柑橘類水果中708種農殘的偵 測方法
[0098]按照實施例1中的方法對同批橙樣品中的農殘進行偵測，不同的是，前處理步驟如 下：
[00"] (1)準確稱取10 .OOg樣品于離心管中，加入50mL水，振蕩直至樣品被水充分浸潤。 冷凍lOmin后移取50mL乙腈至離心管中，然后將離心管置于禍漩混合振蕩儀上，以2000rpm 速率振蕩lmin。將離心管置于-l〇°C條件下保持lOmin，然后向離心管中加入20g無水硫酸鎂 和5g氯化鈉，5g檸檬酸鈉和2.5g檸檬酸二氫鈉，立即于漩渦混合振蕩儀上，以2000rpm速率 振蕩2min，然后以4000rpm速率離心10min，得到上清液。
[0100] (2)移取上清液1 .OmL于1.5mL離心管中，加入150mg無水硫酸鎂及25mg的PSA吸附 劑，于漩禍混合振蕩儀上以2000rpm速率振蕩2min，以6000rpm速率離心2min。吸取上清液經 0.22μπι有機相濾膜過濾，移取200yL，加入100yL乙腈，用超純水稀釋至1. OmL，得到待測樣品 溶液。
[0101] 檢測結果見表2。
[0102] 表2
[0103]
[0104] 由以上數據可以看出，采用本發(fā)明的方法，尤其是優(yōu)選的方法能夠更有效的檢測 出農產品中農殘的種類，并且還具有更低的檢測限。
[0105] 實施例3
[0106]本實施例用于說明本發(fā)明提供的GC-Q-T0F/MS篩查柑橘類水果中708種農殘的偵 測方法
[0107]按照實施例1中的方法對柑橘類水果中的農殘進行偵測，不同的是，樣品為天津地 區(qū)橘樣品。
[0108] 采集天津地區(qū)市售橘樣品18個，檢出11種農藥殘留，共計39頻次，涉及樣品9個，具 體結果見表3。
[0109] 表3
[0110]
[0111]以檢出頻次較高的噠螨靈為例:如圖3所示，橘檢測出4個碎片離子信息，用數據庫 檢索，與噠螨靈比對，4個碎片離子匹配分數均在96分以上，保留時間偏差在Omin以內，豐度 最尚的碎片尚子質量偏差為5.42ppm(如圖4所不），可以確認，橘中有?達蝴靈檢出。
[0112] 實施例4
[0113] 本實施例用于說明本發(fā)明提供的GC-Q-TOF/MS篩查柑橘類水果中708種農殘的偵 測方法
[0114] 按照實施例1中的方法對柑橘類水果中的農殘進行偵測，不同的是，樣品為河北地 區(qū)朽1檬樣品。
[0115] 采集河北地區(qū)市售檸檬樣品8個，檢出5種農藥殘留，共計8頻次，涉及樣品7個，具 體結果見表4。
[0116] 表4
[0117]
[0118] 以檢出頻次較高的水胺硫磷為例:如圖5所示，檸檬中檢測出5個碎片離子信息，用 數據庫檢索，與水胺硫磷比對，5個碎片離子分子量偏差分數均在76分以上，保留時間偏差 為0.003min，豐度最高的碎片離子質量偏差為-2.9ppm(如圖6所示），可以確認，檸檬中有水 胺硫磷檢出。
[0119] 以上詳細描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實施方式中 的具體細節(jié)，在本發(fā)明的技術構思范圍內，可以對本發(fā)明的技術方案進行多種簡單變型，這 些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0120] 另外需要說明的是，在上述【具體實施方式】中所描述的各個具體技術特征，在不矛 盾的情況下，可以通過任何合適的方式進行組合。為了避免不必要的重復，本發(fā)明對各種可 能的組合方式不再另行說明。
[0121] 此外，本發(fā)明的各種不同的實施方式之間也可以進行任意組合，只要其不違背本 發(fā)明的思想，其同樣應當視為本發(fā)明所公開的內容。
【主權項】
1. 一種GC-Q-TOF/MS檢測柑橘類水果中708種農藥殘留的偵測方法，其特征在于：建立 708種農藥T0F/MS數據庫，同時對柑橘類水果中708種農藥進行定性偵測與確證;該方法包 括以下步驟： (1) 將農藥標準品分別配制成l-5mg//L的標準溶液，設定條件下經GC-QT0F/MS-級模式 全譜數據測定每種標準溶液的全譜數據，分別得到每種農藥的化學分子式、保留時間、碎片 離子精確質量數、離子豐度比； (2) 將步驟（1)中獲得的一級模式全譜數據，經核實后的碎片離子全掃描質譜圖導入 PCDL軟件中，并與對應的農藥信息相關聯，建成T0F/MS精確質量數據庫，用于數據檢索分 析； (3) 與步驟(1)相同的設定條件下柑橘類水果的測定待測樣品中農藥的全譜數據，得到 其含有的農藥的化學分子式、保留時間、碎片離子精確質量數、離子豐度比； (4) 對樣品測定結果經精確質量數據庫檢索，對符合鑒定依據的檢出農藥進行準確鑒 定，從而獲得柑橘類水果中的農殘種類。2. 根據權利要求1所述的方法，其中，所述農藥為表1中所示的708種農藥。3. 根據權利要求1所述的方法，其中，所述柑橘類水果選自由橙、橘、檸檬和柚所組成的 組中。4. 