專利名稱：作為mch1拮抗劑的仲氨基苯胺哌啶及其用途的制作方法
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背景技術(shù)：
黑色素聚集激素(MCH)為最初分離自鮭魚(硬骨魚)垂體的一種環(huán)肽(Kawauchi等，1983)。在魚體內(nèi)，這種17個氨基酸肽引起黑色素在黑色素細(xì)胞內(nèi)聚集并且抑制ACTH的釋放，作為α-MSH的功能性拮抗劑起作用。哺乳動物MCH(19個氨基酸)大量儲存在大鼠、小鼠和人之間，呈現(xiàn)100％氨基酸同源性，但它的生理機(jī)能不是很清楚。據(jù)報道MCH參與包括飲食、水平衡、能量代謝、一般覺醒/注意狀態(tài)、記憶和認(rèn)知功能及精神疾病在內(nèi)的各種過程(有關(guān)綜述，參見Baker，1991；Baker，1994；Nahon，1994；Knigge等，1996)。最新Nature出版物(Qu等，1996)支持它在飲食或者體重調(diào)節(jié)中的作用，證實與ob/+小鼠相比，MCH在ob/ob小鼠的下丘腦中過量表達(dá)，并且證實禁食進(jìn)一步增加了禁食期間肥胖和正常小鼠兩者的MCH mRNA水平。當(dāng)將MCH注射到側(cè)腦室中時，MCH也刺激正常大鼠的飲食(Rossi等，1997)。
據(jù)報道MCH也功能性拮抗α-MSH的行為作用(Miller等，1993；Gonzalez等，1996；Sanchez等，1997)；另外，也顯示應(yīng)激能增加POMCmRNA水平，同時減少MCH前體預(yù)處理MCH(ppMCH)mRNA水平(Presse等，1992)。因此，MCH可以用作參與應(yīng)激反應(yīng)以及調(diào)節(jié)飲食和性活動的整合神經(jīng)肽(Baker，1991；Knigge等，1996)。
現(xiàn)確信MCH的生物作用通過特異性受體介導(dǎo)。據(jù)報道，氚化的配體([3H]-MCH)對腦膜呈現(xiàn)特異性結(jié)合，但不能用于飽和分析法，因而既不能測定親和性也不能測定Bmax(Drozdz和Eberle，1995)。酪氨酸在13位的放射性碘化導(dǎo)致配體生物活性意想不到地減少(參見Drozdz和Eberle，1995)。反之，MCH類似物[Phe13，Tyr19]-MCH的放射性碘化是成功的(Drozdz等，1995)；配體保留生物活性并且對包括小鼠黑素瘤(B16-F1、G4F和G4F-7)、PC12和COS細(xì)胞等種細(xì)胞系呈現(xiàn)特異性結(jié)合。在G4F-7細(xì)胞中，KD＝0.118nM，Bmax～1100位點/細(xì)胞。重要的是，這一結(jié)合不受α-MSH抑制，但卻被大鼠ANF微弱抑制(Ki＝116nM對天然MCH 12nM)(Drozdz等，1995)。最近報道了在轉(zhuǎn)化形成的角化細(xì)胞(Burgaud等，1997)和黑素瘤細(xì)胞(Drozdz等，1998)中的特異性MCH結(jié)合，其中光交聯(lián)研究提示所述受體為具有表觀分子量為45-50K道爾頓的膜蛋白，它們與GPCR超家族的受體的分子量范圍相適配。還沒有關(guān)于采用該配體的MCH受體定位的放射自顯影研究的報道。
MCH肽的定位和生物活性提示MCH受體活性的調(diào)節(jié)可以用于多種治療用途。MCH在飲食中的作用是其潛在臨床用途的最佳特征。MCH在參與調(diào)節(jié)口渴和饑餓的腦區(qū)域的下丘腦外側(cè)中表達(dá)(Grillon等，1997)；最近已顯示食欲素(orexins)A和B(它們都是有效的開胃藥物)在下丘腦外側(cè)中具有與MCH非常相似的定位(Sakurai等，1998)。禁食24小時后，在大鼠體內(nèi)這個腦區(qū)域中的MCH mRNA水平增加(Hervé和Fellman，1997)；注射胰島素后，觀察到MCH免疫反應(yīng)性核周質(zhì)和纖維的量和染色亮度顯著增加，同時MCH mRNA水平顯著增加(Bahjaoui-Bouhaddi等，1994)。
與MCH刺激大鼠飲食的能力(Rossi等，1997)相符的是觀察到MCH mRNA水平在肥胖ob/ob小鼠的下丘腦中正向調(diào)節(jié)(Qu等，1996)，并且在用瘦素(leptin)治療的大鼠下丘腦中降低，其食物攝取和體重增加也減少(Sahu等，1998)。MCH在其對食物攝取和HPA(下丘腦垂體/腎軸)中的激素分泌的作用上似乎作為黑色皮質(zhì)素(melanocortin)系統(tǒng)的功能性拮抗劑起作用(Ludwig等，1998)。這些數(shù)據(jù)共同提示內(nèi)源性MCH在調(diào)節(jié)能量平衡和應(yīng)激反應(yīng)中的作用，并且提供開發(fā)用于治療肥胖癥和應(yīng)激性相關(guān)疾病的作用于MCH受體的特異性化合物的原理。
在迄今為止的所有各類的研究中，大部分MCH細(xì)胞組的神經(jīng)元在它們所存在的下丘腦外側(cè)和丘腦底部的那些區(qū)域中占據(jù)相對穩(wěn)定的定位，并且可以作為一些所謂“錐體束外”運(yùn)動環(huán)路的一部分。這些包括涉及丘腦和大腦皮質(zhì)、下丘腦區(qū)域、與丘腦底部核的交叉聯(lián)接區(qū)域、黑質(zhì)和中腦中心的大量紋狀和離蒼白球途徑(Bittencourt等，1992)。在它們的定位中，MCH細(xì)胞組可以提供表達(dá)具有適當(dāng)?shù)暮蛥f(xié)同的運(yùn)動活性的下丘腦內(nèi)臟活性的腦橋或者機(jī)理。臨床上它可以具有某些被認(rèn)為參與運(yùn)動障礙性疾病例如帕金森病和亨廷頓氏舞蹈病(其中已知涉及錐體束外環(huán)路)中的這個MCH系統(tǒng)的價值。
人遺傳連鎖研究已將hMCH位點定位于染色體12位點(12q23-24)上，并將變體hMCH定位于染色體5位點(5q12-13)(Pedeutour等，1994)上。位點12q23-24與其中已繪制II型常染色體顯性的小腦共濟(jì)失調(diào)(SCA2)的位點相吻合(Auburger等，1992；Twells等，1992)。這種疾病包括神經(jīng)退化性疾病，包括橄欖體腦橋小腦的萎縮。
另外，達(dá)里埃氏病的基因已被繪制為位點12q23-24(Craddock等，1993)。達(dá)里埃氏病其特征在于在某些家族中異常I型角化細(xì)胞的粘附和精神性疾病。根據(jù)大鼠和人腦中MCH神經(jīng)系統(tǒng)的功能性和神經(jīng)性解剖學(xué)模式，MCH基因可以表示SCA2或者達(dá)里埃氏病的良好的候選者。令人感興趣地是，已將多種具有高社會影響的疾病繪制成這種基因圖譜。的確，采用遺傳連鎖分析，已將慢性或者急性形式的脊髓肌肉萎縮的基因指定為染色體5q12-13(Melki等，1990；Westbrook等，1992)。此外，一些系列的獨立的證據(jù)支持主要的精神分裂癥位點處于5q11.2-13.3的提定(Sherrington等，1988；Bassett等，1988；Gilliam等，1989)。以上研究提示MCH可在神經(jīng)退化性疾病和情緒紊亂中起作用。
通過在其它的生物系統(tǒng)中可觀察到的MCH作用提示與MCH相關(guān)的化合物的其它的治療用途。例如，MCH可以調(diào)節(jié)雄性和雌性大鼠的生殖功能。在成年大鼠生殖細(xì)胞的試驗中，發(fā)現(xiàn)了MCH轉(zhuǎn)錄物和MCH肽，這提示MCH可以參與干細(xì)胞更新和/或早期精母細(xì)胞的分化(Hervieu等，1996)。將MCH直接注射到視前內(nèi)側(cè)核區(qū)域(MPOA)或者腹內(nèi)側(cè)核(VMN)，可刺激雌性大鼠的性活動(Gonzalez等，1996)。在用雌二醇處理過的切除卵巢的大鼠體內(nèi)，MCH刺激促黃體生成素(LH)釋放，同時抗MCH抗血清抑制LH釋放(Gonzalez等，1997)。先前已將含大量MCH細(xì)胞體的未定區(qū)鑒定為排卵期前LH被動的調(diào)節(jié)區(qū)域(Mackenzie等，1984)。
已報道MCH影響垂體激素包括ACTH和催產(chǎn)素的釋放。MCH類似物在治療癲癇中也是有用的。在PTZ抽搐模型中，抽搐誘導(dǎo)前注射MCH能阻止大鼠和豚鼠的抽搐活性，提示含MCH的神經(jīng)元可以參與經(jīng)歷PTZ誘導(dǎo)的抽搐的神經(jīng)循環(huán)(Knigge和Wagner，1997)。也已觀察到MCH影響認(rèn)知功能的行為相關(guān)性。MCH治療促進(jìn)大鼠體內(nèi)被動性回避應(yīng)答的消失(McBride等，1994)，提高了MCH受體拮抗劑有利于記憶貯存和/或保留的可能性。通過MCH-陽性纖維的導(dǎo)水管周圍(PAG)的致密新生枝，支持MCH在疼痛的調(diào)節(jié)或者參與中的可能的作用。最終，MCH可以參與流體攝取的調(diào)節(jié)。給意識清醒的綿羊體內(nèi)ICV灌注MCH能在增加血液體積的應(yīng)答中產(chǎn)生利尿、促尿鈉排泄和促尿鉀排泄的變化(Parkes，1996)。這些結(jié)果與報道大腦的流體調(diào)節(jié)區(qū)域的MCH存在的解剖學(xué)數(shù)據(jù)一起，指明MCH可以作為一種參與哺乳動物體內(nèi)流體體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的中樞控制的重要的肽。
最近公開了MCH的G-蛋白偶聯(lián)受體的鑒定(Chambers等，1999；Saito等，1999)。這些研究小組將MCH鑒定為人孤獨G-蛋白偶聯(lián)受體SLC-1的內(nèi)源性配體(Lakaye等，1998)。據(jù)報道將這個受體的大鼠同源物(現(xiàn)稱作MCH-1)定位于與飲食行為有關(guān)的大鼠腦區(qū)域(例如背內(nèi)側(cè)和腹內(nèi)側(cè)下丘腦)。最新關(guān)于MCH-1摘除的小鼠的表型的報道增強(qiáng)了MCH-1與MCH對飲食作用之間的關(guān)聯(lián)。兩個小組已獨立顯示(Marsh等，2002；Chen等，2002)小鼠MCH-1受體基因(MCH-1摘除)的定向破壞導(dǎo)致動物多食卻瘦弱，并且與野生型同窩小鼠相比，體重降低。體重減少歸因于代謝增加。每組均證實MCH-1摘除的小鼠對飲食誘導(dǎo)的肥胖具有抗性，通常呈現(xiàn)出與規(guī)律性供給食物維持的同禽小鼠類似的體重。
最后，在文獻(xiàn)中現(xiàn)已描述MCH-1受體的合成的拮抗劑分子。Bednaek等(2002)已報道MCH-1的高親和性肽拮抗劑的合成。另外，Takekawa等已描述了MCH-1的小分子拮抗劑(Takekawa等，2002)。這個化合物T-226296對MCH-1受體呈現(xiàn)出高親和性(對大鼠和人MCH-1為～5-9nM)，并且顯示了抑制通過腦室內(nèi)應(yīng)用MCH誘導(dǎo)的食物攝取。這些數(shù)據(jù)證實應(yīng)用MCH-1受體拮抗劑治療肥胖癥的策略。
另外，在我們自已的研究中，我們已在幾種動物模型上試驗了MCH1拮抗劑，這些模型作為預(yù)測化合物對人體的效力是熟知的(Borowsky等，Nature Medicine 2003)。這些實驗指明MCH1拮抗劑可用于治療肥胖癥、抑郁癥、焦慮癥以及泌尿疾病。
在此，我們報道了可結(jié)合克隆的人黑色素聚集激素1(MCH1)受體的仲氨基苯胺哌啶(anilinic piperidines)類化合物的合成。此外，與其它的克隆的G-蛋白偶聯(lián)受體相比較，這些化合物選擇性結(jié)合于MCH-1受體。公開了按體外試驗測定法測定的抑制克隆受體的激活的能力。
另外，本發(fā)明的化合物也可以用于治療由MCH-1受體的失活介導(dǎo)的異常疾病，例如飲食紊亂(肥胖癥，食欲過盛、神經(jīng)性食欲過盛)、性/生殖疾病、抑郁癥、焦慮癥、抑郁和焦慮、失神抽搐、高血壓、腦缺血、充血性心力衰竭、睡眠紊亂或者其中MCH1受體拮抗作用可以對其有益的任何疾病。
此外，本發(fā)明的化合物可以用于減少患者的體重。此外，本發(fā)明的化合物可以用于治療泌尿疾病。
發(fā)明概述本發(fā)明提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-NO2、-OR3或直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個B獨立為N或CH；其中Z為CO或SO2；其中每個R獨立為-H、-F或直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基；其中R4獨立為-OR3、-NHR3、-SR3、-COR3、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-OR2，或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；或其中n為1-6的整數(shù)。
在上述發(fā)明的另一個實施方案中，所述化合物為對映體純和非對映異構(gòu)體純的化合物。在另一個實施方案中，所述化合物為對映體純和非對映異構(gòu)體純的化合物。在一個實施方案中，所述化合物為(+)對映體。在一個實施方案中，所述化合物為(-)對映體。
本發(fā)明的示例為包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的本發(fā)明的任何一種化合物的藥用組合物。
本發(fā)明的一示例為通過將任何一種上述化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合而制成的藥用組合物。
本發(fā)明的示例為一種制備藥用組合物的方法，它包括將任何一種本發(fā)明的化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
本發(fā)明的示例為一種制備任何一種本發(fā)明的化合物的合成方法。
本發(fā)明的例證為一種在有此需要的患者中治療由MCH1受體介導(dǎo)的疾病的方法，它包括給予所述患者治療有效量的任何一種本發(fā)明的化合物或藥用組合物及藥學(xué)上可接受的載體。
在一個實施方案中，所述治療有效量在約0.03-約300mg之間。
在一個實施方案中，所述疾病為抑郁癥。在一個實施方案中，所述疾病為焦慮癥。在一個實施方案中，所述疾病為肥胖癥。在一個實施方案中，所述疾病為尿失禁。
一個實施方案為一種在有此需要的患者中治療患有選自抑郁癥、焦慮癥、肥胖癥或尿失禁的疾病的方法，它包括給予所述患者治療有效量的本發(fā)明化合物。
在一個實施方案中，所述治療有效量在約0.03-約300mg之間。
在另一個實施方案中，所述疾病為抑郁癥。在另一個實施方案中，所述疾病為焦慮癥。在另一個實施方案中，所述疾病為肥胖癥。在另一個實施方案中，所述疾病為尿失禁。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-NO2、-OR3或直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個B獨立為N或CH；其中Z為CO或SO2；其中每個R獨立為-H、-F或直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基；其中R4獨立為-OR3、-NHR3、-SR3、-COR3、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-OR2，或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
其中R4為芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-OR3，或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3為直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN或-OR2；和其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN。
本發(fā)明的一個實施方案為具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 其中R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基，或芳基，其中芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2或-CN。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中R2為直鏈或支鏈C1-C7烷基；以及其中n為3-6的整數(shù)。
其中化合物具有以下結(jié)構(gòu)的本發(fā)明化合物
其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F或-Cl；和其中R2為直鏈或支鏈C1-C3烷基。
具有以下結(jié)構(gòu)的本發(fā)明化合物 具有以下結(jié)構(gòu)的本發(fā)明化合物 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中R2為芳基，其中芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2或-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
其中每個A獨立為-H、-F或-Cl；和其中R2為被一個或多個-F、-Cl或-Br任選取代的芳基。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F或-Cl；和其中R2為由一個或多個-F任選取代的芳基。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中R4為由一個或多個以下的基團(tuán)任選取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-OR3，或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN或-OR2；
