專利名稱：Mmp表達(dá)抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物，其特征在于，抑制癌細(xì)胞引起的細(xì)胞外基質(zhì)分解酶(MMPmatrix metalloproteinase)的表達(dá)。
背景技術(shù)：
細(xì)胞外基質(zhì)(也稱ECMextracellular matrix)是固定、粘附構(gòu)成多細(xì)胞生物體的各細(xì)胞的不溶性成分的總稱。已知細(xì)胞外基質(zhì)通過(guò)與細(xì)胞結(jié)合而影響細(xì)胞的增殖、分化，作為細(xì)胞外基質(zhì)的主要物質(zhì)，有膠原蛋白、纖連蛋白、層粘連蛋白等。已知細(xì)胞外基質(zhì)可被稱為細(xì)胞外基質(zhì)分解酶(MMPmatrix metalloproteinase，以下稱為“MMP”)的酶分解。MMP是受精卵在反復(fù)進(jìn)行細(xì)胞分裂、同時(shí)生成并分化組織時(shí)表達(dá)的酶，與癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，對(duì)于癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，癌細(xì)胞周圍和血管基底膜的細(xì)胞外基質(zhì)的分解是必要的過(guò)程。

發(fā)明內(nèi)容
所以，通過(guò)抑制MMP的表達(dá)能抑制癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，但抑制MMP表達(dá)的高安全性藥物還沒(méi)有被開(kāi)發(fā)出來(lái)，人們期待著這種藥物的出現(xiàn)。
本申請(qǐng)的發(fā)明人意外發(fā)現(xiàn)四烯甲萘醌(menatetrenone，維生素K-II)抑制MMP的表達(dá)。本發(fā)明的目的是提供具有抑制MMP表達(dá)、抑制癌細(xì)胞增殖效果的高安全性藥物。
本發(fā)明提供(1)一種MMP表達(dá)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分；(2)如權(quán)利要求1所述的MMP表達(dá)抑制劑，其中所述MMP選自MMP-1、MMP-3、MMP-7或MMP-14；(3)一種uPA表達(dá)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分；(4)一種癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分；(5)如權(quán)利要求4所述的癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)抑制劑，其中所述癌是肝癌；(6)一種AP-1的活性抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分；(7)一種Ets-1表達(dá)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分；(8)一種癌治療的預(yù)后改善劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分；(9)一種癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的抑制方法，該方法包括為抑制MMP的表達(dá)而給予有效量的四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物的步驟；(10)一種CDK抑制劑p16、p21或p27的表達(dá)促進(jìn)劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。


圖1(a)是表示四烯甲萘醌的添加量與各種肝癌細(xì)胞增殖的關(guān)系的曲線圖。
圖1(b)是表示利用RT-PCR法研究四烯甲萘醌的添加量與各種肝癌細(xì)胞中CDK抑制劑表達(dá)的關(guān)系的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖1(c)是表示利用Western blot法研究四烯甲萘醌的添加量與各種肝癌細(xì)胞中CDK抑制劑表達(dá)的關(guān)系的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖2是表示向各種肝癌細(xì)胞中添加四烯甲萘醌時(shí)的細(xì)胞周期圖。
圖3是表示向肝癌細(xì)胞中添加四烯甲萘醌時(shí)，對(duì)各種肝癌細(xì)胞浸潤(rùn)的抑制結(jié)果圖。
