專利名稱：女真子總?cè)扑崽崛∥锏闹苽浼捌鋺?yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物女真子提取物的制備方法和應(yīng)用，特別是涉及女真子總?cè)扑崽岢鑫锏闹苽浜推湓谏a(chǎn)用于治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
女真子是木犀科植物女真子(Ligustrum Lucidum Ait)的干燥成熟果實(shí)。中藥女真子主要含有齊墩果酸、乙酰齊墩果酸，熊果酸，烏索酸等有機(jī)酸，多種微量元素以及女真子多糖等。已知女真子或其提取物具有促進(jìn)細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)、升高白細(xì)胞、降低血脂以及抗炎和抗衰老等作用，臨床上常用于治療呼吸道感染、高血壓病、黃膽性肝炎，以及作為抗腫瘤藥物輔助治療劑。雖然98902338、98106801、00129559、01106278、00100034、00107643、00103135、01111062、02122560、02139449、03121089以及03109307號等中國專利申請均分別描述了可以使用包括女真子在內(nèi)的天然中藥組合物治療糖尿病，但迄今尚未見使用女真子提取物特別是女真子總?cè)扑崽崛∥镏委熁蝾A(yù)防糖尿病的報道。
另一方面，雖然現(xiàn)有技術(shù)中已報道了制備女真子總?cè)扑崽崛∥锏姆椒?參見中國專利申請98104228.8號)，但該方法的提取步驟繁復(fù)(例如包括酸化、水洗、堿煮脫色、再堿化和抽濾等較多步驟)，不利于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。因此，有必要對女真子總?cè)扑崽崛∥锏闹苽浠蛏a(chǎn)方法作進(jìn)一步的改進(jìn)。
發(fā)明目的本發(fā)明的一個目的是提供一種制備女真子總?cè)扑崽崛∥锏姆椒?，該方法包括首先將女真子藥材用乙醇回流提?次，合并提取物并放置過夜后，回收濾液并將其濃縮至相對密度為1.25-1.35，然后向濃縮的稠膏內(nèi)加入1-2倍體積的水，混勻并低溫下放置24-48小時，然后過濾殘留物并烘干，粉碎后即得到所需的提取物。
根據(jù)本發(fā)明方法的一個優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說的乙醇是濃度為90-96(V/V)的乙醇水溶液。
本發(fā)明的一個目的是提供女真子總?cè)扑崽崛∥镌谏a(chǎn)治療糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。
發(fā)明的詳細(xì)內(nèi)容本發(fā)明涉及天然藥物的應(yīng)用，特別是涉及女真子總?cè)扑嵩谏a(chǎn)用于治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及生產(chǎn)女真子總?cè)扑岬姆椒ā?br> 中藥女真子主要分布于中國的華北地區(qū)，其藥性平和，具有滋陰補(bǔ)肝腎、烏發(fā)明目等功效，很久以來民間就將其用于治療肝腎陰虛、頭暈耳鳴和腰腿酸痛。二十世紀(jì)八十年代以來，許多研究者利用現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)手段，對女真子的藥化和藥理進(jìn)行了深入的研究，并取得了有價值的成果。本發(fā)明人基于長期從事中藥現(xiàn)代化研究的經(jīng)驗(yàn)，首先全面改進(jìn)了中藥女真子三萜酸的分離和提取方法，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究并發(fā)現(xiàn)了這些三萜酸提取物在降低血糖、改善胰島功能中的作用及其機(jī)理，進(jìn)而完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種制備女真子三萜酸提取物的方法，該方法包括首先將女真子藥材用乙醇回流提取3次，合并提取物并放置過夜后，回收濾液并濃縮止相對密度為1.25-1.35，向濃縮的粘稠膏狀物內(nèi)加入1-2倍體積的水，混勻并低溫下放置24-48小時，然后過濾殘留物并烘干，粉碎后即得到所需的提取物。
簡單地說，本發(fā)明的方法包括稱取清洗并粉碎的女真子藥材后，加入2-4倍體積過量的90-98％乙醇水溶液加熱回流3次，每次0.5-2小時。過濾合并的回流液后，收集上清并將其濃縮成相對密度約為1.25-1.35的粘稠膏狀物。然后趁熱向其中加入1-2倍體積的沸水(約90-100℃)，混勻后低溫(0-4℃)下放置24-48小時。然后棄去上清并常規(guī)過濾殘留物，收集沉淀物并烘干(約80℃)。常規(guī)機(jī)械粉碎并過篩(約80目)后，即得到本發(fā)明所需的女真子三萜酸提取物(參見實(shí)施例1)。
根據(jù)本發(fā)明方法的一個優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說的女真子三萜酸提取物的回收率約為4.5％。
