專利名稱：表面活性物質的醫(yī)藥用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及表面活性物質用于制備預防和/或治療急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的藥物的用途。
背景技術：
急性肺損傷(Acute Lung Injury，ALI)和急性呼吸窘迫綜合征(Acute Respiratory Distress Syndrome，ARDS)是指由嚴重感染、創(chuàng)傷、休克、毒物中毒(包括有毒氣體吸入)等引起的以彌漫性肺實質細胞損傷、肺水腫和微肺不張為病理特征并以嚴重低氧血癥為臨床特點的肺部炎癥和通透性增加的綜合征。二者概念相近，僅嚴重程度不同。繼Ashbaugh于1967年首先提出成人呼吸窘迫癥(AcuteRespiratory Distress in Adults)后，此病在發(fā)病機理、治療等方面的研究取得快速進展，1971年被定名為成人呼吸窘迫綜合征(AdultRespiratory Distress Syndrome，ARDS)，1994年歐美ARDS學會為指導臨床實驗，統(tǒng)一了ARDS的定義和診斷標準，并推薦使用急性呼吸窘迫綜合征(Acute Respiratory Distress Syndrome，ARDS)的名稱。
本發(fā)明人曾以全氟異丁烯(PFIB)吸入肺損傷動物模型進行了對抗肺水腫中藥篩選研究，結果顯示，在10種候篩中成藥中，清開靈注射液對抗PFIB吸入肺水腫效果最好，主要表現(xiàn)在濕肺/體重比顯著降低(清開靈治療組100.6±9.8Vs PFIB中毒對照組141.8±28.6)，顯著改善支氣管肺泡灌洗液中蛋白漏出(清開靈治療組3.51±1.32VsPFIB中毒對照組6.33±3.60mg/ml)，顯著提高存活率(清開靈治療組71.4％Vs PFIB中毒對照組10.7％)。以上作用均具有明顯的劑量效應依賴關系，同時清開靈在其它肺損傷模型中也得到類似的結果(Wang Zhimin，Zhu Xiaoxin，et al.Screening of traditionalChinese remedies for SARS treatment.Cnina Journal of ChineseMateria Medica 2003；28(6)484-487.)。
上述實驗結果提示1)PFIB吸入性肺損傷的發(fā)病機制與其它病因的ARDS具有一定的共性，針對有毒化學物質吸入肺損傷的研究成果可能對其它病因的ARDS有一定的指導意義；2)清開靈可有效對抗PFIB吸入肺損傷屬首次發(fā)現(xiàn)，開辟了中藥防治肺損傷新的研究方向，因此，有必要進一步研究清開靈方中對抗肺水腫的有效組分。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，清開靈方中的陰離子表面活性劑總膽酸可有效對抗肺水腫。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，其它表面活性物質也有此作用。
因此，本發(fā)明涉及表面活性物質用于制備預防和/或治療急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的藥物的用途。
根據(jù)本發(fā)明，其中的表面活性物質選自陰離子表面活性劑和非離子表面活性劑。
根據(jù)本發(fā)明，所述的陰離子表面活性劑選自生理性陰離子表面活性劑，如膽酸、去氧膽酸、異去氧膽酸、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸及它們生理上可接受的堿金屬鹽類，或非生理性表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉。
根據(jù)本發(fā)明，所述的非離子表面活性劑選自吐溫80和吐溫20等。
本發(fā)明所述的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征是指各種誘因的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征。所述的誘因為選自化學有毒物質吸入、酸吸入、反復灌洗、高濃度氧、煙和腐蝕性氣體吸入等的直接誘因和選自創(chuàng)傷、休克、感染、大量輸血、缺血再灌注、胰腺炎、藥物過量、大型外科手術、敗血癥等的間接誘因。
本發(fā)明人借助對清開靈方的拆方研究，進行各組分抗化學性肺水腫效果研究，并通過組方實驗，揭示各有效組分之間的作用關系。結果顯示，清開靈方中的君藥膽酸抗肺水腫效果最好，總膽酸外的其它組分與膽酸配伍沒有協(xié)同作用。
通過對各種膽酸包括膽酸、去氧膽酸、異去氧膽酸、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸的抗肺水腫活性進行比較，發(fā)現(xiàn)它們均具有抑制肺水腫的作用，其中以去氧膽酸和鵝去氧膽酸效果最好。
去氧膽酸對抗PFIB吸入肺水腫具有明顯的劑量依賴關系，在染毒前30min到染毒后8h給藥均有抑制肺水腫效果。
非生理性陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉和非離子表面活性劑也具有對抗PFIB吸入肺水腫作用。


