專利名稱：一種防治植物真菌病害的生防菌及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
21世紀(jì)人類面臨著許多挑戰(zhàn)，而主要問題之一是人口與糧食問題。我國人口占世界總?cè)丝诘乃姆种?，但耕地只有世界耕地?.8％，這個(gè)問題在我國尤其突出。因此，提高糧食產(chǎn)量是我國關(guān)系民生的戰(zhàn)略任務(wù)。但據(jù)調(diào)查，世界主要糧食作物和經(jīng)濟(jì)作物每年因病害損失20％(Oerke et al，1994.Crop Protection andCrop Production.Elsevier，Amsterdam，808pp)。我國糧食作物因病害而損失至少10-15％，如果完全不使用殺菌劑，正常年份的黃瓜損失約為55％～75％、蘿卜為40％、甘籃為25％、蘋果為30％，甜菜為24％[陳萬義，1998.植物保護(hù)24(5)33-36]。由此可見殺菌劑在糧食作物和經(jīng)濟(jì)作物中的重要地位。事實(shí)上，如果沒有殺菌劑的使用，世界上的作物將有一半在現(xiàn)有條件下不能栽種。
目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用的殺菌劑多為化學(xué)合成物?；瘜W(xué)合成殺菌劑雖具有防效較高和應(yīng)用方便的優(yōu)勢(shì)，但存在如下缺點(diǎn)①抗性問題嚴(yán)重特別是植物病原真菌對(duì)內(nèi)吸性殺菌劑的抗性產(chǎn)生的速度快、抗性水平高。一般應(yīng)用3年左右，植物病原真菌就可對(duì)其產(chǎn)生抗性。據(jù)報(bào)道已有46種病原真菌對(duì)苯菌靈產(chǎn)生了較高的抗性(Gullino et al，2000.Crop Protection 191-11)。②研制新品種殺菌劑的費(fèi)用昂貴由于對(duì)殺菌劑的要求越來越嚴(yán)格，新品種殺菌劑的研制費(fèi)用也越來越大。在美國每研究開發(fā)成功一個(gè)新品種的殺菌劑需要研究20000多個(gè)化合物，花費(fèi)約0.8～1億美元(Leroux，1996，Pestic.Sci.47191-197)。③環(huán)境污染雖然化學(xué)合成殺菌劑較化學(xué)合成殺蟲劑對(duì)人蓄的危害要小一些，但化學(xué)合成殺菌劑也有致癌作用，對(duì)野生和非靶標(biāo)生物有毒等缺點(diǎn)，環(huán)境相容性差。因此，在推行的無公害農(nóng)藥和可持續(xù)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的今天，開發(fā)和研制不易產(chǎn)生抗性的、較少引起污染的環(huán)境友好型生物殺菌劑已成為農(nóng)藥發(fā)展的必然趨勢(shì)。
相對(duì)于化學(xué)合成殺菌劑，生物防治和天然產(chǎn)物的使用具有更加誘人的前景，特別是微生物殺菌劑，一方面微生物是地球上最龐大的生物類群，它不僅具有廣泛的生物多樣性，而且還可通過菌種選育、代謝調(diào)控、規(guī)模發(fā)酵以及其它現(xiàn)代生物工程技術(shù)大幅度提高目標(biāo)物質(zhì)的產(chǎn)量，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)；另一方面，微生物殺菌劑(活的微生物及其代謝產(chǎn)物)較化學(xué)農(nóng)藥更加安全，易降解，合成成本較低。
內(nèi)生菌(endophytes)是指生長(zhǎng)在寄主體內(nèi)不引起發(fā)病的一類特殊微生物，大量的研究證明內(nèi)生菌通過產(chǎn)生次生代謝物質(zhì)調(diào)節(jié)并增強(qiáng)宿主植物的環(huán)境適應(yīng)能力，如固氮，抗旱、抗蟲和抗病等(Chanway，1996.Can.J.Bot.75331-332；Wilsonet al.，1994.Mycologia 86635-647)。Fisher等(Fisher et al.，1984.Bot.Helv.94249-253)在進(jìn)行內(nèi)生菌生物活性檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)30％的內(nèi)生菌都能產(chǎn)生抗真菌和/或細(xì)菌的物質(zhì)；尤其是當(dāng)美國的Stierle等(Stierle et al.