本發(fā)明方法的主要技術(shù)進(jìn)步在于，在不降低所需產(chǎn)物的回收率和純度的前提下，大大簡化了女真子三萜酸的提取步驟，并且整個方法中完全不使用層析步驟，也不使用對操作者身體和環(huán)境可能造成損害的有機(jī)溶劑。我們的分析結(jié)果顯示，按本發(fā)明方法制備的女真子三萜酸提取物的純度約為70-80％；女真子三萜酸提取物的總提取率約為4.5％。其中以總?cè)扑釣橹笜?biāo)，得率約為52％；以齊墩果酸為指標(biāo)，得率約為20％(有關(guān)檢測的方法學(xué)參見呂曙華等，藥物分析雜志，13(5)291，1993)。
本發(fā)明人在研究女真子總?cè)扑岬纳飳W(xué)活性的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥锍哂幸阎亩喾N生物學(xué)活性外，還可有效地改善胰島功能，顯著地降低實(shí)驗(yàn)性高血糖動物模型的血糖水平(見實(shí)施例2和3)。
因此，本發(fā)明的再一個目的是提供按前述方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥镌谏a(chǎn)用于預(yù)防和治療糖尿病，特別是II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
糖尿病是一種由于胰島素分泌不足引起的代謝性疾病。在中國，糖尿病和糖耐量低下的患病率逐年升高，近年增長速度加快且患者絕對數(shù)量龐大，其流行形勢非常嚴(yán)峻。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，近年來中國糖尿病患病率已從1979年的0.67％，上升到1995年的3.21％。在不到二十年的時間里，就從小于3％的低患病率國家，迅速跨入糖尿病中等患病率國家的行列。據(jù)估計，目前中國二十歲以上的糖尿病患者超過2000萬，糖耐量低減病人不低于3000萬。據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測，到2005年，中國糖尿病人數(shù)將達(dá)到5000萬。中國已成為僅次于印度的亞洲第二大糖尿病國家。
目前，雖然已有許多具有不同作用機(jī)理的化學(xué)合成的糖尿病治療藥物應(yīng)用于臨床，但這些藥物不僅療效局限，而且價格十分昂貴。由于許多中草藥藥物的付作用相對較低，而且價格比較便宜，所以目前也常常被用于糖尿病和其并發(fā)癥的治療。
II型糖尿病是一種異質(zhì)性疾病，幾乎所有病例均與胰島素抵抗(IR)相關(guān)。IR經(jīng)常與其它幾種主要心血管疾病危險因素例如腹型肥胖、高血壓、脂質(zhì)異常等同時存在，構(gòu)成所謂的IR綜合征(IRS)或代謝綜合征。這些心血管疾病危險因素的聚集(包括IR)，在II型糖尿病患者心血管疾病發(fā)病中具有重要作用。我們的實(shí)驗(yàn)研究顯示，按本方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥锊粌H具有降低血糖活性，而且還具有免疫增強(qiáng)、降低血脂、保護(hù)肝功能和抗炎等藥理學(xué)作用。投用按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥铮粌H可使高血糖動物(大鼠)模型的血糖含量明顯降低，而且還可顯著降低模型動物的血脂特別是甘油三酯水平(參見實(shí)施例2和3)。另外，我們的一般藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，按照本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥锱c催眠藥物戊巴比妥鈉既無協(xié)同也無拮抗作用，對實(shí)驗(yàn)動物(小鼠)的自主活動和協(xié)調(diào)運(yùn)動也無任何影響。實(shí)驗(yàn)還表明，按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥飳φＢ樽硐碌膭游?犬)的呼吸頻率、動脈血壓、心率和心電圖也無任何影響。而且對正常動物(大鼠)的糖耐量和血糖含量幾乎沒有影響(參見實(shí)施例4)。因此，使用按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥锛捌渌幬锝M合物治療糖尿病應(yīng)是十分有利的。
可以按照制藥工業(yè)中已知的方法將本發(fā)明的藥物組合物制成片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、栓劑以及溶液劑和懸浮劑。其中優(yōu)選的是適于經(jīng)胃腸道途徑給藥的膠囊劑和片劑。在制備適于口服給藥的膠囊劑、片劑、丸劑和顆粒劑時，可以使用蔗糖、乳糖、半乳糖、玉米淀粉、明膠、微晶纖維素、羧甲基纖維素等作為載體或賦形劑。