圖1顯示了去氧膽酸不同給藥時間對抗PFIB小鼠肺水腫的效果。
具體實施例方式
下面舉例詳細闡述表面活性劑對ALI/ARDS的預防和/或治療效果。這些實施例僅用于說明本發(fā)明，并不限定本發(fā)明的保護范圍。
實施例1.
清開靈注射液和原料藥由北京中醫(yī)藥大學藥廠提供。PFI購自上海有機所，純度大于98％。
實驗所用的ICR小鼠(雄性，20±1g)購自北京維通利華實驗動物公司。
在有效組分分析研究中，將清開靈拆分為2個部位，部位1清開靈方中非膽酸組分，即板藍根、梔子、金銀花、水牛角、珍珠母和黃芩提取物；部位2總膽酸組分。具體的拆分方法可參見文獻(曹春林主編，中藥制劑匯編，人民衛(wèi)生出版社，1983；984)。其中黃芩甙為0.6％(參考標示含量)，牛膽酸和豬膽酸均為0.4％(參見曹進，徐燕，王義明，羅國安，清開靈注射液中三種膽酸含量測定方法比較，中成藥，2003；25705-708)。
將ICR小鼠隨機分組，按文獻(H.Wang，R.Ding，J.Ruan，B.Yuan，X.Sun，X.Zhang，S.Yu and W.QuPerfluoroisobutylene-Induced Acute Lung Injury and Mortalityare Heralded by Neutrophil Sequestration and Accumulation.J.Occup Health 45331-338(2001)描述的方法，建立PFIB吸入ALI模型，以清開靈全方作陽性對照。給藥時間為染毒后1h，劑量0.4ml/只，i.p.。染毒后24h處死動物，以肺系數(shù)反映肺水腫嚴重程度，觀察清開靈的上述兩個部位對抗肺水腫的效果，結果見表1。
由表1可見，清開靈方中總膽酸和全方抗肺水腫的效果最好，總膽酸外的其它組分沒有作用，由于全方的作用并沒有比總膽酸作用強，說明總膽酸之外的組分與膽酸配伍沒有協(xié)同作用。
表1.清開靈中各組分對抗PFIB吸入小鼠肺水腫效應

兩因素析因分析，*與PFIB組比較，P＜0.05，n＝12。
實施例2各種膽酸的抗肺水腫活性的比較實驗為進一步驗證實施例1中膽酸的活性，以與實施例1同樣的動物模型和同樣的方法比較了各種膽酸包括膽酸、去氧膽酸、異去氧膽酸、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸的抗肺水腫活性。各種膽酸濃度為4mg/ml，給藥時間為染毒后1h，劑量為0.4ml/只，i.p.。染毒后24h處死動物。結果見表2。
由表2可見，所述膽酸均具有抑制肺水腫的作用，其中以去氧膽酸和鵝去氧膽酸效果最好，但觀察到去氧膽酸組24h內(nèi)死亡6只，鵝去氧膽酸組24h內(nèi)死亡4只，死亡動物均未發(fā)現(xiàn)肺水腫，懷疑為藥物毒性所致。
表2.各種膽酸對抗PFIB吸入小鼠肺水腫的效應

