細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)和方法
【專利摘要】一種自動(dòng)系統(tǒng)，該系統(tǒng)從樣品的不同檢視區(qū)域捕獲樣品的多個(gè)數(shù)字圖像。分析圖像并且可以基于在所有數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。因?yàn)榕c測(cè)試結(jié)果僅基于樣品的單個(gè)圖像的系統(tǒng)相比可以減小測(cè)試之間的變化性，所以該系統(tǒng)尤其可以適合于具有低細(xì)胞濃度的樣品的測(cè)試。該系統(tǒng)可以對(duì)在樣品的第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且只有在認(rèn)識(shí)到需要另外的測(cè)量以確保測(cè)試的足夠的準(zhǔn)確性和重復(fù)性時(shí)，才會(huì)捕獲或者分析一個(gè)或更多個(gè)另外的數(shù)字圖像。
【專利說明】細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)和方法
[0001]相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002]本申請(qǐng)是于2012 年 5 月 30 日提交的題為“CELL COUNTING SYSTEMS AND METHODS(細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)和方法)”的美國(guó)專利申請(qǐng)N0.13/483，771的PCT申請(qǐng)，并且涉及和要求于2011年5月31日提交的題為“CELL COUNTING SYSTEMS AND METHODS (細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)和方法)”的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)N0.61/491, 703的權(quán)益，出于所有目的，其全部公開內(nèi)容通過弓I用合并到本文中。
【背景技術(shù)】
[0003]細(xì)胞計(jì)數(shù)法是涉及生物細(xì)胞的計(jì)數(shù)和表征的技術(shù)專業(yè)。例如，在評(píng)估病人的整體健康、診斷疾病、或者其他用途方面，可能關(guān)心病人的血液樣品中的紅細(xì)胞和白細(xì)胞的濃度和相對(duì)數(shù)目。
[0004]自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置已經(jīng)變得普遍。例如，可以將血液樣品放置在樣品架中，然后照相機(jī)或者具有類似照相機(jī)性能的其他裝置可以拍攝樣品的數(shù)碼照片。接著，自動(dòng)化系統(tǒng)可以分析數(shù)碼照片以確定和計(jì)數(shù)存在的細(xì)胞，并報(bào)告結(jié)果。
[0005]通常希望能提高細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]根據(jù)一個(gè)方面，系統(tǒng)包括:感測(cè)系統(tǒng)，該感測(cè)系統(tǒng)生成樣品架的檢視區(qū)域的數(shù)字圖像，樣品架保持細(xì)胞的集合；運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)，該運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)將樣品架和感測(cè)系統(tǒng)的相對(duì)位置變成多個(gè)構(gòu)型，使得在每個(gè)構(gòu)型中檢視區(qū)域包圍樣品架的不同可視部分。所包圍的可視部分相對(duì)于樣品進(jìn)入樣品架的主加載方向來大致橫向地布置。系統(tǒng)還包括控制器，當(dāng)樣品架和感測(cè)系統(tǒng)處于多個(gè)構(gòu)型的每個(gè)構(gòu)型時(shí)，控制器指引感測(cè)系統(tǒng)捕獲數(shù)字圖像。在一些實(shí)施方式中，系統(tǒng)還包括分析數(shù)字圖像并對(duì)在所有數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的計(jì)算機(jī)化分析器?？刂破骺梢詧?zhí)行計(jì)算機(jī)化分析器的功能。系統(tǒng)還可以包括對(duì)檢視區(qū)域進(jìn)行照明的光源。在一些實(shí)施方式中，在多個(gè)構(gòu)型中被檢視區(qū)域包圍的樣品架的可視部分不重疊。運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)還可以包括使樣品架以平移的方式移動(dòng)的平移機(jī)構(gòu)。運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)還可以包括使樣品架以旋轉(zhuǎn)的方式移動(dòng)的旋轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)。在一些實(shí)施方式中，系統(tǒng)還包括容納系統(tǒng)的至少某些部分和限定插有樣品架的槽的外殼，并且運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)使樣品架以搖擺運(yùn)動(dòng)的方式旋轉(zhuǎn)，同時(shí)樣品架的一端保留在槽的側(cè)部之間。旋轉(zhuǎn)系統(tǒng)可以使樣品架圍繞槽處的點(diǎn)旋轉(zhuǎn)。運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)可以包括在控制器的控制下使樣品架移動(dòng)的馬達(dá)。在一些實(shí)施方式中，多個(gè)構(gòu)型包括至少三個(gè)構(gòu)型。在一些實(shí)施方式中，系統(tǒng)還包括樣品架，并且樣品架的可視部分位于樣品架的單個(gè)窗中。在一些實(shí)施方式中，系統(tǒng)還包括樣品架，并且樣品架的可視部分位于樣品架的不同的窗中。至少兩個(gè)窗可以保持不同的樣品材料。
[0007]根據(jù)另一方面，一種方法包括:使用感測(cè)系統(tǒng)捕獲包含細(xì)胞的樣品的第一可視部分的第一數(shù)字圖像，以及重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品使得感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第二可視部分進(jìn)行成像。第一可視部分和第二可視部分相對(duì)于樣品進(jìn)入保持樣品的樣品架中的主加載方向來大致橫向地布置。方法還包括捕獲第二可視部分的第二數(shù)字圖像。在一些實(shí)施方式中，方法還包括使用計(jì)算機(jī)化分析器分析第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像，并且對(duì)在數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后基于在第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像兩者中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。