一種轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的測(cè)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含 量的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液是等量的葡萄糖和果糖（轉(zhuǎn)化糖）、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、 磷酸二氫鈉與乳酸鈉的滅菌水溶液，可為患者提供水、電解質(zhì)及能量，并產(chǎn)生利尿作用和代 謝性堿化作用，其所含乳酸根在肝臟代謝生成糖原，在H+參與下，最終生成C02和水。臨 床上適用于需要非口服途徑補(bǔ)充水分或能源及電解質(zhì)的患者的補(bǔ)液治療，在國內(nèi)外使用廣 泛，因其效果良好、安全性高而收載入美國藥典。
[0003] 經(jīng)檢索美國藥典和國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中收載轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量檢測(cè) 方法均為化學(xué)法，操作繁瑣，而且檢測(cè)結(jié)果反映的是葡萄糖和果糖總量，不能檢測(cè)出果糖和 葡萄糖各自的含量。本發(fā)明采用高效液相色譜法對(duì)轉(zhuǎn)化糖注射液中果糖和葡萄糖進(jìn)行檢 測(cè)，該法專屬性強(qiáng)，可以準(zhǔn)確地反映出果糖和葡萄糖的含量，進(jìn)而可知轉(zhuǎn)化糖的含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)摸索建立了轉(zhuǎn)化糖注射液中轉(zhuǎn)化糖的含 量測(cè)定方法，經(jīng)過嚴(yán)格的方法學(xué)驗(yàn)證，保證方法的科學(xué)性嚴(yán)謹(jǐn)性，滿足了研發(fā)和生產(chǎn)的需 求。本發(fā)明的目的旨在提供一種測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 采用反向高效液相色譜法，測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量，其流動(dòng)相為 乙腈-水-濃氨溶液，比例為50~90 :50~10 :0~0. 3。
[0007] 所述流動(dòng)相優(yōu)選為乙腈-水-25%濃氨溶液比例為50~90 :50~10 :0. 1~0. 3。
[0008] 上述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，更優(yōu)選流動(dòng)相為乙 腈-水-25%濃氨溶液比例為75~90:25~10:0. 1~0.3。
[0009] 上述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，色譜柱為丙基酰胺親水色譜 柱￥611118；[1111110，4.6*250111111，5111]1或此七6『8父131'1(^6八1111(16,4.6111111*15〇111111，3.5111]1或效 能相當(dāng)?shù)纳V柱。
[0010]流速為〇. 5~1. 5mL/min;柱溫為35~45°C，檢測(cè)器為示差檢測(cè)器，示差檢測(cè)器溫 度設(shè)定為40°C或蒸發(fā)光檢測(cè)器。
[0011] 轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液在臨床上對(duì)于需要能量和電解質(zhì)補(bǔ)給的危重病人有著重要 的作用，但是樣品中檢測(cè)轉(zhuǎn)化糖的方法仍沿襲著以前的化學(xué)法，操作繁瑣，準(zhǔn)確度差，針對(duì) 該品種中轉(zhuǎn)化糖測(cè)定的高效液相色譜法還未見報(bào)道。本發(fā)明涉及采用高效液相色譜方法 測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖的含量。方法省時(shí)省力，精密度高，含量測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可 靠，重復(fù)性和回收率良好，可用于轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的常規(guī)分析和質(zhì)量控 制。另外，經(jīng)過嚴(yán)格的方法驗(yàn)證，可以滿足研發(fā)和生產(chǎn)的需求，為轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液的質(zhì) 量控制提供了技術(shù)保障。
【附圖說明】
[0012] 圖1為實(shí)施例1中轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量測(cè)定的系統(tǒng)適用性圖譜；
[0013]圖2為實(shí)施例2中轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量測(cè)定的系統(tǒng)適用性圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 以下通過實(shí)施例形式，對(duì)本發(fā)明涉及的轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖的含量測(cè)定 方法作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主體的范圍僅限于以下的實(shí)例， 凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0015]實(shí)施例1