另外，也可以使用制藥工業(yè)中已知的方法和輔助成分將本發(fā)明的藥物組合物制成適于胃腸道外途徑給藥的溶液劑。為了制備適于胃腸道外途徑給藥的溶液劑，可以使用蒸餾水、注射用水、等滲氯化鈉溶液或葡萄糖溶液，或者低濃度(例如1-100mM)磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)作為載體或稀釋劑?？梢栽谶@些胃腸道外給藥的制劑中加入一種或多種其他輔助成分或添加劑，例如可使用抗壞血酸作為抗氧化劑，使用苯甲酸鈉等作為防腐劑。在這些劑型的制劑中，還可以含有其他適用的增溶劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、著色劑、分散劑或表面活性劑。
一般說來，本發(fā)明藥物組合物的口服給藥劑量為0.01至10mg/kg體重/天，較好為0.1至5mg/kg體重/天，最好為1至3mg/kg體重/天。然而，更確切的用藥劑量還應(yīng)根據(jù)待治療疾病或病理狀態(tài)的性質(zhì)、嚴(yán)重程度、病人的年齡、體重、待治療病人對所用藥物的敏感性及給藥方式等因素由臨床醫(yī)生確定。
本發(fā)明的藥物組合物除含有按本發(fā)明制備的女真子總?cè)扑崽崛∥镒鳛榛净钚猿煞滞?，還可含有一種或多種具有相同或相似作用的其它天然或化學(xué)合成的活性成分。其中天然來源的其它活性成分包括但不只限于丹參、葛根、降香、川芎、紅花、澤瀉等或它們的有效部位或提取物。
如前所述，本發(fā)明的藥物組合物不僅可有效地治療II型糖尿病，而且可用于治療糖尿病性閉塞性動脈硬化和肢端壞疽、糖尿病性視網(wǎng)膜炎及糖尿病性腎病等糖尿病并發(fā)癥。
實(shí)施例1女真子總?cè)扑崽崛∥锏闹苽浔緦?shí)驗(yàn)例舉描述女真子總?cè)扑崽崛∥锏膶?shí)驗(yàn)室制備方法。
稱取清洗干凈并粉碎的中藥女真子20Kg，加入2.5倍體積的水加熱回流2-3小時。然后將回流提取步驟再重復(fù)兩次，時間分別為1-2小時和0.5-1小時。合并回流提取液并室溫放置過夜。然后收集上清并常規(guī)過濾沉淀部分，將所得濾液并入收集的上清中。減壓蒸發(fā)除去乙醇并將殘留物濃縮的相對密度約為1.27-1.35(50℃)的膏狀物。然后立即向其中加入約1.5-2倍體積的沸水(約90-100℃)，混勻后于低溫(0-4℃)下放置24-48小時。然后，棄去上清液，收集并常規(guī)過濾殘留物。于大約80℃烘箱中干燥并粉碎后過80目網(wǎng)篩，得到約1000g所需的女真子總?cè)扑崽崛∥锔稍锓勰?br> 實(shí)施例2女真子總?cè)扑崽崛∥飳λ穆然颊T導(dǎo)的高血糖大鼠模型血糖含量的影響本實(shí)施例舉例描述按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥飳λ穆然妓赂哐谴笫竽Ｐ偷难呛康挠绊憽?br> (1)材料和方法取平均體重210克的雌性大鼠(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心)60只，常規(guī)適應(yīng)性飼養(yǎng)2天后將動物隨機(jī)分為6組，每組10只(1)空白對照組，(2)模型組；(3)-(5)投用大、中、小三個不同劑量(0.1、0.2、0.3g/kg)總?cè)扑崽崛∥锏膶?shí)驗(yàn)治療組；(6)投用對照藥物降糖靈(鹽酸苯乙雙胍片)(山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所制藥廠生產(chǎn))(0.1g/kg)的降糖靈組(陽性對照組)。除空白對照組外，其他各組動物經(jīng)尾靜脈注射2％四氯化碳溶液(55mg/kg)造成大鼠高血糖模型，72小時后，選擇血糖值350-400mg/dl的動物用于試驗(yàn)。對各組動物灌胃給藥，每天一次，連續(xù)給藥14天。實(shí)驗(yàn)期間，分別于給藥后第7和14天斷尾采血，使用血糖檢測儀(Refloux S)檢測動物的空腹血糖水平，并將實(shí)測值與給藥前的測定值相比較，同時進(jìn)行組間比較。
另外，給藥后第14天，經(jīng)腹腔主動脈采取血樣，使用FT-630G全自動生化γ計數(shù)儀以放射免疫法檢測動物的血清胰島素水平，同時使用全自動生化分析儀(OLYMPUS-AU.600型)以免疫比濁法檢測動物的血清糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白、膽固醇和甘油三酯水平，并分別進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理(t檢驗(yàn))。結(jié)果如下列1-4所示，其中所有數(shù)據(jù)均以每組10只動物的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(a)對高血糖大鼠模型血糖水平的影響表1對四氯化碳誘導(dǎo)的高血糖大鼠模型血糖含量的影響(X±SD)

注與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；自身比較+P＜0.05，++P＜0.01.
