)權(quán)利要求26或27的唾液收集溶液，其特征在于，所述芳香物質(zhì)和/或增味劑是天然和/或合成來(lái)源的，選自水果，如蘋(píng)果，覆盆子，櫻桃，草莓，檸檬，甜檸檬，橙，甘草，藥草，奎寧，咖啡因，茶素或它們的混合物。
29.根據(jù)權(quán)利要求26～28之一的唾液收集溶液，其特征在于，所述芳香物質(zhì)和/或增味劑的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選1％的范圍。
30.根據(jù)權(quán)利要求12～29之一的唾液收集溶液，其特征在于，pH值選自下限為3，優(yōu)選3.5，特別是4，和上限為6，優(yōu)選5，特別是4.5的范圍。
31.用于生物液體的容器(1)，由底部部分(2)和蓋部分(3)組成，分別具有外側(cè)(5)和內(nèi)側(cè)(4)，其中，在蓋部分(3)中設(shè)置一個(gè)空洞(6)作為凹槽，在其中設(shè)置傳送裝置(7)，該傳送裝置由在蓋部分(3)的外側(cè)(5)上的用于穿透收集器的裝置(8)和在蓋部分(3)的內(nèi)側(cè)(4)上的具有兩個(gè)端部(10、11)的突出物(9)構(gòu)成，其特征在于，在將容器(1)裝配好的狀態(tài)下，更靠近底部部分(2)的端部(11)與底部部分(2)的距離(12)最大為3mm。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的容器(1)，其特征在于，底部部分(2)的距離(12)選自下限為0.1mm，特別是0.5mm，優(yōu)選1mm，和上限為3mm，特別是2mm，優(yōu)選1.5mm的范圍。
33.根據(jù)權(quán)利要求31或32的容器(1)，其特征在于，在傳送裝置(7)之前或之中安裝過(guò)濾裝置(13)。
34.根據(jù)權(quán)利要求33的容器(1)，其特征在于，過(guò)濾裝置(13)由選自以下的材料形成玻璃棉、棉花、濾紙、泡沫橡膠、再生的纖維素、三乙酸纖維素、尼龍、硝化纖維素、聚二氟乙烯(PVDF)、PVP、聚醚磺酸酯。
35.根據(jù)權(quán)利要求33或34的容器(1)，其特征在于，以膜形式安裝過(guò)濾裝置(13)。
36.根據(jù)權(quán)利要求33～35之一的容器(1)，其特征在于，過(guò)濾裝置(13)的孔徑選自下限為1μm，特別是10μm，優(yōu)選20μm，和上限為100μm，特別是60μm，優(yōu)選50μm的范圍。
37.用于容納生物液體例如血液的可關(guān)閉的收集器，其具有朝向生物樣品的內(nèi)側(cè)，其特征在于，所述收集器包含溶液，該溶液含有用于穩(wěn)定化或保存的試藥和用于使生物液體或其組分去溶劑化的試藥。
38.根據(jù)權(quán)利要求37的收集器，其特征在于，所述用于穩(wěn)定化或保存的試藥是苯甲酸鉀、山梨酸鉀、疊氮化鈉和/或Thimerosal。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的收集器，其特征在于，苯甲酸鉀或山梨酸鉀的濃度選自下限為0.05％，特別是0.1％，優(yōu)選1％，和上限為10％，特別是5％，優(yōu)選2％的范圍。
40.根據(jù)權(quán)利要求38的收集器，其特征在于，疊氮化鈉或Thimerosal的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為1％，特別是0.5％，優(yōu)選0.2％的范圍。
41.根據(jù)權(quán)利要求37的收集器，其特征在于，所述用于去溶劑化的試藥是硫酸銨、氯化鈉和/或氯化鈣。
42.根據(jù)權(quán)利要求41的收集器，其特征在于，所述用于去溶劑化的試藥的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
43.根據(jù)權(quán)利要求37～42之一的收集器，其特征在于，所述溶液的體積選自下限為5μl，特別是20μl，優(yōu)選30μl，和上限為500μl，特別是100μl，優(yōu)選50μl的范圍。
44.根據(jù)權(quán)利要求37～43之一的收集器，其特征在于，用所述溶液對(duì)收集器的內(nèi)側(cè)進(jìn)行噴灑，并任選干燥內(nèi)側(cè)。
45.根據(jù)權(quán)利要求37～44之一的收集器，其特征在于，將所述收集器抽成真空。
46.用于模仿生理學(xué)唾液的組成的唾液模擬溶液，其特征在于，含有鈉、鉀或鈣化合物，人血清白蛋白，尿素和水。
47.根據(jù)權(quán)利要求46的唾液模擬溶液，其特征在于，鈉、鉀或鈣化合物的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為20％，特別是10％，優(yōu)選5％的范圍。
