專利名稱：富含高不飽和脂肪酸海膽的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種富含高不飽和脂肪酸海膽的培育方法。
背景技術(shù)：
海膽的營養(yǎng)價值主要體現(xiàn)在其性腺(俗稱海膽黃)中脂肪酸的食用、藥用功效方面，海膽性腺脂肪酸含量約占其性腺干重的8-11 %，不飽和脂肪酸含量豐富，其中，EPA能有效防止高脂血癥的發(fā)生，減少血栓的形成，減少動脈粥樣硬化和心腦血管病的發(fā)病率； DHA在腦細(xì)胞形成過程中起著重要作用，能提高大腦的功能，增強記憶力，防止大腦衰老，對兒童的生長發(fā)育十分重要，AA是人體大腦和視神經(jīng)發(fā)育的重要物質(zhì)，對提高智力和增強視敏度具有重要作用，海膽性腺中多不飽和脂肪酸含量和組成是影響海膽性腺品質(zhì)的重要性狀，提高海膽生殖腺中不飽和脂肪酸的產(chǎn)量和品質(zhì)是海膽育種的重要目標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述技術(shù)問題，提供一種富含高不飽和脂肪酸海膽的培育方法。本發(fā)明的富含高不飽和脂肪酸海膽的培育方法，步驟如下a.從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調(diào)整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調(diào)溫幅度彡2. 0°C /天，靜水培育，每日吸底一次，換水1/2 2/3，投喂海帶和煮熟的紫貽貝肉，日投餌1次，培育至性成熟；b.利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；c.將家系群體置于最強為50001χ的照度條件下進行養(yǎng)殖，自然光周期，投喂海帶和裙帶菜，并保持每個家系海膽數(shù)量至少100個；d.養(yǎng)殖家系群體至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選30 個，測量每個海膽的殼高TH、殼徑TD、活體重BW和總高不飽和脂肪酸PUFA、花生四烯酸AA、 二十碳五烯酸EPA和二十二碳六烯酸DHA的含量；e.計算PUFA、AA、EPA和DHA的變異系數(shù)，以此評價其表型變異程度；對PUFA與 AA、EPA和DHA組成進行方差分析，判斷家系因素影響的顯著性；最后估計高不飽和脂肪酸的遺傳力；從PUFA、AA、EPA和DHA中選擇具有至少5%的表型變異，家系因素影響顯著，P < 0. 05，具有至少0. 1的遺傳力的性狀作為目標(biāo)性狀；f.計算殼高、殼徑和活體重分別對PUFA、AA、EPA和DHA的通徑系數(shù)Idhp、bDP、bWP， bHA、bDA、bWA，bHE、bDE、bWE，bHD、bDD、bTO ；計算海膽殼高、殼徑和活體重的遺傳力h2H，h2D，g2w ；制定高不飽和脂肪酸的綜合選擇指數(shù)，AA的綜合選擇指數(shù)計算公式為Iaa = bHAPHhH2+bDAPDhD2+bffAPffhff2其中，bm，bDA，bWA分別為殼高、殼徑和活體重對AA的通徑系數(shù)斤…？^？^^分別為殼高、殼徑和活體重測量值；h2H、h2D、h2w分別為殼高、殼徑和活體重的遺傳力；PUFA、EPA和DHA推；g.對PUFA、AA、EPA和DHA的四個綜合選擇指數(shù)進行加權(quán)，其中PUFA為0. 4，AA 加權(quán)值為0. 2，EPA加權(quán)值為0. 3，DHA加權(quán)值為0. 1，利用四個選擇指數(shù)計算對高不飽和脂肪酸的總的選擇指數(shù)為1 = 0. 4Ipufa+0. 2Im+0. 3Iepa+0. IIdha，該公式進一步簡化為I =
41 pufa+2 I aa+3 I epa+I dha ；h.計算步驟b建立的各家系的平均綜合選擇指數(shù)I，上選50%的家系，再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)I高的海膽個體，雌雄比為2 1，使留種率小于或等于2%，在避免近親交配的情況下，建立海膽家系至少100個；i.循環(huán)c i步驟至少四次。本發(fā)明的方法培育的海膽提高了海膽生殖腺中高不飽和脂肪酸的含量，提高了海膽的品質(zhì)。