圖4是表示利用RT-PCR法研究各種肝癌細(xì)胞中添加四烯甲萘醌時(shí)各種浸潤(rùn)相關(guān)因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖5是表示利用Western blot法研究各種肝癌細(xì)胞中添加四烯甲萘醌時(shí)各種浸潤(rùn)相關(guān)因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖6是表示利用凝膠移位試驗(yàn)法研究添加四烯甲萘醌時(shí)轉(zhuǎn)錄因子活化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖7是表示利用RT-PCR法研究肝癌細(xì)胞中添加四烯甲萘醌時(shí)，對(duì)各種MMP啟動(dòng)子活性的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖8是表示利用RT-PCR法研究四烯甲萘醌對(duì)TPA誘導(dǎo)的與癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因表達(dá)的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
圖9是表示利用Western blot法研究四烯甲萘醌對(duì)TPA誘導(dǎo)的與癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白質(zhì)表達(dá)的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式
下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式進(jìn)行說(shuō)明。以下的實(shí)施方式是為了說(shuō)明本發(fā)明的示例，本發(fā)明并不只限定于該實(shí)施方式。只要不脫離本發(fā)明的宗旨，可以以各種方式實(shí)施。
四烯甲萘醌的化學(xué)名為2-甲基-3-四異戊烯基-1，4-萘醌(2-methyl-3-tetraprenyl-1，4-naphthoquinone)。結(jié)構(gòu)式如下。
四烯甲萘醌是黃色結(jié)晶或油狀物質(zhì)，無(wú)嗅無(wú)味，見(jiàn)光易分解。幾乎不溶于水。四烯甲萘醌也稱為維生素K-II，其藥理作用是在凝血因子(prothrombin、VII、IX、X)的蛋白質(zhì)合成過(guò)程中，參與谷氨酸殘基轉(zhuǎn)變成具有生理活性的γ-羧基谷氨酸時(shí)的羧基化反應(yīng)，促進(jìn)肝中正常凝血酶原等的合成，激活生物體的止血機(jī)能，發(fā)揮生理上的止血作用。
在本發(fā)明中，作為“藥理學(xué)上允許的鹽”，例如，可以舉出與無(wú)機(jī)酸形成的鹽、與有機(jī)酸形成的鹽、與無(wú)機(jī)堿形成的鹽、與有機(jī)堿形成的鹽、與酸性或堿性氨基酸形成的鹽等。相對(duì)1分子該化合物，酸、堿以0.1～5分子的適宜比形成鹽。
作為與無(wú)機(jī)酸形成的鹽的優(yōu)選例，例如，可以舉出與鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的鹽；作為與有機(jī)酸形成的鹽的優(yōu)選例，例如，可以舉出與醋酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、酒石酸、檸檬酸、乳酸、硬脂酸、苯甲酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸等形成的鹽。
作為與無(wú)機(jī)堿形成的鹽的優(yōu)選例，例如，可以舉出鈉鹽、鉀鹽等堿金屬鹽，鈣鹽、鎂鹽等堿土金屬鹽，鋁鹽、銨鹽等。另外，作為與有機(jī)堿形成的鹽的優(yōu)選例，例如，可以舉出與二乙胺、二乙醇胺、葡甲胺、N，N-二芐基乙二胺等形成的鹽。
作為與酸性氨基酸形成的鹽的優(yōu)選例，例如，可以舉出與天冬氨酸、谷氨酸等形成的鹽；作為與堿性氨基酸形成的鹽的優(yōu)選例，例如，可以舉出與精氨酸、賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸等形成的鹽。
作為本發(fā)明的藥物有效成分的四烯甲萘醌，可以是無(wú)水物，也可以形成水合物。另外，四烯甲萘醌不只限定以結(jié)晶多型存在，也可以是單一的結(jié)晶型，也可以是多種晶型的混合物。而且，本發(fā)明的四烯甲萘醌在生物體內(nèi)分解產(chǎn)生的代謝物也包含在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)。