，1993.Science 260214-216)從太平洋漿果紫杉中發(fā)現(xiàn)兩株能夠產(chǎn)生紫杉醇及其類似物的內(nèi)生真菌后，使從內(nèi)生菌次生產(chǎn)物中分離新型抑菌或殺菌先導(dǎo)化合物更有據(jù)可依[Petrini etal.1992，Sydowia，44282-293]。本發(fā)明將報(bào)道一株內(nèi)生細(xì)菌——鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株的發(fā)現(xiàn)及其防病作用。
鮑曼氏不動(dòng)桿菌是一種分布比較普遍的一種植物內(nèi)生細(xì)菌，但對(duì)該菌的生物學(xué)功能研究甚少。有報(bào)道稱該菌能夠降解除草劑和石油污染，具有一定的環(huán)保作用(Roque et al.，2000.Scientia Agricola 57(4)723-728；Sarma et al.，2004.Can.J.Microbiol.50(6)405-414)。近年來發(fā)現(xiàn)該菌可用于柑桔潰瘍病的防治(譚小艷等，2006，微生物學(xué)報(bào)46(2)292-296)。該發(fā)明從樟樹莖干中分離到一株鮑曼氏不動(dòng)桿菌菌株具有廣譜的抗真菌活性。這些研究結(jié)果表明鮑曼氏不動(dòng)桿菌具有豐富的種內(nèi)多樣性和廣泛的生物活性，是一種很有開發(fā)潛力的生物農(nóng)藥，用于植物病害的防治。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在探尋生物農(nóng)藥的新來源，利用植物內(nèi)生菌資源而開發(fā)一種可以用于植物真菌病害防治的廣譜、高效、可產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的生防菌菌株。提供鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株以及該菌株的篩選、鑒定方法；提供該菌株產(chǎn)品鮑曼菌液和鮑曼菌素及其制備工藝；提供鮑曼菌液和鮑曼菌素防治植物病害以及促進(jìn)水稻種子萌芽的使用方法。
本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下本發(fā)明采用的細(xì)菌是鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株(Acinetobacterbaumannii LCH0606)(以下簡(jiǎn)稱為L(zhǎng)CH0606菌株)，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏日期為2006年7月6日，保藏號(hào)為CGMCCNo.1752。
本發(fā)明的生產(chǎn)菌株LCH0606菌株分自我國江蘇省紫金山地區(qū)的樟樹莖干，經(jīng)菌落和形態(tài)的顯微觀察、染色反應(yīng)、常規(guī)生理生化特性實(shí)驗(yàn)以及16s rDNA序列分析，該菌株鑒定為鮑曼氏不動(dòng)桿菌(A.baumannii)的一個(gè)新菌株(LCH0606)，具有以下特征①菌落規(guī)則圓形、邊緣光滑、中部突起，不透明灰白色，菌落干燥；②菌體為短桿狀或球桿狀、革蘭氏染色陰性、無芽孢和鞭毛；③生理生化反應(yīng)表現(xiàn)為接觸酶試驗(yàn)、精氨酸雙水解酶試驗(yàn)、丙二酸鹽利用試驗(yàn)、硝酸鹽和亞硝酸鹽還原試驗(yàn)均為陽性；氧化酶試驗(yàn)、明膠液化試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)均為陰性；能利用葡萄糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、木糖和鼠李糖，但不能利用蔗糖、麥芽糖、甘露醇和果糖；④16s rDNA序列分析結(jié)果在GenBank中進(jìn)行最大同源性比較，發(fā)現(xiàn)16s rDNA測(cè)序結(jié)果與不動(dòng)桿菌屬16s rDNA序列同源性達(dá)到100％。
