本發(fā)明屬于藥物有效成分含量的測定技術(shù)領域，具體涉及一種測定藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物含量的方法。

背景技術(shù)：

H2受體拮抗劑，又稱H2受體阻斷藥，可用于治療致病性胃腸道高分泌狀況，如卓-艾綜合征、良性活動性胃潰瘍、短期治療活動性十二指腸潰瘍和胃食管反流的短時間緩解等，常見的這類藥物有：西咪替丁、法莫替丁和鹽酸雷尼替丁等，這種藥物中大多數(shù)含硫，可以被氧化劑氧化成亞砜，所以具有還原性。

目前，測定這類藥物的方法有很多，如高效液相色譜法、電化學法、毛細管電泳法、質(zhì)譜法、近紅外光譜法和紫外-可見分光光度法等，但是它們都存在各自的局限性，比如一般都比較費時，毛細管電泳法對反應條件要求較高，紫外-可見分光光度法靈敏度較低。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供了一種專屬性強、操作簡單快捷、干擾物質(zhì)少、靈敏度高且檢測結(jié)果穩(wěn)定的測定藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物含量的方法。

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題采用如下技術(shù)方案，一種測定藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物含量的方法，其特征在于具體步驟為：

(1)標準曲線的繪制，分別準確移取多組2mL質(zhì)量濃度低于10mg/L且質(zhì)量濃度已知的含硫H2受體拮抗劑類藥物標準溶液置于10mL的比色管中，再分別加入2mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的N-溴代丁二酰亞胺溶液、0.5mL摩爾濃度為0.5mol/L的鹽酸溶液和1mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的亞甲基藍溶液，靜置5min后分別加入3mL摩爾濃度為1.0×10^-2mol/L的β-環(huán)糊精，再靜置2min后分別置于熒光光譜儀中以652nm為最大激發(fā)波長，683nm為最大發(fā)射波長，分別測定混合溶液的熒光強度F，依照上述實驗方法，測定空白組即不加含硫H2受體拮抗劑類藥物溶液的熒光強度F₀，計算得到ΔF＝F-F₀，并用ΔF對含硫H2受體拮抗劑類藥物質(zhì)量濃度繪制標準曲線；

(2)待測藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物含量的測定，將含硫H2受體拮抗劑類藥物的藥品研磨、精密稱重并溶解稀釋成含硫H2受體拮抗劑類藥物的待測溶液，將2mL含硫H2受體拮抗劑類藥物的待測溶液置于10mL的比色管中，再加入2mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的N-溴代丁二酰亞胺溶液、0.5mL摩爾濃度為0.5mol/L的鹽酸溶液和1mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的亞甲基藍溶液，靜置5min后加入3mL摩爾濃度為1.0×10^-2mol/L的β-環(huán)糊精，再靜置2min后置于熒光光譜儀中以652nm為最大激發(fā)波長，683nm為最大發(fā)射波長，測定含硫H2受體拮抗劑類藥物的待測溶液的熒光強度F₁，計算得到ΔF₁＝F₁-F₀，并根據(jù)步驟(1)繪制的標準曲線計算得到待測溶液中含硫H2受體拮抗劑類藥物的質(zhì)量濃度，然后根據(jù)得到的待測溶液中含硫H2受體拮抗劑類藥物的質(zhì)量濃度、待測溶液的體積及藥品的質(zhì)量計算得到藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物的含量。

進一步優(yōu)選，所述含硫H2受體拮抗劑類藥物為西咪替丁、法莫替丁或鹽酸雷尼替丁。

進一步優(yōu)選，所述熒光光譜儀測定過程中的溫度保持在0℃。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下有益效果：

1、本發(fā)明利用氧化劑N-溴代丁二酰亞胺與含硫H2受體拮抗劑類還原性藥物發(fā)生氧化還原反應，將含硫H2受體拮抗劑類還原性藥物中的硫氧化成亞砜，選擇性較強，反應較為靈敏；

2、本發(fā)明利用熒光法間接測定含硫H2受體拮抗劑類還原性藥物，靈敏度較高，操作簡單，不需要復雜的大型儀器；

3、本發(fā)明利用β-環(huán)糊精作增敏劑和催化劑，通過主客體相互作用與亞甲基藍形成包合物，可以在更低濃度下間接測定含硫H2受體拮抗劑類還原性藥物的含量，大大降低了此類藥品的檢測限；

