專利名稱：桑黃袋料栽培培養(yǎng)基及采用該培養(yǎng)基栽培桑黃子實體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的說涉及桑黃袋料培養(yǎng)培養(yǎng)基配方以及采用該培養(yǎng)基規(guī)?；耘嗌｜S子實體的方法。
背景技術(shù)：
桑黃，擔子菌亞門，層菌綱，多孔菌目，多孔菌科，針層孔菌類真菌。學(xué)名 Phellinus Linteus，中文名裂蹄針層孔菌，俗稱桑臣、桑黃菇等；是寄生于桑樹等闊葉
樹的一種藥用真菌，素有“森林黃金”之美稱。據(jù)《藥性論》記載味甘辛，無毒。《全國中草藥匯編》則記載桑黃具有“利五臟，軟堅，排毒，止血，活血和胃止瀉”等功效，是目前國際公認的生物抗癌領(lǐng)域中有效率最佳的藥用真菌?！つ壳?，由于受生理狀態(tài)的特殊性和復(fù)雜性以及外部環(huán)境的制約，桑黃在自然界中形成子實體困難，造成天然的桑黃數(shù)量非常稀少，自然界中可供藥用的資源有限，加之國內(nèi)外市場對桑黃的需求量越來越大，致使國內(nèi)各產(chǎn)地藥農(nóng)掠奪性采集，子實體無法大量形成，難以成為穩(wěn)定的工業(yè)產(chǎn)品來源，對桑黃產(chǎn)業(yè)的發(fā)展十分不利，因此通過人工培植來彌補野生資源的不足顯得尤為重要。但是桑黃人工栽培極其困難，存在著培養(yǎng)條件苛刻、生長周期長的問題。目前栽培的人工栽培主要有兩種，一種是以桑樹、楊樹、櫟樹的段木栽培為主，段木栽培需要大量的木材資源，資源浪費比較嚴重，難以規(guī)模化栽培；另一種是袋料栽培，但是存在培養(yǎng)基營養(yǎng)供給不充分，子實體發(fā)育較小、易染雜菌等問題。申請?zhí)枮?00410041704. X的中國專利公開了一種桑黃人工高產(chǎn)栽培方法及桑黃子實體的應(yīng)用，該發(fā)明采用袋料栽培，為了解決培養(yǎng)基營養(yǎng)供給不充分，子實體發(fā)育較小、易染雜菌等問題。在培養(yǎng)基中添加了生長素，生長素的添加沒有從根本上解決培養(yǎng)基的問題，而且生長素的添加對桑黃的品質(zhì)有影響，同時不利于桑黃的天然生長。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決目前野生桑黃資源的不足，人工栽培中袋料栽培存在培養(yǎng)基營養(yǎng)供給不充分，子實體發(fā)育較小、易染雜菌的問題，本發(fā)明提供一種桑黃袋料栽培培養(yǎng)基，采用桑黃袋料培養(yǎng)基配方，可以提供桑黃子實體生長所攝取的營養(yǎng)物質(zhì)；
同時本發(fā)明提供一種采用該培養(yǎng)基規(guī)?；耘嗌｜S子實體的方法，本發(fā)明培養(yǎng)的桑黃子實體近似野生桑黃、質(zhì)量穩(wěn)定，同時本發(fā)明的培養(yǎng)方式簡單，可用于具有藥用價值的桑黃子實體規(guī)模化栽培。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種桑黃袋料栽培培養(yǎng)基，所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基由營養(yǎng)料與水混合后裝袋制成，然后在溫度110 135°C，壓力0. 05 0. 25MPa，滅菌30_180min，其中營養(yǎng)料與水的質(zhì)量比為I :1. 8 2. 5。如果高溫滅菌不徹底，當采用桑黃袋料栽培培養(yǎng)基栽培桑黃子實體時，雜菌會從袋裝培養(yǎng)基的中部或底部發(fā)生。