一種寶玉的組培快繁方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術領域，涉及一種組培方法，具體涉及一種寶玉的組培快繁方法。
【背景技術】
[0002]寶玉der palmaturn是槭樹科槭屬雞爪槭的一個變種，其樹形優(yōu)美，秋天葉子呈鮮艷的深橙色，春天和夏天葉子是較深的鮮綠色。寶玉植株強健，抗性強，枝條濃密，生長很快，成齡株高達6m，易于修剪成型。寶玉作為視覺效果較好的雞爪槭新品種，其深綠色及秋葉獨特的橙色非常吸引人，具有很高的觀賞價值，可用于庭院、池畔、道路中央隔離帶造景，公園綠化、城市景觀等。但是寶玉數(shù)量少，一般采用嫁接繁殖，其生長周期長，扦插不容易生根，繁殖速度較慢，繁殖率低，難以滿足市場的需求，不易獲得經濟效益。
[0003]因此，如何提高寶玉的繁殖效率成為寶玉資源供應需要解決的一個關鍵技術。植物組織培養(yǎng)是植物規(guī)?；a的一種快速高效繁殖方法。目前關于雞爪槭的組培技術，如專利申請?zhí)?01310338739.9涉及一種雞爪槭組培快繁新方法，它包括以下步驟:S1.切取外植體:采集雞爪槭幼嫩莖段，切割成2?3cm長的莖段；S2.滅菌:將外植體放入超凈工作臺，用酒精和升汞滅菌；S3.啟動培養(yǎng):將滅菌后的外植體接種于啟動培養(yǎng)基中培養(yǎng)，啟動培養(yǎng)基為WPM+GA30.lmg/L+TDZ0.05mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L ；S4.生根培養(yǎng):選取經啟動培養(yǎng)后莖長為I?2cm的雞爪槭帶芽莖段，將腋芽切下后轉移至生根培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為l/2WPM+NAA0.05mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5g/L。但寶玉的組培卻沒有相關報道，因此，急需對寶玉組培快繁技術研宄，建立寶玉組培快繁體系獲得寶玉無菌苗。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明利用組織培養(yǎng)技術進行寶玉外植體培養(yǎng)獲得寶玉無菌苗，提供了一種寶玉的組培快繁方法，組培所用培養(yǎng)基配方簡單，組培流程簡便，繁殖系數(shù)較高，為寶玉工廠化育苗及其深加工提供了技術支持。
[0005]本發(fā)明采用植物的組織培養(yǎng)技術，利用寶玉莖段外植體誘導腋芽生成，再誘導腋芽生成叢生芽增殖，切割叢生芽生根。
[0006]本發(fā)明的目的通過以下技術方案實現(xiàn):一種寶玉的組培快繁方法，它包括以下步驟:
(1)外植體滅菌:取寶玉無病蟲害的當年生幼嫩枝條，去掉葉片，將莖段切割成2?3cm帶芽莖段，放置在超凈工作臺上，用75%酒精滅菌6?10s，0.1%升汞滅菌6?lOmin，無菌水沖洗4?6次；
(2)啟動培養(yǎng):將滅菌后的帶芽莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室中培養(yǎng)2?3周，腋芽伸長2?4cm ；
(3)增殖培養(yǎng):將腋芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室內培養(yǎng)4?6周，叢生芽生成，株高1.5?3cm，增殖系數(shù)為2?3 ; (4)生根培養(yǎng):選取生長健壯的叢生芽，將其切成單芽莖段轉接到生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室內培養(yǎng)3?4周，得到生根的寶玉無菌苗。
[0007]所述啟動培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LIAA+0.05mg/LTDZ+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 5g/L，pH6.3 ?6.7 ο
[0008]所述增殖培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LNAA+0.lmg/LTDZ+0.8mg/L6-BA+50mg/LLH+50mg/L椰汁。
[0009]所述生根培養(yǎng)基為1/4B6+0.02mg/LIAA+0.05mg/LNAA+0.0lmg/LIBA。
[0010]步驟(2)、步驟(3)和步驟(4)中所述培養(yǎng)室內條件為:光照強度2000?3000LX，光照時間14?18h/d，溫度24?28°C。
[0011]本發(fā)明具有以下有益效果:本發(fā)明建立了組培快繁體系，使用的培養(yǎng)基配方簡單、培養(yǎng)基成本低，培養(yǎng)流程簡便，提高了寶玉繁殖的效率，繁殖系數(shù)較高為2?3，能快速獲得遺傳性狀一致的寶玉無菌苗；本發(fā)明利用組織培養(yǎng)技術，進行外植體培養(yǎng)獲得了寶玉無菌苗，不受季節(jié)氣候變化、自然災害的影響，為寶玉工業(yè)化育苗及其深加工提供了技術支持。
【附圖說明】
[0012]圖1為本發(fā)明所述的啟動培養(yǎng)中腋芽萌發(fā)；
圖2為本發(fā)明所述的增殖培養(yǎng)中生成的叢生芽；