4、本發(fā)明的測定方法對實際樣品進行檢測過程，進行50次平行測定，得出相對標準偏差小于2％，表明該方法重現(xiàn)性較好，穩(wěn)定性較高，靈敏度較高。

附圖說明

圖1是MB在NBS、NBS/β-CD、NBS/CIM和NBS/CIM/β-CD中的熒光光譜圖。

具體實施方式

以下通過實施例對本發(fā)明的上述內(nèi)容做進一步詳細說明，但不應該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

通過對比多種H2受體拮抗劑類還原性藥物的分子結(jié)構(gòu)式，發(fā)現(xiàn)H2受體拮抗劑類還原性藥物的結(jié)構(gòu)式中大多數(shù)含硫，代表性的此類藥物有西咪替丁、法莫替丁和鹽酸雷尼替丁。西咪替丁的結(jié)構(gòu)式如式(Ⅰ)所示，法莫替丁的結(jié)構(gòu)式如式(Ⅱ)所示，鹽酸雷尼替丁的結(jié)構(gòu)式如式(Ⅲ)所示。

通過研究發(fā)現(xiàn)此類藥品中大多數(shù)含硫，這種形式存在的硫能被氧化劑N-溴代丁二酰亞胺(NBS)中的氨基氧化成亞砜，剩余的N-溴代丁二酰亞胺能氧化亞甲基藍，β-環(huán)糊精對未參加反應的亞甲基藍具有熒光增強作用，可使其熒光強度增強近2倍，通過測定亞甲基藍的熒光強度間接測定此類還原性藥物的含量。另外，β-環(huán)糊精的空腔大小和疏水性使其特別容易包合熒光試劑亞甲基藍，屬于一種超分子自組裝，能大大增強亞甲基藍的熒光強度。利用β-環(huán)糊精(β-CD)作為敏化劑，通過主客體相互作用與亞甲基藍(MB)形成包合物，可以在更低濃度下間接測定含硫H2受體拮抗劑類還原性藥物的含量。

本發(fā)明測定過程的實驗方法為：(1)標準曲線的繪制，分別準確移取多組2mL質(zhì)量濃度低于10mg/L且質(zhì)量濃度已知的含硫H2受體拮抗劑類藥物標準溶液置于10mL的比色管中，再分別加入2mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的N-溴代丁二酰亞胺溶液、0.5mL摩爾濃度為0.5mol/L的鹽酸溶液和1mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的亞甲基藍溶液，靜置5min后分別加入3mL摩爾濃度為1.0×10^-2mol/L的β-環(huán)糊精，再靜置2min后分別置于熒光光譜儀中以652nm為最大激發(fā)波長，683nm為最大發(fā)射波長，分別測定混合溶液的熒光強度F，依照上述實驗方法，測定空白組即不加含硫H2受體拮抗劑類藥物溶液的熒光強度F₀，計算得到ΔF＝F-F₀，并用ΔF對含硫H2受體拮抗劑類藥物質(zhì)量濃度繪制標準曲線；(2)待測藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物含量的測定，將含硫H2受體拮抗劑類藥物的藥品研磨、精密稱重并溶解稀釋成含硫H2受體拮抗劑類藥物的待測溶液，將2mL含硫H2受體拮抗劑類藥物的待測溶液置于10mL的比色管中，再加入2mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的N-溴代丁二酰亞胺溶液、0.5mL摩爾濃度為0.5mol/L的鹽酸溶液和1mL摩爾濃度為1.0×10^-4mol/L的亞甲基藍溶液，靜置5min后加入3mL摩爾濃度為1.0×10^-2mol/L的β-環(huán)糊精，再靜置2min后置于熒光光譜儀中以652nm為最大激發(fā)波長，683nm為最大發(fā)射波長，測定含硫H2受體拮抗劑類藥物的待測溶液的熒光強度F₁，計算得到ΔF₁＝F₁-F₀，并根據(jù)步驟(1)繪制的標準曲線計算得到待測溶液中含硫H2受體拮抗劑類藥物的質(zhì)量濃度，然后根據(jù)得到的待測溶液中含硫H2受體拮抗劑類藥物的質(zhì)量濃度、待測溶液的體積及藥品的質(zhì)量計算得到藥品中含硫H2受體拮抗劑類藥物的含量。