在一些實(shí)施方式中，方法還包括:重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品，使得感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第三可視部分進(jìn)行成像；捕獲檢視區(qū)域的第三數(shù)字圖像；以及分析第三數(shù)字圖像并且對(duì)在第三數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，其中，基于在第一圖像和第二圖像兩者中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果包括，基于在所有三個(gè)數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。在一些實(shí)施方式中，第一可視部分和第二可視部分不重疊。重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品可以包括移動(dòng)樣品。移動(dòng)樣品可以包括以平移、旋轉(zhuǎn)的方式、或者以平移和旋轉(zhuǎn)的組合的方式移動(dòng)樣品。重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品可以包括移動(dòng)感測(cè)系統(tǒng)的至少一部分。在一些實(shí)施方式中，重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品包括移動(dòng)樣品和感測(cè)系統(tǒng)的至少一部分兩者。第一可視部分和第二可視部分可以位于樣品架的單個(gè)窗中。在一些實(shí)施方式中，第一可視部分和第二可視部分位于樣品架的不同的窗中。
[0008]根據(jù)另一方面，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法包括使用感測(cè)系統(tǒng)捕獲包含細(xì)胞的樣品的第一可視部分的第一數(shù)字圖像。使用計(jì)算機(jī)化分析器分析第一數(shù)字圖像以獲得存在于第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的第一計(jì)數(shù)。該方法還包括將計(jì)數(shù)和閾值計(jì)數(shù)比較。當(dāng)計(jì)數(shù)低于閾值計(jì)數(shù)時(shí)，重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品使得感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第二可視部分進(jìn)行成像、捕獲第二可視部分的第二數(shù)字圖像、以及分析第二數(shù)字圖像并且基于存在于第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。當(dāng)計(jì)數(shù)高于閾值計(jì)數(shù)時(shí)，基于存在于第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果而不捕獲第二數(shù)字圖像。在一些實(shí)施方式中，第一可視部分和第二可視部分相對(duì)于樣品進(jìn)入樣品架中的主加載方向來大致橫向地布置。在一些實(shí)施方式中，第一可視部分和第二可視部分相對(duì)于樣品進(jìn)入樣品架中的主加載方向來大致平行地布置。在一些實(shí)施方式中，該計(jì)數(shù)是第一計(jì)數(shù)，該閾值計(jì)數(shù)是第一閾值計(jì)數(shù)，并且當(dāng)?shù)谝挥?jì)數(shù)低于第一閾值計(jì)數(shù)時(shí)，該方法還包括:分析第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像以計(jì)算存在于第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的第二計(jì)數(shù)；將第二計(jì)數(shù)和第二閾值計(jì)數(shù)比較，當(dāng)?shù)诙?jì)數(shù)低于第二閾值計(jì)數(shù)時(shí)，重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品使得感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第三可視部分進(jìn)行成像，捕獲第三可視部分的第三數(shù)字圖像，以及分析第三數(shù)字圖像，并且基于存在于第一數(shù)字圖像、第二數(shù)字圖像以及第三數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果；當(dāng)?shù)诙?jì)數(shù)高于第二閾值計(jì)數(shù)時(shí)，基于存在于第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果而不捕獲第三數(shù)字圖像。第一濃度閾值和第二濃度閾值可以相同。
[0009]根據(jù)另一方面，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法包括使用感測(cè)系統(tǒng)捕獲包含細(xì)胞的樣品的不同可視部分的多個(gè)數(shù)字圖像。使用計(jì)算機(jī)化分析器分析所述多個(gè)數(shù)字圖像中的第一數(shù)字圖像以獲得存在于第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的第一計(jì)數(shù)，并且將該計(jì)數(shù)和閾值計(jì)數(shù)比較。當(dāng)該計(jì)數(shù)低于閾值計(jì)數(shù)時(shí)，分析所述多個(gè)數(shù)字圖像中的至少一個(gè)另外的圖像，并且基于存在于所分析的數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。當(dāng)該計(jì)數(shù)高于閾值計(jì)數(shù)時(shí)，基于存在于第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果而不分析任何另外的數(shù)字圖像。
[0010]根據(jù)另一方面，樣品架包括構(gòu)造來插入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的主體，以及主體中的多個(gè)窗，所述多個(gè)窗用于接納包含要計(jì)數(shù)的細(xì)胞的且具有一種或更多種材料的樣品。窗相對(duì)于樣品架進(jìn)入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中的主加載方向來橫向或平行地布置?？梢詫⒋耙耘c細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的多個(gè)檢視區(qū)域的間隔相對(duì)應(yīng)的距離來彼此間隔開。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1示出根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)。
[0012]圖2示意性示出可以存在于圖1的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中的部件組。
[0013]圖3示出如可能被圖1的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)所拍攝的示例數(shù)字圖像。
[0014]圖4示出由圖1的系統(tǒng)所成像的檢視區(qū)域與樣品架的窗的關(guān)系。
[0015]圖5示出細(xì)胞濃度低于圖3的數(shù)字圖像中所示出的細(xì)胞濃度的樣品的另一示例圖像。
