專利名稱：一種生物兼容的藥物載體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物制藥，尤其涉及一種生物兼容的藥物控釋載體的制備，該載體以蛋白質(zhì)和磷脂等生物活性物質(zhì)作為主要成分。
與本發(fā)明相關(guān)的背景技術(shù)控制釋放技術(shù)在當(dāng)今的藥物以及制藥學(xué)領(lǐng)域變得越來(lái)越重要，與傳統(tǒng)的配料方式相比，可控制釋放藥物在降低毒副作用、延長(zhǎng)藥物活性時(shí)間、保護(hù)敏感性藥物免受腸胃消化道中酶或酸的分解破壞，以及掩蓋異味等很多方面具有優(yōu)勢(shì)。
對(duì)于藥物的控制釋放來(lái)說(shuō)，微膠囊化技術(shù)是一種靈活多樣的技術(shù)，各種各樣的微結(jié)構(gòu)，諸如脂質(zhì)體、微凝膠、微乳液、聚合物微囊以及膠體粒子等均被廣泛應(yīng)用為藥物的載體。
形式多樣的微結(jié)構(gòu)為藥物的裝料、調(diào)劑、以及釋放提供了多種選擇，對(duì)這些微結(jié)構(gòu)進(jìn)行正確的修飾，就可以制備出具有某些生物功能的微載體。例如，采用層層組裝方法制備新型微膠囊的技術(shù)，可以將藥物包封在選定的材料中。上述研究的相關(guān)文獻(xiàn)披露的材料一般為帶電的聚電解質(zhì)，利用正負(fù)電荷的相互作用將帶電的聚電解質(zhì)層層組裝起來(lái)，進(jìn)而將藥物包封在其囊壁中。囊壁的材料通常是合成的可生物降解的高分子聚合物，例如聚氨基葡糖、葡聚糖硫酸酯、羧甲基纖維素等多糖類聚合物。參見(jiàn)Xingpin Qiu等所著的題為“Studies on the Drug Release Properties of Polysaccharide MultilayersEncapsulated Ibuprofen Microparticles”，發(fā)表在Langmuir，2001，17，5375-5380，此類材料具有一定的生物兼容性。
仿生材料的制備及在分子水平上對(duì)生物活性組織如細(xì)胞與細(xì)胞膜認(rèn)識(shí)的提高，使得關(guān)于蛋白質(zhì)和磷脂復(fù)合膜的研究日趨深入。蛋白質(zhì)和磷脂復(fù)合膜材料在醫(yī)學(xué)上作為藥物的有機(jī)載體，具有良好的生物兼容性，但是由于其不穩(wěn)定性使制備方面存在困難。因而，需要進(jìn)一步尋找在活性體系中和流體界面上穩(wěn)定的載體。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題針對(duì)蛋白質(zhì)和磷脂復(fù)合膜材料所存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于選用適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)和磷脂構(gòu)筑新型的藥物載體，并解決該載體在活性體系中和流體界面上的穩(wěn)定性，從而為藥物控釋提供新的途徑。
本發(fā)明的技術(shù)方案根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種藥物控釋載體，該載體以藥物為核，由蛋白質(zhì)和磷脂在該核的外部有序組裝而構(gòu)成。
上述藥物控釋載體優(yōu)選由人血清白蛋白(HSA)與L-α-雙十四烷基磷脂酸(DMPA)結(jié)合組裝，但并不限于此。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種藥物控釋載體的制備方法，包括以下步驟a.將藥物顆粒放入蛋白質(zhì)的磷酸緩沖溶液中；b.放置適當(dāng)時(shí)間以使蛋白質(zhì)在顆粒上吸附；c.進(jìn)行離心分離處理，去掉顆粒上未吸附的蛋白質(zhì)溶液；
d.清洗吸附有蛋白質(zhì)的顆粒；e.將清洗后的顆粒加入磷脂溶液進(jìn)行吸附；f.離心分離并清洗，去掉顆粒上未吸附的磷脂溶液；以及g.多次重復(fù)步驟a-f，以獲得藥物控釋載體。
本發(fā)明的有益效果公開(kāi)的期刊和文獻(xiàn)中未出現(xiàn)選擇蛋白質(zhì)和磷脂結(jié)合作為藥物載體，是本發(fā)明人發(fā)展起來(lái)的新型體系。傳統(tǒng)上認(rèn)為此兩種材料結(jié)合穩(wěn)定性不夠，從而造成局限。而本發(fā)明采用這兩種生物材料，利用層層吸附技術(shù)，通過(guò)多次實(shí)驗(yàn)，最后得到了穩(wěn)定性和生物兼容性俱佳的新型藥物載體，并實(shí)現(xiàn)了藥物控制釋放。
附圖簡(jiǎn)要描述

圖1本發(fā)明的藥物控釋載體制備方法示意圖；圖2本發(fā)明的10μm-20μm的人血清白蛋白和磷脂膠囊化的布洛芬晶體釋放過(guò)程顯微相差圖；圖3是10μm-20μm純布洛芬晶體的釋放過(guò)程顯微相差圖；以及圖4本發(fā)明的20μm-30μm的人血清白蛋白和磷脂膠囊化的布洛芬晶體釋放過(guò)程顯微相差圖。
具體實(shí)施例方式
