專利名稱：吡唑啉衍生物及其制備方法與應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種吡唑啉衍生物及其制備方法與其作為Zn2+熒光探針的應用。
背景技術：
金屬鋅作為人體中第二大過渡金屬元素，在人體中有著十分重要的地位。眾多以鋅離子為中心的酶以及與DNA相連接的蛋白質(zhì)均在人體中起到了舉足輕重的作用。盡管鋅離子(Zn2+)在作用時與酶和蛋白質(zhì)緊緊相連，但游離的Zn2+依然存在于眾多人體組織，如大腦、腸道和視網(wǎng)膜中。因此，當今的化學研究及生物研究領域急需一種高效率檢測Zn2+的手段。目前，雖然有文獻報道利用熒光技術檢測Zn2+，但是以吡唑啉衍生物為主要結(jié)構單元的Zn2+離子探針尚不多見。在前期研究中，我們開發(fā)了一種吡唑啉衍生物作為Zn2+離 子探針，可在乙腈和水中進行突光檢測，但是突光增強僅僅4倍Sensors&Actuators:B. Chemical. 2011，159，148-153。因此需要對結(jié)構進行修飾，改進其應用性能。尤其是應用于檢測活細胞內(nèi)Zn2+的探針亟待開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種吡唑啉衍生物及其制備方法，同時利用其作為Zn2+熒光探針具有非常高的選擇性和靈敏度，并用于活細胞中檢測鋅離子的存在。本發(fā)明所述的吡唑啉衍生物，結(jié)構式如式(I)所示
權利要求
1.一種吡唑啉衍生物，結(jié)構式如式(I)所示
2.權利要求I所述吡唑啉衍生物的合成方法，是由間-甲基-鄰羥基苯乙酮(I)與鄰-烯丙氧基苯甲醛(2)在乙醇/水中反應得到查耳酮衍生物(3);將制得查耳酮與氨基硫脲在乙醇/水回流條件下，反應4±0. I小時，經(jīng)柱層析純化得到式(I)所示含吡唑啉衍生物衍生物(4);反應式如下
3.權利要求I所述含吡唑啉衍生物作為活細胞內(nèi)Zn2+熒光探針的應用。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述活細胞為PC12細胞。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種吡唑啉衍生物的制備方法及其作為Zn2+熒光探針的應用。該吡唑啉衍生物的結(jié)構式如式(I)所示。本發(fā)明涉及吡唑啉衍生物本身不發(fā)熒光，在EtOH/HEPES(20mM,pH7.2,1:1,體積比)緩沖溶液中與Zn2+作用后，熒光增強40倍。其作為Zn2+熒光探針，具有非常好的選擇性，其對Zn2+的熒光檢測限為6.1×10-7M，而且該化合物可以用于PC12細胞內(nèi)Zn2+熒光成像和定位檢測。
文檔編號C12Q1/02GK102796045SQ201210334638
公開日2012年11月28日 申請日期2012年9月11日 優(yōu)先權日2012年9月11日
發(fā)明者趙寶祥, 苗俊英, 張尚立, 張喆, 王方悟 申請人:山東大學