專利名稱：酶法制備手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸單酰胺類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種基于生物酶催化制備手性化合物的方法，尤其是指一種酶 法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的方法。
背景技術(shù)：
手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物(1)，尤其是 (4R， 5S)-5-取代甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2，6-二氧哌啶-3-羧酸是合成帕 羅醇的重要屮間體。帕羅醇是合成抗艾滋病藥物和抗抑郁癥藥物帕羅西汀及其 衍生物的一種重要的中間體。
COOH
\ COR2
(R尸甲基、乙基、羥基、對，鄰或間氟苯基或者對甲苯基等芳環(huán)取代基；R2= NR4R5， R4、 R5=氫、甲基、乙基、正或異丙基等垸基；R3為C廣C6的垸基、
C2-C6的烯烴垸基、C2-C6的炔烴烷基、d-C6的鹵代垸基、CrC6雜原子取代烷 基、C3-C8的環(huán)垸基和芳烴取代基等。)
(I)
帕羅西汀由美國Smith-Kline Beecham公司開發(fā)，是幾種SSRI中抑制5-HT 再攝取效力最強(qiáng)者，但其抑制NE的再攝取能力則小得多，其高選擇性5-羥色胺 再攝取抑制劑對多巴胺、組胺受體不敏感，僅對M受體有很弱的親和力。帕羅西
R下制備如式(I )所示的4-取代-2， 6-二氧哌啶-反應(yīng)方程式為
;-二甲酸單酰胺類化合物，其
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中，
R產(chǎn)甲基、乙基、羥基、對，鄰或間氟苯基或者對甲苯基；
RfNR4R5， R4、 Rs=氫、甲基、乙基、正或異丙基；
R3為d-C6的烷基、C2-C6的烯烴垸基、C2-C6的炔烴垸基、d-Ce的鹵 代垸基、Q-C6雜原子取代烷基、C3-C8的環(huán)垸基和芳烴取代基；
所述的生物酶為脂肪酶、酯酶或者水解酶。所述生物酶酶為Lipase from Thermomyces lanuginosus， Lipase B from 朋ton:rica， Lipase from
Qm^/e i wgosa , Lipase P S "Jmawo '， S!D, Lipase v451 "Xmflwo ", Lipase "j附朋o"， Lipase "JmaMo", Esterase from&cAm'C co/z'. K12中
的任一種。
進(jìn)一步的，所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物與有機(jī)胺或 氨氣的物質(zhì)的量之比為1:1 20;所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化 合物與生物酶的質(zhì)量之比為1: 0.005~0.1。
進(jìn)一歩的，所述有機(jī)胺為一垸基取代胺或二烷基取代胺。
進(jìn)一步的，所述的有機(jī)溶劑為環(huán)己垸，正己烷，異辛烷，丙垸，乙醚，甲 基叔丁基醚和異丙醚中的一種或任意幾種的混合；且所述有機(jī)溶劑的物質(zhì)的量 為4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物物質(zhì)的量的5 30倍。
進(jìn)一步的，所述反應(yīng)過程中使用無水硫酸銅，分子篩，高分子膜或者除水設(shè)備來除去反應(yīng)中生成的水。
進(jìn)一歩的，所述反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間為5~72小時(shí)。
進(jìn)一步的，該反應(yīng)是以TLC小板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)，展開劑是乙酸乙酯與石油
醚體積比為1 2: l的混合試劑；通過監(jiān)測反應(yīng)中新產(chǎn)生的點(diǎn)的濃度和剩下的點(diǎn)
的濃度來判斷反應(yīng)終點(diǎn)。
進(jìn)一步的，該反應(yīng)可以液相監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)度，通過監(jiān)測液相色譜屮4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的形成和4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-
二甲酸類化合物的消失來判斷反應(yīng)終點(diǎn)。
進(jìn)一步的，反應(yīng)的是按照以下步驟進(jìn)行
a. 按照4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物有機(jī)胺或氨氣物 質(zhì)的量之比為1:1 1: 3進(jìn)行投料，所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲 酸類化合物生物酶質(zhì)量之比為l: 0.005~1: 0.1，所述有機(jī)溶劑的物質(zhì)的
量為4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物質(zhì)的量的5 10倍，將4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物，溶解有有機(jī)胺或氨氣的有機(jī)溶 液，固定化生物酶和溶劑依次投入到反應(yīng)器中；
b. 控制溫度于15 60°C進(jìn)行反應(yīng)，期間用TLC硅膠板或液相色譜進(jìn)行 跟蹤監(jiān)測，直至反應(yīng)基本不再進(jìn)行；
c. 過濾反應(yīng)液，將生物酶除去，然后去除有機(jī)溶劑和未反應(yīng)的有機(jī)胺或 氨氣，即可得到粗制的手性4-取代-2， 6-二氧哌徒-3， 5-二甲酸單酰胺類化 合物。
本發(fā)明提供的制備方法反應(yīng)條件溫和，收率〉85%，純度〉97%，并且后處理 簡單，原子利用度比較高，符合綠色化學(xué)的要求。應(yīng)用該方法可以大大降低成 本，來滿足社會對手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的 需求。