實施例1

西咪替丁的檢測

本實施例選擇市售的西咪替丁藥片(中美天津史克制藥有限公司)作為待測樣品，對其中的西咪替丁(CIM)含量進行檢測。

依照實驗所述方法進行實驗后，在熒光光譜儀上，分別繪制MB在NBS、NBS/β-CD、NBS/CIM、NBS/CIM/β-CD中的熒光光譜圖(如圖1所示)。該方法包括三個階段，第一階段為過量已知的NBS與CIM之間的氧化還原反應，此階段中CIM被消耗殆盡；第二階段，剩余的NBS與過量已知的MB之間的氧化還原反應，此階段中剩余的NBS被消耗殆盡；第三階段，β-CD與剩余的MB之間發(fā)生包合反應，形成較穩(wěn)定的包合產(chǎn)物，β-CD的疏水空腔增強剩余MB的熒光強度，在最大激發(fā)波長為652nm條件下測定CIM的含量。圖中曲線1、曲線3的響應值分別為F和F₀。由圖1可看出，加入β-CD之后，MB的熒光強度顯著增強(由曲線3和曲線4可看出)。在一定范圍內(nèi)，CIM的加入，消耗了部分NBS，減少了NBS與MB之間的反應，體系的熒光強度又得到進一步增強(由曲線2和曲線4可看出)，實驗結(jié)果證明β-CD可以作為此體系的增敏劑，此方法可以在0.05mg/L的較低濃度下測定CIM的含量，其反應過程的反應機理如下：

取西咪替丁(中美天津史克制藥有限公司)5片(每片含0.2g西咪替丁)，研磨均勻后測定其質(zhì)量，精密稱取其質(zhì)量的十分之一細粉(約相當于西咪替丁100mg)，用小燒杯充分溶解后，震蕩搖勻，濾過，然后用二次去離子水定容至100mL的容量瓶中，精密移取容量瓶中的1.0mL，移液于100mL的容量瓶中，稀釋至刻度，震蕩搖勻后作為樣品溶液。依照上述實驗方法對實際樣品進行測定，同時與紫外-可見分光光度法進行比較，并進行加標回收實驗，結(jié)果如表1所示。

表1實際樣品中西咪替丁含量的測定

實施例2

法莫替丁的檢測

本實施例選擇市售的法莫替丁藥片(中國廣東彼迪藥業(yè)有限公司)作為待測樣品，對其中的法莫替丁含量進行檢測。

取片劑法莫替丁(中國廣東彼迪藥業(yè)有限公司)10片，每片約含法莫替丁20mg，研磨均勻后稱其質(zhì)量，精密稱取其質(zhì)量的二分之一細粉(約相當于法莫替丁100mg)，用小燒杯充分溶解后轉(zhuǎn)移到100mL的干凈容量瓶中，用二次去離子水稀釋至容量瓶刻度，震蕩均勻，過濾，精密量取濾液0.25mL，置于500mL量瓶中，加二次水稀釋至刻度，震蕩均勻之后作為樣品溶液。利用上述實驗方法對法莫替丁進行測量，同時與高效液相色譜法進行比較，并進行加標回收實驗，結(jié)果見表2所示。

表2實際樣品中法莫替丁含量的測定

實施例3

鹽酸雷尼替丁的檢測

本實施例選擇市售的取鹽酸雷尼替丁膠囊(匯仁制藥有限公司)作為待測樣品，對其中的鹽酸雷尼替丁含量進行檢測。

取鹽酸雷尼替丁膠囊(匯仁制藥有限公司)4粒，測量其平均裝量，內(nèi)容物混合均勻，精密稱取其質(zhì)量的六分之一(約相當于鹽酸雷尼替丁100mg)，用小燒杯充分溶解后轉(zhuǎn)移到100mL的干凈容量瓶中，用二次去離子水稀釋至容量瓶刻度，震蕩均勻，過濾，精密量取濾液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加二次水稀釋至刻度，震蕩均勻之后作為樣品溶液。利用上述實驗方法對其進行測量，同時與其它方法進行比較，并進行加標回收實驗，結(jié)果如表3所示。

表3實際樣品中鹽酸雷尼替丁含量的測定

以上實施例描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及優(yōu)點，本行業(yè)的技術(shù)人員應該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明原理的范圍下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進均落入本發(fā)明保護的范圍內(nèi)。