本發(fā)明中使用的四烯甲萘醌可以利用已經(jīng)公知的方法制備，作為代表例，可以利用特開(kāi)昭49-55650號(hào)公報(bào)中公開(kāi)的方法容易地制備，除此以外，還可以從合成制造商處容易地購(gòu)得。另外，四烯甲萘醌還可以作為膠囊劑、注射劑等制劑購(gòu)入。本發(fā)明中的藥物可以直接使用四烯甲萘醌，或配合已經(jīng)公知的藥學(xué)上允許的載體等(例如，賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、著色劑、矯味矯嗅劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、pH調(diào)節(jié)劑、防腐劑、抗氧化劑等)、通常用作藥物制劑原料的成分，利用常規(guī)方法制成制劑。根據(jù)需要，還可以配合維生素類、氨基酸等成分。作為制劑的劑型，可以舉出片劑、散劑、細(xì)粒劑、顆粒劑、膠囊劑、糖漿劑、栓劑、注射劑、軟膏劑、敷劑等。
另外，在本發(fā)明中，對(duì)四烯甲萘醌的給藥形式?jīng)]有特別限定，優(yōu)選經(jīng)口給藥。四烯甲萘醌的膠囊劑可以以商品名Kaytwo膠囊劑(衛(wèi)材株式會(huì)社制)、Glakay膠囊劑(衛(wèi)材株式會(huì)社制)獲得，糖漿劑可以以商品名Kaytwo糖漿(衛(wèi)材株式會(huì)社制)獲得，注射劑可以以商品名KaytwoN注射劑(衛(wèi)材株式會(huì)社制)獲得。
四烯甲萘醌的優(yōu)選給藥量為1～500mg/日，優(yōu)選10～200mg/日，更優(yōu)選30～135mg/日。
如上所述，MMP是指基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase)，例如，已知有MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-4、MMP-7、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14等，在本說(shuō)明書(shū)中，并不特別限定于此，其含義代表全部MMP。
另外，所謂uPA(尿激酶纖溶酶激活物，urokinase plasminogen activator)是纖溶酶激活物(PA)中的一種，是一種除了參與纖溶反應(yīng)外、還參與癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的酶。
實(shí)施例下面為表明本發(fā)明的有利效果，列舉了實(shí)施例、參考例，僅用作示例，本發(fā)明在任何情況下都不限定于下面的具體例。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以適當(dāng)變更以下實(shí)施例中記載的條件來(lái)實(shí)施本發(fā)明，所述變更包含在本申請(qǐng)權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
本發(fā)明人為研究四烯甲萘醌對(duì)癌細(xì)胞的(1)增殖和(2)浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移產(chǎn)生怎樣的影響，進(jìn)行了以下試驗(yàn)。
(四烯甲萘醌對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制作用的研究)向肝癌細(xì)胞株HepG2、Huh7、Hep3B、HLE中添加四烯甲萘醌，使?jié)舛确謩e為0M、10-6M、10-5M、10-4M，經(jīng)48小時(shí)后，利用WST試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞增殖的研究。結(jié)果如圖1(a)所示。由圖1(a)可知，添加了四烯甲萘醌的任一個(gè)細(xì)胞與未添加四烯甲萘醌的對(duì)照肝癌細(xì)胞相比，其增殖被濃度依賴性地抑制。
(細(xì)胞周期調(diào)節(jié)基因表達(dá)的研究)為了研究細(xì)胞增殖抑制機(jī)理，著眼于參與細(xì)胞周期進(jìn)行的基因的表達(dá)，利用RT-PCR法和Western blot法解析作為CDK抑制劑的p21、p27、p16的表達(dá)量因四烯甲萘醌的添加而發(fā)生怎樣的變化，上述CDK抑制劑具有阻礙使細(xì)胞周期進(jìn)行的Cyclin dependent kinase(CDK)的作用。
(RT-PCR法)在本試驗(yàn)中，向肝癌細(xì)胞株HepG2、Huh7、Hep3B、HLE中添加四烯甲萘醌，使?jié)舛确謩e為0M、10-6M、10-5M、10-4M，經(jīng)48小時(shí)后收集RNA，用1μg總RNA進(jìn)行RT-PCR，研究p21、p27、p16的表達(dá)。進(jìn)行以GAPDH(Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase)為對(duì)照的RT-PCR。結(jié)果如圖1(b)所示。