本發(fā)明的生防制劑為鮑曼菌液和鮑曼菌素，它們對(duì)多種重要植物真菌病害具有顯著的防治作用，如大豆炭疽病、辣椒疫霉病、番茄灰霉病、小麥赤霉病及水稻紋枯病等，同時(shí)具備了工業(yè)化生產(chǎn)的基本性狀。
本發(fā)明按照常規(guī)方法制備。即從樟樹植株中分離篩選抑菌活性菌株LCH0606；通過液體發(fā)酵和離心處理制備生物殺菌劑——鮑曼菌液；鮑曼菌液經(jīng)大孔樹脂吸附、乙醇洗脫和減壓濃縮處理制備高效生物殺菌劑——鮑曼菌素；鮑曼菌液或鮑曼菌素對(duì)大豆炭疽病、辣椒疫霉病、番茄灰霉病、小麥赤霉病及水稻紋枯病等致病菌的抑制作用通過平皿實(shí)驗(yàn)測(cè)定；鮑曼菌液或鮑曼菌素防治水稻紋枯病的活性通過盆栽實(shí)驗(yàn)證明；鮑曼菌液或鮑曼菌素對(duì)水稻種子萌芽的促進(jìn)作用按常規(guī)方法進(jìn)行；鮑曼菌液或鮑曼菌素抗菌成分的測(cè)定是通過硅膠柱層析和Sephadex LH-20反復(fù)層析所得，并經(jīng)NMR、HSQC、DEPT、LC/MS等現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定為脂肽類物質(zhì)IturinA2、A3、A6。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及效果本發(fā)明具有穩(wěn)定的天然原料來源，菌種來源于樟樹莖干，篩選方法簡(jiǎn)單；發(fā)酵過程中所用原料主要有馬鈴薯和蔗糖，成本較低；鮑曼菌液和鮑曼菌素的制備簡(jiǎn)單，鮑曼菌素經(jīng)大孔樹脂處理獲得，處理量大，操作方便，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，對(duì)光、熱、酸堿均有良好的穩(wěn)定性。本產(chǎn)品低毒，對(duì)人畜無毒害、對(duì)農(nóng)作物無藥害，綠色環(huán)保，且防治植物病害效果顯著。
四

圖1鮑曼菌液對(duì)植物病原真菌生長(zhǎng)的抑制作用。測(cè)試菌種分別為1、C.parasitica；2、G.glycines；3、P.capsici；4、F.oxysporum；5、B.cinerea；6、F.graminearum；7、R.solani。圖中A代表鮑曼菌液(濃度0.1ml/ml)，B代表鮑曼菌素(濃度0.1mg/ml)，C代表陰性對(duì)照，無菌水處理，D代表75％達(dá)克寧可濕性粉劑(濃度0.1mg/ml)，E代表含15％粉銹寧的三唑酮可濕性粉劑(濃度1mg/ml)，培養(yǎng)溫度30℃，觀察時(shí)間40h。
圖2鮑曼菌素對(duì)水稻紋枯病的防治作用。水稻種子30℃催芽至根長(zhǎng)1cm，于近根基部接種直徑6mm的絲核菌絲菌餅，同時(shí)噴灑2ml不同溶液于接種部位，30℃保溫保濕24h，然后移去菌餅，繼續(xù)培養(yǎng)24h，觀察不同處理褐根或黑根長(zhǎng)度，評(píng)價(jià)對(duì)水稻紋枯病的控制效果。圖中A為商用殺菌劑達(dá)克寧(陽性對(duì)照)，濃度為1mg/ml，B為滅菌水(陰性對(duì)照)，C為鮑曼菌液，D為鮑曼菌素，濃度為1mg/ml。
五具體實(shí)施例方式
下面用實(shí)施例來進(jìn)一步詳述本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
實(shí)施例一LCH0606菌株的分離、鑒定新鮮樟樹莖干采自江蘇南京紫金山，自來水洗凈晾干后切成1cm左右的小段。依次浸入75％乙醇和40％甲醛溶液表面消毒各3min，然后用無菌水清洗3次，以除去表面污染雜菌，再用無菌剪刀將莖干縱向切開，切面朝下放于馬鈴薯蔗糖瓊脂平板上，每平板5個(gè)莖段，共5塊平板。30℃培養(yǎng)，逐天觀察新菌落的出現(xiàn)，共7天，挑取單菌落，劃線純化。另外，在相同的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基平板中放入2～3塊未剪碎的莖或葉片作對(duì)照，檢測(cè)表面滅菌是否徹底。所得菌株采用甘油保藏法于-80℃冰箱保藏備用。