在下文將結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述，其目的是使本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)人員更容易理解本發(fā)明的實(shí)施及其優(yōu)點(diǎn)，而不能構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
除非在本發(fā)明說(shuō)明書(shū)中另有定義，否則在此所有的技術(shù)術(shù)語(yǔ)都是根據(jù)本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所通常使用和理解的慣用定義來(lái)使用。
藥物模型本發(fā)明采用布洛芬作為模型藥物，沉淀分取以得到一定尺寸范圍內(nèi)的布洛芬晶體。該模型藥物是一種酸性的、非類脂醇的抗消炎的藥物，其在pH7以下時(shí)難溶，而在pH7以上可溶，故溶液的pH值對(duì)布洛芬的溶解有影響。該模型藥物的選用，是為本發(fā)明進(jìn)一步應(yīng)用提供啟示。
囊壁材料的選用本發(fā)明采用的作為控釋膠囊的囊壁材料為蛋白質(zhì)和磷脂。磷脂是構(gòu)成人體生物膜的重要組成部分，磷脂的種類繁多。相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)披露，，磷脂和蛋白質(zhì)之間的相互作用主要是靜電作用和疏水作用。因此，本發(fā)明優(yōu)選磷脂中的非電中性的磷脂酸作為構(gòu)筑藥物載體的材料。
人血清白蛋白是從人血漿中分離制得的，其在人體內(nèi)無(wú)抗原性、無(wú)過(guò)敏反應(yīng)，同時(shí)具有很強(qiáng)的藥物親和力，可以與很多藥物可逆地結(jié)合發(fā)揮運(yùn)輸作用。人血清白蛋白不是糖基化的蛋白質(zhì)，不參與抑制免疫反應(yīng)。因此，優(yōu)選人血清白蛋白作為構(gòu)成藥物載體的材料。
蛋白質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu)的不同也極大地影響了磷脂和蛋白質(zhì)復(fù)合膜的形成和穩(wěn)定。綜合考慮材料的配合效果，優(yōu)選雙十四烷基磷脂酸(DMPA)和人血清白蛋白，這兩種材料相互作用較強(qiáng)，形成的復(fù)合膜比較穩(wěn)定。
蛋白質(zhì)的緩沖溶液的配制配制適當(dāng)pH的蛋白質(zhì)緩沖溶液，優(yōu)選使pH值在蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)以下，從而達(dá)到調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)電性的目的，使其帶正電荷。本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，緩沖溶液為酸性。
磷脂的水溶液的配制將磷脂(優(yōu)選L-α-雙十四烷基磷脂酸)溶解在氯仿∶甲醇＝1∶1的混合溶劑中，在適當(dāng)?shù)臏囟认滦D(zhuǎn)蒸發(fā)后，加入定量的純水，進(jìn)行超聲處理，獲得磷脂的水溶液。所選磷脂優(yōu)選應(yīng)當(dāng)包含磷脂酸，從而使磷脂荷帶負(fù)電。
控釋載體的制備步驟如圖1所示，首先，選取一定尺寸范圍內(nèi)的布洛芬晶體，將適量蛋白質(zhì)溶液布洛芬晶體中，吸附一段時(shí)間后，離心分離、清洗、去除未吸附的蛋白質(zhì)溶液；然后加入磷脂溶液，吸附一段時(shí)間后，離心分離，清洗、去除未吸附的磷脂溶液；反復(fù)上述步驟數(shù)次(優(yōu)選8次以上)，將蛋白質(zhì)和磷脂通過(guò)交替吸附的方式包裹到藥物晶體的表面，從而使得藥物晶體膠囊化。
實(shí)施例1按照本發(fā)明的方法，取50mg尺寸在10μm-20μm的布洛芬晶體顆粒，加入2ml人血清白蛋白(HSA)的磷酸緩沖溶液，吸附30min后，離心分離5min，去掉上層多余的蛋白質(zhì)溶液，清洗2-3次，然后加入2ml磷脂(DMPA)水溶液，吸附30min后，離心分離5min，去掉上層多余的磷脂水溶液，清洗2-3次，反復(fù)上述過(guò)程，最終獲得包裹8層的布洛芬晶體。
取一定量的膠囊化的布洛芬晶體，加入適量的pH＝7.4的緩沖溶液，在顯微鏡下觀察記錄了布洛芬的釋放過(guò)程。如附圖2所示。隨著時(shí)間的推移，布洛芬緩慢釋放，可以看到蛋白質(zhì)和磷脂的空心膠囊，這不僅說(shuō)明本發(fā)明成功地構(gòu)筑了一種生物藥物載體，更可以說(shuō)明這種載體具有一定的穩(wěn)定性和強(qiáng)度。
比較例取同等量的純的布洛芬的晶體，加入同等量的pH＝7.4的緩沖溶液，進(jìn)行釋放實(shí)驗(yàn)。