具體實施例方式從不同地理群體選取種海膽，并建立雜交家系；通過控制光照為底棲硅藻提供適宜的生長條件；評估高不飽和脂肪酸的選育潛力；確定間接選擇高不飽和脂肪酸的輔助性狀；根據(jù)PUFA、AA、EPA和DHA的經(jīng)濟重要性對它們在選育目標(biāo)進行加權(quán)；利用家系選擇和家系內(nèi)選擇結(jié)合的方法，兩次選擇總留種率不高于1%。具體步驟如下a.從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調(diào)整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調(diào)溫幅度彡2. 0°C /天，靜水培育，每日吸底一次，換水1/2 2/3，投喂海帶和煮熟的紫貽貝肉，日投餌1次，培育至性成熟；b.利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；c.將家系群體置于最強為50001χ的照度條件下進行養(yǎng)殖，自然光周期，投喂海帶和裙帶菜，并保持每個家系海膽數(shù)量至少100個；d.養(yǎng)殖家系群體至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選30 個，測量每個海膽的殼高TH、殼徑TD、活體重BW和總高不飽和脂肪酸PUFA、花生四烯酸AA、 二十碳五烯酸EPA和二十二碳六烯酸DHA的含量；e.計算PUFA、AA、EPA和DHA的變異系數(shù)，以此評價其表型變異程度；對PUFA與 AA、EPA和DHA組成進行方差分析，判斷家系因素影響的顯著性；最后估計高不飽和脂肪酸的遺傳力；從PUFA、AA、EPA和DHA中選擇具有至少5%的表型變異，家系因素影響顯著，P < 0. 05，具有至少0. 1的遺傳力的性狀作為目標(biāo)性狀；f.計算殼高、殼徑和活體重分別對PUFA、AA、EPA和DHA的通徑系數(shù)bHP、hDP、bWP， bHA、bDA、bWA，bHE、bDE、bWE，bHD、bDD、bTO ；計算海膽殼高、殼徑和活體重的遺傳力h2H，h2D，h2ff ；制定高不飽和脂肪酸的綜合選擇指數(shù)，AA的綜合選擇指數(shù)計算公式為Iaa = bHAPHhH2+bDAPDhD2+bffAPffhff2其中，bm，bDA，bffA分別為殼高、殼徑和活體重對AA的通徑系數(shù)；IV PD、Pff分別為殼高、殼徑和活體重測量值；h2H、h2D、h2w分別為殼高、殼徑和活體重的遺傳力；PUFA、EPA和DHA 的綜合選擇指數(shù)計算公式依AA的綜合選擇指數(shù)類推；
g.對PUFA、AA、EPA和DHA的四個綜合選擇指數(shù)進行加權(quán)，其中PUFA為0. 4，AA 加權(quán)值為0. 2，EPA加權(quán)值為0. 3，DHA加權(quán)值為0. 1，利用四個選擇指數(shù)計算對高不飽和脂肪酸的總的選擇指數(shù)為1 = 0. 4Ipufa+0. 2Im+0. 3Iepa+0. IIdha，該公式進一步簡化為I =
41 pufa+2 I aa+3 I epa+I dha ；h.計算步驟b建立的各家系的平均綜合選擇指數(shù)I，上選50%的家系，再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)I高的海膽個體，雌雄比為2 1，使留種率小于或等于2%，在避免近親交配的情況下，建立海膽家系至少100個；i.循環(huán)c i步驟至少四次。計算殼高、殼徑、活體重和高不飽和脂肪酸PUFA、AA、EPA和DHA間的遺傳相關(guān)，若前三者遺傳相關(guān)為正，且它們與PUFA、AA、EPA和DHA的遺傳相關(guān)較大，則將他們作為間接選擇PUFA、AA、EPA和DHA的輔助性狀。在蝦夷馬糞海膽育種實際中，AA、EPA和DHA等高不飽和脂肪酸的均值介于 0. 13% -12. 11%，標(biāo)準(zhǔn)差介于0. 25-3. 40之間，PUFA均值為28. 41%，標(biāo)準(zhǔn)差為5. 08，目標(biāo)性狀的遺傳力按最低0. 1計算，大規(guī)模家系條件下2%的留種率對應(yīng)的選擇強度為2. 41，由此可預(yù)計高不飽和脂肪酸每代可獲得6% -44%的遺傳進展，PUFA每代可獲得至少4%的遺傳進展。
權(quán)利要求