[0016]圖6示出根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的圖1的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的工作。
[0017]圖7示出圖6中描繪的運(yùn)動(dòng)的效果。
[0018]圖8不出樣品架的另一不例運(yùn)動(dòng)的頂視圖。
[0019]圖9示出用于提供圖8所示的搖擺運(yùn)動(dòng)的一個(gè)示例運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)的低斜視圖。
[0020]圖10示出根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法的流程圖。
[0021]圖11示出根據(jù)其他實(shí)施方式的用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法的流程圖。
[0022]圖12示出自包含細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的一個(gè)示例架構(gòu)。
[0023]圖13示出包括外部計(jì)算機(jī)系統(tǒng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的另一示例架構(gòu)。
[0024]圖14示出根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的樣品架。
[0025]圖15示出根據(jù)其他實(shí)施方式的樣品架。
【具體實(shí)施方式】
[0026]圖1示出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100。為使用細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100，用戶可以將包含要計(jì)數(shù)的細(xì)胞的樣品(例如，血液樣品或其他樣品)放置在樣品架101中。樣品架101可以包括透明窗102，如以下更詳細(xì)地描述的，將樣品分散到透明窗102中用于感測(cè)。例如，窗102可以由樣品分散其間的兩個(gè)緊密隔開的透明板形成?？梢蕴峁┡艢饪?105以允許空氣隨著樣品進(jìn)入而從板之間逸出。樣品和其包含的細(xì)胞沿著主加載方向106從一邊分散到窗102中。然后，可以將樣品架101經(jīng)由槽103插入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100中。優(yōu)選地，示例細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100包括用于感測(cè)透明窗102的圖像的部件，并且還可以包括用于分析圖像以確定圖像中可見的細(xì)胞的數(shù)量的元件。可以在顯示器104上向用戶呈現(xiàn)測(cè)試結(jié)果。
[0027]圖2示意性示出了可以存在于細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100中的部件組。在圖2的實(shí)施方式中，樣品架101被設(shè)置在托盤201中，所述托盤201在將樣品架插入到細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100中時(shí)引導(dǎo)樣品架。彈簧202可以用于使樣品架101偏向托盤201的一側(cè)以對(duì)準(zhǔn)一致。行程止步器203限制樣品架101的插入，并且使樣品架101對(duì)準(zhǔn)在正確的插入深度。將認(rèn)識(shí)到的是，圖2中所示用于保持和對(duì)準(zhǔn)樣品架101的特征僅是示例，可以使用用于保持和對(duì)準(zhǔn)樣品架101的任何適合系統(tǒng)。
[0028]光源204對(duì)窗102的至少一部分進(jìn)行照明。例如，托盤201可以包括能夠使來自光源204的光到達(dá)窗102的鏤空部分(圖2中不可見)。光源204可以是任何適合種類的光源，例如，發(fā)光二極管(LED)、白熾光源、熒光光源、或者其他種類的光源。光源204可以是單色的、可以發(fā)窄波長(zhǎng)光譜的光、或者可以發(fā)寬譜光。
[0029]透鏡205將檢視區(qū)域206的圖像投射到陣列光傳感器207上。檢視區(qū)域206僅包括窗102的一部分。例如，雖然可以使用其他尺寸，但窗102可以為約6毫米X9毫米，而檢視區(qū)域可以覆蓋約2毫米X2毫米的區(qū)域。
[0030]陣列光傳感器207可以是電荷耦合器件(CXD)傳感器、互補(bǔ)金屬氧化物半導(dǎo)體(CMOS)傳感器、或者其他種類的電子圖像傳感器。這樣的傳感器包括稱為像素的光敏點(diǎn)的陣列。每個(gè)傳感器像素以與落在像素上的光的強(qiáng)度成比例的速率來累積電荷。為了讀取檢視區(qū)域206的數(shù)字圖像，可以重置傳感器像素，并且使傳感器暴露于光下達(dá)固定的時(shí)間段。將每個(gè)像素處的電荷的量轉(zhuǎn)換成電壓，然后讀取電壓并轉(zhuǎn)換成數(shù)值。數(shù)字圖像是表示落在各個(gè)像素上的光強(qiáng)度的數(shù)值的陣列。在一些實(shí)施方式中，也可以收集顏色信息。在一些實(shí)施方式中，陣列光傳感器207可以包含約4百萬個(gè)像素。
[0031]控制器208與陣列光傳感器207相互作用以采集數(shù)字圖像。例如，取決于傳感器類型，控制器可以向陣列光傳感器207提供定時(shí)信號(hào)、可以提供構(gòu)型信息或其他控制信號(hào)?？刂破?08還接收表示在像素處采集的光讀數(shù)的信息。取決于傳感器類型和系統(tǒng)架構(gòu)，信息可以是要被控制器208轉(zhuǎn)換為數(shù)字值的模擬電壓的形式，或者可以已經(jīng)在傳感器207處被轉(zhuǎn)換為數(shù)字值。對(duì)于采集檢視區(qū)域206的數(shù)字圖像，許多不同的系統(tǒng)架構(gòu)是可能的。
[0032]如以下將更詳細(xì)地描述的，還可以存在馬達(dá)209或其他執(zhí)行器?？梢蕴峁?duì)焦機(jī)構(gòu)。例如，可以沿著光軸手動(dòng)或自動(dòng)移動(dòng)透鏡205或傳感器207以實(shí)現(xiàn)最佳對(duì)焦。
[0033]圖3示出當(dāng)存在樣品時(shí)，可以被細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100所拍攝的檢視區(qū)域206的示例數(shù)字圖像300。在圖像300中約52個(gè)細(xì)胞301 (只有一些被標(biāo)記)是可見的。在組成數(shù)字圖像的數(shù)值的陣列中，細(xì)胞以與圖像的背景302相關(guān)聯(lián)的值不同的關(guān)聯(lián)值組存在。在一些實(shí)施方式中，系統(tǒng)使用根據(jù)已知技術(shù)的計(jì)算機(jī)化方法來定位和分組表示細(xì)胞的存在的值，并且計(jì)數(shù)存在于圖像中的細(xì)胞的數(shù)量。在一些實(shí)施方式中，系統(tǒng)也可以特征化細(xì)胞，例如分別計(jì)數(shù)活細(xì)胞和死細(xì)胞，或者區(qū)分細(xì)胞的類型。在其他實(shí)施方式中，可以簡(jiǎn)單顯示細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)所拍攝的圖像，并且可以手動(dòng)執(zhí)行圖像分析和細(xì)胞計(jì)數(shù)。在另一些實(shí)施方式中，為了分析和細(xì)胞計(jì)數(shù)，可以將細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)所拍攝的圖像轉(zhuǎn)移至別的系統(tǒng)，例如計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。在其他實(shí)施方式中，可以簡(jiǎn)單地查看細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)所拍攝的圖像而不用實(shí)際計(jì)數(shù)細(xì)胞，并且希望所附權(quán)利要求包括系統(tǒng)的這種用法。