其中每個R2獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基。
本發(fā)明還提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 其中R4獨立為-OR3、-NHR3、-COR3或-SR3；其中R3各自獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基，芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選由一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基，或任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I；其中R4獨立為-OR3、-NHR3或-COR3；其中R3為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基，或任選被-個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
其中每個A獨立為-H或-F；其中R3為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中R2獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基，或任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br或-I；和其中n為1-6的整數(shù)。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A為-H、-F、-Cl、-Br或-I；其中芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I；其中R3為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br或-I。
所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 本發(fā)明也提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個Q獨立為氫； 或 其中X為芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、苯氧基或雜芳基，直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個Z獨立為CO、CS、SO2；或不存在(null)；其中每個R獨立為-H、-F、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、-N(R3)2、-NO2、-CN、-CO2R3、-OCOR3、-OR3、-N(R3)COR3或-CON(R3)2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基或者直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-N(R2)2、-NO2、-CN、-COR2、-CO2R2、-OCOR2、-OR2、-N(R2)COR2、-N(R2)CON(R2)2、-CON(R2)2、芳基、雜芳基、苯氧基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個R4獨立為-H、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、芳基、芐基或或雜芳基，其中芳基、芐基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、芐基、雜芳基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個k獨立為1-3的整數(shù)；其中每個m獨立為0-1的整數(shù)；其中n為0-6的整數(shù)；其中q為1-3的整數(shù)。
本發(fā)明也提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個Q獨立為氫；
或 其中X為芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、苯氧基或雜芳基，直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個Z獨立為CO、CS、SO2；或不存在；其中每個R獨立為-H、-F、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、-N(R3)2、-NO2、-CN、-CO2R3、-OCOR3、-OR3、-N(R3)COR3或-CON(R3)2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-N(R2)2、-NO2、-CN、-COR2、-CO2R2、-OCOR2、-OR2、-N(R2)COR2、-N(R2)CON(R2)2、-CON(R2)2、芳基、雜芳基、苯氧基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個R4獨立為-H、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、芳基、芐基或雜芳基，其中芳基、芐基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、芐基、雜芳基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個k獨立為1-3的整數(shù)；其中n為0-6的整數(shù)；其中q為1-3的整數(shù)。
本發(fā)明的示例為一種包含藥學(xué)上可接受的載體和藥學(xué)上治療有效量的上述任何一種化合物的藥用組合物。
本發(fā)明的示例為一種通過將任何一種上述化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合而制備的藥用組合物。
本發(fā)明的示例為一種制備藥用組合物的方法，它包括將任何一種上述的化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
本發(fā)明的示例為一種制備任何一種上述化合物的合成方法。
本發(fā)明的例證為一種在有此需要的患者中治療由MCH-1受體介導(dǎo)的疾病的方法，它包括給予所述患者治療有效量的任何一種上述的化合物或藥用組合物及藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明也提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個Q獨立為氫； 或 其中X為苯基或含氮雜環(huán)，其中苯基或含氮雜環(huán)任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、苯氧基或雜芳基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個Z獨立為CO、CS、SO2；或不存在；其中每個R獨立為-H、-F、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、-N(R3)2、-NO2、-CN、-CO2R3、-OCOR3、-OR3、-N(R3)COR3或-CON(R3)2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-N(R2)2、-NO2、-CN、-COR2、-CO2R2、-OCOR2、-OR2、-N(R2)COR2、-N(R2)CON(R2)2、-CON(R2)2、芳基、雜芳基、苯氧基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個R4獨立為-H、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、芳基、芐基或或雜芳基，其中芳基、芐基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、芐基、雜芳基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個k獨立為1-3的整數(shù)；
其中n為0-6的整數(shù)；其中q為1-3的整數(shù)。
本發(fā)明也提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個Q獨立為氫； 或 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-N(R3)2、-OR3、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個B獨立為N或CH；其中每個Z獨立為CO、CS、SO2；或不存在；其中每個R獨立為-H、-F、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、-N(R3)2、-NO2、-CN、-CO2R3、-OCOR3、-OR3、-N(R3)COR3或-CON(R3)2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-N(R2)2、-NO2、-CN、-COR2、-CO2R2、-OCOR2、-OR2、-N(R2)COR2、-N(R2)CON(R2)2、-CON(R2)2、芳基、雜芳基、苯氧基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個R4獨立為-H、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、芳基、芐基或或雜芳基，其中芳基、芐基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-CN、-NO2、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、芳基、芐基、雜芳基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基；其中每個k獨立為1-3的整數(shù)；其中n為0-6的整數(shù)；其中q為1-3的整數(shù)。
在一個實施方案中，每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br、-I、-ZR3、-ZOR3、-OZR3、-ZN(R3)2、-N(R3)ZR3、-N(R3)ZN(R3)2、-N(R3)2、-OR3、-SR3、-(CH2)qOR3、-(CH2)qSR3、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基；其中每個Z獨立為CO、CS或不存在；其中每個R獨立為-H、-F、直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-N(R2)2、-NO2、-CN、-COR2、-CO2R2、-OCOR2、-OR2、-N(R2)COR2、-N(R2)CON(R2)2、-CON(R2)2、芳基、雜芳基、苯氧基、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基、C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中R4為芳基，其中所述芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基、直鏈或支鏈C2-C7鏈烯基或炔基，或C3-C7環(huán)烷基、一氟代環(huán)烷基、多氟代環(huán)烷基或環(huán)烯基。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中R3為芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-N(R2)2、-NO2、-CN、-COR2、-CO2R2、-OCOR2、-OR2、-N(R2)COR2、-N(R2)CON(R2)2、-CON(R2)2、芳基、雜芳基、苯氧基、直鏈或支鏈C1-C7烷基。
在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 在一個實施方案中，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 本發(fā)明中使用的術(shù)語“雜芳基”包括5和6元不飽和環(huán)，所述環(huán)可含一個或多個氧、硫或氮原子。雜芳基的實例包括但不限于咔唑、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基。
另外，所用術(shù)語“雜芳基”包括可含有一個或多個如氧、硫和氮的雜原子的稠合雙環(huán)體系。這種雜芳基的實例包括但不限于中氮茚基、吲哚基、異氮茚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、嘌呤基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并[b]噻唑基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，8-二氮雜萘基、蝶啶基、喹啉基、異喹啉基、鄰苯二甲酰亞氨基和2，1，3-苯并噻唑基。
術(shù)語“雜芳基”還包括可被以下一個或多個基團(tuán)取代的上述化學(xué)基團(tuán)-F、-Cl、-Br、-I、CN、-NO2、直鏈或支鏈C1-C7烷基、直鏈或支鏈C1-C7一氟烷基、直鏈或支鏈C1-C7多氟烷基、直鏈或支鏈C2-C7烯基、直鏈或支鏈C2-C7炔基、C3-C7環(huán)烷基、C3-C7一氟環(huán)烷基、C3-C7多氟環(huán)烷基、C5-C7環(huán)烯基。
術(shù)語“雜芳基”還包括上述含有至少一個氮原子的化學(xué)基團(tuán)的N-氧化物。在本發(fā)明中，術(shù)語“芳基”為苯基或萘基。
在上述發(fā)明的另一個實施方案中，所述化合物為對映體純和非對映異構(gòu)體純的化合物。在另一個實施方案中，所述化合物為對映體純和非對映異構(gòu)體純的化合物。
在一個實施方案中，所述化合物為(+)對映體。在一個實施方案中，所述化合物為(-)對映體。
本發(fā)明提供了任何本文所描述化合物的各種純立體異構(gòu)體。這些立體異構(gòu)體可包括對映體、非對映異構(gòu)體或E或Z烯烴或亞胺異構(gòu)體。本發(fā)明還提供了立體異構(gòu)體混合物，包括外消旋混合物、非對映異構(gòu)體混合物或E/Z異構(gòu)體混合物?？珊铣杉儜B(tài)的立體異構(gòu)體(Nógrádi，M.；Stereoselective Synthesis，(1987)VCH Edit or Ebel，H.和Asymmetric Synthesis，Volumes 3 B 5，(1983)Academic Press，EditorMorrison，J.)，或可采用各種方法如結(jié)晶和層析技術(shù)對其進(jìn)行拆分(Jaques，J.；Collet，A.；Wilen，S.；Enantiomer，Racemates，and Resolutions，1981，John Wiley and Sons andAsymmetric Synthesis，vol.2，1983，Academic Press，Editor Morrison，J)。
此外，本發(fā)明化合物可以以對映體、非對映異構(gòu)體、同分異構(gòu)體的形式存在，或者可存在兩種或多種這些化合物而形成外消旋混合物或非對映異構(gòu)體混合物。
優(yōu)選本發(fā)明化合物純度為80％、更優(yōu)選90％且最優(yōu)選95％。此處所描述的所有化合物的藥學(xué)上可接受的鹽和復(fù)合物均包括在本發(fā)明中。制備這些鹽的酸和堿包括但不限于本說明書所列的各種酸和堿。酸包括但不限于以下無機(jī)酸氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸和硼酸。酸還包括但不限于以下有機(jī)酸乙酸、蘋果酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、甲磺酸、苯甲酸、乙醇酸、乳酸和扁桃酸。堿包括但不限于氨、甲胺、乙胺、丙胺、二甲胺、二乙胺、三甲胺、三乙胺、乙二胺、羥基乙胺、嗎啉、哌嗪和胍。本發(fā)明還提供此處所描述的所有化合物的水合物和多晶型物。
本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物其范圍內(nèi)的前藥。通常，這些前藥為本發(fā)明化合物的官能化衍生物，它們在體內(nèi)容易轉(zhuǎn)化成所需的化合物。因此，在本發(fā)明中，術(shù)語“給藥”應(yīng)包括采用特別公開的化合物或采用沒有特別公開的化合物，但后者在給藥于患者后在其體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為特定化合物，來治療各種疾病。選擇和制備合適前藥衍生物的常規(guī)方法描述于例如Design of Prodrugs，H.Bundgaard，Elsevier編輯，1985之中。
本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的代謝物。代謝物包括將本發(fā)明化合物引入生物學(xué)環(huán)境后產(chǎn)生的活性物質(zhì)。
本發(fā)明的示例為一種包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的本發(fā)明的任何一種化合物的藥用組合物。