具體實(shí)施例方式
7設(shè)備來除去反應(yīng)中生成的水。
進(jìn)一步的，所述反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間為5~72小時(shí)。
進(jìn)一步的，該反應(yīng)是以TLC小板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)，展開劑是乙酸乙酯與石油 醚體積比為1~2: 1的混合試劑；通過監(jiān)測反應(yīng)中新產(chǎn)生的點(diǎn)的濃度和剩下的點(diǎn) 的濃度來判斷反應(yīng)終點(diǎn)。
進(jìn)一步的，該反應(yīng)可以液相監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)度，通過監(jiān)測液相色譜中4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的形成和4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物的消失來判斷反應(yīng)終點(diǎn)。
進(jìn)一步的，反應(yīng)的是按照以下歩驟進(jìn)行
a. 按照4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物有機(jī)胺或氨氣物 質(zhì)的量之比為1:1 1: 3進(jìn)行投料，所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲
酸類化合物生物酶質(zhì)量之比為l: 0.005 1: 0.1，所述有機(jī)溶劑的物質(zhì)量
為4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物質(zhì)量的5~10倍，將4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物，溶解有有機(jī)胺或氨氣的有機(jī)溶液，固定 化生物酶和溶劑依次投入到反應(yīng)器中；
b. 控制溫度于15~6(TC進(jìn)行反應(yīng)，期間用TLC硅膠板或液相色譜進(jìn)行 跟蹤監(jiān)測，直至反應(yīng)基本不再進(jìn)行；
c. 過濾反應(yīng)液，將生物酶除去，然后去除有機(jī)溶劑和未反應(yīng)的有機(jī)胺或 氨氣，即可得到粗制的手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化 合物。
本發(fā)明提供的制備方法反應(yīng)條件溫和，收率>85%，純度>97%，并且后處理 簡單，原子利用度比較高，符合綠色化學(xué)的要求。應(yīng)用該方法可以大大降低成 本，來滿足社會對手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的需求。
具體實(shí)施方式
以下具體實(shí)例來說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但保護(hù)的范圍并不僅限于此。 本專利所涉及到的生物酶全部購于天野酶制品公司(Amano Enzyme Inc.)， 其余反應(yīng)物及試劑均為市場購買所得。如未特別說明，該方法所使用的生物酶 均為固定化的生物酶，Lipase from Thermomyces lanuginosus酶固定化后稱為 Lipozyme JZJM， lipase B from Cawd油o齒rcrica酶固定化后禾爾為iVovoz戸 Lipase from Ca打6 /tfe Lipase尸51 "j/wawo " 5Z), lipase J51 "^4ma"o ",
Lipase "Jmawo", Lipase ^175* "^4ma"o"， Esterase from ￡lsc/ e〃'cA/" co/z.. K12 (Esterase from gene code b3412)。另外，本發(fā)明所使用的生物酶，有機(jī)溶劑和干 燥劑(分子篩或者無水硫酸銅)可回收并加以重復(fù)使用。
實(shí)施例中采用4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸為底物，簡 稱化合物(IIA);手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物， 簡稱化合物(1)。
(IIA)
實(shí)施例1
將裝有溫度計(jì)，干燥管，和磁力攪拌的50ml的三口或者兩口燒瓶內(nèi)，加入化合物(IIA) 6. 19g，乙胺l.O g，生物酶6T Z 0. 03g，正己烷20ml。加入完畢，將溫度固定在35i:，磁力攪拌，反應(yīng)24小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或高效液相色譜監(jiān)測，反應(yīng)完畢后，后處理，去除有機(jī)溶劑和未反應(yīng)的乙胺，純化處理得到白色固體(4R， 5S)-5-甲酰乙胺-4_(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R, 5S)-5-甲酰乙胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6_二氧哌啶-3-羧酸，收率54%，純度>97%， ee值96y。。實(shí)施例2
將化合物(IIA) 6. 19g，正丙胺L2 g，生物酶0.025g，異辛烷25ml，加入到反應(yīng)器中，加入完畢，將溫度固定在37"，磁力攪拌，反應(yīng)48小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測，使用的酶為Lipase from Ca AV/e
其他操作如同實(shí)施例1，純化處理得到白色固體(4R，5S)-5-甲酰正丙胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
白色固體(4R， 5S)-5_甲酰正丙胺-4-(4-氟苯基)-1_甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率67%，純度〉98%， ee值〉999L實(shí)施例3
