一種辣木組培快繁技術(shù)的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)中植物組織培養(yǎng)的方法，具體地說(shuō)，涉及一種辣木組培快繁技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002]W^iMoringa oleifera Lam.)是辣木科辣木屬植物，為單科單屬植物。辣木原產(chǎn)于印度北部的喜馬拉雅山地區(qū)，I960年辣木作為綠化樹(shù)從印度引入我國(guó)西南地區(qū)，目前主要栽培于福建、云南、廣西、廣東、海南等地。辣木營(yíng)養(yǎng)超級(jí)豐富，從維生素A、B、C族、蛋白質(zhì)到鈣、鐵、鉀等礦質(zhì)元素一應(yīng)俱全，故有蔬菜樹(shù)之稱，苗期的辣木可以整株煮食。新鮮未成熟或成熟的果莢、未成熟的種胚、葉、花、根均可食用，但目前辣木消費(fèi)群體主要集中在印度，因此辣木的食用價(jià)值還有待于開(kāi)發(fā)。辣木枝葉繁茂，生物量大，是重要的飼料來(lái)源，對(duì)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)提高有積極作用。辣木種胚富含油脂，壓榨前無(wú)需加熱，是一種純天然植物油，可用作為香水、高級(jí)潤(rùn)滑油、高級(jí)顏料、高級(jí)天然肥皂等工業(yè)產(chǎn)品的原料。辣木種胚中富含帶電荷蛋白，故其粉末可用作水凈化劑，不僅可以絮凝渾水中懸浮的顆粒還可以沉淀致病微生物，且無(wú)毒副作用。一粒辣木種胚的粉末可凈化I公升渾水，辣木種胚凈化水操作簡(jiǎn)單，成本低，預(yù)見(jiàn)辣木在凈化水質(zhì)應(yīng)用方面潛力無(wú)窮。辣木常用于糖尿病、高血壓、心血管病、風(fēng)濕、壞血病等治療，是一種具有多種藥理功能的藥用植物。
[0003]辣木為多種用途木本植物，在人類食品、保健、醫(yī)藥、燃料、染料、環(huán)境保護(hù)、水凈化等人類生活及健康息息相關(guān)的工業(yè)、產(chǎn)業(yè)上可發(fā)揮生要作用。辣木具有適應(yīng)性廣、栽培粗放的生物特性，在我國(guó)發(fā)展辣木規(guī)?；N植和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)有良好的市場(chǎng)和商業(yè)前景。目前在廣東、福建、云南等地有引種辣木，且開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品也逐漸出現(xiàn)。辣木種苗主要通過(guò)種子繁殖、扦插繁殖進(jìn)行繁育，短時(shí)間內(nèi)無(wú)法規(guī)?；N植種苗的需求。因此，為了緩解市場(chǎng)辣木種苗緊缺現(xiàn)狀，非常有必要建立一套完整的辣木組培快繁技術(shù)。目前，完整的辣木組培快繁技術(shù)尚未見(jiàn)有報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供出一種辣木組培快繁技術(shù)，本發(fā)明包括以辣木腋芽為外植體、通過(guò)芽誘導(dǎo)、芽增殖、生根培養(yǎng)、煉苗及移栽等過(guò)程，實(shí)現(xiàn)了辣木種苗的快速繁殖，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。
[0005]本發(fā)明的一種辣木組培快繁技術(shù)，包括以下的步驟:
(I)外植體的采集與處理:選擇辣木優(yōu)良單株的當(dāng)年生腑芽飽滿枝條，去葉后于洗衣粉水浸泡10?30min，刷凈后自來(lái)水沖洗I?2h，剪成長(zhǎng)I?3cm帶腋芽的莖段，先用75%乙醇消毒5?30s后用無(wú)菌水洗3?5次,再用0.1%升萊溶液消毒10?25min,用無(wú)菌水沖洗4?6次后備用。
[0006](2)芽誘導(dǎo):將步驟(I)的處理得到的帶腋芽莖段接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，先在25?28°C條件下全暗培養(yǎng)3?5天，然后置于每天光照10?12小時(shí)，光照強(qiáng)度為1500?20001x，直至誘導(dǎo)形成叢生芽。
[0007](3)芽增殖:將步驟(2)的叢生芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，接種后先在25?28°C條件下全暗培養(yǎng)I?5天，然后置于每天光照12?16小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000?30001x，置于培養(yǎng)溫度為25?28°C的條件下培養(yǎng)，20?25天轉(zhuǎn)接一次。
[0008](4)生根培養(yǎng):將步驟(I)或(2)高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后先在25?28°C條件下全暗培養(yǎng)I?3天，然后置于每天光照14?16小時(shí)，光照強(qiáng)度為3000?50001x，培養(yǎng)溫度為25?28°C的條件下培養(yǎng)至生根。
[0009](5)煉苗移栽:將高約8?1cm的生根試管苗去瓶蓋置于自然光照下煉苗5?7天后，將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基，栽入由泥炭土和黃沙泥混合成的基質(zhì)中并定植于大田中。