本發(fā)明的示例為一種通過將任何一種上述化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合而制備的藥用組合物。
本發(fā)明的示例為一種制備藥用組合物的方法，它包括將任何一種本發(fā)明的化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
固體載體可包括一種或多種還可用作以下試劑的物質(zhì)內(nèi)源性載體(endogenous carriers，如營養(yǎng)素載體或微量營養(yǎng)素載體)、矯味劑、潤滑劑、助溶劑、懸浮劑、填充劑、助流劑、壓縮助劑、粘合劑或片劑崩解劑，所述固體載體還可為包囊材料。對于散劑來說，載體為分散極細(xì)的固體，它們與分散極細(xì)的活性成分一起混合。對于片劑來說，是將活性成分與合適比例的具有必需的壓縮性能的載體一起混合，然后壓縮成所需的形狀和大小。散劑和片劑優(yōu)選最多含有99％的活性成分。合適的固體載體包括例如磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、糊精、淀粉、明膠、纖維素、聚乙烯基吡咯烷、低熔點蠟和離子交換樹脂。
液體載體用于制備溶液劑、懸浮劑、乳劑、糖漿劑、酏劑和壓縮組合物。可將活性成分溶解或懸浮于諸如水、有機(jī)溶劑或兩者的混合液、或藥學(xué)上可接受的油或脂等的藥學(xué)上可接受的液體載體中。所述液體載體可含有其它合適的藥用添加劑，如助溶劑、乳化劑、緩沖劑、防腐劑、甜味劑、矯味劑、懸浮劑、增稠劑、著色劑、粘度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透調(diào)節(jié)劑。適合于口服和腸胃外給藥的液體載體的實例包括水(部分含有上述添加劑，如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉溶液)、醇(包括一元醇和多元醇，如二元醇)和它們的衍生物，以及油類(如分餾的椰子油和花生油)。對于腸胃外給藥而言，載體也可為油酯，如油酸乙酯或肉豆蔻酸異丙酯。無菌液體載體可用于腸胃外給藥用的無菌液體形式組合物。用于壓縮組合物的液體載體可為鹵化烴或其它藥學(xué)上可接受的拋射劑。
無菌溶液或懸浮液形式的液體藥用組合物可通過如肌內(nèi)、鞘內(nèi)、硬膜外、腹膜內(nèi)或皮下注射使用。無菌溶液還可通過靜脈內(nèi)給藥。可將所述化合物制成無菌固體組合物，在給藥時，可用無菌水、鹽水或其它合適的無菌可注射介質(zhì)溶解或懸浮。載體可包括必須且惰性的粘合劑、懸浮劑、潤滑劑、矯味劑、甜味劑、防腐劑、染料和涂料。所述化合物可以以無菌溶液或懸浮液的形式口服給藥，所述無菌溶液或懸浮液含有其它溶質(zhì)或懸浮劑(如足以制得等滲溶液的鹽水或葡萄糖)、膽汁酸鹽、阿拉伯膠、明膠、脫水山梨糖醇單油酸酯、多乙氧基醚-80(山梨糖醇及其脫水物與環(huán)氧乙烷的共聚物的油酸酯)等。
所述化合物還可以以液體或固體組合物形式口服給藥。適合于口服給藥的組合物包括固體形式，如丸劑、膠囊劑、顆粒劑、片劑和散劑，以及液體形式，如溶液劑、糖漿劑、酏劑和懸浮劑。可用于腸胃外給藥的形式包括無菌溶液劑、乳劑和懸浮劑。
給藥的最佳劑量可由本領(lǐng)域的技術(shù)人員確定，并依具體使用的化合物、制劑的作用強(qiáng)度、給藥方式和疾病的發(fā)展情況而異。另外，根據(jù)具體治療的患者的年齡、體重、性別、飲食情況和給藥時間等因素調(diào)節(jié)劑量。
本發(fā)明的示例為一種制備任何一種本發(fā)明的化合物的合成方法。
本發(fā)明的例證為一種在有此需要的患者中治療由MCH-1受體介導(dǎo)的疾病的方法，它包括給予所述患者治療有效量的任何一種本發(fā)明的化合物或藥用組合物及藥學(xué)上可接受的載體。
在一個實施方案中，所述治療有效量在約0.03-約300mg之間。
在一個實施方案中，所述疾病為抑郁癥。在一個實施方案中，所述疾病為焦慮癥。在一個實施方案中，所述疾病為肥胖癥。在一個實施方案中，所述疾病為尿失禁。
一個實施方案為一種在有此需要的患者中治療患有選自抑郁癥、焦慮癥、肥胖癥或尿失禁的疾病的方法，它包括給予所述患者治療有效量的本發(fā)明化合物。
在一個實施方案中，所述治療有效量在約0.03-約300mg之間。
在另一個實施方案中，所述疾病為抑郁癥。在另一個實施方案中，所述疾病為焦慮癥。在另一個實施方案中，所述疾病為肥胖癥。在另一個實施方案中，所述疾病為尿失禁。
在本申請中，“治療有效量”是指當(dāng)將化合物給予患有可用所述化合物治療的疾病的患者時，任何可減輕、緩解或消退所述疾病的化合物的量。在本申請中，“患者”為脊椎動物、哺乳動物或人。
本發(fā)明提供了一種治療患有異常癥狀的患者的方法，其中所述異常癥狀可通過降低MCH1受體活性而減輕，所述方法包括給予患者一定量的本發(fā)明化合物，所述化合物為可有效治療所述患者的異常癥狀的MCH1受體拮抗劑。
在各獨立的實施方案中，所述異常癥狀為類固醇或腦垂體激素調(diào)節(jié)紊亂、腎上腺素釋放紊亂、腸胃疾病、心血管疾病、電解質(zhì)平衡疾病、高血壓、糖尿病、呼吸疾病、哮喘、生殖功能障礙、免疫性疾病、內(nèi)分泌疾病、肌肉與骨骼疾病、神經(jīng)內(nèi)分泌疾病、認(rèn)知性疾病、記憶障礙(如早老性癡呆)、感覺調(diào)節(jié)和傳遞障礙、運(yùn)動協(xié)調(diào)性障礙、感覺整合障礙、運(yùn)動整合障礙、多巴胺能功能性障礙(如帕金森氏病)，感覺傳遞障礙、嗅覺障礙、交感神經(jīng)支配紊亂、情感障礙(如抑郁癥和焦慮癥)、應(yīng)激相關(guān)性疾病、流體平衡障礙、癲癇病、疼痛、精神病行為(如精神分裂癥)、嗎啡耐量、鴉片癮、偏頭痛或排尿障礙(如尿失禁)。
本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案提供了一種治療以下疾病的方法抑郁癥、焦慮癥、飲食紊亂/體重失調(diào)和排尿障礙。飲食紊亂/體重失調(diào)的實例有肥胖癥、食欲過盛或神經(jīng)性食欲過盛。排尿障礙的實例包括但不限于尿失禁、膀胱活動過度、急迫性尿失禁、尿頻、尿急、夜尿或遺尿。膀胱活動過度或尿急可能伴隨有或不伴隨有良性前列腺增生。
本發(fā)明提供了一種改善患者飲食行為的方法，所述方法包括給予患者有效降低其食物消耗的量的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明還提供一種治療患者飲食疾病的方法，所述方法包括給予患者有效降低其食物消耗的量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明的一個實施方案中，所述飲食疾病為食欲過盛、肥胖或神經(jīng)性食欲過盛。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述患者為脊椎動物、哺乳動物、人或犬科動物。在另一個實施方案中，將所述化合物與食物一起給予。
本發(fā)明還提供一種減輕患者體重的方法，該方法包括給予患者有效降低其體重的量的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明還提供一種治療患有抑郁癥的患者的方法，該方法包括給予患者有效治療患者的抑郁癥的量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還提供一種治療患有焦慮癥的患者的方法，該方法包括給予患者有效治療患者的焦慮癥的量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還提供一種治療患有抑郁癥和焦慮癥的患者的方法，該方法包括給予患者有效治療患者的抑郁癥和焦慮癥的量的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明還提供了一種治療患有以下疾病的患者的方法嚴(yán)重抑郁癥、精神沮喪、雙相性精神障礙I或II、情感分裂性精神障礙、帶抑郁心境的認(rèn)知障礙、人格障礙、失眠、睡眠過度、發(fā)作性睡眠、24小時節(jié)奏睡眠障礙、夢魘、夜驚癥、夢游癥、強(qiáng)迫觀念與行為疾病、有或無廣場恐怖癥的驚恐、創(chuàng)傷后精神緊張性疾病、社交焦慮癥、社交恐怖癥和泛化性焦慮癥。
本發(fā)明還提供了一種治療患有排尿障礙的患者的方法，所述方法包括給予患者有效治療患者的排尿障礙的量的本發(fā)明化合物。在一些實施方案中，所述排尿障礙為尿失禁、膀胱活動過度、急迫性尿失禁、尿頻、尿急、夜尿或遺尿。
從以下實驗所詳細(xì)說明可更好地理解本發(fā)明。但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員將很易理解所討論的具體方法和結(jié)果僅僅是對本發(fā)明的舉例說明，在隨后附加的權(quán)利要求書中將對本發(fā)明作出更全面的說明。
實驗部分I.化學(xué)化合物的合成方法通用方法所有反應(yīng)均在氬氣氣氛中進(jìn)行，經(jīng)注射器和插管將反應(yīng)試劑(純凈或在適當(dāng)?shù)娜軇┲?轉(zhuǎn)移至反應(yīng)容器中。平行合成反應(yīng)則使用J-KEM加熱搖蕩器(Saint Louis，MO)，在管瓶(沒有惰性氣氛)中進(jìn)行。無水溶劑購自Aldrich Chemical Company(Milwaukee，WI)，未加純化直接使用。
除非另有聲明，否則1H譜在400MHz下作記錄(Brüker，Model；Avance)，以四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)。s＝單峰；d＝雙峰；t＝三重峰；q＝四重峰；p＝五重峰、六重峰、七重峰；br＝寬峰；m＝多重峰。
元素分析由Robertson Microlit Laboratories，Inc.測試。除非另有聲明，一般在VG Patform II設(shè)備上，使用電噴霧(ESI-MS)得到質(zhì)譜，報導(dǎo)MH+的數(shù)據(jù)。薄層層析(TLC)在預(yù)涂有硅膠60F254(0.25mm，EMSeparations Tech.)的玻璃板上進(jìn)行。制備薄層層析在預(yù)涂有硅膠GF(2mm，Analtech)的玻璃板上進(jìn)行?？焖僦鶎游鲈贛erck硅膠60(230-400目)上進(jìn)行。熔點(mp)在Mel-Temp裝置上，采用敞開式毛細(xì)管進(jìn)行測試，數(shù)據(jù)未校正。
以下的流程說明合成本發(fā)明化合物的方法。
流程I (a)LDA/PhNTf2/THF/-78℃，然后0℃過夜。(b)氨基苯基硼酸/Pd(PPh)4/LiCl/Na2CO3/DME-H2Oo/回流3小時。(c)10％ Pd/C/H2/EtOH/室溫24-48小時。(d)酰氯/三乙胺/THF/0℃然后室溫2-3小時或羧酸/EDC/DMAP/CH2Cl2/DMF/室溫12小時。(e)4M HCl在1，4-二氧六環(huán)中/室溫1小時或TFA/CH2Cl2/室溫10分鐘。
流程2 (a)二硼酸二(頻哪醇酯)/KOAc/PdCl2dppf/dppf/80℃過夜。(b)K2CO3/PdCl2dppf/DMF/80℃過夜。(c)10％ Pd/C/H2/EtOH/室溫24-72小時。(d)4M HCl在1，4-二氧六環(huán)中/室溫1小時或TFA/CH2Cl2/室溫10分鐘。(e)羧酸/EDC/DMAP/CH2Cl2/DMF/室溫12小時。(f)H2SO4/HNO3，0℃，10分鐘。(g)Fe/NH4Cl/THF/H2O/EtOH/95℃，1.5小時。(h)Cbz-Cl/NaHCO3/CH3CN/室溫12小時。
流程3 (b)K2CO3/PdCl2dppf/DMF/85℃ 24小時。(c)10％ Pd/C/H2(200psi)/EtOAc/MeOH/室溫24-72小時。(d)4M HCl在1，4-二氧六環(huán)中/室溫1小時或TFA/CH2Cl2/室溫0.2小時。(e)羧酸/DC/DMAP/CH2Cl2/DMF/室溫12小時。
哌啶合成的通用方法(流程1) 4-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯的合成于0℃下，將正丁基鋰(17.6ml，44.2mmol，2.5M的己烷溶液)加入到二異丙胺(96.2ml，44.2mmol)的無水THF(40.0ml)溶液中，將得到的混合物攪拌20分鐘。使反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，向該反應(yīng)混合液中滴加入4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁酯(Aldrich Chemical Company，7.97g，40.0mmol)的THF(40.0ml)溶液，然后將其攪拌30分鐘。向該反應(yīng)混合液中滴加入(Tf)2NPh(42.0mmol，15.0g)的THF(40.0ml)溶液，于0℃將該反應(yīng)混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物真空濃縮，再次溶解于己烷∶乙酸乙酯(9∶1)中，通過氧化鋁填料管，并用己烷∶乙酸乙酯(9∶1)洗滌所述氧化鋁填料管。將合并的萃取液真空濃縮，得到所需的產(chǎn)物(16.5g)，產(chǎn)物中夾雜有一些原料Tf2NPh。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.77(s，1H)，4.05(dm，2H，J＝3.0Hz)，3.63(t，2H，J＝5.7Hz)，2.45(m，2H)，1.47(s，9H)。
4-(3-(氨基苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯在氬氣氣氛下、在回流溫度下，將2.0M碳酸鈉水溶液(4.20mL)、4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(0.500g，1.51mmol)、3-氨基苯基硼酸半硫酸鹽(0.393g，2.11mmol)、氯化鋰(0.191g，4.50mmol)和四(三苯基膦)合鈀(0.080g，0.075mmol)在二甲氧基乙烷(5.00mL)中的脫氣的混合物加熱3小時。分離出冷卻的反應(yīng)混合物的有機(jī)層，將水層用乙酸乙酯洗滌(3×50ml)。干燥合并的有機(jī)萃取液，真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)層析純化(硅膠，帶有1％異丙胺的己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷(6∶1∶1)，得到所需產(chǎn)物(0.330g，81％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.12(t，1H，J＝7.60Hz)，6.78(d，1H，J＝8.4Hz)，6.69(t，1H，J＝2.0Hz)，6.59(dd，1H，J＝2.2，8.0Hz)，6.01(br，1H)，4.10-4.01(d，2H，J＝2.4Hz)，3.61(t，2H，J＝5.6Hz)，2.52-2.46(m，2H)，1.49(s，9H)；ESMS m/e275.2(M+H)+。
對C16H24N2O2的計算值C，70.04；H，8.08；N，10.21；實測值C，69.78；H，7.80；N，9.92。
4-[3-(氨基)苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯室溫下，采用氫氣囊(balloon)方法，將4-(3-氨基苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(3.10g，11.3mmol)和10％Pd/C(1.00g)在乙醇(100ml)中的混合物氫化2日。通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物，然后用乙醇洗滌。將合并的乙醇萃取液真空濃縮，將殘余物在硅膠上層析(二氯甲烷∶甲醇∶異丙胺＝95∶5∶1)，得到所需的產(chǎn)物(2.63g，84％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.10(t，1H，J＝7.6Hz)，6.62(d，1H，J＝8.4Hz)，6.60-6.59(m，2H)，4.27-4.18(m，2H)，3.62-3.58(m，2H)，2.80-2.72(m，2H)，2.62-2.59(m，1H)，1.89-1.52(m，4H)，1.49(s，9H)； ESMS m/e277.2(M+H)+。
4-{3-[(6-溴代己酰基)氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯向一25-ml RB-燒瓶中裝入4-[3-(氨基)苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯(2.00mmol，0.553g)、6-溴代己酰氯(0.427g，2.00mmol，1.0eq.)、三乙胺(0.404g，4.00mmol)和THF(8.00ml)，于室溫下攪拌4小時。用氯仿(50ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水(100ml)、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮。殘留物經(jīng)層析純化(硅膠，己烷/乙酸乙酯10∶1)，得到所需產(chǎn)物(0.921g，95.8％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(s，1H)，7.28-7.22(m，2H)，7.11(s，1H)，6.5(d，1H，J＝7.0Hz)，3.45-3.39(m，2H)，2.85-2.70(m，2H)，2.68-2.58(m，1H)，2.37(t，2H，J＝7.4Hz)，1.96-1.71(m，7H)，1.68-1.50(m，5H)，1.48(s，9H)；ESMS m/e355.4，476.6.
