抗稻瘟病基因鑒定方法及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新的制作方法
【專利說明】
[0001]技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新，及種質(zhì)創(chuàng)新過程中使用的抗稻瘟病基因鑒定方法。
[0002]【背景技術(shù)】:
水稻是世界上重要的糧食作物，稻米是世界上一半以上人口的主食。稻瘟病是世界范圍內(nèi)水稻生產(chǎn)的主要病害之一，發(fā)生稻瘟病的水稻田稻谷產(chǎn)量降低、稻米品質(zhì)下降。利用抗稻瘟病基因培育抗病水稻品種，是防治稻瘟病危害的最經(jīng)濟(jì)有效措施。絕大部分抗稻瘟病基因存在于秈稻及南方水稻種質(zhì)資源中。黑龍江省水稻為早粳稻生態(tài)型，創(chuàng)制抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)資源，有利于培育黑龍江省抗病水稻品種。鑒定抗稻瘟病基因是創(chuàng)制水稻抗病種質(zhì)的前提。通常的水稻抗稻瘟病基因鑒定有2條途徑，一條是人工接種稻瘟病菌或田間自然感病，根據(jù)水稻抗感病表型鑒定抗病基因；另外一條是利用分子標(biāo)記鑒定選擇抗病基因。通過表型選擇基因型，如果環(huán)境中不含有稻瘟病菌或環(huán)境不利于稻瘟病菌侵染、擴(kuò)展，表型抗病水稻材料有可能不含有抗病基因。通過與抗病基因連鎖的分子標(biāo)記間接選擇抗稻瘟病病基因，即利用分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)技術(shù)鑒定的抗稻瘟病基因，也存在“假陽性”的問題。將MAS技術(shù)和接種鑒定結(jié)合起來選擇的抗稻瘟病水稻，不含抗病基因的概率大幅度下降。我們利用MAS技術(shù)與接種鑒定相結(jié)合，創(chuàng)制了抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)資源空育131( Ρ??),空育131 {Pi2)和空育131 {Pi9)等。
[0003]
【發(fā)明內(nèi)容】
:
本發(fā)明的目的是提供一種抗稻瘟病基因鑒定方法，即利用MAS和接種鑒定相結(jié)合選擇水稻抗稻瘟病基因的方法，以及利用該方法創(chuàng)制的抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)空育131 (Λ7)、空育 131 {Pi2)和空育 131 {Pi9)等。
[0004]上述的目的通過以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
一種抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新培育方法，利用分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)，具體過程如下:(1)雜交:早粳稻與抗病基因供體雜交；(2)回交及選擇:早粳稻做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因；(3)自交及選擇:在遺傳背景完全恢復(fù)到早粳稻的世代，MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因純合體并令其自交獲得抗稻瘟病早粳稻。
[0005]所述的抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新培育方法，利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制了抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)空育131 (Λ7)、空育131 (/V1和空育131iPid)等。以早粳稻空育131 (Pi2)的創(chuàng)制為例，過程如下:(1)所述的雜交:即空育131與Pi2基因供體親本秈稻BL6進(jìn)行有性雜交，獲得F:雜種；(2)所述的回交及選擇:即空育131做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代MAS選擇Pi2基因陽性株，針刺法將稻瘟病菌單孢菌株#tHD7 (Mo-HD7系從水稻空育131生產(chǎn)田稻瘟病病樣中分離的單孢菌株，其可以誘發(fā)空育131產(chǎn)生稻瘟病，秈稻BL6對(duì)Mo-HD7表現(xiàn)抗病)接種于入選的Pi2陽性株并選擇抗病植株；(3)所述的自交及選擇:即在遺傳背景完全恢復(fù)到空育131的世代，MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇Pi2基因純合體并令其自交即為空育131 (Pi2)o
[0006]本發(fā)明的有益效果:
1.本發(fā)明將MAS技術(shù)和接種鑒定結(jié)合起來選擇的抗稻瘟病水稻，使不含擬選抗病基因的概率大幅度下降。
[0007]本發(fā)明利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制了抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)空育131 (Λ7)、空育131 (/V1和空育131 (Z5/奶等，為黑龍江省水稻抗稻瘟病育種準(zhǔn)備了物質(zhì)基礎(chǔ)。
[0008]本發(fā)明建立了抗稻瘟病基因Pil、Pi2和Pi9的MAS鑒定選擇體系和人工接種鑒定體系。
[0009]【附圖說明】:
附圖1是本發(fā)明的水稻空育131 (Pi2)創(chuàng)制過程示意圖。
[0010]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