將化合物(IIA) 6. 19g，甲胺0.8g，生物酶0.25g,異辛垸20ml，加入到50ml的錐開》瓶中，所使用的酶為Lipase B from Ca"J/fi a朋torc"ca。加入完畢，將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在35。C，轉(zhuǎn)速200r/分。反應(yīng)10小時(shí)，然后加入0.5g生物酶，繼續(xù)反應(yīng)14小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
反應(yīng)完畢，后處理，去除有機(jī)溶劑和未反應(yīng)的甲胺，純化處理得到白色固
10體(4R, 5S)-5-甲酰甲胺-4-(4-氟苯基)-1-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R，5S)-5-甲酰甲胺-4-(4-氟苯基)-1-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率83%，純度98%， 值96%。實(shí)施例4
將化合物(IIA) 6. 19g，正丁胺1.8 g，生物酶0. 13g，甲基叔丁基醚(MTBE)15ml,加入到50ml的錐形瓶中，所使用的酶為Lipase "。
加入完畢，將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在45t:，反應(yīng)15小時(shí)，然后加入0.3g生物酶，繼續(xù)反應(yīng)15小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3純化處理得到白色固體(4R，5S)-5-甲酰正丁胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R，5S)-5-酰正丁胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率43%，純度94%， ee值900/。。實(shí)施例5
將化合物(II A) 6. 19g，溶有氨氣0. 8 g的異丙醚溶液20ml，生物酶0. 03g，加入到50ml的錐形瓶中，所使用的酶為Lipase "^ a/w〃 。加入完畢，將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在25。C，轉(zhuǎn)速200r/分，反應(yīng)10小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3純化處理得到白色固體(4R， 5S)-5-甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R，5S)-5-甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率54%，純度98%， ee值95%。。實(shí)施例6將化合物(IIA) 6. 19g， 二乙胺1. 5g，生物酶0. lg,甲基叔丁基醚(MTBE)15ml加入到50ml的錐形瓶中，所使用的酶為Lipase I "。
加入完畢，將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在25'C，轉(zhuǎn)速200r/分，反應(yīng)15小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3純化處理得到白色固體(4R, 5S)-5-N， N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-1-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R， 5S)-5-N，N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率62%，純度98%， ee值95%。實(shí)施例7
將化合物(IIA) 6. 19g，溶有氨氣0. 8 g的異丙醚溶液20ml，生物酶0. 25g加入到50ml的錐形瓶屮，所使用的酶為Lipase from Om^/e i "gcwa (C7 L)。
加入完畢，將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在25'C，反應(yīng)10小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3純化處理得到白色固體(4R， 5S)-5-甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R，5S)-5-甲酰胺-4-(4-氟苯基)-1-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率70%,純度94%， ee值96%。實(shí)施例8
將化合物(IIA) 6. 19g， 二乙胺1.5g，生物酶0.08g，異丙醚20ml，加入到50ml的錐形瓶中，加入完畢，所使用的酶為Lipase "^z^/70"。加入
完畢，將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在25"，反應(yīng)15小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。其他操作如同實(shí)施例3純化處理得到白色固體(4R， 5S)-5-N， N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-1-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R， 5S)-5-N， N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6_二氧哌啶_3-羧酸，收率37%，純度92%， ee值90%。實(shí)施例9
將化合物(IIA) 6. 19g, 二乙胺1.5g，生物酶0.08g，異丙醚20ml，加入到50ml的錐形瓶中，加入完畢，所使用的酶為7fe叩zj^^^。將錐形瓶放在搖床里。固定溫度在37t:，轉(zhuǎn)速200r/分，反應(yīng)12小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3純化處理得到白色固體4R, 5S)-5-N，N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R， 5S)-5-N， N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率87%，純度98%， ee值98%。