4-(3-{[6-(3，4-二氟苯胺基)己?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯向一5-ml RB-燒瓶中裝入4-{3-[(6-溴代己?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯(40.9mg，0.100mmol)、3，4-二氟苯胺(0.100mmol，12.9mg)、碳酸鉀(0.100mmol，13.8mg)、NaI(22.5mg，0.150mmol)和DMF(1.00ml)，于120℃加熱12小時。用水(10ml)稀釋混合物，用氯仿(3×10ml)提取水層，用鹽水洗滌合并的提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮。殘留物經(jīng)層析純化(己烷/乙酸乙酯10∶1)，得到所需產(chǎn)物，為淡黃色油狀物(7.14mg，14.3％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(s，1H)，7.31-7.18(m，1H)，6.98-6.90(m，3H)，6.50-6.43(m，1H)，6.40-6.30(m，2H)，6.26-6.20(m，1H)，4.28-4.18(m，2H)，3.06(t，2H，J＝7.2Hz)，2.97-2.87(m，1H)，2.84-2.72(m，2H)，2.68-2.58(m，2H)，2.38(t，2H，J＝7.4Hz)，1.85-1.73(m，4H)，1.7-1.54(m，4H)，1.48(s，9H)；ESMS m/e502.2(M+H)+。
實施例66-(3，4-二氟苯胺基)-N-[3-(4-哌啶基)苯基]己酰胺于0℃，向4-(3-{[6-(3，4-二氟苯胺基)己?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(11.2mg，0.0224mmol)的二氯甲烷(0.500ml)溶液中緩慢加入三氟乙酸(25.5mg，2.24mmol)。于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物10分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于異丙醇/CHCl3(1∶3，10ml)中，用10％KOH堿化至pH 11，用水洗滌，然后用鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到所需產(chǎn)物(8.98mg，99％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.39-7.08(m，5H)，7.06-6.94(m，2H)，6.91-6.81(m，1H)，6.77-6.67(m，1H)，3.54-3.42(m，2H)，3.25-3.04(m，3H)，2.91-2.80(m，1H)，2.45-2.32(m，2H)，2.11-1.99(m，2H)，1.98-1.83(m，2H)，1.80-1.62(m，4H)，1.55-1.40(m，2H)，1.34-1.23(m，1H)；ESMS m/e402.2(M+H)+。
根據(jù)流程1制備以下化合物。
實施例15-(2-甲氧基苯基)-N-[3-(4-哌啶基)苯基]戊酰胺采用4-(3-{[5-(2-甲氧基苯基)戊?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯進(jìn)行流程1，得到產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.52-6.68(m，8H)，3.74(s，3H)，3.61-3.35(m，2H)，3.14-2.90(m，2H)，2.88-2.56(m，3H)，2.52-2.27(m，2H)，2.10-1.51(m，8H)；ESIMSm/e367.2[M+H]+。
實施例25-苯基-N-[3-(4-哌啶基)苯基]戊酰胺采用4-{3-[(5-苯基戊?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯進(jìn)行流程1，得到產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.51-6.83(m，9H)，3.66-3.40(m，2H)，3.08-2.80(m，2H)，2.78-2.45(m，3H)，2.43-2.28(m，2H)，2.08-1.60(m，8H)；ESIMS m/e337.2[M+H]+。
實施例36-氧代-6-苯基-N-[3-(4-哌啶基)苯基]己酰胺采用4-{3-[(6-氧代-6-苯基己?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯進(jìn)行流程1，得到產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.98-7.83(m，2H)，7.60-7.31(m，4H)，7.28-7.12(m，2H)，6.97-6.87(m，1H)，3.48-3.31(m，2H)，3.10-2.68(m，5H)，2.40-2.26(m，2H)，2.05-1.63(m，8H)；ESIMS m/e365.2[M+H]+。
實施例42-苯氧基-N-[3-(4-哌啶基)苯基]煙酰胺于室溫下，將4-[3-(氨基)苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯(0.15mmol)、2-苯氧基煙酰氯(0.23mmol)和三乙胺(0.30mmol)在3ml溶劑(二氯甲烷∶THF，1∶3)中的混合物攪拌12小時。經(jīng)制備性TLC(硅膠，乙酸乙酯∶己烷1∶1)純化反應(yīng)混合物，得到所需產(chǎn)物4-(3-{[(2-苯氧基-3-吡啶基)羰基]氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯。將三氟乙酸(1.0ml)加入到溶于1.0ml二氯甲烷中的純化產(chǎn)物中。于室溫下攪拌該溶液1分鐘，真空濃縮反應(yīng)混合物，得到所需產(chǎn)物的TFA鹽。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.85(s，1H)，8.76-8.64(br，1H)，8.30-8.14(br，1H)，7.67(s，1H)，7.49(t，2H，J＝7.8Hz)，7.42-7.29(m，3H)，7.24(t，3H，J＝5.2Hz)，7.03(d，1H，J＝7.2Hz)，3.59(bd，2H，J＝11.5)，3.16-3.02(m，2H)，2.9-2.79(m，1H)，2.14-2.01(m，4H)；ESIMS m/e374.1[M+H]+。
實施例55-(4-甲氧基苯基)-N-[3-(4-哌啶基)苯基]戊酰胺根據(jù)流程1所述方法制備。
(2Z)-2-乙酰基-3-(4-氟代苯基)-2-丙酸甲酯于室溫下，將4-氟苯甲醛(25.5g，0.220mol)、3-氧代丁酸甲酯(21.80g，0.220mol)和哌啶(1.0ml)在無水苯(250ml)中的混合物攪拌10分鐘，接著在迪安-斯塔克(Dean-Stark)設(shè)備中回流過夜。然后使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空蒸發(fā)溶劑，得到(2Z)-2-乙酰基-3-(4-氟代苯基)-2-丙酸甲酯，為黑色固體(48.6g，99％)，其無須純化而用于以下的步驟。

6-(4-氟代苯基)-2-甲氧基-4-甲基-1，6-二氫-5-嘧啶甲酸甲酯將(2Z)-2-乙酰基-3-(4-氟代苯基)-2-丙烯酸甲酯(0.220mol，48.8g)、O-甲基異脲硫酸氫鹽(53.40g，0.310mol，1.5eq.)、碳酸氫鈉(61.74g，0.74mol，3.5eq.)和乙醇(1.2L)的混合物回流24小時，冷卻至室溫，然后過濾。用乙醇(200ml)洗滌該固體，真空濃縮合并的濾液。殘余物經(jīng)層析純化(硅膠，己烷/乙酸乙酯/三乙胺50∶50∶0.1)，得到互變異構(gòu)體混合物(4∶1，33.0g，53.9％)。
1HNMR(CDCl3)δ7.32-7.24(m，2H)，7.04-6.95(m，2H)，5.81(s，1H)，5.38(d，1H，J＝2.9Hz)，4.00(s，3H)，3.63(s，3H)，2.34(s，3H)。
6-(4-氟代苯基)-2-甲氧基-4-甲基-1，5(6H)-嘧啶二甲酸5-甲酯1-(4-硝基苯酯)于23℃，向6-(4-氟代苯基)-2-甲氧基-4-甲基-1，6-二氫-5-嘧啶甲酸甲酯(1.76g，6.34mmol)和4-甲基氨基吡啶(12.7mmol，1.55g)的無水二氯甲烷(20.0ml)溶液中加入氯代甲酸4-硝基苯酯(4.47g，22.2mmol)的二氯甲烷(20.0ml)溶液。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物2小時。用二氯甲烷(50ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮。殘余物經(jīng)快速柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯4∶1)。獲得為黃色糖漿狀物的產(chǎn)物，將其用己烷研磨，成為白色粉末(2.40g，84.3％)。粗產(chǎn)物無須純化而用于以下的步驟。
1-{[(4-叔丁氧基-4-氧代丁基)氨基]羰基}-6-(4-氟代苯基)-2-甲氧基-4-甲基-1，6-二氫-5-嘧啶甲酸甲酯向6-(4-氟代苯基)-2-甲氧基-4-甲基-1，5(6H)-嘧啶二甲酸5-甲酯1-(4-硝基苯酯)(88.7mg，0.200mmol)和碳酸鉀(41.5mg，0.300mmol)的甲醇/二氯甲烷(0.1/2.0ml)溶液中加入4-氨基丁酸叔丁酯(31.8mg，0.200mmol)。于室溫下攪拌1小時后，用飽和碳酸鈉和鹽水洗滌該混合物。經(jīng)硫酸鎂干燥有機(jī)層，真空濃縮。粗品物質(zhì)經(jīng)快速層析純化(在50％乙酸乙酯/己烷中的5％-10％2M氨/甲醇)，得到產(chǎn)物(92.2g，99％)。mp 135-138℃；1H NMR(CD3OD)δ7.29-7.23(m，2H)，6.97-6.88(m，2H)，6.65(s，1H)，3.98 (s，3H)，3.66(s，3H)，3.38-3.30(m，2H)，2.43(s，3H)，2.28(t，2H，J＝7.2Hz)，1.89-1.78(m，2H)，1.43(s，9H)；ESMS m/e464.1(M+H)+。
4-{[(6-(4-氟代苯基)-5-(甲氧基羰基)-4-甲基-2-氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)羰基]氨基}丁酸于0℃，向1-{[(4-叔丁氧基-4-氧代丁基)氨基]羰基}-6-(4-氟代苯基)-2-甲氧基-4-甲基-1，6-二氫-5-嘧啶甲酸甲酯(77.3mg，0.166mmol)的二氯甲烷(2.00ml)溶液中緩慢加入三氟乙酸(189mg，1.66mmol)。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于異丙醇/氯仿(1∶3，10ml)中，用10％KOH溶液堿化至pH 11，用水和鹽水先后洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到所需產(chǎn)物(58.1mg，88.9％)。ESMS m/e394.1(M+H)+。
3-{[(4-{3-[1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶基]苯胺基}-4-氧代丁基)氨基]羰基}-4-(4-氟代苯基)-6-甲基-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶基甲酸甲酯于室溫下，向一10-ml RB-燒瓶中裝入4-{[(6-(4-氟代苯基)-5-(甲氧基羰基)-4-甲基-2-氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)羰基]氨基}丁酸(77.0mg，0.189mmol)、4-[3-(氨基)苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯(52.2mg，0.189mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.567mmol，87.8mg)、4-二甲基氨基吡啶(11.5mg，0.0945mmol)的DMF∶DCM(0.2∶2.0ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物12小時，將水(10.0ml)加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)層，用氯仿(3×10ml)提取合并的有機(jī)物。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮。殘留物經(jīng)層析(硅膠，己烷/乙酸乙酯9∶1)，得到所需產(chǎn)物(40.9mg，33.2％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03{m，3H)，7.57(s，1H)，7.36-7.28(m，3H)，7.27-7.22(m，1H)，6.97-6.89(m，3H)，6.72(s，1H)，3.72(s，3H)，3.47-3.37(m，2H)，2.42(s，3H)，2.37-2.29(m，2H)，1.98-1.91(m，2H)，1.86-1.75(m，2H)，1.72-1.54(m，7H)，1.48(s，9H)； ESMSm/e652.2(M+H)+。
實施例74-(4-氟代苯基)-6-甲基-2-氧代-3-[({4-氧代-4-[3-(4-哌啶基)苯胺基]丁基}氨基)羰基]-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶基甲酸甲酯于0℃，向3-{[(4-{3-[1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶基]苯胺基}-4-氧代丁基)氨基]羰基}-4-(4-氟代苯基)-6-甲基-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶基甲酸甲酯(40.9mg，0.0628mmol)的二氯甲烷(2.00ml)溶液中緩慢加入三氟乙酸(71.6mg，0.628mmol)。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于異丙醇/氯仿(1∶3，10ml)中，用10％KOH溶液堿化至pH 11，用水和鹽水先后洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到所需產(chǎn)物(34.6mg，99％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(m，3H)，7.67(s，1H)，7.35-7.27(m，4H)，7.04-6.98(m，3H)，6.65(s，1H)，3.72(s，3H)，3.5-3.48(m，2H)，3.20-3.11(m，3H)，2.42(t，2H，J＝7.5Hz)，2.36(s，3H)，2.13-2.06(m，2H)，1.97-1.88(m，4H)；ESMS m/e552.3(M+H)+。

4-{3-[(4-{[(5-甲氧基羰基)-6-(3，4-二氟苯基)-4-甲基-2-氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)羰基]氨基}丁?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯于室溫下，向一50-ml RB-燒瓶中裝入4-{[(5-乙?；?-6-(3，4-二氟苯基)-4-甲基-2-氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)羰基]氨基}丁酸(313mg，0.854mmol)、4-[3-(氨基)苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯(235mg，0.857mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(7.71mmol，265mg)、4-甲基氨基吡啶(10.4mg，0.0854mmol)的DMF∶DCM(0.8∶8.0ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物12小時，將水(20.0ml)加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)層，用氯仿(3×10ml)提取合并的有機(jī)層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。殘留物經(jīng)層析(硅膠，己烷/乙酸乙酯9∶1)，得到所需產(chǎn)物(378mg，67.8％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(m，2H)，7.57(s，1H)，7.36-7.28(m，3H)，7.27-7.22(m，1H)，6.97-6.89(m，3H)，6.72(s，1H)，3.72(s，3H)，3.47-3.37(m，2H)，2.42(s，3H)，2.37-2.29(m，2H)，1.98-1.91(m，2H)，1.86-1.75(m，2H)，1.72-1.54(m，7H)，1.48(s，9H)；ESMSm/e554.3(M-100)。
