一種提高藍莓組培試管苗煉苗成苗率的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物種苗組培繁育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提高藍莓組培試管苗煉苗成苗率的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]藍莓素有“抗氧化之王，美瞳之果”的美譽，對快節(jié)奏生活的現(xiàn)代都市人來說越來越具有保健價值。我國藍莓產(chǎn)業(yè)經(jīng)過近15年來的快速發(fā)展已經(jīng)初具規(guī)模，但面積和產(chǎn)量還遠遠不能滿足國內(nèi)市場的需求。目前，國內(nèi)藍莓種苗生產(chǎn)主要依靠組培技術(shù)，其技術(shù)難點集中于瓶內(nèi)壯苗、瓶外生根、煉苗移栽等環(huán)節(jié)。普遍存在繁殖系數(shù)偏低、生根率偏低、移苗操作效率偏低等“三低”問題(以下簡稱“三低”問題)，大大提高了藍莓組培育苗成本和苗木價格，從而制約了藍莓產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明旨在集成創(chuàng)新一種提高藍莓組培試管苗煉苗成苗率的方法的方法，系統(tǒng)解決現(xiàn)有技術(shù)存在的“三低”問題。
[0004]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是，一種提高藍莓組培試管苗煉苗成苗率的方法的方法，在無菌條件下進行初代培養(yǎng)和繼代增殖培養(yǎng)，在培養(yǎng)得到無菌繼代苗的基礎(chǔ)上再進行以下操作:
[0005]步驟1、對繼代苗采用添加西紅柿的WPM培養(yǎng)基進行壯苗培養(yǎng)，得到健壯瓶苗；
[0006]步驟2、對健壯瓶苗進行室內(nèi)瓶外微型莖段高密度生根培養(yǎng)，制備得到微型生根苗；
[0007]步驟3、對微型生根苗進行室外煉苗和移栽管理，培育出標準組培容器苗。
[0008]本發(fā)明的特點還在于，
[0009]步驟I中對繼代苗采用添加西紅柿的WPM培養(yǎng)基進行壯苗培養(yǎng)具體按照以下步驟實施:
[0010]步驟1.1、將繼代苗接種到藍莓繼代培養(yǎng)基上，藍莓繼代培養(yǎng)基配方為WPM+ZTRlmg/L+西紅柿5g/L，無需調(diào)節(jié)pH值，轉(zhuǎn)接I次，其中，藍莓繼代培養(yǎng)基即為添加西紅柿的WPM培養(yǎng)基；
[0011]步驟1.2、將藍莓繼代培養(yǎng)基配方調(diào)整為WPM+ZTR 0.5mg/L+西紅柿10g/L，無需調(diào)節(jié)PH值，經(jīng)多次轉(zhuǎn)接后得到足夠數(shù)量的健壯瓶苗，其中，藍莓繼代培養(yǎng)基即為添加西紅柿的WPM培養(yǎng)基。
[0012]對繼代苗采用添加西紅柿的WPM培養(yǎng)基進行壯苗培養(yǎng)操作時切取帶I?2個單芽的莖段接種培養(yǎng)基中，培養(yǎng)容器采用250ml罐頭瓶或馬鈴薯瓶，每瓶接種數(shù)量10?15棵。
[0013]步驟2中對健壯瓶苗進行室內(nèi)瓶外微型莖段高密度生根培養(yǎng)具體按照以下步驟實施:
[0014]步驟2.1、藍莓壯苗莖段的剪取及處理:在空氣中打開瓶蓋，用鑷子夾出試管苗，剪去基部帶有培養(yǎng)基的部分，再剪成帶2個芽的莖段，用潔凈容器收集，立刻在激素溶液內(nèi)浸泡3s撈出；
[0015]步驟2.2、莖段的扦插:生根基質(zhì)置入塑料餐盒中，將步驟2.1制得的藍莓微型生根莖段置于盛裝了生根基質(zhì)的塑料餐盒內(nèi)，每盒100株左右，改直接扦插為打孔扦插；
[0016]步驟2.3、密封生根:立即用保鮮膜密封，置于溫度為21°C?28°C，光照條件為2000?30001ux光照環(huán)境條件下培養(yǎng)21天。
[0017]步驟2中生根營養(yǎng)液的配制和滅菌方法是:配制IL的WPM培養(yǎng)基加水稀釋至5L，稀釋后的溶液調(diào)節(jié)PH值到4.5，滅菌(改高壓滅菌為煮沸滅菌，下同)。滅菌后冷卻即得到生根營養(yǎng)液，備用；所述激素溶液的配制方法是:稱取IBA或NAA lg，用少量IN的NaOH溶液溶解，定容至1L，將稀釋后的溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0，滅菌后冷卻備用；所述生根基質(zhì)的配制方法是:按照珍珠巖與生根營養(yǎng)液重量比例1:5，將兩者混合即制得生根基質(zhì)。
[0018]步驟3藍莓組培微型生根苗的煉苗和移栽具體按照以下步驟實施:
