專利名稱：一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體而言涉及一種飼料蛋白肽的制備方法。
背景技術(shù)：
自上世紀50年代開始，在動物日糧中添加抗生素顯著促進了動物生產(chǎn)，并對集約化畜牧業(yè)的發(fā)展做出了重大貢獻。然而隨著時間的推移，飼料中添加抗生素的危害日益顯現(xiàn)，并受到社會的廣泛關(guān)注。2004年，WT0、聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)和世界動物衛(wèi)生組織(OIE)聯(lián)合召開專題討論會，討論了非人用抗生素的使用和抗生素的耐藥性問題。歐盟自2006年I月起全面禁止在畜禽飼料中添加抗生素。在生豬等飼養(yǎng)中不得添加抗生素目前已經(jīng)是國際公認的食品安全標準。人們開始紛紛尋求其它的替代品和替代技術(shù)，以保證畜牧業(yè)生產(chǎn)的效率與效益不受影響。為解決上述問題，本發(fā)明提出一種新型飼料蛋白——無抗益生活性飼料蛋白肽的生產(chǎn)工藝。 本發(fā)明的技術(shù)特點在于包含三類菌群，
I是抗營養(yǎng)因子降解菌群，在油料餅柏中含有大量抗營養(yǎng)因子，如豆柏中的胰蛋白酶抑制劑，菜籽柏中的硫代葡萄糖苷，這些抗營養(yǎng)因子的存在會嚴重影響到動物對飼料蛋白的消化利用。本發(fā)明引入相應(yīng)的降解菌，對其進行降解，達到無抗目的。2是動物益生菌菌群。動物益生菌是一種生態(tài)健康型飼料添加劑，因不添加抗生素，不會造成藥物殘留，所以被人們普遍認為是有前途的抗生素的替代品，是動物的綠色飼料添加劑，受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛研究。本發(fā)明引入相應(yīng)的動物益生菌，調(diào)節(jié)動物腸道菌群平衡，提高動物免疫力，達到益生目的。3生物活性肽生產(chǎn)菌群。蛋白質(zhì)被動物攝取后，經(jīng)腸道多種蛋白水解酶的作用，不是僅以氨基酸的形式吸收，更多的是以小肽的形式被直接吸收。而且，二肽和三肽的吸收速度比同組成的氨基酸要快。其中，某些小肽不僅具有營養(yǎng)功能，而且具有多種生理功能，這是肽理論研究和實踐應(yīng)用中的重大突破。本發(fā)明引入相應(yīng)的生物活性肽生產(chǎn)菌群，可將油料餅柏中粗蛋白降解成寡肽，達到活性目的。目前國內(nèi)外對飼料的固體發(fā)酵都是一步發(fā)酵法，即在同一操作條件下進行，不能很好的滿足各種菌群的生長要求。本發(fā)明針對不同菌種的生長特性，實施分時發(fā)酵法，即在不同的發(fā)酵階段控制不同的發(fā)酵參數(shù)(溫度，PH值，通氣量)，不僅保證動物益生菌的有效生長和存活，還保證活性肽生產(chǎn)菌能有效水解蛋白產(chǎn)生物活性肽，抗營養(yǎng)因子降解菌能充分降解原料中的抗營養(yǎng)因子。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備工藝，利用該發(fā)明，制備不含抗營養(yǎng)因子，富含動物益生菌或生物活性肽的飼料蛋白。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的
一發(fā)酵菌的制備I)抗營養(yǎng)因子降解菌的制備，從原始出發(fā)菌種酵母菌屬和霉菌屬(見表I)中挑取一環(huán)菌體，分別接種到麥芽汁種子培養(yǎng)基和察氏種子培養(yǎng)基中，于25°C -30°c溫度下，100-120rpm，搖床培養(yǎng)48-72小時后，停止培養(yǎng)，作為I號發(fā)酵液。2)動物益生菌的制備，從原始出發(fā)菌種乳酸菌屬(見表I)中挑取一環(huán)菌體，接種到乳酸菌屬培養(yǎng)基中，于35°C _38°C溫度下靜止培養(yǎng)48-64小時,作為2號發(fā)酵液。3)生物活性肽生產(chǎn)菌的制備，從原始出發(fā)菌種芽孢桿菌屬(見表I)中挑取一環(huán)菌體，接種到牛肉膏蛋白胨種子培養(yǎng)基中，于30°C _37°C溫度下，150-170rpm，搖床培養(yǎng)16-24小時后，停止培養(yǎng)，作為3號發(fā)酵液。4)復(fù)合發(fā)酵菌種的制備，將I號、2號和3號種子液按體積比I : 2 I比例混合均勻，作為復(fù)合發(fā)酵菌種液。二固態(tài)原料的制備
將豆柏或菜籽柏等原料粉碎，按料水比I :4 1 :8加水混勻。三復(fù)合菌群分步發(fā)酵
I)第一次發(fā)酵將復(fù)合發(fā)酵菌種液以5% ^10%的接種量接種到固態(tài)原料中，混合均勻 于。將攪拌好的料堆積在消好毒的場地上，料高20— 40厘米，好氧發(fā)酵48 54小時。2 )第二次發(fā)酵將混合物裝入大塑料桶或塑料袋壓實密閉，保證密封完全不透氣。厭氧發(fā)酵經(jīng)3-5天。四產(chǎn)品后處理
