一種基于離子型銥配合物磷光猝滅檢測色氨酸的方法【
技術(shù)領(lǐng)域：
】[0001]本發(fā)明基于動態(tài)猝滅機理，加入的色氨酸與磷光金屬銥配合物之間發(fā)生光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移(PET)導(dǎo)致配合物磷光猝滅，屬于光譜分析檢測領(lǐng)域?！?br>背景技術(shù)：
】[0002]氨基酸的特異性檢測一直以來是分析檢測方面的一大難點，因為動植物中富含的十幾種氨基酸都具有相同的氨基和羧基，而不同的結(jié)構(gòu)又大多為化學(xué)惰性，所以對氨基酸的檢測靈敏度普遍偏低。色氨酸是一種非常重要的氨基酸，它被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和食品行業(yè)。它是唯一一個連接在血漿白蛋白的氨基酸。在人腦內(nèi)羥化酶的作用下，游離的色氨酸會合成5-羥色胺，其濃度的增加很容易引起神經(jīng)衰弱[1]。同時研究也發(fā)現(xiàn)，肝功能衰竭會極大的增大腦細(xì)胞中色氨酸含量[2]。因此，臨床檢測色氨酸的濃度具有非常大的意義。[0003]傳統(tǒng)檢測色氨酸的方法如色譜法、電位滴定法、熒光分析法、電化學(xué)方法等大多需要對氨基酸進(jìn)行衍生化處理[3]，操作繁瑣，檢測限普遍偏高，而本發(fā)明采用水溶性銥配合物磷光猝滅檢測色氨酸，具有非常高的檢測靈敏度，檢測限達(dá)到10—9H1l.L—1。本發(fā)明中使用的銥配合物的磷光對色氨酸有很好的響應(yīng)，為測定復(fù)雜體系中的色氨酸提供了參考模型，將來有望廣泛使用。[0004]在眾多檢測方法中，熒光探針被認(rèn)為是目前最為快捷有效的分子檢測工具，它們可以用于活體細(xì)胞以及水溶液中目標(biāo)物質(zhì)的定量檢測[4]。然而，當(dāng)熒光分析技術(shù)應(yīng)用于實際樣品檢測時容易被一些雜散光和體系背景發(fā)射干擾，這種信號的干擾會降低信噪比，導(dǎo)致檢測靈敏度降低[5]。為了減小這些干擾信號的影響，人們發(fā)現(xiàn)具有較長發(fā)光壽命的磷光(一般在微秒級)檢測技術(shù)很好的克服了這一困難，因為磷光信號能容易的實現(xiàn)與發(fā)光壽命很短的普通熒光和雜散光產(chǎn)生的雜質(zhì)信號區(qū)分開[6]。[0005]近年來，銥配合物因其磷光傳感器方面巨大的應(yīng)用價值得到了國內(nèi)外科學(xué)家的廣泛關(guān)注。銥配合物的磷光發(fā)射受配體影響很大，因此配體如果和目標(biāo)分子發(fā)生作用將會改變整個銥配合物的發(fā)光特性，基于這種原理可以檢測一些特定的分子[7]。與一般熒光檢測相比，銥配合物磷光具有非常好的光穩(wěn)定性，較大的斯托克斯位移以及較長的發(fā)光壽命，可以作為一種優(yōu)良的磷光傳感器信號[8]。所以，銥配合物制作的磷光傳感器在生物傳感、生物成像、分子離子探針等方面有巨大的潛在應(yīng)用價值。[0006]使用銥配合物磷光猝滅法檢測氨基酸的報道目前還比較少，其中李富友[9]使用了一種新型銥配合物磷光傳感器檢測高半胱氨酸分子，其檢測機理是磷光銥配合物配體上修飾的醛基和體系中的高半胱氨酸分子形成一個穩(wěn)定的六元環(huán)狀結(jié)構(gòu)，改變了配合物結(jié)構(gòu)從而使磷光發(fā)生改變。YoungminYou[1()]合成了一種含有米基硼配體的銥配合物，它對氟離子的檢測靈敏度和選擇性都非常高。但是大多數(shù)的銥配合物缺點在于水溶性很差，不能在水溶液中檢測目標(biāo)分子。本發(fā)明以一種水溶性離子型銥配合物(pq)2Ir(dCbpy)+PF6—[11]作為磷光探針，用pH=7.4的PBS緩沖溶液控制pH，加入不同濃度的色氨酸會對銥配合物磷光猝滅從而定量的檢測色氨酸分子，具有很高的靈敏度和選擇性。[0007]參考文獻(xiàn)[0008][I]DengKQ,ZhouJH，etal.Directelectrochemicalreduct1nofgrapheneoxideanditsapplicat1ntodeterminat1nofL-tryptophanandL-tyrosine[J].ColloidSurfaceB，2013，101，183-188.[0009][2]ZengLJ,WangHjBoXJ,etal.Electrochemicalsensorforaminoacidsbasedongoldnanoparticles/macroporouscarboncompositesmodifiedglassycarbonelectrode[J].ElectroanalChem，201，117-122.[0010][3]LiL,ChenY，etal.Compositesystembasedonb1molecules-funct1nalizedmultiwalledcarbonnanotubeand1nicliquid!Electrochemistryandelectrocatalysisoftryptophane[J].ElectrochimActa,201I,58,105-111.[0011][4]LiaoXQ,LiRY，etal.Fastsynthesisofcoppernanoclustersthroughtheuseofhydrogenperoxideadditiveandtheirapplicat1nforthefluorescencedetect1nofHg2+inwatersamples[J].NewJournalOfChemistry,2015，39,5240-5248.[0012][5]DeAK,GangulyT.Steadystateandtimeresolvedstudiesonphotophysicalpropertiesofcarbazoleand9-phenylcarbazolemoleculesandtheirquenchingreact1nswithsuitableelectronacceptersintheexcitedelectronicstatesbothattheambienttemperatureandat77K[J].JLumin，2001，92,255-270.[0013][6]KeefeMHjBenksteinKD，etal.Luminescentsensormoleculesbasedoncoordinatedmetals:areviewofrecentdevelopments[J].Coord.Chem.Rev,2000,205:201-228.[0014][7]ChouPT,ChiY，etal.PhosphorescentDyesforOrganicLight-EmittingD1des[J].Chem.Eur.J,2007,13:380-395.[0015][8]ChenHLjLiFY，etal.SelectivePhosphorescenceChemosensorforHomocysteineBasedonanIridium(III)Complex[J].1norg.Chemj2007,46(26),11075-11081.[0016][9]劉淑娟.離子型小分子與高分子銥配合物的設(shè)計、合成、表征與光電性能研究[D]上海:復(fù)旦大學(xué)，2當(dāng)前第1頁1 2