[0010]上述步驟(2)所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS+6-BA2?8mg/L+蔗糖15?30g/L+瓊脂
3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
[0011]上述步驟(3)所述的增殖培養(yǎng)基為:MS+6-BA0.5?2.0mg/L+NAA0.1?1.0mg/L+鹿糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
[0012]上述步驟(4)所述的生根培養(yǎng)基為:1/2MS+IAA0.3?1.0mg/L+蔗糖15?30g/L+瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:目前國(guó)內(nèi)關(guān)于辣木組培快繁技術(shù)尚未有報(bào)道，而本發(fā)明具有簡(jiǎn)單、易行、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)。通過(guò)本發(fā)明育成的辣木試管苗移栽成活率達(dá)到90%以上，可以有效解決辣木規(guī)?；N植中的優(yōu)質(zhì)辣木種苗供應(yīng)問(wèn)題。
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，不是對(duì)本發(fā)明的限制。
[0015]實(shí)施例1:
(I)外植體的采集與處理:選擇辣木優(yōu)良單株的當(dāng)年生腑芽飽滿枝條，去葉后于洗衣粉水浸泡lOmin，刷凈后自來(lái)水沖洗lh，剪成長(zhǎng)I?3cm帶腋芽的莖段，先用75%酒精消毒5s后用無(wú)菌水洗3次,再用0.1%升汞溶液消毒lOmin，用無(wú)菌水沖洗5次后備用。
[0016](2)芽誘導(dǎo):將步驟(I)的處理得到的帶腋芽莖段接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，先在28°C條件下全暗培養(yǎng)3天，然后置于每天光照10小時(shí)，光照強(qiáng)度為1500?20001x培養(yǎng)18天即可形成叢生芽，誘導(dǎo)率達(dá)87.4%。所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS+6-BA4mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂 4g/L，pH 為 5.8。
[0017](3)芽增殖:將步驟(2)的叢生芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，接種后先在28 °C條件下全暗培養(yǎng)I天，然后置于每天光照12小時(shí)，光照強(qiáng)度為20001χ，置于培養(yǎng)溫度為28°C的條件下培養(yǎng)，20天轉(zhuǎn)接一次，增殖系數(shù)達(dá)6.72。所述的增殖培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂 3.5g/L, pH 為 5.8。
[0018](4)生根培養(yǎng):將步驟(I)或(2)高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后先在28°C條件下全暗培養(yǎng)I天，然后置于每天光照14小時(shí)，光照強(qiáng)度為30001x，培養(yǎng)溫度為28°C的條件下培養(yǎng)21天即生根，生根率達(dá)90.3%。所述的生根培養(yǎng)基為:1/2MS+IAA0.5mg/L+ 蔗糖 15g/L+ 瓊脂 3.5g/L，pH 為 5.8。
[0019](5)煉苗移栽:將高約8?1cm的生根試管苗去瓶蓋置于自然光照下煉苗5天后,將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基,栽入由泥炭土和黃沙泥混合成的基質(zhì)中并定植于大田中，移栽成活率為89.6%。
[0020]實(shí)施例2:
(I)外植體的采集與處理:選擇辣木優(yōu)良單株的當(dāng)年生腑芽飽滿枝條，去葉后于洗衣粉水浸泡15min，刷凈后自來(lái)水沖洗3h，剪成長(zhǎng)I?3cm帶腋芽的莖段，先用75%酒精消毒1s后用無(wú)菌水洗3次,再用0.1%升汞溶液消毒15min，用無(wú)菌水沖洗5次后備用。
[0021](2)芽誘導(dǎo):將步驟(I)的處理得到的帶腋芽莖段接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，先在28°C條件下全暗培養(yǎng)3天，然后置于每天光照11小時(shí)，光照強(qiáng)度為1500?20001x培養(yǎng)21天即可形成叢生芽，誘導(dǎo)率達(dá)94.1%。所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS+6-BA7mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂 5g/L，pH 為 5.8。
[0022](3)芽增殖:將步驟(2)的叢生芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，接種后先在28 °C條件下全暗培養(yǎng)3天，然后置于每天光照13小時(shí)，光照強(qiáng)度為25001x，置于培養(yǎng)溫度為28°C的條件下培養(yǎng)，23天轉(zhuǎn)接一次，增殖系數(shù)達(dá)7.02。所述的增殖培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+ 蔗糖 25g/L+ 瓊脂 4g/L，pH 為 5.8。