由表1所示的結(jié)果可以看出，靜脈注射2％四氯化碳溶液(55mg/kg)72小時后，動物血糖升高，呈持續(xù)高血糖狀態(tài)，與對照組比較有顯著差異(p＜0.01)。投用陽性藥物降糖靈后第7和14天動物血糖分別下降27.85％和32.73％，與模型組比較差異顯著(p＜0.01)。給藥后第7天，總?cè)扑崽崛∥锎髣┝拷M動物血糖下降19.12％，第14天下降24.51％，與模型組比較差異顯著(p＜0.01)。給藥后第7和14天，中劑量組動物血糖分別下降15.59％和17.09％，與模型組比較差異顯著(p＜0.01，p＜0.05)。給藥后第7天，小劑量組動物血糖下降9.41％，與模型組比較差異顯著；給藥后第14天，小劑量組動物血糖下降17.18％，與模型組比較有明顯差異(p＜0.01)。這些結(jié)果表明，按本發(fā)明方法生產(chǎn)的女真子總?cè)扑崽崛∥锞哂惺置鞔_的降低血糖作用。
(b)對高血糖大鼠模型血清胰島素水平的影響表2對四氯化碳誘導(dǎo)的高血糖大鼠模型的血清胰島素水平的影響(X±SD)

注與對照組比較##P＜0.01.
由表2所示的結(jié)果可以看出，與對照組相比較，靜脈注射四氯化碳后，動物血清中的胰島素水平明顯下降(p＜0.01)。而與模型組比較，接受不同劑量總?cè)扑崽崛∥锏娜M動物和接受已知降糖藥物降糖靈的動物的血清胰島素水平則無明顯改變(p＞0.05)。
(c)對高血糖大鼠模型血清膽固醇和甘油三酯含量的影響表3對四氯化碳誘導(dǎo)的高血糖大鼠模型的血清膽固醇和甘油三酯含量的影響(X±SD)

注與對照組比較##P＜0.01，與模型組比較**P＜0.01。
由表3所示的結(jié)果可以看出，與對照組比較，靜脈注射四氯化碳后，動物血清甘油三酯含量明顯升高(p＜0.01)。給動物服用總?cè)扑崽崛∥?0.1和0.2g/kg)后可使其血清甘油三酯水平明顯下降(p＜0.01)，但血清膽固醇含量則無明顯改變(p＞0.05)。
(d)對高血糖大鼠模型血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白水平的影響表4對高血糖大鼠模型的血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白水平的影響(X±SD)

注與對照組比較##P＜0.01.
糖化血紅蛋白是血紅蛋白生成后與糖類物質(zhì)經(jīng)非酶促途徑結(jié)合形成的代謝產(chǎn)物，其合成速率與紅細(xì)胞所處環(huán)境中糖的濃度成正比。因此，糖化血紅蛋白可反映檢測前1-2個月的平均血糖水平。而糖化血清蛋白水平則能夠反映過去1-2周內(nèi)的平均血糖水平。本實(shí)驗(yàn)中，高血糖模型動物的血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白水平均明顯高于對照組(p＜0.01)。但與對照組相比，給動物投用本發(fā)明制備的總?cè)扑崽崛∥?0.1、0.2和0.4g/kg)以及對照藥物降糖靈(0.1g/kg)后，對動物血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白含量均無明顯影響(p＞0.05)。
(3)結(jié)論上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果清楚地表明，按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥飳λ穆然颊T導(dǎo)的高血糖大鼠模型的血糖具有顯著降低作用，用藥兩周后，動物血糖下降達(dá)24.51％。同時，按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥锟墒箘游锏难甯视腿ニ矫黠@降低。然而，投用女真子總?cè)扑崽崛∥飳游锏难逄腔t蛋白和糖化血清蛋白水平，以及胰島素分泌則無明顯影響。
實(shí)施例3女真子總?cè)扑崽崛∥飳δI上腺素誘導(dǎo)的高血糖大鼠模型血糖含量的影響本實(shí)施例舉例描述按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥飳δI上腺素誘導(dǎo)的高血糖大鼠模型的血糖含量的影響。
取平均體重210克的雌性大鼠(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心)50只，常規(guī)適應(yīng)性飼養(yǎng)2天后隨機(jī)分為5組，每組10只(1)對照組；(2)-(4)投用大、中、小三個不同劑量(0.1、0.2、0.3g/kg)總?cè)扑崽崛∥锏膶?shí)驗(yàn)治療組；(5)投用對照藥物降糖靈(鹽酸苯乙雙胍片)(山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所制藥廠生產(chǎn))(0.1g/kg)的降糖靈組(陽性對照組)。對各組動物灌胃給藥，每天一次，連續(xù)給藥7天。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日禁食10小時并檢測空腹血糖。末次給藥后1小時，給各組動皮下注射0.1％腎上腺素(0.25mg/kg)造成大鼠高血糖模型。于注射后40、90和135分鐘斷尾采血，使用血糖檢測儀(Refloux S)檢測動物的血糖值，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析(t檢驗(yàn))。結(jié)果如下列表5所示。
表5對腎上腺素誘導(dǎo)的高血糖大鼠模型血糖水平的影響(X±SD)

注與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01.