圖3為本發(fā)明所述的生根培養(yǎng)得到的寶玉無菌苗；
圖4為本發(fā)明所述的生根培養(yǎng)得到的寶玉無菌苗的根系。
【具體實施方式】
[0013]下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的描述，本發(fā)明的保護范圍不局限于以下所述。
[0014]實施例1:一種寶玉的組培快繁方法，它包括以下步驟:
(1)外植體滅菌:取寶玉無病蟲害的當年生幼嫩枝條，去掉葉片，將莖段切割成2cm帶芽莖段，放置在超凈工作臺上，用75%酒精滅菌6s，0.1%升汞滅菌lOmin，無菌水沖洗6次；
(2)啟動培養(yǎng):將滅菌后的帶芽莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，在光照強度為2000LX，光照時間為18h/d，溫度為24°C的培養(yǎng)室內培養(yǎng)2周，腋芽平均伸長2cm，其中，啟動培養(yǎng)基為:B6+0.lmg/LIAA+0.05mg/LTDZ+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 5g/L，pH 6.3 ；
(3)增殖培養(yǎng):將腋芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)4周，叢生芽生成，株平均高1.5cm，增殖系數(shù)為2，其中，增殖培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LNAA+0.lmg/LTDZ+0.8mg/L6-BA+50mg/LLH+ 50mg/L 椰汁；
(4)生根培養(yǎng):選取生長健壯的叢生芽，將其切成單芽莖段轉接到生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)3周，得到生根的寶玉無菌苗，其中，生根培養(yǎng)基為:1/4B6+0.02mg/LIAA+0.05mg/LNAA+0.0lmg/LIBA 的。
[0015]實施例2:—種寶玉的組培快繁方法，它包括以下步驟:
(1)外植體滅菌:取寶玉無病蟲害的當年生幼嫩枝條，去掉葉片，將莖段切割成3cm帶芽莖段，放置在超凈工作臺上，用75%酒精滅菌10s，0.1%升汞滅菌6min，無菌水沖洗4次；
(2)啟動培養(yǎng):將滅菌后的帶芽莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，在光照強度為3000LX，光照時間為14h/d，溫度為28°C的培養(yǎng)室內培養(yǎng)3周，腋芽平均伸長4cm，其中啟動培養(yǎng)基為:B6+0.lmg/LIAA+0.05mg/LTDZ+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 5g/L，pH 6.7 ；
(3)增殖培養(yǎng):將腋芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)6周，叢生芽生成，株平均高3.0cm，增殖系數(shù)為3，其中，增殖培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LNAA+0.lmg/LTDZ+0.8mg/L6-BA+50mg/LLH+ 50mg/L 椰汁；
(4)生根培養(yǎng):選取生長健壯的叢生芽，將其切成單芽莖段轉接到生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)4周，得到生根的寶玉無菌苗，其中，生根培養(yǎng)基為:1/4B6+0.02mg/LIAA+0.05mg/LNAA+0.0lmg/LIBA 的。
[0016]實施例3:—種寶玉的組培快繁方法，它包括以下步驟:
(1)外植體滅菌:取寶玉無病蟲害的當年生幼嫩枝條，去掉葉片，將莖段切割成3cm帶芽莖段，放置在超凈工作臺上，用75%酒精滅菌7s，0.1%升汞滅菌8min，無菌水沖洗5次；
(2)啟動培養(yǎng):將滅菌后的帶芽莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，在光照強度為2300LX，光照時間為16h/d，溫度為25°C的培養(yǎng)室內培養(yǎng)16天，腋芽平均伸長2.8cm，其中，啟動培養(yǎng)基為:B6+0.lmg/LIAA+0.05mg/LTDZ+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 5g/L，pH 6.5 ；
(3)增殖培養(yǎng):將腋芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)5周，叢生芽生成，株平均高2.3cm，增殖系數(shù)為2.3，其中，增殖培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LNAA+ 0.1mg/LTDZ+0.8mg/L6-BA+50mg/LLH+ 50mg/L 椰汁；