[0023](4)生根培養(yǎng):將步驟(I)或(2)高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后先在28°C條件下全暗培養(yǎng)3天，然后置于每天光照14小時(shí)，光照強(qiáng)度為35001x，培養(yǎng)溫度為28°C的條件下培養(yǎng)21天即生根，生根率達(dá)93.7%。所述的生根培養(yǎng)基為:1/2MS+IAA0.8mg/L+ 蔗糖 15g/L+ 瓊脂 3.5g/L，pH 為 5.8。
[0024](5)煉苗移栽:將高約8?1cm的生根試管苗去瓶蓋置于自然光照下煉苗5天后,將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基,栽入由泥炭土和黃沙泥混合成的基質(zhì)中并定植于大田中，移栽成活率為90.8%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種辣木組培快繁技術(shù)，其特征在于包括以下步驟: (I)外植體的采集與處理:選擇辣木優(yōu)良單株的當(dāng)年生腑芽飽滿枝條，去葉后于洗衣粉水浸泡10?30min，刷凈后自來(lái)水沖洗I?2h，剪成長(zhǎng)I?3cm帶腋芽的莖段，先用75%乙醇消毒5?30s后用無(wú)菌水洗3?5次,再用0.1%升萊溶液消毒10?25min,用無(wú)菌水沖洗4?6次后備用； (2)芽誘導(dǎo):將步驟(I)的處理得到的帶腋芽莖段接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，先在25?28 °C條件下全暗培養(yǎng)3?5天，然后置于每天光照10?12小時(shí)，光照強(qiáng)度為1500?20001x，直至誘導(dǎo)形成叢生芽； (3)芽增殖:將步驟(2)的叢生芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，接種后先在25?28 °C條件下全暗培養(yǎng)I?5天，然后置于每天光照12?16小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000?30001x，置于培養(yǎng)溫度為25?28°C的條件下培養(yǎng)，20?25天轉(zhuǎn)接一次； (4)生根培養(yǎng):將步驟(I)或(2)高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后先在25?28°C條件下全暗培養(yǎng)I?3天，然后置于每天光照14?16小時(shí)，光照強(qiáng)度為3000?50001x，培養(yǎng)溫度為25?28°C的條件下培養(yǎng)至生根； (5)煉苗移栽:將高約8?1cm的生根試管苗去瓶蓋置于自然光照下煉苗5?7天后,將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基,栽入由泥炭土和黃沙泥混合成的基質(zhì)中并定植于大田中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種辣木組培快繁技術(shù)，其特征在于步驟(2)所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS+6-BA2 ?8mg/L+ 蔗糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L，pH 為 5.4 ?5.8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種辣木組培快繁技術(shù)，其特征在于步驟(3)所述的增殖培養(yǎng)基為:MS+6-BA0.5 ?2.0mg/L+NAA0.1 ?1.0mg/L+ 蔗糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L，pH 為 5.4 ?5.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種辣木組培快繁技術(shù)，其特征在于步驟(4)所述的生根培養(yǎng)基為:1/2MS+IAA0.3 ?1.0mg/L+蔗糖 15 ?30g/L+瓊脂 3.5 ?6.0g/L，pH 為 5.4 ?5.8。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種辣木組培快繁技術(shù)，涉及辣木（Moringa oleifera Lam.）通過(guò)無(wú)性快繁技術(shù)獲得株性穩(wěn)定種苗的育苗方法。本發(fā)明包括以辣木腋芽為外植體、通過(guò)芽誘導(dǎo)、芽增殖、生根培養(yǎng)、煉苗及移栽等過(guò)程，實(shí)現(xiàn)了辣木種苗的快速繁殖，將對(duì)加快辣木引種、人工栽培以及培育出高質(zhì)量的辣木樹(shù)苗具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
【IPC分類】A01H4-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104686348
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510086066
【發(fā)明人】陳桂容
【申請(qǐng)人】陳桂容
【公開(kāi)日】2015年6月10日
【申請(qǐng)日】2015年2月24日