(Western blot法)在本試驗(yàn)中，向肝癌細(xì)胞株HepG2、Huh7、Hep3B、HLE中添加四烯甲萘醌，使?jié)舛确謩e為0M、10-6M、10-5M、10-4M后，從以上細(xì)胞中分別提取蛋白質(zhì)，利用SDS-PAGE電泳后，印跡(blot)在PVP膜上，與抗p21、p27抗體一同孵育，利用ECL法研究p21、p27的蛋白質(zhì)表達(dá)。結(jié)果如圖1(c)所示。
由圖1(b)、圖1(c)可知，在HepG2細(xì)胞中，可以觀察到p27和p21的mRNA隨四烯甲萘醌的添加濃度依賴性地增加。在Hep3B細(xì)胞中，可見(jiàn)p21和p16的輕度增加，但未觀察到p27的變化。在Huh7細(xì)胞中，未觀察到上述蛋白的表達(dá)。
(細(xì)胞周期的研究)對(duì)于四烯甲萘醌對(duì)癌細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響，利用流式細(xì)胞儀(FACS)解析添加了四烯甲萘醌的肝癌細(xì)胞的DNA量分布。在本試驗(yàn)中，向肝癌細(xì)胞株HepG2、Huh7、Hep3B、HLE中添加四烯甲萘醌，使?jié)舛确謩e為0M、10-6M、10-5M、10-4M，經(jīng)48小時(shí)后，利用FACS觀察細(xì)胞周期的變化。結(jié)果如圖2所示。由圖2可知，由于四烯甲萘醌的添加，任一個(gè)細(xì)胞中均可觀察到G1期細(xì)胞的比率隨濃度依賴性地增加，G2期細(xì)胞減少。這暗示在肝癌細(xì)胞的細(xì)胞周期中，四烯甲萘醌抑制由G1期進(jìn)入S期的過(guò)程，認(rèn)為四烯甲萘醌通過(guò)誘導(dǎo)G1停滯，從而抑制肝癌細(xì)胞的增殖。
(對(duì)癌細(xì)胞的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的研究)為了研究四烯甲萘醌具有的抑制癌細(xì)胞的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的作用，向肝癌細(xì)胞(HepG2)中添加四烯甲萘醌，使?jié)舛葹?M、10-6M、10-5M、10-4M后，測(cè)定癌細(xì)胞進(jìn)入基質(zhì)凝膠(matrigel)內(nèi)的浸潤(rùn)能力。在本試驗(yàn)中，在雙室的上室涂布基質(zhì)凝膠，在其上使癌細(xì)胞擴(kuò)散，并添加四烯甲萘醌。在下室擴(kuò)散NIH3T3細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞(feeder)。24小時(shí)后在顯微鏡下觀察通過(guò)基質(zhì)凝膠移動(dòng)至上室下表面的細(xì)胞數(shù)。結(jié)果如圖3所示。由圖3可知，四烯甲萘醌的添加濃度越大，移動(dòng)至上室下表面的細(xì)胞數(shù)越少。根據(jù)該結(jié)果可知四烯甲萘醌濃度依賴性地抑制癌細(xì)胞進(jìn)入基質(zhì)凝膠內(nèi)的浸潤(rùn)能力。
利用下述試驗(yàn)研究四烯甲萘醌對(duì)MMP表達(dá)的影響，所述試驗(yàn)為(1)RT-PCR試驗(yàn)，(2)Western blot試驗(yàn)，(3)凝膠移位試驗(yàn)，(4)MMP基因啟動(dòng)子活性試驗(yàn)，以及(5)TPA誘導(dǎo)時(shí)的基因表達(dá)試驗(yàn)。
(RT-PCR法)為研究MMP的表達(dá)，利用RT-PCR法進(jìn)行試驗(yàn)。在本試驗(yàn)中，研究向各種肝癌細(xì)胞(HepG2、Hep3B、Huh7)中添加四烯甲萘醌的情況下各種MMP(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-14(MT1-MMP))、影響MMP表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子Ets-1以及作為細(xì)胞外基質(zhì)受體的β1整聯(lián)蛋白的表達(dá)。結(jié)果如圖4所示。由圖4可知，由肝癌細(xì)胞表達(dá)的MMP種類部分不同，但由于添加四烯甲萘醌，使得MMP-1、MMP-3、MMP-7、MMP-14的mRNA表達(dá)被濃度依賴性地抑制。而且，轉(zhuǎn)錄因子Ets-1的表達(dá)也被濃度依賴性地抑制，β1整聯(lián)蛋白和GAPDH的mRNA的表達(dá)未見(jiàn)變化。