[0034]圖4示出檢視區(qū)域206與窗102的關(guān)系。因?yàn)闇y(cè)量的樣品的細(xì)胞濃度相對(duì)高，所以在檢視區(qū)域206中找到的與檢視區(qū)域206的面積相關(guān)的細(xì)胞的數(shù)量表示樣品中的細(xì)胞的濃度。也就是說，在該理想化的示例中，檢視區(qū)域206中測(cè)量的單位面積的細(xì)胞數(shù)量與將在跨整個(gè)窗102測(cè)量的單位面積的細(xì)胞數(shù)量大致相同。在這些條件下，對(duì)來自相同材料的樣品的重復(fù)測(cè)試可能會(huì)給出如下結(jié)果:與要計(jì)數(shù)的細(xì)胞的數(shù)量相比，計(jì)數(shù)到的細(xì)胞的數(shù)量的變化非常小。
[0035]圖5示出具有濃度低得多的細(xì)胞的樣品的另一示例測(cè)試。事實(shí)上，在檢視區(qū)域206中僅出現(xiàn)了 7個(gè)細(xì)胞?？梢钥闯觯?yàn)榇?02的其他區(qū)域具有聚集更加緊密的細(xì)胞，所以在檢視區(qū)域206中計(jì)數(shù)到的細(xì)胞的數(shù)量可能無法準(zhǔn)確表示樣品的濃度。如果要再次測(cè)試該樣品，則從統(tǒng)計(jì)上講可能出現(xiàn)，第二測(cè)試中的細(xì)胞會(huì)碰巧以不同的方式分散，并且在檢視區(qū)域206中計(jì)數(shù)到的數(shù)量會(huì)明顯不同。[0036]對(duì)測(cè)試結(jié)果的變化性的一種測(cè)量是變化系數(shù)(COV, coefficient of variation),COV可以定義為:
[0037]COV= σ /μ * 100
[0038]其中，σ是對(duì)特定材料的樣品進(jìn)行大量測(cè)試的結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差，μ是測(cè)試結(jié)果的平均值。明顯的是，COV表示測(cè)試結(jié)果相對(duì)于平均值結(jié)果的大小的變化性。乘數(shù)100是可選的，并且當(dāng)使用時(shí)，以百分比表示結(jié)果。具有低細(xì)胞濃度的材料尤其可能受大的COV的影響，部分是因?yàn)閷?duì)于具有低細(xì)胞濃度的材料，COV的表達(dá)式中的分母μ小。一般來說，希望能減小不管是通過COV或別的特征所測(cè)量的測(cè)試結(jié)果的變化性，使得可以自信地報(bào)告測(cè)試結(jié)果，并且可以避免重復(fù)測(cè)試。
[0039]圖6示出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100的工作。在圖6所示的示例中，托盤201相對(duì)于透鏡205可移動(dòng)，使得樣品架101和感測(cè)系統(tǒng)的相對(duì)位置是變化的。例如，可以沿著方向601將托盤201平移到如虛線所示的位置201a。使用托盤201運(yùn)送樣品架101，使得圖像傳感器207所成像的檢視區(qū)域包圍窗102的區(qū)域206a。也可以將托盤201沿著相反方向移動(dòng)到別的位置(未示出)，其中，傳感器207所成像的檢視區(qū)域包圍窗102的區(qū)域206b。托盤201的移動(dòng)可以通過運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)完成，運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)可以包括馬達(dá)(如馬達(dá)209)或其他種類的執(zhí)行器。因此，感測(cè)系統(tǒng)和樣品架101的相對(duì)位置可以變成多個(gè)構(gòu)型，其中，在每個(gè)構(gòu)型中傳感器207所成像的檢視區(qū)域包圍樣品架的不同可視部分。雖然認(rèn)識(shí)到可以使用兩個(gè)構(gòu)型，但是在該示例中，可以獲得三個(gè)不同的構(gòu)型，或者可以獲得多于三個(gè)的構(gòu)型。
[0040]圖7示出如在窗102處看到的托盤201的運(yùn)動(dòng)的效果。三個(gè)構(gòu)型中通過傳感器207所成像的三個(gè)區(qū)域206、206a、206b示出為疊加在窗102上。
[0041]為了計(jì)數(shù)正在測(cè)量的樣品中的細(xì)胞，當(dāng)樣品架和感測(cè)系統(tǒng)在多個(gè)構(gòu)型的每個(gè)構(gòu)型中時(shí)，控制器208指示感測(cè)系統(tǒng)捕獲數(shù)字圖像，然后分析數(shù)字圖像以對(duì)存在于所有數(shù)字圖像中的檢視區(qū)域中的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。如可以在圖7的示例中看出的，這導(dǎo)致較大的有效測(cè)量面積，以及針對(duì)該樣品所計(jì)數(shù)到的更多的細(xì)胞的數(shù)量。較大的有效測(cè)量面積將減小后續(xù)樣品中細(xì)胞以如下方式分散的可能性:所計(jì)數(shù)的細(xì)胞的總數(shù)量相對(duì)于所計(jì)數(shù)的細(xì)胞的平均數(shù)量明顯不同。如果將COV用作變化性的測(cè)量，則與僅使用單一圖像的測(cè)試相比，COV減小。
[0042]雖然圖6的系統(tǒng)所成像的三個(gè)區(qū)域206、206a以及206b不重疊或接觸，但這不是必要條件?？梢允褂媒佑|或重疊檢視區(qū)域。系統(tǒng)可以執(zhí)行相關(guān)運(yùn)算以識(shí)別出現(xiàn)在任何重疊區(qū)域中的細(xì)胞，以避免細(xì)胞的重復(fù)計(jì)數(shù)。
[0043]在圖6的不例系統(tǒng)中，托盤201平移以將窗102的不同部分暴露在傳感器207下。在其他實(shí)施方式中，可以使用其他種類的運(yùn)動(dòng)，例如，導(dǎo)致樣品架101的旋轉(zhuǎn)以及樣品架101的組合平移和旋轉(zhuǎn)的運(yùn)動(dòng)、在樣品架101保持靜止時(shí)感測(cè)系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)、或者樣品架101和感測(cè)系統(tǒng)兩者的運(yùn)動(dòng)，只要樣品架和感測(cè)系統(tǒng)的相對(duì)位置移動(dòng)到多個(gè)構(gòu)型使得在每個(gè)構(gòu)型中傳感器207所成像的檢視區(qū)域包圍樣品架的不同可視部分即可。
