1000:130:450,制得混合物 料;3)浸提:將混合物料在超聲功率750-1500W條件下,浸提30-50分鐘;4)過濾:用板框壓濾 機或者廂式壓濾機對浸提后的混合物料進行過濾,過濾壓力為0.8-1.5Mpa; 5)培蒸滅菌:將 過濾后的混合物料進行培蒸滅菌,強度為在95-115°C的溫度條件下連續(xù)滅菌20-60分鐘,然 后冷卻至25-30°C;6)發(fā)酵:將活化后制備的酵母菌菌液、雙歧桿菌菌液、嗜酸乳桿菌菌液、 保加利亞乳桿菌菌液、嗜熱鏈球菌菌液按酵母菌菌液:雙歧桿菌菌液:嗜酸乳桿菌菌液:保 加利亞乳桿菌菌液:嗜熱鏈球菌菌液=1:1:2:2:1的體積比混合,作為發(fā)酵種子液,將發(fā)酵種 子液接種于滅菌冷卻后的混合物料中,發(fā)酵種子液的接種量為發(fā)酵物料總重量的5%,在無 氧級嫌氣發(fā)酵罐中進行二級發(fā)酵,控制無氧級嫌氣發(fā)酵罐中含氧量低于5%,二級發(fā)酵包括 第一階段和第二階段,第一階段發(fā)酵溫度為32-34度,發(fā)酵液PH為6-6.5,發(fā)酵時間為24-48 小時;第二階段發(fā)酵溫度為36-38度,發(fā)酵液PH為5-6,發(fā)酵時間為48-96小時;7)后處理:發(fā) 酵結束后,出罐,發(fā)酵產(chǎn)物先用雙聯(lián)過濾器進行過濾,濾液于離屯、機中進行離屯、沉降,離屯、 機轉(zhuǎn)速為2000-5000轉(zhuǎn)/分鐘,離屯、時間為5-10分鐘,收取上清液制得算蒲頭酵素;8)調(diào)配: 將算蒲頭酵素液、算蒲頭勻漿液、食鹽、麥芽糊精按質(zhì)量比3-6:2-3:1-2:1-2進行混合,混合 后在夾層鍋中攬拌溶解均勻,控制固形物含量在45-50%之間,制得混合漿液;9)均質(zhì):將混 合漿液用30-40Mpa的壓力在均質(zhì)機中進行均質(zhì),使得混合漿液更加細膩和均勻,有利于成 品質(zhì)量及風味的穩(wěn)定;10)脫氣:采用真空脫氣機對均質(zhì)后的漿液進行脫氣處理,脫氣條件 為:40-50°C,壓強為16-25邸a; 11)殺菌:采用福照殺菌,丫射線,福照劑量9.5KGy; 12)干燥: 采用噴霧干燥器或真空冷凍干燥,制得固體酵素調(diào)味品,噴霧干燥條件為:進風溫度160-190°C,排風溫度90-96°C,干燥后物料含水量< 3.6% ;真空冷凍干燥條件為:真空度30-IOOPa,擱板溫度前化,50-60°C,然后36-40°C,物料厚度3-6mm,冷阱溫度零下30°C到零下40 °C。
[001引 實施例2 實施例2的制備方法同實施例1,不同之處在于步驟2)中,算蒲頭勻漿液:甘馨渣勻漿 液:混合勻漿液:水的質(zhì)量比為1000:50:50:300;步驟4)中的接種量為4%。
[0019] 實施例3 實施例3的制備方法同實施例1,不同之處在于步驟2)中,算蒲頭勻漿液:甘馨渣勻漿 液:混合勻漿液:水的質(zhì)量比為1000:300:200:600;步驟4)中的接種量為6%。
[0020] 實驗例: 竹算酵素的減肥功能檢驗 實驗儀器:高速冷凍離屯、機(Sigma 3-16K),灌胃針,電子砰,手術剪,高壓滅菌鍋。
[0021 ] 動物與實驗方法:Wistar大鼠,雄性,體重220±23g,購自于浙江省疾控中屯、。
[0022] 實驗分組:大鼠適應性飼養(yǎng)一周,隨機分為3組: ① 正常組(n=10):給予維持飼料,灌胃給予蒸饋水(1.5mL/100g) ② 模型組(n=10):給予高脂飼料(70%基礎飼料+15%薦糖+15%豬油),灌胃給予蒸饋水 (1.5mL/100g) ③ 劑量組(n=10):給予高脂飼料,灌胃給予實施例1制備的竹算酵素(1.5 mL/lOOg) 實驗方法:適應性飼養(yǎng)一周后,按大鼠體重隨機分為兩組,將其中10只大鼠給予正常飼 料,作為正常組。30只大鼠給予高脂飼料,每周記錄體重,給食量,撒食量和剩食量。飼養(yǎng)兩 周后,給予高脂飼料的大鼠按體重增重順序,淘汰體重增重較低的1/3肥胖抵抗大鼠。