實施例85-甲氧基羰基-6-(3，4-二氟苯基)-4-甲基-2-氧代-N-{4-氧代-4-[3-(4-哌啶基)苯胺基]丁基}-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶甲酰胺于0℃，向4-{3-[(4-{[(5-甲氧基羰基)-6-(3，4-二氟苯基)-4-甲基-2-氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)羰基]氨基}丁酰基)氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯(378mg，0.579mmol)的二氯甲烷(5.00ml)溶液中緩慢加入三氟乙酸(659mg，5.79mmol)。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于異丙醇/氯仿(1∶3，10ml)中，用10％KOH溶液堿化至pH 11，用水和鹽水先后洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，殘留物經(jīng)快速層析純化(二氯甲烷∶甲醇5∶1)，得到所需產(chǎn)物(93.8mg，29.3％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46-7.43(m，3H)，7.35-7.29(m，2H)，7.12-7.06(m，3H)，6.63-6.60(m，1H)，6.56-6.52(m，2H)，3.26(s，3H)，3.22(s，3H)，2.72(dt，6H，J＝2.3，12.3Hz)，2.66(tt，2H，J＝3.6，11.9Hz)，2.55(tt，1H，J＝3.8，11.9Hz)，1.88-1.82(m，1H)，1.75-1.63(m，6H)；ESMS m/e554.3(M+H)+。
哌啶合成的通用方法(流程2) 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯于室溫、氬氣下，向裝入二硼酸雙(頻哪醇酯)(422mg，1.66mmol)、乙酸鉀(444mg，4.53mmol)、PdCl2dppf(37.0mg，3.00mol％)和dppf(25.0mg，3.00mol％)的一個50-ml RB-燒瓶中，加入4-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(500mg，1.51mmol)的1，4-二噁烷(10.0mL)溶液。將混合物在80℃下加熱過夜。冷卻至室溫后，通過Celite過濾該混合物，用乙酸乙酯(3×20ml)洗滌Celite。用水和鹽水洗滌合并的濾液，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/己烷1∶9)，得到4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(355mg，76％)
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.60-6.34(br，1H)，4.06-3.86(br，2H)，3.55-3.34(br，2H)，2.35-2.09(br，2H)，1.46(s，9H)，1.26(s，12H)；ESMSm/e310.4(M+H)+。
5-溴-2，4-二氟硝基苯于0℃，向1-溴-2，4-二氟苯(53.0mmol，6.00ml)在濃硫酸(38.5ml)中的懸浮液中滴加入濃硝酸(34.0ml)，同時維持內(nèi)溫低于20℃。于0℃攪拌得到的混合物10分鐘，然后在劇烈攪拌下傾入冰/水中。用乙醚(3×100ml)提取該混合物。用碳酸氫鈉水溶液(3×100ml)和鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/己烷1∶9)，得到5-溴-2，4-二氟硝基苯，為黃色油狀物(12.2g，97％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45(t，1H，J＝7.5Hz)，7.16(dd，1H，J＝11.0，8.6Hz)；ESMS m/e240，238，223，221，112 5-溴-2，4-二氟苯胺向一250-ml RB-燒瓶中裝入5-溴-2，4-二氟硝基苯(5.04g，21.3mmol)、飽和氯化銨(25.0ml)、鐵粉(5.00g，89.5mmol)、乙醇(100ml)、THF(50.0ml)和水(25.0ml)，于95℃將該混合物回流1.5小時。冷卻至室溫后，加入飽和碳酸氫鈉(100ml)，通過Celite過濾該混合物，用乙酸乙酯(3×50ml)洗滌Celite。用水和鹽水洗滌合并的濾液，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/己烷1∶9)，得到5-溴-2，4-二氟苯胺(2.61g，59.1％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.97(dd，1H，J＝7.2，6.7Hz)，6.85(t，1H，J＝8.2Hz)，3.63(br，2H)。
5-溴-2，4-二氟苯基氨基甲酸芐基酯向一250-ml RB-燒瓶中裝入5-溴-2，4-二氟苯胺(5.00g，24.2mmol)、甲酸氯代芐基酯(4.10ml，29.0mmol)、碳酸氫鈉(6.10g，72.6mmol)和乙腈(100ml)。于25℃將該混合物攪拌12小時，然后通過多孔玻璃漏斗(玻璃質(zhì)漏斗)過濾，用乙酸乙酯(3×20ml)洗滌，真空濃縮。用水和鹽水洗滌濾液，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/己烷1∶9)，得到5-溴-2，4-二氟苯基氨基甲酸芐基酯(5.05g，61.0％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.38(s，1H)，7.49-7.31(m，5H)，6.94-6.89(m，1H)，6.81-6.77(m，1H)，5.22(s，2H)；ESMS m/e340.1(M-H+)。
4-(5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2，4-二氟苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯于室溫、氬氣下，向裝有4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(4.58g，14.8mmol)、碳酸鉀(6.14g，44.4mmol)和PdCl2dppf(1.48mmol，1.21g)的一個250-ml RB-燒瓶中加入5-溴-2，4-二氟苯基氨基甲酸芐基酯(5.05g，14.8mmol)的DMF(150ml)溶液。將混合物在80℃、氬氣下加熱過夜。冷卻至室溫后，通過Celite過濾該混合物，用乙酸乙酯(3×100ml)洗滌Celite。用水(3×200ml)、鹽水(100ml)洗滌濾液，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/己烷1∶9)，得到4-(5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2，4-二氟苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(1.60g，24.5％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(s，1H)，7.45-7.35(m，5H)，6.85-6.70(m，1H)，5.95-5.85(m，1H)，5.20(s，2H)，4.05(m，2H)，3.6-3.5(m，2H)，2.5-2.4(m，2H)，1.50(s，9H)；ESMS m/e443.3(M-H+)。
4-(5-氨基-2，4-二氟苯基)-1-吡啶甲酸叔丁酯于室溫下，用氫氣泵(200psi)，將4-(5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2，4-二氟苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(1.60g，3.60mmol)和5％Pd/C(320mg，0.100mmol)在乙酸乙酯(25.0ml)和甲醇(25.0ml)中的混合物氫化72小時。通過Celite過濾該反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯/甲醇(1∶1，3×50ml)洗滌。真空濃縮濾液，得到4-(5-氨基-2，4-二氟苯基)-1-吡啶甲酸叔丁酯(1.39g，100％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.73(t，1H，J＝10.6Hz)，6.60-6.54(dd，1H，J＝7.6，6.57Hz)，4.20(br，2H)，3.55(s，2H)，2.96-2.72(m，3H)，1.79-1.71(m，2H)，1.58-1.52(m，2H)，1.47(s，9H)；ESMS m/e257.3(M-56)。
(4E)-5-(2-甲氧基苯基)-4-戊烯酸乙酯向一200-ml RB-燒瓶中加入2-碘代苯甲醚(5.00g，21.4mmol)、4-戊烯酸乙酯(3.30g，25.6mmol)、四(三苯基膦)合鈀(O)(0.740g，0.600mmol)、三乙胺(6.00ml，42.7mmol)以及乙腈(45.0ml)和THF(15.0ml)的混合液。將該反應(yīng)混合物回流過夜，然后冷卻至室溫。真空除去溶劑后，使得到的深棕色殘留物溶于5％HCl水溶液中，用二氯甲烷提取3次。用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌合并的提取液，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮。經(jīng)層析(硅膠，乙酸乙酯/己烷1∶10)純化深棕色油狀物，得到為淡黃色油狀物的產(chǎn)物(3.40g，68％)。
5-(2-甲氧基苯基)戊酸乙酯向(4E)-5-(2-甲氧基苯基)-4-戊烯酸乙酯(3.40g，14.5mmol)在乙酸乙酯和甲醇(40.0/10.0ml)的混合液中的溶液中，分次少量加入Pd/C(10％披鈀碳，0.700g)，以避免劇烈的發(fā)熱反應(yīng)。然后于室溫下，在300psi氫氣中，將反應(yīng)混合物攪拌過夜。釋放壓力后，通過Celite過濾該混合物，用乙酸乙酯(3×50ml)洗滌Celite。真空濃縮濾液，得到為淡黃色油狀物的粗產(chǎn)物(3.40g，100％)，其無須進(jìn)一步純化而使用。
5-(2-甲氧基苯基)戊酸向一250-ml RB-燒瓶中加入5-(2-甲氧基苯基)戊酸乙酯(3.40g，14.5mmol)、NaOH(1.74g，42.8mmol)、THF(25.0ml)和水(25.0ml)。將該反應(yīng)化合物回流2小時，冷卻至室溫。真空濃縮反應(yīng)混合物，用6MHCl將得到的水溶液酸化至pH＜5。用氯仿/異丙醇(3∶1，3×50ml)提取該酸性混合物，用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮，得到為白色固體的產(chǎn)物(2.68g，90％)，其無須進(jìn)一步純化而使用。1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.23-7.03(m，2H)，6.95-6.76(m，2H)，3.81(s，3H)，2.63(t，2H，J＝7.2Hz)，2.38(t，2H，J＝7.2Hz)，1.77-1.53(m，4H)。
4-(2，4-二氟-5-{[5-(2-甲氧基苯基)戊?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯于室溫下，向一15-ml RB-燒瓶中裝入5-(2-甲氧基苯基)戊酸(69.0mg，0.810mmol)、4-(5-氨基-2，4-二氟苯基)-1-吡啶甲酸叔丁酯(229mg，0.740mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(2.22mmol，426mg)、4-二甲基氨基吡啶(9mg，0.07mmol)的DMF∶DCM(0.2∶5.0ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物12小時，將水(10.0ml)加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)層，用氯仿(3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，得到4-(2，4-二氟-5-{[5-(2-甲氧基苯基)戊?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(310mg，83.2％)1H NMR(400MHzCDCl3)δ8.36-8.13(m，1H)，7.39(s，1H)，7.26-7.06(m，1H)，7.06-6.92(m，1H)，6.92-6.75(m，3H)，4.41-4.02(m，2H)，3.80(s，3H)，2.90-2.70(m，2H)，2.70-2.63(m，2H)，2.63-2.51(m，1H)，2.49-2.32(m，2H)，1.87-1.72(m，4H)，1.72-1.63(m，2H)，1.63-1.52(m，2H)，1.48(s，9H)。
實施例11N-[2，4-二氟-5-(4-哌啶基)苯基]-5-(2-甲氧基苯基)戊酰胺于0℃，向4-(2，4-二氟-5-{[5-(2-甲氧基苯基)戊?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(310mg，0.620mmol)的二氯甲烷(5.00ml)溶液中緩慢加入三氟乙酸(707mg，6.20mmol)。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于異丙醇/氯仿(1∶3，10ml)中，用10％KOH溶液堿化至pH 11，用水和鹽水先后洗滌。分離有機(jī)層，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到所需產(chǎn)物(108mg，43.3％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.59(t，1H，J＝8.2Hz)，7.10-6.96(m，2H)，6.90-6.68(m，3H)，3.67(s，3H)，3.09(d，2H，J＝12.4Hz)，2.89(tt，1H，J＝11.8Hz)，2.69(dt，2H，J＝2.6，12.4Hz)，2.54(t，2H，J＝7.2Hz)，2.33(t，2H，J＝7.2Hz)，1.76-1.48(m，8H)；ESMS m/e403.3(M+H)+。
哌啶合成的通用方法(流程3) 4-(4-氟-3-硝基苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯于室溫、氬氣下，向裝有4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(5.58g，16.5mmol)、碳酸鉀(5.60g，40.5mmol)和PdCl2dppf(1.48mmol，1.21g)的一個150-ml RB-燒瓶中，加入4-溴-1-氟-2-硝基苯(3.30g，15.0mmol)的DMF(50.0ml)溶液。將混合物在80℃、氬氣下加熱12小時。冷卻至室溫后，通過Celite過濾該混合物，用乙酸乙酯(3×100ml)洗滌Celite。用水(3×200ml)、鹽水(100ml)洗滌濾液，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/己烷1∶9)，得到4-(4-氟-3-硝基苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(3.13g，65.1％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06-7.89(m，1H)，7.66-7.49(m，1H)，7.30-7.10(m，1H)，6.19-5.95(br，1H)，4.10-3.95(m，2H)，3.58(t，2H，J＝5.6Hz)，2.49-2.34(m，2H)，1.42(s，9H)。

4-(3-氨基-4-氟苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯于室溫下，用氫氣泵(200psi)，將4-(4-氟-3-硝基苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯(2.35g，8.85mmol)和10％Pd/C(400mg)在乙酸乙酯(40.0ml)和甲醇(10.0ml)中的混合物氫化72小時。通過Celite過濾該反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯/甲醇(1∶1，3×50ml)洗滌Celite。真空濃縮濾液，得到4-(3-氨基-4-氟苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(2.10g，98.0％)。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.96-6.76(m，1H)，6.67-6.54(m，1H)，6.54-6.40(m，1H)，4.38-4.09(br，2H)，4.09-3.58(br，2H)，2.87-2.62(m，2H)，2.60-2.39(m，1H)，1.85-1.65(m，2H)，1.64-1.40(m，2H)，1.48(s，9H)。
4-(4-氟-3-{[5-(2-甲氧基苯基)戊?；鵠氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯于室溫下，向一25-ml RB-燒瓶中裝入5-(2-甲氧基苯基)戊酸(53.0mg，0.250mmol)、4-(3-氨基-4-氟苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(59.0mg，0.200mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.400mmol，62.0mg)、4-二甲基氨基吡啶(10mg)的DMF∶DCM(0.2∶2.0ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物12小時，將水(10.0ml)加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)層，用氯仿(3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)層析純化(硅膠，己烷∶乙酸乙酯6∶1)，得到4-(4-氟-3-{[5-(2-甲氧基苯基)戊酰基]氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(48.4mg，50.0％)1H NMR(400MHzCDCl3)δ8.36-8.13(m，1H)，7.39(s，1H)，7.26-7.06(m，2H)，7.06-6.92(m，1H)，6.92-6.75(m，3H)，4.41-4.02(m，2H)，3.80(s，3H)，2.90-2.70(m，2H)，2.70-2.63(m，2H)，2.63-2.51(m，1H)，2.49-2.32(m，2H)，1.87-1.72(m，4H)，1.72-1.63(m，2H)，1.63-1.52(m，2H)，1.48(s，9H)。