[0044]如在圖4、圖5和圖7中可見的，細(xì)胞可以以細(xì)胞密度的梯度的方式分散到窗102中。通常來說，細(xì)胞分布在窗102的接近加載點(diǎn)的部分中可能較不密集，在窗的遠(yuǎn)離加載點(diǎn)的部分中可能較密集。也就是說，隨著沿著加載方向106穿過窗，細(xì)胞分布可能不是均勻的。與將樣品架大致平行于加載方向106移動(dòng)的系統(tǒng)相比，在采集多個(gè)數(shù)字圖像時(shí)樣品架101的橫向運(yùn)動(dòng)可以確保窗102的被系統(tǒng)成像的部分來自窗102的細(xì)胞分布大體一致的部分，并且還可以進(jìn)一步有助于測(cè)試結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。即便如此，在一些實(shí)施方式中，運(yùn)動(dòng)通常平行于樣品架101中的樣品的加載方向106。在其他實(shí)施方式中，可以使用平行于細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100中的樣品架101的加載方向的運(yùn)動(dòng)。樣品架中的樣品的加載方向106可以與細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中的樣品架的加載方向相同或不同。優(yōu)選地，成像區(qū)域選擇為使得系統(tǒng)所生成的細(xì)胞計(jì)數(shù)與通過其他方法所生成的一致。如圖7所示，在長(zhǎng)度“L”約為9.0毫米的窗的一個(gè)示例實(shí)施方式中，系統(tǒng)所成像的區(qū)域在距最接近加載點(diǎn)701的窗邊緣約6.3毫米的中央?yún)^(qū)域。
[0045]圖8不出樣品架101的另一不例運(yùn)動(dòng)的頂視圖。如圖1所不，可以將樣品架101插入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100中槽或其他插孔內(nèi)(如槽103)。因此，可以通過細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)100的外殼的壁803來約束樣品架101的可視端801的明顯的橫向平移?？梢酝ㄟ^托盤201和樣品架101的旋轉(zhuǎn)或搖擺運(yùn)動(dòng)來提供使窗102的多個(gè)區(qū)域暴露在傳感器207下的托盤201的運(yùn)動(dòng)。在圖8所示的示例中，托盤201圍繞槽103處的軸802旋轉(zhuǎn)。雖然軸802位于槽103的中心附近，但是可以選擇其他軸，例如在槽103的一個(gè)邊緣處的軸。在其他實(shí)施方式中，可以使用不接近槽103的旋轉(zhuǎn)軸。
[0046]在圖8的示例中，當(dāng)托盤201旋轉(zhuǎn)到如虛線所示的位置201c時(shí)，則圖像傳感器207所成像的檢視區(qū)域包圍窗102的區(qū)域206c。托盤201也可以沿著相反方向旋轉(zhuǎn)以窗102的區(qū)域206d暴露在傳感器207下。因?yàn)檩S802遠(yuǎn)離窗102，所以樣品架101的旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致檢視區(qū)域206的位置相對(duì)于窗102的大致橫向改變。因此，區(qū)域206、206c以及206d可以全部包圍窗102的具有相似細(xì)胞分布的部分。優(yōu)選地，為了在窗102中實(shí)現(xiàn)檢視區(qū)域206的明顯的大致橫向的運(yùn)動(dòng)，使樣品架101的旋轉(zhuǎn)軸與檢視區(qū)域206相距距離“R”，該距離“R”為檢視區(qū)域206的寬度“W”的至少5倍，更優(yōu)選地，為檢視區(qū)域206的寬度的至少8倍。在一些實(shí)施方式中，可以使旋轉(zhuǎn)軸離開檢視區(qū)域206的寬度的10倍、15倍或更多倍。
[0047]圖9示出用于提供圖8所示的搖擺運(yùn)動(dòng)的一個(gè)示例運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)的低斜視圖。在圖9的系統(tǒng)中，馬達(dá)209的旋轉(zhuǎn)驅(qū)動(dòng)偏心銷901，偏心銷901進(jìn)而與托盤201中的槽902接合。偏心銷901的運(yùn)動(dòng)驅(qū)動(dòng)槽902，從而驅(qū)動(dòng)托盤201和樣品架101，以向傳感器207露出窗102的不同區(qū)域。
[0048]馬達(dá)109可以是任何適合種類的馬達(dá)，例如:步進(jìn)馬達(dá)、DC伺服馬達(dá)、或者其他種類的馬達(dá)?？梢蕴峁┫拗崎_關(guān)或其他工具來限制馬達(dá)109的旋轉(zhuǎn)行程。在其他實(shí)施方式中，可以使用其他種類的執(zhí)行器和運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)，例如，線性馬達(dá)、螺線管、氣動(dòng)執(zhí)行器或液壓執(zhí)行器、或者其他種類的執(zhí)行器可以通過齒輪、傳送帶、滑輪、直接傳動(dòng)、摩擦傳動(dòng)、或者其他適合機(jī)構(gòu)來驅(qū)動(dòng)托盤102。
[0049]圖10示出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法1000的流程圖。在步驟1001中，捕獲包含要計(jì)數(shù)的細(xì)胞的樣品的第一可視部分的數(shù)字圖像。在步驟1002中，重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品的關(guān)系，使得感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第二可視部分進(jìn)行成像。在步驟1003中，捕獲第二可視部分的第二數(shù)字圖像。在步驟1004中，分析第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像，并且對(duì)在兩個(gè)數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。在步驟1005中，報(bào)告基于在第一圖像和第二圖像兩者中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)的測(cè)試結(jié)果。例如，如果在第一數(shù)字圖像中檢測(cè)到23個(gè)細(xì)胞，并且在第二數(shù)字圖像中檢測(cè)到29個(gè)細(xì)胞，則可以報(bào)告52個(gè)總細(xì)胞數(shù)。在其他實(shí)施方式中，可以報(bào)告基于細(xì)胞數(shù)的其他種類的值。例如，可以將細(xì)胞數(shù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞濃度，然后可以報(bào)告細(xì)胞濃度。
[0050]將認(rèn)識(shí)到的是，可以捕獲多于兩個(gè)的數(shù)字圖像，每個(gè)數(shù)字圖像是樣品的不同可視部分。例如，可以使用三個(gè)、四個(gè)或更多個(gè)可視區(qū)域和各自的數(shù)字圖像，并且基于出現(xiàn)在所有數(shù)字圖像中的細(xì)胞的組合計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。還將認(rèn)識(shí)到的是，可以以任何可行的順序執(zhí)行步驟。例如，可以在分析任一個(gè)圖像之前捕獲兩個(gè)數(shù)字圖像。
[0051]圖11示出根據(jù)其他實(shí)施方式的用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法1100的流程圖。在一些測(cè)試中，例如在測(cè)試具有高濃度細(xì)胞的樣品中，計(jì)數(shù)單個(gè)數(shù)字圖像中的細(xì)胞可能足以給出可重復(fù)的和可靠的濃度估計(jì)。在這種情況下，進(jìn)一步的測(cè)試不提供在準(zhǔn)確性或重復(fù)性方面的明顯的優(yōu)勢(shì)，并且引起在重構(gòu)感測(cè)系統(tǒng)和樣品、捕獲附加的圖像、以及分析附加的圖像方面的附加的測(cè)試時(shí)間。方法1100認(rèn)識(shí)到一些測(cè)試可能僅需要分析單個(gè)數(shù)字圖像以實(shí)現(xiàn)滿意的結(jié)果，而其他測(cè)試可能需要分析兩個(gè)或更多個(gè)數(shù)字圖像。