(Western blot法)為研究MMP的表達(dá)，利用Western blot法進(jìn)行試驗(yàn)。在本試驗(yàn)中，研究向各種肝癌細(xì)胞(HepG2、Hep3B、Huh7)中添加四烯甲萘醌的情況下MMP-1和MMP-3的蛋白表達(dá)。結(jié)果如圖5所示。由圖5可知，由于添加四烯甲萘醌，使得MMP-1和MMP-3的蛋白表達(dá)被抑制。
(凝膠移位試驗(yàn))已知MMP與其啟動(dòng)子區(qū)域同樣地具有與轉(zhuǎn)錄因子AP-1、Ets-1、Tcf/Lef等的結(jié)合位點(diǎn)，對(duì)MMP的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)。利用凝膠移位試驗(yàn)，研究調(diào)節(jié)MMP表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子AP-1、Tcf/Lef的結(jié)合活性是否因添加四烯甲萘醌而發(fā)生變化。在本試驗(yàn)中，向肝癌細(xì)胞HepG2中添加四烯甲萘醌，24小時(shí)后提取核蛋白，使其與用32P標(biāo)記的具有AP-1、Tcf/Lef的結(jié)合位點(diǎn)的雙鏈DNA反應(yīng)，然后進(jìn)行凝膠移位試驗(yàn)。結(jié)果如圖6所示。由圖6可知，四烯甲萘醌并未改變Tcf/Lef的結(jié)合活性，但濃度依賴性地抑制了AP-1的結(jié)合活性。與未標(biāo)記的過(guò)量AP-1探針結(jié)合時(shí)，帶(band)隨濃度依賴性地減弱(圖中“10X”、“100X”)，與變異AP-1探針結(jié)合時(shí)，帶未發(fā)生變化(圖中“M”)。另外，利用抗c-fos抗體能觀察到帶的減弱、轉(zhuǎn)移(圖中“S”)。根據(jù)以上的結(jié)果可知四烯甲萘醌特異性抑制AP-1的結(jié)合。
(MMP基因啟動(dòng)子活性試驗(yàn))下面，向肝癌細(xì)胞Huh7中導(dǎo)入MMP-1、MMP-3、MMP-7的啟動(dòng)子報(bào)道基因(promoter reporter gene)，研究四烯甲萘醌對(duì)這些MMP啟動(dòng)子活性的影響。MMP-1、MMP-3、MMP-7的啟動(dòng)子-熒光素酶報(bào)道質(zhì)粒(promoter-luciferase reporter plasmids)可以使用通過(guò)取代Ozaki I，Mizuta T，Zhao G，Zhang H，Yoshimura T，Kawazoe S，EguchiY，Yasutake T，Hisatomi A，Sakai T，Yamamoto K.Induction of multiple matrix metalloproteinase genes in human hepatocellular carcinoma by hepatocyte growth factor via a transcription factor Ets-1.Hepatol Res 2003；27288-300中報(bào)告的MMP啟動(dòng)子-CAT報(bào)道質(zhì)粒的報(bào)道基因部分而制備的物質(zhì)。使用脂質(zhì)轉(zhuǎn)染胺試劑(lipofectamine)向肝癌細(xì)胞Huh7中導(dǎo)入各種MMP-熒光素酶質(zhì)粒，然后以各種濃度添加四烯甲萘醌，48小時(shí)后收集細(xì)胞，測(cè)定熒光素酶活性，研究四烯甲萘醌對(duì)MMP-1、MMP-3、MMP-7基因的啟動(dòng)子活性的影響。
結(jié)果如圖7所示。由圖7可知，由于四烯甲萘醌的添加，使得Huh7細(xì)胞中的MMP-1、MMP-3、MMP-7的啟動(dòng)子活性被濃度依賴性地抑制。特別是MMP-1和MMP-7，活性降低接近50％。由此表明四烯甲萘醌對(duì)MMP的表達(dá)抑制是通過(guò)抑制這些基因啟動(dòng)子活性而實(shí)現(xiàn)的。
(TPA誘導(dǎo)時(shí)基因的表達(dá)試驗(yàn))已知表達(dá)被四烯甲萘醌抑制的MMP和Ets-1與uPA(尿激酶纖溶酶激活物，urokinase plasminogen activator)同樣都是由12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酯(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate，TPA)誘導(dǎo)的基因。為研究四烯甲萘醌是否抑制被TPA活化的基因的表達(dá)，向培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞HepG2中添加TPA，使?jié)舛葹?0nM，再向其中添加四烯甲萘醌，利用RT-PCR法和Western blot法研究由TPA誘導(dǎo)的上述基因的表達(dá)是否受到影響。