所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基的營養(yǎng)料由以下組份混合制成，各組分的質(zhì)量百分比為桑枝木屑40 80%，桑葉粉5 20%，谷粒10 30%，糖0. 5 2%，生石灰1% 5%，KH2PO4O. 1% 2%，MgSO4O. I 2%。選用生石灰不僅可以滅菌，給桑黃菌提供一個良好的生長環(huán)境，還可以為培養(yǎng)基提供Ca2+元素，而且成本比石膏粉低。谷粒選自玉米粒、麥粒、稻谷中一種。相對于目 前常用的米糠或麥麩，可以提供更加充足的營養(yǎng)，使桑黃菌生長狀況更好；桑黃菌的母種目前大都采用谷粒培養(yǎng)的，轉(zhuǎn)接后對菌種來說更容易適應(yīng)環(huán)境；選用谷粒取代了目前常用的另一種基材-棉籽殼，可以避免棉籽殼中的有害成分棉酚進入桑黃子實體中，從而提高桑黃的品質(zhì)。作為優(yōu)選，糖選為蔗糖或者葡萄糖。由于桑黃以桑樹長出來的子實體為佳，因此利用桑枝木屑、桑葉粉為基材進行培養(yǎng)，能夠提供最佳生長營養(yǎng)條件，提高其品質(zhì)；同時充分利用蠶桑廢棄資源，有利于環(huán)保和可持續(xù)開發(fā)利用。雖然桑樹枝木段培養(yǎng)基上桑黃菌絲生長良好，菌蕾出現(xiàn)時間早，但是桑樹長得慢，資源有限，如果都用桑樹段木的話，不僅無法形成規(guī)?；囵B(yǎng)，而且不環(huán)保，因此菌袋是發(fā)展趨勢。本發(fā)明的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基的組成成分解決了袋裝培養(yǎng)基營養(yǎng)供給不充分，子實體發(fā)育較小、易染雜菌等問題。一種采用桑黃袋料栽培培養(yǎng)基栽培桑黃子實體的方法為以下步驟
a)桑黃菌袋培養(yǎng)基的菌絲體培養(yǎng)方法在無菌環(huán)境中往桑黃菌袋培養(yǎng)基中接入桑黃母種，接種量為桑黃菌袋培養(yǎng)基質(zhì)量的5 20%，將接種后的桑黃菌袋培養(yǎng)基置于25 30°C恒溫中培養(yǎng)，空氣濕度50 80%，桑黃菌袋培養(yǎng)基濕度50 60%，光照強度10-301uX，通風換氣次數(shù)I 5次/天，每次的時間5 30min，培養(yǎng)時間60-90天；
b)采用菌袋培養(yǎng)基規(guī)?；耘嗌｜S子實體的方法將步驟a)長滿菌絲體的菌袋的一端埋入土中，埋入土中的菌袋長度菌袋長度的1/3 1/2，另一端裸露在外面，栽培3、天后在桑黃菌袋培養(yǎng)基的袋子上劃開切口出菇，作為優(yōu)選，采用環(huán)割方式劃開切口出菇，切口為半月形，切口長度約為袋料周長的三分之一，面積2-9cm2，數(shù)量為21個，培養(yǎng)溫度25^300C，土壤濕度40 75%，空氣濕度85 98%，光照強度2(T2001ux，通風換氣次數(shù)I 8次/天，每次的時間5 30min，7 10天后即可形成桑黃子實體，培養(yǎng)時間75天 4年。因為桑黃是多年生的，75天就可以長到成品的大小，以后的生長很緩慢，但是年限越長，桑黃子實體藥用效果越好。作為優(yōu)選，栽培6天后采用環(huán)割方式出菇，切口為半月型，約5cm2，栽培溫度28 0C，土壤濕度60%，空氣濕度95%。作為優(yōu)選，從桑黃菌袋培養(yǎng)基的袋子上劃開切口出菇到形成桑黃子實體期間要采取變溫處理，調(diào)節(jié)晝夜溫差，刺激利于子實體的形成和生長。一般從桑黃菌袋培養(yǎng)基的袋子上劃開切口出菇到形成小的桑黃子實體的7 10內(nèi)，采用通風換氣等方法，調(diào)節(jié)晝夜溫差，使晝夜溫差控制在10°C以上。作為優(yōu)選，白天溫度控制在25 30°C左右，夜晚控制在12 18°C左右。桑黃子實體形成后可恢復(fù)常溫培養(yǎng)溫度25 30°C。桑黃母種來源于從野外采集來的野生桑黃子實體，經(jīng)過菌種鑒定后，采用常規(guī)方法分離純化得到桑黃菌株，接種到母種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得桑黃母種。
