本發(fā)明涉及的是一種羊抗病育種分子，更具體的說(shuō)，涉及綿羊羔羊腹瀉的代謝標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、隨著集約化、規(guī)?；B(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，大規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)不斷涌現(xiàn)，而精細(xì)的飼養(yǎng)管理和定期接種疫苗會(huì)誘發(fā)細(xì)菌性和病毒性腹瀉。飲食變化、斷奶應(yīng)激和代謝紊亂也是腹瀉的主要原因。許多研究表明，腹瀉對(duì)宿主有多種影響，如改變腸道微生物群的穩(wěn)定狀態(tài)、腸道粘膜病理變化和各種酶活性降低。

2、羔羊腹瀉病是當(dāng)前嚴(yán)重影響羔羊生產(chǎn)的一種消化道常見性、多發(fā)性、致死率較高的疾病之一。腹瀉會(huì)導(dǎo)致新羔羊個(gè)體體重下降、生長(zhǎng)遲緩甚至死亡，給養(yǎng)殖企業(yè)造成巨大的損失。腸道是生物體宿主免疫和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要器官。由于羔羊腸道微生態(tài)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)還不穩(wěn)定和成熟，對(duì)病原微生物比較敏感，因此極易受到病原菌的感染而發(fā)生腹瀉。腹瀉會(huì)對(duì)羔羊腸道造成一定的損傷，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，進(jìn)而影響生長(zhǎng)發(fā)育，給養(yǎng)羊業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

3、腹瀉、腸道微生物群和宿主之間的關(guān)系在動(dòng)物生長(zhǎng)、免疫、發(fā)育以及營(yíng)養(yǎng)代謝中起著至關(guān)重要的作用。有研究表明，腸聚集性大腸桿菌誘導(dǎo)的雌性犢牛腹瀉可以通過(guò)腸道微生物組的改變來(lái)預(yù)測(cè)，并在生命早期顯著改變糞便中未吸收的碳水化合物含量。腸道微生物還可以產(chǎn)生代謝物，如與免疫蛋白產(chǎn)生相關(guān)的短鏈脂肪酸。瘤胃球菌科、caldicobacteraceae、coriobacteriaceae和eggthellaceae等涉及纖維素多糖的降解和類黃酮的代謝，并發(fā)揮基本功能。有研究表明，腹瀉鹿的代謝物譜狀發(fā)生了改變，顯示出大規(guī)模的代謝物失調(diào)，在代謝產(chǎn)物中，?；鈮A、膽汁酸和氧化脂質(zhì)顯著升高。盡管腹瀉對(duì)生長(zhǎng)、免疫和代謝的潛在影響已在家畜中得到證實(shí)，但有限的研究主要集中在腹瀉對(duì)宿主的影響以及腹瀉動(dòng)物腸道菌群的變化，腹瀉動(dòng)物代謝的變化還有待于進(jìn)一步研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是為了提供與綿羊羔羊腹瀉相關(guān)的代謝標(biāo)記物及其應(yīng)用。

2、本發(fā)明鑒定了140種代謝物結(jié)構(gòu)并使用pls-da分析對(duì)代謝物和樣品之間的關(guān)系建模。

3、本發(fā)明通過(guò)與代謝物數(shù)據(jù)庫(kù)比較，篩選出具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的代謝物（vip?＞?1和 p值?＜?0.05）。

4、本發(fā)明提供了一種腹瀉綿羊羔羊的代謝標(biāo)志物，包括guanosine、hecogenin、quinethazone、hypotaurine、bovinocidin、clindamycin、sarsasapogenin、irbesartan、peiminine、taurine、lithocholic?acid、glyceraldehyde、thymidine、procymidone、protoveratrine?a、ketoleucine、lauric?acid、ltc4、palmitic?acid等中的至少一種。

5、本發(fā)明實(shí)施例的代謝物標(biāo)記物至少具有如下有益效果：

6、本發(fā)明通過(guò)收集腹瀉羔羊及健康羔羊的血清樣本，發(fā)現(xiàn)特定的19種代謝物在腹瀉羔羊與健康羔羊之間存在明顯的差異，這些具有明顯含量差異的代謝物可以作為腹瀉羔羊的生物標(biāo)志物，或?qū)⒂靡栽\斷治療依據(jù)。

7、本發(fā)明對(duì)綿羊腹瀉羔羊及健康羔羊之間的差異代謝物進(jìn)行比較分析其變化情況，并進(jìn)行kegg富集分析，發(fā)現(xiàn)腹瀉羔羊與健康羔羊之間差異代謝物富集的主要代謝途徑。

8、本發(fā)明提供了代謝物標(biāo)志物的代謝富集途徑，包括?；撬?、亞硫磺酸代謝、脂肪酸生物合成、膽汁分泌等代謝途徑中的至少一種。

9、本發(fā)明提供了綿羊羔羊腹瀉代謝物標(biāo)志物的應(yīng)用，利用腹瀉風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估系統(tǒng)來(lái)判斷測(cè)試綿羊羔羊腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)或檢測(cè)腹瀉藥物是否符合篩選條件。