結(jié)果如圖8和圖9所示。由圖8可知，如果在肝癌細(xì)胞HepG2中添加20nM的TPA，則MMP-1、MMP-3、MMP-7和Ets-1、以及uPA的mRNA的表達(dá)增加。另一方面，作為uPA受體的uPAR和作為uPA抑制劑的PAI不受影響。如果向其中添加四烯甲萘醌，則由TPA誘導(dǎo)的MMP-1、MMP-3、MMP-7、Ets-1以及uPA的mRNA的表達(dá)被濃度依賴性地抑制。而且，由圖9可知，四烯甲萘醌也能夠濃度依賴性地抑制MMP-1和MMP-3的蛋白質(zhì)水平的表達(dá)。該結(jié)果表明，在肝癌細(xì)胞中，四烯甲萘醌抑制由TPA誘導(dǎo)的MMP、Ets-1以及uPA等參與浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的基因的表達(dá)。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性根據(jù)本發(fā)明，四烯甲萘醌能夠抑制轉(zhuǎn)錄因子Ets-1的表達(dá)和AP-1的結(jié)合活性，抑制并防止作為分解細(xì)胞外基質(zhì)的酶的MMP以及作為與MMP一同參與癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的酶的uPA的表達(dá)，從而能抑制癌細(xì)胞的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移。
權(quán)利要求
1.一種MMP表達(dá)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
2.如權(quán)利要求1所述的MMP表達(dá)抑制劑，其中所述MMP選自MMP-1、MMP-3、MMP-7或MMP-14。
3.一種uPA表達(dá)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
4.一種癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
5.如權(quán)利要求4所述的癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)抑制劑，其中所述癌是肝癌。
6.一種AP-1活性抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
7.一種Ets-1表達(dá)抑制劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
8.一種癌治療的預(yù)后改善劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
9.一種癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移抑制方法，該方法包括為抑制MMP的表達(dá)而給予有效量的四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物的步驟。
10.一種CDK抑制劑p16、p21或p27的表達(dá)促進(jìn)劑，其含有四烯甲萘醌或其藥理學(xué)上允許的鹽或這些化合物的水合物作為有效成分。
全文摘要
細(xì)胞外基質(zhì)分解酶(MMP)是受精卵在反復(fù)進(jìn)行細(xì)胞分裂、同時(shí)生成并分化組織時(shí)表達(dá)的酶，與癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，對(duì)于癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，癌細(xì)胞周圍和血管基底膜的細(xì)胞外基質(zhì)的分解是必要的過(guò)程。通過(guò)抑制MMP的表達(dá)能抑制癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，但抑制MMP表達(dá)的高安全性藥物還沒(méi)有被開(kāi)發(fā)。本發(fā)明提供抑制癌細(xì)胞引起的MMP表達(dá)的制劑。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1777413SQ200480010509
公開(kāi)日2006年5月24日 申請(qǐng)日期2004年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月23日
發(fā)明者尾崎巖太, 張 浩, 水田敏彥, 山本匡介 申請(qǐng)人:衛(wèi)材株式會(huì)社