一般桑黃菌絲開始萌發(fā)時雜菌也就開始生長。因此接入桑黃母菌時要在無菌環(huán)境中，如果接種室消毒不嚴或者操作時帶進雜菌，會造成雜菌感染，還有原種是否有雜菌感染等。若是原種本身有雜菌，接種后菌種培養(yǎng)基表面全是雜菌，若是接種操作不當，只是部分袋裝培養(yǎng)基表面滋生雜菌，而不是全部感染雜菌。 桑黃菌絲對溫度的變化很敏感，試驗說明，菌絲的生長速度隨溫度的升高而加快，到28°C時最快，隨后隨溫度的升高生長速度逐漸降低；但是菌袋放在28°C下培養(yǎng)，大量的菌袋堆在發(fā)菌室中，雜菌繁殖快，菌棒極易被污染，將菌袋放在26°C的條件下培養(yǎng)可減少污染。因此作為優(yōu)選，菌絲生長階段溫度應(yīng)控制在26V。同樣菌絲生長階段對于濕度和通風、光照也有要求。在桑黃子實體形成和分化階段同樣要求有適當?shù)臏囟?、濕度、光線和通氣條件。避免強日光直射，否則子實體很難分化或不分化。桑黃要求有良好的通氣條件，對二氧化碳非常敏感，如果通氣不良，會使子實體發(fā)育畸形。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是
(1)采用本發(fā)明的袋料培養(yǎng)基可快速、規(guī)模化栽培桑黃子實體，近似野生桑黃，并且質(zhì)·量穩(wěn)定;
(2)本發(fā)明培養(yǎng)方式簡單，可用于具有藥用價值的桑黃子實體大規(guī)模培養(yǎng)。(3)本發(fā)明可以充分利用桑枝、桑葉等資源，能夠有效減少段木資源的浪費，利于環(huán)保。具體實施方法
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。所用原料均可市購，桑黃母種是采用常規(guī)方法分離純化得到桑黃菌株，接種到母種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得桑黃母種。實施例I
配置本發(fā)明中所述的桑黃子實體培養(yǎng)基I千克，每千克中營養(yǎng)料各組份重量為桑枝木屑720克，桑葉粉100克，玉米顆粒100克，蔗糖10克，生石灰50克，KH2PO4IO克，MgSO4IO克；按配方攪拌均勻，加水I. 8千克，拌好后裝袋，袋裝培養(yǎng)基通過高壓滅菌，滅菌條件壓力0. 15MPa，溫度112°C，時間180min，得到桑黃袋料栽培培養(yǎng)基。將桑黃母種在無菌室中接種于上述桑黃袋料栽培培養(yǎng)基中，接種量10%，將接種后的菌棒培養(yǎng)溫度26°C，空氣濕度75%，袋料濕度50%，光照強度201ux，通風換氣次數(shù)2次/天，每次IOmin,培養(yǎng)時間75天；
將長滿菌絲體的菌袋下面三分之一埋入土中，三分之二裸露在外面，對菌袋栽培3天后采用環(huán)割方式出菇，切口 5個，面積約2cm2，出菇后采用通風換氣方法，調(diào)節(jié)晝夜溫差，白天溫度控制在26°C左右，夜晚控制在15°C左右，5天后桑黃子實體形成，然后栽培溫度260C，空氣濕度95%，光照強度lOOlux，通風換氣次數(shù)3次，每次20min，培養(yǎng)時間90天，培養(yǎng)結(jié)束后可獲得桑黃子實體35克。實施例2
