紅松種仁多糖的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種紅松種仁多糖的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]在我國，食用紅松種仁的歷史己有3000多年，自唐代以來紅松種仁就成為人們喜愛的小食品，宋代更是把紅松種仁視為延年益壽的“長生果”，它既被視為美味食物，又作食療佳品，倍受醫(yī)家、營養(yǎng)家的推崇?！侗静菥V目》一記載:“松子味甘，性溫，無毒。主治:骨頭節(jié)風(fēng)濕，頭眩，祛風(fēng)濕，潤五臟，充饑，逐風(fēng)痹寒氣，補(bǔ)體虛，滋潤皮膚，久服輕身不老，另有潤肺功能，治燥結(jié)咳嗽”。
[0003]隨著追求天然食品浪潮的興起，紅松種仁相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)逐漸成為食品和保健品開發(fā)中的一個新亮點，紅松種仁中的碳水化合物總含量為2.2%。多糖是一類由醛糖或酮糖通過糖昔鍵連接而成的天然高分子多聚物，是構(gòu)成生命的分子基礎(chǔ)之一?！岸嗵巧飳W(xué)”是生命科學(xué)的新前沿，多糖的生物信息量比蛋白質(zhì)和核算還要高出一個數(shù)量級以上。
[0004]研宄發(fā)現(xiàn)不同種植物所含多糖類化合物是一類免疫調(diào)節(jié)劑，它具有抑制腫瘤生長，激活免疫細(xì)胞，改善機(jī)體免疫功能等作用。對正常細(xì)胞無毒副作用。到目前為止，從植物中分離出來的多糖類化合物中以水溶性多糖最為重要。通過對免疫物質(zhì)、生物膜以及多種生物活性物質(zhì)在生物體內(nèi)活動的研宄表明，糖類在生物體內(nèi)的功能不僅僅是提供能量和參與結(jié)構(gòu)組織，同時還具有多種多樣的生物學(xué)功能，在生物生命活動中扮演重要的角色，參與細(xì)胞的各種活動，尤其是多糖的功能與應(yīng)用近年來更是人們關(guān)注的一個熱點，國內(nèi)外的大量研宄證明，多糖具有多方面的生物活性與功能。
[0005]目前，對紅松種仁多糖進(jìn)行提取并優(yōu)化提取工藝以及提取產(chǎn)物的含量測定的研宄還很少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種紅松種仁多糖的檢測方法，該檢測方法簡單，所需樣品量少，為進(jìn)一步研宄紅松種仁多糖的藥效作用提供了一種實用有效的提取分析方法。
[0007]紅松種仁多糖的檢測方法，包括以下步驟:
步驟I，取干燥的紅松種仁，加入蒸餾水，回流提取；
步驟2，將步驟I所得提取液冷凍離心，所得離心上清納濾濃縮；
步驟3，在步驟2所得濃縮液加入正戊醇和乙酸乙酯的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀； 步驟4，在步驟3所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，棄上清；
步驟5，在步驟4所得沉淀中加入正丁醇和三氯甲烷的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀；步驟6，在步驟5所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，所得沉淀經(jīng)無水乙醇洗滌，即得紅松種仁多糖；
步驟7，將步驟6所得紅松種仁多糖用紫外分光光度計，490nm處測定吸光度值，以葡萄糖做對照，測定含量。
[0008]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟I中紅松種仁的用量為20?60g，蒸餾水的用量為 10 ?50mLo
[0009]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟I中回流提取溫度為70?90°C，時間為I?3h。
[0010]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟2中納濾膜孔徑為100?200nm。
[0011]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟2中冷凍離心的條件為_10°C、3000?5000rpm，時間為10?15min。
[0012]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟3中濃縮液的用量為5?10mL，正戊醇和乙酸乙酯的混合液的用量為25?45 mL，混合液中正戊醇和乙酸乙酯的體積比為I?5:3?9。
[0013]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟4中上清和95%乙醇水溶液的體積比為2?9:7 ?14。
[0014]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟5中沉淀用量為5?20g，正丁醇和三氯甲烷的混合液的用量為30?50mL，混合液中正丁醇和三氯甲烷的體積比為I?6:4?12。
[0015]作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟6中上清和95%乙醇水溶液的體積比為3?12:5 ?25。
[0016]本發(fā)明的檢測方法簡單，所需樣品量少，為進(jìn)一步研宄紅松種仁多糖的藥效作用提供了一種實用有效的提取分析方法。
【具體實施方式】
[0017]實施例1
紅松種仁多糖的檢測方法，包括以下步驟:
步驟I，取干燥的紅松種仁，加入蒸餾水，回流提取；
步驟2，將步驟I所得提取液冷凍離心，所得離心上清納濾濃縮；
步驟3，在步驟2所得濃縮液加入正戊醇和乙酸乙酯的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀； 步驟4，在步驟3所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，棄上清；
步驟5，在步驟4所得沉淀中加入正丁醇和三氯甲烷的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀；步驟6，在步驟5所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，所得沉淀經(jīng)無水乙醇洗滌，即得紅松種仁多糖；
步驟7，將步驟6所得紅松種仁多糖用紫外分光光度計，490nm處測定吸光度值，以葡萄糖做對照，測定含量。
[0018]步驟I中紅松種仁的用量為20g，蒸餾水的用量為10mL。
[0019]步驟I中回流提取溫度為70 °C，時間為Ih。
[0020]步驟2中納濾膜孔徑為10nm0
[0021]步驟2中冷凍離心的條件為_10°C、3000rpm，時間為lOmin。
[0022]步驟3中濃縮液的用量為5mL，正戊醇和乙酸乙酯的混合液的用量為25mL，混合液中正戊醇和乙酸乙酯的體積比為1:3。
[0023]步驟4中上清和95%乙醇水溶液的體積比為2:7。
[0024]步驟5中沉淀用量為5g，正丁醇和三氯甲烷的混合液的用量為30mL，混合液中正丁醇和三氯甲烷的體積比為1:4。
[0025]步驟6中上清和95%乙醇水溶液的體積比為3:5。
[0026]經(jīng)上述檢測方法檢測，紅松種仁多糖含量為58.9%。
[0027]實施例2
紅松種仁多糖的檢測方法，包括以下步驟:
步驟I，取干燥的紅松種仁，加入蒸餾水，回流提??；
步驟2，將步驟I所得提取液冷凍離心，所得離心上清納濾濃縮；
步驟3，在步驟2所得濃縮液加入正戊醇和乙酸乙酯的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀； 步驟4，在步驟3所得上清中加入95%乙醇水溶液