實施例10N-[2-氟-5-(4-哌啶基)苯基]-5-(2-甲氧基苯基)戊酰胺于室溫下，向4-(4-氟-3-{[5-(2-甲氧基苯基)戊酰基]氨基}苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(48.4mg，0.100mmol)的二氯甲烷(2.0ml)溶液中加入三氟乙酸(114mg，1.0mmol)。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于氯仿/異丙醇(3∶1，10ml)中，用5％KOH溶液堿化至pH 11。分離有機(jī)層，用氯仿/異丙醇(3∶1，3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到N-[2-氟-5-(4-哌啶基)苯基]-5-(2-甲氧基苯基)戊酰胺(38.0mg，95％)1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.30-8.12(m，1H)，7.64-7.41(m，1H)，7.24-7.07(m，2H)，7.06-6.92(m，1H)，6.92-6.74(m，3H)，3.80(s，3H)，3.25-3.06(m，2H)，2.80-2.49(m，5H)，2.48-2.24(m，3H)，1.89-1.71(m，4H)，1.71-1.46(m，4H)；ESMS m/e385.2(M+H)+。
3-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]丙酸向一50-ml RB-燒瓶中裝入3-(4-羥基苯基)丙酸(1.66g，10.0mmol)、3，4-二氟碘代苯(2.40g，10.0mmol)、溴化銅(I)(0.100g)、碳酸鉀(2.76g，20.0mmol)和作為溶劑的正-甲基-2-吡咯烷酮(20ml)。于室溫下攪拌混合物5分鐘，然后加熱至140℃(油浴)。于140℃攪拌12小時后，使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(100ml)稀釋。用檸檬酸(30ml水溶液)、水(3×50ml)、鹽水洗滌稀釋的混合物，經(jīng)硫酸鎂干燥。真空除去溶劑，得到粗產(chǎn)物，將其經(jīng)層析純化(0.901g，32％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.44-11.06(br，1H)，7.24-7.14(m，2H)，7.14-7.00(m，1H)，7.00-6.86(m，2H)，6.86-6.75(m，1H)，6.75-6.61(m，1H)，2.94(t，2H，J＝7.6Hz)，2.68(t，2H，J＝7.6Hz)；ESMS m/e277.2(M-H+)。
4-[3-({3-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]丙酰基}氨基)-4-氟苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯室溫下，向一25-ml RB-燒瓶中裝入3-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]丙酸(180mg，0.650mmol)、4-(3-氨基-4-氟苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(180mg，0.610mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.22mmol，190mg)、4-二甲基氨基吡啶(20mg)的DMF∶DCM(0.4∶4.0ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物12小時，將水(10.0ml)加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)層，用氯仿(3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)層析純化(硅膠，己烷∶乙酸乙酯6∶1)，得到4-[3-({3-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]丙?；鶀氨基)-4-氟苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯(85.0mg，25.0％)
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.32-8.15(m，1H)，7.47-6.45(m，10H)，4.41-4.07(br，2H)，3.17-2.96(m，2H)，2.90-2.67(m，4H)，2.67-2.56(m，1H)，1.91-1.69(m，2H)，1.68-1.48(m，2H)，1.47(s，9H)；ESMS m/e 553.3(M-H+)。
實施例123-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]-N-[2-氟-5-(4-哌啶基)苯基]丙酰胺于室溫下，向4-[3-({3-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]丙?；鶀氨基)-4-氟苯基]-1-哌啶甲酸叔丁酯(85.0mg，0.150mmol)的二氯甲烷(2.0ml)溶液中加入三氟乙酸(170mg，1.50mmol)。攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于氯仿/異丙醇(3∶1，10ml)中，用5％KOH溶液堿化至pH 11，提取有機(jī)層，用氯仿/異丙醇(3∶1，3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾、真空濃縮，得到3-[4-(3，4-二氟苯氧基)苯基]-N-[2-氟-5-(4-哌啶基)苯基]丙酰胺(65.0mg，92％)1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.27-8.12(m，1H)，7.39(s，1H)，7.33-7.17(m，2H)，7.17-7.06(m，1H)，7.06-6.97(m，1H)，6.97-6.87(m，3H)，6.86-6.74(m，1H)，6.74-6.62(m，1H)，6.15-5.63(br，1H)，3.55-3.31(m，2H)，3.15-2.97(m，2H)，2.97-2.79(m，2H)，2.79-2.59(m，3H)，2.05-1.79(m，4H)；ESMSm/e455.2(M+H)+。
4-{4-氟-3-[(6-氧代-6-苯基己?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯于室溫下，向一25-ml RB-燒瓶中裝入6-氧代-6-苯基己酸(51.0mg，0.250mmol)、4-(3-氨基-4-氟苯基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(59.0mg，0.200mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.400mmol，62.0mg)、4-二甲基氨基吡啶(10mg)的DMF∶DCM(0.2∶2.0ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物12小時，將水(10.0ml)加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)層，用氯仿(3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)層析純化(硅膠，己烷∶乙酸乙酯6∶1)，得到4-{4-氟-3-[(6-氧代-6-苯基己?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯(49.0mg，51.0％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30-8.14(m，1H)，8.04-7.89(m，2H)，7.62-7.50(m，1H)，7.50-7.37(m，3H)，7.09-6.93(m，1H)，6.93-6.76(m，1H)，4.38-4.01(br，2H)，3.13-2.95(m，2H)，2.89-2.69(m，2H)，2.65-2.54(m，1H)，2.54-2.35(m，2H)，1.95-1.74(m，6H)，1.69-1.48(m，2H)，1.47(s，9H)。
實施例9N-[2-氟-5-(4-哌啶基)苯基]-6-氧代-6-苯基己酰胺于室溫下，向4-{4-氟-3-[(6-氧代-6-苯基己?；?氨基]苯基}-1-哌啶甲酸叔丁酯(49.0mg，0.101mmol)的二氯甲烷(3.0ml)溶液中加入三氟乙酸(114mg，1.01mmol)。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，真空濃縮。使殘留物溶于氯仿/異丙醇(3∶1，10ml)中，用5％KOH溶液堿化至pH 11，分離有機(jī)層，用氯仿/異丙醇(3∶1，3×10ml)提取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾、真空濃縮，得到N-[2-氟-5-(4-哌啶基)苯基]-6-氧代-6-苯基己酰胺(35.5mg，86.0％)。鹽酸鹽1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.14-8.01(br，1H)，8.01-7.89(m，2H)，7.65-7.52(m，1H)，7.52-7.43(m，2H)，7.43-7.26(br，1H)，7.13-7.00(m，1H)，7.00-6.88(br，1H)，3.68-3.43(m，2H)，3.19-2.92(br，4H)，2.89-2.67(m，1H)，2.61-2.36(br，2H)，2.26-2.06(m，2H)，2.06-1.93(m，2H)，1.93-1.71(br，4H)；ESMS m/e383.2(M+H)+。
II.通用結(jié)構(gòu)的合成方法在I部分中描述的各實施例僅僅是舉例說明合成MCH1拮抗劑的方法。采用根據(jù)用于合成各實施例的合成方法的通法，可得到進(jìn)一步的衍生物。
在所概括的合成進(jìn)一步的衍生物的方法中，可能需要對各取代基，如氨基、酰氨基、羧酸和羥基進(jìn)行保護(hù)和脫保護(hù)。這些基團(tuán)的保護(hù)和脫保護(hù)方法為本領(lǐng)域所熟知，可參見如Green，T.W.和Wuts，P.G.M.(1991)，Protection Groups in Organic Synthesis，第二版，JohnWiley & Sons，New York。
III.口服組合物作為本發(fā)明化合物的口服組合物的一個具體的實施方案，將100mg一種本文所述化合物與充分分散的乳糖一起配制，得到總量為580mg至590mg填充在O型硬膠囊中的膠束劑。
IV.在克隆的大鼠MCH1受體上對各化合物進(jìn)行藥理學(xué)評價使用以下描述的方法，在克隆的大鼠MCH1受體上進(jìn)行本發(fā)明化合物的藥理學(xué)性能評價。
宿主細(xì)胞可采用各種各樣的宿主細(xì)胞研究各種異源表達(dá)的蛋白質(zhì)。這些細(xì)胞包括但不限于各種哺乳動物細(xì)胞系，如Cos-7、CHO、LM(tk-)、HEK293、Peak rapid 293等；昆蟲細(xì)胞系，如Sf9、Sf21等；兩棲動物細(xì)胞系，如非洲爪蟾屬卵母細(xì)胞等。
在37℃及5％的CO2氣氛中，使COS-7細(xì)胞在150mm培養(yǎng)板上，在DMEM補(bǔ)充培養(yǎng)基(Dulbecco改性的Eagle培養(yǎng)基，補(bǔ)充有10％小牛血清，4mM谷酰胺，100單位/ml青霉素/100Fg/ml鏈霉素)中生長。每隔3-4天將COS-7細(xì)胞的母板(stock plate)進(jìn)行胰蛋白酶消化，并按1∶6的比例分板生長。
在37℃及5％的CO2氣氛中，使人胚腎細(xì)胞293在150mm培養(yǎng)板上，在DMEM補(bǔ)充培養(yǎng)基(補(bǔ)充10％小牛血清，4mM谷酰胺，100單位/ml青霉素/100Fg/ml鏈霉素)中生長。每隔3-4天將293細(xì)胞的母板進(jìn)行胰蛋白酶消化，并按1∶6的比例分板生長。
在37℃及5％的CO2氣氛中，使人胚腎細(xì)胞Peak rapid293(Peakr293)在150mm培養(yǎng)板上，在DMEM補(bǔ)充培養(yǎng)基(補(bǔ)充10％胎牛血清，10％L-谷酰胺，50Fg/ml慶大霉素)中生長。每隔3-4天將Peak rapid 293細(xì)胞的母板進(jìn)行胰蛋白酶消化，并按1∶12的比例分板生長。
在37℃及5％的CO2氣氛中，使小鼠成纖維細(xì)胞LM(tk-)在150mm培養(yǎng)板上，在DMEM補(bǔ)充培養(yǎng)基(Dulbecco改性的Eagle培養(yǎng)基，補(bǔ)充10％小牛血清，4mM谷酰胺，100單位/ml青霉素/100Fg/ml鏈霉素)中生長。每隔3-4天將LM(tk-)細(xì)胞的母板進(jìn)行胰蛋白酶消化，并按1∶10的比例分板生長。
在37℃及5％的CO2氣氛中，使中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞在150mm培養(yǎng)板上，在HAM氏F-12培養(yǎng)基(補(bǔ)充10％小牛血清，4mML-谷酰胺，100單位/ml青霉素/100Fg/ml鏈霉素)中生長。每隔3-4天將CHO細(xì)胞的母板進(jìn)行胰蛋白酶消化，并按1∶8的比例分板生長。
在37℃及5％的CO2氣氛中，使小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH-3T3細(xì)胞在150mm培養(yǎng)板上，在Dulbecco改性的Eagle培養(yǎng)基(DMEM，補(bǔ)充10％小牛血清，4mM谷酰胺，100單位/ml青霉素/100Fg/ml鏈霉素)中生長。每隔3-4天將NIH-3T3細(xì)胞母板進(jìn)行胰蛋白酶消化，并按1∶15的比例分板生長。
在27℃，無CO2氣氛中，使Sf9和Sf21細(xì)胞在150mm組織培養(yǎng)皿上，在TMN-FH培養(yǎng)基(補(bǔ)充有10％胎牛血清)中以單層生長。同樣也在27℃，無CO2氣氛下，使High Five昆蟲細(xì)胞在150mm組織培養(yǎng)皿上，在Ex-Cell 400TM培養(yǎng)基(補(bǔ)充有L-谷酰胺)中生長。
在某些情況下，可將以粘連單層生長的細(xì)胞系轉(zhuǎn)換為懸浮培養(yǎng)液以提高細(xì)胞產(chǎn)率，提供大批量的用于常規(guī)受體篩選的均勻測試材料。
瞬時表達(dá)可通過以下幾種方法將待研究的編碼DNA的蛋白質(zhì)在各種哺乳動物、昆蟲、兩棲動物的細(xì)胞系以及其它細(xì)胞系中瞬時表達(dá)，所述方法包括但不限于磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法、電穿孔介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法以及微注射介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法。這些方法均要求根據(jù)DNA、細(xì)胞系以及隨后將用到的測試方法類型將配套的實驗參數(shù)最優(yōu)化。
以下說明應(yīng)用于Peak rapid 293細(xì)胞的磷酸鈣法的一般操作規(guī)程在轉(zhuǎn)染之前約24小時收集粘連的細(xì)胞，然后以3.5×106細(xì)胞/皿的密度，將細(xì)胞再次接種于150mm組織培養(yǎng)皿中，在37℃，5％CO2中培養(yǎng)過夜。將250Fl的CaCl2和DNA(15Fg DNA在250mM CaCl2中的溶液)的混合液加入到5ml塑料管中，隨后在輕微混合下緩慢加入500Fl的2×HBS(280mM NaCl，10mM KCl，1.5mM Na2HPO4，12mM葡聚糖和50mM HEPES)。將所述混合液在室溫下培養(yǎng)20分鐘，形成DNA沉淀。隨后將所述DNA沉淀混合物加入到各培養(yǎng)板上的培養(yǎng)基中，在37℃，5％ CO2中培養(yǎng)5小時。培養(yǎng)后，往各培養(yǎng)板中加入5ml培養(yǎng)基(DMEM，10％FBS，10％L-glut和50μg/ml慶大霉素)。接著將細(xì)胞在37℃，5％CO2中培養(yǎng)24至48小時。
以下說明應(yīng)用于Cos-7細(xì)胞的DEAE-葡聚糖法的一般操作規(guī)程在轉(zhuǎn)染之前24小時將用于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞分瓶生長，使得各瓶中細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時達(dá)到70-80％融合。簡要地說，將8Fg受體DNA和8Fg任何其它所需的DNA(如Gα蛋白質(zhì)表達(dá)載體、報道基因構(gòu)件(construct)、抗生素抗性標(biāo)記物、模擬載體等)加入到9ml完全DMEM和DEAE葡聚糖混合物(10mg/ml的PBS溶液)中。將接種于T225燒瓶(分融合)中的COS-7細(xì)胞用PBS洗滌一次，往各燒瓶中加入所述DNA混合液。將細(xì)胞在37℃，5％ CO2中培養(yǎng)30分鐘。培養(yǎng)后，往各燒瓶中加入36ml完全DMEM及80FM氯喹，并繼續(xù)培養(yǎng)3小時。隨后將所述培養(yǎng)基抽吸，用24ml含10％DMSO的完全培養(yǎng)基洗滌2分鐘，隨后抽吸。接著將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，往各燒瓶中加入30ml完全DMEM。隨后將細(xì)胞培養(yǎng)過夜。第二天，經(jīng)胰蛋白酶消化收集細(xì)胞，根據(jù)所進(jìn)行的測試類型的需要再次接種。