10、本發(fā)明提供了一種評(píng)估受試綿羊羔羊腹瀉風(fēng)險(xiǎn)的系統(tǒng)，包括：檢測(cè)裝置，用于確定受試綿羊羔羊樣本中權(quán)利要求1所述的腹瀉代謝標(biāo)志物的含量；比對(duì)裝置，用于將所述含量與預(yù)設(shè)閾值進(jìn)行比較，根據(jù)比較結(jié)果判斷腹瀉風(fēng)險(xiǎn)或檢測(cè)腹瀉藥物是否符合篩選條件。

11、根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例的方法，滿足以下至少一種條件，可以判斷受試綿羊羔羊的腹瀉風(fēng)險(xiǎn)或檢測(cè)腹瀉藥物是否符合篩選條件。

12、（1）guanosine的含量比閾值低。

13、（2）hecogenin的含量比閾值低。

14、（3）quinethazone的含量比閾值低。

15、（4）hypotaurine的含量比閾值低。

16、（5）bovinocidin的含量比閾值低。

17、（6）clindamycin的含量比閾值低。

18、（7）sarsasapogenin的含量比閾值低。

19、（8）irbesartan的含量比閾值低。

20、（9）peiminine的含量比閾值高。

21、（10）taurine的含量比閾值高。

22、（11）lithocholic?acid的含量比閾值低。

23、（12）glyceraldehyde的含量比閾值高。

24、（13）thymidine的含量比閾值低。

25、（14）procymidone的含量比閾值高。

26、（15）protoveratrine?a的含量比閾值低。

27、（16）ketoleucine的含量比閾值低。

28、（17）lauric?acid的含量比閾值高。

29、（18）ltc4的含量比閾值低。

30、（19）palmitic?acid的含量比閾值低。

技術(shù)特征：

1.腹瀉羔羊與健康羔羊相比，其代謝發(fā)生變化，具有不同的代謝標(biāo)記物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述，腹瀉羔羊的代謝標(biāo)志物包括guanosine、hecogenin、quinethazone、hypotaurine、bovinocidin、clindamycin、sarsasapogenin、irbesartan、peiminine、taurine、lithocholic?acid、glyceraldehyde、thymidine、procymidone、protoveratrine?a、ketoleucine、lauric?acid、ltc4、palmitic?acid等19種中的至少一種，如圖2所示。

3.腹瀉羔羊與健康羔羊之間的差異代謝物主要富集在?；撬帷喠蚧撬岽x、脂肪酸生物合成、膽汁分泌等代謝途徑，如圖3所示。

4.權(quán)利要求書2所述的代謝物或者權(quán)利要求書3所述的代謝途徑在預(yù)防和/或治療羔羊腹瀉中的應(yīng)用。

5.一種試劑盒，其特征在于，包括用于檢測(cè)標(biāo)志物的含量的試劑，所述標(biāo)志物為權(quán)利要求1所述的綿羊腹瀉代謝標(biāo)志物。

6.根據(jù)權(quán)利要求書中1、3所述，腹瀉羔羊與健康羔羊代謝變化的檢測(cè)方法為：（1）收集健康羔羊及腹瀉羔羊的血清樣本，進(jìn)行代謝物提取及檢測(cè)；（2）對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行過(guò)濾，篩選差異代謝物，比較其變化情況；（3）將差異代謝物與kegg數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)分析，發(fā)現(xiàn)腹瀉羔羊與健康羔羊差異代謝物的顯著富集途徑。

7.一種評(píng)估受試綿羊腹瀉風(fēng)險(xiǎn)的系統(tǒng)，其特征在于，包括：檢測(cè)裝置，用于確定受試綿羊樣本中權(quán)利要求1所述的腹瀉代謝標(biāo)志物的含量；比對(duì)裝置，用于將所述含量與預(yù)設(shè)閾值進(jìn)行比較，根據(jù)比較結(jié)果判斷腹瀉風(fēng)險(xiǎn)。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及羊抗病育種分子技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及與綿羊羔羊腹瀉相關(guān)的代謝標(biāo)記物及其變化途徑。本發(fā)明通過(guò)代謝組測(cè)序技術(shù)等相關(guān)分子手段，篩選與綿羊羔羊腹瀉有關(guān)的特定代謝物，分析與綿羊羔羊腹瀉顯著相關(guān)的代謝途徑，這可能作為綿羊羔羊腹瀉的潛在標(biāo)記。本發(fā)明從代謝層面探討綿羊羔羊腹瀉的機(jī)制，從而為綿羊羔羊腹瀉提供預(yù)防策略和治療依據(jù)。

技術(shù)研發(fā)人員：仲濤,郭紫薇,張紅平,李利,王林杰,郭家中,占思遠(yuǎn),曹家雪
受保護(hù)的技術(shù)使用者：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9