專利名稱：雞腿菇菌絲體多糖在禽畜飼料中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于飼料生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及以雞腿菇菌絲體多糖單用或與其它輔料混用作為禽畜飼料添加剤，在禽畜養(yǎng)殖中，添加到飼料中，達(dá)到增強(qiáng)禽畜免疫力，促進(jìn)禽畜生長(zhǎng)的目的。
背景技術(shù)：
長(zhǎng)期以來，由于動(dòng)物飼料中廣泛使用抗生素、化學(xué)合成藥物、激素等促生長(zhǎng)保健齊U，導(dǎo)致畜禽和水產(chǎn)產(chǎn)品中藥物殘留嚴(yán)重，直接危害人體健康；畜禽產(chǎn)品品質(zhì)下降，缺乏市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力和信譽(yù)；細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)、耐藥菌株增多，威脅人類安全；破壞生態(tài)環(huán)境等。隨著瘋牛病、ニ噁英污染、法國污水飼料、供港豬的“鹽酸克倫特羅”、禽肉產(chǎn)品出口歐盟受阻等 事件的發(fā)生，消費(fèi)者對(duì)食品的安全、衛(wèi)生、健康等問題日益關(guān)注，對(duì)畜產(chǎn)品品質(zhì)的要求越來越高。因此，無污染、無殘留和無公害的安全緑色食品已成為人們追求的目標(biāo)。多糖(polysaccharide)是由20個(gè)以上的單糖通過糖苷鍵連接形成的含酸基或酮基的多羥基聚合物及其衍生物，廣泛分布于動(dòng)物、植物及微生物中。目前多糖提取的主要原料是植物和微生物，微生物由于其具有生產(chǎn)周期短，繁殖迅速，來源豐富等優(yōu)點(diǎn)受到研究者的青睞。傳統(tǒng)的真菌菌絲體多糖提取多采用子實(shí)體為材料，但由于子實(shí)體栽培周期長(zhǎng)，勞動(dòng)強(qiáng)度大，受氣候、環(huán)境的影響，產(chǎn)量及質(zhì)量不穩(wěn)定，且子實(shí)體木質(zhì)化程度高，多糖提取利用率較低。與之相反，采用生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)菌絲體，周期短、成本低、產(chǎn)量大，且有エ業(yè)化生產(chǎn)前景，因此利用生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)菌絲體多糖是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。具有抗氧化和增強(qiáng)免疫力等多種生物學(xué)功能的食藥用真菌菌絲體多糖可作為天然防腐劑代替化學(xué)合成產(chǎn)品以提高飼料品質(zhì)。國外多糖在飼料エ業(yè)中的應(yīng)用也證明它在替代部分抗生素，改善飼料風(fēng)味，提高飼料的適ロ性以及滿足畜禽的營養(yǎng)需要，促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)等方面有重要的生理作用，使食藥用真菌菌絲體多糖制品在畜牧業(yè)中將會(huì)有巨大的市場(chǎng)，特別在世界各國都在紛紛禁用或限制抗生素的使用，提倡生態(tài)農(nóng)業(yè)、緑色飼料和畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展的今天，研究和開發(fā)食藥用真菌菌絲體多糖更具廣闊前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種綠色天然禽畜飼料添加劑，在禽畜養(yǎng)殖中，添加到禽畜飼料中，可增強(qiáng)禽畜免疫力，提高其抗病能力，促進(jìn)禽畜生長(zhǎng)。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是雞腿菇菌絲體多糖單用或與輔料混合使用制備雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑，在日常的家禽，畜牧的飼養(yǎng)中，添加到飼料中。所述的輔料可以包括小米多肽、麥麩多肽、黒米多肽、意米多肽、光合細(xì)菌、糞鏈球菌、乳酸菌、雙歧桿菌和芽孢桿菌。當(dāng)雞腿菇菌絲體多糖與上述輔料混合使用制備雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑時(shí)，按重量百分比禽畜飼料添加劑組成如下
雞腿菇菌絲體多糖65%-75%，小米多肽1%_5%，麥麩多肽1%_5%，黑米多肽1%_5%，意米多肽1%-5%，光合細(xì)菌1%-3%，糞鏈球菌1%-3%，乳酸菌1%-3%，