[0052]在步驟1101中，捕獲包含要計(jì)數(shù)的細(xì)胞的樣品的第一可視部分的第一數(shù)字圖像，然后分析數(shù)字圖像以計(jì)數(shù)在第一數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞的數(shù)量。該計(jì)數(shù)表示對(duì)樣品中的細(xì)胞的濃度的估計(jì)。在步驟1102中，將計(jì)數(shù)與所選的第一閾值進(jìn)行比較以區(qū)分以下測(cè)試:單個(gè)數(shù)字圖像的分析足以獲得滿意的濃度估計(jì)的測(cè)試和需要多個(gè)圖像的測(cè)試。如果從對(duì)第一數(shù)字圖像的分析中獲得的計(jì)數(shù)超過第一閾值，則在步驟1103報(bào)告基于第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞計(jì)數(shù)的測(cè)試結(jié)果。
[0053]當(dāng)對(duì)第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)不超過第一閾值時(shí)，感測(cè)系統(tǒng)和樣品被重構(gòu)使得感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第二可視部分進(jìn)行成像。在步驟1105中，捕獲樣品的第二可視部分的第二數(shù)字圖像，然后分析第二數(shù)字圖像以確定細(xì)胞數(shù)。在步驟1106，將在第一圖像和第二圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞的組合計(jì)數(shù)與第二閾值進(jìn)行比較。如果組合計(jì)數(shù)超過閾值，則在步驟1107中基于出現(xiàn)在第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的組合計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。如果組合計(jì)數(shù)不超過第二閾值，則在步驟1108中再次重構(gòu)系統(tǒng)，以便感測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的第三可視部分進(jìn)行成像。在步驟1109，捕獲樣品的第三檢視區(qū)域的第三數(shù)字圖像，然后分析第三數(shù)字圖像。在步驟1110，基于所有三個(gè)圖像的組合細(xì)胞計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。
[0054]其他變體是可能的。例如，可以在執(zhí)行任何的圖像分析之前獲得樣品的不同檢視區(qū)域的多個(gè)數(shù)字圖像。然后，可以分析所述多個(gè)圖像中的第一圖像，如果分析表明檢測(cè)到無需進(jìn)行附加測(cè)試的足夠的細(xì)胞，則可以報(bào)告結(jié)果，可以放棄對(duì)任何其他數(shù)字圖像的分析，并且放棄任何不用的數(shù)字圖像。如果對(duì)第一數(shù)字圖像的分析表明細(xì)胞濃度對(duì)于滿意的結(jié)果太低，則可以分析所述多個(gè)圖像中的第二圖像。如果對(duì)第二數(shù)字圖像的分析表明第一數(shù)字圖像和第二數(shù)字圖像提供了滿意的結(jié)果，則報(bào)告結(jié)果，并且放棄對(duì)任何進(jìn)一步的圖像的分析。
[0055]根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的系統(tǒng)可以具有各種電子架構(gòu)。圖12示出如圖1所示的系統(tǒng)100的自包含細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的一個(gè)示例架構(gòu)。在圖12的實(shí)施方式中，控制器208包括處理器801。處理器801可以是任何適合種類的處理器，如通用微處理器或通用微控制器。處理器801對(duì)存儲(chǔ)器802進(jìn)行存取，存儲(chǔ)器802可以包括易失性存儲(chǔ)器和非易失性存儲(chǔ)器。例如，存儲(chǔ)器802可以包括非易失性存儲(chǔ)器，如閃存存儲(chǔ)器或可編程只讀存儲(chǔ)器，其保存在由處理器801執(zhí)行時(shí)使控制器執(zhí)行其編程功能的微處理器指令。輸出/輸出模塊803可以包括到系統(tǒng)的其他部分的一個(gè)或更多個(gè)接口，所述系統(tǒng)的其他部分包括:運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)804 (其可以包括馬達(dá)209或其他種類的執(zhí)行器)、圖像傳感器207、光源204、以及顯示器104。在該示例實(shí)施方式中，存儲(chǔ)器802可以保存使處理器801指引系統(tǒng)的構(gòu)型和數(shù)字圖像的采集的指令，并且還可以包括用于分析數(shù)字圖像以識(shí)別和計(jì)數(shù)細(xì)胞以及用于報(bào)告結(jié)果的指令。
[0056]圖13示出包括外部計(jì)算機(jī)系統(tǒng)1301的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的另一示例架構(gòu)。例如，控制器208可以向計(jì)算機(jī)系統(tǒng)1301發(fā)送圖像傳感器207所捕獲的數(shù)字圖像來分析和報(bào)告結(jié)果。將認(rèn)識(shí)到的是，可以以許多方式來在硬件、軟件與固件之間，以及在不同內(nèi)部處理器與外部計(jì)算機(jī)系統(tǒng)之間分配由根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)所執(zhí)行的任務(wù)。意圖不是將權(quán)利要求限制為任何特別的電子架構(gòu)。
[0057]圖14示出便于結(jié)合根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)和方法使用的樣品架
1400。樣品架1400包括構(gòu)造成用于插入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)(例如上述細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng))的主體
1401。樣品架1400還包括可以將樣品放置其中的多個(gè)窗1402。示例樣品架1400包括四個(gè)窗1402，但是可以使用更多個(gè)或更少個(gè)。優(yōu)選地，窗1402的位置對(duì)應(yīng)檢視區(qū)域(如檢視區(qū)域206)的位置，根據(jù)實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)可以向傳感器如傳感器207呈現(xiàn)該檢視區(qū)域以便進(jìn)行數(shù)字成像。在一個(gè)示例用法中，可以將適量樣品放置在窗1402的一個(gè)或更多個(gè)中。然后可以將樣品架1400放置在根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式的細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中，并且可以對(duì)不只一個(gè)的窗1402進(jìn)行成像。在多個(gè)窗中使用的樣品可以是相同的材料或任何組合的不同材料。