實(shí)施例10
將化合物(IIA) 6. 19g， 二乙胺1.5g，生物酶0.08g，異丙醚15ml，加入到50ml的錐形瓶中，加入完畢，所使用的酶為Lipase尸5 "^tea/7o〃5汰加入完畢，將溫度固定在3(TC，轉(zhuǎn)速200r/分，反應(yīng)16小時(shí)，期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例l，純化處理得到白色固體(4R，5S)-5-N，N-二乙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R， 5S) -5-N， N-二乙基甲酰胺_4- (4-氟苯基)-1 -甲基-2， 6-二氧哌啶-3_羧酸，收率50%，純度97%， ee值94%。
13實(shí)施例11
將化合物(IIA) 6. 19g，溶有氨氣0. 8 g的異丙醚溶液20ml，生物酶0. 25g加入到50ml的錐形瓶中，所使用的酶為Lipase B from "torcrtcfl。力口
入完畢，將溫度固定在3(TC，轉(zhuǎn)速200r/分，反應(yīng)5小時(shí)后再加入0. 5g生物酶(Lipase B from Cflw^V/a awtor"/cfl)，繼續(xù)反應(yīng)8小日寸。期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3，純化處理得到白色固體4R，5S)-5-甲酰胺-4-(4-氟苯基)-1-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
(4R，5S)-5-甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率72%，純度96%， ee值96%。實(shí)施例12
將化合物(IIA) 6. 19g， 二異丙胺2. lg，生物酶0.08g,異丙醚20ml，加入到50ml的錐形瓶中，加入完畢，所使用的酶為Lipase from 7T e，omyces/am^z'"o幼s。加入完畢，將溫度固定在30。C，轉(zhuǎn)速140r/分，反應(yīng)5小時(shí)后再力口入0. 6g生物酶(Lipase from 7%erwom>>ces /"wwg/woms)，繼續(xù)反應(yīng)10小時(shí)。期間TLC小板監(jiān)測或液相色譜監(jiān)測。
其他操作如同實(shí)施例3，純化處理得到白色固體(4R，5S)-5-N，N-二異丙基甲酰胺-4_(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸。
((4R， 5S)-5-N,N-二異丙基甲酰胺-4-(4-氟苯基)-l-甲基-2， 6-二氧哌啶-3-羧酸，收率72%,純度96%， ee值96%。序列表
<110>浙江大學(xué)
浙江中貝化工有限公司
<120>酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合
物的方法
<130> CS 233275,DE 3238530
<160> 1
<170〉 Patentln version 3.3
<210〉 1
<211〉 771
<212> DNA
<213> Escherichia coli
<400〉 1
atgaataaca tctggtggca gaccaaaggt caggggaatg ttcatcttgc gctgctgcac ggatggggac 70
tgaatgccg3 3gtgtggcgt tgcattgacg aggaacttac ctcgcatttt acgctgcacc ttgttgscct 140
gcccggcttc gggcgtagcc ggggatttgg tgcgctgtca cttgctgata tggccgaagc cgtgctgcaa 210
caggcacctg ataaagccat ttggttaggc tggagtctgg gcgggctggt ggcaagccag attgcgttaa 280
cccatcccga gcctgttcag gcgctggtca ccgtggcgtc gtcaccttgt tttagtgctc gtgacgagtg 350
gccggggata aaaccggacg tgctggcggg atttcagcag caactcagtg atgattttca gcgtacagtg 420gagcggttcc tggcgttaca aaccatgggg actgaaacgg cgcgccagga tgcgcgggcg ttgaagaaaa 490ccgttctggc gttaccgatg ccggaggttg acgtgcttaa tggcgggctg gaaatcctga aaacggtcga 560tctccgtcag ccgctgcaaa acgtgtccat gccgtttttg cgattgtatg gctatctcga cggtctggtg 630
ccgcgcaaag tggtgccgat gctggataaa ctttggcctc acagcgaatc atatatcttc gccaaagcgg 700
cccatgcgcc atttatttcg catccggccg agttttgtca cctgctggtg gcgttgaagc agagggtgta 770
g 7權(quán)利要求
1.一種酶法制備手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸單酰胺類化合物的方法，其特征在于所述的方法為以如式(II)所示的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸類化合物為原料，在生物酶的作用下與有機(jī)胺或氨氣反應(yīng)，在有機(jī)溶劑中于15-60℃下制備如式(I)所示的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸單酰胺類化合物，其反應(yīng)方程式為其中，R1＝甲基、乙基、羥基、對，鄰或間氟苯基或者對甲苯基；R2＝NR4R5，R4、R5＝氫、甲基、乙基、正或異丙基；R3為C1-C6的烷基、C2-C6的烯烴烷基、C2-C6的炔烴烷基、C1-C6的鹵代烷基、C1-C6雜原子取代烷基、C3-C8的環(huán)烷基和芳烴取代基；所述的生物酶為脂肪酶，酯酶或者水解酶。
2. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于所述生物酶為Lipase from Thermomyces lanuginosus, Lipase B from Cawtfefa a ton:&ca, Lipase from Cawfi z't/e , Lipase "Jmawo" 5D, Lipase y451 "Jmtmo", Lipase j《"Jmtzwo", Lipase 」15* "Jm朋o "， Esterase from EscAeWc/n'a <%>//. Kl2中的任一禾中。
3. 如權(quán)利要求l所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲 酸類化合物與有機(jī)胺或氨氣的物質(zhì)的量之比為1:1 20;所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物與生物酶的質(zhì)量之比為1: 0.005-0.1。
4. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于所述有機(jī)胺為一烷基取代胺或二烷基取代 胺。
5. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑為環(huán)己垸，正己烷，異辛 烷，丙烷，乙醚，甲基叔丁基醚和異丙醚中的一種或任意幾種的混合；且 所述有機(jī)溶劑的物質(zhì)的量為4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物 物質(zhì)的量的5 30倍。
6. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于所述反應(yīng)過程中使用無水硫酸銅，分子篩， 高分子膜或者除水設(shè)備來除去反應(yīng)中生成的水。
7. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于所述反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間為5 72小時(shí)。
8. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物的方法，其特征在于該反應(yīng)是以TLC小板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)，展開劑是乙酸乙酯與石油醚體積比為1 2: 1的混合試劑；通過監(jiān)測反應(yīng)中新產(chǎn)生的點(diǎn)的濃度和剩下的點(diǎn)的濃度來判斷反應(yīng)終點(diǎn)。
9. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的方法，其特征在于該反應(yīng)可以液相監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)度，通過監(jiān)測液相色譜中4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的形成和 4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物的消失來判斷反應(yīng)終點(diǎn)。
10. 如權(quán)利要求1所述酶法制備手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺類化合物的方法，其特征在于反應(yīng)的是按照以下步驟進(jìn)行a.按照4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物有機(jī)胺或氨氣 物質(zhì)的量之比為1: 1 1: 3進(jìn)行投料，所述的4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物生物酶質(zhì)量之比為l: 0.005-1: 0.1，所述有機(jī)溶劑的物質(zhì)的量為4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物質(zhì)的量的5 10倍， 將4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸類化合物，溶解有有機(jī)胺或氨氣的 有機(jī)溶液，固定化生物酶和溶劑依次投入到反應(yīng)器中；b. 控制溫度于15 60°C進(jìn)行反應(yīng)，期間用TLC硅膠板或液相色譜進(jìn) 行跟蹤監(jiān)測，直至反應(yīng)基本不再進(jìn)行；c. 過濾反應(yīng)液，將生物酶除去，然后去除有機(jī)溶劑和未反應(yīng)的有機(jī)胺 或氨氣，即可得到粗制的手性4-取代-2， 6-二氧哌啶-3， 5-二甲酸單酰胺 類化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種基于生物酶催化制備手性化合物的方法，尤其是指一種酶法制備手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸單酰胺類化合物的方法。所述的方法為以4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸類化合物為原料，在生物酶的作用下與有機(jī)胺或氨氣反應(yīng)，在有機(jī)溶劑中于15-60℃下制備4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸單酰胺類化合物。本發(fā)明提供的制備方法反應(yīng)條件溫和，收率＞85％，純度＞97％，并且后處理簡單，原子利用度比較高，符合綠色化學(xué)的要求。應(yīng)用該方法可以大大降低成本，來滿足社會對手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸單酰胺類化合物的需求。
文檔編號C12P13/02GK101665812SQ20091010104
公開日2010年3月10日 申請日期2009年7月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月30日
發(fā)明者于洪巍, 博 王, 車大慶 申請人:浙江大學(xué);浙江中貝化工有限公司