根據權利要求1所述的方法，其中，測定每種標準溶液中農藥的全譜數據的條件包 括： (1) 色譜條件:色譜柱:VF-1701MS;色譜柱升溫程序:30-50°C保持0.5-5min，然后以20-50°C/min升溫至 110-150°C，再以 3-10°C/min升溫至 200-280°C，隨后以 5-15°C/min升溫至 250-320°C，保持 3-10min，再以 5-20°C/min降溫至 200-290°C，保持l_5min;載氣：氦氣；流 速:0.5-2mL/min;進樣口溫度:230-320°C:無分流進樣，溶劑延遲2-10min; (2) 質譜條件：離子源:EI;離子源溫度：230-330°C，電子轟擊源能量:50-lOOeV;氣相-質譜接口溫度：200-320°C;掃描方式：以每秒2-10張譜圖的方式進行T0F模式全掃描，質量 數范圍 50_600amu。5. 根據權利要求1所述方法，其中，T0F/MS精確質量數據庫能夠將從待測樣品中測定得 到的碎片離子的保留時間、精確質量數、離子豐度比的實測值，與T0F/MS精確質量數據庫中 碎片離子的對應要素理論值檢索比對，給出每個碎片離子的得分，進而給出平均分即目標 化合物的匹配度得分值;其中，碎片離子的保留時間偏差設定在±〇.5min，精確質量數偏差 設定為±100ppm。6. 根據權利要求5所述的方法，其中：通過如下方法對符合鑒定依據的檢出農藥進行準 確鑒定： 通過對特征離子檢出情況及符合度，給出的得分值，對農藥進行定性識別，其方法程序 為:對于樣品中目標化合物的偵測，是將飛行時間質譜測得的化合物的保留時間、豐度最高 的7個碎片離子精確質量數、碎片離子豐度比的結果，與T0F/MS數據庫檢索比對，結果為檢 出至少三個碎片離子，且綜合得分大于60的農藥被確定為檢出農藥。7. 根據權利要求1所述的方法，通過對柑橘類水果進行前處理以獲得柑橘類水果的測 定待測樣品，所述前處理方法包括以下程序： 樣品制備:柑橘類水果樣品經0.5-5體積％醋酸乙腈勻漿提取，經脫水和離心、濃縮后， 再經Carbon/NH2柱凈化，乙腈+甲苯洗脫殘留農藥，經再濃縮、過濾后制成待測樣液a。8.根據權利要求7所述的方法，其中:所述柑橘類水果樣品量為5-20g; 優(yōu)選的，所述〇. 5-5體積％的醋酸乙腈的用量為30-50mL; 優(yōu)選的，所述勻漿提取條件為:轉速12000_15000r/min，時間為0.5-5min; 優(yōu)選的，所述經脫水是指在〇. 5-5體積％醋酸乙腈提取液中加入0.5-5g氯化鈉，2-8g無 水硫酸鎂，振蕩l-l〇min; 優(yōu)選的，所述離心是指在3000-5000r/min下離心l-10min; 優(yōu)選的，所述濃縮是指取離心上清液10_30mL，在20-60°C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮至約 0·5_2mL〇 9 ·根據權利要求8所述的方法，其中：所述Carbon/Mfe柱凈化步驟如下：在Carbon/Mfe柱 中加入約l-3cm高無水硫酸鈉，先用2-6mL-定比例的乙腈和甲苯混合溶液淋洗SPE柱，并棄 去流出液，當液面到達硫酸鈉的頂部時，迅速將樣品濃縮液轉移至凈化柱上，下接容器接 收;再每次用2-6mL乙腈和甲苯混合溶液洗滌樣液瓶三次，并將洗滌液移入SPE柱中。再用優(yōu) 選20-30ml的一定體積乙腈和甲苯混合溶液洗脫農藥，合并洗脫液于容器中； 優(yōu)選的，所述一定比例的乙腈和甲苯混合溶液，乙腈：甲苯體積比為2.5-3.5:1。10.根據權利要求8所述的方法，其中：所述經再濃縮、過濾后制成待測樣液a是指權利 要求9所得到的洗脫液，在30-50°C水浴中旋轉濃縮至約0.5-2mL，并將濃縮液置于氮氣下吹 干，加入l-5mL的一定比例的乙腈和0-5體積％甲酸水混合溶液混勻，經0.18-0.22μπι濾膜過 濾后定容，得到待測樣品溶液a。 優(yōu)選的，所述一定比例的乙腈和0-5體積％甲酸水混合溶液，乙腈:0.1-5體積％甲酸水 2:7-9〇
【專利摘要】本發(fā)明涉及農殘檢測領域，提供了篩查柑橘類水果中708種農殘的偵測方法，在GC-Q-TOF/MS一級模式下采集農藥標準物指定條件下的碎片離子全掃描質譜圖，得到農藥的化學分子式、保留時間、碎片離子精確質量數、離子豐度比，并導入PCDL軟件，與對應的農藥信息關聯，形成數據庫，在相同的設定條件下測定待測樣品的全譜數據，得到全譜數據；對樣品測定結果經精確質量數據庫檢索，對符合鑒定依據的檢出農藥準確鑒定，獲得柑橘類水果中的農殘種類。本發(fā)明運用GC-Q-TOF/MS高分辨質譜建立的檢測方法對柑橘類水果中農藥殘留進行檢測，優(yōu)選結合特定的前處理，具有快速、高通量、高精度和高可靠性檢測的特點。無需標準物作對照，同時對柑橘類水果中708種農藥進行定性偵測與確證。
【IPC分類】G01N30/88
【公開號】CN105467057
【申請?zhí)枴緾N201511018575
【發(fā)明人】龐國芳, 范春林, 胡雪艷, 常巧英
【申請人】中國檢驗檢疫科學研究院
【公開日】2016年4月6日
【申請日】2015年12月28日