[0016] 轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量高效液相色譜法測(cè)定
[0017] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用WatersXbridgeAmide, 4. 6mm*150mm，3. 5um為色 譜柱，以乙腈-水-濃氨溶液（75 :25 :0. 1)為流動(dòng)相，流速1.OmL/min，示差折光檢測(cè)器，檢 測(cè)器溫度和柱溫均為40°C。取果糖與無水葡萄糖各適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每 lml中含果糖5mg和無水葡萄糖5mg的溶液，量取20ill，注入液相色譜儀，果糖峰與無水葡 萄糖峰的分離度應(yīng)符合要求。測(cè)定法精密量取本品適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每 lml含果糖5mg和無水葡萄糖5mg的溶液，精密量取20ill，注入液相色譜儀，記錄色譜圖； 另取果糖和無水葡萄糖對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。
[0018] 對(duì)本實(shí)施例含量測(cè)定方法進(jìn)行了以下項(xiàng)目的驗(yàn)證：
[0019] 1、系統(tǒng)適應(yīng)性
[0020] 采用轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液樣品來分析此色譜條件是否符合要求。由圖1可見此條 件輔料及果糖和葡萄糖及果糖之間分離度符合要求。
[0021] 2、標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0022] 配制各濃度的供試液，分別精密量取20iU，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度 (mg/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積（A)為縱坐標(biāo)，繪制回歸曲線，計(jì)算回歸系數(shù)。由結(jié)果可見，本品 的含量測(cè)定于果糖和葡萄糖濃度在l_9mg/ml的濃度范圍內(nèi)有良好線性。
[0023] 表1果糖含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0024]
[0025] 表2葡萄糖含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0026]
[0027] 3、重復(fù)性：取樣重復(fù)配制六份樣品，分別照高效液相色譜法測(cè)定，計(jì)算含量。結(jié)果 表明本品采用高效液相色譜法測(cè)定含量重復(fù)性良好。
[0028] 表3葡萄糖和果糖重復(fù)性測(cè)定結(jié)果
[0029]
[0030] 4、回收率制備含有果糖10mg/ml和葡萄糖10mg/ml的混合母液，分別移取該母液 4ml、5ml、6ml置10ml量瓶中，每個(gè)濃度溶液平行移取三份，再在每個(gè)容量瓶中加入輔料溶 液，加入75%乙腈溶液定容至刻度，搖勻。照高效液相色譜法測(cè)定，計(jì)算回收率。由結(jié)果表 明本方法測(cè)定果糖和葡萄糖回收率良好，符合測(cè)定要求。
[0031] 表4葡萄糖和果糖含量測(cè)定回收率測(cè)定結(jié)果
[0032]
[0033] 5、溶液穩(wěn)定性，取樣品分別于0、2、4、6、8小時(shí)測(cè)定，考察本品含量測(cè)定的溶液穩(wěn) 定性，有結(jié)果可見，本品含量測(cè)定溶液在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
[0034] 表5葡萄糖和果糖含量測(cè)定溶液穩(wěn)定性測(cè)定結(jié)果
[0035]
[0036]
[0037] 實(shí)施例2
[0038] 轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量高效液相色譜法測(cè)定
[0039] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用丙基酰胺親水色譜柱VenusilHILIC，4. 6*250mm， 5iim，以乙腈-水（80 :20)為流動(dòng)相，流速為1. 5mL/min，蒸發(fā)光檢測(cè)器。取果糖與無水葡 萄糖各適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每lml中含果糖lmg和無水葡萄糖lmg的溶液， 量取10iil，注入液相色譜儀，果糖峰與無水葡萄糖峰的分離度應(yīng)符合要求。
[0040] 測(cè)定法精密量取本品適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每1ml含果糖lmg和無水 葡萄糖lmg的溶液，精密量取10iil，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取果糖和無水葡萄糖 對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。
[0041] 對(duì)本實(shí)施例含量測(cè)定方法進(jìn)行了以下項(xiàng)目的驗(yàn)證：
[0042] 1、系統(tǒng)適應(yīng)性