Oneway anova tukey test*與PFIB組比較，P＜0.05，n＝10。
實施例3采用抗肺水腫效果最好的去氧膽酸，研究其對抗PFIB吸入肺水腫的劑量效應關系，并在最佳劑量下考察給藥時間效應關系。去氧膽酸濃度為4mg/ml，給藥時間為染毒后1h，i.p.。染毒后24h處死動物，結果見表3。
由表3可見，去氧膽酸對抗PFIB吸入肺水腫具有明顯的劑量依賴關系，但亦觀察到其中0.4ml組24h內(nèi)死亡9只，死亡動物均未發(fā)現(xiàn)肺水腫，懷疑為藥物毒性所致。
以效果較好且觀察期內(nèi)無動物死亡的0.2ml的實驗劑量，觀察到在染毒前30min到染毒后8h給藥均有抑制肺水腫效果，結果見圖1。
表3.去氧膽酸不同給藥劑量對抗PFIB吸入小鼠肺水腫效應

oneway anova Tukey Test*與PFIB組比較，P＜0.05，n＝12。
實施例4為進一步驗證其它表面活性劑的作用，選擇陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉和非離子表面活性劑吐溫80進行觀察。十二烷基硫酸鈉濃度為1.25％，給藥時間為染毒后1h，i.p.。吐溫濃度為40％(v/v)，給藥時間為染毒后1h，i.p.。染毒后24h處死動物。結果見表4和表5。
由表4和表5可見，十二烷基硫酸鈉和較大劑量的吐溫均具有抗肺水腫作用。其中SDS 0.15ml組24h內(nèi)死亡2只；0.3ml組24h內(nèi)死亡4只，吐溫0.4ml組24h內(nèi)死亡1只。死亡動物均未發(fā)現(xiàn)肺水腫，懷疑為藥物毒性所致。
表4.十二烷基硫酸鈉對抗PFIB吸入小鼠肺水腫效果

t Test*與PFIB組比較，P＜0.05 n＝12。
表5.吐溫80對抗PFIB吸入小鼠肺水腫效果

t Test*與PFIB組比較，P＜0.01 n＝12。
權利要求
1.表面活性物質用于制備預防和/或治療急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的藥物的用途。
2.權利要求1的用途，所述的表面活性物質選自陰離子表面活性劑和非離子表面活性劑。
3.權利要求2的用途，所述的陰離子表面活性劑選自生理性陰離子表面活性劑。
4.權利要求3的用途，所述的生理性陰離子表面活性劑選自膽酸、去氧膽酸、異去氧膽酸、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸及它們生理上可接受的堿金屬鹽類。
5.權利要求2的用途，其中的陰離子表面活性劑選自非生理性陰離子表面活性劑。
6.權利要求5的用途，其中的非生理性表面活性劑為十二烷基硫酸鈉。
7.權利要求2的用途、其中的非離子表面活性劑選自吐溫80和吐溫20。
8.權利要求1的用途，其中的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征是指各種誘因的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征。
9.權利要求8的用途，其中的誘因為選自化學有毒物質吸入、酸吸入、反復灌洗、高濃度氧、煙和腐蝕性氣體吸入等的直接誘因，和選自創(chuàng)傷、休克、感染、大量輸血、缺血再灌注、胰腺炎、藥物過量、大型外科手術、敗血癥等的間接誘因。
全文摘要
本發(fā)明涉及膽酸等表面活性物質用于制備預防和/或治療急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的藥物的用途。膽酸等陰離子表面活性劑和吐溫80等非離子表面活性劑可顯著減輕氣血屏障的損傷和肺水腫。
文檔編號A61K31/56GK1853639SQ200510067850
公開日2006年11月1日 申請日期2005年4月28日 優(yōu)先權日2005年4月28日
發(fā)明者丁日高, 阮金秀, 張?zhí)旌?申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所