以下說明應(yīng)用于CHO細(xì)胞的脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法的一般操作規(guī)程在轉(zhuǎn)染之前24小時將用于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞分瓶生長，使得各瓶中細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時達(dá)到70-80％融合。轉(zhuǎn)染每75cm2燒瓶細(xì)胞總共用10FgDNA(可包括各種比例的受體DNA及其它需要的DNA(如Gα蛋白質(zhì)表達(dá)載體、報道基因構(gòu)件(construct)、抗生素抗性標(biāo)記物、模擬載體等))。按照生產(chǎn)商的要求(LipofectAMINE、GibcoBRL、Bethesda、MD)進(jìn)行脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時后收集已轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，按照所進(jìn)行測試的要求進(jìn)行使用或再次接種。
以下說明應(yīng)用于Cos-7細(xì)胞的電穿孔轉(zhuǎn)染法的一般操作規(guī)程在轉(zhuǎn)染之前24小時將用于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞分瓶生長，使得各瓶中細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時分融合。用胰蛋白酶消化收集細(xì)胞，再次懸浮于它們的生長培養(yǎng)基中，計數(shù)。將4×106個細(xì)胞懸浮于300F1 DMEM中，置于電穿孔比色杯中。往所述細(xì)胞懸浮液中加入8Fg受體DNA及8Fg其它需要的DNA(如Gα蛋白質(zhì)表達(dá)載體、報道基因構(gòu)件(construct)、抗生素抗性標(biāo)記物、模擬載體等)，將比色杯置于BioRad Gene Pulser中，進(jìn)行電脈沖(Gene Pulser設(shè)置電壓0.25kV，電容950FF)。脈沖后，往各比色杯中加入800F1完全DMEM，將所述懸浮液轉(zhuǎn)移至無菌試管中。往各試管中加入完全培養(yǎng)基，使得最終的細(xì)胞濃度為1×105細(xì)胞/100F1。接著根據(jù)所進(jìn)行測試的需要對細(xì)胞進(jìn)行接種。
以下以昆蟲Sf9細(xì)胞的桿狀病毒感染說明異種蛋白質(zhì)的病毒介導(dǎo)的表達(dá)的一般操作規(guī)程。可將此處描述的編碼DNA的受體的編碼區(qū)域亞克隆進(jìn)pBlueBacIII至所存在的限制位點或細(xì)胞工程化至多肽的編碼區(qū)域的序列5′和3′的位點上。為了產(chǎn)生桿狀病毒，可按照Pharmingen描述的方法(在“Baculovirus Expression Vector SystemProcedures and Methods Manual”中描述)，通過磷酸鈣共沉淀方法，將0.5Fg病毒DNA(BaculoGold)和3Fg編碼DNA結(jié)構(gòu)的多肽共轉(zhuǎn)染至2×106秋粘蟲(Spodoptera frugiperda)昆蟲Sf9細(xì)胞中。隨后將所述細(xì)胞在27℃下培養(yǎng)5天。離心收集共轉(zhuǎn)染培養(yǎng)板的上清液，將重組的病毒噬斑純化。用病毒感染細(xì)胞、制備病毒儲液以及滴定病毒儲液的方法在Pharmingen的手冊中描述。類似的原理適用于哺乳動物細(xì)胞經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒、Simliki forest病毒和雙鏈DNA病毒(如腺病毒、皰疹病毒和痘苗病毒等)的表達(dá)。
穩(wěn)定表達(dá)可將異種DNA穩(wěn)定摻入宿主細(xì)胞中，使得細(xì)胞持續(xù)表達(dá)異種蛋白。將DNA傳遞至細(xì)胞中的方法與上述那些用于瞬時表達(dá)的方法類似，但要求將輔助基因共轉(zhuǎn)染以使目標(biāo)宿主細(xì)胞皆有耐藥性。所要的耐藥性可用于選擇并保持已吸收了異種DNA的細(xì)胞?？色@得的一類耐藥基因包括但不限于新霉素、卡那霉素和潮霉素。為了研究受體，在哺乳動物細(xì)胞(但不限于哺乳動物細(xì)胞，包括CHO、HEK293、LM(tk-)等)中進(jìn)行異種受體蛋白質(zhì)的穩(wěn)定表達(dá)。
細(xì)胞膜的制備為了進(jìn)行結(jié)合測試，將轉(zhuǎn)染的細(xì)胞顆粒懸浮在冰冷卻的緩沖液(20mM Tris·HCl，5mM EDTA，pH 7.4)中，經(jīng)超聲波均化7秒。在4℃下，將細(xì)胞溶胞產(chǎn)物在200xg下離心5分鐘。隨后在4℃下，以40,000xg速度將上清液離心20分鐘。將所得的顆粒用均化緩沖液洗滌一次，然后懸浮在結(jié)合緩沖液中(參見放射性配體結(jié)合的方法)。按照Bradford(1976)的方法，采用牛血清清蛋白作為標(biāo)樣，測定蛋白質(zhì)濃度。通常立即進(jìn)行結(jié)合測試，但是也可以分批制膜，然后在液氮中貯存以備使用。
放射性配體結(jié)合測試使用質(zhì)粒pcDNA3.1-rMCH1-f(ATCC專利保藏號PTA-3505)進(jìn)行對大鼠MCH1受體的放射性配體結(jié)合測試。質(zhì)粒pcDNA3.1-rMCH1-f包含DNA在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)所必需的調(diào)節(jié)元素，這些元素有效地連接在編碼DNA的大鼠MCH1受體上，以便進(jìn)行表達(dá)。按照國際認(rèn)可的用于專利程序的微生物保藏的布達(dá)佩斯條約的規(guī)定，將質(zhì)粒pcDNA3.1-rMCH1-f于2001年7月5日保藏于American TypeCulture Collection(美國典型培養(yǎng)物保藏中心，ATCC)，12301 ParklawnDrive，Rockville，Maryland 20852，USA，ATCC專利保藏號為PTA-3505。
還可按如下所述，使用質(zhì)粒pEXJ.HR-TL231(ATCC專利保藏號203197)進(jìn)行結(jié)合測試。質(zhì)粒pEXJ.HR-TL231編碼人MCH1受體，按照國際認(rèn)可的用于專利程序的微生物的保藏布達(dá)佩斯條約的規(guī)定，于1998年9月17號保藏于American Type Culture Collection(美國典型培養(yǎng)物保藏中心，ATCC)，12301 Parklawn Drive，Rockville，Maryland20852，USA，ATCC保藏號為203197。
如上所述，采用磷酸鈣法和細(xì)胞膜法，使用編碼DNA的MCH1受體瞬時轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞Peak rapid 293細(xì)胞(Peakr293細(xì)胞)。用來自用大鼠MCH1受體轉(zhuǎn)染的Peakr293細(xì)胞的膜的結(jié)合試驗采用0.08nM[3H]化合物A(Amersham標(biāo)明規(guī)定)(化合物A的合成在以下詳細(xì)描述)，使用培養(yǎng)緩沖液(由50mM Tris pH 7.4，10mM MgCl2，0.16mMPMSF，1mM 1，10-二氮雜菲和0.2％BSA)來實施。在25℃下進(jìn)行結(jié)合90分鐘。通過在GF/C玻璃纖維過濾器(在5％PEI中預(yù)浸泡，使用50nMpH7.4的Tris為洗滌緩沖液)上的快速真空過濾，停止培養(yǎng)。在所有試驗中，使用10FM化合物A確定非特異性結(jié)合。
功能測試使用功能測試法可篩選出存在內(nèi)源性哺乳動物受體的細(xì)胞。可將所存在的不含或含極少量內(nèi)源性受體的細(xì)胞用功能測試中所用的內(nèi)源性受體進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
可用廣譜測試法篩選受體的活性。這些測試包括如常規(guī)的對磷脂酰肌醇、cAMP、Ca++和K+的測試；測試這些相同第二信使的體系，但可對這些體系進(jìn)行修改或調(diào)整以使測試方法更快、更具普遍性和更敏感；報導(dǎo)更普遍的由受體活化產(chǎn)生的細(xì)胞事件的細(xì)胞基礎(chǔ)性平臺(cell based platforms)，所述受體活化如新陳代謝變化、分化和細(xì)胞分裂/增殖；高水平的有機(jī)體測試，這類測試能監(jiān)測據(jù)認(rèn)為參與了包括心血管、鎮(zhèn)痛、開胃、抗焦慮和鎮(zhèn)靜作用等受體活化的復(fù)雜生理和行為變化。
放射性配體結(jié)合測試結(jié)果使用克隆的大鼠MCH1測試上述各化合物。各化合物的結(jié)合親和力見表I所示。
V.化合物A的合成以下描述化合物A的合成方法。化合物A為用于上述放射性配體結(jié)合測試的放射性標(biāo)記化合物。
N-[3-(1，2，3，6-四氫-4-吡啶基)苯基]乙酰胺將飽和碳酸鈉水溶液(25mL)、4-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-1，2，3，6-四氫-1-吡啶-甲酸叔丁酯(20mmol)、3-乙酰氨基苯基硼酸(30mmol)和四(三苯基膦)合鈀(O)(1.15g)在二甲氧基乙烷(40mL)中的混合物加熱回流反應(yīng)過夜，得到4-[3-(乙酰氨基)苯基]-3，6-二氫-1(2H)-吡啶甲酸叔丁酯。使用HCl的二噁烷溶液將BOC基團(tuán)脫保護(hù)，接著堿化(pH 11-12)，得到所需產(chǎn)物。
N-(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯在二氯甲烷中，在堿存在下，由3-溴丙胺氫溴酸鹽和BOC2O制備題述化合物。
N-{3-[1-(3-氨基丙基)-1，2，3，6-四氫-4-吡啶基]苯基}乙酰胺按照方案A所述，由N-(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯和N[3-(1，2，3，6-四氫-4-吡啶基)苯基]乙酰胺與催化量的Bu4NI及堿在回流的二噁烷中反應(yīng)，得到3-(4-[3-(乙酰氨基)苯基]-3，6-二氫-1(2H)-吡啶基)丙基氨基甲酸叔丁酯。使用HCl的二噁烷溶液將BOC基團(tuán)脫保護(hù)，接著堿化(pH 11-12)，得到所需產(chǎn)物。
(4S)-3-({[3-(4-[3-(乙酰氨基)苯基]-3，6-二氫-1(2H)-吡啶基]丙基)氨基]羰基}-4-(3，4-二氟苯基)-6-(甲氧基甲基)-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸甲酯由(6S)-6-(3，4-二氟苯基)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-3，6-二氫-1，5(2H)-嘧啶二甲酸5-甲·酯1-(4-硝基苯基)酯(按照2000年6月29日公開的PCT公開號WO 00/37026制備)和N-{3-[1-(3-氨基丙基)-1，2，3，6-四氫-4-吡啶基]苯基}乙酰胺的反應(yīng)制備題述化合物。
1H NMRδ8.90(t，1H，J＝3.6Hz)，7.75(s，1H)，7.50-7.00(m，8H)，6.68(s，1H)，6.03(br s，1H)，4.67(s，2H)，3.71(s，3H)，3.47(s，3H)，3.38(ABm，2H)，3.16(m，2H)，2.71(t，2H，J＝5.4Hz)，2.56(m，4H)，2.35-1.90(br，2H)，2.17(s，3H)，1.82(p，2H，J＝7.2Hz)；ESMS，612.25(M+H)+。
氚化(4S)-3-{[(3-{4-[3-(乙酰氨基)苯基]-1-哌啶基}丙基)氨基]羰基}-4-(3，4-二氟苯基)-6-(甲氧基甲基)-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸甲酯采用描述的冷卻方法(H2，氣囊方法，甲醇，Pd/C，過夜)，將(4S)-3-({[3-(4-[3-(乙酰氨基)苯基]-3，6-二氫-1(2H)-比啶基)丙基]氨基}羰基)-4-(3，4-二氟苯基)-6-(甲氧基甲基)-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸甲酯氚化(Amersham)，得到氚化的(4S)-3-{[(3-{4-[3-(乙酰氨基)苯基]-1-哌啶基}丙基)氨基]羰基}-4-(3，4-二氟苯基)-6-(甲氧基甲基)-2-氧代-1，2，3，4-四氫-5-嘧啶甲酸甲酯((+)-異構(gòu)體)，然后將該產(chǎn)物在MCH藥理學(xué)試驗中用作放射配體。
表1
表1(續(xù)) VI.體內(nèi)方法實施以下的體內(nèi)方法以預(yù)測MCH1拮抗劑對治療肥胖癥(3-天體重和加糖濃縮牛奶)、抑郁癥(強(qiáng)迫游泳測試)、焦慮癥(社會性交往測試)和泌尿疾病(DIRC和CSTI)的效果。
MCH1拮抗劑對體重的影響(3天)將體重180-200g的雄性Long Evans大鼠(Charles River)以4只為一組關(guān)在12小時光/暗循環(huán)的籠中，使它們自由進(jìn)食和飲水。經(jīng)i.p.注射每天兩次(黑暗循環(huán)前1小時和光亮后2小時)給予試驗化合物，進(jìn)行3天。在每次早上注射后，每日給每只大鼠稱重。所有的結(jié)果以每天得到的體量(g)表示(平均值±SEM)，按照二向方差分析進(jìn)行分析。對各時間點的數(shù)據(jù)采用單向方差分析進(jìn)行分析，接著進(jìn)行post hocNewman/Keuls分析。使用GraphPad Prism(第2.01版(GraphPadSoftware，Inc.，San Diego，CA)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所有數(shù)據(jù)以平均值±S.E.M表示。
MCH1拮抗劑對加糖濃縮牛奶的消耗的影響在實驗開始時，將體重17-19g的雄性C57BL/6小鼠(Charles River)以4或5只為一組關(guān)在12小時光/暗循環(huán)的籠中，使它們自由進(jìn)食和飲水。在7天內(nèi)，將各小鼠稱重，置于獨立的籠中，在進(jìn)入光亮循環(huán)前2-4小時使其飲用加糖濃牛奶(Nestle，按1∶3的比例用水稀釋)1小時。所飲用牛奶的量通過稱量飲用前后牛奶瓶重量測得。在測試日，在飲用牛奶前30分鐘，對小鼠經(jīng)i.p.注射試驗化合物(3、10或30mg/kg在0.01％乳酸中的溶液)、d-芬氟拉明(10mg/kg在0.01％乳酸中的溶液)的溶媒(0.01％乳酸)。將在測試日飲用的牛奶的量(單位mls牛奶/kg體重)與前兩天測量各小鼠的基準(zhǔn)飲用量比較。采用單向方差分析對各時間點的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
對大鼠的強(qiáng)迫性游泳測試(FST)動物所有試驗均采用雄性Sprague-Dawley大鼠(Taconic Farms，NY)。將大鼠以每籠5只，以12:12小時光:暗循環(huán)進(jìn)行飼養(yǎng)。在進(jìn)行行為測試前，每天對大鼠進(jìn)行訓(xùn)練1分鐘，連續(xù)4天。
給藥在開始進(jìn)行5分鐘的測試期間前60分鐘，隨機(jī)選擇動物接受單次i.p.溶媒(2.5％EtOH/2.5％Tween-80)給藥、米帕明(陽性對照物；60mg/kg)給藥或測試化合物給藥。所有注射均使用帶26 3/8針管(Becton-Dickinson，VWR Scientific，Bridgeport，NJ)的1cc結(jié)核菌素注射器，進(jìn)行。注射體積為1ml/kg。
實驗設(shè)計用于本研究的方法與前述的方法(Porsolt等，1978)相似，不同之處在于本方法的水深為31cm。在本實驗中采用更深的水深是為了防止大鼠的爪接觸到水槽的底部而支持起它們的身體。將各大鼠置于單獨的有機(jī)玻璃水槽(高46cm×直徑20cm)中，水深31cm，水溫23-25℃，進(jìn)行游泳測試。游泳測試一般進(jìn)行900至1700小時，由初始的15分鐘調(diào)試階段和24小時后進(jìn)行的5分鐘測試階段組成。在5分鐘測試期間前的60分鐘，給予大鼠藥物處理。所有游泳測試后，將各大鼠從水槽中取出，用紙巾抹干，然后置于經(jīng)加熱的籠中15分鐘，隨后返回它們的籠中。使用彩色攝像機(jī)將整個測試過程錄像，然后作記錄以便隨后的評分。
行為評分在5分鐘的測試期間，由單個評價人員(該評價人員對于處理條件并不知曉)每隔5秒對大鼠的行為進(jìn)行評價。記錄的行為如下1.不動大鼠漂浮在水上，沒有擊水動作，僅僅是作出一些使得它們的頭伸出水面的必須動作；2.攀爬大鼠作出積極的行為，它們的前爪劃著水，通常為朝著壁攀爬；3.游泳大鼠積極地游泳，而不是僅僅保持它們的頭高出水面，如沿著水槽移動；和4.沉水大鼠整個身體浸入水中。
數(shù)據(jù)分析將強(qiáng)迫性游泳測試數(shù)據(jù)(不動、游泳、攀爬和沉水)進(jìn)行隨機(jī)的、單向方差分析，并使用Newman-Keuls測試進(jìn)行post hoc測試。使用GraphPad Prism(第2.01版)(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所有數(shù)據(jù)以平均值±S.E.M表示。
對小鼠進(jìn)行的強(qiáng)迫性游泳測試(FST)動物所有試驗均使用DBA/2小鼠(Taconic Farms，NY)。將小鼠以每籠5只，在12:12小時光:暗循環(huán)的受控環(huán)境下進(jìn)行飼養(yǎng)。在進(jìn)行該測試前，每天對小鼠進(jìn)行訓(xùn)練1分鐘，連續(xù)4天。該方法包括采用1.5英寸的飼養(yǎng)管進(jìn)行模擬管飼法(mock gavage)。
給藥在開始進(jìn)行游泳測試前1小時，隨機(jī)選擇動物通過口服管飼法接受單次溶媒(5％EtOH/5％Tween-80)給藥、測試化合物給藥或米帕明(60mg/kg)給藥。
實驗設(shè)計用于小鼠強(qiáng)迫性游泳測試的方法與前述用于大鼠的方法相似，但稍作改動。用于本測試的水槽為1升的燒杯(直徑10.5cm×高15cm)，裝入23-25℃水800ml(深10cm)。在1300至1700小時的測試期間，對每只小鼠僅僅進(jìn)行了一次5分鐘的游泳測試。在進(jìn)行該5分鐘測試期間前的30-60分鐘，給予藥物處理。所有游泳測試后，將各小鼠從水槽中取出，用紙巾抹干，然后置于經(jīng)加熱的籠中15分鐘。使用彩色攝像機(jī)將整個測試過程錄像，作記錄以便隨后的評分。
