專利名稱：利用皮狀絲孢酵母發(fā)酵生產(chǎn)丙酮酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，是利用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)有機酸的新工藝。具體地說，本發(fā)明涉及利用皮狀絲孢酵母發(fā)酵生產(chǎn)丙酮酸的方法。
將皮狀絲孢酵母9070接種于含有碳、氮源和K、Mg、Ca鹽的液體培養(yǎng)基中。發(fā)酵培養(yǎng)基的組份為碳源(蔗糖和/或葡萄糖和/或糖蜜和/或淀粉)5％-20％，氮源(玉米漿和/或牛肉膏和/或酵母提取物和/或蛋白胨和/或豆餅粉和/或銨鹽和/或尿素)1％-5％，KH2PO40.05％-0.5％，MgSO40.01％-0.1％，CaCO31％-5％。在24℃-37℃發(fā)酵1-4天，得到的發(fā)酵液中含丙酮酸最高可達43g/L。該發(fā)酵工藝條件粗放，原料價格低廉，適宜于大規(guī)模生產(chǎn)，具有良好的應(yīng)用前景。
以下是幾個實施例。
實施例二皮狀絲孢酵母9070(CGMCC0754)接種于裝在250ml搖瓶中的25ml發(fā)酵培養(yǎng)基2，培養(yǎng)基組份為葡萄糖糖5％，牛肉膏5％，KH2PO40.1％，MgSO40.02％，CaCO31％。在24℃發(fā)酵1天后，取10ml發(fā)酵液接種于裝在250ml搖瓶中的75ml發(fā)酵培養(yǎng)基3，培養(yǎng)基組份為淀粉水解糖15％，蛋白胨4％，KH2PO40.15％，MgSO40.07％，CaCO35％。在28℃發(fā)酵3天后，離心分離菌體，得到的上清液測得含丙酮酸42.3g/L。
實施例三皮狀絲孢酵母9070(CGMCC0754)接種于裝在250ml搖瓶中的50ml發(fā)酵培養(yǎng)基4，培養(yǎng)基組份為糖密8％，玉米漿2％，KH2PO40.05％，MgSO40.01％，CaCO31％。在32℃發(fā)酵1天后，離心分離菌體，得到的上清液測得含丙酮酸32.8g/L。
實施例四皮狀絲孢酵母9070(CGMCC0754)接種于裝在250ml搖瓶中的25ml發(fā)酵培養(yǎng)基5，培養(yǎng)基組份為蔗糖5％，豆餅粉1％，尿素1％，KH2PO40.1％，MgSO40.02％，CaCO31％。在37℃發(fā)酵1天后，發(fā)酵液接種于裝在2000ml搖瓶中的300ml發(fā)酵培養(yǎng)基6，培養(yǎng)基組份為葡萄糖10％，酵母提取物1％，(NH4)2SO41％，KH2PO40.1％，MgSO40.05％，CaCO32％。在28℃發(fā)酵3天后，發(fā)酵液接種于裝在5L發(fā)酵罐中的3000ml發(fā)酵培養(yǎng)基7，培養(yǎng)基組份為葡萄糖10％，蛋白胨3％，KH2PO40.1％，MgSO40.05％，CaCO34％。在30℃發(fā)酵2天后，離心分離菌體，得到的上清液測得含丙酮酸43.0g/L。
權(quán)利要求
1.一種利用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)丙酮酸的方法，該方法是選用皮狀絲孢酵母(Trichosporon cutaneum)9070 CGMCC0754，在含有碳源(蔗糖和/或葡萄糖和/或糖蜜和/或淀粉)、氮源(玉米漿和/或牛肉膏和/或酵母提取物和/或蛋白胨和/或豆餅粉和/或銨鹽和/或尿素)以及K、Mg、Ca鹽的液體培養(yǎng)基中進行液體發(fā)酵生產(chǎn)丙酮酸的方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，使用的碳源的濃度范圍為5％-20％，氮源的濃度范圍為1％-5％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，K鹽為KH2PO4，濃度范圍為0.05％-0.5％，Mg鹽為MgSO4，濃度范圍為0.01％-0.1％，Ca鹽為CaCO3，濃度范圍為1％-5％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，利用CGMCC0754酵母進行液體發(fā)酵生產(chǎn)丙酮酸時，發(fā)酵溫度為24℃-37℃。發(fā)酵周期為1-4天。
全文摘要
丙酮酸是生物體糖代謝的重要中間代謝物，具有保健生理功能，并且是合成L－色氨酸、L－酪氨酸、L－多巴等產(chǎn)品的原料。本發(fā)明為一種用皮狀絲孢酵母發(fā)酵葡萄糖生產(chǎn)丙酮酸的方法，在勿需添加維生素和氨基酸的簡單培養(yǎng)基中可得到每升40克以上的丙酮酸，原料價格低廉，具有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號C12P7/40GK1468964SQ0212625
公開日2004年1月21日 申請日期2002年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月17日
發(fā)明者江寧, 王欽宏, 沈安, 賀鵬, 盧大軍, 江 寧 申請人:中國科學院微生物研究所