發(fā)酵結(jié)束后，于60°C下干燥，粉碎，包裝即得產(chǎn)品。
表I復(fù)合發(fā)酵菌群中的具體菌種
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具體實施例I)分別從斜面保藏的酵母菌屬原始菌種釀酒酵母、白地霉、產(chǎn)脘假絲酵母、熱帶假絲酵母中挑取一環(huán)菌體，接種到O. 5 L麥芽汁種子培養(yǎng)基，于28°C溫度下，120rpm，搖床培養(yǎng)48小時后，使其活菌數(shù)量達到106/ml以上，等體積混合四種菌株的種子培養(yǎng)液，得到2L酵母復(fù)合種子液。2)分別從斜面保藏的霉菌屬原始菌種米曲霉、黑曲霉中挑取一環(huán)菌體，接種到I L察氏種子培養(yǎng)基中，于28°C溫度下，120rpm,搖床培養(yǎng)72小時后,停止培養(yǎng),使其活菌數(shù)量達到106/ml以上，等體積混合兩種菌株的種子培養(yǎng)液，得到2L霉菌復(fù)合種子液。3)將2L酵母復(fù)合種子液和2L霉菌復(fù)合種子液混合均勻，得到4L抗營養(yǎng)因子降解菌復(fù)合發(fā)酵液(I號發(fā)酵液)。4)分別從斜面保藏的乳酸菌屬原始菌種植物乳桿菌、雙歧乳桿菌、腸球菌、酪酸菌中挑取一環(huán)菌體，接種到2 L乳酸菌屬培養(yǎng)基中，于37°C溫度下靜止培養(yǎng)48小時，使其活菌數(shù)量達到107/ml以上，等體積混合四種菌株的種子培養(yǎng)液，得到8L乳酸菌復(fù)合種子液，作為動物益生菌復(fù)合發(fā)酵液(2號發(fā)酵液)。5)分別從斜面保藏的芽孢桿菌屬原始菌種枯草芽孢桿菌、納豆桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌中挑取一環(huán)菌體，接種到I L牛肉膏蛋白胨種子培養(yǎng)基中，于37°C溫度下，160rpm，搖床培養(yǎng)24小時后，使其活菌數(shù)量達到107/ml以上，等體積混合四種菌株的種子培養(yǎng)液，得到4L芽孢桿菌復(fù)合種子液，作為生物活性肽復(fù)合發(fā)酵液(3號發(fā)酵液)。
6)將4L體積的I號發(fā)酵液、8L體積的2號發(fā)酵液和4L體積的3號發(fā)酵液混合均勻，共得16L復(fù)合發(fā)酵菌種液。7)將32公斤豆柏粉碎，按料水比I :4加如128公斤水，混勻，得160公斤發(fā)酵原料。8)將16L復(fù)合發(fā)酵菌種液接種到160公斤固態(tài)發(fā)酵原料中，混合均勻。將攪拌好的料堆積在消好毒的場地上，料高30厘米，好氧發(fā)酵48小時。9 )好氧發(fā)酵結(jié)束后，將混合物裝入大塑料桶中壓實密閉，保證完全不透氣。再厭氧發(fā)酵4天。10)發(fā)酵結(jié)束后，取出物料，于60°C下干燥，粉碎，包裝即得產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備方法，其特征是以油料餅柏為主要原料，用復(fù)合 微生物進行固體發(fā)酵所得，所述的復(fù)合微生物包括三大功能菌群1抗營養(yǎng)因子降解菌群；2動物益生菌群；3生物活性肽生產(chǎn)菌群，上述的抗營養(yǎng)因子降解菌群由釀酒酵母、白地霉、產(chǎn)脘假絲酵母、熱帶假絲酵母、米曲霉、黑曲霉組合而成，每種菌的活菌總數(shù)^ IXIO6-IO9,上述的動物益生菌群由植物乳桿菌、雙歧乳桿菌、腸球菌和酪酸菌組合而成，每種菌的活菌總數(shù)> IXIO6-IO9,上述的生物活性肽生產(chǎn)菌群由枯草芽孢桿菌、納豆桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌組合而成，每種菌的活菌總數(shù)> IXIO6-IO90
全文摘要
本發(fā)明提供一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備方法，以價格低廉的油料餅粕為原料，經(jīng)過微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)變成無抗益生活性飼料蛋白肽，所用發(fā)酵菌為復(fù)合菌群，包括抗營養(yǎng)因子降解菌群、動物益生菌群，生物活性肽生產(chǎn)菌群。利用該發(fā)明所得產(chǎn)品為一種飼料蛋白，其具有三大特點1無抗，不含抗營養(yǎng)因子；2益生，富含動物益生菌；3活性，富含生物活性肽。該飼料蛋白用于動物飼養(yǎng)具有易吸收、生物效價高和對動物的免疫調(diào)節(jié)、防病抗病等作用。
文檔編號A23K1/14GK102919514SQ201210457459
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月15日
發(fā)明者熊小鵬, 李 榮 申請人:江西一領(lǐng)藥業(yè)有限公司