將分離到的10株樟樹莖干內(nèi)生細(xì)菌分別接種于含4mL馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基的15mL試管中，37℃、100rpm搖床培養(yǎng)48h；培養(yǎng)液過濾除菌后取1mL與9mL溶化的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基混勻，倒入直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，制成含發(fā)酵液10％的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基平板，冷卻后放入直徑為7mm的新鮮植物病原真菌菌餅，菌面向下，于30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)40h后測(cè)量菌落直徑，并以同樣體積的培養(yǎng)基代替發(fā)酵液作空白對(duì)照，計(jì)算發(fā)酵液對(duì)測(cè)試真菌生長(zhǎng)的抑制率，重復(fù)三次。其中，抑制率(％)＝[(對(duì)照組菌落平均直徑-樣品組菌落平均直徑)/(對(duì)照組菌落平均直徑-原始菌片直徑)]×100％，菌落直徑單位厘米(cm)。
根據(jù)發(fā)酵液對(duì)植物病原真菌炭疽菌、疫霉菌、灰霉菌、鐮刀菌及絲核菌的抑制活性，篩選到一株廣譜、高效抗真菌活性菌株，經(jīng)形態(tài)、染色、生理生化和16S rDNA序列分析，鑒定為鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株。
實(shí)施例二鮑曼菌液的制備方法種子培養(yǎng)基為馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基，挑取活化的LCH0606單菌落接種到4mL馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基(15mL試管)培養(yǎng)，37℃、100rpm搖床培養(yǎng)12h。接種1％的種子液于400mL馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基搖瓶(1L)中，37℃、100rpm搖床培養(yǎng)48-60h，所得菌液經(jīng)5000-6000rpm離心除菌體后，即為鮑曼菌液。
實(shí)施例三鮑曼菌素的制備方法實(shí)施例二中所述的鮑曼菌液經(jīng)大孔樹脂X-5吸附、80％乙醇洗脫、減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即為鮑曼菌素。大孔樹脂用量為鮑曼菌液的1％，上樣和洗脫流速為4mL/min。鮑曼菌素得率為568mg/L。
實(shí)施例四鮑曼菌液和鮑曼菌素皿內(nèi)抑菌活性實(shí)驗(yàn)1mL實(shí)施例二中所述的鮑曼菌液與9mL已溶化的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基混勻后，倒入直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，制成含鮑曼菌液10％的培養(yǎng)平板，然后放入直徑為7mm的各種新鮮植物病原真菌菌餅，菌面向下，于30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)40h后測(cè)量菌落直徑，并以同樣體積的培養(yǎng)基代替上清液作空白對(duì)照，計(jì)算上清液對(duì)各種測(cè)試真菌生長(zhǎng)的抑制率，重復(fù)三次。
抑制率(％)＝[(對(duì)照組菌落平均直徑-樣品組菌落平均直徑)/(對(duì)照組菌落平均直徑-原始菌片直徑)]×100％，菌落直徑單位厘米(cm)。
用同樣的方法測(cè)定實(shí)施例三中所述鮑曼菌素的抑菌作用，使用濃度為0.1mg/mL；1mg/mL的三唑酮(15％粉銹寧可濕性粉劑)為陽性對(duì)照。結(jié)果顯示鮑曼菌液和鮑曼菌素對(duì)各供試植物病原真菌生長(zhǎng)的抑制作用與陽性對(duì)照三唑酮相當(dāng)，無顯著差異(表1，圖1-2)。
表一 鮑曼菌液和鮑曼菌素對(duì)植物病原真菌生長(zhǎng)的抑制作用(％)

