專利名稱：：一種轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及轉(zhuǎn)基因棉花
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體為一種轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法。
背景技術(shù)：
：棉花經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化外源基因獲得的轉(zhuǎn)基因再生株，經(jīng)分子檢測，證明外源基因已轉(zhuǎn)入受體棉花中，轉(zhuǎn)化的再生株移植法采用嫁接法或常規(guī)移栽法正常成活，然后生長為所需要的轉(zhuǎn)基因棉花。轉(zhuǎn)基因棉花再生株常規(guī)移栽法為先將三角瓶轉(zhuǎn)基因棉花再生株生根苗打開瓶蓋置于培養(yǎng)間煉苗l-2天；再將轉(zhuǎn)基因棉花洗去根部培養(yǎng)基，栽入裝有滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水；然后放入濕度70%、溫度27°C29t:培養(yǎng)箱中，先整株蓋株培養(yǎng)810天，然后移去蓋棉株的容器，再在培養(yǎng)箱培養(yǎng)57天左右；最后移入正常條件的溫室中成活到棉花吐絮成熟。棉花轉(zhuǎn)基因的目的是將外源目的基因轉(zhuǎn)入常規(guī)棉花中，以期獲得轉(zhuǎn)基因棉花，從"九五"以來一直是國家"863"的重點(diǎn)研究項(xiàng)目。獲得的轉(zhuǎn)基因棉花植株價(jià)格昂貴，但是，由于現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法，需要在高溫，低濕的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，容易造成根部腐爛，造成活率低的問題，一般成活率只有20%60%，而且在培養(yǎng)過程中需要先整株加蓋，然后再移蓋培養(yǎng)，操作步驟比較繁瑣，所以一直以來達(dá)不到理想的結(jié)果。尋找一種操作簡單，成活率高的轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法成為目前研究的熱點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法采用高溫、低濕的，而造成成活率低，步驟繁瑣的問題，而提供了一種轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法。本發(fā)明轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法包括以下步驟1)將轉(zhuǎn)基因棉花三角瓶再生株生根苗瓶蓋打開進(jìn)行室內(nèi)瓶內(nèi)煉苗2天3天；2)將轉(zhuǎn)基因棉花再生株根部培養(yǎng)基洗去，栽入裝有經(jīng)滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水，在濕度為88%90%、溫度為20°C22。C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1015天；3)移入正常條件的溫室中成活到棉花吐絮成熟。常規(guī)的移植方法是在高溫低濕的環(huán)境下進(jìn)行，先整株蓋株培養(yǎng)810天，然后移去蓋棉株的容器，再培養(yǎng)57天左右，這樣在高溫低濕的環(huán)境中再生株根部容易腐爛，引起整株死亡，而由于獲得轉(zhuǎn)基因再生株的價(jià)格昂貴，從而使得成本提高。本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)，最終采用濕度為88%90%、溫度為20°C22t:的低溫、高濕培養(yǎng)環(huán)境，使得成活率達(dá)90%95%，且在培養(yǎng)過程中省去用容器蓋株的培養(yǎng)步驟。用轉(zhuǎn)基因棉花再生株每10株為一組，共12組，在不同的溫度和濕度環(huán)境下進(jìn)行移植培養(yǎng)，觀察成活率。具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下表表1所述表l3<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>從表1可知，在低溫高濕的環(huán)境下，轉(zhuǎn)基因棉花再生株的成活率達(dá)到90%。2009年3月15日，在轉(zhuǎn)基因棉花再生株的移植實(shí)驗(yàn)過程中，選用低溫高濕的環(huán)境進(jìn)行，將再生株每40株為一組，共9組，觀察成活率，具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下表表2所述表2<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>本發(fā)明轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法，采用低溫高濕的培養(yǎng)環(huán)境，極大的提高了成活率，且簡化了現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法中的整株用玻璃杯或者塑料膜加蓋這一步驟，是一種較為理想的轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法。實(shí)施實(shí)施方式實(shí)施例1將轉(zhuǎn)基因棉花再生株生根苗瓶蓋打開進(jìn)行室內(nèi)瓶內(nèi)煉苗2天；再將煉苗后的再生株根部培養(yǎng)基洗去，栽入裝有滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水，在濕度為90%、溫度為22t:的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15天；移入溫室中培養(yǎng)成活到棉花吐絮成熟。實(shí)施例2將轉(zhuǎn)基因棉花再生株生根苗瓶蓋打開進(jìn)行室內(nèi)瓶內(nèi)煉苗3天；再將煉苗后的再生株根部培養(yǎng)基洗去，栽入裝有滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水，在濕度為88%、溫度為2(TC的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10天；移入溫室中培養(yǎng)成活到棉花吐絮成熟。實(shí)施例3將轉(zhuǎn)基因棉花再生株生根苗瓶蓋打開進(jìn)行室內(nèi)瓶內(nèi)煉苗3天；再將煉苗后的再生株根部培養(yǎng)基洗去，栽入裝有滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水，在濕度為89%、溫度為2rC的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)13天；移入溫室中培養(yǎng)成活到棉花吐絮成熟。權(quán)利要求一種轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法，其特征是包括以下步驟1)將轉(zhuǎn)基因棉花再生株生根苗瓶蓋打開進(jìn)行室內(nèi)瓶內(nèi)煉苗2天～3天；2)將轉(zhuǎn)基因棉花再生株根部培養(yǎng)基洗去，栽入裝有經(jīng)滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水，在濕度為88％～90％、溫度為20℃～22℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10天～15天；3)移入正常條件的溫室中成活到棉花吐絮成熟。全文摘要本發(fā)明是公開了一種轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法，是為了解決現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法存在的成活率低，步驟繁瑣的問題，包括以下步驟1)將轉(zhuǎn)基因棉花再生株生根苗瓶蓋打開進(jìn)行室內(nèi)瓶內(nèi)煉苗2天～3天；2)將轉(zhuǎn)基因棉花再生株根部培養(yǎng)基洗去，栽入裝有經(jīng)滅菌蛭石的容器中，一次性澆透水，在濕度為88％～90％、溫度為20℃～22℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10天～15天；3)移入正常條件的溫室中成活到棉花吐絮成熟。本發(fā)明簡化了現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法中的整株覆蓋及調(diào)溫調(diào)濕步驟，主要是采用低溫、高濕環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)，使得成活率達(dá)90％～95％，是一種較為理想的轉(zhuǎn)基因棉花再生株移植法。文檔編號A01G1/00GK101773039SQ20101010394公開日2010年7月14日申請日期2010年1月28日優(yōu)先權(quán)日2010年1月28日發(fā)明者上官小霞,吳霞,張林水,李燕娥,楊淑巧,翟曉菊,范小平申請人:山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所