[0058]在樣品架1400中，窗1402相對(duì)于樣品架1400進(jìn)入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中的主加載方向1403來橫向地布置中。圖15示出另一示例樣品架1500，樣品架1500包括:主體1501和相對(duì)于樣品架1501進(jìn)入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中的主加載方向1503平行地布置的多個(gè)窗1502。
[0059]在所附的權(quán)利要求中，術(shù)語(yǔ)“一個(gè)(a或an)”意圖表示“一個(gè)或更多個(gè)”。當(dāng)加在步驟或元素的敘述之前時(shí)，術(shù)語(yǔ)“包括”和其變型意圖表示其他的步驟或元素的增加是可選的，并且不排除在外。為了清晰和理解，現(xiàn)在已經(jīng)詳細(xì)介紹了本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解可以在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)實(shí)行某種改變和修改。
【權(quán)利要求】
1.一種系統(tǒng)，包括: 感測(cè)系統(tǒng)，所述感測(cè)系統(tǒng)生成樣品架的檢視區(qū)域的數(shù)字圖像，所述樣品架保持細(xì)胞的集合; 運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)，所述運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)將所述樣品架和所述感測(cè)系統(tǒng)的相對(duì)位置變成多個(gè)構(gòu)型，使得在每個(gè)構(gòu)型中所述檢視區(qū)域包圍所述樣品架的不同可視部分，其中，所包圍的可視部分相對(duì)于所述樣品進(jìn)入所述樣品架的主加載方向來大致橫向地布置；以及 控制器，當(dāng)所述樣品架和所述感測(cè)系統(tǒng)處于所述多個(gè)構(gòu)型的每個(gè)構(gòu)型中時(shí)，所述控制器指引所述感測(cè)系統(tǒng)捕獲數(shù)字圖像。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，還包括分析所述數(shù)字圖像和對(duì)在所有所述數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的計(jì)算機(jī)化分析器。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的系統(tǒng)，其中，所述控制器執(zhí)行所述計(jì)算機(jī)化分析器的功能。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，還包括對(duì)所述檢視區(qū)域進(jìn)行照明的光源。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中，在所述多個(gè)構(gòu)型中由所述檢視區(qū)域包圍的樣品架的可視部分不重疊。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中，所述運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)還包括使所述樣品架以平移的方式移動(dòng)的平移機(jī)構(gòu)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中，所述運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)還包括使所述樣品架以旋轉(zhuǎn)的方式移動(dòng)的旋轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，還包括容納所述系統(tǒng)的至少某些部分和對(duì)插有所述樣品架的槽進(jìn)行限定的外殼，并且其中，所述運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)使所述樣品架以搖擺運(yùn)動(dòng)的方式旋轉(zhuǎn)，其中，所述樣品架的一端保留在所述槽的側(cè)部之間。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的系統(tǒng)，其中，所述旋轉(zhuǎn)系統(tǒng)使所述樣品架圍繞槽處的點(diǎn)旋轉(zhuǎn)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中，所述運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)包括馬達(dá)，所述馬達(dá)在所述控制器的控制下移動(dòng)所述樣品架。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中，所述多個(gè)構(gòu)型包括至少三個(gè)構(gòu)型。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，還包括所述樣品架，其中，所述樣品架的可視部分位于所述樣品架的單個(gè)窗中。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，還包括所述樣品架，其中，所述樣品架的可視部分位于所述樣品架的不同的窗中。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的系統(tǒng)，其中，至少兩個(gè)窗保持不同的樣品材料。
15.一種方法，包括: 使用感測(cè)系統(tǒng)捕獲樣品的第一可視部分的第一數(shù)字圖像，所述樣品包含細(xì)胞； 重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品，使得所述感測(cè)系統(tǒng)對(duì)所述樣品的第二可視部分進(jìn)行成像，其中，所述第一可視部分和所述第二可視部分相對(duì)于所述樣品進(jìn)入保持所述樣品的樣品架中的主加載方向來大致橫向地布置；以及， 捕獲所述第二可視部分的第二數(shù)字圖像。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，還包括: 使用計(jì)算機(jī)化分析器分析所述第一數(shù)字圖像和所述第二數(shù)字圖像，并且對(duì)在所述數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)；以及基于在所述第一圖像和所述第二圖像兩者中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，還包括: 重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品，使得所述感測(cè)系統(tǒng)對(duì)所述樣品的第三可視部分進(jìn)行成像； 捕獲所述檢視區(qū)域的第三數(shù)字圖像；以及 分析所述第三數(shù)字圖像并且對(duì)在所述第三數(shù)字圖像中檢測(cè)到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)； 其中，基于在所述第一圖像和所述第二圖像兩者中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果包括，基于在全部 三個(gè)所述數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果。