48.根據(jù)權(quán)利要求46的唾液模擬溶液，其特征在于，人血清白蛋白的濃度選自下限為0.001％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是2.5％，優(yōu)選1％的范圍。
49.根據(jù)權(quán)利要求46的唾液模擬溶液，其特征在于，尿素的濃度選自下限為0.0005％，特別是0.001％，優(yōu)選0.01％，和上限為2％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
50.根據(jù)權(quán)利要求46～49之一的唾液模擬溶液，其特征在于，含有乳鐵蛋白。
51.根據(jù)權(quán)利要求50的唾液模擬溶液，其特征在于，乳鐵蛋白的濃度選自下限為0.000001％，特別是0.00001％，優(yōu)選0.0001％，和上限為0.1％，特別是0.01％，優(yōu)選0.005％的范圍。
52.根據(jù)權(quán)利要求46～51之一的唾液模擬溶液，其特征在于，含有明膠。
53.根據(jù)權(quán)利要求52的唾液模擬溶液，其特征在于，明膠的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
54.根據(jù)權(quán)利要求46～53之一的唾液模擬溶液，其特征在于，pH值選自下限為5，優(yōu)選5.5，特別是6，和上限為7.5，優(yōu)選7，特別是6.5的范圍。
55.用于定量唾液體積的校準(zhǔn)溶液，其特征在于，包含唾液收集溶液和/或唾液模擬溶液和疊氮化鈉、苯甲酸鉀、山梨酸鉀和/或Thimerosal。
56.根據(jù)權(quán)利要求55的校準(zhǔn)溶液，其特征在于，以近似反比的比例含有唾液收集溶液和唾液模擬溶液。
57.根據(jù)權(quán)利要求55或56的校準(zhǔn)溶液，其特征在于，分別以梯度含有唾液收集溶液和唾液模擬溶液的體積。
58.根據(jù)權(quán)利要求55～57之一的校準(zhǔn)溶液，其特征在于，疊氮化鈉、苯甲酸鉀、山梨酸鉀和/或Thimerosal的濃度選自下限為0.005％，特別是0.01％，優(yōu)選0.1％，和上限為5％，特別是1％，優(yōu)選0.5％的范圍。
59.用于獲得唾液的測(cè)試試劑盒，其特征在于，包括根據(jù)權(quán)利要求12～30之一的唾液收集溶液和根據(jù)權(quán)利要求31～36之一的容器(1)。
60.根據(jù)權(quán)利要求59的測(cè)試試劑盒，其特征在于，包括至少一個(gè)根據(jù)權(quán)利要求37～45之一的可關(guān)閉的收集器。
61.根據(jù)權(quán)利要求59或60的測(cè)試試劑盒，其特征在于，包括根據(jù)權(quán)利要求46～54之一的唾液模擬溶液和/或至少一種根據(jù)權(quán)利要求55～58之一的校準(zhǔn)溶液。
62.根據(jù)權(quán)利要求59～61之一的測(cè)試試劑盒，其特征在于，包括至少一個(gè)微量滴定板、比色皿和/或使用說(shuō)明書(shū)。
63.根據(jù)權(quán)利要求12～30之一的唾液收集溶液用于刺激唾液流出并對(duì)唾液體積進(jìn)行定量的用途。
64.根據(jù)權(quán)利要求31～36之一的容器(1)的用途，所述用途為用于收集生物液體，特別是唾液或唾液-唾液收集溶液混合物，并將其傳送到可關(guān)閉的收集器中。
65.根據(jù)權(quán)利要求37～45之一的可關(guān)閉的收集器的用途，所述用途為用于離心和分析其中所包含的樣品，特別是上清液。
66.根據(jù)權(quán)利要求46～54之一的唾液模擬溶液用于制備對(duì)照和/或校準(zhǔn)溶液的用途。
67.根據(jù)權(quán)利要求55～58之一的校準(zhǔn)溶液用于對(duì)唾液體積進(jìn)行定量的用途。
68.根據(jù)權(quán)利要求59～62之一的測(cè)試試劑盒用于對(duì)唾液體積進(jìn)行定量的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及從口腔中收集唾液以檢測(cè)分析物的方法，所述方法包括以下步驟(a)清潔口腔，(b)用唾液收集溶液刺激唾液分泌，(c)從口腔中除去唾液－唾液收集溶液混合物，并收集在容器(1)中，(d)將唾液－唾液收集溶液混合物轉(zhuǎn)移入可關(guān)閉的收集器中。
文檔編號(hào)A61B10/00GK101065070SQ20058004018
公開(kāi)日2007年10月31日 申請(qǐng)日期2005年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月6日
發(fā)明者F·科納德 申請(qǐng)人:格萊恩比奧-奧內(nèi)有限公司