配置本發(fā)明中所述的桑黃子實體培養(yǎng)基I千克，每千克中營養(yǎng)料各組份重量為桑枝木屑700克，桑葉粉100克，麥粒135克，葡萄糖15克，生石灰20克，KH2PO415克，MgSO415克；按配方攪拌均勻，加水2. 5千克，拌好后裝袋，袋裝培養(yǎng)基通過高壓滅菌，滅菌條件壓力0. 05MPa，溫度121°C，時間120min，得到桑黃袋料栽培培養(yǎng)基。將桑黃母種在無菌室中接種于上述桑黃袋料栽培培養(yǎng)基中，接種量15%，將接種后的菌棒培養(yǎng)溫度28°C，空氣濕度65%，袋料濕度55%，光照強度lOlux，通風換氣次數(shù)3次/天，，每次30min，培養(yǎng)時間60天；
將長滿菌絲體的菌袋下面二分之一埋入土中，其余裸露在外面，對菌袋進行栽培，栽培5天后采用環(huán)割方式出菇，切口 3個，面積5cm2，出菇后采用通風換氣方法，調(diào)節(jié)晝夜溫差，白天溫度控制在28°C左右，夜晚控制在15°C左右。7天后桑黃子實體形成，然后栽培溫度28°C，空氣濕度90%，光照強度1201ux，通風換氣次數(shù)5次，每次lOmin，培養(yǎng)時間100天。培養(yǎng)結(jié)束后可獲得桑黃子實體30克。實施例3
配置本發(fā)明中所述的桑黃子實體培養(yǎng)基I千克，每千克中營養(yǎng)料各組份重量為桑枝木屑650克，桑葉粉100克，稻谷200克，蔗糖10克，生石灰15克，KH2P0415克，MgSO4IO克；按配方攪拌均勻，加水2. 3千克，拌好后裝袋，袋裝培養(yǎng)基通過高壓滅菌，滅菌條件壓力0. 15MPa，溫度128°C，時間90min，得到桑黃袋料栽培培養(yǎng)基。
·
將桑黃母種在無菌室中接種到上述桑黃袋料栽培培養(yǎng)基中，接種量20%，將接種后的菌棒培養(yǎng)溫度26°C，空氣濕度70%，袋料濕度60%，光照強度151ux，通風換氣次數(shù)5次/天，每次IOmin,培養(yǎng)時間80天；
將長滿菌絲體的菌袋下面三分之一埋入土中，其余裸露在外面，對菌袋進行栽培，栽培9天后采用環(huán)割方式出菇，切口 4個，面積9cm2，出菇后采用通風換氣方法，調(diào)節(jié)晝夜溫差，白天溫度控制在25°C左右，夜晚控制在14°C左右。10天后桑黃子實體形成，然后栽培溫度250C，空氣濕度95%，光照強度801ux，通風換氣次數(shù)4次/天，每次20min，培養(yǎng)時間105天。培養(yǎng)結(jié)束后可獲得桑黃子實體32克。實施例I、實施例2和實施例3培養(yǎng)出的桑黃子實體呈馬蹄形，質(zhì)地堅硬，單層片大而質(zhì)優(yōu)，子實體呈深黃至淺咖啡色，近似野生桑黃，根據(jù)報道是目前桑黃子實體規(guī)?；N植唯一成功的實例。以上所述僅為本發(fā)明的具體實施例，但本發(fā)明的技術(shù)特征并不局限于此，任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明的領(lǐng)域內(nèi)，所作的變化或修飾皆涵蓋在本發(fā)明的專利范圍之中。
權(quán)利要求
1.一種桑黃袋料栽培培養(yǎng)基，其特征在于所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基由營養(yǎng)料與水混合后裝袋制成，然后在溫度110 135°C，壓力0. 05 0. 25Mpa，滅菌3(Tl80min，其中營養(yǎng)料與水的質(zhì)量比為I :1.8 2. 5。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基，其特征在于所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基的營養(yǎng)料由以下組分混合制成，各組分的質(zhì)量百分比為桑枝木屑4(T80%，桑葉粉5 20%，谷粒 10 30%，糖 0. 5 2%，生石灰 1% 5%，KH2PO4O. 1% 2%，MgSO4O. I 2%。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基，其特征在于谷粒選自玉米粒、麥粒、稻谷中一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基，其特征在于糖選為蔗糖或者葡萄糖。