[0019]步驟3.1、煉苗:在溫度20?25°C，光照20001ux，相對濕度70?90%環(huán)境條件下，步驟2.3生根苗餐盒保鮮膜劃開一道口子，煉苗I?2天，之后完全揭去保鮮膜，澆水繼續(xù)煉苗I?2天；
[0020]步驟3.2、移栽:完成煉苗后收集藍莓微型生根苗于塑料盒容器中，移栽時用鑷子夾取生根的藍莓微型生根苗直接放入盛裝移栽基質(zhì)的穴盤中，置于帶有噴灌系統(tǒng)的苗床內(nèi)，不定期噴水保濕；
[0021]步驟3.3、上盆:待穴盤苗新梢長出4-5張葉片時，帶基質(zhì)移栽上盆，其中，塑料盆口徑8-lOcm，即移入苗圃進行正常管理。
[0022]移栽基質(zhì)的具體制備方法如下:按照質(zhì)量百分比稱取泥炭70份，珍珠巖10份，黃心土 10份，稻殼8份，控釋肥2份混拌均勻，浸泡消毒，移栽前澆透水備用。
[0023]本發(fā)明的有益效果是:本技術(shù)方案采用的瓶內(nèi)壯苗、室內(nèi)瓶外高密度集中生根、室外煉苗移栽等方法，提高了成苗率和工作效率，系統(tǒng)解決藍莓工廠化組培育苗的“三低”問題。與現(xiàn)有同類技術(shù)相比，優(yōu)點在于:①步驟I繼代苗培養(yǎng)基添加西紅柿有機物進行壯苗培養(yǎng)，提高了試管苗的健壯程度，更有利于生根和增強其對不良環(huán)境的抵抗能力；藍莓自然生長時屬于喜強酸性土壤條件的植物，由于西紅柿富含有機酸，添加西紅柿的培養(yǎng)基維持低PH值的緩沖能力大大增強，降低了未添加的培養(yǎng)基后期pH上升的不利影響，還可省去每次培養(yǎng)基配制時調(diào)節(jié)酸堿度的麻煩。②步驟2采用的室內(nèi)瓶外高密度生根技術(shù)，方法上改變滅菌方式，實行室內(nèi)操作，簡易方便；環(huán)境控制上室內(nèi)可控性強，管理方便集約化，從而保證了其生根的穩(wěn)定性；③步驟3微型生根苗的室外煉苗移栽，較之同類技術(shù)的無根苗馴化時既要適應(yīng)環(huán)境又要生根，其對環(huán)境變化的適應(yīng)性大大增強，生根率達到95%，比國內(nèi)平均水平高出10個百分點以上；④步驟3生根莖段僅帶2個芽，僅此階段就比現(xiàn)有技術(shù)(5?6個芽)的苗木繁殖系數(shù)提高2倍以上。⑤生根采用珍珠巖作為支持物，材料易取得重量輕，移栽時操作方便，每人每天可移栽0.8?I萬株，移栽效率是國內(nèi)現(xiàn)有技術(shù)的2倍，顯著降低了人工成本。
【附圖說明】
[0024]圖1是微型苗生根顯微鏡照片，其中，a為一種是微型苗生根顯微鏡照片；b為另一種是微型苗生根顯微鏡照片，C是生根后成活情況圖片，d是室內(nèi)大規(guī)模生根圖片。
【具體實施方式】
[0025]下面結(jié)合附圖和【具體實施方式】對本發(fā)明進行詳細說明。
[0026]本發(fā)明提供一種提高藍莓組培試管苗煉苗成苗率的方法，具體按照以下步驟實施:取藍莓半木質(zhì)化或未木質(zhì)化嫩梢進行無菌接種，經(jīng)初代培養(yǎng)和繼代增殖培養(yǎng)，在得到繼代苗的基礎(chǔ)上再進行以下操作:
[0027]步驟1、繼代苗的壯苗培養(yǎng)；將進入快速增殖階段的藍莓無菌苗，進行壯苗培養(yǎng)。壯苗培養(yǎng)共分二個階段進行:第一階段的培養(yǎng)基組成為:基本培養(yǎng)基、激素及有機添加物。基本培養(yǎng)基采用WPM培養(yǎng)基，添加激素為反式玉米素核苷(ZTR)，濃度為lmg/L，有機添加物為西紅柿，濃度為5g/L，無需調(diào)節(jié)pH值。第二階段將培養(yǎng)基激素配方調(diào)整為ZTR 0.5mg/L、有機添加物西紅柿濃度調(diào)整為10g/L，無需調(diào)節(jié)pH值。第一階段轉(zhuǎn)接I次，第二階段轉(zhuǎn)接多次，每次轉(zhuǎn)接間隔時間I個月，直至培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的健壯瓶苗。每次轉(zhuǎn)接操作時，要求切取帶2個單芽的莖段，培養(yǎng)容器采用250ml罐頭瓶或馬鈴薯瓶，每瓶接種數(shù)量10-15棵。
[0028]步驟2、健壯瓶苗室內(nèi)瓶外高密度生根培養(yǎng)，配制2種生根溶液:生根營養(yǎng)液(1/5WPM營養(yǎng)溶液)和激素溶液(lmg/mL的IBA溶液)。1/5WPM營養(yǎng)液配制方法是:配制IL的WPM培養(yǎng)基加水稀釋至5L，稀釋后的溶液調(diào)節(jié)pH值到4.5，煮沸滅菌后冷卻即可，備用。激素溶液的配制方法是:稱取IBA lg，用少量IN的NaOH溶液溶解，定容至1L，將稀釋后的溶液調(diào)節(jié)PH值至5.0，煮沸滅菌后冷卻備用。
[0029]將干凈的珍珠巖與生根營養(yǎng)