由表5所示的結(jié)果可以看出，對照組動物于注射腎上腺素后40分鐘血糖逐漸升高并于90分鐘達(dá)到最高值，形成腎上腺素性高血糖狀態(tài)。投用0.4、0.2和0.1mg/kg總?cè)扑崽崛∥锖螅謩e40和90分鐘出現(xiàn)血糖明顯下降，并且與對照組比較差異十分顯著(p＜0.01)。
腎上腺素能夠促進(jìn)肝臟及肌肉的糖原分解。肌肉中糖酵解生成的乳酸經(jīng)三羧酸循環(huán)異生葡萄糖，同時激活丙酮酸羧化酶，使丙酮酸轉(zhuǎn)化成烯醇式丙酮酸，加速糖異生，導(dǎo)致血糖升高。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥锬軌驈?qiáng)有力地對抗腎上腺素通過上述機(jī)制誘導(dǎo)的高血糖癥。
實(shí)施例4女真子總?cè)扑崽崛∥飳φ４笫笱撬降挠绊懕緦?shí)施例舉例說明按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥飳φ４笫笱撬降挠绊憽?br> 平均體重220克的雌性大鼠(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心)50只，常規(guī)適應(yīng)性飼養(yǎng)2天后隨機(jī)分為5組，每組10只(1)陰性對照組；(2)-(4)投用大、中、小三個不同劑量(0.1、0.2、0.3g/kg)總?cè)扑崽崛∥锏膶?shí)驗(yàn)治療組；(5)投用對照藥物優(yōu)降糖(北京雙橋制藥公司生產(chǎn))(0.05g/kg)的優(yōu)降糖組(陽性對照組)。首先測定用藥前動物的血糖值，然后按上述劑量分別給藥，連續(xù)給藥7天。末次給藥后禁食10小時，然后斷尾采血并使用血糖檢測儀(Refloux S)檢測動物的血糖值。結(jié)果如下列表6所示。
表6對正常大鼠模型血糖水平的影響(X±SD)

注與對照組比較##P＜0.01；自身比較**P＜0.01.
由表6所示的數(shù)據(jù)可以看出，給正常動物投用按本發(fā)明方法制備的女真子總?cè)扑崽崛∥?，對動物的血糖水平?jīng)]有明顯影響。
權(quán)利要求
1.一種制備女真子總?cè)扑崽崛∥锏姆椒?，該方法包括首先將女真子藥材用乙醇回流提?次，合并提取物并放置過夜后，回收濾液并將其濃縮至相對密度為1.25-1.35，然后向濃縮的稠膏內(nèi)加入1-2倍體積的水，混勻并低溫下放置24-48小時，然后過濾殘留物并烘干，粉碎后即得到所需的提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說的乙醇是濃度為90-96(V/V)的乙醇水溶液。
3.女真子總?cè)扑崽崛∥镌谏a(chǎn)治療糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然藥物女真子提取物的制備方法和應(yīng)用，特別是涉及女真子總?cè)扑崽岢鑫锏闹苽浜推湓谏a(chǎn)用于治療糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號A61K31/7028GK1670030SQ200410010730
公開日2005年9月21日 申請日期2004年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月16日
發(fā)明者霍成斌 申請人:霍成斌