(4)生根培養(yǎng):選取生長健壯的叢生芽，將其切成單芽莖段轉接到生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)24天，得到生根的寶玉無菌苗，其中，生根培養(yǎng)基為:1/4B6+0.02mg/LIAA+0.05mg/LNAA+0.0lmg/LIBA。
[0017]實施例4:一種寶玉的組培快繁方法，它包括以下步驟:
(1)外植體滅菌:取寶玉無病蟲害的當年生幼嫩枝條，去掉葉片，將莖段切割成2.5cm帶芽莖段，放置在超凈工作臺上，用75%酒精滅菌8s，0.1%升汞滅菌7min，無菌水沖洗6次；
(2)啟動培養(yǎng):將滅菌后的帶芽莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，在光照強度為2600LX，光照時間為15h/d，溫度為27°C的培養(yǎng)室內培養(yǎng)20天，腋芽平均伸長3.6cm，其中，啟動培養(yǎng)基為 B6+0.lmg/LIAA+0.05mg/LTDZ+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 5g/L，pH 6.6 ；
(3)增殖培養(yǎng):將腋芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)5周，叢生芽生成，株平均高2.5cm，增殖系數(shù)為2.6，其中，增殖培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LNAA+ 0.1mg/LTDZ+0.8mg/L6-BA+50mg/LLH+ 50mg/L 椰汁；
(4)生根培養(yǎng):選取生長健壯的叢生芽，將其切成單芽莖段轉接到生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)室內條件保持不變，培養(yǎng)25天，得到生根的寶玉無菌苗，其中，生根培養(yǎng)基為:1/4B6+0.02mg/LIAA+0.05mg/LNAA+0.0lmg/LIBA 的。
[0018]從實施例1?4得出:本發(fā)明利用植物組織培養(yǎng)技術，建立組培快繁體系，所用的培養(yǎng)基配方簡單，增殖系數(shù)為2?3，能在短時間得到大量的寶玉無菌苗。
【主權項】
1.一種寶玉的組培快繁方法，其特征在于，它包括以下步驟: (1)外植體滅菌:取寶玉無病蟲害的當年生幼嫩枝條，去掉葉片，將莖段切割成2?3cm帶芽莖段，放置在超凈工作臺上，用75%酒精滅菌6?10s，0.1%升汞滅菌6?lOmin，無菌水沖洗4?6次； (2)啟動培養(yǎng):將滅菌后的帶芽莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室中培養(yǎng)2?3周，腋芽伸長2?4cm ； (3)增殖培養(yǎng):將腋芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室內培養(yǎng)4?6周，叢生芽生成，株高1.5?3cm ； (4)生根培養(yǎng):選取生長健壯的叢生芽，將其切成單芽莖段轉接到生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室內培養(yǎng)3?4周，得到生根的寶玉無菌苗。
2.根據權利要求1所述的一種寶玉的組培快繁方法，其特征在于，所述啟動培養(yǎng)基為B6+0.lmg/LIAA+0.05mg/LTDZ+ 蔗糖 30g/L+ 瓊脂 5g/L，pH 6.3 ?6.7。
3.根據權利要求1所述的一種寶玉的組培快繁方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基為Β6+0.lmg/LNAA+0.lmg/LTDZ+0.8mg/L6-BA+50mg/LLH+50mg/L 椰汁。
4.根據權利要求1所述的一種寶玉的組培快繁方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基為.1/4B6+0.02mg/LIAA+0.05mg/LNAA+0.0lmg/LIBA。
5.根據權利要求1所述的一種寶玉的組培快繁方法，其特征在于，步驟(2)、步驟(3)和步驟(4)中所述培養(yǎng)室內條件為:光照強度2000?3000LX，光照時間14?18h/d，溫度.24 ?28V。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種寶玉的組培快繁方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術領域，它包括外植體滅菌，啟動培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的步驟。本發(fā)明建立了組培快繁體系，使用的培養(yǎng)基配方簡單、培養(yǎng)基成本低，培養(yǎng)流程簡便，寶玉繁殖系數(shù)較高，為寶玉工業(yè)化育苗及其深加工提供了技術支持。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號】CN104663435
【申請?zhí)枴緾N201510064320
【發(fā)明人】沈香蘭, 馬建華, 王小輝, 朱曉菲, 馬良良, 楊小霞
【申請人】巴中七彩林業(yè)科技有限公司
【公開日】2015年6月3日
【申請日】2015年2月9日