專利名稱：一種棘白菌素生物轉(zhuǎn)化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物轉(zhuǎn)化領(lǐng)域，具體涉及利用環(huán)糊精及其衍生物或其他助溶劑提高棘白菌素(Echinocandins)生物轉(zhuǎn)化效率的方法。
背景技術(shù)：
棘白菌素類抗生素是20世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)的一類具有抑制￠-1,3-葡聚糖合成酶酶活性的天然產(chǎn)物，具有很好的抗真菌活性，其基本結(jié)構(gòu)式見(jiàn)式I。由于天然棘白菌素類化合物具有R2的脂肪酸側(cè)鏈，在人體具有一定的溶血毒性，因此已經(jīng)上市的米卡芬凈、阿尼芬凈和還在臨床研究的aminocandin等抗真菌藥物都需要對(duì)脂肪酸側(cè)鏈重新修飾。而這一修飾的前提是需要將原有脂肪酸側(cè)鏈脫去，這一過(guò)程采用化學(xué)法很難完成，因此一般采用生物轉(zhuǎn)化脫側(cè)鏈。
權(quán)利要求
1.一種棘白菌素(Echinocandins)類化合物的生物轉(zhuǎn)化方法,包括如下步驟 1)微生物細(xì)胞培養(yǎng)與全細(xì)胞脫?；傅闹苽?； 2)棘白菌素生物轉(zhuǎn)化將棘白菌素類化合物、緩沖溶液以及助溶劑充分混合，再加入步驟I)得到的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化， 其特征在于步驟2)中的助溶劑為3 -環(huán)糊精或其衍生物和/或其他有機(jī)溶劑或其混合物，步驟I)所述微生物為放線菌或鏈霉菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于所述放線菌為游動(dòng)放線菌，鏈霉囷為環(huán)圈鏈霉囷。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于所述緩沖溶液中添加有環(huán)糊精或其衍生物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于環(huán)糊精或其衍生物選自￠-環(huán)糊精或其衍生物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于3-環(huán)糊精衍生物為二甲基-0 -環(huán)糊精或羥丙基-P -環(huán)糊精。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在環(huán)糊精或其衍生物與棘白菌素質(zhì)量比為I : 0. 17-1。
7.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征所述緩沖溶液中添加有其他有機(jī)助溶劑，其中所述助溶劑不是DMS0。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于其他有機(jī)助溶劑為甲醇、乙醇或丙酮。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于甲醇或乙醇或丙酮的添加量為使最終轉(zhuǎn)化體系中甲醇、乙醇或丙酮的濃度為10-50mL/L。
10.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的方法，其特征在于轉(zhuǎn)化體系的pH為5-9。
11.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的方法，其特征在于棘白菌素為EchinocandinB、aculeacin A 或 FR901379。
12.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種棘白菌素生物轉(zhuǎn)化方法，其特征在于步驟2)中全細(xì)胞脫酰基酶的添加量為使最終轉(zhuǎn)化體系中干細(xì)胞的濃度為0. 5-5g干細(xì)胞/L，棘白菌素類化合物的添加量為使最終轉(zhuǎn)化體系中棘白菌素的濃度為0. 5-5g/L。
13.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種棘白菌素生物轉(zhuǎn)化方法，其中轉(zhuǎn)化溫度為25-500C，轉(zhuǎn)化體系pH為5-9，轉(zhuǎn)化緩沖體系中緩沖鹽濃度為0. 02-0. 2M，緩沖鹽可以是磷酸鹽、檸檬酸鹽、醋酸鹽和Tris鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種利用放線菌全細(xì)胞或發(fā)酵液作為催化劑的棘白菌素生物轉(zhuǎn)化方法。本發(fā)明還提供了一種利用環(huán)糊精及其衍生物或其他助溶劑的棘白菌素生物轉(zhuǎn)化方法。本發(fā)明所涉及的轉(zhuǎn)化體系，其特征在于能有效提高疏水性的棘白菌素類化合物在水溶液中的溶解度，提高底物的利用率和反應(yīng)速率，提高產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率。本發(fā)明所涉及游動(dòng)放線菌及其突變株在含有可同化的碳和氮源的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基里并在通氣條件下產(chǎn)生全細(xì)胞脫?；?，該酶可用于棘白菌素的生物轉(zhuǎn)化。
文檔編號(hào)C12P21/04GK102618606SQ20111003242
公開(kāi)日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2011年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月30日
發(fā)明者朱進(jìn)偉, 滕云, 胡海潮, 陳曉靜, 陳正杰 申請(qǐng)人:浙江海正藥業(yè)股份有限公司