5.一種采用如權(quán)利要求I至4中任一所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基栽培桑黃子實體的方法，其特征在于所述的方法為以下步驟 a)桑黃菌袋培養(yǎng)基的菌絲體培養(yǎng)方法在無菌環(huán)境中往桑黃菌袋培養(yǎng)基中接入桑黃母種，接種量為桑黃菌袋培養(yǎng)基質(zhì)量的5 20%，將接種后的桑黃菌袋培養(yǎng)基置于25 30°C恒溫中培養(yǎng)，空氣濕度50 80%，桑黃菌袋培養(yǎng)基濕度50 60%，光照強度10-301uX，通風換氣次數(shù)I 5次/天，每次的時間5 30min，培養(yǎng)時間60-90天； b)采用菌袋培養(yǎng)基規(guī)模化栽培桑黃子實體的方法將步驟a)長滿菌絲體的菌袋的1/3 1/2埋入土中，栽培3、天后在桑黃菌袋培養(yǎng)基的袋子上劃開切口出菇，切口 2 8個，培養(yǎng)溫度25 30°C，土壤濕度40 75%，空氣濕度85 98%，光照強度2(T2001ux，通風換氣次數(shù)1^8次/天，每次的時間5 30min，培養(yǎng)時間75天 4年。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的采用桑黃袋料栽培培養(yǎng)基栽培桑黃子實體的方法，其特征在于步驟b)中在桑黃菌袋培養(yǎng)基的袋子上采用環(huán)割方式劃開切口出菇，切口為半月型。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的采用桑黃袋料栽培培養(yǎng)基栽培桑黃子實體的方法，其特征在于步驟b)中從桑黃菌袋培養(yǎng)基的袋子上劃開切口出菇到形成子實體期間調(diào)節(jié)晝夜溫差，晝夜溫差控制在10°C以上。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，為了解決目前野生桑黃資源的不足，人工栽培中袋料栽培存在培養(yǎng)基營養(yǎng)供給不充分，子實體發(fā)育較小、易染雜菌的問題，本發(fā)明提供一種桑黃袋料栽培培養(yǎng)基及采用該培養(yǎng)基栽培桑黃子實體的方法，所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基由營養(yǎng)料與水混合后裝袋制成，然后在溫度110~135℃，壓力0.05~0.25MPa，滅菌30-180min，其中營養(yǎng)料與水的質(zhì)量比為1∶1.8~2.5。采用本發(fā)明的桑黃袋料培養(yǎng)基配方，可以提供桑黃子實體生長所攝取的營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)的桑黃子實體近似野生桑黃、質(zhì)量穩(wěn)定，同時本發(fā)明的培養(yǎng)方式簡單，可用于具有藥用價值的桑黃子實體規(guī)模化栽培。
文檔編號A01G1/04GK102786333SQ20121020722
公開日2012年11月21日 申請日期2012年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月21日
發(fā)明者萬和炎, 壽旦, 方俊, 李有貴, 計東風, 陳平華, 馬相鋒 申請人:杭州清正生物科技有限公司