[0023] 將篩選出的20只肥胖敏感大鼠分為模型組和劑量組,模型組和劑量組繼續(xù)給予高 脂飼料,正常組繼續(xù)給予正常飼料,劑量組給予竹算酵素(1.5 mL/100 g),模型組和正常組 給予蒸饋水(1.5mL/100g),受試樣品給予時間為六周。實驗結束后,稱量體重,稱量剩食量, 解剖取腎周圍脂肪、睪丸周圍脂肪計算脂/體比。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》 (2003版),建立大鼠肥胖模型,觀察正常組、模型組、竹算酵素組大鼠的體重變化、體內(nèi)脂肪 變化、脂/體比、攝食量W及食物利用率等各指標,W評價竹算酵素的減肥作用。
[0024] 數(shù)據(jù)處理:試驗數(shù)據(jù)采用方差分析進行統(tǒng)計處理。應用SPSS10.0軟件進行方差分 析和t檢驗,p<0.05為差異顯著,有統(tǒng)計學意義。
[0025] 竹算酵素對大鼠體重、體重增重、脂肪重量、脂/體比、攝食量、食物利用率的影響 (x±'引結果見表1。
[0026] 表1
與模型組比較,中<0.05, *中<0.01; 1.竹算酵素對大鼠體重的影響 由表1可見,正常組、模型組和酵素組大鼠的初始體重無顯著性差別(P〉〇. 05),給予高 脂飼料六周后,正常組和竹算酵素組大鼠的末次體重顯著低于模型組大鼠體重(P<〇.05)。 正常組、酵素組大鼠的體重增重顯著低于模型組大鼠的體重增重(P<〇.05),其中,酵素組大 鼠的體重增重最不明顯(P<〇. Ol)。
[0027] 本實驗研究結果表明,正常組、模型組和給酵素組大鼠的初始體重無顯著性差異, 給予高脂飼料八周后,模型組大鼠的體重和體重增重明顯高于給予正常飼料的大鼠,表明 高脂飼料過多食用會造成大鼠體內(nèi)脂肪的積累,增加了大鼠體重,導致肥胖,,說明動物肥 胖模型制造成功。=組初始體重無明顯差異,但實驗八周之后,體重卻有顯著性差異,表明 竹算酵素可W抑制大鼠體重的增長。
[0028] 2.竹算酵素對體內(nèi)脂肪重量和脂肪/體重的影響 由表1可見,正常組和竹算酵素組大鼠的體內(nèi)脂肪重量顯著低于模型組大鼠體內(nèi)脂 肪重量(p<〇.05),其中,正常組大鼠的體內(nèi)脂肪重量最少(P<〇.01)。
[0029] 在脂肪/體重值上,S組沒有明顯的差別(P〉0.05)。可能原因為:脂肪重量較多的 大鼠體重會偏重,脂肪重量較少的大鼠體重也會偏輕,所W可能導致二者的比值沒有顯著 性的差異。
[0030] 本實驗研究結果表明,脂肪重量是大鼠體脂水平和肥胖程度衡量指標之一。隨著 體重的增長,大鼠體內(nèi)脂肪重量也相應的提高,給予高脂飼料模型組大鼠的脂肪重量顯著 高于給予正常飼料大鼠的脂肪重量,可知高脂飼料造成了大鼠體內(nèi)脂肪的積累。給予高脂 飼料的同時給予竹算酵素大鼠的脂肪重量顯著低于給予高脂飼料模型組大鼠的脂肪重量, 表明竹算酵素可W有效的抑制大鼠體內(nèi)脂肪的積累。
[0031] 3.竹算酵素對大鼠攝食量和食物利用率的影響 由1可見,正常組、模型組和竹算酵素組大鼠攝食量之間差異均無顯著性(P〉〇.05)。
[0032] 本實驗研究結果表明,給予高脂飼料的模型組大鼠與給予正常飼料大鼠攝食量沒 有顯著性差異,但高脂飼料的熱量要大于正常飼料的熱量,從而引起大鼠機體的肥胖;給予 竹算酵素的大鼠攝食量與模型組相比沒有顯著性差異,表明給酵素組攝入的熱量與模型組 大鼠攝入的熱量沒有顯著性差別,而給酵素組的體重、體重增重和脂肪重量卻明顯低于模 型組,表明竹算酵素可W有效的抑制大鼠體重和脂肪重量的增長,從而具有減肥的作用。 [003引 4.結論 竹算酵素對大鼠減肥功能研究的試驗結果表明:試驗末期模型對照組體重高于正常 組,且差異具有顯著性(P<0.05),說明肥胖模型成立;各組大鼠初始體重無顯著性差異,試 驗末期,竹算酵素組的體重、體內(nèi)脂肪重量低于模型對照組且差異具有顯著性(P<0.05),酵 素組大鼠的體重增重明顯低于模型對照組大鼠且差異具有顯著性(P<0.01),而攝食量卻無 明顯差別,說明竹算酵素可W有效抑制大鼠體重增長和脂肪的積累,動物減肥功能試驗結 果陽性,具有減肥的功效。
[0034]竹算酵素改善胃腸功能檢驗 實驗材料:實施例1制備的竹算酵素,嗎下嘟片(西安揚森制藥有限公司生產(chǎn),規(guī)格 IOmg X 30片KlOmg嗎下嘟片加入蒸饋水IOOmL制成嗎下嘟溶液,即每毫升溶液含嗎下嘟 O.lmg),葡聚糖藍 2000(Sigma) 儀器:高速冷凍離屯、機(Sigma 3-16K),灌胃針,電子砰,手術剪,高壓滅菌鍋,UV-180