雙歧桿菌1%_3%，芽孢桿菌1%-3%。以雞腿菇菌絲體多糖單用或與輔料混合使用作為禽畜飼料添加剤，應(yīng)用于禽畜飼料時(shí)，禽畜飼料添加劑與禽畜飼料的重量份配比為禽畜飼料添加劑1-50份，禽畜飼料100000 份。本發(fā)明涉及的雞腿菇菌絲體多糖是由雞腿菇菌絲體提取的真菌多糖，以酸性多糖為主?？梢圆捎檬匈彽幕虿捎贸暡?微波-復(fù)合酶酶解分步法的エ 藝組合提取的雞腿菇菌絲體多糖。采用超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的エ藝組合提取雞腿菇菌絲體多糖的步驟如下
1)超聲浸提將雞腿菇菌絲體干粉溶于水中，料液比按質(zhì)量比1:10-1:30，控制溫度為 50-90°C，pH 值 4. 0-8. 0，超聲波功率為 100W-500W，超聲時(shí)間為 20min_60min ；
2)微波輔助提取微波功率300W-500W，微波時(shí)間為20min-60min；
3)復(fù)合酶酶解提取復(fù)合酶加入量為I.0%-5. 0%，控制溫度為30-60°C，pH 4. 0-8. 0，酶解時(shí)間為30min-60min ;抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加入4倍體積的95%こ醇沉淀多糖，2000rmp離心后去除上清液，冷凍干燥。所述的復(fù)合酶是纖維素酶與木瓜蛋白酶按質(zhì)量比1:0. 5^2的混合。本發(fā)明采用的輔料小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽和薏米多肽，可以采用市購的或采用提取蛋白質(zhì)后酶解法制備的生物活性肽。本發(fā)明具開創(chuàng)性的技術(shù)是將雞腿菇菌絲體多糖作為禽畜飼料添加劑的核心功能性原料單用或與其它營養(yǎng)素結(jié)合，根據(jù)現(xiàn)代動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)模型合理搭配、科學(xué)組合應(yīng)用，形成具有提高禽畜機(jī)體功能的多糖型混合飼料添加剤。本發(fā)明的含有雞腿菇菌絲體多糖的禽畜飼料添加劑，在現(xiàn)有家禽、牲畜的飼養(yǎng)中，可以與現(xiàn)有的任意的禽畜飼料混合，都可以達(dá)到增強(qiáng)禽畜免疫力，提高抗病能力，促進(jìn)禽畜生長(zhǎng)的目的。添加本發(fā)明雞腿菇菌絲體多糖型飼料添加劑不影響此后對(duì)飼料其他方式的加工。本發(fā)明和現(xiàn)有技術(shù)相比有如下優(yōu)點(diǎn)添加雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑的飼料喂養(yǎng)禽畜，具有增進(jìn)食欲、促進(jìn)生長(zhǎng)、抗病健體功效，可以提高禽畜的免疫力，改善禽畜肉質(zhì)，還可以提高禽類產(chǎn)蛋品質(zhì)及數(shù)量。通過配方的科學(xué)組合，從而不需要在飼料中添加抗生素等藥物作為飼料添加劑也可達(dá)到對(duì)禽畜的促進(jìn)生長(zhǎng)和提高免疫力、成活率的功效，并避免了禽畜產(chǎn)品中的藥物殘留。雞腿菇菌絲體多糖來源簡(jiǎn)單，通過生物發(fā)酵法制備雞腿菇菌絲體，提取方法成熟，成本較低，添加到禽畜飼料中，減少常規(guī)飼料及抗生素的應(yīng)用，提高禽畜食用安全性，降低飼料成本。
具體實(shí)施例方式為了便于理解本發(fā)明，特例舉以下實(shí)施例。其作用被理解為是對(duì)本發(fā)明的闡釋而非對(duì)本發(fā)明的任何形式的限制。實(shí)施例I
將雞腿菇菌絲體多糖單用作為禽畜飼料添加剤，按重量比10:100000的比例與常規(guī)的豬飼料混合均勻，飼喂豬。還可以將上述混合均勻的飼料再按常規(guī)エ藝制備仔豬飼料，直接飼喂仔豬。本實(shí)施例采用以超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的エ藝組合提取的雞腿菇菌絲體多糖，步驟如下
1)超聲浸堤將雞腿菇菌絲體干粉充分溶于水中，料液比按質(zhì)量比1:10-1:30，在該料液比條件下，進(jìn)行熱水浸提多糖，控制浸提溫度為50-90°C，浸提pH值4. 0-8. 0，超聲波功率為100W-500W之間，超聲時(shí)間為20min-60min ；
2)然后微波輔助提取控制微波功率300W-500W之間，微波提取時(shí)間為20min_60min ；
3)最后復(fù)合酶酶解提取復(fù)合酶(纖維素酶與木瓜蛋白酶質(zhì)量比為1:1)加入量為
I.0%-5. 0% (w%),酶解溫度為30-600C，酶解pH范圍值4. 0-8. O酶解時(shí)間為30min_60min。抽濾，濾渣反復(fù)提取2次，合并濾液。濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/4后，加入4倍體積的95%こ醇沉淀多糖，2000rmp離心后去除上清液，冷凍干燥。經(jīng)過該エ藝組合提取的長(zhǎng)根菇菌絲體多糖得率明顯提高，收率達(dá)到85%以上。雞腿菇菌絲體多糖也可以采用市購的產(chǎn)品。實(shí)施例2