18.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述第一可視部分和所述第二可視部分不重疊。
19.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品包括，移動(dòng)所述樣品。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中，移動(dòng)所述樣品包括，使所述樣品以平移、旋轉(zhuǎn)的方式來移動(dòng)、或者以平移和旋轉(zhuǎn)的組合的方式來移動(dòng)。
21.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品包括，移動(dòng)所述感測(cè)系統(tǒng)的至少一部分。
22.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品包括，移動(dòng)所述感測(cè)系統(tǒng)的至少一部分和所述樣品兩者。
23.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述第一可視部分和所述第二可視部分位于所述樣品架的單個(gè)窗中。
24.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述第一可視部分和所述第二可視部分位于所述樣品架的不同的窗中。
25.—種對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法，所述方法包括: 使用感測(cè)系統(tǒng)捕獲包含細(xì)胞的樣品的第一可視部分的第一數(shù)字圖像； 使用計(jì)算機(jī)化分析器分析所述第一數(shù)字圖像以獲得存在于所述第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的第一計(jì)數(shù)； 將所述計(jì)數(shù)與閾值計(jì)數(shù)進(jìn)行比較； 當(dāng)所述計(jì)數(shù)低于所述閾值計(jì)數(shù)時(shí)，重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品，使得所述感測(cè)系統(tǒng)對(duì)所述樣品的第二可視部分進(jìn)行成像；捕獲所述第二可視部分的第二數(shù)字圖像；以及分析所述第二數(shù)字圖像并且基于存在于所述第一數(shù)字圖像和所述第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果；以及 當(dāng)所述計(jì)數(shù)高于所述閾值計(jì)數(shù)時(shí)，基于存在于所述第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果而不捕獲第二數(shù)字圖像。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述第一可視部分和所述第二可視部分相對(duì)于所述樣品進(jìn)入樣品架的主加載方向來大致橫向地布置。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述第一可視部分和所述第二可視部分相對(duì)于所述樣品進(jìn)入樣品架的主加載方向來大致平行地布置。
28.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述計(jì)數(shù)是第一計(jì)數(shù)，所述閾值計(jì)數(shù)是第一閾值計(jì)數(shù)，所述方法還包括:當(dāng)所述第一計(jì)數(shù)低于所述第一閾值計(jì)數(shù)時(shí)，分析所述第一數(shù)字圖像和所述第二數(shù)字圖像以計(jì)算存在于所述第一數(shù)字圖像和所述第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的第二計(jì)數(shù)； 將所述第二計(jì)數(shù)與第二閾值計(jì)數(shù)進(jìn)行比較； 當(dāng)所述第二計(jì)數(shù)低于所述第二閾值計(jì)數(shù)時(shí)，重構(gòu)所述感測(cè)系統(tǒng)和所述樣品，使得所述感測(cè)系統(tǒng)對(duì)所述樣品的第三可視部分進(jìn)行成像；捕獲所述第三可視部分的第三數(shù)字圖像；以及分析所述第三數(shù)字圖像并且基于存在于所述第一數(shù)字圖像、所述第二數(shù)字圖像以及所述第三數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果；以及 當(dāng)所述第二計(jì)數(shù)高于所述第二閾值計(jì)數(shù)時(shí)，基于存在于所述第一數(shù)字圖像和所述第二數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果而不捕獲第三數(shù)字圖像。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中，所述第一濃度閾值和所述第二濃度閾值相同。
30.一種對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法，所述方法包括: 使用感測(cè)系統(tǒng)捕獲樣品的不同可視部分的多個(gè)數(shù)字圖像，所述樣品包含細(xì)胞； 使用計(jì)算機(jī)化分析器分析所述多個(gè)數(shù)字圖像中的第一數(shù)字圖像以獲得存在于所述第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的第一計(jì)數(shù)； 將所述計(jì)數(shù)與閾值 計(jì)數(shù)進(jìn)行比較； 當(dāng)所述計(jì)數(shù)低于所述閾值計(jì)數(shù)時(shí)，分析所述多個(gè)數(shù)字圖像中的至少一個(gè)另外的圖像，并且基于存在于所分析的數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果；以及 當(dāng)所述計(jì)數(shù)高于所述閾值計(jì)數(shù)時(shí)，基于存在于所述第一數(shù)字圖像中的細(xì)胞的計(jì)數(shù)來報(bào)告測(cè)試結(jié)果而不分析任何另外的數(shù)字圖像。
31.一種樣品架，包括: 主體,構(gòu)造成插入細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)內(nèi)； 在所述主體中的多個(gè)窗，用于接納包含要計(jì)數(shù)的細(xì)胞的且具有一種或更多種材料的樣品，所述多個(gè)窗相對(duì)于所述樣品架進(jìn)入所述細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)中的主加載方向來橫向或平行地布置。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的樣品架，其中，所述窗以與所述細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的多個(gè)檢視區(qū)域的間隔對(duì)應(yīng)的距離來彼此間隔開。
【文檔編號(hào)】G06K9/00GK103620619SQ201280026916
【公開日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2012年5月31日 優(yōu)先權(quán)日:2011年5月31日
【發(fā)明者】丹尼爾·Y·楚, 葉利·A·赫夫納, 揚(yáng)·茹弗諾 申請(qǐng)人:伯樂實(shí)驗(yàn)室有限公司