實(shí)施例五活性物質(zhì)的分析實(shí)施例三中所述的鮑曼菌素6.85g經(jīng)硅膠柱層析、氯仿-甲醇梯度洗脫，所得組分進(jìn)行皿內(nèi)抑菌實(shí)驗(yàn)，根據(jù)抑菌結(jié)果合并活性組分，減壓濃縮至干，得到280mg棕色浸膏。該浸膏用甲醇溶解后用Sephadex LH-20反復(fù)純化，得到白色粉末活性成分40mg。經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振檢測(cè)分析，該抗菌化合物為脂肽類化合物，分別為Iturin A2、A3和A6。質(zhì)譜儀型號(hào)VG-ZAB-HS，核磁共振儀型號(hào)Bruker AM500FT-NMR，層析硅膠為200-300目。
實(shí)施例六鮑曼菌液和鮑曼菌素防治水稻紋枯病害實(shí)驗(yàn)(1)皿內(nèi)實(shí)驗(yàn)50粒水稻種子30℃催芽至根長(zhǎng)1cm，于近根基部接種直徑6mm的絲核菌絲菌餅，同時(shí)噴灑2ml不同溶液于接種部位，30℃保溫保濕24h，然后移去菌餅，繼續(xù)培養(yǎng)24h，觀察不同處理褐根或黑根長(zhǎng)度，評(píng)價(jià)對(duì)水稻紋枯病的控制效果。結(jié)果顯示鮑曼菌液或鮑曼菌素(1mg/ml)對(duì)水稻紋枯病的防治效果與商用殺菌劑達(dá)克寧(陽性對(duì)照，濃度1mg/ml)相當(dāng)(圖3)。
(2)盆栽實(shí)驗(yàn)取萌發(fā)后根長(zhǎng)2cm左右的水稻幼苗，在根部接種土傳真菌病害水稻紋枯病菌，然后分別用實(shí)施例二中所述的鮑曼菌液以及實(shí)施例三中所述鮑曼菌素溶液(0.1mg/mL)噴淋水稻幼苗根部，以無菌水處理為對(duì)照，每組50粒種子，30C培養(yǎng)72h后調(diào)查記錄紋枯病害侵染情況，按照5級(jí)分類標(biāo)準(zhǔn)(0級(jí)無病害癥狀；1級(jí)淺灰色病斑，長(zhǎng)度小于0.5cm；2級(jí)病害褐色病斑，長(zhǎng)度0.5cm-1cm；3級(jí)別黑色病斑，長(zhǎng)度1cm以上，根部受害嚴(yán)重)，計(jì)算各組水稻平均病情指數(shù)，平均病情指數(shù)＝∑[(各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)病情級(jí)數(shù))]/調(diào)查總株數(shù)。結(jié)果表明鮑曼菌液對(duì)水稻紋枯病具有良好的防治作用，濃度為0.1mg/mL的鮑曼菌素溶液對(duì)水稻紋枯病也有一定的防治作用(表二)，鮑曼菌液的防效為82％，鮑曼菌素(0.1mg/mL)的防效為48％。
表二、鮑曼菌液和鮑曼菌素對(duì)水稻紋枯病菌侵染的防效

實(shí)施例七鮑曼菌液對(duì)水稻種子萌發(fā)的影響挑選健康水稻種子粒，37℃預(yù)催芽24h，然后分別用實(shí)施例二中所述的鮑曼菌液以及實(shí)施例三中所述的鮑曼菌素溶液(0.1mg/mL)30℃浸種12h，以無菌水浸種為空白對(duì)照，每組50粒種子。再將處理后的種子置于培養(yǎng)皿中，皿底鋪有無菌水潤(rùn)濕的濾紙，30℃培養(yǎng)3d，檢測(cè)各組處理種子的發(fā)芽率、主根長(zhǎng)、根毛數(shù)和莖長(zhǎng)。結(jié)果顯示鮑曼菌液和鮑曼菌素對(duì)水稻種子萌芽沒有顯著影響，但對(duì)根長(zhǎng)、根毛數(shù)和莖長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用(表三)。
表三、鮑曼菌液和鮑曼菌素對(duì)水稻種子萌發(fā)的影響

權(quán)利要求
1.一種抑制多種植物致病真菌的微生物制劑，其特征在于該生物制劑為鮑曼菌液和鮑曼菌素，生產(chǎn)菌株為鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株(Acinetobacterbaumannii LCH0606)，該菌株已于2006年7月6日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株的制備方法，其特征是從樟樹莖干中分離到內(nèi)生細(xì)菌，具體步驟為將植物莖干切成1cm左右的小段，依次浸入75％乙醇和40％甲醛溶液表面消毒各3min，然后用無菌水清洗3次，以除去表面污染雜菌，再用無菌剪刀將莖干沿縱向切開，切面朝下放于馬鈴薯蔗糖瓊脂平板上，每平板5塊莖段，共5塊平板，30℃培養(yǎng)，逐天觀察新菌落的出現(xiàn)，共7天，挑取單菌落，劃線純化，所得菌株經(jīng)拮抗實(shí)驗(yàn)，獲得對(duì)植物病原真菌炭疽菌、疫霉菌、灰霉菌、鐮刀菌及絲核菌有顯著抑制活性的菌株——鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株，于-80℃冰箱保藏。