一種抗稻瘟病基因鑒定方法及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新，利用分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)，具體過程如下:(1)雜交:早粳稻與抗病基因供體雜交；(2)回交及選擇:早粳稻做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因；(3)自交及選擇:在遺傳背景完全恢復(fù)到早粳稻的世代，MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因純合體并令其自交獲得抗稻痕病早粳稻。
[0011]實(shí)施例2:
根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗稻瘟病基因鑒定方法及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新，利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制了抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)資源空育131(Λ7)、空育131 (/V1和空育131 QPi9)等。以早粳稻空育131 (Pi2)創(chuàng)制為例，過程如下:(1)所述的雜交:即空育131與Pi2基因供體親本秈稻BL6進(jìn)行有性雜交，獲得F ι雜種；
(2)所述的回交及選擇:即空育131做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代MAS選擇Pi2基因陽性株，針刺法將稻瘟病菌單孢菌株#tHD7 (Mo-HD7系從水稻空育131生產(chǎn)田稻瘟病病樣中分離的單孢菌株，其可以誘發(fā)空育131產(chǎn)生稻瘟病，秈稻BL6對(duì)Mo-HD7表現(xiàn)抗病)接種于入選的Pi2陽性株并選擇抗病植株；(3)所述的自交及選擇:即在遺傳背景完全恢復(fù)到空育131的世代，MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇Pi2基因純合體并令其自交即為空育131(Pi2)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新培育方法，其特征是:利用分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)，具體過程如下:(1)雜交:早粳稻與抗病基因供體雜交；(2)回交及選擇:早粳稻做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因；(3)自交及選擇:在遺傳背景完全恢復(fù)到早粳稻的世代，MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因純合體并令其自交獲得抗稻瘟病早粳稻。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新培育方法，其特征是:利用MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制了抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)空育131 iPil),空育131 {Pi2)和空育131 {Pi9)等。3.以早粳稻空育131(Pi2)的創(chuàng)制為例，過程如下:(1)所述的雜交:即空育131與Pi2基因供體親本秈稻BL6進(jìn)行有性雜交，獲得匕雜種；(2)所述的回交及選擇:即空育131做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代MAS選擇Pi 2基因陽性株，針刺法將稻瘟病菌單孢菌株#^HD7 (Mo-HD7系從水稻空育131生產(chǎn)田稻瘟病病樣中分離的單孢菌株，其可以誘發(fā)空育131產(chǎn)生稻瘟病，秈稻BL6對(duì)Mo-HD7表現(xiàn)抗病)接種于入選的Pi2陽性株并選擇抗病植株；(3)所述的自交及選擇:即在遺傳背景完全恢復(fù)到空育131的世代，MAS與接種鑒定相結(jié)合選擇Pi2基因純合體并令其自交即為空育131 (Pi2)o
【專利摘要】<b>一種抗稻瘟病基因鑒定方法及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新。準(zhǔn)確鑒定選擇抗稻瘟病基因，有利于抗稻瘟病種質(zhì)創(chuàng)新及品種培育。一種抗稻瘟病基因鑒定方法及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新，利用分子標(biāo)記輔助選擇（</b><b>MAS</b><b>）與接種鑒定相結(jié)合選擇抗稻瘟病基因，回交轉(zhuǎn)育創(chuàng)制抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)，具體過程如下：（</b><b>1</b><b>）雜交：早粳稻與抗病基因供體雜交；（</b><b>2</b><b>）回交及選擇：早粳稻做輪回親本進(jìn)行多次回交，各回交世代利用</b><b>MAS</b><b>與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因；（</b><b>3</b><b>）自交及選擇：在遺傳背景完全恢復(fù)到早粳稻的世代，</b><b>MAS</b><b>與接種鑒定相結(jié)合選擇抗病基因純合體并令其自交獲得抗稻瘟病早粳稻。本發(fā)明應(yīng)用于抗稻瘟病基因鑒定及抗稻瘟病早粳稻種質(zhì)創(chuàng)新。</b>
【IPC分類】C12Q1/68, A01H1/04, A01H1/02
【公開號(hào)】CN105248274
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510748192
【發(fā)明人】李榮田, 劉長(zhǎng)華, 張游, 陳全珍
【申請(qǐng)人】黑龍江大學(xué)
【公開日】2016年1月20日
【申請(qǐng)日】2015年11月6日