(一)雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑
I)雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑按重量百分比組成如下
雞腿菇菌絲體多糖70%，小米多肽5%，麥麩多肽5%，黒米多肽5%，
意米多肽5%，光合細(xì)菌2%，糞鏈球菌2%，乳酸菌 2%，
雙歧桿菌2%，芽孢桿菌2%。本實(shí)施例采用以超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的エ藝組合提取的長(zhǎng)根菇菌絲體多糖，制備方法同實(shí)施例I。本實(shí)施例小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽和薏米多肽采用提取蛋白質(zhì)后酶解法制備的生物活性肽。以提取蛋白質(zhì)后酶解法制備生物活性肽的步驟如下將麥麩、小米、黒米、意米粉碎，按與NaOH溶液的重量比I : 10 20，分別加入pH 11的NaOH溶液，提取溫度為45-55°C，時(shí)間為2-3h，調(diào)pH至等電點(diǎn)，離心收集沉淀，冷凍干燥分別制得麥麩、小米、黒米、意米蛋白粉末；取麥麩、小米、黒米、意米蛋白粉末，分別加入堿性蛋白酶酶解，酶解條件為PH 8，酶活添加量為6000u/g，時(shí)間2. 5-3. 5h，溫度50 V ;然后加入復(fù)合風(fēng)味蛋白酶酶解，酶解條件為pH 6，酶活添加量為6000u/g，時(shí)間1-1. 5h，溫度55 V ;將酶解后的酶解液加熱到100°C，保持10分鐘；采用截留分子量為IOkDa超濾板超濾，收集分子量為IOkDa以下的酶解液；冷凍干燥分別制得小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽和薏米多肽。小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽和薏米多肽也可以采用市購的產(chǎn)品。2)制備方法將雞腿菇菌絲體多糖與小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽，意米多肽，光合細(xì)菌，糞鏈球菌，乳酸菌，雙歧桿菌和芽孢桿菌按上述的配比取料，混合均勻即可。(ニ)混合禽畜飼料
將雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑按重量比30:100000的比例與肉食雞全價(jià)飼料混合均勻，制備肉食雞飼料，直接飼喂雞。 實(shí)施例3(一)雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑
I)雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑按重量百分比組成如下
雞腿菇菌絲體多糖75%，小米多肽3%，麥麩多肽3%，黒米多肽2%，
意米多肽2%，光合細(xì)菌3%，糞鏈球菌3%，乳酸菌3%，
雙歧桿菌3%，芽孢桿菌3%。本實(shí)施例采用以超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的エ藝組合提取的雞腿菇菌絲體多糖，制備方法同實(shí)施例I。 本實(shí)施例采用以提取蛋白質(zhì)后酶解法制備生物活性肽的方法制備的小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽和薏米多肽，制備方法同實(shí)施例2。當(dāng)然，雞腿菇菌絲體多糖、小米多肽、麥麩多肽、黒米多肽和薏米多肽也可以采用市購的產(chǎn)品。2)制備方法將雞腿菇菌絲體多糖與小米多肽，麥麩多肽，黒米多肽，意米多肽，光合細(xì)菌，糞鏈球菌，乳酸菌，雙歧桿菌和芽孢桿菌按上述的配比取料，混合均勻即可。(ニ)混合禽畜飼料
將雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑按重量比50:100000的比例與蛋雞全價(jià)飼料混合均勻，制備蛋雞飼料，直接飼喂蛋雞。應(yīng)用效果