1. 一種富含高不飽和脂肪酸海膽的培育方法，其特征在于步驟如下a.從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調(diào)整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調(diào)溫幅度彡2. 0°C /天，靜水培育，每日吸底一次，換水 1/2 2/3，投喂海帶和煮熟的紫貽貝肉，日投餌1次，培育至性成熟；b.利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；c.將家系群體置于最強為50001χ的照度條件下進行養(yǎng)殖，自然光周期，投喂海帶和裙帶菜，并保持每個家系海膽數(shù)量至少100個；d.養(yǎng)殖家系群體至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選30個， 測量每個海膽的殼高TH、殼徑TD、活體重BW和總高不飽和脂肪酸PUFA、花生四烯酸AA、 二十碳五烯酸EPA和二十二碳六烯酸DHA的含量；e.計算PUFA、AA、EPA和DHA的變異系數(shù)，以此評價其表型變異程度；對PUFA與AA、EPA 和DHA組成進行方差分析，判斷家系因素影響的顯著性；最后估計高不飽和脂肪酸的遺傳力；從PUFA、AA、EPA和DHA中選擇具有至少5%的表型變異，家系因素影響顯著，P < 0. 05， 具有至少0. 1的遺傳力的性狀作為目標(biāo)性狀；f.計算殼高、殼徑和活體重分別對PUFA、AA、EPA和DHA的通徑系數(shù)Ι ΗΡΛΡ、‘，bHA、bDA、 bWA，bHE、bDE、bWE，bHD、bDD、bTO ；計算海膽殼高、殼徑和活體重的遺傳力h2H，h2D，h2ff ；制定高不飽和脂肪酸的綜合選擇指數(shù)，AA的綜合選擇指數(shù)計算公式為Iaa — ^παΡη^π +bDAPDhD +bWAPwhw其中，bHA，bDA，bWA分別為殼高、殼徑和活體重對AA的通徑系數(shù)；PH、PD、Pw分別為殼高、 殼徑和活體重測量值；h2H、h2D、h2w分別為殼高、殼徑和活體重的遺傳力；PUFA、EPA和DHA的綜合選擇指數(shù)計算公式依AA的綜合選擇指數(shù)類推；g.對PUFA、AA、EPA和DHA的四個綜合選擇指數(shù)進行加權(quán)，其中PUFA為0.4，AA加權(quán)值為0. 2，EPA加權(quán)值為0. 3，DHA加權(quán)值為0. 1，利用四個選擇指數(shù)計算對高不飽和脂肪酸的總的選擇指數(shù)為1 = 0. 4Ipufa+0. 2Iaa+0. 3Iepa+0. 1IDHA，該公式進一步簡化為I = 41 pufa+2 I aa+3 I epa+I dha ；h.計算步驟b建立的各家系的平均綜合選擇指數(shù)I，上選50%的家系，再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)I高的海膽個體，雌雄比為2 1，使留種率小于或等于2%，在避免近親交配的情況下，建立海膽家系至少100個；i.循環(huán)c i步驟至少四次。
全文摘要
富含高不飽和脂肪酸海膽的培育方法，步驟為從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，培育至性成熟；以雌雄比2∶1的比例建立至少100個海膽家系；養(yǎng)殖至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選30個，測出殼高、殼徑、活體重和總高不飽和脂肪酸PUFA、AA、EPA和DHA的含量；根據(jù)變異系數(shù)、家系影響顯著性、遺傳力選育；計算綜合選擇指數(shù)；各家系的平均綜合選擇指數(shù)I，上選50％的家系，再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)I高的海膽個體，雌雄比為2∶1，使留種率小于或等于2％，在避免近親交配的情況下，建立海膽家系至少100個；按上述循環(huán)至少四次。本發(fā)明的方法培育的海膽富含高不飽和脂肪酸，品質(zhì)好。
文檔編號A01K61/00GK102369894SQ20101025224
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月13日
發(fā)明者丁君, 常亞青, 張偉杰 申請人:大連海洋大學(xué)