[0043] 采用轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液樣品來分析此色譜條件是否符合要求。由圖2可見此條 件輔料及果糖和葡萄糖及果糖之間分離度符合要求。
[0044] 2、標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0045] 配制各濃度的供試液，分別精密量取10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度 (mg/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積（A)為縱坐標(biāo)，繪制回歸曲線，計(jì)算回歸系數(shù)。由結(jié)果可見，本品 的含量測(cè)定于果糖和葡萄糖濃度在l_9mg/ml的濃度范圍內(nèi)有良好線性。
[0046] 表6果糖含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0047]
[0050] 3、重復(fù)性：取樣重復(fù)配制六份樣品，分別照高效液相色譜法測(cè)定，計(jì)算含量。結(jié)果 表明本品采用高效液相色譜法測(cè)定含量重復(fù)性良好。
[0051] 表8甸甸糖和果糖重復(fù)性測(cè)走結(jié)果 [0052：
[0053] 4、回收率制備含有果糖2mg/ml和葡萄糖2mg/ml的混合母液，分別移取該母液 4. 0ml、5. 0ml、6. 0ml置10ml量瓶中，每個(gè)濃度溶液平行移取三份，再在每個(gè)容量瓶中加入 輔料溶液，加入75%乙腈溶液定容至刻度，搖勻。照高效液相色譜法測(cè)定，計(jì)算回收率。由 結(jié)果表明本方法測(cè)定果糖和葡萄糖回收率良好，符合測(cè)定要求。
[0054] 表9葡萄糖和果糖含量測(cè)定回收率測(cè)定結(jié)果
[0055]
[0056]
[0057] 5、溶液穩(wěn)定性，取樣品分別于0、2、4、6、8小時(shí)測(cè)定，考察本品含量測(cè)定的溶液穩(wěn) 定性，有結(jié)果可見，本品含量測(cè)定溶液在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
[0058] 表10葡萄糖和果糖含量測(cè)定溶液穩(wěn)定性測(cè)定結(jié)果
[0059]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特征在于：采用反向高效液 相色譜法，其中色譜柱以丙基酰胺鍵合硅膠色譜柱或酰胺基三鍵合亞乙基橋雜化顆粒為填 充劑；流動(dòng)相為乙腈-水-濃氨溶液，比例為50~90 :50~10 :0~0. 3。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特征在于： 流動(dòng)相為乙腈-水-濃氨溶液，比例為50~90 :50~10 :0. 1~0. 3。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特征在于： 流動(dòng)相為乙腈-水-濃氨溶液比例為75~90:10~25:0. 1~0. 3。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其 特征在于：色譜柱為：丙基酰胺親水色譜柱Venusil HILIC，4. 6*250mm，5 ii m或Waters Xbridge Amide, 4. 6mm*150mm, 3. 5 u m 或效能相當(dāng)?shù)纳V柱。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特 征在于：流速為0. 5-1. 5mL/min。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特 征在于：柱溫為35-45 °C。7. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特 征在于：檢測(cè)器為示差檢測(cè)器，示差檢測(cè)器溫度設(shè)定為40°C。8. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述測(cè)定轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的方法，其特 征在于：檢測(cè)器為蒸發(fā)光檢測(cè)器。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測(cè)轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液中轉(zhuǎn)化糖含量的高效液相色譜檢測(cè)方法。其中色譜柱以丙基酰胺鍵合硅膠色譜柱或酰胺基三鍵合亞乙基橋雜化顆粒為填充劑；流動(dòng)相為乙腈-水，比例為50～90∶50～10。該方法與傳統(tǒng)的化學(xué)法相比較，操作簡便，快速、可準(zhǔn)確得出果糖和葡萄糖的含量，經(jīng)方法學(xué)考察，該方法專屬性良好、線性、回收率、重復(fù)性、溶液穩(wěn)定性良好，可用于本品在研發(fā)和生產(chǎn)中對(duì)轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量控制。
【IPC分類】G01N30/89
【公開號(hào)】CN105021760
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410179391
【發(fā)明人】寧洪鑫, 楊穎 , 王偉, 孟令闊
【申請(qǐng)人】天津藥物研究院
【公開日】2015年11月4日
【申請(qǐng)日】2014年4月30日