選取7日肉雞54只，按體重、性別均等的原則隨機(jī)分為3組，每組18只肉雞，設(shè)3個(gè)重復(fù)組，每組重復(fù)6只。對(duì)照組，飼喂正常肉雞飼料，試驗(yàn)組分為兩組，試驗(yàn)組I，將雞腿菇菌絲體多糖按10:100000的比例與動(dòng)物日糧混合均勻，再按常規(guī)エ藝制備飼料，直接飼喂；試驗(yàn)組2，將雞腿菇菌絲體多糖型混合飼料添加劑按10:100000的比例與動(dòng)物日糧混合均勻，再按常規(guī)エ藝制備飼料，直接飼喂。飼養(yǎng)期共21天，每天記錄采食量。在試驗(yàn)開始時(shí)(7d)，14d、21d和28d分別空腹稱重，并處死肉雞，剝?nèi)⌒叵?、脾臟和法氏囊，并將周圍組織剝離干凈后分析天平稱重，按下式計(jì)算免疫臟器指數(shù)，顯微鏡觀察肉雞內(nèi)臟器官有無異常和病變。研究雞腿菇菌絲體多糖、雞腿菇菌絲體多糖型混合飼料添加劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)及免疫功能的影響，試驗(yàn)結(jié)果見表I、表2。
表I雞腿菇菌絲體多糖及混合型飼料添加剤對(duì)肉雞增重的影響
II_ 肉雞重重(g)_I
II 試驗(yàn)組I I 試驗(yàn)組2 I 對(duì)照組 I
日齡(d)(只添加雞腿菇菌 (添加雞腿菇菌絲體多糖型 (常規(guī)飼料)I
_I 絲體多糖)_貓合飼料添加剤)_ I
71 182.1 187.2 180.6 1
14313,5 336,0 301.8
21735.6 f 760,6 710.5 I
I 28 I _ 1163.2 _| _11 卯.5__1107.3_ I試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，雞腿菇菌絲體多糖對(duì)肉雞體重明顯增加，其中雞腿菇菌絲體多糖型混合飼料添加劑對(duì)肉雞體重增加更加明顯。
權(quán)利要求
1.雞腿菇菌絲體多糖在禽畜飼料中的應(yīng)用，其特征在于雞腿菇菌絲體多糖單用或與輔料混合使用制備雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加剤。
2.按照權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述的輔料包括小米多肽、麥麩多肽、黑米多肽、意米多肽、光合細(xì)菌、糞鏈球菌、乳酸菌、雙歧桿菌和芽孢桿菌。
3.按照權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于雞腿菇菌絲體多糖與輔料混合使用制備的雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加剤，按重量百分比組成如下 雞腿菇菌絲體多糖65%-75%，小米多肽1%_5%，麥麩多肽1%_5%，黑米多肽1%_5%， 意米多肽1%_5%，光合細(xì)菌1%_3%，糞鏈球菌1%-3%，乳酸菌1%-3%， 雙歧桿菌1%_3%，芽孢桿菌1%-3%。
4.按照權(quán)利要求1、2或3所述的應(yīng)用，其特征在于雞腿菇菌絲體多糖型禽畜飼料添加劑與禽畜飼料的重量份配比為禽畜飼料添加劑1-50份，禽畜飼料100000份。
5.按照權(quán)利要求1、2或3所述的應(yīng)用，其特征在于所述的雞腿菇菌絲體多糖的制備方法如下 1)超聲浸提將雞腿菇菌絲體干粉溶于水中，料液比按質(zhì)量比1:10-1:30，控制溫度為50-90°C，pH 值 4. 0-8. 0，超聲波功率為 100W-500W，超聲時(shí)間為 20min_60min ； 2)微波輔助提取微波功率300W-500W，微波時(shí)間為20min-60min； 3)復(fù)合酶酶解提取復(fù)合酶加入量為I.0%-5· 0%，控制溫度為30-60°C, pH 4. 0-8. 0，酶解時(shí)間為30min-60min ;抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加入4倍體積的95%こ醇沉淀多糖，2000rmp離心后去除上清液,冷凍干燥。
6.按照權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述的復(fù)合酶是纖維素酶與木瓜蛋白酶按質(zhì)量比1:0. 5 2的混合。
全文摘要
本發(fā)明涉及雞腿菇菌絲體多糖在禽畜飼料中的應(yīng)用。含有雞腿菇菌絲體多糖的禽畜飼料添加劑與飼料的重量份數(shù)比為添加劑1-50份，飼料100000份。本發(fā)明通過添加雞腿菇菌絲體多糖型添加劑喂養(yǎng)禽畜，具有增進(jìn)食欲、促進(jìn)生長(zhǎng)，提高禽畜的自身免疫力和機(jī)體抗病能力，改善禽畜肉質(zhì)，還可以提高禽類產(chǎn)蛋品質(zhì)及數(shù)量。通過配方的科學(xué)組合，從而不需要在飼料中添加抗生素等藥物作為飼料添加劑也可達(dá)到對(duì)禽畜的促進(jìn)生長(zhǎng)和提高免疫力、成活率的功效，并避免了禽畜產(chǎn)品中的藥物殘留。
文檔編號(hào)A23K1/16GK102687791SQ201210150718
公開日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月16日
發(fā)明者劉劍利, 孟雪蓮, 徐成斌, 曹向宇, 蘆秀麗, 趙中洲, 鄭勇 申請(qǐng)人:遼寧大學(xué)