利用熒光顯微鏡的相差觀測(cè)手段，可觀測(cè)藥物釋放的全過(guò)程，并采用CCD攝像機(jī)和計(jì)算機(jī)錄像技術(shù)記錄了藥物釋放的完整過(guò)程，對(duì)藥物釋放的各個(gè)環(huán)節(jié)實(shí)施監(jiān)控并獲得動(dòng)態(tài)的數(shù)據(jù)信息。其記錄結(jié)果如附圖3所示，與實(shí)施例1所用的同樣尺寸、未包封的布洛芬晶體，在25秒時(shí)基本溶解，而膠囊化的布洛芬在40秒時(shí)仍然明顯存在(如圖2所示)。與膠囊化的布洛芬的釋放過(guò)程相比較，可以看出復(fù)合載體具有明顯的緩釋作用。
實(shí)施例2按照本發(fā)明的方法，將實(shí)施例1中的尺寸在10μm-20μm的布洛芬晶體顆粒替換為尺寸在20μm-30μm的布洛芬晶體顆粒，基于同樣的操作和原理進(jìn)行了藥物載體的構(gòu)筑和釋放實(shí)驗(yàn)，如附圖4所示。
結(jié)論將人血清白蛋白和磷脂包裹在布洛芬晶體顆粒的表面，不僅獲得了一種生物兼容的藥物載體，并實(shí)現(xiàn)了藥物的緩釋功能。由此可見(jiàn)，對(duì)于低水溶性的藥物，采用蛋白質(zhì)和磷脂使其膠囊化，進(jìn)行藥物的控制性釋放是可行的。
盡管本發(fā)明已經(jīng)參照優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行了說(shuō)明，但是，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。本發(fā)明的各種更改、變化、和等同物由所附的權(quán)利要求書(shū)的內(nèi)容涵蓋。
權(quán)利要求
1.一種藥物控釋載體，所述載體以所述藥物為核，由蛋白質(zhì)和磷脂在所述核的外部有序組裝而構(gòu)成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物控釋載體，其中所述藥物的溶解度隨pH值變化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物控釋載體，其中所述藥物是酸性的非類脂醇類藥物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物控釋載體，其中所述的藥物核是布洛芬晶體顆粒。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物控釋載體，其中所述的磷脂是磷脂酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一權(quán)利要求所述的藥物控釋載體，其中所述蛋白質(zhì)是人血清白蛋白，磷脂是L-α-雙十四烷基磷脂酸。
7.一種藥物控釋載體的制備方法，包括以下步驟a.將藥物顆粒放入蛋白質(zhì)的磷酸緩沖溶液中；b.放置適當(dāng)時(shí)間以使所述蛋白質(zhì)在所述顆粒上吸附；c.進(jìn)行離心分離處理，去掉所述顆粒上未吸附的所述的蛋白質(zhì)溶液；d.清洗吸附有所述蛋白質(zhì)的顆粒；e.將清洗后的顆粒加入磷脂溶液進(jìn)行吸附；f.離心分離并清洗，去掉所述顆粒上未吸附的所述磷脂溶液；以及g.多次重復(fù)步驟a-f，獲得藥物控釋載體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述蛋白質(zhì)的磷酸緩沖溶液pH值在蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)以下，使蛋白質(zhì)帶正電荷。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述蛋白質(zhì)的磷酸緩沖溶液是酸性的。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述的蛋白質(zhì)是人血清白蛋白，所述的磷脂是L-α-雙十四烷基磷脂酸。
11.根據(jù)權(quán)利要求7所述方法，其中所述的藥物是低水溶性的藥物。
12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述藥物是酸性的非類脂醇類藥物。
13.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述藥物是布洛芬。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物制藥，尤其涉及一種生物兼容的藥物控釋載體的制備，該載體以蛋白質(zhì)和磷脂等生物活性物質(zhì)作為主要成分。本發(fā)明的目的在于選用適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)和磷脂構(gòu)筑新型的藥物載體，解決該載體在生物體系中和流體界面上的穩(wěn)定性，為藥物控釋提供新的途徑。
文檔編號(hào)A61K9/22GK1511589SQ0216002
公開(kāi)日2004年7月14日 申請(qǐng)日期2002年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月30日
發(fā)明者李峻柏, 安智華 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所