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株所產(chǎn)生的鮑曼菌液，其特征是鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株的混合發(fā)酵液，經(jīng)5000-6000rmp離心30min后所得的無菌上清液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株所產(chǎn)生的鮑曼菌液的制備方法，其特征是對(duì)鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵工藝包括種子液的制備和1L搖瓶發(fā)酵，種子液的制備為在15mL試管中加入4mL馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基，接種后于37℃、100rpm搖床培養(yǎng)12h，然后按1％的種子液接種到400ml的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基中，37℃、100rpm搖瓶發(fā)酵48h，發(fā)酵液經(jīng)5000-6000rmp離心30min后，所得無菌上清液即為鮑曼菌液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株所產(chǎn)生的鮑曼菌素，其特征是鮑曼菌液經(jīng)大孔樹脂吸附濃縮后所得的浸膏。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株所產(chǎn)生的鮑曼菌素的制備方法，其特征是使用大孔樹脂吸附濃縮，大孔樹脂顆粒大小為100-400，與發(fā)酵液體積比為1∶100，流速為4mL/min；洗脫溶劑為80％乙醇，流速為4mL/min，洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干，即為鮑曼菌素。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株所產(chǎn)生的抗真菌活性物質(zhì)，其特征是脂肽類物質(zhì)，經(jīng)鑒定為Iturin A2，A3和A6。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株所產(chǎn)生的鮑曼菌液和鮑曼菌素在防治大豆炭疽病、辣椒疫霉病、番茄灰霉病、小麥赤霉病及水稻紋枯病多種植物病害的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鮑曼氏不動(dòng)桿菌所產(chǎn)生的鮑曼菌液和鮑曼菌素在促進(jìn)水稻種子生根、萌芽中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域。內(nèi)容包括四個(gè)方面(1)鮑曼氏不動(dòng)桿菌LCH0606菌株(Acinetobacter baumannii LCH0606)的分離與鑒定；(2)鮑曼菌液的制備及其防治植物病害的應(yīng)用；(3)鮑曼菌素的制備及防病應(yīng)用；(4)鮑曼菌素有效成分的分析。鮑曼菌液或鮑曼菌素的抗菌活性成分主要為Iturin A，具有殺菌譜廣、效果持久、病害不易產(chǎn)生抗藥性、植物不會(huì)產(chǎn)生藥害、生物安全和環(huán)境友好等特點(diǎn)，對(duì)土壤及葉部真菌，特別是炭疽菌、疫霉菌、灰霉菌、鐮刀菌及絲核菌等有顯著的防治效果；此外，鮑曼菌液或鮑曼菌素對(duì)水稻種子萌發(fā)有一定的促生作用。
文檔編號(hào)A01P1/00GK1973631SQ200610088339
公開日2007年6月6日 申請(qǐng)日期2006年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月12日
發(fā)明者劉常宏, 陳欣, 顧玉誠, 王艷艷, 幸穎, 湯城 申請(qǐng)人:南京大學(xué)