行為評分將2-5分鐘的測試行為在電視監(jiān)測器上回放，由審查員進(jìn)行評分。記錄不動(動物漂浮在水上，僅僅作出一些使得它們能夠漂浮的動作)和運(yùn)動(游泳并進(jìn)行不僅僅為了保持漂浮而作出的運(yùn)動)的總時間。
數(shù)據(jù)分析將強(qiáng)迫性游泳測試數(shù)據(jù)(不動、運(yùn)動時間，秒)進(jìn)行隨機(jī)的、單向方差分析，并使用Newman-Keuls測試進(jìn)行post hoc測試。使用GraphPad Prism(第2.01版，GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所有數(shù)據(jù)以平均值±S.E.M表示。
社會性活動測試(SIT)使大鼠進(jìn)行為期5天的適應(yīng)動物護(hù)理設(shè)備的訓(xùn)練，隨后在測試前在單獨的籠中飼養(yǎng)5天。每天對動物訓(xùn)練5分鐘。社交活動測試的設(shè)計和步驟按照Kennett等(1997)先前所述方法進(jìn)行。在測試日，對重量匹配的各對大鼠(±5％，彼此互不熟悉)進(jìn)行相同的處理，隨后返回它們自己的籠中。將動物隨機(jī)分成5個處理組，每組5對，給予以下一種i.p.處理測試化合物(10、30或100mg/kg)、溶媒(1ml/kg)或氯氮(5mg/kg)。在測試前1小時給藥。隨后將各大鼠置于白色的透明塑料測試箱或場地(54×37×26cm，其地板分為24塊正方形)中15分鐘。采用空調(diào)產(chǎn)生背景噪音，保持室溫為大約74°F。采用JVC攝影機(jī)(GR-SZ1型，Elmwood Park，NJ)，用TDK(HG ultimate brand)或Sony 30分鐘卡帶對所有過程錄影。所有過程進(jìn)行1300-1630小時。使用計時表(226型Sportsline，1/100秒，辨別率)記錄積極的社交活動，如自我清潔、嗅氣味、撕咬、搏擊、摔跤、追逐和上下爬行。記錄直立(動物完全用其后肢支撐起其整個身體)、自我清潔(舔、咬和抓扒身體)、洗臉(即是動物的爪在其臉上反復(fù)移動)的次數(shù)以及所穿越的方格數(shù)。不記錄被動的社交活動(動物相互躺在一旁或重疊)。隨后由一名不知曉所述處理的觀測者對所有的行為進(jìn)行評價。在各測試結(jié)束后，用濕紙巾充分擦拭所述箱。
動物將雄性albino Sprague-Dawley大鼠(Taconic Farms，NY)成對關(guān)在12小時光/暗循環(huán)(光亮?xí)r間0700小時)的籠中，使它們自由進(jìn)食和飲水。
給藥將測試化合物溶于100％v/v DMSO或5％v/v乳酸(SigmaChemical Co.，St.Louis，MO)中。將氯氮(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)溶于雙蒸水中。溶媒由50％DMSO(v/v)或100％二甲基乙酰胺(DMA)組成。所有的藥物溶液均在注射前10分鐘配制完成，測試后將溶液倒掉。所給予的藥物溶液的體積為1ml/kg。
數(shù)據(jù)分析將社交數(shù)據(jù)(交往時間、直立和穿越的方塊數(shù))進(jìn)行隨機(jī)的、單向方差分析，并使用Student-Newman-Keuls測試進(jìn)行post hoc測試。將數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(Shapiro-Wilk測試)。使用GBSTAT程序，第6.5版(Dynamics Microsystems，Inc.，Silver Spring，MD，1997)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所有的數(shù)據(jù)以平均數(shù)S.E.M表示。
排尿反射的體內(nèi)模型化合物在排尿反射中的作用按照前述的公開文獻(xiàn)(如maggi等，1987；Morikawa等，1992)描述的“膨脹引起的節(jié)律性收縮(distension-induced rhythmic contraction)”(DIRC)和大鼠的連續(xù)緩慢膀胱灌輸(Continuous Slow Transvesicular Infusion)(CSTI)模型進(jìn)行評價。
DIRC模型經(jīng)皮下給予尿烷(1.2g/kg)，將體重約300g的雌性Sprague Dawley大鼠麻醉。用PE240管插管到氣管中，為整個實驗提供清潔氣道。在中腹切口，將左右輸尿管分離。將各輸尿管遠(yuǎn)側(cè)結(jié)扎(防止流體從膀胱泄漏)，鄰近處用PE10管插管。使用4-0絲縫線縫合缺口，留下PE10管通到外部以排泄尿液。使用PE50管在距尿道開口2.5cm處插入，經(jīng)尿道插入膀胱。使用膠帶將插管固定至尾部，與壓力傳感器連接。為防止從膀胱處泄漏，使用4-0絲線將插管系緊，伸出尿道開口外部。
為開始排尿反射，首先通過對腹部底部施壓將膀胱排空，隨后填充100增量的生理鹽水(最多2ml)，直至發(fā)生自發(fā)性膀胱收縮(一般20-40mmHg，每2至3分鐘收縮一次)。一旦產(chǎn)生節(jié)奏性收縮，即經(jīng)i.v.或i.p.給予溶媒(鹽水)或測試化合物，以對膀胱活性產(chǎn)生作用。使用5-HT1A拮抗劑WAY-100635作為陽性對照物。數(shù)據(jù)以給予藥物前的收縮間隔(秒)(基線)或給予溶媒或測試化合物后的收縮間隔表示。連續(xù)緩慢膀胱灌輸(CSTI)的大鼠模型使用體重約300g的雄性Sprague Dawley大鼠進(jìn)行研究。用戊巴比妥鈉(50mg/kg，i.p.)將大鼠麻醉。在中腹切口，暴露出膀胱，將聚乙烯管(PE 50)經(jīng)膀胱的圓頂上的小切口引入其中，用縮攏縫線(pursestring suture)將插管固定。插管的另一端經(jīng)皮下從背頸部從腹內(nèi)引出。類似地，將另一插管(PE 50)經(jīng)由腹部的正中旁切口插入胃部，自由端在皮下伸至頸部。用4-0絲縫線將外部傷口縫合，對動物進(jìn)行適當(dāng)?shù)氖中g(shù)后護(hù)理以使其恢復(fù)。第二天，將動物置于大鼠制動器中。將膀胱插管的開口端經(jīng)三通開關(guān)與壓力傳感器及灌輸泵連接。通過以100μl/min的速率連續(xù)灌輸生理鹽水開始膀胱空白循環(huán)。用Power Lab在線數(shù)據(jù)收集軟件記錄反復(fù)性空白收縮。記錄基線空白曲線1小時后，經(jīng)胃內(nèi)導(dǎo)管將測試藥物或溶媒直接給藥至胃內(nèi)，監(jiān)視空白循環(huán)5小時。計算各動物處理前后(間隔30分鐘)的排尿壓力和頻率。根據(jù)100μl/min的恒定灌輸速率，從排尿頻率計算膀胱容量。測試藥物的效果以基線，即給藥前膀胱容量的百分?jǐn)?shù)表示。使用WAY 100635為陽性對照進(jìn)行比較。
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權(quán)利要求
1.一種具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-NO2、-OR3或直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個B獨立為N或CH；其中Z為CO或SO2；其中每個R獨立為-H、-F或直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟代烷基或多氟代烷基；其中R4獨立為-OR3、-NHR3、-SR3、-COR3、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-OR2或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、一氟烷基或多氟烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物具有以下的結(jié)構(gòu) 其中A、B、Z、n和R4如權(quán)利要求1所定義。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物具有以下的結(jié)構(gòu) 其中A和Z如權(quán)利要求1所定義；其中R4為芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-OR3，或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3為直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN或-OR2；其中每個R2為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n如權(quán)利要求1所定義。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A如權(quán)利要求1所定義；其中R2為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基，或芳基，其中芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2或-CN；和其中n如權(quán)利要求1所定義。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A如權(quán)利要求1所定義；其中R2為直鏈或支鏈C1-C7烷基；和其中n為3-6的整數(shù)。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I；和R2如權(quán)利要求5所定義。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F或-Cl；和其中R2為直鏈或支鏈C1-C3烷基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
9.權(quán)利要求7的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
10.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A如權(quán)利要求1所定義；和其中R2為芳基，其中芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2或-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I；和其中R2如權(quán)利要求10所定義。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F或-Cl；和其中R2為被一個或多個-F、-Cl或-Br任選取代的芳基。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H、-F或-Cl；和其中R2為由一個或多個-F任選取代的芳基。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
15.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A、Z、n和R4如權(quán)利要求1所定義。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A如權(quán)利要求1所定義；和其中R4為由一個或多個以下的基團(tuán)任選取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-OR3或者直鏈或支鏈C1-C7烷基；其中每個R3獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN或-OR2；其中每個R2獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基；和其中n如權(quán)利要求1所定義。
17.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A如權(quán)利要求1所定義；其中Z如權(quán)利要求1所定義；其中R4獨立為-OR3、-NHR3、-COR3或-SR3；其中每個R3獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基任選由一個或多個以下的基團(tuán)取代-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中R2為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基，或任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中Z如權(quán)利要求1所定義；其中每個A獨立為-H、-F、-Cl、-Br或-I；其中R4獨立為-OR3、-NHR3、或-COR3；其中R3為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中每個R2獨立為-H、直鏈或支鏈C1-C7烷基，或任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN；和其中n為1-6的整數(shù)。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中每個A獨立為-H或-F；其中R3為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-CN、-OR2或-NHR2；其中R2獨立為直鏈或支鏈C1-C7烷基，或任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br或-I；和其中n為1-6的整數(shù)。
20.權(quán)利要求17的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A為-H、-F、-Cl、-Br或-I；其中R3為任選被-NHR2取代的芳基；和其中R2為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br、-I。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
22.權(quán)利要求18的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
23.權(quán)利要求18的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu) 其中A為-H、-F、-Cl、-Br或-I；其中R3為任選被一個或多個以下的基團(tuán)取代的芳基-F、-Cl、-Br或-I。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
25.權(quán)利要求23的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
26.一種藥用組合物，它包含權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
27.一種藥用組合物，它通過將權(quán)利要求1的化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合而制備。
28.一種制備藥用組合物的方法，它包括將權(quán)利要求1的化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
29.一種治療患有由MCH1受體介導(dǎo)的疾病的患者的方法，該方法包括給予患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述治療有效量在約0.03-約300mg之間。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述疾病為抑郁癥。
32.權(quán)利要求30的方法，其中所述疾病為焦慮癥。
33.權(quán)利要求30的方法，其中所述疾病為肥胖癥。
34.權(quán)利要求30的方法，其中所述疾病為尿失禁。
35.一種治療患有抑郁癥、焦慮癥、尿失禁或肥胖癥的患者的方法，該方法包括給予患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
36.權(quán)利要求35的方法，其中所述治療有效量在約0.03-約300mg之間。
37.權(quán)利要求35的方法，其中所述患者患有抑郁癥。
38.權(quán)利要求35的方法，其中所述患者患有焦慮癥。
39.權(quán)利要求35的方法，其中所述患者患有肥胖癥。
40.權(quán)利要求35的方法，其中所述患者患有尿失禁。
全文摘要
本發(fā)明涉及作為黑色素聚集激素－1(MCH1)受體的選擇性拮抗劑的化合物。本發(fā)明提供了一種包含治療有效量的本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。本發(fā)明提供了一種通過將治療有效量的本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受的載體混合制得的藥用組合物。本發(fā)明還提供了一種制備包含治療有效量的本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物的方法。本發(fā)明還提供一種減輕患者體重的方法，該方法包括給予患者有效降低其體重的量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還提供一種治療患有抑郁癥和/或焦慮癥的患者的方法，該方法包括給予患者有效治療患者的抑郁癥和/或焦慮癥的量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還提供一種治療患有尿失禁的患者的方法。
文檔編號A61K31/4545GK1665786SQ03815766
公開日2005年9月7日 申請日期2003年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月3日
發(fā)明者M·馬扎巴迪, Y·姜, K·盧, C·－A·陳, J·德萊昂, J·維策爾, K·安德森 申請人:H·隆德貝克有限公司